CN107343918A - 一种中药组合物醇提物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属中药技术领域，具体涉及一种中药组合物醇提物及其制备方法和应用。所述醇提物使用的原料药包括人参、麦冬，人参、麦冬的重量比为等比。该醇提物具有抗氧化的功效，可在制备抗氧化药物或保健品中应用，有望开发成新一代抗氧化药物或保健品。
Description
技术领域
本发明属中药技术领域，具体涉及一种中药组合物醇提物及其制备方法和应用。
背景技术
人类在整个生命过程中需要不断地进行氧化还原反应。生物体的过氧化是导致机体衰老的重要原因。机体的过氧化损伤主要是由于机体内活性氧产生过多从而损伤机体内的蛋白质、DNA和细胞脂质等大分子物质所引起的[1]。过氧化损伤影响机体正常的生理功能，扰乱机体内代谢平衡，导致细胞损伤、凋亡，从而加剧与氧化损伤相关慢性疾病的产生，困扰着人类的正常生活。
机体内，活性氧与抗氧化剂在体内处于动态平衡的关系，当体内活性氧过多或者抗氧化剂产生不足打破其动态平衡关系时，就会对机体造成损伤[2]。因此，预防机体的氧化损伤对于维持机体的健康状态至关重要。另一方面，活性氧不仅仅是亟待清除的有毒物质，它们还是一类信息分子，可作为第二信使调节体内氧化还原敏感蛋白的活性状态，启动或关闭这些分子开关，进而参与一系列信号转导和基因表达调控，为机体内正常生理过程所必须，过度清除活性氧是有害的[3]。活性氧为我们身体健康所必需，通过体育运动可产生一定水平的活性氧，这种低水平的活性氧能够使人体心脏更有力地搏动，促进机体的健康状态[4]。因此，给予抗氧化剂预防机体氧化损伤的同时必须防止抗氧化剂导致的机体过度还原态。
生脉散作为《中国药典》(2010版)收载的传统古方，具有“益气养阴，敛汗生津”的功能，现代临床用于急性心肌梗死、心源性休克、冠心病等。生脉散由人参、麦冬、五味子组成，对于生脉散的拆方研究表明，人参、麦冬、五味子都具有抗氧化作用，对于全方生脉散抗氧化功效都有贡献，发挥协同作用抗氧化[5，6]。现有技术的缺陷在于仅仅强调生脉散的抗氧化作用，未考察生脉散应用是否导致机体处于过度还原状态，这种过度还原态打破了机体的氧化还原稳态，对于维持机体的健康状态同样是不利的。
基于以上研究现状，本发明提供一种中药组合物醇提物，所述中药组合物醇提物在生脉散基础上进行减味，在具有显著抗氧化功效的同时，不会使机体处于过还原状态而损伤机体，更利于人体健康，可在制备抗氧化药物或保健品中应用，有望开发成新一代的抗氧化药物或保健品。本发明同时提供该中药组合物醇提物的制备方法和应用。
参考文献
[1]Coban J,Betül-Kalaz E,C,Aydin AF,-Ekici I,S,Uysal M.BLueberry treatment attenuates D-galactose inducedoxidative stress and tissue damage in rat liver.Geriatr Gerontol Int 2014,14(2)：490-497.
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[6]丰平,王学江.生脉散抗氧化、清除自由基作用研究.中药药理与临床2006,22:3-4.
发明内容
本发明的目的是提供一种中药组合物醇提物，所述醇提物具有抗氧化的功效。
本发明的另一个目的是提供上述中药组合物醇提物的制备方法。
本发明的另一个目的是提供上述中药组合物醇提物的应用。
本发明所述的上述目的是通过以下技术方案实现的：
一种中药组合物醇提物，所述中药组合物醇提物含有人参、麦冬。
所述人参、麦冬的重量比为等比。
所述人参、麦冬的重量比为9：9。
所述中药组合物醇提物为无水乙醇提取物。
所述中药组合物醇提物的制备方法如下：
a、将人参、麦冬打粉，分别称取重量比为等比的人参粉和麦冬粉，将生药粉加入圆底烧瓶中；
b、量取10倍体积无水乙醇加入含有生药粉的圆底烧瓶中；
c、水浴锅加热控温80℃，回流提取两个小时；
d、真空抽滤得上清液；
e、将滤渣重新加入圆底烧瓶中，加入滤渣体积8倍的无水乙醇，继续回流提取两个小时，之后真空抽滤得上清液，合并两次滤液；
f、使用旋转蒸发仪将两次滤液旋干即得所述中药组合物醇提物。
上述中药组合物醇提物在制备抗氧化药物中的应用。
上述中药组合物醇提物在制备抗氧化保健品中的应用。
本发明的有益效果：
经D-半乳糖诱导的过氧化损伤模型小鼠验证，生脉散常常导致机体处于过度还原态，而本发明所述中药组合物醇提物具有适宜的抗氧化功效，不会使机体处于过还原状态而损伤机体，更利于人体健康，这种效果是仅靠减少生脉散用量所达不到的。同时中药组合物醇提物可减少生药用量，成本更低。因此，所述中药组合物醇提物可在制备抗氧化药物或保健品中应用，有望开发成新一代的抗氧化药物或保健品。
以下提供具体实施例以实现本发明所述的技术方案，但本发明的保护范围不局限于以下所述。
具体实施方式
实施例1中药组合物醇提物的制备方法
实验材料：人参、麦冬，两味药材都购买于兰州惠仁堂药业连锁有限责任公司。
a、将人参、麦冬打粉，分别称取65g人参粉和65g麦冬粉，将生药粉加入2L圆底烧瓶中；
b、量取1.3L无水乙醇加入含有生药粉的圆底烧瓶中；
c、水浴锅加热控温80℃，回流提取两个小时；
d、真空抽滤得上清液；
e、将滤渣重新加入2L圆底烧瓶中，加入滤渣体积8倍的无水乙醇，继续回流提取两个小时，之后真空抽滤得上清液，合并两次滤液；
f、使用旋转蒸发仪将两次滤液旋干即得所述中药组合物醇提物，-20℃保存，备用。
实施例2D-半乳糖诱导的过氧化损伤模型小鼠造模
1.生物材料
昆明小鼠(雄鼠)90只，体重18-22g，购于兰州大学GLP实验中心。
小鼠饲料购于北京科奥协力饲料有限公司。
2.试剂
D-半乳糖，分子式：C6H12O6，分子量为180.16，购于百灵威科技有限公司，CAS：59-23-4；作为造模药物，颈背部皮下给药浓度为500mg/kg BW(Body weight)。
3.小鼠造模
小鼠于24℃、12h明暗周期动物室饲养，自由饮水。随机分为6组，每组15只，空白对照组小鼠颈背部皮下注射生理盐水,其他各组小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖，500mg/kgBW，每日一次，持续造模42天。
实施例3生脉散醇提物的抗氧化功效验证
1.试剂
1，1，3，3-四乙氧基丙烷，分子式：C11H24O4，分子量为220，购于百灵威科技有限公司，CAS：122-31-6；作为测量MDA的标准品，其终浓度为40nmol/mL。
2.生脉散醇提物的制备
实验材料：人参、麦冬、五味子均购买于兰州惠仁堂药业连锁有限责任公司。
a、将人参、麦冬和五味子打粉，分别称取65g人参粉、65g麦冬粉和43g五味子粉(重量比为9:9:6)，将生药粉加入2L圆底烧瓶中；
b、量取1.7L无水乙醇加入含有生药粉的圆底烧瓶中；
c、水浴锅加热控温80℃，回流提取两个小时；
d、真空抽滤得上清液；
e、将滤渣重新加入2L圆底烧瓶中，加入滤渣体积8倍的无水乙醇，继续回流提取两个小时，之后真空抽滤得上清液，合并两次滤液；
f、使用旋转蒸发仪将两次滤液旋干即得所述生脉散醇提物，-20℃保存，备用。
3.实施步骤
(1)给药
从小鼠造模第15天开始给药，共持续给药28天，每天一次。其中，空白对照组灌胃蒸馏水、模型对照组灌胃蒸馏水、生脉散醇提物低浓度组灌胃100mg/kg生脉散醇提物、生脉散醇提物中浓度组灌胃200mg/kg生脉散醇提物、生脉散醇提物高浓度组灌胃600mg/kg生脉散醇提物。第28天给药后将小鼠处死，分别取海马、心脏、肝脏备用。
(2)组织匀浆的制备
海马匀浆的制备：将用生理盐水洗净并用滤纸吸干的海马精确称重，放于1.5mL的离心管中，加入9倍体积的PBS进行匀浆。
心脏、肝脏匀浆的制备：将用生理盐水洗净并用滤纸吸干的肝脏、心脏剪碎，精确称取0.1g放入1.5mL的离心管中加入0.9mL的PBS(pH 7.4)进行匀浆。
(3)指标检测
分别测定小鼠海马、心脏、肝脏组织中丙二醛MDA含量、超氧化物歧化酶SOD活性及谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px活性。MDA含量测定用硫代巴比妥酸比色法测定；SOD活性测定用氮蓝四唑法测定；谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px含量测定用DTNB法测定。
(4)实验结果
表1小鼠海马、心脏、肝脏中MDA含量测定结果
注：不同字母标注表示有显著性差异，P<0.05。
表2小鼠海马、心脏、肝脏中SOD酶活力测定结果
注：不同字母标注表示有显著性差异，P<0.05。
表3小鼠海马、心脏、肝脏中GSH-Px酶活力测定结果
注：不同字母标注表示有显著性差异，P<0.05。
D-半乳糖诱导的过氧化损伤模型对照组的小鼠肝脏、心脏、海马组织中MDA含量均高于空白对照组，而SOD与GSH-Px活性均低于空白对照组，说明造模成功。在灌胃给药之后，小鼠组织中的MDA含量下降，SOD、GSH-Px酶活力升高，见表1、表2、表3。这些结果说明9:9:6配比下的生脉散醇提物对D-半乳糖诱导的过氧化损伤模型小鼠有保护作用。但是生脉散醇提物中、高浓度组中SOD和GSH-Px酶活力显著高于空白对照组。抗氧化酶活力适当的升高可促使机体免受氧化损伤，具有保护作用。但是，如果机体内抗氧化酶水平过度升高，会使机体进入一种过度还原状态，这同样对机体有害。
在本实施例中，中浓度剂量为人体用量的10倍，由于小鼠体表面积约为人的10倍，因此，这个剂量相当于人体使用推荐剂量。在这一浓度下，SOD酶活性已高于空白对照组，进一步降低剂量则对降低MDA含量无效。
实施例4中药组合物醇提物的抗氧化功效验证
1.试剂
同实施例3。
2.中药组合物醇提物的制备方法同实施例1；
生脉散醇提物的制备方法同实施例3。
3.实施步骤
(1)给药
空白对照组灌胃蒸馏水、模型对照组灌胃蒸馏水、中药组合物醇提物低浓度组灌胃100mg/kg中药组合物醇提物、中药组合物醇提物中浓度组灌胃200mg/kg中药组合物醇提物、中药组合物高浓度组灌胃600mg/kg中药组合物、生脉散醇提物高浓度组灌胃600mg/kg生脉散醇提物。
具体步骤同实施例3。
(2)组织匀浆的制备
同实施例3。
(3)指标检测
同实施例3。
(4)实验结果
表4小鼠海马、心脏、肝脏中MDA含量测定结果
注：不同字母标注表示有显著性差异，P<0.05。
表5小鼠海马、心脏、肝脏中SOD含量测定结果
注：不同字母标注表示有显著性差异，P<0.05。
由表4、表5可以看出，使用D-半乳糖造模之后，模型对照组与空白对照组相比，小鼠体内MDA含量增加，SOD酶活力下降，说明造模成功。(p＜0.05)
同时，从表4、表5的结果可以看出，中药组合物醇提物各浓度组小鼠组织中MDA含量与模型对照组相比明显下降，SOD酶含量与模型对照组比较显著升高，这些结果说明中药组合物醇提物对D-半乳糖诱导的过氧化损伤模型小鼠有一定的保护作用，同时中药组合物醇提物各浓度组的SOD酶活力与空白对照组比较差异不显著，显示所述中药组合物醇提物不会导致体内的过还原态对机体造成损伤。因此，本发明在实施例3的研究基础上，特提供一种中药组合物醇提物，该醇提物对生脉散复方进行了减味处理，可以达到抗氧化而又不损伤机体的效果。
以上实施例的动物实验表明，与生脉散原方相比，本发明所述的中药组合物醇提物进行了减方处理，在具备显著抗氧化效果的同时，不会使机体处于过还原状态而损伤机体，更利于人体健康。并且可减少生药用量，节约成本。因此，本发明提供的中药组合物醇提物可在制备抗氧化药物或保健品中应用，有望开发成新一代的抗氧化药物或保健品。
Claims (7)
1.一种中药组合物醇提物，其特征在于，所述中药组合物醇提物含有人参、麦冬。
2.如权利要求1所述的一种中药组合物醇提物，其特征在于，人参、麦冬的重量比为等比。
3.如权利要求2所述的一种中药组合物醇提物，其特征在于，人参、麦冬的重量比为9:9。
4.如权利要求1-3任一项所述的一种中药组合物醇提物，其特征在于，所述醇提物为无水乙醇提取物。
5.一种如权利要求1-3任一项所述的中药组合物醇提物制备方法，其特征在于，所述制备方法如下：
a、将人参、麦冬打粉，分别称取重量比为等比的人参粉和麦冬粉，将生药粉加入圆底烧瓶中；
b、量取10倍体积无水乙醇加入含有生药粉的圆底烧瓶中；
c、水浴锅加热控温80℃，回流提取两个小时；
d、真空抽滤得上清液；
e、将滤渣重新加入圆底烧瓶中，加入滤渣体积8倍的无水乙醇，继续回流提取两个小时，之后真空抽滤得上清液，合并两次滤液；
f、使用旋转蒸发仪将两次滤液旋干即得所述中药组合物醇提物。
6.一种如权利要求1-3任一项所述的中药组合物醇提物在制备抗氧化药物中的应用。
7.一种如权利要求1-3任一项所述的中药组合物醇提物在制备抗氧化保健品中的应用。
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Citations (3)
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| KR20110087965A (ko) * | 2010-01-28 | 2011-08-03 | 권혁한 | 생맥산 추출물과 그 추출물을 이용한 생맥산 두부 및 그 제조방법 |
| CN105267619A (zh) * | 2014-06-07 | 2016-01-27 | 兰州大学 | 一种抑制ras原癌基因过表达的抗肿瘤中药复方提取物 |
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- 2016-05-05 CN CN201610292730.2A patent/CN107343918A/zh active Pending
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| Title |
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