CN107281293B - 一种黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法，包括对黑果腺肋花楸果实进行脱脂处理；然后经混合酸水溶液提取；树脂纯化提取浸液，获得黑果腺肋花楸果实的干浸膏。本发明创造性地在提取步骤前使用适当脱脂等预处理方法，并获得尽可能保留花青素的黑果腺肋花楸果实花青素提取物(干浸膏或粉剂)，其中花青素含量大于55％。

Description

一种黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法。
背景技术
黑果腺肋花楸，又名野樱莓，不老莓，是集食用、药用、园林和生态价值于一身的蔷薇科落叶灌木。其果实甜酸略有微涩味，球形，果皮紫黑色，果肉暗红色。黑果腺肋花楸果实富含大量营养物质，如膳食纤维、糖类、蛋白质、多酚类化合物，多酚类化合物是已知植物中含量最高的，多酚类化合物如酚酸、原花青素、花青素、黄酮醇等含量丰富，且与黑果腺肋花楸的生物活性密切相关。花青素和黄酮类化合物具有特殊的保健作用，可保护机体免受自由基损伤，有防癌、护肝等多种作用。因此黑果腺肋花楸果实具有明显的保健作用。
黑果腺肋花楸果实常用于加工果汁饮料、果酒、果酱、果奶、糖果等产品，但由于黑果腺肋花楸果实中含有大量单宁，生食果实味道酸涩，口感不佳，不易被消费者接受，因此，迫切需要寻找一种能够利用黑果腺肋花楸果有效成分，特别是花青素，同时克服黑果腺肋花楸果的不良口感的深加工方法。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)对黑果腺肋花楸果实进行脱脂处理；
2)然后经混合酸水溶液提取；
3)树脂纯化提取浸液，获得黑果腺肋花楸果实的干浸膏。
优选地，本发明所述黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法中，所述步骤1)中黑果腺肋花楸果实的脱脂处理为将黑果腺肋花楸果实自然晾干，使含水量低于7％重量，然后以液料比5：1(体积:质量比)的石油醚(60℃～90℃)回流脱脂，低温干燥，使含水量低于4％重量，得到预处理好的黑果腺肋花楸果实；更优选地，所述石油醚回流脱脂次数为2次，每次30分钟；更优选地，所述低温干燥的温度为低于50℃。
优选地，本发明所述黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法中，所述步骤2)中混合酸为乙酸与苹果酸按质量比1：1混合而成，所述混合酸的pH为2～3；更优选地，所述步骤2)混合酸水溶液提取方法为混合酸与预处理好的黑果腺肋花楸果实按液料比(体积:质量)6：1进行混合，于室温条件下避光浸泡48h，过滤，获得滤液与滤渣。
更优选地，本发明所述黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法中，所述步骤2)中获得的滤渣再以液料比5：1(体积:质量)加入蒸馏水，调pH值至5～6，于避光条件下微波500W处理10min，然后转移至水浴50℃保温2h，再用所述混合酸将体系pH值调至2～3，水浴温度调至60℃提取1h，过滤，将二次滤液合并，滤液减压浓缩至与黑果腺肋花楸果实初始质量的重量体积比为1，得到黑果腺肋花楸果实的提取浸液。
优选地，本发明所述黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法中，所述步骤3)中所述树脂为D-101型大孔吸附树脂，吸附速率为1.0mL/min，乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩得到黑果腺肋花楸果实的清膏，喷雾干燥即得黑果腺肋花楸果实的干浸膏。
更优选地，本发明所述黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法中，所述黑果腺肋花楸果实的干浸膏粉碎后可进一步获得黑果腺肋花楸果实的粉剂。
本发明提供了上述方法获得的黑果腺肋花楸果实花青素提取物——黑果腺肋花楸果实的干浸膏或粉剂，其中，所述黑果腺肋花楸果实的花青素提取物(干浸膏或粉剂)中花青素含量大于55％。
本发明与现有技术相比，本发明具有以下优点：黑果腺肋花楸果实可以作为提取花青素、多酚、黄酮等药物及保健食品原料，但是由于果实中大量单宁等物质，生食果实味道酸涩，口感不佳，不易被消费者接受；本发明创造性地在提取步骤前使用适当脱脂等预处理方法，并获得尽可能保留花青素的黑果腺肋花楸果实花青素提取物(干浸膏或粉剂)，其中花青素含量大于55％。
附图说明
图1为本发明的一个实施例中的吸附流速对吸附率的影响示意图；
图2为本发明的一个实施例中的洗脱流速对解吸率的影响示意图；
图3为本发明的一个实施例中的乙醇体积分数对解吸率的影响示意图；
图4为本发明的一个实施例中的洗脱液用量的考察示意图；
具体实施方式
本发明的实施例中提供了一种黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)对黑果腺肋花楸果实进行脱脂处理；
2)然后经混合酸水溶液提取；
3)树脂纯化提取浸液，获得黑果腺肋花楸果实的干浸膏。
优选地，在本发明的一个实施例中，所述步骤1)中黑果腺肋花楸果实的脱脂处理为将黑果腺肋花楸果实自然晾干，使含水量低于7％重量，然后以液料比5：1(体积:质量比)的石油醚(60℃～90℃)回流脱脂，低温干燥，使含水量低于4％重量，得到预处理好的黑果腺肋花楸果实。
更优选地，在本发明的另一个实施例中，所述石油醚回流脱脂次数为2次，每次30分钟。
更优选地，在本发明的另一个实施例中，所述低温干燥的温度为低于50℃。
优选地，在本发明的一个实施例中，所述步骤2)中混合酸为乙酸与苹果酸按质量比1：1混合而成，所述混合酸的pH为2～3。
更优选地，在本发明的另一个实施例中，所述步骤2)混合酸水溶液提取方法为混合酸与预处理好的黑果腺肋花楸果实按液料比(体积:质量)6：1进行混合，于室温条件下避光浸泡48h，过滤，获得滤液与滤渣。
更优选地，在本发明的另一个实施例中，所述步骤2)中获得的滤渣再以液料比5：1(体积:质量)加入蒸馏水，调pH值至5～6，于避光条件下微波500W处理10min，然后转移至水浴50℃保温2h，再用所述混合酸将体系pH值调至2～3，水浴温度调至60℃提取1h，过滤，将二次滤液合并，滤液减压浓缩至与黑果腺肋花楸果实初始质量的重量体积比为1，得到黑果腺肋花楸果实的提取浸液。
优选地，在本发明的一个实施例中，所述步骤3)中所述树脂为D-101型大孔吸附树脂，吸附速率为1.0mL/min，乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩得到黑果腺肋花楸果实的清膏，喷雾干燥即得黑果腺肋花楸果实的干浸膏。
更优选地，在本发明的另一个实施例中，将得到的黑果腺肋花楸果实的提取浸液，加入乙醇至乙醇体积分数为70％，静置24h，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.18～1.25(60℃)的清膏，加蒸馏水分散成浓度为0.50g/mL(相当于原黑果腺肋花楸果实)的分散液，经过D-101型大孔吸附树脂吸附，吸附速率为1.0mL/min，然后用4倍柱体积的体积分数为50％的乙醇水溶液(用混合酸调pH值为2～3)以2.0mL/min的流速洗脱，收集洗脱液，浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)的清膏，喷雾干燥制成干浸膏，将上述干浸膏粉碎成细粉，即得黑果腺肋花楸果实花青素提取物，其花青素含量为58.48％。
在本发明的另一个优选实施例中，所述提取步骤中，提取溶剂为pH值为2～3的混合酸水溶液；液料比优选为6:1；微波功率优选为500W；微波时间优选为10min；水浴保温时间为2h；水浴提取时间为1h；提取水浴温度优选为60℃。
在本发明的又一个优选实施例中，所述纯化步骤中，上样液质量浓度优选为0.50g/mL(相当于原黑果腺肋花楸果实)；吸附流速优选为1.0mL/min；洗脱液为pH值为2～3的50％乙醇水溶液；洗脱流速优选为2.0mL/min；洗脱液体积优选为4倍柱体积。
在本发明的又一个优选实施例中，所述纯化步骤中，醇沉中的乙醇体积分数优选为70％。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备
1、黑果腺肋花楸果实的预处理：将黑果腺肋花楸果实自然晾干，使含水量低于7％，然后以液料比5：1(体积mL:质量g)的石油醚(60～90℃)回流处理2次，每次30min，主要除去黑果腺肋花楸果实中的脂类、色素等，将脱脂后的黑果腺肋花楸果实在干燥箱中低于50℃进行干燥，使含水量低于4％，得到预处理好的黑果腺肋花楸果实；
2、提取：将预处理好的黑果腺肋花楸果实与混合酸水溶液(混合酸水溶液的pH值为2～3，混合酸为乙酸与苹果酸按质量比1：1混合而成)按液料比(体积mL:质量g)6：1进行混合，于室温条件下避光浸泡48h，过滤，滤液备用，滤渣以液料比6：1(体积mL:质量g)加入蒸馏水(以上述混合酸调至pH值为5～6)，于避光条件下微波500W处理10min，然后转移至水浴50℃保温2h，再用混合酸将体系pH值调至2～3，水浴温度调至60℃提取1h，过滤，将上述二次滤液合并，滤液减压浓缩至相对密度为1.20～1.35(60℃)，得到黑果腺肋花楸果实的提取浸液；
3、纯化：将步骤2中得到的黑果腺肋花楸果实的提取浸液，加入乙醇至乙醇体积分数为70％，静置24h，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.18～1.25(60℃)的清膏，加蒸馏水分散成浓度为0.50g/mL(相当于原黑果腺肋花楸果实)的分散液，经过D-101型大孔吸附树脂吸附，吸附速率为1.0mL/min，然后用4倍柱体积的体积分数为50％的乙醇水溶液(用混合酸调pH值为2～3)以2.0mL/min的流速洗脱，收集洗脱液，浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)的清膏，喷雾干燥制成干浸膏，将上述干浸膏粉碎成细粉，即得黑果腺肋花楸果实花青素提取物，其花青素含量为58.48％。
4、提取溶剂种类对提取效果的影响
提取溶剂设定为pH值为2～3的混合酸水溶液，分别于室温条件下避光浸泡48h，微波功率500W，微波处理10min，50℃保温2h，提取水浴温度60℃，以液料比6:1加入提取溶剂进行提取1h，总花青素提取率为20.52mg/g。
通过多次试验发现提取溶剂为pH值为2～3的混合酸水溶液，微波功率为500W，微波时间为10min，选择液料比(6:1、7:1、8:1)、水浴保温时间(1.5、2.0、2.5h)、水浴提取时间(0.5、1.0、1.5h)、水浴提取温度(55、60、65℃)进行实验。
5、正交试验结果及工艺验证试验：正交试验结果表明，最佳提取条件为A1B2C2D2，即提取溶剂为pH值为2～3的混合酸水溶液，微波功率为500W，微波时间为10min，液料比为6:1，水浴保温时间为2h，水浴提取时间为1h，水浴提取温度为60℃。三次工艺验证试验结果总花青素提取率分别为21.25mg/g、20.18mg/g、21.05mg/g，表明工艺稳定可行。
6、大孔吸附树脂类型的选择：取已预处理好的ADS-17、ADS-F8、LSA-21、LSA-10、AB-8、LX-36、D-101、LSA-33湿树脂各4g，分别加入100mL具塞三角瓶中，各加入上述质量浓度已知的黑果腺肋花楸果供试品溶液60mL。25～30℃摇床震荡吸附2h，静置24h，分别取各树脂吸附后的上清液3mL，置于10mL容量瓶或比色管中，加入0.1M柠檬酸水溶液定容。将上述静态吸附的树脂抽滤至干，放回至原来的具塞三角瓶中，25～30℃条件下各加入100mL80％乙醇解吸，25～30℃摇床震荡吸附2h，静置24h，分别取各解吸液的上清液5mL，置于10mL容量瓶中，加入0.1M柠檬酸水溶液定容。对照空白试管吸取相同量的黑果腺肋花楸果供试品溶液，在定容前加入0.5mL10％Na2SO3溶液。混匀，静置5min后分别于1cm的比色皿中。按照紫外可见分光光度法，在517nm处测定其吸光度值A，根据标准曲线计算出样品中总花青素的含量，计算各树脂对总花青素的吸附率及解吸率，吸附率为96.55％、解吸率为98.78％。结果表明D-101型大孔吸附树脂对黑果腺肋花楸果的纯化效果最理想。
动态吸附曲线的考察：取处理好的树脂30g于树脂柱内，精密吸取黑果腺肋花楸果供试品溶液500m，缓慢上柱，以1.0mL/min的流速进行动态吸附，收集流出液，开始每15mL为1个流份，共8个，从第9个开始每30mL为一个流份，共12个，吸取不同流份过柱液适量，置于10mL容量瓶中，加入0.1M柠檬酸水溶液定容。对照空白试管吸取相同量的黑果腺肋花楸果总花青素溶液，在定容前加0.5mL10％Na2SO3溶液。混匀，静置5min后分别于1cm的比色皿中。按照紫外可见分光光度法，在517nm处测定其吸光度值A，根据标准曲线计算出样品中总花青素的含量。以过柱液体积为横坐标，吸附量为纵坐标作图，即得动态吸附曲线。由试验结果可知，当收集到第10个流份时，流出液中总花青素的质量浓度已大于原黑果腺肋花楸果供试品溶液中总花青素的质量浓度的10％，认为达到了目标物的泄漏点。所以黑果腺肋花楸果供试品溶液的体积与树脂质量的比值(L：kg)为6：1。
吸附流速的考察：如图1所示，取6份处理好的树脂30g，分别加入到树脂柱内，精密吸取6份黑果腺肋花楸果供试品溶液180mL，分别以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL/min的流速进行吸附，吸附完全后，分别收集过柱液，记录体积，分别测定流出液中总花青素含量，计算各流速下的吸附率，吸附率分别为94.34％、92.58％、88.37％、82.14％、74.64％、68.53％。由试验结果可知，吸附流速越慢，吸附率越高。吸附流速越大，吸附率越低，在吸附速率为0.5～1.0mL/min范围内，吸附率较高，且吸附率变化不明显，考虑到吸附流速越慢耗费的时间也就越长，上样过程周期就越长，所以综合考虑将上样液吸附流速确定为1.0mL/min，既保证了上样进度，又能得到较好的吸附率。
洗脱流速的选择：如图2所示，取6份处理好的树脂30g，分别加入到树脂柱内，精密吸取6份黑果腺肋花楸果供试品溶液180mL，以1.0mL/min的流速进行吸附，吸附完全后，然后以50％乙醇水溶液100mL为洗脱剂，分别以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL/min流速洗脱，吸取不同洗脱液适量，置于10mL容量瓶中，加入0.1M柠檬酸水溶液定容。对照空白试管吸取相同量的黑果腺肋花楸果总花青素溶液，在定容前加入0.5mL10％Na2SO3溶液。混匀，静置5min后分别于1cm的比色皿中。按照紫外可见分光光度法，在517nm处测定其吸光度值A，计算解吸率，解吸率分别为97.27％、96.48％、95.15％、93.28％、86.23％、80.58％。实验结果表明洗脱流速在0.5～2.0mL/min范围内时解吸量、解吸率较高，且变化不大，只有当洗脱流速＞2.0mL/min时的解吸量、解吸率才会出现明显下降。所以综合考虑将洗脱液洗脱流速确定为2.0mL/min。
洗脱液乙醇体积分数的选择：如图3所示，取6份处理好的树脂30g，分别加入到树脂柱内，精密吸取6份黑果腺肋花楸果供试品溶液180mL，以1.0mL/min的流速进行吸附，吸附完全后，然后分别以水、10％、30％、50％、70％、90％乙醇100mL为洗脱剂进行洗脱，吸取不同洗脱液适量，置于10mL容量瓶中，加入0.1M柠檬酸水溶液定容。对照空白试管吸取相同量的黑果腺肋花楸果总花青素溶液，在定容前加入0.5mL10％Na2SO3溶液。混匀，静置5min后分别于1cm的比色皿中。按照紫外可见分光光度法，在517nm处测定其吸光度值A，计算解吸率，解吸率分别为37.46％、45.57％、70.39％、97.08％、86.23％、74.47％。结果表明随着乙醇体积分数的增加，解吸率呈现先逐渐升高而后下降的趋势，当乙醇体积分数为50％时，解吸率最大，选用50％乙醇水溶液作为洗脱液。
洗脱液pH值的选择：取6份处理好的树脂30g，分别加入到树脂柱内，精密吸取6份黑果腺肋花楸果供试品溶液180mL，以1.0mL/min的流速进行吸附，吸附完全后，然后将50％乙醇水溶液用混合酸分别调pH值为1～2、2～3、3～4、4～5、5～6、6～7，以2.0mL/min流速洗脱，吸取不同洗脱液适量，置于10mL容量瓶中，加入0.1M柠檬酸水溶液定容。对照空白试管吸取相同量的黑果腺肋花楸果总花青素溶液，在定容前加入0.5mL10％Na2SO3溶液。混匀，静置5min后分别于1cm的比色皿中。按照紫外可见分光光度法，在517nm处测定其吸光度值A，计算解吸率，解吸率分别为80.85％、97.11％、92.31％、88.24％、84.62％、82.53％。实验结果表明洗脱液pH值在2～3范围内解吸率较高。
洗脱液用量的考察：如图4所示，取6份处理好的树脂30g，分别加入到树脂柱内，精密吸取6份黑果腺肋花楸果供试品溶液180mL，以1.0mL/min的流速进行吸附，吸附完全后，然后用pH值为2～3的50％乙醇水溶液以2.0mL/min流速洗脱，按每个15mL收集洗脱液，共收集20个流份，吸取不同流份洗脱液适量，置于10mL容量瓶中，加入0.1M柠檬酸水溶液定容。对照空白试管吸取相同量的黑果腺肋花楸果总花青素溶液，在定容前加入0.5mL10％Na2SO3溶液，混匀，静置5min后分别于1cm的比色皿中。按照紫外可见分光光度法，在517nm处测定其吸光度值A，计算不同流份洗脱液中总花青素的质量浓度，质量浓度分别为0.59mg/mL、2.28mg/mL、1.54mg/mL、0.72mg/mL、0.22mg/mL、0.067mg/mL、0.044mg/mL、0.015mg/mL、0.013mg/mL、0.013mg/mL、0.014mg/mL、0.011mg/mL、0.010mg/mL、0.011mg/mL、0.09mg/mL、0.09mg/mL、0.011mg/mL、0.09mg/mL、0.08mg/mL、0.09mg/mL。试验结果表明第8个流份以后洗脱液中总花青素质量浓度基本不变，故用120mL(约相当于树脂柱体积的4倍)50％乙醇水溶液(pH值为2～3)即可将总花青素基本洗脱完全。即洗脱液体积与树脂质量之比(L：kg)为4：1。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种黑果腺肋花楸果实花青素提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)对黑果腺肋花楸果实进行脱脂处理；
2)然后经混合酸水溶液提取；
3)树脂纯化提取浸液，获得黑果腺肋花楸果实的干浸膏；
所述步骤1)中黑果腺肋花楸果实的脱脂处理为将黑果腺肋花楸果实自然晾干，使含水量低于7％重量，然后以液料比5：1的石油醚回流脱脂，低温干燥，使含水量低于4％重量，得到预处理好的黑果腺肋花楸果实；所述料液比是指体积ml：质量g；所述回流的温度为60℃～90℃；
所述步骤2)中混合酸为乙酸与苹果酸按质量比1：1混合而成，所述混合酸的pH为2～3；
所述步骤2)混合酸水溶液提取方法为混合酸与预处理好的黑果腺肋花楸果实按液料比6：1进行混合，于室温条件下避光浸泡48h，过滤，获得滤液与滤渣；所述料液比是指体积ml：质量g；
所述步骤2)中的滤渣再以液料比5：1加入蒸馏水，调pH值至5～6，于避光条件下微波500W处理10min，然后转移至水浴 50℃保温2h，再用所述混合酸将体系pH值调至2～3，水浴温度调至60℃提取1h，过滤，将二次滤液合并，滤液减压浓缩，得到黑果腺肋花楸果实的提取浸液；所述料液比是指体积ml：质量g。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述石油醚回流脱脂次数为2次，每次30min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述低温干燥的温度为低于50℃。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中所述树脂为D-101型大孔吸附树脂，吸附速率为1.0mL/min，乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩得到黑果腺肋花楸果实的清膏，喷雾干燥即得黑果腺肋花楸果实的干浸膏。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果实的干浸膏粉碎后进一步获得黑果腺肋花楸果实的粉剂。
6.根据权利要求1～5任意一项所述的方法获得的黑果腺肋花楸果实花青素提取物，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果实的花青素提取物中花青素含量大于55％。
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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The influence of interactions among phenolic compounds on the antiradical activity of chokeberries (Aronia melanocarpa);LIDIJA JAKOBEK等;《International Journal of Food Sciences and Nutrition》;20110630;第62卷(第4期);第345-352页 *
蓝莓花青素的提取及分离研究进展;徐青等;《食品与生物技术学报》;20161231;第35卷(第9期);第897-902页，尤其是第898页左栏第2段，第899页左栏第1段和右栏第3段 *
黑果腺肋花楸花青素的提取工艺及其稳定性;刘芳芳等;《延边大学农学学报》;20150930;第37卷(第3期);第196-201页，尤其是第199页左栏第1段和右栏第1段 *

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