CN107361203A - 一种天然替抗饲料颗粒剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

一种天然替抗饲料颗粒剂及其制备方法和应用，颗粒剂由23‑27份芪类成分浸膏和73‑77份的辅料组成，辅料由重量比为42‑54：14.5‑19的可溶性淀粉和糊精组成，芪类成分浸膏、可溶性淀粉、糊精与额外加入的溶媒混合制成软材，软材过筛、干燥制成颗粒剂；其中，溶媒与可溶性淀粉、糊精的重量比为23‑27：42‑50：14.5‑18.5。本发明通过制粒、干燥和整理的单元操作，及紫外质控、检测后包装等工序步骤，提供一种抗耐药菌MRSA（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌）、MSSA（耐金黄色葡萄球菌）和MSSE（耐表皮葡萄球菌），并具有杀菌效力，增强畜禽和反刍动物免疫功能，提高抗应激能力的抗生素样治疗作用。

Description

一种天然替抗饲料颗粒剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及饲料技术领域，具体涉及一种天然替抗饲料颗粒剂及其制备方法和应用。
背景技术
食品安全乃民生大事，饲料中添加抗生素是影响食品安全的重要因素之一。然而近年来，部分养殖业在牲畜养殖过程中大量使用抗生素，国内外已经引起高度关注：一是抗生素残留的动物性食品和因动物滥用抗生素形成的耐药菌株，或大量种类繁多的抗生素被应用于畜禽生产的各个环节，在动物源性食品中造成抗生素残留、微生物耐药性及水环境污染等问题，从而威胁到人类健康和安全；二是各种养殖场大量排泄物含有抗生素及其代谢产物，影响生态环境；三是抗生素类饲料药物及其代谢物在食物链中高度富集，易导致兽药残留超标。因此，抗生素替代产品的研究成为养殖业的一个热点。面对当今世界随着抗生素耐药性越来越严重，以及超级细菌地不断涌现，“饲料禁抗”已经成为国际畜牧业发展的必然趋势。
替抗或无抗饲料和天然安全的生长促进剂是动物肉、蛋和奶产品市场中的一个重要主题。虽然有大量科学文献和研究报道了用不同的产品去替代抗生素，但是其结果并不一致。很多研究仅停留在试验阶段，距离实际生产应用还有一段距离。此外，许多关于抗生素替代产品的研究报道是由其制造商或者供应商资助的，这会导致研究偏差，在数据的分析中也可能存在相关问题。因此，有必要开展独立的且严格管理的试验以评估各种抗生素替代产品的实际效果。现阶段的研究表明: 由于抗生素在动物生产中的长期使用以及一些不合理应用，人们发现，抗生素饲料添加剂在给我们带来巨大经济效益的同时也引发了许多严重的问题。如抗生素引起的细菌耐药性的产生，抗生素在动物产品和环境中的残留等。然而目前还没有一种抗生素替代产品可以完全替代抗生素。在无抗日粮的生产中，某种或某些饲料添加剂的添加只能在一定程度上缓解或部分替代抗生素。因此，继续寻找抗生素替代产品尤其天然替抗产物，以研发安全且高效的无抗饲料尤其显得紧迫和迫切。
人们研究开发出了饲用酶制剂、饲用微生物制剂、酸化剂、寡聚糖、中草药、有机金属微量元素等抗生素替代品, 然而与使用抗生素一样, 我们同样要考虑使用这些产品在动物上的安全性、经济效益和使用效果。因此寻找新的适合于畜禽饲料天然替抗添加剂，是当前国内外尤其欧洲和中国的最大需求。为此，本发明从以上技术问题和替抗天然饲料、或新的天然抗生素的饲料空白点出发，为饲料添加剂及其应用提供了一种新资源和新思路。
发明内容
为了克服现有技术中存在的问题，本发明提供了一种天然替抗饲料颗粒剂及其制备方法和应用。
