CN107312861A

CN107312861A - 一种b‑all患者预后风险评估标记物

Info

Publication number: CN107312861A
Application number: CN201710645443.XA
Authority: CN
Inventors: 阮国瑞; 黄晓军; 吴利新; 刘开彦
Original assignee: Peking University Peoples Hospital
Current assignee: Peking University; Peking University Peoples Hospital
Priority date: 2017-08-01
Filing date: 2017-08-01
Publication date: 2017-11-03
Anticipated expiration: 2037-08-01
Also published as: CN107312861B

Abstract

本发明公开了一种B‑ALL患者预后风险评估标记物。本发明保护用于检测DIAPH1基因的产品或用于检测DIAPH1基因突变的产品在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的用途为如下(a1)‑(a4)中的至少一种：(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。所述DIAPH1基因如序列表的序列1所示。本发明发现DIAPH1基因突变是成人B‑ALL患者累计复发率和无复发生存率的独立危险因素。本发明可能在B‑ALL的分层诊断和预后评估中发挥重要作用。

Description

一种B-ALL患者预后风险评估标记物

技术领域

本发明涉及一种B-ALL患者预后风险评估标记物。

背景技术

B系急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是成人最常见的ALL类型，危险分层和治疗方式的进步显著改善了患者的预后，但成人B-ALL复发率高，总体预后仍较差，长期生存仅为30％-40％。目前的危险度分层根据年龄，初诊白细胞计数，染色体核型，中枢神经系统受累以及对初始治疗的反应等将患者分为标危和高危。但值得注意的是，标危患者中仍有部分患者复发，提示目前的危险度分层仍有待精准化，因此新的预后相关分子标记物的发现和验证对于更精确的危险度分层十分必要，且可能提供治疗靶点。

人类DIAPH1基因(NCBI编号：NM_001079812)位于5q31.3，编码成蛋白mDia，属于Rho效应蛋白，主要与肌动蛋白聚合作用、稳定微管有关，从而影响细胞的形态以及黏附、迁移、分裂等功能，并参与疾病的发生发展。家系研究发现，人类DIAPH1纯合失活突变与多种神经系统疾病相关，包括小头畸形、早发癫痫、视力障碍、智力障碍等。

发明内容

本发明的目的是提供一种B-ALL患者预后风险评估标记物。

本发明提供了用于检测DIAPH1基因的产品在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的用途为如下(a1)-(a4)中的至少一种：

(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；

(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；

(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；

(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。

本发明还保护用于检测DIAPH1基因突变的产品在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的用途为如下(a1)-(a4)中的至少一种：

(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；

(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；

(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；

(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。

本发明还保护一种试剂盒，包括用于检测DIAPH1基因的产品；所述试剂盒的用途为如下(a1)-(a4)中的至少一种：

(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；

(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；

(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；

(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。

本发明还保护一种试剂盒，包括用于检测DIAPH1基因突变的产品；所述试剂盒的用途为如下(a1)-(a4)中的至少一种：

(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；

(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；

(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；

(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。

本发明还保护DIAPH1基因作为靶标在B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估中的应用。

本发明还保护DIAPH1基因作为靶标在B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估中的应用。

本发明还保护DIAPH1基因作为靶标在B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估中的应用。

本发明还保护一种B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估方法，包括如下步骤：检测待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因突变情况，根据DIAPH1基因突变情况进行患者预后风险评估。

所述方法中，如果待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因发生突变，待测患者与DIAPH1基因未发生突变的患者相比，预后复发率高、无复发生存率低。

本发明还保护一种B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估方法，包括如下步骤：检测待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因突变情况，根据DIAPH1基因突变情况进行患者预后复发率评估。

所述方法中，如果待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因发生突变，待测患者与DIAPH1基因未发生突变的患者相比，预后复发率高。

本发明还保护一种B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估方法，包括如下步骤：检测待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因突变情况，根据DIAPH1基因突变情况进行患者预后无复发生存率评估。

所述方法中，如果待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因发生突变，待测患者与DIAPH1基因未发生突变的患者相比，无复发生存率低。

以上任一所述DIAPH1基因全长如序列表的序列1所示，DIAPH1基因编码区序列如序列表的序列2所示，DIAPH1基因编码的蛋白质(DIAPH1蛋白)如序列表的序列3所示。

以上任一所述DIAPH1基因突变包括单核苷酸变异、小片段插入缺失和拷贝数变异。

以上任一所述DIAPH1基因突变具体可为如下(b1)-(b5)中的任一种：

(b1)编码野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)第817位氨基酸残基的密码子由编码S的密码子突变为编码P的密码子；

(b2)编码野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)第58位氨基酸残基的密码子由编码A的密码子突变为编码V的密码子；

(b3)编码野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)第658位氨基酸残基的密码子由编码S的密码子突变为编码P的密码子；

(b4)编码野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)第725位氨基酸残基的密码子由编码G的密码子突变为编码R的密码子；

(b5)编码野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)第749位氨基酸残基的密码子由编码P的密码子突变为编码S的密码子；

以上任一所述DIAPH1基因突变具体可为如下(c1)-(c5)中的任一种：

(c1)与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第2449位核苷酸由T突变为C；

(c2)与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第173位核苷酸由C突变为T；

(c3)与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第1972位核苷酸由T突变为C；

(c4)与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第2173位核苷酸由G突变为A；

(c5)与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第2245位核苷酸由C突变为T。

本发明通过研究发现DIAPH1基因突变是成人B-ALL患者累计复发率(CIR)和无复发生存率(RFS)的独立危险因素。本发明可能在B-ALL的分层诊断和预后评估中发挥重要作用。

附图说明

图1为患者累计复发率(CIR)和无复发生存率(RFS)统计结果。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。

完全缓解(CR)定义为骨髓原始淋巴细胞<5％，中性粒细胞>1.0×10⁹/L，血细胞>100×10⁹/L，无髓外复发，持续4周以上。

复发定义为完全缓解的患者出现骨髓原始细胞>5％或髓外白血病(参照文献：J.C.Alvarnas,P.A.Brown,P.Aoun,K.K.Ballen,N.Bellam,W.Blum,et al.,Acutelymphoblastic leukemia,J.Natl.Compr.Canc.Netw.JNCCN 10(2012)858–914.)。

DIAPH1基因全长如序列表的序列1所示，DIAPH1基因编码区序列如序列表的序列2所示，DIAPH1基因编码序列3所示的蛋白质。

实施例1、DIAPH1基因突变与B-ALL患者预后风险评估

一、研究对象

收集2007年4月至2015年12月北京大学人民医院初诊为B-ALL的226例患者作为研究组。入选标准：①年龄≥14岁；②符合B-ALL标准诊断(参照WHO关于前体B和T细胞肿瘤分类标准)；③均为初诊，未进行任何相关治疗。患者或患者监护人(若患者年龄<18岁)均签署知情同意书。本研究获得北京大学人民医院医学伦理会批准，遵循赫尔辛基宣言。患者情况观察截止时间为2016年4月30日。

二、治疗方案

所有患者接受诱导化疗(共1-2个疗程)，若患者达完全缓解，给予巩固化疗2疗程；2疗程巩固化疗后，根据患者意愿，部分患者再进行0-2个疗程巩固化疗后行造血干细胞移植，其它未移植的患者继续接受巩固化疗1-1.5年，后继续进行维持化疗至少1年。

226例患者中，共203例患者达到完全缓解。完全缓解的患者中，123例患者进行造血干细胞移植，80例患者未进行移植。

1个疗程的诱导化疗方案为：长春新碱1.5mg/m²/天，在治疗第1、8、15和22天给予；柔红霉素45mg/m²/天，在治疗第1-3天和第15-17天给予；环磷酰胺800mg/m²/天，在治疗第1天和第15天给予；泼尼松60mg/m²/天，在治疗第1-19天给予；左旋门冬酰胺酶10,000U/m²/天，在治疗第19-28天给予。

1个疗程的巩固化疗方案为：甲氨蝶呤1g/m²/天，在治疗第1天给予；阿糖胞苷6g/m²/天，在治疗第2-7天给予；环磷酰胺600mg/m²/天，在治疗第1-3天给予；柔红霉素50mg/m²/天，在治疗第4-5天给予；长春新碱2mg/m²/天，在治疗第4天给予；地塞米松40mg/天，在治疗第1-4天和第11-14天给予；甲氨蝶呤和左旋门冬酰胺酶(甲氨蝶呤1g/m²/天，在治疗第1天给予；左旋门冬酰胺酶10,000U/m²/天，在治疗第2-8天给予)或CAM(环磷酰胺800mg/m²/天，在治疗第1天给予；阿糖胞苷100/m²/天，在治疗第1-7天给予；6-巯基嘌呤75mg/m²/天，在治疗第1-7天给予；)交替使用。

维持化疗方案为：6-巯基嘌呤50mg/m²/天，每天1次；甲氨蝶呤MTX 20mg/m²/天，每周1次。

中枢神经系统白血病预防：患者在诱导和巩固化疗期间接受8-10次三联药物(甲氨蝶呤、阿糖胞苷和地塞米松)鞘内注射(参照文献：Yan CH,Jiang Q,Wang J,Xu LP,LiuDH,Jiang H,Chen H,Zhang XH,Liu KY,Huang XJ.Superior survival of unmanipulatedhaploidentical hematopoietic stem cell transplantation compared withchemotherapy alone used as post-remission therapy in adults with standard-risk acute lymphoblastic leukemia in first complete remission.Biol BloodMarrow Transplant.2014Sep；20(9):1314-21.)。

123例(54％)患者接受异基因造血干细胞移植，34例(28％)HLA全相合，87例(71％)HLA半相合(1个HLA抗原不合4例，2个HLA抗原不合20例，3个HLA抗原不合63例),1例(1％)非血缘HLA全相合，1例(1％)自体移植。HLA全合移植患者及自体移植患者，预处理方案包括：阿糖胞苷(Ara-C)，环磷酰胺(CTX)，白舒菲(BU)以及甲环己亚硝脲(MeCCNU)。对HLA不合/单倍体移植患者或非血缘HLA全相合移植患者，预处理方案加用抗人胸腺球蛋白(ATG)。所有供者均接受rhG-CSF 5μg/(kg·d)，连续皮下注射5-6天。第4天采集骨髓，有核细胞要求达3-4×10⁸/kg；第5-6天应用COBE血细胞分离机采集外周血干细胞，循环总量约10L，总单个核细胞达3-4×10⁸/kg；非血缘供者不采集骨髓，第5-6天应用COBE血细胞分离机采集外周血干细胞，循环总量约10L，总单个核细胞达6-8×10⁸/kg。所有采集物根据供受者ABO血型相合程度进行必要的去红和/或去浆处理后立即回输给患者。移植物抗宿主病预防采用环孢素，骁悉和短程环磷酰胺联合方案(参照文献：Huang XJ,Liu DH,Liu KY,XuLP,Chen H,Han W,Chen YH,Zhang XH,Lu DP.Treatment of acute leukemia withunmanipulated HLA-mismatched/haploidentical blood and bone marrowtransplantation.Biol Blood Marrow Transplant.2009Feb；15(2):257-65.)。

三、测序研究方案

1、标本采集

226例患者均在初诊时进行标本采集，其中203例完全缓解的患者均在首次完全缓解时再次进行标本采集。采集方法为：采集患者骨髓4ml，加入EDTA抗凝，应用密度梯度离心法提取单个核细胞。采用美国Invitrogen公司DNAzol提取单个核细胞总DNA。

2、对步骤1得到的样本进行测序分析，具体如下：

(1)配对样本：从203例完全缓解患者的样本中，随机抽取104对样本(初诊期+完全缓解期)，其中8对样本进行全基因组测序(WGS)测序分析，13对样本进行全外显子组测序(WES)分析，88对样本进行目标靶区测序(TRS)分析。这其中，5对样本同时做了WES和TRS用于验证。

(2)仅初诊样本：226例中的其余患者初诊期样本(共122例样本)仅进行目标靶区测序(TRS)分析。

全基因组测序(WGS)：取总量0.5μg以上的DNA样品建库。利用Covaris破碎仪将基因组DNA随机打断成长度为350bp的片段，经末端修复、磷酸化以及加A尾后，片段两端分别连接接头，制备成DNA文库。文库构建完成后，利用美国Bcekman公司的AMPure XP system进行纯化，随后使用Agilent 2100对文库的Insert size进行检测，Insert size符合预期后，使用Q-PCR方法对文库的有效浓度(3nmol/L)进行准确定量，以保证文库质量。利用美国HiSeq X PE Cluster试剂盒聚集样本，然后进行Illumina Hiseq PE150测序。

全外显子组测序(WES)和目标靶区测序(TRS)：取总量0.6μg以上的DNA样品建库。WES测序文库通过美国Agilent公司的Agilent SureSelect Human All Exon试剂盒构建，TRS由Agilent SureSelect Human Custom Design Panel(310个基因，表1)构建。样本由美国Covaris公司Hydrodynamic shearing system生成180-280bp的片段。经末端修复、加A尾和连接接头后进行PCR。然后利用生物素标记的探针进行杂交，用链霉素磁珠捕获外显子组区域。对捕获的区域加上标签后进行测序。产物纯化、库检、聚集及测序同WGS。

表1设计面板的310个基因

测序数据质量控制：高通量测序得到的原始图像数据经碱基识别分析转化为原始测序序列，结果以FASTQ文件格式存储，其中包含测序序列的序列信息以及其对应的测序质量信息。测序得到的原始数据中会有少量序列包含接头信息、低质量碱基或未检出的碱基，对后续信息分析造成很大干扰。为了保证信息分析质量，必须对原始数据进行精细过滤，得到无污染的序列用于后续分析。数据过滤主要包括成对去除以下三种情况的序列：1)、含有接头序列的序列；2)、单端序列中N(N表示无法确定碱基信息)的碱基个数超过该条序列碱基总数的10％的序列；3)、单端序列中低质量(质量值低于5)碱基数超过该条序列长度比例的50％的序列。

序列比对及加工：有效测序数据通过BWA软件(参照文献：Li H,Durbin R.Fastand accurate short read alignment with Burrows-Wheeler transform[J].Bioinformatics,2009,25(14):1754-1760.)比对到参考基因组，得到BAM格式的最初的比对结果。利用SAMtools(参照文献：Li H,Handsaker B,Wysoker A,et al.The SequenceAlignment/Map format and SAMtools[J].Bioinformatics,2009,25(16):2078-2079.)、Picard(http://broadinstitute.github.io/picard/)和GATK软件(参照文献：DePristo MA,Banks E,Poplin R,et al.A framework for variation discovery and genotypingusing next-generation DNA sequencing data[J].Nat Genet,2011,43(5):491-498.)整理BAM文件，并进行标记重复、局部重新排列、碱基质量再校准等处理，从而得到BAM格式的最终比对结果。利用比对到基因组上的有效数据进行测序覆盖度和深度的统计(表2)。

表2测序深度和覆盖度统计

3、将步骤2得到的结果进行分析

(1)配对样本分析：利用muTect软件(参照文献：Cibulskis K,Lawrence M S,Carter S L,et al.Sensitive detection of somatic point mutations in impure andheterogeneous cancer samples[J].Nat Biotechnol,2013,31(3):213-219.)检测单核苷酸变异(SNVs)。Strelka软件检测插入缺失(InDels)(参照文献：Saunders C T,Wong W S,Swamy S,et al.Strelka:accurate somatic small-variant calling from sequencedtumor-normal sample pairs[J].Bioinformatics,2012,28(14):1811-1817.)。Control-FREEC软件检测拷贝数变异(参照文献：Boeva V,Popova T,Bleakley K,et al.Control-FREEC:a tool for assessing copy number and allelic content using next-generation sequencing data[J].Bioinformatics,2012,28(3):423-425.)。ANNOVAR软件(参照文献：Wang K,Li M,Hakonarson H.ANNOVAR:functional annotation of geneticvariants from high-throughput sequencing data[J].Nucleic Acids Res,2010,38(16):e164.)对检测的体细胞突变进行注释。利用千人基因组数据库(参照文献：AbecasisG R,Auton A,Brooks L D,et al.An integrated map of genetic variation from 1,092human genomes[J].Nature,2012,491(7422):56-65.)或ExAC数据库(参照文献：Lek M,Karczewski K J,Minikel E V,et al.Analysis of protein-coding genetic variationin 60,706humans[J].Nature,2016,536(7616):285-291.)过滤掉人群中频率大于0.01的变异位点，去除个体间多样性位点，保留频率低于0.01的变异位点。MuSic软件(参照文献：Dees N D,Zhang Q,Kandoth C,et al.MuSiC:identifying mutational significance incancer genomes[J].Genome Res,2012,22(8):1589-1598.)用于检测高频突变基因，GISTIC软件(Beroukhim R,Getz G,Nghiemphu L,et al.Assessing the significance ofchromosomal aberrations in cancer:methodology and application to glioma[J].Proc Natl Acad Sci U S A,2007,104(50):20007-20012.)。

(2)仅初诊样本分析：利用SAMtools检测单核苷酸多态性，再通过以下步骤进行SNVs过滤：1)、比对千人基因组数据库或ExAC数据库，过滤掉人群中频率大于0.01的变异位点；2)、过滤掉在构建的88例正常人群TRS数据库中的多态性位点。

88例正常人群TRS数据库为步骤2中88对用于目标靶区测序(TRS)分析的配对样本中的缓解期样本数据组成的数据库。

采用SPSS19.0，Graphad Prism 5.0和R统计软件进行数据分析。运用Kaplan-Meier法计算生存率，Log-rank检验进行生存分析，建立Cox比例风险回归模型对DIAPH1基因突变情况及其他可能影响预后的因素进行多因素分析，研究DIAPH1基因突变对累积复发率(CIR)和无复发生存率(RFS)等预后指标的影响。P>0.1变量从模型中去除，以P<0.05为差异有统计学意义。

四、研究结果

高频基因突变显示，在226例患者中，共有DIAPH1突变(均为点突变)阳性患者8例，占4％，为首次在成人B-ALL报道的高频突变基因。

8例DIAPH1突变阳性患者具体突变情况如下：

3例：与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第2449位核苷酸由T突变为C，与野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)的区别在于：第817位氨基酸由S突变为P；

2例：与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第173位核苷酸由C突变为T，与野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)的区别在于：第58位氨基酸由A突变为V；

1例：与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第1972位核苷酸由T突变为C，与野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)的区别在于：第658位氨基酸由S突变为P；

1例：与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第2173位核苷酸由G突变为A，与野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)的区别在于：第725位氨基酸由G突变为R；

1例：与野生型DIAPH1基因的编码区(序列表的序列2)的区别在于：第2245位核苷酸由C突变为T，与野生型DIAPH1蛋白(序列表的序列3)的区别在于：第749位氨基酸由P突变为S。

