CN107056762A - 一种用作抗流感病毒的双羰基类似物 - Google Patents

一种用作抗流感病毒的双羰基类似物 Download PDF

Info

Publication number
CN107056762A
CN107056762A CN201611200068.XA CN201611200068A CN107056762A CN 107056762 A CN107056762 A CN 107056762A CN 201611200068 A CN201611200068 A CN 201611200068A CN 107056762 A CN107056762 A CN 107056762A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
amino
alkyl
influenza
neighbouring
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201611200068.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN107056762B (zh
Inventor
吴勇
朱义
海俐
王茜
王一茜
王乾韬
李�杰
金辉
齐庆蓉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sichuan Baili Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Sichuan Baili Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sichuan Baili Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Sichuan Baili Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN201611200068.XA priority Critical patent/CN107056762B/zh
Publication of CN107056762A publication Critical patent/CN107056762A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107056762B publication Critical patent/CN107056762B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D261/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings
    • C07D261/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D261/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D261/08—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Abstract

本文阐述了一种结构通式为（I）的一类化合物，或其在药学上可接受的盐，其中异恶唑5元杂环为具有邻近‑Ar取代基或邻近‑Ar取代基的连接点5元异恶唑杂环；Ar为芳基或者杂芳基；R为‑CH或者‑N；n为链长0‑1个碳原子；X为 ‑F,‑Cl,‑Br,‑CF3,‑CF2H；Y为‑NO2，‑Cl,‑Br,‑CHO,‑CN；Z为 ‑CH或者‑N；W为‑CH或者‑N。本文还提供了制备式I化合物的方法，和式I化合物作为药物和在预防和抗流感病毒中的用途。

Description

一种用作抗流感病毒的双羰基类似物
技术领域
本发明涉及用于预防和治疗流感病毒的一类化合物和涉及含有这些化合物的组合物和制剂。具体涉及如结构式I的一类化合物及其制备方法和在抗流感病毒中的用途。
背景技术
流感病毒（influenza virus）为人类急性下呼吸道感染的重要病原体，包括人流感病毒和动物流感病毒，它是由正粘病毒（orthomyxoviridae）科的RNA病毒引起的，极易在哺乳动物和鸟类当中进行传播导致流行，每年都有死亡的案例出现，对人类的健康造成了很大的威胁，也受到了越来越多的关注。人流感病毒主要分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，是流感的病原体，其中甲型流感病毒极易发生变异，多次引起世界性的大流行。其中，自从1900年以来在世界范围内造成了多次的大流行，导致至少5000万的人不幸丧生。例如1918-1919年世界上暴发了历史上最著名的严重流感大流行，灾难性的“西班牙流感”（H1N1甲型流感病毒）在全世界至少夺去了2000万-4000万人得性命，在这场流感之后，美国人的平均寿命下降了10年。1957年，暴发了“亚洲流感”(病毒类型H2N2)，流感两周后骚扰了亚洲的所有国家，接着又在澳洲、美洲和欧洲登陆，漫游了无数国家。此次全球仍然有200多万人遭遇厄运。随后的1968年7月，由甲型流感病毒(H3N2)所致的“香港流感”在香港大规模暴发，据统计，美国共有3.4万人因感染致死，整个伦敦很多人染病，需要大批志愿者进行护理。1977年1月，“俄罗斯流感”(病毒类型H1N1)在前苏联出现并流行，1997年，开始出现禽流感病毒(H5N1)，尽管该病毒很少感染人，但仍然夺去了18个人的生命，这些人大都与家禽有过直接接触。2003年，自从2003年以来，全球有400多例禽流感致死的病例。2009年4月，墨西哥、美国等多个国家和地区相继暴发甲型H1N1流感。众多的历史数据表明，流感病毒依然是全球健康和人类安全的主要威胁，对人类的影响深远，但是目前对流感病毒的标准疗法依然不足。
流感的最常见症状为发冷、发热、喉咙肌肉酸痛、严重头痛、咳嗽、身体虚弱等症状，其中喉咙痛、发热、咳嗽是最常见的症状，且流感加重之后，经常会引起肺炎，而肺炎对于一些儿童和老人来说是致命的。人们通常很容易将流感和感冒发生混淆，而流感是传染性很强的急性呼吸道传染病，病毒存在于病人的呼吸道中，在病人咳嗽、打喷嚏时经飞沫传染给别人，是比感冒更为严重的疾病。