本发明为解决上述问题所采用的技术方案为：一种天然替抗饲料颗粒剂，颗粒剂由以下重量份的原料组成：23-27份芪类成分浸膏和73-77份的辅料，辅料由重量比为42-54：14.5-19的可溶性淀粉和糊精组成，芪类成分浸膏、可溶性淀粉、糊精与额外加入的溶媒混合制成软材，软材过筛、干燥制成颗粒剂；其中，溶媒与可溶性淀粉、糊精的重量比为23-27：42-50：14.5-18.5。
优选的，芪类成分浸膏、可溶性淀粉、糊精、溶媒的重量比为1：2.0：0.5：1。
本发明中，所述的溶媒为质量浓度为50%的乙醇。
一种天然替抗饲料颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、采摘完全成熟的牡丹籽果实，于干燥通风处晾6~8天，敲打果实，使牡丹籽自然脱落，取其中的牡丹籽仁，将牡丹籽仁均匀连续地送入螺旋压榨机，牡丹籽油在压力作用下被挤压出来，螺旋轴的转速在8-10r/min，收集压榨油后的剩余牡丹籽饼粕，备用；
步骤二、用粉碎机将牡丹籽饼粕粉碎，制得牡丹籽粕，将其完全浸于质量百分比为95%的乙醇溶液中，在超声下浸泡三天，每天超声两次，三天后过滤并收集滤液；过滤的固体残渣用质量百分比为95%的乙醇溶液重复上述提取2-3次，固液分离后，合并所有滤液，备用；
步骤三、将步骤二收集的滤液在50℃下减压蒸馏至完全去除乙醇后，得到固液分层的浸膏浓缩液，进一步固液分离操作，得到浸膏和牡丹籽油，待用；
步骤四、采用石油醚清洗浸膏至少三次，合并石油醚，减压下除去溶剂石油醚后再次得到牡丹籽油剩余，将该剩余籽油一同并入上述待用的籽油中，再合并收集浸膏，即得芪类成分浸膏；
步骤五、按照所述颗粒剂的配比称取步骤四制得的芪类成分浸膏，以乙醇作溶媒使芪类成分浸膏溶解，再称取可溶性淀粉和糊精并加入芪类成分浸膏中，不断搅拌使原料均匀混合，形成软材；
步骤六、将软材至于18目的筛网中，挤压使软材通过筛网，形成大小均匀的颗粒；
步骤七、将制好的颗粒烘干后先过18目的筛网，再将通过18目筛网的颗粒过40目的筛网，收集能通过18目筛网却不能通过40目筛网的颗粒密封包装后，在室温下贮藏。
其中，步骤七中，将制好的颗粒烘干的方法为：将颗粒置于50~60℃的烘箱内干燥1h后，用玻璃棒搅动，以免颗粒结成块；搅拌结束后，将烘箱内温度调至60~70℃，继续干燥3h后，用玻璃棒搅动，以免颗粒结成块；搅拌结束后，将烘箱内温度保持在70℃以下2-3h，直至把颗粒烘干。
本发明还提供了一种天然替抗饲料颗粒剂在水溶性天然替抗饲料冲剂方面的应用。本发明的芪类成分浸膏抗G+菌阳性菌，并同时具有杀菌效力，可直接作为新型替抗饲料应用的天然的口服颗粒制剂。
本发明还提供了一种天然替抗饲料颗粒剂在畜禽和反刍动物中作为天然抗生素的应用。本发明的制备工艺通过制粒、干燥和整理的单元操作，及紫外质控、检测后包装等工序步骤，提供一种抗耐药菌MRSA（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌）、MSSA（耐金黄色葡萄球菌）和 MSSE（耐表皮葡萄球菌），并同时具有杀菌效力，增强畜禽和反刍动物免疫功能，提高抗应激能力的抗生素样治疗作用。
有益效果：本发明所公开的天然替抗饲料颗粒剂，其中，有效抑菌杀菌成分含量高于25%以上，有效抑菌杀菌成分主要作用于耐药菌MRSA的PBP2a蛋白作为对受体蛋白的作用机理，靶标关系明确，作用显著。芪类成分浸膏抗G+菌阳性菌；该颗粒剂水溶性好，为口服冲剂，方便动物使用，生物利用度好；综合牡丹天然替抗饲料颗粒剂综上优势，可直接作为天然抗生素治疗性应用，替抗效果独特，便于推向国内外替抗饲料市场广泛应用。
附图说明
图1为本发明制得的颗粒剂；
图2和图4均为本发明芪类成分浸膏与PBP2a的对接结果；
图3和图5依次为图2和图4的局部放大图；
图6为万古霉素与PBP2a的对接结果；
图7为图6的局部放大图；
图8为本发明芪类成分浸膏红外光谱图；
图9为芪类成分浸膏的紫外吸收谱图；
图10为不同浓度梯度的抗菌化合物Ⅰ标准品溶液进行吸光度检测的曲线图；
图11为牡丹提取物及单体的MBC杀菌实验照片。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
一种天然替抗饲料颗粒剂，颗粒剂由以下重量份的原料组成：23-27份芪类成分浸膏和73-77份的辅料，辅料由重量比为42-54：14.5-19的可溶性淀粉和糊精组成，芪类成分浸膏、可溶性淀粉、糊精与额外加入的溶媒混合制成软材，软材过筛、干燥制成颗粒剂；其中，溶媒与可溶性淀粉、糊精的重量比为23-27：42-50：14.5-18.5。优选的，芪类成分浸膏、可溶性淀粉、糊精、溶媒的重量比为1：2.0：0.5：1。所述的溶媒为质量浓度为50%的乙醇。
一种天然替抗饲料颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：步骤一、采摘完全成熟的牡丹籽果实，于干燥通风处晾6~8天，敲打果实，使牡丹籽自然脱落，取其中的牡丹籽仁，将牡丹籽仁均匀连续地送入螺旋压榨机，牡丹籽油在压力作用下被挤压出来，螺旋轴的转速在8-10r/min，收集压榨油后的剩余牡丹籽饼粕，备用；
步骤二、用粉碎机将牡丹籽饼粕粉碎，制得牡丹籽粕，将其完全浸于质量百分比为95%的乙醇溶液中，在超声下浸泡三天，每天超声两次，三天后过滤并收集滤液；过滤的固体残渣用质量百分比为95%的乙醇溶液重复上述提取2-3次，固液分离后，合并所有滤液，备用；
步骤三、将步骤二收集的滤液在50℃下减压蒸馏至完全去除乙醇后，得到固液分层的浸膏浓缩液，进一步固液分离操作，得到浸膏和牡丹籽油，待用；
步骤四、采用石油醚清洗浸膏至少三次，合并石油醚，减压下除去溶剂石油醚后再次得到牡丹籽油剩余，将该剩余籽油一同并入上述待用的籽油中，再合并收集浸膏，即得芪类成分浸膏；
步骤五、按照颗粒剂的配比称取步骤四制得的芪类成分浸膏，以乙醇作溶媒使芪类成分浸膏溶解，溶媒控制在10%以下；再称取可溶性淀粉和糊精并加入芪类成分浸膏中，不断搅拌使原料均匀混合，形成软材；加入的质量浓度为50%的乙醇，使软材的硬度达到“手握成团，触之即散”。
步骤六、将软材至于18目的筛网中，挤压使软材通过筛网，形成大小均匀的颗粒；
步骤七、将制好的颗粒烘干后先过18目的筛网，再将通过18目筛网的颗粒过40目的筛网，收集能通过18目筛网却不能通过40目筛网的颗粒密封包装后，在室温下贮藏。其中，烘干的操作为：将颗粒置于50~60℃的烘箱内干燥1h后，用玻璃棒搅动，以免颗粒结成块；搅拌结束后，将烘箱内温度调至60~70℃，继续干燥3h后，用玻璃棒搅动，以免颗粒结成块；搅拌结束后，将烘箱内温度保持在70℃以下2-3h，直至把颗粒烘干，干燥失重＜2.0%。
其中，制粒过程中，溶媒与可溶性淀粉、糊精的重量比为23-27：42-50：14.5-18.5。该颗粒剂制剂最佳组成配比按照重量份比的芪类成分浸膏：可溶性淀粉：糊精：50%的乙醇为1：2.0：0.5：1。
本发明所公开的天然替抗饲料颗粒剂，其中，替抗芪类化合物有效抑菌杀菌成分含量高于25%以上。
对步骤四获得的芪类成分浸膏，按照中国药典要求，用紫外分光光度法检测其中含有的抗耐药菌含量。以抗菌成分trans-ε-Viniferin作为标准品，以甲醇为参比，在284nm处检测吸光度，计算抗菌成分含量为24.00-25.26%，详见图9和图10。
通过采用分子对接计算机辅助药物设计手段可以证明，芪类成分浸膏具有与万古霉素样作用的抗MRSA的相同机理，可作用于同一个PBP2a受体蛋白（详见图2和图4）。芪类成分浸膏其中的两种成分为抗菌化合物Ⅰ（trans-ε-Viniferin）与抗菌化合物Ⅱ（Gentin H）。
其抗菌杀菌的机理研究，可通过采用分子对接计算机辅助药物设计手段表明，MRSA的PBP2a蛋白作为对接受体蛋白，其PDB ID为4CJN（详见图2和图4）。从图2和图3中可以看出：PBP2a中的氨基酸残基形成的活性口袋与各个化合物对接时形成的作用力在具体的空间中的作用位置与情况。其中， 抗菌化合物Ⅰ在与蛋白PBP2a的结合中形成了以LysB：316、GluB：294、LysB：273和ValB：277为主要作用氨基酸残基的活性口袋；从图4和图5中可以看出：抗菌化合物Ⅱ在与蛋白PBP2a的结合中形成了以LysB：273、ArgA：298、ThrA：308、TyrB：105和SerA:306为主要作用氨基酸残基的活性口袋；研究显示，抗菌化合物Ⅰ、抗菌化合物Ⅱ与标准品万古霉素在与蛋白PBP2a的结合中形成了类似以SerB：72、AsnB：306、TrpB：205、LysB：273、AspB：295、AspB：275和ValB：277为主要作用氨基酸残基的活性口袋作用机理一致。
因此，从图2-图4中可以看出：PBP2a中的氨基酸残基形成的活性口袋与各个化合物对接时形成的作用力在具体的空间中的作用位置与情况。作用机理似抗生素万古霉素生成的配体-蛋白相互作用靶向蛋白途径极为相似。此对接结果也印证了实验室的抑菌效果为万古霉素＞抗菌化合物Ⅰ＞抗菌化合物Ⅱ的实验结果。但是48小时后万古霉素产生了明显抗耐药性（见图11和表3），然而牡丹提取物及有效成分杀菌效果显著。综上研究揭示，牡丹天然替抗饲料颗粒剂可以发挥完全替代抗生素的效力。配体与PBP2a的对接参数见下表表1所示。
表1 配体与PBP2a的对接参数
本发明的目的还在于提供一种天然替抗饲料颗粒剂在水溶性天然替抗饲料冲剂方面的应用。可直接作为天然替抗饲料冲剂。其中，替抗芪类化合物有效抑菌杀菌成分含量高于25%以上。详见以下利用紫外分光光度法对提取物浸膏中低聚芪类含量的定量分析结果测定。其中抗菌化合物Ⅰ标准品为反式葡萄籽醇（trans-ε-Viniferin），具体测定方法步骤：
1）、芪类成分浸膏的成分的定性分析，红外谱图见图8所示：
红外谱图的详细红外光谱鉴定数据分析如下：
νmax（cm-1） 3355，1159，1045（OH或Ar-OH）；
2929，1458（C-H骨架吸收）；
1605，1514（-C=C-骨架吸收）；
929，835（Ar一二取代或三取代吸收）；
1245（C-OH叔羟基吸收）
由红外光谱数据分析，证明浸膏中主要含芪类成分。
2）、芪类成分浸膏中芪类化合物的定量分析结果：
紫外光谱在200~400nm的内进行波长扫描，结果如图9所示，测得对照品反式葡萄籽醇和浸膏供试品，均在284nm处有稳定最大吸收峰，且峰型相似，故在本实验中选择284nm作为低聚芪类化合物分析波长。
通过对一系列不同浓度梯度的抗菌化合物Ⅰ标准品溶液进行吸光度检测，得出标准曲线图如图10所示。其中，吸光度随浓度变化值如下表表2所示。
表2 吸光度随浓度变化值
以甲醇为参比，在284nm处测得不同浓度的吸光度，计算纵坐标-吸光度(A)对横坐标-浓度(C)的线性回归方程，得标准曲线方程A＝43.2104C＋0.00676299（r＝0.9995）如图10所示。结果表明，低聚芪类在0.00324～0.01620mg/ mL浓度范围内线性关系良好。
提取物浸膏中低聚芪类含量测定：
