CN1072955C - 黑羊胎素补液及其生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明为一种黑羊胎素补液，属于滋补保健品范围。本发明的黑羊胎素补液采用海南岛特有黑山羊80～100天的胎儿及胎盘制成的水提液，配以中药鸡血藤和益智仁的水提液，再加入果糖和纯净水，其主要原料配比(重量份)为：水：(羊胎素水提液+鸡血藤和益智仁水提液+果糖)＝4～5∶1。所述羊胎素水提液为用8～12重量份的羊胎及胎盘加酶水解制成的水解液，所述鸡血藤和益智仁水提液为用2～3重量份的鸡血藤和用2～3重量份的益智仁制成的水提液，所述果糖加入量为5～7重量份。本发明具有明显的延缓衰老、抗氧化、抗疲劳、提高免疫力等作用，并能减轻癌症病人因放射治疗导致的副反应。

Description

黑羊胎素补液及其生产方法

本发明为一种黑羊胎素补液，特别涉及一种全羊胎及胎盘并配以滋补中药生产的黑羊胎素补液，属于滋补保健品范围。

在以动物胚胎为原料的保健品研究和生产领域里，最常用的方法是采用人或动物胎盘，提取胎盘中对人体有益物质，其主要成份是胎盘蛋白质和多肽及氨基酸，对人体有一定的营养作用；胎儿是一个完整的动物体，其生物结构、营养成份比胎盘更加齐全，除了有丰富的蛋白质、氨基酸以外，还含有大量的卵磷质(动物胎儿中的卵磷质含量为生物体中最高)、不饱和脂肪酸、多种维生素、钙、锌、铁等微量元素和营养物质，更重要的是动物胚胎心中含有大量的生物活性物质，对生物体成长发育、抵抗疾病、成熟有着十分重要的作用，生物胎儿中的营养物质和生物活性物质有易吸收、生物利用率高的优点。在多种动物胚胎中，羊胚胎资源丰富、营养成份齐全、生物活性物质含量高；羊吃百草，营养齐全，且抗病能力强，尤其是海南岛特有的黑羊，更是羊中一杰。海南岛四季如春，全年无冬，气温宜人，岛上四季百草皆生，特殊的气候和环境条件培育出与众不同的种属。该黑山羊品系成熟重量小、全身黑毛、抗病力极强，寿命明显高于普通山羊。

在动物保健品的研制中，较多采用的方法是先高温杀菌(100℃,5～10分钟)后，用高温提取或乙醇提取或加酶消化，提取营养成份，由于提取前的高温杀菌处理或高温提取过程中，高温会造成部分营养成份，如蛋白质维生素的热破坏，特别是高温会破坏生物体的生物活性物质(如代谢酶、免疫蛋白等)丧失生物活性。

本发明的目的是提供一种黑羊胎素补液及其生产方法。本发明黑羊胎素补液采用海南特有的黑山羊的胎儿和胎盘为主要原料，再配以补血温肾中药鸡血藤和益智仁，制成黑羊胎素补液。本发明具有明显的延缓衰老、抗氧化、抗疲劳、提高免疫力等作用，并能减轻癌症病人因放射治疗导致的副反应。

本发明的目的是这样实现的：

本发明的黑羊胎素补液采用海南岛特有黑山羊80～100天的胎儿及胎盘制成的水提液，配以中药鸡血藤和益智仁的水提液，再加入果糖和纯净水，其主要原料配比(重量份)为：

水∶(羊胎素水提液+鸡血藤和益智仁水提液+果糖)=4～5∶1

所述羊胎素水提液为用8～12重量份的羊胎及胎盘加酶水解制成的水解液，所述鸡血藤和益智仁水提液为用2～3重量份的鸡血藤和用2～3重量份的益智仁制成的水提液，所述果糖加入量为5～7重量份。