把获得完全缓解的患者纳入生存分析。总共203例患者获得完全缓解，其中DIAPH1突变阳性患者7例。临床资料提示，7例DIAPH1突变阳性患者均出现复发，其中接受移植患者2例，截至随访终点仍然存活；未接受移植患者5例，4例死亡。DIAPH1野生型患者复发65例，其中接受移植患者121例，截至随访时间存活99例；未接受移植患者75例，19例死亡。

单因素分析提示，DIAPH1突变型患者5年CIR为100％，5年RFS为0％；DIAPH1野生型患者5年CIR为47％，5年RFS为50％。DIAPH1突变型患者5年CIR更高(100％，95％可信区间[59，100％]vs.47％，95％可信区间[40，54％]；P＝<0.001)以及更差的5年RFS(0，95％可信区间[0,41％]vs.50％，95％可信区间[43,57％]；P＝<0.001)(图1)。

纳入DIAPH1突变、年龄(按照年龄对患者进行分组，分为大于等于35岁或小于35岁)、性别、MRD、白细胞计数(按照初诊时白细胞计数对患者进行分组，分为大于等于30×10⁹/L或小于30×10⁹/L)、IKZF1缺失、BCR-ABL1、MLL重排和治疗方式(是否移植)预后相关因素，多因素分析显示，DIAPH1突变是CIR(HR＝4.3[1.7,11.0]；P＝0.002)和RFS(HR＝4.1[1.8,9.2]；P＝0.001)的独立危险因素。其他因素中，造血干细胞移植是CIR(HR＝0.2[0.1-0.4]；P<0.001)和RFS(HR＝0.2[0.1-0.4]；P<0.001)的保护性因素，MLL重排是CIR(HR＝5.3[2.8-10.3]；P<0.001)和RFS(HR＝5.2[2.2-12.2]；P<0.001)的独立危险因素(表3)。而年龄、性别、MRD、白细胞计数、IKZF1缺失、BCR-ABL1等因素对预后无影响。

