CN107011293B - 百尾参中一种新化合物的制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及百尾参中一种新化合物的制备方法及应用，发明还涉及从中药百尾参中提取、分离、纯化本化合物的制备方法，药理研究表明该新化合物具有显著抑制脂多糖(LPS)引起的小鼠局势细胞RAW246.7小鼠巨噬细胞中IL‑1β，COX‑2和TNF‑αmRNA的表达水平，且多呈剂量依赖关系，表明本发明所述化合物具有明显的抗炎活性，可用于抗炎药物的制备。该制备方法简单易行，所得化合物纯度高，具有良好的经济效益和应用前景。

Description

百尾参中一种新化合物的制备方法及应用
技术领域
本发明涉及百尾参中一种新化合物的制备方法及应用,属于天然药物医药技术领域。
背景技术
百尾参为百合科(Liliaceae)万寿竹属(Disporum)植物万寿竹(Disporumcantoniense(Lour)Merr)的根及根茎，别名又叫白味参、百尾笋、白龙须。百尾参为多年生草本植物，其味甘、淡，性平。具有抗炎、镇痛、止咳的生物活性。我们对百尾参的化学成分及其生物活性进行了较为系统的研究，并对分离得到的化合物进行了抗炎活性的研究。本专利即首次报道了其中一个新化合物及其制备方法和抗炎活性。
发明内容
本发明的目的是对百尾参进行活性成分研究，提供一种具有抗炎活性的新的酚酸类化合物。
为实现上述目的，本发明的技术方案如下：
百尾参中一种新化合物，名称为：(3R,4S,5R)-3-羟基-4-甲氧基-2-(γ-内酯)-脱氧戊糖酸，其结构式如下：
百尾参中一种新化合物的制备方法，具体步骤为：
(1)提取：所用原料为百合科万寿竹属万寿竹的根及根茎，采自贵州安顺猫营镇，将干燥百尾参药材粉碎后，用75％乙醇溶液加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液，浓缩得总提取物；
(2)粗分：将上述提取所得总提取物，用水溶解后，经HP-20离子型交换树脂，分别以水、30％乙醇溶液、60％乙醇溶液、95％乙醇溶液洗脱，每个梯度洗脱三个保留体积，收集30％乙醇溶液洗脱部位，于60℃减压浓缩得粗提物；
(3)精制：上述得粗提物，30％乙醇洗脱部位总浸膏63g，加水溶解，滤过，滤液上样于中压MCI柱色谱，用10％、20％、30％、40％、50％的MeOH-H2O洗脱得到5个流分A～E，取C流分经过中压ODS反相柱色谱，用5％、10％、20％、50％MeOH-H2O洗脱，其中20％MeOH-H2O部位再经制备型HPLC制备，以体积比为5:95的甲醇-水为流动相，检测波长254nm，流速2ml/min，保留时间23min处制备得该化合物。
其中，步骤(1)所述的提取方法包括冷浸法、渗漉法、微波提取法、超声提取法、回流提取法和连续回流提取法。
本发明提供了百尾参中一种新化合物在制备抗炎药物中的应用。
本发明所提供的百尾参中一种新化合物，将化合物和药学上可接受的载体制备成片剂、胶囊剂、注射剂、粉针剂、颗粒剂、脂肪乳剂、微囊、滴丸、软膏剂或透皮控释贴剂等剂型。
本发明提供的百尾参中一种新化合物制备方法简单易行，所得化合物纯度高，具有良好的经济效益和应用前景。
附图说明
图1为本发明提供的百尾参中一种新化合物的结构示意图；
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
制备百尾参提取物
(1)提取：所用原料为百合科万寿竹属万寿竹的根及根茎，采自贵州安顺猫营镇，将干燥百尾参药材粉碎后，用75％乙醇溶液加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液，浓缩得总提取物；
(2)粗分：将上述提取所得总提取物，用水溶解后，经HP-20离子型交换树脂，分别以水、30％乙醇溶液、60％乙醇溶液、95％乙醇溶液洗脱，每个梯度洗脱三个保留体积，收集30％乙醇溶液洗脱部位，于60℃减压浓缩得粗提物；
(3)精制：上述得粗提物，30％乙醇洗脱部位总浸膏63g，加水溶解，滤过，滤液上样于中压MCI柱色谱，用10％、20％、30％、40％、50％的MeOH-H2O洗脱得到5个流分A～E，取C流分经过中压ODS反相柱色谱，用5％、10％、20％、50％MeOH-H2O洗脱，其中20％MeOH-H2O部位再经制备型HPLC制备，以体积比为5:95的甲醇-水为流动相，检测波长254nm，流速2ml/min，保留时间23min处制备得该化合物。
结构鉴定：主要利用光谱技术，包括紫外、红外、质谱、核磁共振(1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR)鉴定其结构，再经TOF高分辨质谱精确确定其分子量及分子式。命名为(3R,4S,5R)-3-羟基-4-甲氧基-2-(γ-内酯)-脱氧戊糖酸。分子式为C12H14O6，ESI-MS：254.0796[M-H]-.其波谱数据见表1。
表1.化合物1H-NMR(DMSO-d6，600MHz)和13C-NMR(DMSO-d6，150MHz)
实施例2
抗炎活性试验
将单体化合物作用于脂多糖(LSP)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞，通过检测RAW264.7细胞中IL-1β，COX-2和TNF-αmRNA的表达水平来检测其抗炎活性。
1、药物溶液的配制
(1)将单体化合物用DMSO配制成100μg/mL溶液，置于-4℃保存；
(2)脂多糖(lipopolysaccharide from Escherichia Coli E 0127:B8-purifiedby phenol extraction，LPS)，购自Sigma-Aldrich公司，货号：L3129，用重蒸水配制成100μg/mL溶液，-20℃保存。
2、细胞株:RAW264.7小鼠巨噬细胞，由中国科学研究院上海分院提供。
3、试验方法:
按常规复苏细胞并且传代培养，使用DMEM+10％PBS+1％双抗(青霉素、链霉素)的完全培养基，接种细胞到6孔细胞培养板，每孔细胞悬液2ml，细胞数为1.5×105个；每个化合物按每孔不同药物浓度分成2组，即100μg/mL和10μg/mL组，置于5％CO2培养箱于37℃培养48小时，加入LPS(终浓度为10ng/mL)，诱导4小时，每孔加入lml TRIzol试剂提取RNA，用RNA反转录试剂盒将RNA反转录为cDNA，用实时定量PCR方法(Real Time-PCR)进行IL-1β，COX-2和TNF-αmRNA的表达水平检测，对检测数据进行统计分析，以确定药物预处理对于LPS诱导的炎症反应是否具有抑制作用。结果如表2所示。
表2.化合物对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞中IL-1β，COX-2和TNF-αmRNA表达水平相对值的影响(平均值±方差)
注：**P<0.01；药物预处理组与DMSO+LSP组比较。
由表2数据可见，该化合物能显著抑制脂多糖(LSP)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7中IL-1β，COX-2和TNF-αmRNA的表达水平，且多呈剂量依赖关系，表明本发明所述化合物具有明显的抗炎活性。因此，可以用于制备新的抗炎活性药物。

Claims (5)

1.百尾参中一种化合物，其特征在于：名称为：(3R,4S,5R)-3-羟基-4-甲氧基-2-(γ-内酯)-脱氧戊糖酸，其结构式如下：
。
2.权利要求 1 所述的百尾参中一种化合物的制备方法，其特征在于：制备方法具体步骤为：
（1）提取：所用原料为百合科万寿竹属万寿竹的根及根茎，采自贵州安顺猫营镇，将干燥百尾参药材粉碎后，用75%乙醇溶液加热回流提取3次，每次2 小时，合并提取液，浓缩得总提取物；
（2）粗分：将上述提取所得总提取物，用水溶解后，经HP-20离子型交换树脂，分别以水、30%乙醇溶液、60%乙醇溶液、95%乙醇溶液洗脱，每个梯度洗脱三个保留体积，收集 30%乙醇溶液洗脱部位，于 60℃减压浓缩得粗提物；
（3）精制：上述得粗提物，30%乙醇洗脱部位总浸膏63g，加水溶解，滤过，滤液上样于中压 MCI 柱色谱，用 10%、20%、30%、40%、50%的 MeOH-H2O 洗脱得到5个流分A～E，取C流分经过中压ODS反相柱色谱，用5%、10%、20%、50%MeOH-H2O洗脱，其中20%MeOH-H2O部位再经制备型HPLC制备，以体积比为5: 95的甲醇-水为流动相，检测波长 254nm，流速2ml/min，保留时间23min处制备得该化合物。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：其中，步骤（1）所述的提取方法包括冷浸法、渗漉法、微波提取法、超声提取法、回流提取法和连续回流提取法。
4.权利要求1所述的百尾参中一种化合物在制备抗炎药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的百尾参中一种化合物在制备抗炎药物中的应用，其特征在于：将化合物和药学上可接受的载体制备成片剂、胶囊剂、注射剂、粉针剂、颗粒剂、脂肪乳剂、微囊、滴丸、软膏剂或透皮控释贴剂。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102302653A (zh) * 2011-09-08 2012-01-04 南京泽朗医药科技有限公司 一种白龙须总皂苷的制备方法
CN104844720A (zh) * 2015-06-19 2015-08-19 贵州师范学院 一种百尾参多糖的分离提取方法
JP2017061438A (ja) * 2015-09-25 2017-03-30 静岡県公立大学法人 脳神経細胞増殖促進剤

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102302653A (zh) * 2011-09-08 2012-01-04 南京泽朗医药科技有限公司 一种白龙须总皂苷的制备方法
CN104844720A (zh) * 2015-06-19 2015-08-19 贵州师范学院 一种百尾参多糖的分离提取方法
JP2017061438A (ja) * 2015-09-25 2017-03-30 静岡県公立大学法人 脳神経細胞増殖促進剤

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
New synthesis of harzialactone A via kinetic resolution using recombinant Fusarium proliferatum lactonase;Bing Chen et al.;《Tetrahedron: Asymmetry》;20100301;第21卷;237-240
百尾参抗炎有效组分的筛选及机制研究;董永喜等;《中国医刊》;20161231;第51卷(第11期);99-101

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