本发明黑羊胎素补液的生产方法是采用海南特有的黑山羊80～100天的胎儿和胎盘，采用无菌手术剖腹产取出羊胎和胎盘，在10000级净化条件下常温、无菌操作，冲洗、粉碎后加入酶消化过滤提取制成羊胎素水提液，再配以海南岛特有补血温肾中药鸡血藤和益智仁水提液，合理调配制成所述黑羊胎素补液。由于本发明加酶消化前不需高温杀菌，在加酶水解后酶的灭活和罐装封口后杀菌均采用巴氏低温杀菌60～70℃,25～30分钟，从而克服常规处理热破坏的缺点，并最大限度保留羊胎和胎盘的营养成份和生物物质的活性。为发扬中国传统医学的特点，增加本发明补液的功效，在本补液中加入海南特有的补血、通筋活络中药-鸡血藤，温肺补肾中药-益智仁，以取得协同增效作用的效果。

本发明的黑羊胎素补液的生产方法及其工艺步骤如下：

一、其主要原料配比(重量份)为：

羊胎及胎盘∶鸡血藤∶益智仁=(8～12)∶(2～3)∶(2～3)

二、羊胎素水提液制备

1、原料准备：将怀孕80～100天(羊饲养基地兽医确定怀孕时间)的黑山羊在手术室(10000级净化)全麻后，刮除下部的黑毛，用3％碘酒消毒一次，再用75％酒精消毒两次，按外科手术操作规程进行无菌剖腹产，取出羊胎和胎盘，按手术常规缝合母羊子宫、腹部肌肉、腹膜和皮肤。

2、冲洗与粉碎：将羊胎及胎盘在无菌室中用无菌水冲洗干净，洗净后称取所述重量份的羊胎和胎盘粉碎成糊状，其余的急冻至零下20℃贮存，使用前解冻后粉碎成糊状。

冲洗和粉碎操作均在10000级净化间中，室温为23～27℃，半小时内完成。

3、加酶水解：先用浓度为20～30％(V/V)的食用盐酸将上述粉碎成糊状的羊胎及胎盘原液调PH值为2.0～4.5，再加入动物胃蛋白酶或胰凝乳蛋白酶，酶的加入量为每克羊胎及胎盘加入3.5～4.5万酶活力单位(U)。加酶过程为先用酶粉重量3～4倍(W∶W)纯净水常温下溶解酶粉后，将其加入糊状的羊胎及胎盘原液中，边加酶边搅拌，在42±5℃温度下水解22～26小时后得到羊胎及胎盘水解液。

4、酶灭活：用浓度为20～30％(W/V)的食用级氢氧化钠将上述水解液中和至PH6.0～7.0，搅拌均匀后，将温度升高至60～65℃，保温25～30分钟，将酶完全灭活。

5、过滤：将上述灭活酶后的水解液粗滤一次，再精滤一次，得到所述羊胎素水提液，将该水提液配料生产或急冻至零下5℃保存，生产前再解冻。

三、鸡血藤和益智仁水提液的制备

称取所述重量份的鸡血藤和益智仁，用纯净水冲洗干净后切碎，加入药物重量4～5倍(W∶W)的纯净水浸泡1～1.5小时后，加热煮沸4～6小时，去渣后过滤，加热浓缩至原液的30～50％，将上述浓缩液粗滤一次，再精滤一次，将滤过的浓缩液置于零下2～4℃沉清，24～48小时后取上清液即得到鸡血藤和益智仁水提液，将该水提液配料生产或置于零下4℃的冷库中保存。

四、调配罐装

在10000级净化间中，先将所述羊胎素水提液倒入配料锅中，加入所述鸡血藤和益智仁水提液，然后加入果糖，加入果糖比(重量份)为：

羊胎及胎盘∶鸡血藤∶益智仁∶果糖=(8～12)∶(2～3)∶(2～3)∶(5～7)

可加焦糖调至棕褐色，最后加纯净水，加入水比(重量份)为：

水∶(羊胎素水提液+鸡血藤和益智仁水提液+果糖)=4～5∶1

边加料边搅拌均匀，制成黑羊胎素补液，并用食用磷酸调所述黑羊胎素补液的PH值为3.5～4.0，分别粗精过滤一次后罐装封口，在60～70℃中温加热25～30分钟，冷却、贴标包装。

根据需要可另加调味剂及调酸剂调味和调色剂调色。

本发明的黑羊胎素补液由于采取无菌、常温、加酶水解的先进工艺，最大限度地保存羊胎及胎盘的有效营养成份和生物物质的活性，具有显著的保健功能，经中国人民解放军监床营养中心进行实验和临床研究，结果表明，本发明的黑羊胎素补液具有明显延缓衰老、抗氧化、提高免疫力和抗疲劳功能，并能减轻癌症病人接受放射治疗时的消化道症状，有效防止白细胞和淋巴细胞下降，以及恶心、呕吐、食欲减退、腹胀、腹泻、腹水等症状发生，具有抗辐射、保护机体免疫力的作用，具体实验结果如下：

(一)、实验研究

1、果蝇延长寿命实验：

选用美国野生型黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)刚羽化的处女蝇作为实验动物。将雌雄果蝇分别放入培养管中，每组180只。实验分为高、中、低三个剂量组，分别含椰风黑羊胎素补液20％、10％和5％，隔天更换培养基一次，在25.0±2.0℃、相对浓度60％～65％的暗箱中培养。本发明的黑羊胎素补液对果蝇寿命的影响见表1。根据实验结果，本发明的黑羊胎素补液在5％浓度时，即可延长果蝇的寿命，有显著性差异(P＜0.05)，在10％和20％浓度时，差异非常明显(P＜0.01)，延长寿命的效果与浓度有关。可以认为，在本实验条件下，本发明的黑羊胎素补液有延长果蝇寿命的效果。

2、抗氧化作用实验：

选用健康成年雄性的昆明种小鼠，单只分别喂养。随机将小鼠分为黑羊胎素补液试验组和对照组，每组12只。试验组分为高、中、低三个剂量组，剂量分别为含本发明黑羊胎素补液50％、20％和10％，按0.1ml/10g体重灌胃给药30天。检测小鼠肝脏和脑组织的单胺氧化酶活性(AO-B)、红细胞超支过氧化酶(SOD)、肝脏脂质过氧化物(LPO)、心肌脂褐质和皮肤羟脯氨酸含量(表2)。

小鼠饮用黑羊胎素补液后，脑组织中单胺氧化酶活性显著地降低，可降低50.0～67.9，对肝脏单胺氧化酶活性影响不明显；肝脏脂质过氧化物降低，高剂量组有显著性差异，心肌脂褐质含量均有所降低，相差非常显著；血红细胞超支过氧化酶活性均显著升高，皮肤羟脯氨酸含量在高、中剂量组均有所增高。结果表明黑羊胎素补液有良好的抗氧化作用，作用的程度与饮用的黑羊胎素补液的浓度有关。

3、免疫功能试验

选用健康成年雄性BALB/C小鼠，单只分笼养。将小鼠随机分为黑羊胎素补液试验组和对照组，每组12只。试验组分为高、中、低三个剂量组，剂量分别为含本发明黑羊胎素补液50％、20％和10％，按0.1ml/10g体重灌胃给药30天。测定巨噬细胞吞噬率、吞噬指数、溶血素和迟发型过敏反应等免疫学指标。黑羊胎素补液对小鼠免疫功能的影响见表3。试验结果表明，黑羊胎素补液可以明显增强对小鼠巨噬细胞吞噬功能的非特异免疫作用、迟发型过敏反应的特异性免疫功能和增加以溶血素为代表的体液免疫功能，对胸腺的增重也有显著的作用，可以认为黑羊胎素补液能有效地提高机体的免疫功能。

4、抗疲劳试验

选用健康成年雄性的昆明种小鼠，单只分笼喂养。随机将小鼠分为黑羊胎素补液试验组和对照组，每组12只。试验组分为高、中、低三个剂量组，剂量分别为含本发明黑羊胎素补液50％、20％和10％，按0.1ml/10g体重灌胃给药30天。试验到第15天时，黑羊胎素补液各试验组的LSH的活性与对照组相比，均有明显升高，增加了10～20％，活性的增高与黑羊胎素补液的浓度有关。表明黑羊胎素补液具有提高机体LDH的活性的作用。黑羊胎素补液各试验组的血乳酸值明显低于对照组试验前的血乳酸水平，饮用黑羊胎素补液28天的小鼠，在停止运动20～50min，血乳酸的恢复速率比对照组提高36％，自身对照提高了36％。饮用黑羊胎素补液14天后的小鼠，与对照组相比，其肌糖原增加了31％，肝糖原含量增加了59％。试验的第29天，饮用黑羊胎素补液的各组小鼠在运动后1.5小时，血尿素增量不仅低于对照组，而且也低于本组试验前的数值。实验研究的结果表明，小鼠在服用黑羊胎素补液一定时间后，乳酸脱氢酶的活性、肌糖原、肝糖原含量均比对照组有显著增加，运动后血乳酸水平及血尿素的含量明显降低，运动后恢复期血乳酸清除速率显著加快。可以认为，黑羊胎素补液可以显著地提高机体对运动负荷的适应能力，并具有十分明显的抗疲劳和加速疲劳的消除作用。

(二)、临床研究

减轻癌症患者放射治疗反应的实验研究，选用在门诊已经确诊为恶性肿瘤的患者共60例，男性36例，女性24例，平均年龄54.3±10.2岁，其中乳腺癌12例、肺癌18例、食管贲门癌19例和恶性淋巴瘤11例，随机分为试验组和对照组。试验组每天口服黑羊胎素补液2次，每次50mL，观察时间为30天。服用含本发明黑羊胎素补液30天后血常规及肝贤功能未见有明显的变化。黑羊胎素补液可明显地降低放疗引起的消化道症状，对白细胞和淋巴细胞无明显影响(见表4)，显示黑羊胎素补液能有效减轻放疗的副作用，使癌症患者能顺利地接受治疗。服用黑羊胎素补液试验组总有效率96.7％(表5)，其中显效率与对照组有显著性差异，可以认为在本实验条件下，黑羊胎素补液确有减轻接受放疗的癌症患者消化道症状的效果，有效地防止白细胞和淋巴细胞下降，以及恶心、呕吐、食欲减退、腹胀、腹泻、腹泻水等临床症状的发生，具有抗辐射、保证机体免疫功能的作用。

(三)、评价

综合以上实验研究和临床观察的结果，可以认为所述黑羊胎素补液对选用的实验具有明显的抗衰老、抗疲劳和提高免疫功能的作用，并能有效地减轻癌症患者在接受放射治疗时引起的消化道不良反应，对患者机体的免疫功能也有保证作用。

实施例：

一、配方

羊胎及胎盘 100kg 鸡血藤 25kg 益智仁 25kg 果糖 60kg

二、操作

1、将怀孕90天的海南岛黑山羊在手术室(10000级净化)全麻后，按外科手术常规操作，去掉下腹部黑毛，用3％碘酒消毒一次，再用75％酒精消毒两次，按外科手术操作规程进行无菌剖腹产，取出羊胎和胎盘，按手术常规缝合母羊子宫、下腹部肌肉、腹膜和皮肤。

2、在室温为25℃的10000级净化间中操作，，将取出的羊胎及胎盘去掉羊水，用无菌水冲洗干净，称重后取100kg羊胎及胎盘粉碎成糊状，剩余的置冷库中零下20℃贮存。用浓度为20％(V/V)食用级盐酸将上述粉碎后的羊胎及胎盘原液调PH值至3.0，酶的加入量为酶活力4万u/mg的胃蛋白酶1000克，先用3kg的纯净水溶解酶粉，然后缓缓加入羊胎及胎盘液中，边加料边搅拌均匀，在40℃温度下水解22小时。

3、用浓度为20％(W/V)的食用级氢氧化钠将上述水解液中和至PH6.5，再在62℃中温加热27分钟，将酶完全灭活。

4、将上述酶灭活后的原液用120目滤布和240目滤布分别过滤一次，将滤得的羊胎素水提液进入配料工序。

5、鸡血藤、益智仁水提液的制备：称取25kg鸡血藤(干品)，25kg益智仁(干品)，用纯净水冲洗干净后切碎，先用药物5倍的纯净水250kg浸泡1.5小时，在提取锅中加热煮沸5小时后，去渣后用120目滤布过滤一次，加热浓缩至80kg，将上述浓缩液分别用120目和240目滤布过滤一次，将滤过的浓缩液放在零下4℃的冷库中沉渣，24小时后取该鸡血藤和益智仁水提液配料。

6、配料：在10000级净化间中，先将所述羊胎素水提液倒入配料锅中，加入鸡血藤和益智仁水提液，然后加入果糖60kg，再加适量焦糖调色，加纯净水1000kg，边加料边搅拌均匀，制成黑羊胎素补液，并用食用磷酸调所述黑羊胎素补液的PH值为3.7，最后分别用250目和360目滤布过滤一次。

7、罐装、灭菌冷却、贴标、包装：将上述配好的黑羊胎素补液罐装在50ML的棕色玻璃瓶中，用防盗铝盖封口，将上述罐装好的产品在65℃中温加热30分钟灭菌后，经过28℃冷却、干燥后贴标、包装得到本发明的黑羊胎素补液。上述操作均在10000级的净化间中进行。

表1黑羊胎素补液对果蝇寿命的影响

组别	性别	数目(只)	最短寿命(天)	平均寿命(天)	半数死亡天数	最长寿命(天)
							20％黑羊胎素补液组	雄	180	19.5	27.74±4.78**	27.1±2.3**	35
	雌	17.5	20.0	28.92+3.82**	27.7±1.8**	35
							10％黑羊胎素补液组	雄	180	14.0	26.41±3.92**	25.2±2.1**	34
	雌	178	14.0	27.51+5.88**	25.8±2.4**	34
							5％黑羊胎素补液组	雄	180	13.0	25.18±3.79*	24.3±3.2*	31
	雌	180	13.0	26/31±3.85*	23.1±2.3*	31
							空白对照组	雄	178	11.5	24.03±3.07	22.8±2.1	29
	雌	176	12.0	25.08+3.27	23.1+3.0	29

^**:p＜0.01,^*:p＜0.05；与对照组相比^*的含义为：比较有显著性差异，^**的含义为：比较有非常显著性差异

表2黑羊胎素补液抗氧化作用的效果

组别	脑MAO-B[ΔA/(mg蛋白h)]	肝MAO-B[ΔA/(mg蛋白h)]	红细胞SOD(单位/mg蛋白)
				50％黑羊胎素补液组	0.09±0.03@	1.48±0.21	348.4±38.1@
20％黑羊胎素补液组	0.12±0.02@	1.53±0.31	329.8±29.7@
				10％黑羊胎素补液组	0.13±0.03@	1.49±0.24	315.7±33.3@
生理盐水对照组	0.28±0.02	1.52±0.23	243.2±41.0
				组别	肝LPO*	心肌脂褐质**	羟脯氨酸(mg/g)
50％黑羊胎素补液组	1.01±0.15#	2.29±0.41@	136.4±21.9@
				20％黑羊胎素补液组	1.14±0.13	2.38±0.38@	131.8±22.4#
10％黑羊胎素补液组	1.18±0.12	2.57±0.37@	129.7±18.8
				生理盐水对照组	1.53±0.21	4.91±0.52	101.5±13.8

^*:10^-10mol/mg蛋白，^**:ug硫酸奎宁/g组织，@:p＜0.01,#:p＜0.05，与对照组相比

	吞噬率(％)	吞噬指数	×10-3/L	(mm)	(mg)
						50％黑羊胎素补液组	23.9±1.5@	0.51±0.04#	398.6±35.9@	0.14±0.08#	40.82±11.41@
20％黑羊胎素补液组	22.3±4.8@	0.48±0.04#	371.2±27.4@	0.12±0 07#	39.43±10.58@
						10％黑羊胎素补液组	22.5±5.7@	0.47±0.06#	358.6±31.7@	0.12±0.08#	38.64±9.87@
生理盐水对照组	4.3±4.3	0.25±0.02	118.9±24.8	0.07±0.02	15.97±5.21

@:p＜0.01,#:p＜0.05，与对照组相比

表4黑羊胎素补液对接受放射治疗癌症患者的影响[例(96)]

组别	例数	白细胞↓	恶心	呕吐	食欲减退	腹胀	腹水	淋巴细胞↓
									试验组	30	1(3.3)*	2(6.7)*	2(6.7)*	3(10.0)	4(13.3)	0(0.0)	1(33)*
对照组	30	18(60.0)	14(46.7)	12(40.0)	22(73.3)	8(26.7)	3(10.0)	14(46.7)

^*：与对照组相比，p＜0.01

表5黑羊胎素补液减轻放疗癌症患者效果

组别	例数	显效[例(96)]	有效[例(96)]	无效[例(96)]	总有效率(％)
						试验组	30	24(80.0)*	6(20.0)	1(3.3)	96.7
对照组	30	10(33.3)	12(40.0)	4(13.3)	86.7

^*：与对照组相比，p＜0.01(原文中未给^*的含义？)

Claims (2)

1、一种黑羊胎素补液，其特征在于所述补液采用海南岛特有黑羊80～100天的胎儿及胎盘制成的水提液，配以中药鸡血藤和益智仁的水提液，再加入果糖和纯净水，其主要原料重量份配比为：

水∶羊胎素水提液+鸡血藤和益智仁水提液+果糖=4～5∶1

所述羊胎素水提液为用8～12重量份的羊胎及胎盘加酶水解制成的水解液，所述鸡血藤和益智仁水提液为用2～3重量份的鸡血藤和用2～3重量份的益智仁制成的水提液，所述果糖为5～7重量份。

2、如权利要求1中所述补液的生产方法，其特征在于所述方法如下：

(1)、其主要原料重量份配比为：

羊胎及胎盘∶鸡血藤∶益智仁=8～12∶2～3∶2～3

(2)、羊胎素水提液制备

①、原料准备：将怀孕80～100天的海南岛特有黑羊在10000级净化手术室中用无菌手术剖腹产取出羊胎和胎盘；

②、冲洗与粉碎：在无菌室中用无菌水冲洗羊胎及胎盘，洗净后称取所述8～12重量份的羊胎及胎盘粉碎成糊状，其余急冻至零下20℃贮存，使用前解冻后粉碎成糊状，冲洗和粉碎操作在10000级净化间中，室温23～27℃，半小时内完成；

③、加蛋白酶水解：先用浓度为20～30％(V/V)的食用盐酸将上述粉碎成糊状的羊胎及胎盘原液调PH值为2.0～4.5，再加入动物胃蛋白酶或胰凝乳蛋白酶，酶的加入量为每克羊胎及胎盘加3.5～4.5万酶活力单位(U)，加酶过程为先用酶粉重量3～4倍(W∶W)纯净水常温下溶解酶粉后，将其加入糊状的羊胎及胎盘原液中，边加酶边搅拌，在42±5℃温度下水解22～26小时后得到羊胎及胎盘水解液；

④、酶灭活：用浓度为20～30％(W/V)的食用级氢氧化钠将上述水解液中和至PH6.0～7.0，搅拌均匀后，将温度升高至60～65℃，保温25～30分钟，将酶完全灭活；

⑤、过滤：将上述灭活酶后的水解液粗滤一次，再精滤一次，得到所述羊胎素水提液，配料生产或急冻至零下5℃保存，生产前再解冻；

(3)、鸡血藤和益智仁水提液的制备

称取所述2～3重量份的鸡血藤和2～3重量份的益智仁，用纯净水冲洗干净后切碎，加入药物重量4～5倍(W∶W)的纯净水浸泡1～1.5小时后，加热煮沸4～6小时，去渣后过滤，加热浓缩至原液的30～50％，将上述浓缩液粗滤一次，再精滤一次，将滤过的浓缩液置于零下2～4℃沉清，24～48小时后取上清液即得到鸡血藤和益智仁水提液；

(4)、调配罐装

在10000级净化间中，先将所述羊胎素水提液倒入配料锅中，加入所述鸡血藤和益智仁水提液，然后加入果糖，果糖重量份加入量为：

羊胎及胎盘∶鸡血藤∶益智仁∶果糖=8～12∶2～3∶2～3∶5～7

最后加纯净水，水的重量份加入量为：

水∶羊胎素水提液+鸡血藤和益智仁水提液+果糖=4～5∶1

边加料边搅拌均匀，制成黑羊胎素补液，并用食用磷酸调所述黑羊胎素补液的PH值为3.5～4.0，分别粗精过滤一次后罐装封口，在60～70℃中温加热25～30分钟，冷却。