CN107079855A - 一种高密度水蛭饲养方法及其专用微生态制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种高密饲养水蛭的专用微生态制剂及其对应的饲养方法;所述微生态制剂为枯草芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母经培养后,获得,根据比例混合活菌菌液得到水蛭专用微生态制剂;本发明解决了水蛭高密度饲养过程中产生的污染严重、水蛭疾病多、死亡率高、产量底下等问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种水蛭饲养方法,更具体的说涉及一种高密度水蛭饲养方法及其专用微生态制剂。
技术背景
水蛭(Leech)又名蚂蟥、马鳖,为蛭纲动物,首载于《神农本草经》,历代本草均有记载,其味咸、苦,性平,有毒,具有破血逐瘀通经之功效,在临床中主要用于治疗心血管疾病、高脂血症、妇科、男科、内科等疾病。由于水蛭具有较高的药用价值和经济价值,市场需求量持续增长,但近年来由于野生水蛭受农药、化肥、工业废弃物等的污染影响,再加上人为大量捕捉,野生资源日益枯竭,水蛭已成为世界性的紧俏中药材之一,供需矛盾尤为突出,价格也直线攀升。
人工养殖是解决市场水蛭药材紧缺的最有效途径。近年来全国各地陆续兴起水蛭养殖的热潮,但人工养殖存在诸多问题,首先集约化程度不高,产量较低。其次,集中饲养的水蛭病害频繁发生,养殖水体环境的迅速恶化,死亡率较高。再次,水蛭养殖环节中产生的养殖废水任意排放,污染天然水域及地表水。目前主要采用广谱抗生素来控制水蛭养殖病害的发生,然而过度使用抗生素类药物不仅使病菌的耐药性增强,而且还会干扰或抑制养殖环境中有益微生物菌群的正常生长,引起微生态平衡失调,产生二次污染和内源性感染。因此,在水蛭养殖过程中,寻求一种能解决集约化、高效化的生态、环保养殖方法迫在眉睫。
发明内容
为了提高水蛭养殖效率和养殖户的经济收入,解决水蛭养殖环节中抗生素滥用、水体污染严重、死亡率高等凸显问题,本发明提供了一种水蛭养殖专用微生态制剂,所述微生态制剂为枯草芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母经培养后获得,根据一定比例混合活菌菌液得到水蛭专用微生态制剂。
所述的水蛭专用微生态制剂的制备方法,包括以下步骤:
1)将枯草芽孢杆菌按1%比例接入LB培养液中,37℃培养24h,得到枯草芽孢杆菌活菌菌液;
2)将乳酸杆菌按1%比例接入MRS培养液中,放入厌氧罐中37℃培养24h,得到乳酸杆菌活菌菌液;
3)将产朊假丝酵母、酿酒酵母分别按1%比例接入LB培养液中,37℃培养24h,分别得到产朊假丝酵母活菌菌液和酿酒酵母活菌菌液;
4)将枯草芽孢杆菌活菌菌液、乳酸杆菌活菌菌液、产朊假丝酵母活菌菌液和酿酒酵母活菌菌液根据菌株数2:1:1:1的比例混合,加水调整菌群浓度为每mL有活菌0.1-0.2亿个,制备得到水蛭专用微生态制剂。
一种高密度水蛭饲养方法,包括以下步骤:
1)将水池底用进行了防止渗漏的水池作为养殖水蛭的水域,水深60-100cm,在底部放置水蛭附着、栖息的杂物,水池的顶部设置遮阴的装置,水池的四周设置≦80目的防逃逸网;
2)根据每m2投放0.5L的量在水池中投放水蛭专用微生态制剂,每m2投放水蛭幼苗(1~2月龄)600-800尾,注意遮阴避免水温升高;
3)每隔15天,以每m2投放0.5-1.0kg的量向水池中投放淡水贝类(非吸血水蛭)、血块(吸血水蛭)作为水蛭的食物;
4)每隔15天,向水池中投放一次水蛭专用微生态制剂,投放的量为每m2投放0.2L,平均水温高于25℃的月份每m2投放0.5L。
本发明的有益技术效果是:本发明提高了一种适用于高密饲养水蛭的专用微生态制剂及其对应的饲养方法;本发明解决了水蛭高密度饲养过程中产生的污染严重、水蛭疾病多、死亡率高、产量底下等问题。
具体实施方式
实施例1水蛭专用微生态制剂的制备
1.产朊假丝酵母(Candida utilis)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的制备:按1%比例将产朊假丝酵母和酿酒酵母种接入土豆培养液中,35℃培养24h。按照微量计数法,无菌操作取酵母菌液0.5ml,加入4.5ml灭菌生理盐水中,振荡混匀,即为10-1倍稀释,再取10-1倍稀释0.5ml加入4.5ml灭菌生理盐水中混匀,即为10-2倍稀释,依次稀释成10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8,然后用微量移液器分别吸取10-6、10-7、10-8三个稀释度的菌液10μl,点种于固体土豆培养基上,每个稀释度滴三次(三个重复),放于35℃恒温培养箱中培养24h,观察计数。(菌数CFU/ml=菌液菌落数平均值*稀释度*100)
2.乳酸菌(Lactobacillus casei):按1%比例将乳酸菌种接入MRS培养液中,放入厌氧罐中37℃培养24h计数,计数方法同酵母菌。
3枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的制备:按1%比例将枯草芽抱杆菌接入LB培养液中,37℃培养24h计数,计数方法同酵母菌。
4.将上述枯草芽孢杆菌活菌菌液、乳酸杆菌活菌菌液、产朊假丝酵母活菌菌液和酿酒酵母活菌菌液根据菌株数2:1:1:1的比例混合,加水调整菌群浓度为每ml有活菌0.1-0.2亿个,制备得到水蛭专用微生态制剂A组。
5.将上述枯草芽孢杆菌活菌菌液、乳酸杆菌活菌菌液、产朊假丝酵母活菌菌液和酿酒酵母活菌菌液根据菌株数4:1:1:1的比例混合,加水调整菌群浓度为每ml有活菌0.1-0.2亿个,制备得到水蛭专用微生态制剂B组。
6.将上述枯草芽孢杆菌活菌菌液、乳酸杆菌活菌菌液、产朊假丝酵母活菌菌液和酿酒酵母活菌菌液根据菌株数1:1:1:1的比例混合,加水调整菌群浓度为每ml有活菌0.1-0.2亿个,制备得到水蛭专用微生态制剂C组。
实施例2不同水蛭专用微生态制剂对水蛭饲养的影响
1、水蛭饲养条件
选择基础条件基本相同的5个水池,根据水蛭的生活习性,在养殖水域底部放置杂物如石块、砖块、树枝、毛竹梢等,以供水蛭附着、栖息,水池的顶部设置遮阴装置。水深保持在60~100厘米。水池的四周设置≦80目的防逃网。
2、水蛭苗投放
(1)任意一个水池作为实验组A,根据每m2投放0.5L的量在水池中投放实施例1制备的水蛭专用微生态制剂A,每m2投放水蛭苗800尾,注意遮阴避免水温升高。每过15d向水池中投放一次水蛭专用微生态制剂A,投放的量为每m2投放0.2L,平均水温高于25℃的月份每m2投放0.5L。
(2)任意一个水池作为实验组B,根据每m2投放0.5L的量在水池中投放实施例1制备的水蛭专用微生态制剂B,每m2投放水蛭苗700尾,注意遮阴避免水温升高。每过15d向水池中投放一次水蛭专用微生态制剂B,投放的量为每m2投放0.2L,平均水温高于25℃的月份每m2投放0.5L。
(3)任意一个水池作为实验组C,根据每m2投放0.5L的量在水池中投放实施例1制备的水蛭专用微生态制剂C,每m2投放水蛭苗700尾,注意遮阴避免水温升高。每过15d向水池中投放一次水蛭专用微生态制剂C,投放的量为每m2投放0.2L,平均水温高于25℃的月份每m2投放0.5L。
(4)任意一个水池作为作为空白组,每m2投放水蛭苗600尾,注意遮阴避免水温升高。不使用任何微生态制剂,其它条件与实验组A、B、C相同。
3、水蛭的饲养和管理
当年3~5月,将实验组A、B、C与空白组每组水蛭每隔15d以每m2投放0.5-1.0kg的量向水池中投放淡水贝类或动物血块作为水蛭的食物;淡水贝类如田螺、福寿螺等,血块如猪血、鸭血或鸡血等。
在投喂操作中,螺蛳在投喂前要求先清洗,然后进行满池投放。对5厘米以下的小水蛭,只能投喂黄豆大小的活幼螺,或者投一种薄壳活螺蛳,如椎实螺等。如果要投大螺蛳给20日龄内的小水蛭吃,必须把螺壳敲碎,否则小水蛭会被螺蛳厣压伤或夹死。为防止小水蛭吃不到螺肉,也可将碎螺满池投放。一般非活体饵料要投在食台上,食台固定在水中,制作方法同一般的养鱼池食台。投喂时间是下午5-6时。
水温调控。水蛭生长适宜的水温为15~30℃,10℃以下停止吃食,35℃以上停止生长,因此,要重视防高温和防低温。高温时可采取搭遮阳棚防暑,低温时可覆盖塑料薄膜保温以延长其生长期。
4、不同微生态制剂对水蛭饲养的影响
分别在当年的6、8、10月对实验组A、B、C和空白组的水池水质及水蛭生长情况进行考察。水池水质情况如表1所示。投放后200d统计水蛭的生长情况如表2所示。
表1高密度水蛭饲养对水质的影响
从表1的数据可知,采用水蛭专用微生态制剂A、B、C均能够有效的改善水质,尤其是在夏季,水体pH值呈现中性或微酸性,水色以黄褐色、淡绿色,较空白组更加适合水蛭的生长,其中,水蛭专用微生态制剂A的效果最佳。同时观察池底的有机物分解效果较好,能够有效的请除池塘底部的残饵。
表2不同生长时期水蛭的生长状况考察
组别 | 实验组A | 实验组B | 实验组C | 空白组 |
存活率/% | 89.5 | 81.4 | 77.5 | 65.6 |
平均体重/g | 65.2 | 55.3 | 61.7 | 57.8 |
从表1的数据可知,采用采用水蛭专用微生态制剂A、B、C均能够有效的提高水蛭的存活率。同时,能够提高单位面积内水蛭的养殖数量。
Claims (3)
1.一种水蛭专用微生态制剂,其特征在于:所述微生态制剂为枯草芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母经培养后,获得,根据比例混合活菌菌液得到水蛭专用微生态制剂。
2.根据权利要求1所述的水蛭专用微生态制剂的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)将枯草芽孢杆菌活菌菌液按1%比例将枯草芽抱杆菌接入LB培养液中,37℃培养24h,得到枯草芽孢杆菌活菌菌液;
2)将乳酸杆菌按1%比例接入MRS培养液中,放入厌氧罐中37℃培养24h,得到乳酸杆菌活菌菌液;
3)将产朊假丝酵母、酿酒酵母分别按1%比例接入LB培养液中,37℃培养24h,分别得到产朊假丝酵母活菌菌液和酿酒酵母活菌菌液;
4)将枯草芽孢杆菌活菌菌液、乳酸杆菌活菌菌液、产朊假丝酵母活菌菌液和酿酒酵母活菌菌液根据菌株数2:1:1:1的比例混合,加水调整菌群浓度为每mL有活菌0.1-0.2亿个,制备得到水蛭专用微生态制剂。
3.一种高密度水蛭饲养方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)将水池底用进行了防止渗漏的水池作为养殖水蛭的水域,水深60-100cm,在底部放置水蛭附着、栖息的杂物,水池的顶部设置遮阴的装置,水池的四周设置≦80目的防逃逸网;
2)根据每m2投放0.5L的量在水池中投放水蛭专用微生态制剂,每m2投放1~2月龄的水蛭幼苗600-800尾,注意遮阴避免水温升高;
3)每隔15天,以每m2投放0.5-1.0kg的量向水池中投放淡水贝类、血块作为水蛭的食物;
4)每隔15天,向水池中投放一次水蛭专用微生态制剂,投放的量为每m2投放0.2L,平均水温高于25℃的月份每m2投放0.5L。
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CN101629157A (zh) * | 2009-08-06 | 2010-01-20 | 江苏省江大绿康生物工程技术研究有限公司 | 一种用于净化水质的复合微生态制剂 |
CN102232474A (zh) * | 2011-04-15 | 2011-11-09 | 北京康华远景科技有限公司 | 水产动物用抗病促生长剂及其制备方法 |
CN104920273A (zh) * | 2015-07-10 | 2015-09-23 | 荆州市南欣商贸有限公司 | 一种水蛭生态化围网养殖方法 |
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2017
- 2017-04-26 CN CN201710281910.5A patent/CN107079855A/zh active Pending
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