CN107200726A - 吡咯烷‑酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及吡咯烷‑酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。具体而言，本发明涉及一种通式(I)所示的吡咯烷‑酰胺类衍生物、其制备方法及含有该衍生物的药物组合物以及其作为治疗剂，特别是作为XIa因子抑制剂的用途和在制备治疗和/或预防血栓栓塞等疾病的药物中的用途，其中通式(I)中的各取代基的定义与说明书中的定义相同。

Description

吡咯烷-酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

技术领域

本发明涉及一类新的吡咯烷-酰胺类衍生物、其制备方法及含有该衍生物的药物组合物以及其作为治疗剂，特别是作为XIa因子抑制剂的用途和在制备治疗和/或预防血栓栓塞等疾病的药物中的用途。

背景技术

全球每年脑血管、脑梗塞、心肌梗塞、冠心病、动脉硬化等心脑血管疾病夺走近1200万人的生命，接近世界总死亡人数的1/4，成为人类健康的头号大敌。中国每年死于心血管疾病的人数达到260万人以上，存活的患者75％致残，其中40％以上重残。由心脑血管疾病和糖尿病及其并发症引起的血栓问题，成为当今要解决的刻不容缓的问题。

据独立市场分析机构Datamonitor 2011年数据预计，随着仿制药的生产，心血管及代谢疾病在七大主要市场的份额将在2011年达到顶峰，之后逐渐降低，其销售额将从2010年的1090亿美元将至2019年的1010亿美元。其中血栓市场保持基本稳定，由2010年的195亿美元微降至2019年的189亿美元(Datamonitor:HC00034-001、HC00139-001)。广州标点2011年的调研报告也显示，2011年中国抗血栓药物市场规模可达81.35亿元，同比增长20.52％，具有巨大的市场潜力(抗血栓药物市场研究报告：广州标点(2011))。

人体凝血系统包含两个过程：内源性途径(intrinsic pathway)及外源性途径(extrinsic pathway)及一个共同途径(Annu.Rev.Med.2011.62:41–57)。外源性途径也称为组织因子途径，作为外源途径，在损伤和各种外来刺激下，组织因子和被激活的因子VIIa(FVIIa)组成的复合物激活因子X(FX)，形成因子Xa(FXa)，激活的FXa可以将凝血酶原(prothrombin,PT)转化为凝血酶(thrombin)，凝血酶作为凝血过程的中心催化酶，催化纤维蛋白酶原形成纤维蛋白，起到凝血作用。该过程参与的酶数量少，见效快。内源性途径属于机体固有途径，参与凝血的因子全部来自血液，通过级联反应激活因子XII(FXII)、因子XI(FXI)、因子IX(FIX)，进而激活FXa将下游的凝血酶原(PT)转化为凝血酶，凝血酶又可以反过来激活FXI。该过程参与的酶数量多，见效较慢(Arterioscler Thromb VascBiol.2010；30:388-392)。

在整个凝血过程中，FXI和FXIa扮演着极其重要的角色，其作为外源性和内源性凝血途径的共同调节因子，其拮抗剂被广泛开发用于各种血栓的治疗。现有多种FXa拮抗剂上市，以其显著有效性占据广大心脑血管市场，然而其副作用也越来越显著，其中“出血风险(bleeding risk)”是首当其冲最为严峻的问题(N Engl J Med 1991；325:153-8、Blood.2003；101:4783-4788)。

为解决这个问题，近期靶点FXIa成为各大公司及研究机构的研究热门。有研究发现严重的FXI不足会引起血友病C，该病症多发生在犹太人身上(1:450)。血友病C的症状比血友病A和B更为温和，少许发生自发性出血，即使在受伤或手术中机体的止血功能也不受影响，血友病C患者可以正常怀孕分娩(Arterioscler Thromb Vasc Biol.2010；30:388-392)。因此FXIa安全性显著优于FXa。研究发现，在血栓模型中，抑制FXIa因子可以有效抑制血栓的形成，但在更为严重的血栓情况下，FXIa的作用微乎其微(Blood.2010；116(19):3981-3989)。临床统计显示，提高FXIa的量会增加VTE的患病率(Blood 2009；114:2878-2883)，而FXIa严重不足者其患有DVT的风险性减少(Thromb Haemost 2011；105:269–273)。

FXIa作为新兴靶点，尚未公布其进入临床阶段的药物，但Bristol-Myers Squibb的BMS-654457及BMS-262084有可能已展开临床研究，其临床结果尚未公开。临床前研究结果显示，在直流电刺激诱导的实验兔动脉血栓模型中，BMS-654457显示了显著的剂量依赖性的潜在有效性，同时无出血副作用存在(22nd Int Symp Med Chem(Sept 2-6,Berlin)2012,Abst L63)。而BMS-262084的药代数据显示了该化合物作为FXIa抑制剂显著改善实验模型血栓症状，同时其副作用极其微小(J Thromb Thrombolysis(2011)32:129–137)。

专利申请WO9630396、WO9941276、WO2013093484、WO2004002405、WO2013056060和US20050171148公开了具有因子XIa抑制活性的化合物。本发明设计了新的化合物小分子FXIa拮抗剂，具有更高的活性，并表现出优异的效果和作用。可用于有效治疗心脑血管疾病及血栓症状。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中：

为单键或双键；

M选自有机酸和无机酸，优选三氟乙酸；

X和Y相同或不同，且各自独立地选自CH、S、O和N；

环A选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷中的一个或多个取代基所取代；

环B选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷中的一个或多个取代基所取代；

R¹选自环烷基、杂环基、芳基和芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷中的一个或多个取代基所取代；

R²相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、脒基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、脒基、胍基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

或R¹和R²连接在一起，形成一个3-8元的环，所述的环选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷中的一个或多个取代基所取代；

R³选自氢原子、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、脒基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、脒基、胍基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁸、-C(O)R⁸、-C(O)OR⁸、-S(O)_mR⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)NR⁹R¹⁰、-C(O)NHR⁹、-NR⁹C(O)R¹⁰和-NR⁹S(O)_mR¹⁰中的一个或多个取代基所取代；

R⁴选自氢原子、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、脒基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、脒基、胍基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁸、-C(O)R⁸、-C(O)OR⁸、-S(O)_mR⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)NR⁹R¹⁰、-C(O)NHR⁹、-NR⁹C(O)R¹⁰和-NR⁹S(O)_mR¹⁰中的一个或多个取代基所取代；

R⁵选自氢原子、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、羧酸酯基、羟烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

R⁶和R⁷相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基、羟基、氨基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自烷基、卤素、羟基、羧酸酯基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

R⁸选自氢原子、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、羧酸酯基、羟烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

R⁹和R¹⁰相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基、羟基、氨基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自烷基、卤素、羟基、羧酸酯基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

m为0、1或2；

x为0、1、2、3或4；

y为0或1；

q为0、1、2、3、4或5；

p为0、1、2、3、4或5；且

n为0、1、2、3或4。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物为通式(I-A)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

环A、环B、M、X、Y、x、n、y、p、q和R¹～R⁴如通式(I)中所定义。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物为通式(I-B)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

环A、环B、M、x、n、p、q和R¹～R⁴如通式(I)中所定义。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物为通式(II)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

环A、环B、M、x、n、p、q和R²～R⁴如通式(I)中所定义。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其中A环为

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(III)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

R^a选自氢原子、烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

或者R⁴和R^a一起形成5～8元杂环，其中所述的杂环选自单杂环、螺杂环、桥杂环和稠杂环。

环B、M、x、n、q和R²～R⁴如通式(I)中所定义。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物为通式(IV)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

M、x、n、q、R²～R⁴和R^a如通式(III)中所定义。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物为通式(V)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

n为1、2、3或4；

M、x、q、R²～R⁴和R^a如通式(III)中所定义。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)～通式(V)所示的化合物，其中R²选自烷基、氨基、卤素、脒基和胍基，其中所述的烷基任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)～通式(V)所示的化合物，其中R³为氢原子。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)～通式(V)所示的化合物，其中n为1或2。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)～通式(V)所示的化合物，其中R⁴为-C(O)OR⁵，R⁵为氢原子。

通式(I)的典型化合物，包括但不限于：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐。

在本发明一个优选的实施方案中，一种通式(VI)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中：

n为1、2、3或4；

M、q、R²～R⁴和R^a如通式(III)中所定义。

本发明还涉及一种制备所述的通式(V)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐的方法，该方法包括：

通式(VI)化合物在酸性条件下脱保护进行，得到通式(V)化合物；

其中：

n为1、2、3或4；

M、x、q、R²～R⁴和R^a如通式(V)中所定义。

本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐以及药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂。

本发明的另一方面涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病中的用途，所述疾病优选为血栓栓塞性疾病，更优选为心肌梗塞、心绞痛、血管成型术或主动脉冠状动脉分流术后的再阻塞和再狭窄、中风、短暂的局部缺血发作、周围动脉闭塞性疾病、肺栓塞或深部静脉血栓形成。

本发明的另一方面涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物在制备预防和/或治疗通过抑制因子XIa正性影响的疾病的药物中的用途；在制备治疗弥散性血管内凝血的药物中的用途；以及在制备抑制因子XIa的药物中的用途。

本发明的另一方面涉及一种调控因子XIa活性，优选抑制因子XIa活性的方法，该方法包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物。

本发明的另一方面涉及一种治疗和/或预防心脑血管疾病的方法，该方法包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物。其中所述的疾病优选为血栓栓塞性疾病，更优选心肌梗塞、心绞痛、血管成型术或主动脉冠状动脉分流术后的再阻塞和再狭窄、中风、短暂的局部缺血发作、周围动脉闭塞性疾病、肺栓塞或深部静脉血栓形成。

本发明的另一方面涉及一种预防和/或治疗通过抑制因子XIa正性影响的疾病的方法，该方法包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物。

本发明的另一方面涉及一种治疗弥散性血管内凝血疾病的方法，该方法包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物。

本发明进一步涉及一种用作药物的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用盐。

本发明另一方面涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物，其用于预防和/或治疗心脑血管疾病，优选血栓栓塞性疾病，更优选心肌梗塞、心绞痛、血管成型术或主动脉冠状动脉分流术后的再阻塞和再狭窄、中风、短暂的局部缺血发作、周围动脉闭塞性疾病、肺栓塞或深部静脉血栓形成。

本发明另一方面涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物，其用于预防和/或治疗通过抑制因子XIa正性影响的疾病；用于治疗弥散性血管内凝血；以及用于抑制因子XIa活性。

含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯胶；和润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。例如，可使用水溶性味道掩蔽物质，例如羟丙基甲基纤维素或羟丙基纤维素，或延长时间物质例如乙基纤维素、醋酸丁酸纤维素。

也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合的硬明胶胶囊，或其中活性成分与水溶性载体例如聚乙二醇或油溶媒例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合的软明胶胶囊提供口服制剂。

水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂，例如羧基甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂可以是天然产生的磷脂例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七碳亚乙基氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的缩合产物，例如聚环氧乙烷山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物，例如聚环氧乙烷脱水山梨醇单油酸酯。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂例如尼泊金乙酯或尼泊金正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或阿司帕坦。

油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油，或矿物油例如液体石蜡中配制而成。油悬浮液可含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂例如丁羟茴醚或α-生育酚保存这些组合物。

通过加入水可使适用于制备水混悬也的可分散粉末和颗粒提供活性成分和用于混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂可说明上述的例子。也可加入其他赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸保存这些组合物。

本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油例如橄榄油或花生油，或矿物油例如液体石蜡或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，例如大豆卵磷脂和由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯例如山梨坦单油酸酯，和所述偏酯和环氧乙烷的缩合产物，例如聚环氧乙烷山梨醇单油酸酯。乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。可用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖配制糖浆和酏剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。

本发明的药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳。例如将活性成分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后将油溶液加入水和甘油的混合物中处理形成微乳。可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本发明化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。这种装置的实例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型静脉注射泵。

本发明的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液，例如1,3-丁二醇中制备的溶液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用包括合成甘油单或二酯在内的任何调和固定油。此外，脂肪酸例如油酸也可以制备注射剂。

可按用于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。此类物质包括可可脂、甘油明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。

如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行被、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物(I)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。

发明的详细说明

除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子的烷基，更优选含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。

术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至8个碳原子，最优选包含5至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等，优选环烷基；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。

术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：

术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：

术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：

所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等；优选苯基并环戊基、四氢萘基。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。

术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；最优选包含3至8个环原子，其中1～3个是杂原子；最优选包含5至6个环原子，其中1～2或1～3个是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等，优选四氢吡喃基、哌啶基、吡咯烷基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。

术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：

术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：

术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：

所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：

杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。

术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至20元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，更优选5至6元，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：

优选

芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。

术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至20个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，含1至3个杂原子；更优选为5元或6元，含1至2个杂原子；优选例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：

优选

杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。

术语“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。

术语“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。

术语“羟基”指-OH基团。

术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。

术语“氨基”指-NH₂。

术语“氰基”指-CN。

术语“硝基”指-NO₂。

术语“羧基”指-C(O)OH。

术语“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(环烷基)，其中烷基、环烷基如上所定义。

术语“酰卤”指含有-C(O)-卤素的基团的化合物。

“X选自A、B、或C”、“X选自A、B和C”、“X为A、B或C”、“X为A、B和C”等不同用语均表达了相同的意义，即表示X可以是A、B、C中任意一种或几种。

“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。

“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。

本发明化合物的合成方法

为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

本发明通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐制备方法，包括以下步骤：

方案一

通式(I-a)化合物和通式(I-b)化合物在碱性条件下发生缩合反应，得到通式(I)化合物，该条件下的碱性试剂优选N,N-二异丙基乙胺，缩合试剂优选2-(7-偶氮苯唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述的有机碱类包括但不限于三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钾、叔丁醇钠或叔丁醇钾，所述的无机碱类包括但不限于氢化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠和氢氧化锂。

缩合剂包括但不限于1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷。

其中：

环A、环B、M、X、Y、x、y、n、q、p和R¹～R⁴如通式(I)中所定义。

方案二

通式(II-1)化合物在低温酸性条件下与N-碘代丁二酰亚胺发生反应，得到通式(II-2)化合物；得到的通式(II-2)化合物与卤代烷基在碱性条件下反应生成通式(II-3)化合物，该条件下碱性试剂优选碳酸钾；得到的通式(II-3)化合物在加热条件下与N-溴代琥珀酰亚胺和偶氮二异丁腈反应得到通式(II-4)化合物；得到的通式(II-4)化合物在氨甲醇溶液里与二碳酸二叔丁酯在碱性条件下反应，得到通式(II-5)化合物，该条件下碱性试剂优选碳酸钠；得到的通式(II-5)化合物在碱性条件下与环丙基硼酸发生偶联反应，得到通式(II-6)化合物，该条件下的碱性试剂优选碳酸钠，催化剂优选1,1'-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯；得到的通式(II-6)化合物在碱性条件下发生水解反应，得到通式(II-7)化合物，该条件下的碱性试剂优选氢氧化钠；得到的通式(II-7)和通式(II-8)在碱性条件发生缩合反应，得到通式(VI)化合物，该条件下的碱性试剂优选N,N-二异丙基乙胺，缩合剂优选2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；得到的通式(VI)化合物进一步在碱性条件下脱保护，得到通式(V)化合物，该条件下的碱性试剂优选氢氧化钠。

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述的有机碱类包括但不限于三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钾、叔丁醇钠或叔丁醇钾，所述的无机碱类包括但不限于氢化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠和氢氧化锂。

提供酸性的条件包括但不限于三氟乙酸、甲酸、乙酸、盐酸、硫酸和甲磺酸。

催化剂包括但不限于钯/碳、雷尼镍、四-三苯基膦钯、二氯化钯、醋酸钯、1,1’-双(二苄基磷)二氯二戊铁钯或三(二亚苄基丙酮)二钯。

缩合剂包括但不限于1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷。

所用溶剂包括但不限于：醋酸、甲醇、乙醇、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、水或N,N-二甲基甲酰胺。

其中：

R^x选自烷基或环烷基，其中所述的烷基和环烷基任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

M、x、n、q、R^a和R²～R⁴如通式(V)中所定义。

本发明所涉及的各通式化合物，如在合成过程中得到化合物盐的形式，可进一步采用常规的实验手段得到游离态化合物；如在合成过程中得到游离态化合物形式，可进一步采用常规实验手段得到化合物的盐。

具体实施方式

以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。

实施例

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)，氘代氯仿(CDCl₃)，氘代甲醇(CD₃OD),内标为四甲基硅烷(TMS)。

MS的测定用FINNIGAN LCQAd(ESI)质谱仪(生产商:Thermo,型号：Finnigan LCQadvantage MAX)。

HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。

手性HPLC分析测定使用LC-10A vp(Shimadzu)或者SFC-analytical(BergerInstruments Inc.)；

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。

柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。

手性制备柱层析使用Prep Star SD-1(Varian Instruments Inc.)或SFC-multigram(Berger Instruments Inc.)

激酶平均抑制率及IC₅₀值的测定用NovoStar酶标仪(德国BMG公司)。

本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶远化学科技(AccelaChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。

实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。

氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。

加压氢化反应使用Parr 3916EKX型氢化仪和清蓝QL-500型氢气发生器或HC2-SS型氢化仪。

氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。

微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。

实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。

实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂的体系有：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，C：石油醚和乙酸乙酯体系，D：丙酮，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。

纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，C：二氯甲烷和丙酮体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。

实施例1

5-((2S,3S)-1-(4-(氨甲基)-2-氯-5-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸三氟乙酸盐1

第一步

5-溴-2-氯-4-甲基苯甲酸1b

将溴(7.5mL，132.3mmol)加入反应瓶中，冰浴条件下加入铁粉(739mg，13.2mmol)，搅拌均匀后缓慢加入2-氯-4甲基苯甲酸1a(1.5g，8.8mmol)，升至室温反应2小时。将反应液倒入冰水浴冷却下的硫代硫酸钠饱和溶液150mL中，再用乙酸乙酯萃取(200mL)，有机相分别用水(50mL)，饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，向所得残余物中加入100mL乙酸乙酯，搅拌均匀，过滤去除不溶物，将滤液减压浓缩后得到粗品标题产物1b(2.09g，淡黄色固体)。产品不经纯化直接进行下一步反应。

第二步

5-溴-2-氯-4-甲基苯甲酸甲酯1c

将粗品1b(2.09g，8.0mmol)溶于30mL甲醇中，加入2mL浓硫酸，70℃回流反应12小时。反应液冷却至室温，减压浓缩去除反应液中的甲醇，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物1c(1.67g，无色油状液体)，产率：80％。

第三步

5-溴-4-(溴甲基)-2-氯苯甲酸甲酯1d

将1c(1.67g，6.34mmol)溶于30mL四氯化碳中，再加入N-溴代琥珀酰亚胺(1.13g，6.34mmol)和偶氮二异丁腈(153mg，0.634mmol)，加热至回流反应2小时。向反应液中加入50mL二氯甲烷，有机相分别用水(50mL)，饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物1d(713mg，无色油状物)，产率：32.9％。

第四步

4-(叠氮甲基)-5-溴-2氯苯甲酸甲酯1e

将1d(713mg，2.08mmol)溶于10mL N,N-二甲基甲酰胺中，冰水浴冷却下缓慢加入叠氮化钠(149mg，2.29mmol)，室温反应2小时。向反应液中加入50mL水，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，用水(50mL)，饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物1e(480mg，白色固体)，产率：76.3％。

第五步

4-(氨甲基)-5-溴-2-氯苯甲酸甲酯1f

将1e(470mg,1.54mmol)溶于6mL四氢呋喃中，再加入三苯基膦(484mg，1.85mmol)和1.2mL水，升温至40-45℃反应12小时。滴加1M盐酸至反应液pH为3-4，乙酸乙酯萃取(50mL×2)，水相中滴加1M氢氧化钠溶液至pH为10，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后得到粗品标题产物1f(290mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。

第六步

5-溴-4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-氯苯甲酸甲酯1g

将粗品1f(290mg，1.04mmol)溶于10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(210mg，2.08mmol)，再加入二碳酸二叔丁酯(250mg，1.2mmol)，室温反应2-3小时。加入二氯甲烷(50mL)，有机相分别用饱和氯化铵溶液(50mL×2)，饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物1g(217mg，无色油状液体)，产率：57％。

第七步

4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-氯-5-环丙基苯甲酸甲酯1h

将1g(217mg，0.574mmol)，环丙基硼酸(98.6mg，1.148mmol)，碳酸钠(182.5mg，1.722mmol)溶于6.5mL甲苯、甲醇和水的混合溶剂中(V:V:V＝4:1.5:1)，加入[1,1'-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯(41.9mg，0.0574mmol)，升温至80℃反应16小时。加入50mL水，乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并有机相，用水(50mL)，饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物1h(100mg，无色油状液体)，产率：51.4％。

第八步

4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-氯-5-环丙基苯甲酸1i

将1h(100mg，0.29mmol)溶于4mL甲醇中，滴加入1M氢氧化钠溶液(1.76mL，1.76mmol)，45℃反应1-2小时。低温条件下减压浓缩除去甲醇，再加入少量水，水相中滴加1M盐酸至pH为4-5，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后的到粗品标题产物1i(88mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。

第九步

5-((2S,3S)-1-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-氯-5-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯1j

将粗品1i(85mg，0.26mmol)，5-((2S,3S)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯三氟醋酸盐(129mg，0.26mmol，采用公知的方法“Organic Letters,2009,11(18),4056-4059”制备而得)溶于6mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(148mg，0.4mmol)，N,N-二异丙基乙胺(67mg，0.52mmol)，搅拌反应16小时。加入50mL水，水相用乙酸乙酯萃取(50mL×4)，合并有机相，用水(50mL×4)，饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残余物，得到标题产物1j(180mg，无色油状液体)，产率：100％。

第十步

5-((2S,3S)-1-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-氯-5-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸1k

将1j(180mg，0.26mmol)溶于5mL四氢呋喃、甲醇和水的混合溶剂中(V:V:V＝3:1:1)，加入氢氧化钠(62.4mg，1.56mmol)，45℃搅拌反应2小时。低温条件下减压蒸除有机溶剂，加入少量水至溶解，滴加1M盐酸至pH为4-5，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后的到粗品标题产物1k(130mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。

第十一步

5-((2S,3S)-1-(4-(氨甲基)-2-氯-5-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸三氟乙酸盐1

将粗品1k(130mg，0.196mmol)溶于5mL二氯甲烷中，加入0.8mL三氟醋酸，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残余物，得标题产物1(30mg，白色固体)，产率：27.2％。

MS m/z(ESI):563.4[M+1]

¹H NMR(400MHZ,DMSO-d₆)δ10.19(s,1H),7.99(s,1H),7.53(s,1H),7.40-7.37(m,1H),7.33-7.31(dd,1H),7.06(s,1H),7.04-7.03(m,1H),4.73-4.71(d,1H),4.24(s,2H),3.27-3.23(m,1H),3.18-3.11(m,1H),2.12-2.06(m,2H),2.01-1.94(m,4H),1.62-1.60(m,3H),1.52-1.49(m,1H),1.25-1.15(m,1H),1.10-1.05(m,3H),1.00-0.90(m,4H),0.70-0.60(m,2H)。

实施例2

5-((2S,3S)-1-(4-(氨甲基)-3-氯-5-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸三氟乙酸盐2

第一步

3-氯-5-碘-4-甲基苯甲酸2b

将3-氯-4-甲基苯甲酸2a(850mg，5mmol)溶于8mL浓硫酸中，分批缓慢加入N-碘代丁二酰亚胺(1.24g，5.5mmol)，搅拌反应1小时。将反应液倒入100mL冰水中，过滤，滤饼用正己烷(10mL×4)洗涤，收集滤饼得到标题产物2b(1.38g，白色固体)，产率：93％。

第二步

3-氯-5-碘-4甲基苯甲酸甲酯2c

将2b(1.37g，4.62mmol)溶于15mL N,N-二甲基甲酰胺中，依次加入碳酸钾(956mg，6.93mmol)，碘甲烷(984mg，6.93mmol)，搅拌反应12小时。将反应液倒入20mL冰水中，滴加3M盐酸至pH为3-4，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL×4)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物2c(1.36g，白色固体)，产率：95％。

第三步

4-(溴甲基)-3-氯-5-碘苯甲酸甲酯2d

将2c(1.35g，4.34mmol)溶于15mL四氯化碳中，加入N-溴代琥珀酰亚胺(968mg，4.34mmol)和偶氮二异丁腈(143mg，0.868mmol)，回流反应20小时。减压浓缩用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物2d(600mg，白色固体)，产率：35％。

第四步

4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-氯-5-碘苯甲酸甲酯2e

将2d(100mg，0.257mmol)溶于氨甲醇溶液(7M，2mL)中，搅拌反应3小时。减压浓缩得到残余物溶于6mL的甲醇和水的混合溶剂中(V:V＝1:1)，加入碳酸钠(33mg，0.308mmol)，二碳酸二叔丁酯(64mg，0.308mmol)，搅拌反应2小时。加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(15mL×2)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物2e(75mg，白色固体)，产率：68％。

第五步

4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-氯-5-环丙基苯甲酸甲酯2f

将2e(180mg，0.423mmol)，环丙基硼酸(73mg，0.846mmol)溶于13mL甲苯、甲醇和水的混合溶剂中(V:V:V＝8:3:2)，加入碳酸钠(135mg，1.27mmol)和[1,1'-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯(31mg，0.042mmol)，升温至90℃搅拌反应12小时。将反应液倒入10mL水中，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物2f(135mg，无色液体)，产率：93％。

第六步

4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-氯-5-环丙基苯甲酸2g

将2f(130mg，0.383mmol)溶于5mL甲醇中，加入1M氢氧化钠溶液(2mL，1.91mmol)，45℃搅拌反应1.5小时。加入10mL水，滴加1M盐酸至pH为3-4，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后得到粗品标题产物2g(108mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。

第七步

5-((2S,3S)-1-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-氯-5-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯2h

将粗品2g(108mg，0.331mmol)，5-((2S,3S)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯三氟醋酸盐(165mg，0.331mmol，采用专利申请“EP2876105”公开的方法制备而得)溶于6mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(189mg，0.496mmol)，N,N-二异丙基乙胺(120mg，0.927mmol)，25℃搅拌反应6小时。加入20mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化得粗品180mg，进一步用薄层色谱法以展开剂体系A纯化得到标题产物2h(122mg，白色固体)，产率：53％。

第八步

5-((2S,3S)-1-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-氯-5-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸2i

将2h(122mg，0.176mmol)溶于7mL甲醇中，加入1M氢氧化钠溶液(2.2mL，2.2mmol)，升至45℃搅拌反应2小时。加入10mL水，滴加1M盐酸至pH为4-5，乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后得到粗品标题产物2i(117mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。

第九步

5-((2S,3S)-1-(4-(氨基甲基)-3-氯-5-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸三氟乙酸盐2

将粗品2i(117mg，0.176mmol)溶于5mL二氯甲烷中，加入0.5mL三氟醋酸，搅拌反应2小时。减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残余物，得标题产物2(55mg，白色固体)，产率：46％。

MS m/z(ESI):563.4[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.72(s,1H),10.15(s,0.75H),9.52(s,0.25H),7.98(s,0.76H),7.76(s,0.25H),7.49(s,0.76H),7.41-7.39(m,0.77H),7.36-7.30(m,1.27H),7.15(s,0.76H),7.11-7.07(m,1.22H),6.86(s,0.26H),4.66(d,0.81H),4.36-4.29(m,2H),4.17(d,0.28H),3.52-3.37(m,2H),2.18-2.12(m,2.5H),1.97-1.90(m,2.5H),1.62-1.51(m,4H),1.20-0.79(m,8H),0.75-0.66(m,2H)。

实施例3

(2S,3S)-1-(4-(氨基甲基)-3-环丙基苯甲酰基)-3-环己基-N-(1'-氧-1'H-螺[环丁烷-1,3'-噁唑并[3,4-a]吲哚]-7'-基)吡咯烷-2-甲酰胺三氟乙酸盐3

第一步

(2S,3S)-叔丁基-3-环己基-2-((1'-氧-1'H-螺[环丁烷-1,3'-噁唑并[3,4-a]吲哚]-7'-基)氨甲酰)吡咯烷-1-羧酸酯3b

将5-((2S,3S)-1-(叔丁氧羰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸3a(180mg，0.395mmol，采用专利申请“EP2876105”公开的方法制备而得)溶于12mL四氢呋喃中，冰浴下加入N,N'-羰基二咪唑(129mg，0.79mmol)，升至室温搅拌反应1.5小时，冰浴下加入环丁酮(70mg，0.9875mmol)，1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(157mg，1.027mmol)，搅拌反应1小时后升至室温继续搅拌反应18小时。减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得标题产物3b(70mg，亮黄色固体)，产率：27％。

第二步

(2S,3S)-3-环己基-N-(1'-氧-1'H-螺[环丁烷-1,3'-噁唑[3,4-a]吲哚]-7'-基)吡咯烷-2-甲酰胺三氟乙酸盐3c

将3b(70mg，0.138mmol)溶于5mL二氯甲烷中，加入0.5mL三氟醋酸，搅拌反应2小时。减压浓缩得到粗品标题产物3c(75mg，黄色粉状物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。

第三步

4-((2S,3S)-3-环己基-2-((1'-氧-1'H-螺[环丁烷-1,3'-噁唑[3,4-a]吲哚]-7'-基)氨甲酰)吡咯烷-1-羰基)-2-环丙基苯甲胺叔丁酯3e

将粗品3c(75mg，0.138mmol)溶于6mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-环丙基苯甲酸3d(41mg，0.138mmol，采用专利申请“WO2015/123093”公开的方法制备而得)，2-(7-偶氮苯唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(79mg，0.207mmol)，N,N-二异丙基乙胺(50mg，0.386mmol)，搅拌反应6小时。加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残余物，进一步用薄层色谱法以展开剂体系A纯化得到标题产物3e(60mg，白色固体)，产率：63％。

第四步

(2S,3S)-1-(4-(氨基甲基)-3-环丙基苯甲酰基)-3-环己基-N-(1'-氧-1'H-螺[环丁烷-1,3'-噁唑[3,4-a]吲哚]-7'-基)吡咯烷-2-甲酰胺三氟乙酸盐3

将3e(60mg，0.088mmol)溶于5mL二氯甲烷中，加入0.5mL三氟醋酸，搅拌反应2小时。减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残余物，得标题产物3(60mg，白色固体)，产率：98％。

MS m/z(ESI):581.5[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.34(s,0.78H),9.66(s,0.18H),8.20(d,0.78H),7.95(d,0.18H),7.86(d,0.78H),7.81(d,0.18H),7.54(dd,0.78H),7.43-7.33(m,2H),7.21(d,0.18H),7.17-7.16(m,1.70H),6.90(s,0.18H),4.67(d,0.81H),4.34-4.16(m,2H),3.77-3.76(m,0.25H),3.52-3.40(m,2H),3.11-3.03(m,2H),2.77-2.71(m,2H),2.19-1.88(m,7H),1.62-1.49(m,4H),1.20-0.95(m,8H),0.77-0.61(m,2H)。

实施例4

5-((2S,3S)-1-(4-(氨甲基)-3-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸三氟乙酸盐4

第一步

5-((2S,3S)-1-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯4c

将5-((2S,3S)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯三氟乙酸盐4a(150mg，0.302mmol，采用专利申请“EP2876105”公开的方法制备而得)，4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-环丙基苯甲酸4b(114mg，0.392mmol，采用专利申请“WO2015/123093”公开的方法制备而得)溶于6mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入N,N-二异丙基乙胺(117mg，0.904mmol)，2-(7-偶氮苯并三唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(172mg，0.452mmol)，搅拌反应2小时。加入40mL水，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，用饱和氯化铵溶液(15mL)，饱和氯化钠溶液(15mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残余物，得标题产物4c(210mg，黄褐色固体)，直接用于下一步反应。

第二步

5-((2S,3S)-1-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-3-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸4d

将4c(210mg，0.32mmol)溶于12mL乙醇和水的混合溶剂中(V:V＝5:1)，加入氢氧化钠(64mg，1.599mmol)，搅拌反应4小时。向反应液滴加1M盐酸至pH为5，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，滤液减压浓缩得到粗品标题产物4d(210mg，类白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。

第三步

5-((2S,3S)-1-(4-(氨甲基)-3-环丙基苯甲酰基)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸三氟乙酸盐4

将粗品4d(210mg，0.334mmol)溶于10mL二氯甲烷中，加入2mL三氟乙酸，搅拌反应2小时。减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残余物，得标题产物4(107mg，白色固体)，产率：51.2％。

MS m/z(ESI):529.4[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.72(s,0.45H),10.13(s,1H),8.01(s,1H),7.41(dd,3H),7.33(d,1H),7.17(s,1H),7.07(s,1H),4.67(d,1H),4.25(s,2H),2.14(d,2H),2.06-1.83(m,4H),1.62(d,3H),1.51(s,1H),1.20(d,2H),1.07(d,2H),1.04-0.91(m,5H),0.68(s,2H)。

实施例5

5-((2S,3S)-1-(4-(氨甲基)-5-环丙基-2-氟苯甲酰)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺)-1H-吲哚-2-羧酸三氟乙酸盐5

第一步

5-溴-4-(溴甲基)-2-氟苯甲酸甲酯5b

将5-溴-2-氟-4-甲基-苯甲酸甲酯5a(7.6g，30.762mmol，采用专利申请“WO2015175171”公开的方法制备而得)溶于80mL四氯化碳中，加入N-溴代琥珀酰亚胺(5.475g，30.762mmol)，过氧苯甲酰(0.745g，3.076mmol)，升温至85℃搅拌反应12小时。减压浓缩去除有机溶剂，加入200mL乙酸乙酯，用水(40mL)，饱和氯化钠溶液(40mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得标题产物5b(2.1g，白色固体)，产率：20.9％。

第二步

4-(叠氮甲基)-5-溴-2-氟苯甲酸甲酯5c

将5b(1.14g，3.497mmol)溶于20mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入叠氮化钠(0.25g，3.847mmol)，搅拌反应1.5小时。将反应液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有机相，用水(20mL)，饱和氯化钠溶液(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得标题产物5c(0.92g，白色固体)，产率：91.41％。

第三步

4-(氨甲基)-5-溴-2-氟苯甲酸甲酯5d

将5c(0.92g，3.194mmol)溶于12mL四氢呋喃中，加入三苯基膦(0.921g，3.513mmol)和4mL水，搅拌反应12小时。加入50mL乙酸乙酯，用1M盐酸(15mL×3)洗涤，合并水相，滴加1M氢氧化钠至pH为9，用乙酸乙酯萃取(25mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残余物，得标题产物5d(316mg，白色固体)，产率：37.8％。

第四步

5-溴-4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯5e

将5d(311mg，1.187mmol)溶于16mL二氯甲烷中，加入三乙胺(240mg，2.373mmol)和二碳酸二叔丁酯(285mg，1.305mmol)，搅拌反应48小时。加入70mL二氯甲烷，用水(20mL)，饱和氯化钠溶液(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得标题产物5e(400mg，无色油状物)，产率：93.1％。

第五步

4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-5-环丙基-2-氟苯甲酸甲酯5f

将5c(150mg，0.414mmol)，环丙基硼酸(71mg，0.828mmol)，碳酸钠(132mg，1.242mmol)溶于6.5mL甲苯、甲醇和水的混合溶剂中(V:V:V＝4:1.5:1)，加入[1,1'-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯(30mg，0.0414mmol)，升温至80℃反应12小时。加入80mL乙酸乙酯萃取，用水(15mL)，饱和氯化钠溶液(15mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物5f(70mg，无色油状液体)，产率：78.6％。

第六步

4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-5-环丙基-2-氟苯甲酸5g

将5f(70mg，0.216mmol)溶于8mL甲醇和水的混合溶剂中(V:V＝7:1)，加入氢氧化钠(43mg，1.082mmol)，搅拌反应2.5小时。加入30mL水，滴加1M盐酸至pH为5，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(15mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后得到粗品标题产物5g(67mg，淡黄色油状物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。

第七步

5-((2S,3S)-1-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-5-环丙基-2-氟苯甲酰)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯5h

将粗品5g(67mg，0.216mmol)溶于10mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(123mg，0.325mmol)，N,N-二异丙基乙胺(84mg，0.65mmol)和5-((2S,3S)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯三氟醋酸盐(129mg，0.26mmol，采用专利申请“EP2876105”公开的方法制备而得)，搅拌反应1.5小时。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有机相，用饱和氯化铵溶液(20mL)，饱和氯化钠溶液(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩后用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残余物，得到标题产物5h(140mg，淡黄色泡沫状物)，产率：95.9％。

第八步

5-((2S,3S)-1-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-5-环丙基-2-氟苯甲酰)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺)-1H-吲哚-2-羧酸5i

将5h(140mg，0.207mmol)溶于8mL乙醇中，加入氢氧化钠(41mg，1.037mmol)和1.5mL水，搅拌反应12小时，升温至45℃反应1.5小时。加入40mL水，滴加1M盐酸至pH为5，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题产物5i(153mg，淡黄色油状物)，产品不经纯化直接进行下一步。

第九步

5-((2S,3S)-1-(4-(氨甲基)-5-环丙基-2-氟苯甲酰)-3-环己基吡咯烷-2-甲酰胺)-1H-吲哚-2-羧酸三氟乙酸盐5

将粗品5i(153mg，0.236mmol)溶于10mL二氯甲烷中，加入1mL三氟乙酸，搅拌反应2小时。减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残余物，得标题产物5(85mg，灰白色固体)，产率：55.9％。

MS m/z(ESI):547.4[M+1]

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.73(d,0.56H),10.18(s,1H),8.02(d,1H),7.40(d,1H),7.36-7.32(m,2H),7.11-7.06(m,2H),4.71(d,1H),4.27(s,2H),3.37-3.25(m,2H),2.16(d,2H),2.03-1.97(m,3H),1.62(d,4H),1.31-1.21(m,2H),1.10(s,3H),1.00-0.92(m,5H),0.67(m,2H)。

生物学评价

以下结合测试例进一步描述解释本发明，但这些实施例并非意味着限制本发明的范围。

本发明测试例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。

测试例1吸收光法检测因子XIa抑制剂的生物活性

1、实验材料

酶：因子XIa蛋白酶(Abcam,货号ab62411)

底物：因子XIa特异性底物(HYPHEN1310med，货号Biophen cs-21(66))

缓冲液：100mM tris-HCl，200mM NaCl，0.02％吐温20，pH7.4

2、实验步骤

将溶于100％DMSO的20mM受试化合物用100％DMSO稀释至200、20、2、0.2、0.02、0.002uM；在384孔板中每孔加入1ul化合物，空白和对照孔用DMSO替代，离心，将化合物离至底部。每孔加入10ul(2.5ug/ml)的FXIa酶溶液，空白孔加入10ul缓冲液替代，离心，将酶溶液离至底部。

最后每孔加入2mM底物10ul，离心，将底物液离至底部。

在37℃孵育10分钟；然后在405nm处测其吸光值。吸光值用graphpad进行曲线拟合并获得IC₅₀。

化合物编号	IC50(因子XIa)/(nM)
		实施例4	50.13
实施例5	63.27

结论：本发明化合物对因子XIa具有明显的抑制活性。

测试例2人血液体外抗凝血作用的测定

1、实验材料

血浆：人血收集于不含抗凝剂的采血管中，加入3.8％柠檬酸钠(体积比1：9)，室温2500rpm离心10min，收集血浆，分装保存于-80℃；

试剂：APTT试剂(活化部分凝血活酶时间测定试剂盒，SIEMENS，货号B4218-1)、PT试剂(凝血酶原时间测定试剂盒，SIEMENS，货号OUHP29)、氯化钙溶液；

仪器：凝血仪(SYSMEX，CA-500)。

2、实验检测

取分装血浆室温融化后混合均匀。将溶于100％DMSO的10000uM受试化合物用100％DMSO稀释至3000、300、200、150、75、30、10、3、0.3uM，空白为100％DMSO。将试剂、血浆、化合物放入凝血仪中对应位置，进行化合物的APTT及PT的检测。

3、数据处理

通过Prism进行曲线拟合，计算CT₂，即2倍空白对照的APTT、PT所对应的化合物的浓度，结果如下：

化合物编号	抑制血小板凝集CT2(μM)
		实施例1	89.9
实施例3	8.45
		实施例4	11.04

结论：本发明化合物对人血液凝集具有明显的抑制活性。

药代动力学评价

测试例3、本发明实施例3化合物的药代动力学测试

1、摘要

以SD大鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定了大鼠灌胃给予实施例3化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在大鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。

2、试验方案

2.1试验药品

实施例3化合物

2.2试验动物

健康成年SD大鼠4只，雌雄各半，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2008-0016。

2.3药物配制

称取适量药物，加入5％DMSO和5％吐温80使溶解，后加生理盐水至终体积，配成溶液。

2.4给药

SD大鼠4只，雌雄各半；禁食一夜后分别灌胃给药，灌胃给药。

3、操作

灌胃给药组于给药前及给药后0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、11.0、24.0h采血0.1ml，置于肝素化试管中，3500rpm离心10min分离血浆，于-20℃保存。用LC/MS/MS法测定不同化合物灌胃给药后大鼠血浆中的待测化合物含量。

4、药代动力学参数结果

本发明实施例3化合物的药代动力学参数如下：

结论：本发明化合物3作为实施例4化合物的前药，其药代吸收良好，具有明显的药代吸收效果。

测试例4、本发明实施例4化合物的药代动力学测试

1、摘要

以SD大鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定了大鼠静脉给予实施例4化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在大鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。

2、试验方案

2.1试验药品

实施例4化合物

2.2试验动物

健康成年SD大鼠4只，雌雄各半，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2008-0016。

2.3药物配制

称取适量药物，加入0.5mlDMSO和0.5ml吐温80使溶解，后加生理盐水至终体积，配成0.2mg/ml溶液。

2.4给药

SD大鼠4只，雌雄各半；禁食一夜后分别静脉注射给药，灌胃给药。

3、操作

静脉给药组于给药前及给药后5min,15min,0.5h,1,2h,4h,8h,11h,24h由眼眶采血0.2ml，置于肝素抗凝试管中，3500rpm离心10min分离血浆，于-20℃保存。用LC/MS/MS法测定不同化合物静脉给药后大鼠血浆中的待测化合物含量。

4、药代动力学参数结果

本发明实施例4化合物的药代动力学参数如下：

结论：本发明实施例4化合物的药代效果良好，具有明显的药代效果。

Claims (19)

1.一种通式(I)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中：

为单键或双键；

M选自有机酸和无机酸，优选三氟乙酸；

X和Y相同或不同，且各自独立地选自CH、S、O和N；

环A选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷中的一个或多个取代基所取代；

环B选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷中的一个或多个取代基所取代；

R¹选自环烷基、杂环基、芳基和芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷中的一个或多个取代基所取代；

R²相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、脒基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、脒基、胍基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

或R¹和R²连接在一起，形成一个3-8元的环，所述的环选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷中的一个或多个取代基所取代；

R³选自氢原子、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、脒基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、脒基、胍基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁸、-C(O)R⁸、-C(O)OR⁸、-S(O)_mR⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)NR⁹R¹⁰、-C(O)NHR⁹、-NR⁹C(O)R¹⁰和-NR⁹S(O)_mR¹⁰中的一个或多个取代基所取代；

R⁴选自氢原子、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、脒基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁵、-C(O)R⁵、-C(O)OR⁵、-S(O)_mR⁵、-NR⁶R⁷、-C(O)NR⁶R⁷、-C(O)NHR⁶、-NR⁶C(O)R⁷和-NR⁶S(O)_mR⁷，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、脒基、胍基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR⁸、-C(O)R⁸、-C(O)OR⁸、-S(O)_mR⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)NR⁹R¹⁰、-C(O)NHR⁹、-NR⁹C(O)R¹⁰和-NR⁹S(O)_mR¹⁰中的一个或多个取代基所取代；

R⁵选自氢原子、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、羧酸酯基、羟烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

R⁶和R⁷相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基、羟基、氨基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自烷基、卤素、羟基、羧酸酯基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

R⁸选自氢原子、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、羧酸酯基、羟烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

R⁹和R¹⁰相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基、羟基、氨基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自烷基、卤素、羟基、羧酸酯基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

m为0、1或2；

x为0、1、2、3或4；

y为0或1；

q为0、1、2、3、4或5；

p为0、1、2、3、4或5；且

n为0、1、2、3或4。

2.根据权利要求1所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(I-A)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

环A、环B、M、X、Y、x、n、y、p、q和R¹～R⁴如权利要求1中所定义。

3.根据权利要求1所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(I-B)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

环A、环B、M、x、n、p、q和R¹～R⁴如权利要求1中所定义。

4.根据权利要求1所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(II)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

环A、环B、M、x、n、p、q和R²～R⁴如权利要求1中所定义。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的通式(I)所示的化合物，其中A环为

6.根据权利要求1～5中任一项所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(III)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

R^a选自氢原子、烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

或者R⁴和R^a一起形成5～8元杂环，其中所述的杂环选自单杂环、螺杂环、桥杂环和稠杂环；

环B、M、x、n、q和R²～R⁴如权利要求1中所定义。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(IV)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

M、x、n、q、R²～R⁴和R^a如权利要求6中所定义。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的通式(I)所示的化合物，其为通式(V)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，

其中：

n为1、2、3或4；

M、x、q、R²～R⁴和R^a如权利要求6中所定义。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的通式(I)所示的化合物，其中R²选自烷基、氨基、卤素、脒基和胍基，其中所述的烷基任选被选自卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的通式(I)的化合物，其中R³为氢原子。

11.根据权利要求1～10任一项所述的通式(I)的化合物，其中R⁴为-C(O)OR⁵，R⁵为氢原子。

12.根据权利要求1～11任一项所述的通式(I)所示的化合物，其中所述化合物选自：

13.一种通式(VI)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中：

n为1、2、3或4；

M、q、R²～R⁴和R^a如权利要求6中所定义。

14.一种制备根据权利要求8所述的通式(V)所示的化合物的方法，该方法包括：

通式(VI)化合物在酸性条件下脱保护进行，得到通式(V)化合物；

其中：

n为1、2、3或4；

M、x、q、R²～R⁴和R^a如权利要求13中所定义。

15.一种药物组合物，其含有治疗有效量的根据权利要求1～12中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐以及药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂。

16.根据权利要求1～12任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐或根据权利要求15所述的药物组合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病中的用途，所述心脑血管疾病优选为血栓栓塞性疾病，更优选为心肌梗塞、心绞痛、血管成型术或主动脉冠状动脉分流术后的再阻塞和再狭窄、中风、短暂的局部缺血发作、周围动脉闭塞性疾病、肺栓塞或深部静脉血栓形成。

17.根据权利要求1～12任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐或根据权利要求15所述的药物组合物在制备预防和/或治疗通过抑制因子XIa正性影响的疾病的药物中的用途。

18.根据权利要求1～12任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐或根据权利要求15所述的药物组合物在制备治疗弥散性血管内凝血的药物中的用途。

19.根据权利要求1～12任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐或根据权利要求15所述的药物组合物在制备抑制因子XIa的药物中的用途。