流感一般10-50年就要爆发一次大的流行，给人类的身体健康带来了严重的威胁，也带来了巨大的经济损失。目前，基于小分子的抗病毒靶标主要有质子选择性M2离子通道和蛋白神经酰胺酶 (NA)。但是目前针对这两种靶点设计的药物其耐药性是很常见的，抗流感病毒药物的耐药性日益增加。几乎100%的2008流感病毒H1N1样品对神经酰胺酶抑制剂奥司他韦（达菲）耐药，大神多数的H3N2对金刚烷M2离子通道有耐药性，而且没有一种药物显示出对2010的H5N1禽流感病毒显示出有效的抗性。
因此，基于目前抗流感病毒药物的形势，市场上目前对新的预防和抵抗流感病毒药物有着很大的需求。我们的发明目标也是提供有效的治疗和预防病毒的感染，尤其是提供抵抗流感病毒感染的化合物，以及这些化合物的制备方法和这些化合物的使用方法。
发明内容
本发明的目的是公开下述结构通式I所示的一类全新的抗流感病毒化合物及这类化合物的制备方法和使用该化合物的抗病毒用途。
本发明提供了式I化合物或其在药学上可接受的盐。
其中
异恶唑5元杂环为具有邻近-Ar取代基或邻近-Ar取代基的连接点5元异恶唑杂环
Ar为芳基或者杂芳基；
R为-CH或者-N；
n代表链长为0-1个碳原子
X代表-F, -Cl, -Br, -CF3；
Y代表-NO2,-Cl, -Br, -CHO, -CN；
Z代表 -CH或者-N；
W代表 -CH或者-N；
特别的，在式I化合物的进一步实施方案中，优选的异恶唑5元杂环为具有邻近-Ar取代基或邻近-Ar取代基的连接点5元异恶唑杂环。
在本发明的一个优选实施方案中Ar优选自：
其中
L为H，卤素，氰基，羟基，氨基，烷基，烷氧基，烷基氨基或酰胺基；
M为H，卤素，氰基，羟基，氨基，烷基，烷氧基，烷基氨基或酰胺基；
Q为H，卤素，氰基，羟基，氨基，烷基，烷氧基，烷基氨基或酰胺基；
U为H，卤素，氰基，羟基，氨基，烷基，烷氧基，烷基氨基或酰胺基；
甚至更优选的Ar选自：
尤其优选的Ar为甲氧基、硫氧基、氟、氯或硝基取代的苯基。尤其优选的是Ar为甲氧基、硫氧基、氟、氯取代的苯基。
如以上阐述的那样，其中R优选为-CH或者-N。尤其优选的R为-N。
优选实施方案中，链长n为0-1个碳原子。尤其优选n为链长为0个碳原子。
取代基X为-F、 -Cl或 -CF3，更加优选为-F或-Cl。
取代基Y为-NO2、 -Cl或-Br，更加优选为-NO2或-Br。
优选实施方案中，其中Z为-CH或者-N。更为优选Z为-CH。
优选实施方案中，其中W为-CH或者-N。更为优选W为-CH。
根据以上的实施方案，优选的式I化合物，包括其药学上可接受的盐，包括以下：
。
本发明提供了一种药用组合物，包含一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物，其中所述化合物可以有效治疗或预防病毒感染。
包括上述任一所述的式I化合物和一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂在治疗或预防病毒感染中的用途。
附图说明
图1为不同孔板中阳性药物利巴韦林的重复性结果图。
图2为WY01细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图3为WY02细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图4为WY03细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图5为WY04细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图6为WY05细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图7为WY06细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图8为WY07细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图9为WY08细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图10为WY09细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图11为WY10细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图12为WY11细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图13为WY12细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图14为WY13细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图15为WY14细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。。
图16为WY15细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图17为WY16细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
图18为WY17细胞毒性及对流感病毒H1N1的抑制作用图。
具体实施方式
本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了互相排斥的特征和/或步骤以外，均可以以任何方式组合。
实施例1：本发明所述的式I衍生物中具有代表性的化合物结构如下：
WY-01 、
WY-02 、
WY-03 、
WY-04 、
WY-05 、
WY-06、
WY-07 、
WY-08、
WY-09 、
WY-10、
WY-11 、
WY-12、
WY-13、
WY-14 、
WY-15 、
WY-16、
WY-17。
实施例2：化合物1（WY-01）的合成
将化合物11a (100mg, 0.433mmol) 溶解于20ml吡啶中，加入加入84.7mg（0.764mmol）SeO2，回流反应3.5h。将反应液过滤，滤液减压浓缩，然后加入适量乙醚与1M HCl萃取，合并有机层，然后有机层用水洗2次，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到90.38mg浅黄色半固体12a。将12a (90.38mg, 0.346mmol) 和13a (95.90mg, 0.346mmol), EDCI (265.31mg,1.384mmol), DIEA (66.972mg, 0.519mmol) 溶解于15ml二氯甲烷中，然后室温搅拌2-4小时。加入水溶解，然后用二氯甲烷提取，合并有机层。然后有机层用水洗2遍，饱和食盐水洗1次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品。然后经柱层析分离得WY-01淡黄色固体130mg。收率为57.72%。 mp：182-184℃ 1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.78 (s,3H), 3.22-3.24 (m, 2H), 3.33-3.36 (m, 2H), 3.41 (br, s, 2H), 3.48-3.51 (m,2H), 3.78 (s, 3H), 6.98-7.00 (d, 1H), 7.09-7.11 (d, 1H), 7.39-7.41(dd, 1H),7.45-7.47 (dd, 1H)。
实施例3：化合物2（WY-02）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11b和13b。得到目标化合物WY-02为浅黄色固体。收率65.3%。mp：174-176℃。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.77 (s, 3H),3.11-3.14 (t, 2H), 3.22-3.24 (t, 2H), 3.40-3.42 (t, 2H), 3.50-3.52 (m, 2H),3.77 (s, 3H), 6.98-7.00 (d, 1H), 6.87-6.92 (m, 1H), 6.96-6.98 (d, 1H), 7.06-7.09 (m, 1H), 7.39-7.41 (dd, 1H), 7.92-7.95 (dd, 1H), 7.44-7.48 (dd, 1H),7.99-8.02 (dd, 1H)。
实施例4：化合物3（WY-03）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11c和13c。得到目标化合物WY-03为白色固体。收率62.4%。mp：176-178℃。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.76 (s, 3H),3.03-3.05 (t, 2H), 3.13-3.15 (t, 2H), 3.42-3.44 (t, 2H), 3.51-3.53 (m, 2H),3.77 (s, 3H), 6.97-7.01 (m, 2H), 7.05-7.09 (m, 1H), 7.38-7.40 (d, 1H), 7.44-7.48 (m, 1H), 8.09-7.12 (dd, 1H), 8.25-8.26 (dd, 1H)。
实施例5：化合物4（WY-04）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11d和13d。得到目标化合物WY-04为黄色固体。收率56.6%。mp：152-154℃。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.42 (s, 3H), 2.75(s, 3H), 2.92-2.95 (m, 2H), 3.13-3.15 (m, 2H), 3.22-3.25 (m, 2H), 3.41-3.47(m, 2H), 3.78 (s, 3H), 7.01-7.03 (d, 1H), 7.07-7.10 (m, 1H), 7.37-7.39 (d,1H), 7.47-7.50 (m, 1H), 8.09 (s, 1H)。
实施例6：化合物5（WY-05）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11e和13e。得到目标化合物WY-05为类白色半固体。收率61.6%。 1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.37 (s, 3H), 2.82 (s,3H), 2.97-2.99 (t, 2H), 3.12-3.15 (t, 2H), 3.36-3.39 (t, 2H), 3.57-3.59 (t,2H), 6.98-7.01 (d, 1H), 7.31-7.35 (m, 1H), 7.37-7.41 (m, 2H), 7.44-7.49 (m,1H), 8.11-8.14 (dd, 1H), 8.27 (d, 1H)。
实施例7：化合物6（WY-06）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11f 和13f。得到目标化合物WY-06为类白色半固体。收率67.7%。mp：145-147℃。 1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.78 (s,3H), 2.99-3.01 (t, 2H), 3.07-3.09 (t, 2H), 3.45-3.50 (m, 4H), 6.97-7.00 (d,1H), 7.46-7.53 (m, 5H), 8.08-8.11 (dd, 1H), 8.23-8.24 (d, 1H)。
实施例8：化合物7（WY-07）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11f 和13f。得到目标化合物WY-07为淡黄色固体。收率57.1%。mp：186-188℃。 1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.79 (s, 3H),3.00 (s, 2H), 3.19 (s, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.64 (s, 2H), 7.03-7.05 (d, 1H),7.33-7.37 (m, 1H), 7.41-7.43 (d, 1H), 7.59-7.60 (d, 1H), 8.09-8.11 (d, 1H),8.24 (s, 1H)。
实施例9：化合物8（WY-08）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11h 和13h。得到目标化合物WY-08为浅白色固体。收率63.9%。mp：146-148℃。 1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.79 (s, 3H),3.09-3.12 (t, 2H), 3.21-3.24 (t, 2H), 3.53-3.56 (t, 2H), 3.66-3.69 (t, 2H),7.03-7.06 (d, 1H), 7.14-7.18 (m, 1H), 7.28-7.32 (m, 1H), 7.48-7.52 (m, 1H),7.55-7.59 (m, 1H), 8.12-8.14 (dd, 1H), 8.28-8.29 (d, 1H)。
实施例10：化合物9（WY-09）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11i 和13i。得到目标化合物WY-09为棕色半固体。收率46.2%。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.78 (s, 3H), 3.13-3.18 (m,4H), 3.53-3.55 (t, 2H), 3.65-3.67 (t, 2H), 7.02-7.04 (d, 1H), 7.58-7.60 (d,1H), 7.70-7.73 (m, 1H), 7.77-7.80 (m, 1H), 8.09-8.12 (dd, 1H), 8.25-8.26 (d,1H), 8.28-8.30 (d, 1H)。
实施例11：化合物10（WY-10）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11j 和13j。得到目标化合物WY-10为浅黄色半固体。收率62.7%。mp：92-94℃。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.75 (s, 3H),3.26-3.40 (m, 4H), 3.45-3.48 (m, 2H), 3.56-3.59 (m, 2H), 3.73-3.75 (m, 3H+2H), 6.94-6.97 (d, 1H), 6.99-7.02 (d, 1H), 7.03-7.07 (m, 1H), 7.36-7.39 (m,1H), 7.42-7.47 (m, 1H), 8.01-8.05 (m, 1H), 8.21-8.23 (d, 1H)。
实施例12：化合物11（WY-11）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11k 和13k。得到目标化合物WY-11为类白色固体。收率55.7%。mp：80-82℃。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.74 (s, 3H),3.34-3.37 (m, 2H), 3.50-3.56 (m, 2H), 3.58-3.63 (m, 2H), 3.73-3.78 (m, 3H+2H), 6.74-6.81 (d, 1H), 6.92-6.94 (d, 1H), 7.03-7.07 (m, 1H), 7.36-7.40 (m,1H), 7.42-7.46 (m, 1H), 7.88-7.90 (m, 1H), 7.93-7.96 (m, 1H)。
实施例13：化合物12（WY-12）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11l 和13l。得到目标化合物WY-12为类白色半固体。收率59.1%。mp：102-104℃。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.77 (s, 3H),3.32-3.34 (m, 2H), 3.37-3.43 (m, 4H), 3.57-3.60 (m, 2H), 3.63-3.68 (m, 2H),7.01-7.03 (d, 1H), 6.92-6.94 (d, 1H), 7.07-7.09 (m, 1H), 7.27-7.29 (m, 1H),7.46-7.54 (m, 2H), 8.03-8.05 (m, 1H), 8.24-8.25 (m, 1H)。
实施例14：化合物13（WY-13）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11m 和13m。得到目标化合物WY-13为深黄色半固体。收率52.1%。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 1.63-1.67 (m, 2H), 183-1.89 (m, 2H), 2.50-2.51 (m, 1H), 2.78 (s, 3H), 3.44-3.48 (m, 2H), 3.62-3.64(m, 2H), 7.03-7.05 (d, 1H), 7.32-7.36 (m, 1H), 7.41-7.43 (m, 1H), 7.56-7.60(m, 1H), 8.10-8.12 (m, 1H), 8.24-8.26 (d, 1H)。
实施例15：化合物14（WY-14）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11n 和13n。得到目标化合物WY-14为乳黄色半固体。收率53.5%。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 1.65-1.69 (m, 2H), 184-1.89 (m, 2H), 2.51-2.52 (m, 1H), 2.77 (s, 3H), 3.45-3.49 (m, 2H), 3.63-3.65(m, 2H), 3.78 (s, 3H), 7.02-7.04 (d, 1H), 7.34-7.38 (m, 1H), 7.42-7.44 (m,1H), 7.56-7.60 (m, 1H), 8.07-8.09 (m, 1H), 8.27-8.28 (d, 1H), 8.48-8.49(d,1H).
实施例16：化合物15（WY-15）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11o 和13o。得到目标化合物WY-15为黄色固体。收率50.1%。mp:84-86℃ 1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 1.65-1.69 (m,2H), 184-1.89 (m, 2H), 2.51-2.52 (m, 1H), 2.77 (s, 3H), 3.45-3.49 (m, 2H),3.63-3.65 (m, 2H), 7.02-7.06 (d, 1H), 7.15-7.18 (m, 1H), 7.28-7.32 (m, 1H),7.48-7.52 (m, 1H), 7.55-7.59 (m, 1H), 8.13-8.14 (dd, 1H), 8.29-8.31 (d, 1H)。
实施例17：化合物16（WY-16）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11p 和13p。得到目标化合物WY-16为白色固体。收率62.1%。mp:146-148℃ 1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 2.84 (s, 3H),3.07-3.09 (m, 5H), 3.14-3.16 (m, 2H), 3.38-3.39 (m, 2H), 3.54-3.55 (m, 2H),7.02-7.04 (d, 1H), 7.64-7.66 (d, 1H), 7.70-7.73 (m, 1H), 7.76-7.80 (m, 1H),8.09-8.14 (m, 2H), 8.23-8.24 (d, 1H)。
实施例18：化合物17（WY-17）的合成
制备方法类似于实施例1，但所用原料为11q 和13q。得到目标化合物WY-17为淡黄色固体。收率45.4%。mp:126-128℃。1HNMR {400 MHz, CDCl3(TMS), δ(ppm)}: 1.84-1.86 (m,2H), 1.98-199 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 314-3.16 (m, 2H), 3.42-3.45 (m, 4H),3.51-3.54 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 6.92-6.95 (d, 1H), 7.04-7.07 (m, 1H), 7.12-7.14 (d, 1H), 7.35-7.37 (dd, 1H), 7.42-7.46 (m, 1H), 8.03-8.06 (dd, 1H),8.24-8.25 (d, 1H)。
实施例19：抗病毒活性实验
1. 材料
1.1 毒株 甲型流感病毒（A/PR/8/34 H1N1），实验室传代保存。
1.2 细胞模型 狗肾细胞系MDCK, 本实验室传代保存。培养条件: DMEM+10%胎牛血清，37℃，5% CO2。
1.3 送试样品 自供样品，样品溶解的溶剂和浓度见表2。
2. 方法
2.1 药物的细胞毒性检测
采用了alamarBlue®（Invitrogen）试剂盒检测药物对细胞的毒性作用。
实验原理：alamarBlue® 是一种氧化还原指示剂，能根据代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。alamarBlue®易溶于水,其氧化形式进入细胞后经线粒体酶还原产生可测量的荧光及颜色变化，用于细胞活性和细胞增殖的定量分析以及体外细胞毒性研究。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力，受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性，对应的信号较低。因此荧光信号强弱，可以反映细胞活性的高低。
方法步骤：MDCK细胞接种于96孔细胞培养板中，细胞贴壁后备用。用细胞维持液（DMEM+2%血清）将药物从起始浓度连续3倍梯度稀释9个梯度，每梯度2个复孔。加药培养72h后，光镜下观察药物引起的细胞病变效应（CPE），加入alamarBlue®，37℃孵育2h，荧光检测alamarBlue®的还原情况，激发光570nm，发射光595nm。
细胞活性（%）=（样品孔-空白对照）/ （细胞对照-空白对照）* 100%
2.2 药物对流感病毒的抑制试验
鉴于基于病毒引起的细胞病变效应检测不够灵敏和不便于定量分析。 我们采用检测流感病毒神经氨酸酶活性来代表病毒的复制水平，是更为准确和可定量的方法。
实验原理：流感病毒神经氨酸酶（NA），又称唾液酸酶，是一种表面糖蛋白，具有酶活性，对A、B型流感病毒的复制有重要作用。它可以裂解细胞表面流感病毒受体末端的唾液酸残基，帮助子代病毒粒子的释放，并防止病毒粒子聚集，促进病毒的扩散。神经氨酸酶是抗流感病毒药物研发的重要靶点。本实验室采用MUNANA作为底物检测流感病毒NA活性。MUNANA（4-methylumbelliferyl-α-N-acetyl-neuraminate）是流感病毒NA的特异性底物，在NA作用下产生的催化产物在355nm激发光照射下，可以产生460nm荧光，荧光强度的变化，可以灵敏反映神经氨酸酶活性。病毒感染细胞并加药培养一定时间后，取培养液上清进行神经氨酸酶活性检测，在反应底物过量时，酶促反应的速度与酶浓度是呈正比的，所以根据此原理可以检测NA酶活来反映上清中病毒粒子的滴度
方法步骤：
（1）细胞铺板：将MDCK细胞接种于96孔细胞培养板中，37℃细胞培养箱中培养12～14h后备用。
（2）病毒感染细胞：
药物从2倍最高测试浓度起连续3倍梯度稀释9个梯度；将孔板中培养基弃去，同时加入药物和病毒液于细胞孔中，37℃细胞培养箱中孵育1h后，弃上清培养基，PBS洗涤后，再次加入梯度稀释药物。置于37℃细胞培养箱培养48h，辅以观察细胞病变（CPE）。取培养液上清进行神经氨酸酶活力检测。
筛选中设两个平行孔。实验设空白对照孔(正常细胞)，酶活对照孔（病毒感染后未加药物孔），阳性药物对照孔（感染后加利巴韦林）。
（3）神经氨酸酶活性检测：
实验操作：96孔黑色微量板中加入20µL底物（MUNANA），吸取病毒培养液40µL上清加入孔板中，避光置于37℃孵育60min，加入100µL终止液/孔终止反应，多功能检测仪上测定荧光值。激发波长为：355nm，发射波长485nm。计算各检测孔中NA被抑制率。
抑制率（%）=100 -（样品孔-空白对照）/ （酶活对照 - 空白对照）* 100%
3. 结果
3.1 药物样品对细胞的毒性检测及对神经氨酸酶抑制活性检测
药物样品稀释所用溶剂，最高溶解浓度，最高测试浓度， CC50，EC50以及SI(选择指数)如表2所示。
不同孔板中阳性药物利巴韦林的重复性如图1所示。图中显示阳性药物利巴韦林有较好的重复性。
表2 各药物样品实验结果
样品编号 溶剂 最高测试浓度（µg/ml） CC50（µm） EC50（µm） SI
WY-01 DMSO 10.42 11.183 9.572 1.17
WY-02 DMSO 20.83 ND 0.961 >46.29
WY-03 DMSO 20.83 ND ND -
WY-04 DMSO 125.00 ND ND -
WY-05 DMSO 20.83 ND 1.377 >29.98
WY-06 DMSO 125.00 ND 0.725 >382.50
WY-07 DMSO 125.00 ND 5.060 >47.21
WY-08 DMSO 10.42 ND ND -
WY-09 DMSO 94.37 ND 3.847 >51.99
WY-10 DMSO 20.83 ND ND -
WY-11 DMSO 125 ND ND -
WY-12 DMSO 20.83 ND ND -
WY-13 DMSO 13.07 ND 4.647 >5.38
WY-14 DMSO 96.78 15.27 0.740 20.63
WY-15 DMSO 47.19 ND 24.906 >4.02
WY-16 DMSO 106.59 ND 5.278 >37.89
WY-17 DMSO 102.59 ND 2.490 >80.32
Ribavirin DMSO 175µM ~199.6µM 31.31µM 6.37
“ND”：表示未检测到明显细胞毒性； 未检测到病毒抑制活性；
“-”：表示无选择指数。
上述实验结果证明：化合物的活性已经达到较高水平，本发明所述的式I衍生物中具有代表性的化合物有显著的抗病毒活性。
本发明并不局限于前述的具体实施方式。本发明扩展到任何在本说明书中披露的新特征或任何新的组合，以及披露的任一新的方法或过程的步骤或任何新的组合。

Claims (23)

1.结构通式I 所示的一类化合物,包括其在药学上可接受的盐：
其中，
异恶唑5元杂环为具有邻近-Ar取代基或邻近-Ar取代基的连接点5元异恶唑杂环
Ar为芳基或者杂芳基；
R为-CH或者-N；
n代表链长为0-1个碳原子
X代表-F, -Cl, -Br, -CF3；
Y代表-NO2,-Cl, -Br, -CHO, -CN；
Z代表 -CH或者-N；
W代表 -CH或者-N。
2.根据权利要求1中的化合物，异恶唑5元杂环为具有邻近-Ar取代基或邻近-Ar取代基的连接点5元异恶唑杂环。
3.根据权利要求1中的化合物，其中Ar选自
中的一种
其中
L为H，卤素，氰基，羟基，氨基，烷基，烷氧基，烷基氨基或酰胺基；
M为H，卤素，氰基，羟基，氨基，烷基，烷氧基，烷基氨基或酰胺基；
Q为H，卤素，氰基，羟基，氨基，烷基，烷氧基，烷基氨基或酰胺基；
U为H，卤素，氰基，羟基，氨基，烷基，烷氧基，烷基氨基或酰胺基。
4.根据权利要求3中的化合物，其中Ar为苯基。
5.根据权利要求4中的化合物，其中Ar为甲氧基、硫氧基、氟、氯或硝基取代的苯基。
6.根据权利要求1中的化合物，其中R为-CH或者-N。
7.根据权利要求1中的化合物，其中n为链长为0-1个碳原子。
8.根据权利要求1中的化合物，其中X为-F, -Cl, -CF3。
9.根据权利要求1中的化合物，其中Y为-NO2, -Cl, -Br。
10.根据权利要求1中的化合物，其中Z为-CH或者-N。
11.根据权利要求1中的化合物，其中W为 -CH或者-N。
12.根据权利要求1中的化合物，其中Ar选自
中的一种。
13.根据权利要求12中的化合物，其中Ar为苯基。
14.根据权利要求13中的化合物，其中Ar为甲氧基、硫氧基、氟或氯取代的苯基。
15.根据权利要求6中的化合物，其中R为-N。
16.根据权利要求7中的化合物，其中n为链长为0个碳原子。
17.根据权利要求8中的化合物，其中X为-F或 -Cl。
18.根据权利要求9中的化合物，其中Y为-NO2或 -Br。
19.根据权利要求10中的化合物，其中Z为-CH。
20.根据权利要求11中的化合物，其中W为-CH。
21.根据以上的权利要求，一种结构通式I 所示的一类化合物或其在药学上可接受的盐，其特征在于所述化合物选自
。
22.一种药用组合物，包含一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物，其中所述化合物以有效治疗或预防病毒感染的量存在。
23.一种用于治疗感染流感病毒的哺乳动物的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物抗病毒有效量的如在权利要求1中要求的式I化合物和一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
CN201611200068.XA 2016-12-22 2016-12-22 一种用作抗流感病毒的双羰基类似物 Active CN107056762B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611200068.XA CN107056762B (zh) 2016-12-22 2016-12-22 一种用作抗流感病毒的双羰基类似物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611200068.XA CN107056762B (zh) 2016-12-22 2016-12-22 一种用作抗流感病毒的双羰基类似物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107056762A true CN107056762A (zh) 2017-08-18
CN107056762B CN107056762B (zh) 2020-08-28

Family

ID=59619615

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201611200068.XA Active CN107056762B (zh) 2016-12-22 2016-12-22 一种用作抗流感病毒的双羰基类似物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107056762B (zh)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1953985A (zh) * 2004-03-15 2007-04-25 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 哌嗪和取代的哌啶抗病毒药物的前药
CN102596946A (zh) * 2009-08-05 2012-07-18 港大科桥有限公司 抗病毒化合物及其制备和使用方法
WO2012134967A2 (en) * 2011-03-25 2012-10-04 Bristol-Myers Squibb Company Three-dimensional structure of hin1 nucleoprotein in complex with antiviral compounds
CN103209977A (zh) * 2010-09-28 2013-07-17 百时美施贵宝公司 作为广谱抗流感病毒剂的带有取代的杂芳基的新的哌嗪类似物
CN103402998A (zh) * 2010-11-18 2013-11-20 耶鲁大学 具有募集抗体并对人体免疫缺陷病毒进入有抑制活性的双功能分子
CN104540810A (zh) * 2012-05-18 2015-04-22 维洛诺瓦公司 具有抗病毒活性的甲硫酮化合物

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1953985A (zh) * 2004-03-15 2007-04-25 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 哌嗪和取代的哌啶抗病毒药物的前药
CN102596946A (zh) * 2009-08-05 2012-07-18 港大科桥有限公司 抗病毒化合物及其制备和使用方法
CN103209977A (zh) * 2010-09-28 2013-07-17 百时美施贵宝公司 作为广谱抗流感病毒剂的带有取代的杂芳基的新的哌嗪类似物
CN103402998A (zh) * 2010-11-18 2013-11-20 耶鲁大学 具有募集抗体并对人体免疫缺陷病毒进入有抑制活性的双功能分子
WO2012134967A2 (en) * 2011-03-25 2012-10-04 Bristol-Myers Squibb Company Three-dimensional structure of hin1 nucleoprotein in complex with antiviral compounds
CN104540810A (zh) * 2012-05-18 2015-04-22 维洛诺瓦公司 具有抗病毒活性的甲硫酮化合物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张姝，等: "新型流感病毒核蛋白抑制剂nucleozin衍生物的设计合成及抗病毒活性", 《中国药物化学杂志》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN107056762B (zh) 2020-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103705511B (zh) N-[5-(1,2,4-三唑-1-基)噻唑-2-基]脂肪酰胺的医药用途
CN104774199B (zh) 2‑（2‑苄亚肼基）‑5‑（1，2，4‑三唑‑1‑基）噻唑及其制备与应用
Ju et al. Discovery of C-1 modified oseltamivir derivatives as potent influenza neuraminidase inhibitors
WO2024037520A1 (zh) 一种酰胺类化合物及其制备方法、药物组合物和用途
Han et al. Identification and structure–activity relationships of diarylhydrazides as novel potent and selective human enterovirus inhibitors
Liu et al. Discovery and optimization of new 6, 7-dihydroxy-1, 2, 3, 4-tetrahydroisoquinoline derivatives as potent influenza virus PAN inhibitors
CN106032365B (zh) 2‑(噻唑‑2‑基)亚氨基‑5‑亚苄基噻唑啉酮及其制备方法与应用
CN105640951B (zh) 不对称芳香二硫醚类化合物作为病毒3c蛋白酶抑制剂在制备抗病毒药物中的应用
CN107056762A (zh) 一种用作抗流感病毒的双羰基类似物
CN1990479A (zh) 3－烷氧取代－2,5,7－三取代苯并吡喃－4－酮类化合物及其制备方法和包含该类化合物的药物组合物
CN107200716A (zh) 苯并噁嗪类化合物及其制备方法与应用
CN103239446B (zh) 一种马来酸氯苯那敏在制备治疗或预防流感病毒药物中的应用
CN104447625A (zh) 苯甲酰胺类化合物或其药学上可接受的盐及其应用
CN102070565B (zh) 4-烷基-6-芳基-5-乙酰基-1,3-噻嗪及其制备方法与应用
WO2023285654A2 (en) Compounds for the treatment of covid-19
CN107827830B (zh) 一种奥司他韦衍生物及其制备方法与应用
CN103830233B (zh) 5-（1，2，4-三唑-1-基）-2-苯乙酰氨基噻唑的医药用途
CN103739599A (zh) 3-[[2-(2-苄亚肼基)噻唑-5-基]甲基]喹啉-2(1h)-酮及其制备与应用
CN106117187B (zh) 一种丙型肝炎病毒抑制剂、药物组合物及其应用
CN113754599B (zh) 一种吡嗪酰胺化合物及其制备方法
CN106317049B (zh) 2-[5-(氮唑-1-基)噻唑-2-亚氨基]-5-亚苄基-4-噻唑啉酮作为na抑制剂的应用
CN105985298B (zh) 2‑[(5‑卤噻唑‑2‑基)亚氨基]‑5‑亚苄基噻唑啉酮及其制备方法与应用
CN101665473B (zh) 取代苯丙烯基哌嗪基烷基多羟基苯甲酰胺化合物及其制备方法和应用
CN106432031A (zh) 苯甲酸三氮唑类抗流感病毒化合物及其制备方法和用途
CN109528722B (zh) 一种抑制流感病毒rna聚合酶活性的抗病毒药物分子及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant