CN107043372A - 一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用 - Google Patents

一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107043372A
CN107043372A CN201710311115.6A CN201710311115A CN107043372A CN 107043372 A CN107043372 A CN 107043372A CN 201710311115 A CN201710311115 A CN 201710311115A CN 107043372 A CN107043372 A CN 107043372A
Authority
CN
China
Prior art keywords
flavones
fluorescence probe
preparation
targetted mitochondria
hours
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710311115.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107043372B (zh
Inventor
刘斌
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenzhen University
Original Assignee
Shenzhen University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenzhen University filed Critical Shenzhen University
Priority to CN201710311115.6A priority Critical patent/CN107043372B/zh
Publication of CN107043372A publication Critical patent/CN107043372A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107043372B publication Critical patent/CN107043372B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
    • C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
    • C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
    • C09K2211/1029—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
    • C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
    • C09K2211/1088—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing oxygen as the only heteroatom

Abstract

本发明公开了一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用，所述黄酮荧光探针的化学结构式如下所示：；其中，R基团为甲基、乙基或正丁基。本发明靶向线粒体的黄酮荧光探针具有如下优点：（1）合成原料便宜，合成步骤少，纯化过程简单；（2）荧光性能稳定，抗离子干扰能力强，生物毒性低；（3）能够对线粒体靶向染色。本发明靶向线粒体的黄酮荧光探针有利于推动荧光成像技术在生命科学研究领域的使用。

Description

一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及荧光探针领域，尤其涉及一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用。
背景技术
线粒体是存在于大多数真核细胞中的细胞器，在众多重要的细胞活动过程中起到重要作用，例如能量供应、活性氧产生、信号传导、细胞分化和细胞死亡等。线粒体的形态不仅受细胞类型、细胞周期阶段和细胞内代谢状态的影响，其形态的变化也会对细胞的某些生理功能起到促进作用。值得注意的是，阿森海默氏病及癌症等重要人类疾病也会引起体内线粒体的形态或数量的异常。因此，开发出高效的靶向线粒体成像方法用以实时监控细胞内线粒体的形态和数量变化，对于了解细胞生物化学过程和早期诊断疾病具有重要的意义。
荧光探针技术对样本具有非破坏性、实时监控、高灵敏度和高时空分辨率的特点，因此特别适用于生物成像。目前为止，数种用于线粒体成像的荧光探针已经被开发并商用化，例如MitoTracker Green FM, MitoTracker Red CMXRos等。然而，大多数靶向线粒体荧光探针，特别是基于酞菁类或罗丹明类染料设计的荧光探针，价格昂贵，合成步骤复杂，生物毒性强，抗光漂白能力弱，难以满足现有生物成像的多样化需要。
因此，现有技术还有待于改进和发展。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用，旨在解决现有线粒体成像的荧光探针价格昂贵，合成步骤复杂，生物毒性强，抗光漂白能力弱的问题。
本发明的技术方案如下：
一种靶向线粒体的黄酮荧光探针，其中，所述黄酮荧光探针的化学结构式如下所示：
；其中，R基团为甲基、乙基或正丁基。
一种如上所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其中，包括：
步骤A、将4-（二R取代基氨基）-2-羟基苯甲醛溶于无水丙酮中，然后分别加入二溴丁烷和碳酸铯，室温下搅拌1-3小时，然后在40-60摄氏度下搅拌4-24小时，经提纯处理获得2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯甲醛；
步骤B、将2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基基氨基）苯甲醛与临羟基苯乙酮溶于乙醇中，然后滴加氢氧化钾溶液，室温搅拌10-14小时后，置于冰水浴条件下，滴加双氧水溶液并于室温下搅拌3-5小时后，用盐酸中和，静置22-26小时后，经提纯处理获得2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮；
步骤C、将 2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮溶于无水吡啶中，加热至80-100摄氏度后，搅拌2-48小时，然后冷却至0摄氏度，加入乙醚得到沉淀物，经提纯处理获得1-（4-（5-（二R取代基氨基）-2-（3-羟基-4-氧代-4H-色烯-2-基）苯氧基）正丁基）吡啶盐。
所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其中，所述步骤A中，所述4-（二R取代基氨基）-2-羟基苯甲醛、二溴丁烷和碳酸铯的摩尔比为1:（1-12）:（1-12）。。
所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其中，所述步骤A中的提纯处理过程具体为：减压蒸馏除去溶剂，获得的粗产品采用柱层析色谱分离，洗脱剂为正己烷和二氯甲烷的混合溶剂。
所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其中，所述步骤B中，所述2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基基氨基）苯甲醛和临羟基苯乙酮的摩尔比为1:1。
所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其中，所述步骤B中的提纯处理过程具体为：过滤，烘干，重结晶两次。
所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其中，重结晶所采用的溶剂为乙醇。
所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其中，所述步骤C中的提纯处理过程具体为：用乙醚冲洗沉淀物两次，干燥，获得粗产物，对粗产物进行柱层析分离。
所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其中，所述柱层析分离所采用的洗脱剂为二氯甲烷和乙醇的混合溶剂。
一种如上所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的应用，其中，将所述黄酮荧光探针对细胞线粒体进行荧光标记。
有益效果：本发明如上所述黄酮荧光探针具有性能稳定、抗离子干扰能力强和生物毒性低的特点，且所述黄酮荧光探针能够对线粒体靶向染色。
附图说明
图1为本发明实施例1的黄酮荧光探针FLMito的荧光稳定性测试结果图。
图2为本发明实施例1的黄酮荧光探针FLMito的抗离子干扰能力测试结果图。
图3为本发明实施例1的黄酮荧光探针FLMito的生物毒性测试结果图。
图4为本发明实施例1的黄酮荧光探针FLMito将细胞染色后的明场图。
图5为本发明实施例1的黄酮荧光探针FLMito将细胞染色后的荧光图。
具体实施方式
本发明提供了一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明提供了一种靶向线粒体的黄酮荧光探针，所述黄酮荧光探针的化学结构式如下所示：
；其中，R基团为甲基、乙基或正丁基。
本发明如上所述黄酮荧光探针具有性能稳定、抗离子干扰能力强和生物毒性低的特点，且所述黄酮荧光探针能够对线粒体靶向染色。
本发明还提供了一种如上所述靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，包括：
步骤A、将4-（二R取代基氨基）-2-羟基苯甲醛溶于无水丙酮中，然后分别加入二溴丁烷和碳酸铯，室温下搅拌1-3小时（如2小时），然后在40-60摄氏度（如50摄氏度）下搅拌4-24小时，经提纯处理获得2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯甲醛。
所述步骤A具体为：将50毫摩尔4-（二R取代基氨基）-2-羟基苯甲醛加入装有100-300毫升无水丙酮的500毫升圆底烧瓶中，待完全溶解后，向烧瓶中分别加入300毫摩尔的二溴丁烷和50-200毫摩尔碳酸铯。室温下搅拌1-3小时（如2小时），然后在40-60摄氏度（如50摄氏度）下搅拌4-24小时，减压蒸馏除去丙酮溶剂，获得的粗产品采用柱层析色谱分离，洗脱剂为正己烷和二氯甲烷的混合溶剂（混合体积比2:1），获得2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯甲醛。反应式如下：
；其中，R基团为甲基、乙基或正丁基。
优选地，上述步骤A中，无水丙酮的用量为300毫升，碳酸铯用量为50毫摩尔，50摄氏度下搅拌时间为12小时。
优选地，上述步骤A中，所述4-（二R取代基氨基）-2-羟基苯甲醛、二溴丁烷和碳酸铯的摩尔比为1:（1-12）:（1-12），如摩尔比为1:6:1。
步骤B、将2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基基氨基）苯甲醛与临羟基苯乙酮溶于乙醇中，然后滴加氢氧化钾溶液，室温搅拌10-14小时后，置于冰水浴条件下，滴加双氧水溶液并于室温下搅拌3-5小时后，用盐酸中和，静置22-26小时后，经提纯处理获得2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮。
所述步骤B具体为：将10毫摩尔2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基基氨基）苯甲醛与10毫摩尔临羟基苯乙酮加入装有150毫升的乙醇的圆底烧瓶中，搅拌至完全溶解。将10-100毫升氢氧化钾溶液（由30毫摩尔的氢氧化钾溶于50毫升去离子水配制获得）逐滴加入圆底烧瓶中，室温搅拌10-14小时（如12小时）至溶液颜色由浅黄色变为深红色。将圆底烧瓶置于冰水浴中，向烧瓶中逐滴加入5-40毫升质量分数为30%的双氧水，滴加完毕后室温下搅拌3-5小时（如4小时）。搅拌完毕后，利用稀盐酸将反应溶液的pH调至中性。反应液静置22-26小时，优选24小时后，将沉淀过滤收集，烘干，在劣溶剂中重结晶两次，获得2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮。反应式如下：
；其中，R基团为甲基、乙基或正丁基。
优选地，上述步骤B中，氢氧化钾溶液用量为50毫升，双氧水的用量为10毫升，重结晶所采用的溶剂为乙醇。
步骤C、将 2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮溶于无水吡啶中，加热至80-100摄氏度后，搅拌2-48小时，然后冷却至0摄氏度，加入乙醚得到沉淀物，经提纯处理获得1-（4-（5-（二R取代基氨基）-2-（3-羟基-4-氧代-4H-色烯-2-基）苯氧基）正丁基）吡啶盐。
所述步骤C具体为：将2毫摩尔的2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮溶于5-40毫升的无水吡啶中，加热至80-100摄氏度（如90摄氏度）后，搅拌2-48小时。搅拌完成后，将溶液冷却至零摄氏度，加入50毫升的乙醚，会有黄色沉淀生成。将沉淀用布氏漏斗收集，用10毫升的乙醚冲洗沉淀两次，干燥，获得粗产物。将粗产物用二氯甲烷和乙醇的混合溶剂为洗脱剂柱层析分离获得亮黄色固体，即1-（4-（5-（二R取代基氨基）-2-（3-羟基-4-氧代-4H-色烯-2-基）苯氧基）正丁基）吡啶盐，即为靶向线粒体黄酮荧光探针。反应式如下：
；
其中，R基团为甲基、乙基或正丁基。
优选地，上述步骤C中，所述无水吡啶的用量为15毫升，加热搅拌的时间为4小时，洗脱剂中二氯甲烷与乙醇的体积比为30：1。
本发明上述靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，合成原料便宜，合成步骤少，纯化过程简单。
本发明还提供一种如上所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的应用，其中，将所述黄酮荧光探针对细胞线粒体进行荧光标记。本发明黄酮荧光探针能够对线粒体靶向染色，可以用于对细胞线粒体进行荧光标记，有利于推动荧光成像技术在生命科学研究领域的使用。
下面通过实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
1、黄酮荧光探针FLMito的合成
步骤（1）、将50毫摩尔4-（二乙基氨基）-2-羟基苯甲醛加入装有300毫升无水丙酮的500毫升圆底烧瓶中，待完全溶解后，向烧瓶中分别加入300毫摩尔的二溴丁烷和50毫摩尔碳酸铯。室温下搅拌2小时，然后50摄氏度搅拌12小时，减压蒸馏除去丙酮溶剂，粗产品采用柱层析色谱分离，洗脱剂为正己烷和二氯甲烷混合溶剂（体积比2:1），获得2-（4-溴丁氧基）-4-（二乙基氨基）苯甲醛，产率为65%。反应式如下：
步骤（2）、将10毫摩尔2-（4-溴丁氧基）-4-（二乙基氨基）苯甲醛与10毫摩尔临羟基苯乙酮加入装有150毫升的乙醇的圆底烧瓶中，搅拌至完全溶解。将50毫升氢氧化钾溶液（由30毫摩尔的氢氧化钾溶于50毫升去离子水配制获得）逐滴加入圆底烧瓶中，室温搅拌12小时至溶液颜色由浅黄色变为深红色。将圆底烧瓶置于冰水浴中，向烧瓶中逐滴加入10毫升质量分数为30%的双氧水，滴加完毕后室温下搅拌4小时。搅拌完毕后，利用稀盐酸将反应溶液的pH调至中性。反应液静置24小时后，将沉淀过滤收集，烘干，在乙醇中重结晶两次，获得2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二乙基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮，产率为33%。反应式如下：
步骤（3）、将2毫摩尔的2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二乙基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮溶于15毫升的无水吡啶中，加热至90摄氏度后，搅拌4小时。搅拌完成后，将溶液冷却至零摄氏度，加入50毫升的乙醚，会有黄色沉淀生成。将沉淀用布氏漏斗收集，用10毫升的乙醚冲洗沉淀两次，干燥，获得粗产物。将粗产物用二氯甲烷和乙醇混合溶剂（体积比为30比1）为洗脱剂柱层析分离获得亮黄色固体，即1-（4-（5-（二乙基氨基）-2-（3-羟基-4-氧代-4H-色烯-2-基）苯氧基）正丁基）吡啶盐，即为靶向线粒体黄酮荧光探针FLMito。反应式如下：
2、黄酮荧光探针FLMito的荧光性能测试
将上述制备获得的黄酮荧光探针FLMito配制成黄酮荧光探针FLMito溶液（FLMito浓度为10微摩尔每升，溶剂为四氢呋喃），在400纳米激发光照射下，发出黄色荧光，最大荧光峰波长为565纳米。黄酮荧光探针FLMito的抗光漂白能力非常强，如图1所示，用100毫瓦的紫外灯（激发波长约为365纳米）连续照射FLMito溶液10分钟，FLMito的最大荧光强度仍然保持在初始值的90%以上，说明该黄酮荧光探针FLMito能够应用于长时细胞成像。
同时，为避免细胞内常见离子对黄酮荧光探针FLMito的荧光信号干扰，黄酮荧光探针FLMito溶液中分别加入50微摩尔的钠离子、钾离子、镁离子、钙离子、铁离子、铜离子、磷酸根离子和焦磷酸根离子，如图2所示，黄酮荧光探针FLMito的最大荧光强度基本保持不变，说明黄酮荧光探针FLMito的抗离子干扰能力强。
3、黄酮荧光探针FLMito的生物成像
低生物毒性是衡量荧光探针的生物实用性的重要指标之一，如图3所示，MTT比色法显示1微摩尔每升、5微摩尔每升和10微摩尔每升浓度的黄酮荧光探针FLMito在24小时内对内皮祖细胞几乎没有生物毒性，即细胞存活率>90%。将内皮祖细胞用5微摩尔每升的黄酮荧光探针FLMito染色20分钟后，如图4和图5所示，在400纳米激发光下，细胞释放出强烈的绿色荧光，荧光区域成线条状或丝状，很好对应了细胞线粒体的形态，说明细胞内的线粒体被成功染色。
综上所述，本发明提供了一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用，本发明的靶向线粒体的黄酮荧光探针具有性能稳定、抗离子干扰能力强和生物毒性低的特点。可以用于对细胞线粒体进行荧光标记，有利于推动荧光成像技术在生命科学研究领域的使用。并且本发明的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，合成原料便宜，合成步骤少，纯化过程简单。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (10)

1.一种靶向线粒体的黄酮荧光探针，其特征在于，所述黄酮荧光探针的化学结构式如下所示：
；其中，R基团为甲基、乙基或正丁基。
2.一种如权利要求1所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其特征在于，包括：
步骤A、将4-（二R取代基氨基）-2-羟基苯甲醛溶于无水丙酮中，然后分别加入二溴丁烷和碳酸铯，室温下搅拌1-3小时，然后在40-60摄氏度下搅拌4-24小时，经提纯处理获得2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯甲醛；
步骤B、将2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基基氨基）苯甲醛与临羟基苯乙酮溶于乙醇中，然后滴加氢氧化钾溶液，室温搅拌10-14小时后，置于冰水浴条件下，滴加双氧水溶液并于室温下搅拌3-5小时后，用盐酸中和，静置22-26小时后，经提纯处理获得2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮；
步骤C、将 2-（2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基氨基）苯基）-3-羟基-4H-色烯-4-酮溶于无水吡啶中，加热至80-100摄氏度后，搅拌2-48小时，然后冷却至0摄氏度，加入乙醚得到沉淀物，经提纯处理获得1-（4-（5-（二R取代基氨基）-2-（3-羟基-4-氧代-4H-色烯-2-基）苯氧基）正丁基）吡啶盐。
3.根据权利要求2所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤A中，所述4-（二R取代基氨基）-2-羟基苯甲醛、二溴丁烷和碳酸铯的摩尔比为1:（1-12）:（1-12）。
4.根据权利要求2所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤A中的提纯处理过程具体为：减压蒸馏除去溶剂，获得的粗产品采用柱层析色谱分离，洗脱剂为正己烷和二氯甲烷的混合溶剂。
5.根据权利要求2所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤B中，所述2-（4-溴丁氧基）-4-（二R取代基基氨基）苯甲醛和临羟基苯乙酮的摩尔比为1:1。
6.根据权利要求2所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤B中的提纯处理过程具体为：过滤，烘干，重结晶两次。
7.根据权利要求6所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其特征在于，重结晶所采用的溶剂为乙醇。
8.根据权利要求2所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤C中的提纯处理过程具体为：用乙醚冲洗沉淀物两次，干燥，获得粗产物，对粗产物进行柱层析分离。
9.根据权利要求8所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的制备方法，其特征在于，所述柱层析分离所采用的洗脱剂为二氯甲烷和乙醇的混合溶剂。
10.一种如权利要求1所述的靶向线粒体的黄酮荧光探针的应用，其特征在于，将所述黄酮荧光探针对细胞线粒体进行荧光标记。
CN201710311115.6A 2017-05-05 2017-05-05 一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用 Active CN107043372B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710311115.6A CN107043372B (zh) 2017-05-05 2017-05-05 一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710311115.6A CN107043372B (zh) 2017-05-05 2017-05-05 一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107043372A true CN107043372A (zh) 2017-08-15
CN107043372B CN107043372B (zh) 2019-11-26

Family

ID=59546158

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710311115.6A Active CN107043372B (zh) 2017-05-05 2017-05-05 一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107043372B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107652257A (zh) * 2017-09-13 2018-02-02 济南大学 一种双色区分成像的死活细胞荧光探针及其应用
CN109134545A (zh) * 2018-10-09 2019-01-04 深圳市第二人民医院 一种线粒体靶向荧光探针及其制备方法与应用
CN111995619A (zh) * 2020-08-06 2020-11-27 广州医科大学附属第二医院 一种靶向线粒体的硫氧还蛋白还原酶荧光探针及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105542754A (zh) * 2015-12-31 2016-05-04 深圳大学 一种黄酮基荧光分子探针及其制备方法与应用
CN106518857A (zh) * 2016-10-31 2017-03-22 湖南师范大学 一种线粒体靶向pH比率型荧光探针的制备方法和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105542754A (zh) * 2015-12-31 2016-05-04 深圳大学 一种黄酮基荧光分子探针及其制备方法与应用
CN106518857A (zh) * 2016-10-31 2017-03-22 湖南师范大学 一种线粒体靶向pH比率型荧光探针的制备方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MASAHIRO ONO ET AL.: "99mTc/Re complexes based on flavone and aurone as SPECT peobes for imaging cerebral ß-amyloid plaques", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS》 *
RANJAN DAS ET AL.: "Excited State Proton Transfer and Solvent Relaxation of a 3-Hydroxyflavone Probe in Lipid Bilayers", 《J. PHYS. CHEM. B》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107652257A (zh) * 2017-09-13 2018-02-02 济南大学 一种双色区分成像的死活细胞荧光探针及其应用
CN109134545A (zh) * 2018-10-09 2019-01-04 深圳市第二人民医院 一种线粒体靶向荧光探针及其制备方法与应用
CN109134545B (zh) * 2018-10-09 2020-10-30 深圳市第二人民医院 一种线粒体靶向荧光探针及其制备方法与应用
CN111995619A (zh) * 2020-08-06 2020-11-27 广州医科大学附属第二医院 一种靶向线粒体的硫氧还蛋白还原酶荧光探针及其制备方法和应用
CN111995619B (zh) * 2020-08-06 2022-02-25 广州医科大学附属第二医院 一种靶向线粒体的硫氧还蛋白还原酶荧光探针及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN107043372B (zh) 2019-11-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Shen et al. A rhodamine B-based lysosomal pH probe
Dong et al. A tumor-targeting and lysosome-specific two-photon fluorescent probe for imaging pH changes in living cells
Zhang et al. A ratiometric lysosomal pH probe based on the coumarin–rhodamine FRET system
Qu et al. Construction of a novel far-red fluorescence light-up probe for visualizing intracellular peroxynitrite
CN107849441A (zh) 用于癌症的可视化和治疗的aie发光体
Liu et al. A phthalimide-based fluorescent probe for thiol detection with a large Stokes shift
CN107043372B (zh) 一种靶向线粒体的黄酮荧光探针及其制备方法与应用
CN112159522B (zh) 一种水溶性罗丹明基荧光/比色双模式探针及其制备方法与应用
Zeng et al. A near-infrared fluorescent sensor with large Stokes shift for rapid and highly selective detection of thiophenols in water samples and living cells
CN111892923B (zh) 一种基于二腈乙烯基的双光子荧光粘度探针及其制备方法和用途
CN111285833A (zh) 一种检测onoo-的比率型荧光分子探针及其制备方法和应用
Qi et al. A red-emitting fluorescent probe for biothiols detection with a large Stokes shift
CN101149373A (zh) 检测汞离子的花菁染料荧光探针及合成方法和用途
CN108358814A (zh) 一种基于水杨酰腙衍生物的aie荧光探针及其制备方法、应用
CN110642882B (zh) 一种兼具双氧水检测和光动力杀伤癌细胞活性的荧光探针及其制备方法和应用
CN106632212A (zh) 一种检测细胞内半胱氨酸的荧光探针
Zhu et al. Modulation of ICT and PET processes in boranil derivatives: a ratiometric fluorescent probe for imaging of cysteine
CN101149374A (zh) 检测细胞内氢离子的荧光探针及合成方法和用途
CN110092773B (zh) 一种氧杂蒽类衍生物及其制备方法和应用
Guo et al. A novel two-channel ratio fluorescent probe for monitoring intracellular pH fluctuations
CN114874142A (zh) 基于1,8-萘酰亚胺衍生物的荧光探针及其制备方法和应用
Wang et al. Synthesis of a BODIPY–2-(2′-hydroxyphenyl) benzothiazole conjugate with solid state emission and its application as a fluorescent pH probe
CN102633789B (zh) 含有双罗丹明b的化合物及其制备方法与应用
CN109369565A (zh) 一种苯并噻唑衍生物及其制备方法和应用
CN111087362B (zh) 一种高选择性检测甲醛的荧光探针及其合成方法与应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant