CN107184617B - 银杏酸在制备预防和/或治疗过敏性疾病的产品中的应用 - Google Patents
银杏酸在制备预防和/或治疗过敏性疾病的产品中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107184617B CN107184617B CN201710599259.6A CN201710599259A CN107184617B CN 107184617 B CN107184617 B CN 107184617B CN 201710599259 A CN201710599259 A CN 201710599259A CN 107184617 B CN107184617 B CN 107184617B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ginkgolic acid
- ginkgolic
- syk
- acid
- active compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- YXHVCZZLWZYHSA-FPLPWBNLSA-N Ginkgoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O YXHVCZZLWZYHSA-FPLPWBNLSA-N 0.000 title claims abstract description 97
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 title claims description 10
- YXHVCZZLWZYHSA-UHFFFAOYSA-N (Z)-6-[8-pentadecenyl]salicylic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O YXHVCZZLWZYHSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 22
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 61
- VEPUCZUJLKAVNM-UHFFFAOYSA-N 2-Hydroxy-6-tridecylbenzoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O VEPUCZUJLKAVNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 42
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 42
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 40
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims abstract description 14
- 241000218628 Ginkgo Species 0.000 claims abstract description 12
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 235000011201 Ginkgo Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 11
- 108010016672 Syk Kinase Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 102000000551 Syk Kinase Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 14
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 30
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 29
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000002547 new drug Substances 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 67
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 31
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 13
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 11
- 108010067755 dinitrophenyl-bovine serum albumin Proteins 0.000 description 10
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 9
- 101000699762 Homo sapiens RNA 3'-terminal phosphate cyclase Proteins 0.000 description 9
- 102100029143 RNA 3'-terminal phosphate cyclase Human genes 0.000 description 9
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 8
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Natural products ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- 102000007478 beta-N-Acetylhexosaminidases Human genes 0.000 description 6
- 108010085377 beta-N-Acetylhexosaminidases Proteins 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N ent-staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N staurosporine Chemical compound C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1[C@H]1C[C@@H](NC)[C@@H](OC)[C@]4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N 0.000 description 5
- CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(OC)O1 CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- 102100038183 Tyrosine-protein kinase SYK Human genes 0.000 description 4
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L magnesium chloride Substances [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 3
- 239000000043 antiallergic agent Substances 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 3
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 3
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000194101 Ginkgo biloba Species 0.000 description 2
- 241000218791 Ginkgoaceae Species 0.000 description 2
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 description 2
- 101710182312 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 229920002584 Polyethylene Glycol 6000 Polymers 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229940069078 citric acid / sodium citrate Drugs 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 239000005712 elicitor Substances 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 2
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 2-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010008469 Chest discomfort Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 239000008118 PEG 6000 Substances 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000036428 airway hyperreactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- -1 cysteinyl leukotrienes Chemical class 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K hemin Chemical compound CC1=C(CCC(O)=O)C(C=C2C(CCC(O)=O)=C(C)\C(N2[Fe](Cl)N23)=C\4)=N\C1=C/C2=C(C)C(C=C)=C3\C=C/1C(C)=C(C=C)C/4=N\1 BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K 0.000 description 1
- 229940025294 hemin Drugs 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- POFWRMVFWIJXHP-UHFFFAOYSA-N n-benzyl-9-(oxan-2-yl)purin-6-amine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNC(C=1N=C2)=NC=NC=1N2C1CCCCO1 POFWRMVFWIJXHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/16—Ginkgophyta, e.g. Ginkgoaceae (Ginkgo family)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了具有Syk抑制活性的中药活性化合物及其制备方法与应用。本发明发现活性化合物银杏酸C15:1或银杏酸C13:0具有脾酪氨酸激酶(Syk)抑制活性，进一步研究表明该活性化合物还具有抑制肥大细胞脱颗粒作用，并且首次从白果药材中得到中药活性化合物银杏酸C15:1，并验证其同样具有Syk抑制活性和肥大细胞脱颗粒抑制活性。本发明的活性化合物银杏酸C15:1或银杏酸C13:0的有效组分和化学成分简单，作用靶点明确，能直接抑制Syk活性并抑制肥大细胞脱颗粒，在药理研究上更易于阐明其作用机制，在预防和治疗过敏性哮喘方面具有潜在的应用价值，为过敏性哮喘的防治提供新的药物选择。
Description
技术领域
本发明属于中药化学领域，更具体地说涉及从中药白果中发现的一种能直接作用于脾酪氨酸激酶(Syk)并抑制该酶活性的化合物，该化合物具有抑制肥大细胞脱颗粒活性，该化合物及其制剂具有潜在的预防和治疗哮喘等过敏性疾病的作用。
背景技术
过敏性哮喘(Bronchial asthma)是以肺部多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞等浸润和对各种激发因子产生气道高反应为特征的慢性气道炎症疾病，在易感者中此种炎症可引起反复发作的气促、喘息、咳嗽和胸闷等症状，气道对多种刺激因子反应性增高，其发病率有逐年上升的趋势。
研究表明肥大细胞在过敏性哮喘病理学中扮演了非常重要的角色，在过敏反应中，肥大细胞是连接过敏反应致敏阶段与效应阶段的枢纽细胞，粉尘螨抗原特异性IgE与肥大细胞表面受体FcεRI结合从而活化肥大细胞，肥大细胞的活化释放了包括组织胺、蛋白酶、半胱氨酰白三烯和前列腺素等在内的大量生物活性介质(称为肥大细胞脱颗粒)直接诱导过敏性哮喘的发生。在肥大细胞中，脾酪氨酸激酶(Syk)是FcεRI介导的人肥大细胞脱颗粒过程中一种非常关键的调节因子，其对肥大细胞脱颗粒的信号转导具有重要意义。药理学研究发现抑制Syk活性可以阻断RBL-2H3肥大细胞或骨髓由来的嗜碱粒细胞的脱颗粒现象。因此，Syk抑制剂可作为一个潜在的，疗效明显的抗过敏药物，其开发及应用将具有远大的前景。但现有的Syk抑制剂大多为化学合成小分子，源于中药的Syk抑制剂还少见报道。
发明内容
本发明的一个目的是提供银杏酸或其提取物或其制剂的新用途。
本发明提供了银杏酸或其提取物或其制剂在如下1)-8)中任一种中的应用：
1)抑制脾酪氨酸激酶(Syk)活性；
2)制备抑制脾酪氨酸激酶(Syk)活性的产品；
3)抑制肥大细胞脱颗粒；
4)制备抑制肥大细胞脱颗粒的产品；
5)预防和/或治疗过敏性疾病；
6)制备预防和/或治疗过敏性疾病的产品；
7)制备Syk抑制剂；
8)作为抗过敏药物。
上述应用中，所述银杏酸为银杏酸(C15:1)或银杏酸(C13:0)。
本发明的另一个目的是提供一种产品；
所述产品的功能为如下(1)-(5)中任一种：
(1)抑制脾酪氨酸激酶(Syk)活性；
(2)抑制肥大细胞脱颗粒；
(3)预防和/或治疗过敏性疾病；
(4)作为Syk抑制剂；
(5)作为抗过敏药物。
本发明提供的具有上述功能的产品的活性成分为银杏酸或其提取物或其制剂；
上述产品中，所述银杏酸为银杏酸(C15:1)或银杏酸(C13:0)。
上述产品中，所述制剂可为丸剂、气雾剂、片剂或颗粒剂等制剂，但不限于此，包括其它常规剂型，不一一罗列。所述产品可为药物，所述药物活性分为中药活性化合物银杏酸C15:1或银杏酸C13:0，该药物还包括药剂学上可接受的辅料。
上述应用或产品中，所述银杏酸(C15:1)可从中药材中提取得到；在本发明的具体实施例中，所述中药材为白果，但不限于此，也可以是其它药材中提取。
上述应用或产品中，所述过敏性疾病可为过敏性哮喘、过敏性皮炎和过敏性鼻炎等过敏性疾病。
本发明的最后一个目的是提供一种抑制肥大细胞脱颗粒的方法。
本发明提供的抑制肥大细胞脱颗粒的方法包括用银杏酸或其提取物或其制剂处理细胞的步骤。
上述方法中，所述银杏酸为银杏酸(C15:1)或银杏酸(C13:0)。
上述方法中，所述细胞为RBL-2H3肥大细胞。
本发明的有益效果为：
1、本发明提供的中药有效组分和化学成分简单明确，在药理研究上更易于阐明其作用机制。
2、本发明首次从白果中得到具有Syk抑制活性的银杏酸(C15:1)，并具有抗肥大细胞脱颗粒作用，为过敏性哮喘的防治提供新的药物选择。
3、白果来源为《中国药典》(2015版)记载的银杏科植物银杏Ginkgo Biloba L.的干燥成熟种子，为临床验证安全有效的抗过敏性哮喘药物，从中发现活性化合物用于制备抗过敏性哮喘药物，在有效性、安全性上能够得到保障。
本发明发现活性化合物银杏酸C15:1或银杏酸C13:0具有脾酪氨酸激酶(Spleentyrosine kinase，Syk)抑制活性，进一步研究表明该活性化合物还具有抑制肥大细胞脱颗粒作用，并且首次从白果药材中得到中药活性化合物银杏酸C15:1，并验证其同样具有Syk抑制活性和肥大细胞脱颗粒抑制活性。本发明的活性化合物银杏酸C15:1或银杏酸C13:0的有效组分和化学成分简单，作用靶点明确，能直接抑制Syk活性并抑制肥大细胞脱颗粒，在药理研究上更易于阐明其作用机制，在预防和治疗过敏性哮喘方面具有潜在的应用价值，为过敏性哮喘的防治提供新的药物选择。
附图说明
图1为银杏酸(C15:1)对Syk活性的抑制作用。
图2为银杏酸(C15:1)抑制Syk活性的量效关系。
图3为银杏酸(C15:1)对肥大细胞脱颗粒的抑制作用。
图4为银杏酸(C15:1)抑制肥大细胞脱颗粒的量效关系。
图5为基于RTCA实验的银杏酸(C15:1)对肥大细胞表型抑制作用。
图6为基于RTCA实验的银杏酸(C15:1)对细胞毒性分析。
图7为银杏酸(C13:0)对Syk活性的抑制作用。
图8为银杏酸(C13:0)抑制Syk活性的量效关系。
图9为银杏酸(C13:0)对肥大细胞脱颗粒的抑制作用。
图10为银杏酸(C13:0)抑制肥大细胞脱颗粒的量效关系。
图11为基于RTCA实验的银杏酸(C13:0)对肥大细胞表型抑制作用。
图12为基于RTCA实验的银杏酸(C13:0)对细胞毒性分析。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
下述实施例中的银杏酸(C15:1)和银杏酸(C13:0)均是成都普思生物科技股份有限公司的产品，产品编号依次为PS0816-0025和PS0798-0025，化合物CAS编号依次为22910-60-7和20261-38-5，纯度均在98％以上。
银杏酸(C15:1)的分子式为C22H34O3；分子量为346.51，分子结构示意图如式Ⅰ：
银杏酸(C13:0)的分子式为C20H32O3；分子量为320.47，分子结构示意图如式Ⅱ：
实施例1、银杏酸(C15:1)在抑制脾酪氨酸激酶(Syk)活性中的应用
一、Syk抑制活性的测定
1、取384孔板，加入4μL SYK酶溶液和2μL测试样品溶液(银杏酸C15:1)，混匀后在30℃条件下孵育20min。同时以测试样品溶液(十字孢碱)作为阳性对照。
SYK酶溶液是由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质及其浓度分别为：3ng/μL SYK酶(英国Abcam公司，ab60886)、20mM MgCl2、0.1mg/ml BSA、50μM DTT、40mM Tris缓冲液(pH7.5)。
测试样品溶液(银杏酸C15:1)是由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质及其浓度分别为：1mmol/L实施例1中制备的银杏酸(C15:1)、20mM MgCl2、0.1mg/ml BSA、50μM DTT、40mMTris缓冲液(pH 7.5)。
测试样品溶液(十字孢碱)是由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质及其浓度分别为：1μM阳性药物十字孢碱(N0.81590，美国Cayman公司)、20mM MgCl2、0.1mg/ml BSA、50μMDTT、40mM Tris缓冲液(pH 7.5)。
2、然后向各孔中加入4μL Poly E4Y1溶液，混匀后在30℃条件下孵育60min。
Poly E4Y1溶液是由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质及其浓度分别为：0.2μg/μLPoly E4Y1(英国Abcam公司，ab204877)、10μM ATP、20mM MgCl2、0.1mg/ml BSA、50μM DTT、40mM Tris缓冲液(pH 7.5)。
3、用ADP-glo-max-assay试剂盒(Promega公司)检测酶促反应产物ADP的含量。具体步骤如下：向每个孔的酶促反应液中加入10μL ADP-GloTM试剂，混匀后在30℃条件下孵育40min。再加入20μl ADP-GloTM Max检测试剂，混匀后在30℃条件下孵育60min，用读板发光计(EnVisionTM多标记微孔板检测仪)测量化学发光值，并计算银杏酸(C15:1)对Syk活性的抑制率。Syk抑制率计算公式如式Ⅲ：
A空白：含底物和酶，不加样品反应后的化学发光值；
A样品：含底物和酶，加入样品反应后的化学发光值；
A背景：只加入样品溶液的化学发光值。
结果如图2所示。银杏酸(C15:1)在50.00μM浓度下抑制率为44.57％。相同条件下，阳性药物十字孢碱在50.00nM浓度下抑制率为56.79％。
二、银杏酸(C15:1)对Syk抑制活性的量效关系考察
1、取384孔板，每孔加入2μL浓度分别为2000.00μM、666.67μM、222.22μM、74.07μM、24.69μM和8.23μM的银杏酸(C15:1)溶液，再加入4μL SYK酶溶液，混匀后在30℃条件下孵育20min。
2、然后每孔加入4μL Poly E4Y1溶液，混匀后在30℃条件下孵育60min。
3、用ADP-glo-max-assay试剂盒(Promega公司生产)检测酶促反应产物ADP的含量。具体步骤同上述步骤3。银杏酸(C15:1)在体系中的终浓度分别为100μM、33.33μM、11.11μM、3.70μM、1.23μM和0.41μM。采用GraphPad Prism软件绘制银杏酸(C15:1)抑制Syk活性的量效曲线，并计算Syk的半抑制浓度(IC50)。
量效曲线如图2所示。银杏酸(C15:1)对Syk的半抑制浓度(IC50)值为5.69μM。2.00-100.00μM的银杏酸(C15:1)均可不同程度地抑制Syk活性。
实施例2、银杏酸(C15:1)在抑制肥大细胞脱颗粒中的应用
一、抑制肥大细胞脱颗粒活性测定
1、将RBL-2H3肥大细胞(购自美国ATCC细胞库，
CRL-2256TM)用含10％FBS、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的EMEM培养基(购自龙沙(中国)投资有限公司，LONZA12-611F)混悬，调整细胞密度为2.0×104个/孔，接种于96孔板中，每孔180μL，在37℃、5％CO2细胞培养箱中孵育24小时。
2、然后向各孔细胞中加入20μL DNP-IgE(Sigma，D8406)溶液(溶剂为0.1M磷酸缓冲液，pH 7.4)致敏12小时，使DNP-IgE终浓度为100ng/ml；弃去培养液，用PBS缓冲液(NaCl8.0g；KCl 0.2g；Na2HPO4 1.44g；KH2PO4 0.24g；加蒸馏水至1000ml，pH 7.4)洗涤两次，分别加入80μl无酚红DMEM培养基和20μl测试样品溶液(银杏酸C15:1)溶液，于37℃孵育1小时。同时以测试样品溶液(氯喹)作为阳性对照。
测试样品溶液(银杏酸C15:1)是将实施例1中制备的银杏酸C15:1与无酚红的DMEM培养基(Gibco，21063029)混匀得到的溶液，其中银杏酸C15:1浓度为50μM。
测试样品溶液(氯喹)是将氯喹(Sigma，C6628-25G)与无酚红的DMEM培养基混匀得到的溶液，其中氯喹浓度为5mM。
3、向各孔中加入DNP-BSA(Merck，324101-100MG)刺激RBL-2H3细胞，使DNP-BSA终浓度为100ng/ml，37℃孵育30分钟；然后转至0℃冰浴静置10分钟。
4、取50μl上清液与50μL 4mM对硝基苯基-N-乙酰基-β-D-葡糖苷溶液(溶剂为0.1mol/L柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液，pH 4.5)混匀，在37℃条件下孵育1.5小时，再加入200μL0.1mol/l碳酸钠缓冲液(pH 10.5)终止反应。在分光光度计405nm处测定反应液的吸光度来检测产物对硝基苯酚(细胞上清液)的含量。
5、采用100μl含0.1％(v/v)triton X-100的缓冲液(sigma，T8787)裂解步骤3中静置10分钟后孔底部的细胞，取50μL裂解液与50μL 4mM对硝基苯基-N-乙酰基-β-D-葡糖苷溶液(溶剂为0.1mol/L柠檬酸，pH 4.5)混匀，在37℃条件下孵育1.5小时，再加入200μL0.1mol/L碳酸钠缓冲液(pH 10.5)终止反应。在分光光度计405nm处测定反应液的吸光度来检测产物对硝基苯酚(细胞裂解液)的含量。并计算RBL-2H3肥大细胞中β-氨基己糖苷酶的释放率(R)和β-氨基己糖苷酶抑制率，计算公式如式Ⅳ和式Ⅴ。
A0：空白对照组(未受刺激的细胞)上清液吸光度值；
Aup：实验组(受刺激的细胞)上清液吸光度值；
Acell：实验组(受刺激的细胞)细胞裂解液吸光度值；
R0：空白对照组(未受刺激的细胞)的β-氨基己糖苷酶释放率；
R1：实验组(受刺激的细胞)未经测试样品处理的β-氨基己糖苷酶释放率；
R2：实验组(受刺激的细胞)经测试样品处理的β-氨基己糖苷酶释放率。
结果如图3所示。银杏酸(C15:1)在10.00μM浓度下能显著抑制肥大细胞中β-氨基己糖苷酶的释放(图3A)，抑制率为88.93％。相同条件下，阳性药物氯喹在1.00mM浓度下抑制率为86.96％(图3B)。
二、银杏酸(C15:1)对肥大细胞脱颗粒抑制活性的量效关系考察
1、以无酚红的DMEM培养基将银杏酸(C15:1)梯度稀释为100.00μM、33.33μM、11.11μM、3.70μM和1.23μM的银杏酸(C15:1)溶液。
2、将RBL-2H3细胞用含10％FBS、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的DMEM培养基混悬，调整细胞密度为2.0×104个/孔，接种于96孔板中，每孔180μL，在37℃、5％CO2细胞培养箱中过夜。
3、第二天向各孔细胞中加入20μL DNP-IgE溶液致敏12小时，使DNP-IgE终浓度为100ng/ml；弃去培养液，用PBS缓冲液洗涤两次，分别加入80μL无酚红DMEM培养基和20μL步骤1中制备的不同浓度系列的银杏酸(C15:1)溶液，在37℃条件下孵育1小时。
4、向各孔中加入DNP-BSA刺激RBL-2H3细胞，使DNP-BSA终浓度为100ng/ml，37℃孵育30分钟；然后转至0℃冰浴静置10分钟。
5、取50μL上清液与50μL 4mM对硝基苯基-N-乙酰基-β-D-葡糖苷溶液(溶剂为0.1mol/L柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液，pH 4.5)混匀，在37℃条件下孵育1.5小时，再加入200μL0.1mol/l碳酸钠缓冲液(pH 10.5)终止反应。在分光光度计405nm处测定反应液的吸光度来检测产物对硝基苯酚(细胞上清液)的含量。
6、采用100μL含0.1％(v/v)triton X-100的缓冲液裂解步骤4中静置10分钟后孔底部的细胞，取50μL裂解液与50μL 4mM对硝基苯基-N-乙酰基-β-D-葡糖苷溶液(溶剂为0.1mol/L柠檬酸，pH 4.5)混匀，在37℃条件下孵育1.5小时，再加入200μL0.1mol/L碳酸钠缓冲液(pH 10.5)终止反应。银杏酸(C15:1)在体系中的终浓度分别为20.00μM、6.70μM、2.20μM、0.70μM、0.20μM和0.10μM。在分光光度计405nm处测定反应液的吸光度来检测产物对硝基苯酚(细胞裂解液)的含量。计算RBL-2H3肥大细胞中β-氨基己糖苷酶的释放率以及银杏酸(C15:1)对肥大细胞脱颗粒的半抑制浓度(IC50)值。
结果如图4所示。银杏酸(C15:1)对肥大细胞脱颗粒的半抑制浓度(IC50)值为2.50μM。2.25-20.00μM的银杏酸(C15:1)均可不同程度地抑制肥大细胞脱颗粒。
三、基于实时无标记细胞分析技术(RealTime Cellular Analysis，RTCA)检测银杏酸(C15:1)对肥大细胞表型抑制作用
实时无标记细胞分析技术可以实时检测RBL-2H3细胞内受体的活化情况，RBL-2H3细胞的数量以及贴壁程度的改变都会影响电极传感器表面电子和离子的通过，通过实时检测电极间阻抗可以评价银杏酸(C15:1)对肥大细胞表型的抑制作用。当RBL-2H3细胞再次接受到抗原刺激时细胞脱颗粒，细胞表型发生变化，反映在RTCA上表现为电阻值增加。
1、RTCA实验检测银杏酸(C15:1)对肥大细胞表型抑制作用
首先向E-Plate金属板细胞孔内加入不含细胞的新鲜培养基(含有10％FBS的DMEM)100μL/孔，放入培养箱。打开iCELLigence系统分析软件，以0h读取的细胞指数值(cell index，简称CI)记为基线值。选取生长状态良好的RBL-2H3细胞，胰酶消化后细胞计数，配成一定浓度的细胞悬液(2.0×104个细胞/孔)，向金属板中加入细胞悬液180μL/孔，室温静置5min，放入培养箱，通过iCELLigence系统分析软件每15分钟检测一次。第二天每孔加入20μL DNP-IgE溶液致敏过夜，使DNP-IgE终浓度为100ng/ml。第三天实验前为细胞换液，每孔加入80μL无血清DMEM(Lonza12-604F)。待仪器检测的细胞指数曲线趋于稳定时，每孔加入银杏酸(C15:1)(终浓度为2.2μM)或氯喹(chloroquine)(终浓度为1000.0μM)，每分钟检测1次，待仪器检测的细胞指数曲线重新趋于稳定时(约1小时)，每孔加入25μL DNP-BSA溶液，使DNP-BSA终浓度为100ng/ml，每分钟检测1次。
以加入DNP-IgE和DNP-BSA的细胞作为BSA-IgE组；以加入DNP-IgE、银杏酸(C15:1)和DNP-BSA的细胞作为银杏酸(C15:1)组；以加入DNP-IgE、氯喹和DNP-BSA的细胞作为氯喹组；以RBL-2H3细胞为空白对照组。
RTCA实验结果如图5所示。结果表明：BSA-IgE组可以明显引起细胞脱颗粒，细胞指数上升，氯喹组可以抑制肥大细胞脱颗粒，细胞指数上升较空白组高而低于BSA-IgE组，2.20μM银杏酸(C15:1)同样可以抑制因肥大细胞脱颗粒引起的细胞指数上升。说明2.20μM银杏酸(C15:1)可以明显抑制DNP-BSA引起的RBL-2H3细胞脱颗粒。
2、银杏酸(C15:1)对RBL-2H3细胞毒性的分析
RTCA实验可以反映RBL-2H3细胞的活力并以此来评价银杏酸(C15:1)对RBL-2H3细胞的毒性。当加入测试化合物后，若细胞指数明显下降，且在长时间内不会恢复到与空白对照孔同样的CI值时，表明药物对细胞产生一定毒性，CI值能剂量依赖性地表征测试化合物对细胞的毒性大小。在脱颗粒实验的第三天，细胞换液后加入80μL/孔的无血清DMEM。待仪器检测的细胞指数曲线趋于稳定时，每孔分别加入20μL如下不同浓度的银杏酸(C15:1)溶液：6.70μM、2.20μM、0.70μM和0.20μM，每分钟检测1次，连续检测2个小时，评价银杏酸(C15:1)对RBL-2H3细胞的毒性作用。同时以不加任何药物的细胞作为空白对照。
结果如图6所示。结果表明，银杏酸(C15:1)在0.20-2.20μM浓度范围内对RBL-2H3细胞无明显毒性作用。
实施例3、银杏酸(C13:0)在抑制Syk活性中的应用
一、Syk抑制活性的测定
将实施例1步骤一中的银杏酸C15:1替换为银杏酸C13:0，且保持其他步骤不变，检测银杏酸(C13:0)的Syk抑制活性。
结果如图7所示。银杏酸(C13:0)在33.33μM浓度下抑制率为48.17％。相同条件下，阳性药物十字孢碱在50nM浓度下抑制率为52.96％。
二、银杏酸(C13:0)对Syk抑制活性的量效关系考察
将实施例1步骤二中的银杏酸C15:1替换为银杏酸C13:0，且保持其他步骤不变，考察银杏酸(C13:0)对Syk抑制活性的量效关系。
量效曲线如图8所示。银杏酸(C13:0)对Syk的半抑制浓度(IC50)值为2.70μM。2.00-20.0μM的银杏酸(C13:0)均可不同程度地抑制Syk活性。
实施例4、银杏酸(C13:0)在抑制肥大细胞脱颗粒中的应用
一、抑制肥大细胞脱颗粒活性测定
将实施例2步骤一中的银杏酸(C15:1)替换为银杏酸(C13:0)，且保持其他步骤不变，检测银杏酸(C13:0)的抑制肥大细胞脱颗粒活性。
结果如图9所示。银杏酸(C13:0)在20.00μM浓度下能显著抑制肥大细胞中β-氨基己糖苷酶的释放(图9A)，抑制率为79.09％。相同条件下，阳性药物氯喹在1.00mM浓度下抑制率为79.44％(图9B)。
二、银杏酸(C13:0)对肥大细胞脱颗粒抑制活性的量效关系考察
将实施例2步骤二中的银杏酸(C15:1)替换为银杏酸(C13:0)，且保持其他步骤不变，考察银杏酸(C13:0)对肥大细胞脱颗粒抑制活性的量效关系。
结果如图10所示。银杏酸(C13:0)对肥大细胞脱颗粒的半抑制浓度(IC50)值为2.68μM。2.25-20.00μM的银杏酸(C13:0)均可不同程度地抑制肥大细胞脱颗粒。
三、基于实时无标记细胞分析技术检测银杏酸(C13:0)对肥大细胞表型抑制作用
将实施例2步骤三中的银杏酸(C15:1)替换为银杏酸(C13:0)，且保持其他步骤不变，基于实时无标记细胞分析技术检测银杏酸(C13:0)对肥大细胞表型抑制作用。
结果如图11所示。结果表明：BSA-IgE组可以明显引起细胞脱颗粒，细胞指数上升，氯喹组可以抑制肥大细胞脱颗粒，细胞指数上升较空白组高而低于BSA-IgE组，20.00μM银杏酸(C13:1)同样可以抑制因肥大细胞脱颗粒引起的细胞指数上升。说明20.00μM银杏酸(C13:1)可以明显抑制DNP-BSA引起的RBL-2H3细胞脱颗粒。