表3 203例患者CIR和RFS多因素分析

结果表明，DIAPH1基因突变是成人B-ALL患者CIR和RFS的独立危险因素。本发明可能在B-ALL的分层诊断和预后评估中发挥重要作用。

SEQUENCE LISTING

<110> 北京大学人民医院

<120> 一种B-ALL患者预后风险评估标记物

<160> 3

<210> 1

<211> 5760

<212> DNA

<213> 人（ Homo sapiens）

<400> 1

attcatgagg cgcgcgcagc ccggcatgct aatgaggcgg ggcgcggcgg ctggctaaag 60

agcgactggg cggcggcggg cgcggagctg ccaggcggga gcggcgtagg cgcggggtcg 120

ccggccagcg tgaaccggga catggagccg cccggcggga gcctggggcc cggccgcggg 180

acccgggaca agaagaaggg ccggagccca gatgagctgc cctcggcggg cggcgacggc 240

ggcaaatcta agaaatttct ggagagattt accagcatga gaattaagaa ggagaaggaa 300

aagcccaatt ctgctcatag aaattcttct gcatcatatg gggatgatcc cacagcacag 360

tcattgcaag atgtttcaga tgaacaagtg ctggttctct ttgaacagat gctgctggat 420

atgaacctga atgaggagaa acagcaacct ttgagggaga aggacatcat catcaagagg 480

gagatggtgt cccaatactt gtacacctcc aaggctggca tgagccagaa ggagagctct 540

aagtctgcca tgatgtatat tcaggagttg aggtcaggct tgcgggatat gcctctgctc 600

agctgcctgg agtcccttcg tgtgtctctc aacaacaacc ctgtcagttg ggtgcaaaca 660

tttggtgctg aaggcttggc ctccttattg gacattctta aacgacttca tgatgagaaa 720

gaagagactg ctgggagtta cgatagccgg aacaagcatg agatcattcg ctgcttgaaa 780

gcttttatga acaacaagtt tggaatcaag accatgttgg agacagaaga aggaatccta 840

ctgctggtca gagccatgga tcctgctgtt cccaacatga tgattgatgc agctaagctg 900

ctttctgctc tttgtattct accgcagcca gaggacatga atgaaagggt tttggaggca 960

atgacagaaa gagctgagat ggatgaagtg gaacgtttcc agccgctgct ggatggatta 1020

aaaagtggaa ccactattgc actgaaggtt ggatgcctac agctgatcaa tgctctcatc 1080

acaccagcgg aggaacttga cttccgagtt cacatcagaa gtgaactgat gcgtttgggg 1140

ctacatcagg tgttgcagga ccttcgagag attgaaaatg aagatatgag agtgcaacta 1200

aatgtgtttg atgaacaagg ggaagaggat tcctatgacc tgaagggacg gctggatgac 1260

attcgcatgg agatggatga ctttaatgaa gtctttcaga ttctcttaaa cacagtgaag 1320

gattcaaagg cagagccaca cttcctttcc atcctgcagc acttactctt ggtccgaaat 1380

gactatgagg ccagacctca gtactataag ttgattgaag aatgtatttc ccagatagtt 1440

ctgcacaaga acggggctga tcctgacttc aagtgccggc acctccagat tgagattgag 1500

ggattaattg atcaaatgat tgataagaca aaggtggaga aatctgaagc caaagctgca 1560

gagctggaaa agaagttgga ctcagagtta acagcccgac atgagctaca ggtggaaatg 1620

aaaaagatgg aaagtgactt tgagcagaag cttcaagatc ttcagggaga aaaagatgca 1680

ctgcattctg aaaagcagca aattgccaca gagaaacagg acctggaagc agaggtgtcc 1740

cagctcacag gagaggttgc caagctgaca aaggaactgg aagatgccaa gaaagaaatg 1800

gcttccctct ctgcggcagc tattactgta cctccttctg ttcctagtcg tgctcctgtt 1860

ccccctgccc ctcctttacc tggtgactct ggcactatta ttccaccacc acctgctcct 1920

ggggatagta ccactcctcc tcctcctcct cctcctcctc ctcctccacc tcctttgcct 1980

gggggtgttt gcatctcctc acccccttct ttacctggag gtactgctat ctctccaccc 2040

cctcctttgt ctggggatgc taccatccct ccaccccctc ctttgcctga gggtgttggc 2100

atcccttcac cctcttcttt gcctggaggt actgccatcc ccccacctcc tcctttgcct 2160

gggagtgcta gaatcccccc accaccacct cctttgcctg ggagtgctgg aattcccccc 2220

ccacctcctc ccttgcctgg agaagcagga atgccacctc ctcctccccc tcttcctggt 2280

ggtcctggaa tccctccacc tcctccattt cccggaggcc ctggcattcc tccacctcca 2340

cccggaatgg gtatgcctcc acctccccca tttggatttg gagttcctgc agccccagtt 2400

ctgccatttg gattaacccc caaaaagctt tataagccag aggtgcagct ccggaggcca 2460

aactggtcca agcttgtggc tgaggacctc tcccaggact gcttctggac aaaggtgaag 2520

gaggaccgct ttgagaacaa tgaacttttc gccaaactta cccttacctt ctctgcccag 2580

accaagactt ccaaagccaa gaaggatcaa gaaggtggag aagaaaagaa atctgtgcaa 2640

aagaaaaaag taaaagagtt aaaggtgttg gattcaaaga cagcccagaa tctctcaatc 2700

tttttgggtt ccttccgcat gccctatcaa gagattaaga atgtcatcct ggaggtgaat 2760

gaggctgttc tgactgagtc tatgatccag aacctcatta agcaaatgcc agagccagag 2820

cagttaaaaa tgctttctga actgaaggat gaatatgatg acctggctga gtcagagcag 2880

tttggcgtgg tgatgggcac tgtgccccga ctgcggcctc gcctcaatgc cattctcttc 2940

aagctacaat tcagcgagca agtggagaat atcaagccag agattgtgtc tgtcactgct 3000

gcatgtgagg agttacgtaa gagtgagagc ttttccaatc tcctagagat taccttgctt 3060

gttggaaatt acatgaatgc tggctccaga aatgctggtg cttttggctt caatatcagc 3120

ttcctctgta agcttcgaga caccaagtcc acagatcaga agatgacgtt gttacacttc 3180

ttggctgagt tgtgtgagaa tgactatccc gatgtcctca agtttccaga cgagcttgcc 3240

catgtggaga aagccagccg agtttctgct gaaaacttgc aaaagaacct agatcagatg 3300

aagaaacaaa tttctgatgt ggaacgtgat gttcagaatt tcccagctgc cacagatgaa 3360

aaagacaagt ttgttgaaaa aatgaccagc tttgtgaagg atgcacagga acagtataac 3420

aagctgcgga tgatgcattc taacatggag accctctata aggagctggg cgagtacttc 3480

ctctttgacc ccaagaagtt gtctgttgaa gaatttttca tggatcttca caattttcgg 3540

aatatgtttt tgcaagcagt caaggagaac cagaagcggc gggagacaga agaaaagatg 3600

aggcgagcaa aactagccaa ggagaaggca gagaaggagc ggctagagaa gcagcagaag 3660

agagagcaac tcatagacat gaatgcagag ggcgatgaga caggtgtgat ggacagtctt 3720

ctagaagccc tgcagtcagg ggcagcattc cgacggaaga gagggccccg tcaagccaac 3780

aggaaggccg ggtgtgcagt cacatctctg ctagcttcgg agctgaccaa ggatgatgcc 3840

atggctgctg ttcctgccaa ggtgtccaag aacagtgaga cattccccac aatccttgag 3900

gaagccaagg agttggttgg ccgtgcaagc taatgtgggt cctgtgaccg cggcagctcc 3960

tcagcggagc cgcagactgt cctgccctgc agcatgtgcc taaaggctca aggggatatt 4020

cctctggggt ggccactccc accaccctga ccctgtcttt ctctctggcc tgctgctctc 4080

tcaacatcac atacagcttc agctgcctgg aggccagaag gaaagggcag tgcaggggag 4140

gcctgagccc gacttagcca gccctggctg ttgtattacc aaagcagggt ccatgtttgc 4200

tgccttaacc ctgtctcctc tctgttactc agagggcctc atctcagaca aggcccagcc 4260

tgctttttct cagccctgac tttctaatgg gctttccccc ctaggtcagt cttgctggat 4320

ttgtgctttt cttttgtggt ttctctggcc ctgagaatag catggggctt gtaaaccttt 4380

gggctagatc cctcctttca ttgctgttgt ctctgctctt ccctctcctg gctgtggtta 4440

tttattatta gtggtgtggc actgggagct gctcctaagg aagcagggag caaatcccac 4500

ctttacccca ccttcctggg aaaggcctcc aaagcaaagg atctggacca gtttccctgc 4560

tgtgctgtgg cccaggccag agcctgtggg caggcaggca gggcatagcg acagtgtggg 4620

acctgccccc agcttctgcc acgctttatg cccttgcctc tctggacgct ctgcaccaac 4680

cccaggctac tgagccacct tccctcctca tgccttccct gagctttggt gcatctcatc 4740

tggactatgg gttgtactgt gaccatccca acacctcacc ctctgtctac aaggaaatgg 4800

gaggtggagc ctcctggctg agaaattgtt ttgcaaatgg atctattttt gtatgaaaaa 4860

aaaaattttt ttaaagaaaa ctgttccttc cccctttccc ctccataatg taagaagctt 4920

tggtggcagg ttacagagtt ctgggatttc ttctcacagg cccaatcctg aatgtgcccc 4980

tggaccttct ggacccttga gtccaaggca gatcctctct cccagggaat ccgacacagg 5040

aggaacccct tctctggttg agctgggcca ggcctaagag tagcaggaac tctaagacca 5100

cagagttttt tataaatgta taaatgtatc aagccaaatg tgcagatgct aactggacat 5160

tctggggaac tgggcaccag gagtgccttc atacactgta ccccagctct cttctaaaag 5220

agaagtgggt gggcacactg aactgtttgg tggccccaac cacaggaagc tgcaattctc 5280

tggcttaggg tgatactttt gccctccttg tgcccctctc agctttccat ccccagctag 5340

gaagaaagaa tggcactctt gggcttggcc cagaattaga gttattagag caagagagag 5400

cttaggaagc atgagggcaa ctatagtgag gccttattgc caggagggag ggttttggtt 5460

gctggcgctt gtgtataaag gggcaagagc agctcctttg gactattcct gggaggactc 5520

tgatgcaggg cgtctgttgc tcccctgggt cacctcctcc ctgctcgctg acatctgggg 5580

ctttgaccct ttctttttta atctactttt gctaagatgc atttaataaa aaaaaagaga 5640

gagagagaga ggtgtgaggg acaaaatgca aacctatttc ccttgcctca taggcttctg 5700

ggatgtcatc acctccagtt tgttggtttt gtttccaact gttaataaag cattgaaaca 5760

<210> 2

<211> 3792

<212> DNA

<213> 人（ Homo sapiens）

<400> 2

atggagccgc ccggcgggag cctggggccc ggccgcggga cccgggacaa gaagaagggc 60

cggagcccag atgagctgcc ctcggcgggc ggcgacggcg gcaaatctaa gaaatttctg 120

gagagattta ccagcatgag aattaagaag gagaaggaaa agcccaattc tgctcataga 180

aattcttctg catcatatgg ggatgatccc acagcacagt cattgcaaga tgtttcagat 240

gaacaagtgc tggttctctt tgaacagatg ctgctggata tgaacctgaa tgaggagaaa 300

cagcaacctt tgagggagaa ggacatcatc atcaagaggg agatggtgtc ccaatacttg 360

tacacctcca aggctggcat gagccagaag gagagctcta agtctgccat gatgtatatt 420

caggagttga ggtcaggctt gcgggatatg cctctgctca gctgcctgga gtcccttcgt 480

gtgtctctca acaacaaccc tgtcagttgg gtgcaaacat ttggtgctga aggcttggcc 540

tccttattgg acattcttaa acgacttcat gatgagaaag aagagactgc tgggagttac 600

gatagccgga acaagcatga gatcattcgc tgcttgaaag cttttatgaa caacaagttt 660

ggaatcaaga ccatgttgga gacagaagaa ggaatcctac tgctggtcag agccatggat 720

cctgctgttc ccaacatgat gattgatgca gctaagctgc tttctgctct ttgtattcta 780

ccgcagccag aggacatgaa tgaaagggtt ttggaggcaa tgacagaaag agctgagatg 840

gatgaagtgg aacgtttcca gccgctgctg gatggattaa aaagtggaac cactattgca 900

ctgaaggttg gatgcctaca gctgatcaat gctctcatca caccagcgga ggaacttgac 960

ttccgagttc acatcagaag tgaactgatg cgtttggggc tacatcaggt gttgcaggac 1020

cttcgagaga ttgaaaatga agatatgaga gtgcaactaa atgtgtttga tgaacaaggg 1080

gaagaggatt cctatgacct gaagggacgg ctggatgaca ttcgcatgga gatggatgac 1140

tttaatgaag tctttcagat tctcttaaac acagtgaagg attcaaaggc agagccacac 1200

ttcctttcca tcctgcagca cttactcttg gtccgaaatg actatgaggc cagacctcag 1260

tactataagt tgattgaaga atgtatttcc cagatagttc tgcacaagaa cggggctgat 1320

cctgacttca agtgccggca cctccagatt gagattgagg gattaattga tcaaatgatt 1380

gataagacaa aggtggagaa atctgaagcc aaagctgcag agctggaaaa gaagttggac 1440

tcagagttaa cagcccgaca tgagctacag gtggaaatga aaaagatgga aagtgacttt 1500

gagcagaagc ttcaagatct tcagggagaa aaagatgcac tgcattctga aaagcagcaa 1560

attgccacag agaaacagga cctggaagca gaggtgtccc agctcacagg agaggttgcc 1620

aagctgacaa aggaactgga agatgccaag aaagaaatgg cttccctctc tgcggcagct 1680

attactgtac ctccttctgt tcctagtcgt gctcctgttc cccctgcccc tcctttacct 1740

ggtgactctg gcactattat tccaccacca cctgctcctg gggatagtac cactcctcct 1800

cctcctcctc ctcctcctcc tcctccacct cctttgcctg ggggtgtttg catctcctca 1860

cccccttctt tacctggagg tactgctatc tctccacccc ctcctttgtc tggggatgct 1920

accatccctc caccccctcc tttgcctgag ggtgttggca tcccttcacc ctcttctttg 1980

cctggaggta ctgccatccc cccacctcct cctttgcctg ggagtgctag aatcccccca 2040

ccaccacctc ctttgcctgg gagtgctgga attccccccc cacctcctcc cttgcctgga 2100

gaagcaggaa tgccacctcc tcctccccct cttcctggtg gtcctggaat ccctccacct 2160

cctccatttc ccggaggccc tggcattcct ccacctccac ccggaatggg tatgcctcca 2220

cctcccccat ttggatttgg agttcctgca gccccagttc tgccatttgg attaaccccc 2280

aaaaagcttt ataagccaga ggtgcagctc cggaggccaa actggtccaa gcttgtggct 2340

gaggacctct cccaggactg cttctggaca aaggtgaagg aggaccgctt tgagaacaat 2400

gaacttttcg ccaaacttac ccttaccttc tctgcccaga ccaagacttc caaagccaag 2460

aaggatcaag aaggtggaga agaaaagaaa tctgtgcaaa agaaaaaagt aaaagagtta 2520

aaggtgttgg attcaaagac agcccagaat ctctcaatct ttttgggttc cttccgcatg 2580

ccctatcaag agattaagaa tgtcatcctg gaggtgaatg aggctgttct gactgagtct 2640

atgatccaga acctcattaa gcaaatgcca gagccagagc agttaaaaat gctttctgaa 2700

ctgaaggatg aatatgatga cctggctgag tcagagcagt ttggcgtggt gatgggcact 2760

gtgccccgac tgcggcctcg cctcaatgcc attctcttca agctacaatt cagcgagcaa 2820

gtggagaata tcaagccaga gattgtgtct gtcactgctg catgtgagga gttacgtaag 2880

agtgagagct tttccaatct cctagagatt accttgcttg ttggaaatta catgaatgct 2940

ggctccagaa atgctggtgc ttttggcttc aatatcagct tcctctgtaa gcttcgagac 3000

accaagtcca cagatcagaa gatgacgttg ttacacttct tggctgagtt gtgtgagaat 3060

gactatcccg atgtcctcaa gtttccagac gagcttgccc atgtggagaa agccagccga 3120

gtttctgctg aaaacttgca aaagaaccta gatcagatga agaaacaaat ttctgatgtg 3180

gaacgtgatg ttcagaattt cccagctgcc acagatgaaa aagacaagtt tgttgaaaaa 3240

atgaccagct ttgtgaagga tgcacaggaa cagtataaca agctgcggat gatgcattct 3300

aacatggaga ccctctataa ggagctgggc gagtacttcc tctttgaccc caagaagttg 3360

tctgttgaag aatttttcat ggatcttcac aattttcgga atatgttttt gcaagcagtc 3420

aaggagaacc agaagcggcg ggagacagaa gaaaagatga ggcgagcaaa actagccaag 3480

gagaaggcag agaaggagcg gctagagaag cagcagaaga gagagcaact catagacatg 3540

aatgcagagg gcgatgagac aggtgtgatg gacagtcttc tagaagccct gcagtcaggg 3600

gcagcattcc gacggaagag agggccccgt caagccaaca ggaaggccgg gtgtgcagtc 3660

acatctctgc tagcttcgga gctgaccaag gatgatgcca tggctgctgt tcctgccaag 3720

gtgtccaaga acagtgagac attccccaca atccttgagg aagccaagga gttggttggc 3780

cgtgcaagct aa 3792

<210> 3

<211> 1263

<212> PRT

<213> 人（ Homo sapiens）

<400> 3

Met Glu Pro Pro Gly Gly Ser Leu Gly Pro Gly Arg Gly Thr Arg Asp

1 5 10 15

Lys Lys Lys Gly Arg Ser Pro Asp Glu Leu Pro Ser Ala Gly Gly Asp

20 25 30

Gly Gly Lys Ser Lys Lys Phe Leu Glu Arg Phe Thr Ser Met Arg Ile

35 40 45

Lys Lys Glu Lys Glu Lys Pro Asn Ser Ala His Arg Asn Ser Ser Ala

50 55 60

Ser Tyr Gly Asp Asp Pro Thr Ala Gln Ser Leu Gln Asp Val Ser Asp

65 70 75 80

Glu Gln Val Leu Val Leu Phe Glu Gln Met Leu Leu Asp Met Asn Leu

85 90 95

Asn Glu Glu Lys Gln Gln Pro Leu Arg Glu Lys Asp Ile Ile Ile Lys

100 105 110

Arg Glu Met Val Ser Gln Tyr Leu Tyr Thr Ser Lys Ala Gly Met Ser

115 120 125

Gln Lys Glu Ser Ser Lys Ser Ala Met Met Tyr Ile Gln Glu Leu Arg

130 135 140

Ser Gly Leu Arg Asp Met Pro Leu Leu Ser Cys Leu Glu Ser Leu Arg

145 150 155 160

Val Ser Leu Asn Asn Asn Pro Val Ser Trp Val Gln Thr Phe Gly Ala

165 170 175

Glu Gly Leu Ala Ser Leu Leu Asp Ile Leu Lys Arg Leu His Asp Glu

180 185 190

Lys Glu Glu Thr Ala Gly Ser Tyr Asp Ser Arg Asn Lys His Glu Ile

195 200 205

Ile Arg Cys Leu Lys Ala Phe Met Asn Asn Lys Phe Gly Ile Lys Thr

210 215 220

Met Leu Glu Thr Glu Glu Gly Ile Leu Leu Leu Val Arg Ala Met Asp

225 230 235 240

Pro Ala Val Pro Asn Met Met Ile Asp Ala Ala Lys Leu Leu Ser Ala

245 250 255

Leu Cys Ile Leu Pro Gln Pro Glu Asp Met Asn Glu Arg Val Leu Glu

260 265 270

Ala Met Thr Glu Arg Ala Glu Met Asp Glu Val Glu Arg Phe Gln Pro

275 280 285

Leu Leu Asp Gly Leu Lys Ser Gly Thr Thr Ile Ala Leu Lys Val Gly

290 295 300

Cys Leu Gln Leu Ile Asn Ala Leu Ile Thr Pro Ala Glu Glu Leu Asp

305 310 315 320

Phe Arg Val His Ile Arg Ser Glu Leu Met Arg Leu Gly Leu His Gln

325 330 335

Val Leu Gln Asp Leu Arg Glu Ile Glu Asn Glu Asp Met Arg Val Gln

340 345 350

Leu Asn Val Phe Asp Glu Gln Gly Glu Glu Asp Ser Tyr Asp Leu Lys

355 360 365

Gly Arg Leu Asp Asp Ile Arg Met Glu Met Asp Asp Phe Asn Glu Val

370 375 380

Phe Gln Ile Leu Leu Asn Thr Val Lys Asp Ser Lys Ala Glu Pro His

385 390 395 400

Phe Leu Ser Ile Leu Gln His Leu Leu Leu Val Arg Asn Asp Tyr Glu

405 410 415

Ala Arg Pro Gln Tyr Tyr Lys Leu Ile Glu Glu Cys Ile Ser Gln Ile

420 425 430

Val Leu His Lys Asn Gly Ala Asp Pro Asp Phe Lys Cys Arg His Leu

435 440 445

Gln Ile Glu Ile Glu Gly Leu Ile Asp Gln Met Ile Asp Lys Thr Lys

450 455 460

Val Glu Lys Ser Glu Ala Lys Ala Ala Glu Leu Glu Lys Lys Leu Asp

465 470 475 480

Ser Glu Leu Thr Ala Arg His Glu Leu Gln Val Glu Met Lys Lys Met

485 490 495

Glu Ser Asp Phe Glu Gln Lys Leu Gln Asp Leu Gln Gly Glu Lys Asp

500 505 510

Ala Leu His Ser Glu Lys Gln Gln Ile Ala Thr Glu Lys Gln Asp Leu

515 520 525

Glu Ala Glu Val Ser Gln Leu Thr Gly Glu Val Ala Lys Leu Thr Lys

530 535 540

Glu Leu Glu Asp Ala Lys Lys Glu Met Ala Ser Leu Ser Ala Ala Ala

545 550 555 560

Ile Thr Val Pro Pro Ser Val Pro Ser Arg Ala Pro Val Pro Pro Ala

565 570 575

Pro Pro Leu Pro Gly Asp Ser Gly Thr Ile Ile Pro Pro Pro Pro Ala

580 585 590

Pro Gly Asp Ser Thr Thr Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro

595 600 605

Pro Pro Pro Leu Pro Gly Gly Val Cys Ile Ser Ser Pro Pro Ser Leu

610 615 620

Pro Gly Gly Thr Ala Ile Ser Pro Pro Pro Pro Leu Ser Gly Asp Ala

625 630 635 640

Thr Ile Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro Glu Gly Val Gly Ile Pro Ser

645 650 655

Pro Ser Ser Leu Pro Gly Gly Thr Ala Ile Pro Pro Pro Pro Pro Leu

660 665 670

Pro Gly Ser Ala Arg Ile Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro Gly Ser

675 680 685

Ala Gly Ile Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro Gly Glu Ala Gly Met

690 695 700

Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro Gly Gly Pro Gly Ile Pro Pro Pro

705 710 715 720

Pro Pro Phe Pro Gly Gly Pro Gly Ile Pro Pro Pro Pro Pro Gly Met

725 730 735

Gly Met Pro Pro Pro Pro Pro Phe Gly Phe Gly Val Pro Ala Ala Pro

740 745 750

Val Leu Pro Phe Gly Leu Thr Pro Lys Lys Leu Tyr Lys Pro Glu Val

755 760 765

Gln Leu Arg Arg Pro Asn Trp Ser Lys Leu Val Ala Glu Asp Leu Ser

770 775 780

Gln Asp Cys Phe Trp Thr Lys Val Lys Glu Asp Arg Phe Glu Asn Asn

785 790 795 800

Glu Leu Phe Ala Lys Leu Thr Leu Thr Phe Ser Ala Gln Thr Lys Thr

805 810 815

Ser Lys Ala Lys Lys Asp Gln Glu Gly Gly Glu Glu Lys Lys Ser Val

820 825 830

Gln Lys Lys Lys Val Lys Glu Leu Lys Val Leu Asp Ser Lys Thr Ala

835 840 845

Gln Asn Leu Ser Ile Phe Leu Gly Ser Phe Arg Met Pro Tyr Gln Glu

850 855 860

Ile Lys Asn Val Ile Leu Glu Val Asn Glu Ala Val Leu Thr Glu Ser

865 870 875 880

Met Ile Gln Asn Leu Ile Lys Gln Met Pro Glu Pro Glu Gln Leu Lys

885 890 895

Met Leu Ser Glu Leu Lys Asp Glu Tyr Asp Asp Leu Ala Glu Ser Glu

900 905 910

Gln Phe Gly Val Val Met Gly Thr Val Pro Arg Leu Arg Pro Arg Leu

915 920 925

Asn Ala Ile Leu Phe Lys Leu Gln Phe Ser Glu Gln Val Glu Asn Ile

930 935 940

Lys Pro Glu Ile Val Ser Val Thr Ala Ala Cys Glu Glu Leu Arg Lys

945 950 955 960

Ser Glu Ser Phe Ser Asn Leu Leu Glu Ile Thr Leu Leu Val Gly Asn

965 970 975

Tyr Met Asn Ala Gly Ser Arg Asn Ala Gly Ala Phe Gly Phe Asn Ile

980 985 990

Ser Phe Leu Cys Lys Leu Arg Asp Thr Lys Ser Thr Asp Gln Lys Met

995 1000 1005

Thr Leu Leu His Phe Leu Ala Glu Leu Cys Glu Asn Asp Tyr Pro

1010 1015 1020

Asp Val Leu Lys Phe Pro Asp Glu Leu Ala His Val Glu Lys Ala

1025 1030 1035

Ser Arg Val Ser Ala Glu Asn Leu Gln Lys Asn Leu Asp Gln Met

1040 1045 1050

Lys Lys Gln Ile Ser Asp Val Glu Arg Asp Val Gln Asn Phe Pro

1055 1060 1065

Ala Ala Thr Asp Glu Lys Asp Lys Phe Val Glu Lys Met Thr Ser

1070 1075 1080

Phe Val Lys Asp Ala Gln Glu Gln Tyr Asn Lys Leu Arg Met Met

1085 1090 1095

His Ser Asn Met Glu Thr Leu Tyr Lys Glu Leu Gly Glu Tyr Phe

1100 1105 1110

Leu Phe Asp Pro Lys Lys Leu Ser Val Glu Glu Phe Phe Met Asp

1115 1120 1125

Leu His Asn Phe Arg Asn Met Phe Leu Gln Ala Val Lys Glu Asn

1130 1135 1140

Gln Lys Arg Arg Glu Thr Glu Glu Lys Met Arg Arg Ala Lys Leu

1145 1150 1155

Ala Lys Glu Lys Ala Glu Lys Glu Arg Leu Glu Lys Gln Gln Lys

1160 1165 1170

Arg Glu Gln Leu Ile Asp Met Asn Ala Glu Gly Asp Glu Thr Gly

1175 1180 1185

Val Met Asp Ser Leu Leu Glu Ala Leu Gln Ser Gly Ala Ala Phe

1190 1195 1200

Arg Arg Lys Arg Gly Pro Arg Gln Ala Asn Arg Lys Ala Gly Cys

1205 1210 1215

Ala Val Thr Ser Leu Leu Ala Ser Glu Leu Thr Lys Asp Asp Ala

1220 1225 1230

Met Ala Ala Val Pro Ala Lys Val Ser Lys Asn Ser Glu Thr Phe

1235 1240 1245

Pro Thr Ile Leu Glu Glu Ala Lys Glu Leu Val Gly Arg Ala Ser

1250 1255 1260

Claims

1.用于检测DIAPH1基因的产品在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的用途为如下(a1)-(a4)中的至少一种：

(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；

(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；

(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；

(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。

2.用于检测DIAPH1基因突变的产品在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的用途为如下(a1)-(a4)中的至少一种：

(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；

(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；

(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；

(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。

3.一种试剂盒，包括用于检测DIAPH1基因的产品；所述试剂盒的用途为如下(a1)-(a4)中的至少一种：

(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；

(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；

(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；

(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。

4.一种试剂盒，包括用于检测DIAPH1基因突变的产品；所述试剂盒的用途为如下(a1)-(a4)中的至少一种：

(a1)B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估；

(a2)B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估；

(a3)B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估；

(a4)B系急性淋巴细胞白血病分层诊断。

5.DIAPH1基因作为靶标在B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估中的应用。

6.DIAPH1基因作为靶标在B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估中的应用。

7.DIAPH1基因作为靶标在B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估中的应用。

8.一种B系急性淋巴细胞白血病患者预后风险评估方法，包括如下步骤：检测待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因突变情况，根据DIAPH1基因突变情况进行患者预后风险评估。

9.一种B系急性淋巴细胞白血病患者预后复发率评估方法，包括如下步骤：检测待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因突变情况，根据DIAPH1基因突变情况进行患者预后复发率评估。

10.一种B系急性淋巴细胞白血病患者预后无复发生存率评估方法，包括如下步骤：检测待测患者单核细胞DNA中DIAPH1基因突变情况，根据DIAPH1基因突变情况进行患者预后无复发生存率评估。