取浸膏含低聚芪类供试品，在284nm波长处测定吸光度，按反式葡萄籽醇对照品标准曲线处理数据，得低聚芪类供试品反式葡萄籽醇浓度为0.01516mg/mL,提取的浸膏中抗菌成分等低聚芪类成分含量为：
0.01516÷0.06＝0.2526×100=25.26%；
本发明的目的还在于提供一种在畜禽和反刍动物中，特别是作为鸡，牛马羊的天然抗生素来应用，不是作为饲料添加剂应用。因为他们不仅有抗耐药菌作用，而且具有杀死耐药菌的作用。芪类成分浸膏中含有抗菌化合物Ⅰ单体，芪类成分浸膏粗提取物及单体的MAC杀菌实验见图11所示；粗提取物及单体化合物两者对临床分离的MRSA的MIC及MBC测定结果见表3所示。
表3芪类成分浸膏粗提取物及单体体对临床分离的MRSA的MIC及MBC值
其中，表3中，抗菌化合物Ⅰ单体抗耐药菌（MRSA）MIC=8ug/mL，杀菌（MRSA）MBC值<<25.6ug/mL。抗生素万古霉素48h后因有菌落再生，证明没有杀菌效果，但抑菌效果最强，MIC=0.5ug/mL。
如在图11中最后一排为万古霉素不同浓度MBC测定，从左至右依次标记为W5、W4、W3，其中均明显显示有菌落生长（见W5，W4，W3菌落中有小的白点斑），产生耐药情况。图11中最上面一排，从左至右依次标记为甲、C7、C6，其中，“甲”代表溶剂对照。接着C7代表芪类成分浸膏，没有产生新的菌落；同样芪类成分纯品C6显示没有生成新的菌落。说明牡丹提取物和提取成分不会产生耐药性。
本发明公开的芪类成分浸膏的抗菌效果，并且公开了这种新的天然替抗饲料颗粒剂的特征和应用制作方法及临床应用前景。该替抗制剂为天然颗粒型口服冲剂，具体产品详见图1中。体外药效学证明可完全替代抗生素使用。
本发明还提供一种牡丹天然替抗饲料颗粒剂的口服制剂应用及抗生素样作用效果测定：
替抗饲料颗粒剂的有效剂量及安全性试验，牡丹天然替抗饲料颗粒剂饲养肉猪的效果各试验区误差P＞0.05，无显著性差异。设高剂量(220mg/kg)及低剂量(150mg/kg)两组。抗生素组为强力霉素150mg/kg。另设空白对照组，每组30头。分别设3个重复，即每一重复10头。按常规饲喂28天，停药后7天调查药物残留及环境安全。试验结果见表4。
表4 天然替抗饲料颗粒剂的口服制剂饲喂仔猪的实验
由上述表4分析可以看出,本发明还提供一种天然替抗饲料颗粒剂的口服制剂在220~150mg/kg范围内是安全有效的，能达到猪仔预防腹泻的效果。从平均体重、饲料消耗量、饲料效价等数据均与抗生素组无明显差异。而天然替抗饲料颗粒剂的口服制剂组腹泻率较抗生素组及对照组为低。
实施例1
本发明提供的一种天然替抗饲料颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
（1）、油用牡丹种子收购：本项目牡丹资源原料采取在洛阳和全国广泛收购（要求每年在8月底或9月初采收的凤丹白和紫斑等高产油用牡丹为产油的优质品种各品种牡丹籽的饱满种粒）。指导当地农民采摘完全成熟的牡丹籽果实，于干燥通风处晾6~8天，敲打果实，使牡丹籽自然脱落；或在药材市场如安徽亳州收购的油用牡丹籽的饱满种粒；
（2）、螺旋压榨与过滤：将牡丹籽仁均匀连续地送入螺旋压榨机，牡丹籽油在压力作用下被挤压出来，螺旋轴的转速在8~10r／min，压榨出的毛油用滤油机过滤固体杂质残渣，得牡丹籽毛油，剩余牡丹籽饼粕为大量，收集待用；
（3）、取10Kg上述原料牡丹籽饼粕或凤丹白牡丹籽饼粕，用粉碎机粉碎，再采用95%乙醇常温浸泡提取，超声辅助浸泡三天，每天超声两次；三天后过滤浸泡液，固体残渣仍用95%乙醇重复上述提取2-3次；固液分离后，合并所有滤液；滤液减压下蒸馏50℃除去95%乙醇后，得到浸膏浓缩液，分为固液两层；进一步固液分离操作，得到浸膏和牡丹籽油待用；根据相似相容原理，用石油醚清洗浸膏三次，合并石油醚，减压下除去溶剂石油醚后再次得到牡丹籽油剩余，将该剩余籽油一同并入上述待用的籽油中，再合并收集芪类成分浸膏；
（4）、含量检测：对步骤（3）中获得的芪类成分浸膏，按照中国药典要求，用紫外分光光度法检测其中含有的抗耐药菌含量。以抗菌化合物Ⅰ作为标准品，以甲醇为参比，在284nm处检测吸光度，计算抗菌成分含量为24.00-25.26%，待用；
（5）、浸膏制粒：
a、制软材：称取27份步骤（3）中获得的芪类成分浸膏、54份可溶性淀粉、19份糊精，将芪类成分浸膏溶解于无水乙醇中，无水乙醇控制在10%以下，并加入可溶性淀粉和糊精，不断搅拌使其均匀；称取27份质量浓度为50%的乙醇，加入的50%的乙醇，使软材的硬度达到“手握成团，触之即散”。
b、制粒：将制好的软材至于18目的筛网中，不断轻轻的挤压，使软材通过筛网，形成大小均匀的颗粒；
c、干燥：将制好的颗粒放到烘箱中，先把温度调到60℃，1h后，用玻璃棒轻轻搅动，以免颗粒结成块。搅拌结束后，将温度调到60℃，继续干燥，3h后，在慢慢搅动颗粒；最后把温度保持在70℃以下2h，直至把颗粒烘干，使颗粒的干燥失重﹤2.0%；
d、整粒：将烘干的颗粒，先过18目的筛网，去掉无法通过筛网的较大颗粒。再将通过18目筛网的颗粒过40目的筛网，去掉通过筛网的较小颗粒。收集能通过18目筛网却不能通过40目筛网的颗粒；
e、包装：密封包装后，在室温下贮藏。
实施例2
本发明提供的一种天然替抗饲料颗粒剂的制备方法，制备方法参照实施例1；在步骤（3）中取50Kg步骤（2）中的凤丹白牡丹籽饼粕，后续的粉碎、乙醇浸泡、石油醚清洗、制粒整粒等单元操作步骤同实施例1，但在步骤（5）b中的干燥机制为：将制好的颗粒放到烘箱中，先把温度调到50℃，1h后，用玻璃棒轻轻搅动，以免颗粒结成块。搅拌结束后，将温度调到70℃，继续干燥，3h后，在慢慢搅动颗粒。最后把温度保持在70℃以下3h，直至把颗粒烘干，使颗粒的干燥失重﹤2.0%。其中，步骤（5）a制软材：称取23份步骤（3）中获得的芪类成分浸膏、57份可溶性淀粉、20份糊精，将芪类成分浸膏溶解于无水乙醇中，无水乙醇控制在10%以下，并加入可溶性淀粉和糊精，不断搅拌使其均匀；必要时，加入50%的乙醇，使软材的硬度达到“手握成团，触之即散”。50%的乙醇与可溶性淀粉、糊精的重量比为23-27：42-50：14.5-18.5。
实施例3
本发明提供的一种天然替抗饲料颗粒剂的制备方法，制备方法参照实施例1；在步骤（3）中取100Kg步骤（2）中的凤丹白牡丹籽饼粕，后续的粉碎、乙醇浸泡、石油醚清洗、制粒整粒等单元操作步骤同实施例1，但在步骤（5）b中的干燥机制为：将制好的颗粒放到烘箱中，先把温度调到55℃，1h后，用玻璃棒轻轻搅动，以免颗粒结成块。搅拌结束后，将温度调到65℃，继续干燥，3h后，在慢慢搅动颗粒。最后把温度保持在70℃以下2.5h，直至把颗粒烘干，使颗粒的干燥失重﹤2.0%。其中，步骤（5）a制软材：称取24份步骤（3）中获得的芪类成分浸膏、55份可溶性淀粉、21份糊精，将芪类成分浸膏溶解于无水乙醇中，无水乙醇控制在10%以下，并加入可溶性淀粉和糊精，不断搅拌使其均匀；必要时，加入50%的乙醇，使软材的硬度达到“手握成团，触之即散”。50%的乙醇与可溶性淀粉、糊精的重量比为23-27：42-50：14.5-18.5。
本发明从以上技术问题和替抗天然饲料、或新的天然抗生素样物质的饲料空白点出发，结合牡丹新型天然替抗饲料颗粒剂研究，为饲料添加剂及其应用提供了一种新资源和新思路。
本发明公开的牡丹天然替抗饲料颗粒剂及其制备和应用的制作方法，由于产品药效成分含量高和具有显著地抑菌和杀菌作用，杀菌机理可解释为有效成分-杀菌化合物主要作用于耐药菌MRSA的PBP2a蛋白作为对受体蛋白的作用机理，靶标关系明确，作用显著。另外，该研究制剂水溶性好，为口服冲剂，方便动物使用，生物利用度好；综合牡丹天然替抗饲料颗粒剂综上优势，可直接作为天然抗生素治疗性应用，替抗效果独特，便于推向国内外替抗饲料市场广泛应用。
与现有技术相比，本发明的技术效果体现在：按照国家抗生素饲料添加剂在动物生产中的规范应用，全面对比考察评价天然替抗饲料颗粒剂在畜禽和反刍动物，特别是在鸡和猪，牛马羊的饲料中的应用优势：不仅在上呼吸道抑菌和杀菌，而且直接对肠微生物菌群数量明显会减少；消化道问题减少并具有抗生素样功效。

Claims (7)

1.一种天然替抗饲料颗粒剂，其特征在于：颗粒剂由以下重量份的原料组成：23-27份芪类成分浸膏和73-77份的辅料，辅料由重量比为42-54：14.5-19的可溶性淀粉和糊精组成，芪类成分浸膏、可溶性淀粉、糊精与额外加入的溶媒混合制成软材，软材过筛、干燥制成颗粒剂；其中，溶媒与可溶性淀粉、糊精的重量比为23-27：42-50：14.5-18.5。
2.如权利要求1所述的一种天然替抗饲料颗粒剂，其特征在于：芪类成分浸膏、可溶性淀粉、糊精、溶媒的重量比为1：2.0：0.5：1。
3.如权利要求1或2所述的一种天然替抗饲料颗粒剂，其特征在于：所述的溶媒为质量浓度为50%的乙醇。
4.制备如权利要求1所述一种天然替抗饲料颗粒剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、采摘完全成熟的牡丹籽果实，于干燥通风处晾6~8天，敲打果实，使牡丹籽自然脱落，取其中的牡丹籽仁，将牡丹籽仁均匀连续地送入螺旋压榨机，牡丹籽油在压力作用下被挤压出来，螺旋轴的转速在8-10r/min，收集压榨油后的剩余牡丹籽饼粕，备用；
步骤二、用粉碎机将牡丹籽饼粕粉碎，制得牡丹籽粕，将其完全浸于质量百分比为95%的乙醇溶液中，在超声下浸泡三天，每天超声两次，三天后过滤并收集滤液；过滤的固体残渣用质量百分比为95%的乙醇溶液重复上述提取2-3次，固液分离后，合并所有滤液，备用；
步骤三、将步骤二收集的滤液在50℃下减压蒸馏至完全去除乙醇后，得到固液分层的浸膏浓缩液，进一步固液分离操作，得到浸膏和牡丹籽油，待用；
步骤四、采用石油醚清洗浸膏至少三次，合并石油醚，减压下除去溶剂石油醚后再次得到牡丹籽油剩余，将该剩余籽油一同并入上述待用的籽油中，再合并收集浸膏，即得芪类成分浸膏；
步骤五、按照权利要求1的配比称取步骤四制得的芪类成分浸膏，以乙醇作溶媒使芪类成分浸膏溶解，再称取可溶性淀粉和糊精并加入芪类成分浸膏中，不断搅拌使原料均匀混合，形成软材；
步骤六、将软材至于18目的筛网中，挤压使软材通过筛网，形成大小均匀的颗粒；
步骤七、将制好的颗粒烘干后先过18目的筛网，再将通过18目筛网的颗粒过40目的筛网，收集能通过18目筛网却不能通过40目筛网的颗粒密封包装后，在室温下贮藏。
5.如权利要求4所述的制备一种天然替抗饲料颗粒剂的方法，其特征在于：步骤七中，将制好的颗粒烘干的方法为：将颗粒置于50-60℃的烘箱内干燥1h后，用玻璃棒搅动，以免颗粒结成块；搅拌结束后，将烘箱内温度调至60-70℃，继续干燥3h后，用玻璃棒搅动，以免颗粒结成块；搅拌结束后，将烘箱内温度保持在70℃以下2-3h，直至把颗粒烘干。
6.如权利要求1所述的一种天然替抗饲料颗粒剂在水溶性天然替抗饲料冲剂方面的应用。
7.如权利要求1所述的一种天然替抗饲料颗粒剂在畜禽和反刍动物中作为天然抗生素的应用。
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