银杏酸(C13:0)对RBL-2H3细胞毒性分析结果如图12所示。银杏酸(C13:0)在0.25-20.00μM浓度范围内对RBL-2H3细胞无明显毒性作用。
实施例5、银杏酸(C15:1)的提取及中药活性化合物制剂的制备与应用
一、银杏酸(C15:1)的提取及中药活性化合物制剂的制备
1、银杏酸(C15:1)的提取
(1)取白果药材(购自安徽亳州药材市场，经鉴定为银杏科植物银杏Ginkgobiloba L.的干燥成熟种子)干燥粉末600g，加入10倍量石油醚(30-60℃)，然后在45℃水浴条件下回流提取3次，每次1h，合并滤液，最后减压浓缩至干(旋转蒸发仪N-1001，上海爱郎仪器有限公司)，得到白果粗提物。
(2)取30g白果粗提取溶解于90mL的90％乙醇中，得到溶解液；将溶解液上小孔吸附树脂(MCI GEL CHP20P，日本三菱)进行纯化，用2L的90％乙醇洗脱，收集洗脱液，并浓缩至无醇味，得到浓缩液；用甲醇溶解浓缩液，采用制备液相色谱仪(岛津LC-6AD型)对浓缩液进行分离，Agilent C18半制备柱，检测波长为310nm，流动相：乙腈-0.4％TFA溶液(85:15)，流速10mL/min，柱温：35℃。取保留时间为20分钟的色谱峰，即得银杏酸(C15:1)。
2、中药活性化合物制剂的制备
取2g步骤一中制备的银杏酸(C15:1)，加入8g聚乙二醇-6000(PEG-6000，国药集团化学试剂有限公司)加热熔融，化料后移至滴丸滴灌中，药液滴至6-8℃液体石蜡冷凝剂中，静置30min后收集滴丸，用毛边纸吸去冷凝液，干燥，即得中药活性化合物制剂。
二、中药活性化合物制剂在抑制Syk活性中的应用
将实施例1步骤一中的银杏酸(C15:1)替换为中药活性化合物制剂，且保持其他步骤不变，检测中药活性化合物制剂的Syk抑制活性。
结果表明：中药活性化合物制剂的Syk抑制活性与银杏酸(C15:1)无显著性差异。
三、中药活性化合物制剂在抑制肥大细胞脱颗粒中的应用
将实施例2步骤一中的银杏酸(C15:1)替换为中药活性化合物制剂，且保持其他步骤不变，检测中药活性化合物制剂的抑制肥大细胞脱颗粒活性。
结果表明：中药活性化合物制剂的肥大细胞脱颗粒抑制活性与银杏酸(C15:1)无显著性差异。
Claims (3)
1.银杏酸或其制剂在如下1）-3）中任一种中的应用：
1）制备抑制脾酪氨酸激酶活性的产品；
2）制备抑制肥大细胞脱颗粒的产品；
3）制备预防和/或治疗过敏性疾病的产品；
所述过敏性疾病为过敏性哮喘或过敏性鼻炎；
所述银杏酸为银杏酸C15:1或银杏酸C13:0。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述银杏酸C15:1从中药材中提取得到。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述中药材为白果。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710599259.6A CN107184617B (zh) | 2017-07-21 | 2017-07-21 | 银杏酸在制备预防和/或治疗过敏性疾病的产品中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710599259.6A CN107184617B (zh) | 2017-07-21 | 2017-07-21 | 银杏酸在制备预防和/或治疗过敏性疾病的产品中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107184617A CN107184617A (zh) | 2017-09-22 |
| CN107184617B true CN107184617B (zh) | 2020-10-02 |
Family
ID=59884562
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710599259.6A Active CN107184617B (zh) | 2017-07-21 | 2017-07-21 | 银杏酸在制备预防和/或治疗过敏性疾病的产品中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107184617B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108904686A (zh) * | 2018-09-04 | 2018-11-30 | 天津太平洋制药有限公司 | 一种预防哮喘的中药制剂及其制备工艺 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62205028A (ja) * | 1986-03-06 | 1987-09-09 | Daicel Chem Ind Ltd | イチヨウ抽出物入り健康飲料 |
| US6030621A (en) * | 1998-03-19 | 2000-02-29 | De Long; Xie | Ginkgo biloba composition, method to prepare the same and uses thereof |
| CN102319272B (zh) * | 2011-08-18 | 2013-12-11 | 王青 | 银杏酚酸在制备治疗皮肤病的外用制剂中的用途 |
-
2017
- 2017-07-21 CN CN201710599259.6A patent/CN107184617B/zh active Active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 银杏外种皮中酸性成分的提取与药用探讨;赵成林;《中草药》;19971231;第28卷(第4期);第250页第1节第1段以及第251页3.3段 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107184617A (zh) | 2017-09-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Srivastava et al. | Inhibition of human cervical cancer cell growth by ethanolic extract of Boerhaavia diffusa Linn.(punarnava) root | |
| CN102854281B (zh) | 一种无糖型强力枇杷露的检测方法 | |
| Jong et al. | Using LC/MS/MS to determine matrine, oxymatrine, ferulic acid, mangiferin, and glycyrrhizin in the Chinese medicinal preparations Shiau-feng-saan and Dang-guei-nian-tong-tang | |
| Xu et al. | Analgesic effect of the main components of Corydalis yanhusuo (yanhusuo in Chinese) is caused by inhibition of voltage gated sodium channels | |
| CN103028065B (zh) | 一种紫香益母制剂及其制备方法和检测方法 | |
| CN102397342B (zh) | 一种金荞麦提取物，含其制剂及其制备方法 | |
| CN107184617B (zh) | 银杏酸在制备预防和/或治疗过敏性疾病的产品中的应用 | |
| CN101843667B (zh) | 一种双黄连药物组合物及其制备方法 | |
| CN105646611B (zh) | 一种二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷及其用途 | |
| CN100363029C (zh) | 一种中药制剂的质量控制方法 | |
| Liang et al. | A combined HPLC-PDA and HPLC-MS method for quantitative and qualitative analysis of 10 major constituents in the traditional Chinese medicine Zuo Gui Wan | |
| CN100491364C (zh) | 蒲公英中的倍半萜内酯及其抗格兰氏阳性菌的用途 | |
| CN102775375B (zh) | 一种色酮类化合物及制备方法、应用以及所制备的抗艾滋病药物组合物和制剂 | |
| CN101766664B (zh) | 一种岗梅总皂苷提取物的检测方法 | |
| CN103739652A (zh) | 一种新的23,29-降齐墩果烷酸化合物及其制备方法和在制备糖苷酶抑制剂药物中的用途 | |
| Liu et al. | Screening and analyzing potential hepatotoxic compounds in the ethanol extract of Asteris Radix by HPLC/DAD/ESI-MSn technique | |
| CN101575636A (zh) | 一种筛选磷酸二酯酶(pde)抑制剂的方法 | |
| Song et al. | Elucidation for the pharmacological effects and mechanism of Shen Bai formula in treating myocardial injury based on energy metabolism and serum metabolomic approaches | |
| Manogar et al. | Evaluation of antioxidant and neuroprotective activities of Lyngbya majuscula on human neural tissues | |
| CN107050010A (zh) | 菊苣酸在制备抗呼吸道合胞病毒的药物中的应用 | |
| Yew et al. | Tannic acid-rich porcupine bezoars induce apoptosis and cell cycle arrest in human colon cancer cells | |
| CN110623962A (zh) | 2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用 | |
| CN109464488A (zh) | 金银花总黄酮及其制备方法和应用 | |
| Ford-Hutchinson et al. | Leukotriene B: a potent mediator of leucocyte function released from polymorphonuclear leucocytes | |
| CN101176755B (zh) | 槲皮素-7-o-葡萄糖甙在柘木或其制剂检测方法中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |