CN106947698A - 一种油菜品种抗菌核病性田间鉴定接种的菌种及方法 - Google Patents

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张先平
王国军
邓根生
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Abstract

本发明公开了一种油菜品种抗菌核病性田间鉴定接种的菌种及方法。该菌种的有效致病物为长满菌核病混合菌丝和菌核的麦粒。其方法是在油菜油菜初花期，一次性接入，接种量为每小区750克。接入时，顺行倒退将菌种从植株上部均匀溜撒入植株，接种后连续人工喷雾7天，保持田间湿度，保持菌种与油菜植株湿润，促进发病。本发明的菌种及接菌方法适用于油菜品种(材料)大群体或大面积抗病性田间鉴定接菌，溜撒麦粒接种法发病程度＜牙签茎秆接种法、与叶面琼脂块接种法相当，其鉴定结果更接近于田间真实发病状况，方法简便易行、省时省工。

Description

一种油菜品种抗菌核病性田间鉴定接种的菌种及方法
技术领域
本发明涉及微生物领域，具体涉及一种用于油菜抗菌核病性田间鉴定的菌种制备和接菌方法。
背景技术
油菜菌核病是由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)deBary)引起的一种真菌病害，喜欢潮湿温润的环境，世界各个油菜产区均有发生。在我国主要油菜产区中，该病发病率一般为10-30％，严重年份可达80％以上，导致油菜的品质和产量大大降低，严重影响了我国油菜产业的发展。
目前，防治油菜菌核病主要采用的是选用抗病品种，与化学药剂防治为主的综合防治措施。然而药剂防治的效果并不稳定，且长期使用农药，会污染环境，危害人类健康，不断导致核盘菌群体中抗药性菌株的出现，弊大于利。所以选用种植抗菌核病的油菜品种是最经济有效又生态的手段。
由于油菜对菌核病抗性遗传的复杂性，尽管还没有获得对菌核病完全免疫的油菜品种，但大量实践证明，油菜品种间对菌核病存在明显抗感差异。因此从抗病品种上减轻菌核病的发生为害也是切实可行的。
国家品种审定委员会对油菜品种审定及登记时要求：田间病圃诱发抗性鉴定，高感菌核病品种不予审定或登记。鉴定油菜品种的抗病性，为油菜品种审定、登记、引种及推广提供科学依据。
要进行多品种、大面积抗病性鉴定，并且保证取得真实、准确、可靠的鉴定结果，诱发鉴定过程中采用的菌种与方法十分重要。
受陕西省油菜品种审定委员会委托，我们一直负责省审定油菜品种抗菌核病性鉴定工作，现在又承担油菜登记品种抗菌核病性鉴定工作，为油菜品种审定、登记提供依据，为筛选抗病良种把关。
在多年油菜抗病性鉴定工作中，我们推陈出新，创新了田间鉴定接种方法。新方法经过实践反复验证，发病充分、可操作性强、简便易行，大幅度提高了诱发鉴定的效率。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，提供一种油菜抗菌核病田间鉴定具有较好效果的菌种和新接种方法。
本发明的接种油菜菌核病所用的菌种是麦粒菌种。
本发明的接种用麦粒菌种是由将各地油菜秆中收集的油菜菌核病菌核在PSA培养基中分离、纯化，纯化菌混合后在麦粒培养基中生长，23℃暗室培养15天，麦粒培养基长满菌丝及菌核后得到油菜菌核病菌种。
本发明的油菜菌核病鉴定接种的方法是在油菜初花期，一次性接入，接种量为每小区750克的麦粒菌种量。
本发明的一次性接入是油菜初花期，顺行从植株上部均匀溜撒入植株，保持田间湿润，连续人工喷雾7天，保持菌种与油菜植株湿润，促进发病。
本发明的每个小区是一个品种播种5行，行长2.5米，行宽0.5米，播种量7.5～10g，定苗后每行约70～80株(约合2.5万株/亩)。
本发明的病害调查，收获前逐行逐株分5级调查，所有品种在两天内调查完毕。
菌核病调查分级标准(5级)，及品种(系、组合)抗病等级划分，可参照文献“周必文，油菜抗菌核病评价方法，中国油料，1994”中所记载记载的内容进行。
病情指数(ID)＝(1×S1+2×S2+3×S3+4×S4)/调查总株数/4×100式中S1、S2、S3、S4为1～4级各级发病株数。
用相对抗性指数(RRI)为指标，划分品种抗病等级。RRI≤-1.2为高抗，-1.2＜RRI≤-0.7为抗，-0.7＜RRI≤0为中抗，0＜RRI≤0.9为中感，0.9＜RRI≤2.0为感，RRI＞2.0为高感。
附图说明
图1、图2为本发明制备的菌种及接种方法使用后油菜植株发病情况。
图3为花期叶面琼脂块接种方法使用后油菜植株发病情况。
图4为对照的菌种及花期牙签接种方法。
具体实施方式
本发明的实施实例一：本发明涉及的菌种和接菌方法与已有报道的叶面琼脂块接种、牙签接种法，在同年(2013年)、同田、三个油菜品种上3次重复试验，发病效果＜牙签，与叶面琼脂块相当，相关数据如表1所示。
表1 三种接菌方法效果比较
本发明的实施实例二：本发明涉及的菌种和接菌方法在同年(2014年)、同田、用不同的油菜品种试验，品种间表现抗感差异明显，麦粒溜撒接菌法能高效诱发菌核病发生，保证发病充分、鉴定结果真实可靠，相关数据如表2所示。
表2 麦粒溜撒接菌法鉴定结果比较
注：表中同列数据后不同字母表示0.05水平差异显著。
鉴定相同数量的品种，牙签茎秆法用8个工、16小时，叶面琼脂块法用8个工、16小时，麦粒溜撒法用4个工、3小时，麦粒溜撒法比牙签茎秆、叶面琼脂块两种方法既省工又省时，且接种的样本量要大的多。

Claims (8)

1.一种制备油菜菌核病菌种的方法，其特征在于，将各地油菜秆中收集的油菜菌核病菌核在PSA培养基中分离、纯化，纯化菌混合后在麦粒培养基中生长，麦粒培养基长满菌丝及菌核后得到油菜菌核病菌种。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的PSA培养由200g马铃薯、10g蔗糖、18g琼胶、1000mL蒸馏水组成。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述麦粒固体培养基中，麦粒用清水浸泡72小时，沥干水分，装瓶灭菌40分钟制成。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，各地收集的菌核用漂白粉液进行组织表面消毒，纯化种从小段顶端菌丝繁殖而来。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述漂白粉液由10g漂白粉、140mL蒸馏水组成，使用前临时配制，过滤后使用。
6.一种油菜菌核病鉴定接种的方法是：在油菜初花期，一次性接入，接种量为每小区750克的麦粒菌种量。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，每个小区是一个品种播种5行，行长2.5米，行宽0.5米，播种量7.5～10g，定苗后每行约70～80株(约合2.5万株/亩)。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述一次性接入是油菜初花期，操作人倒退顺行从植株上部均匀溜撒入植株，接种后保持田间湿度，连续人工喷雾7天，保持菌种与油菜植株湿润，促进发病。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108271685A (zh) * 2018-01-21 2018-07-13 孙晓敏 一种选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法
CN110343739A (zh) * 2019-06-27 2019-10-18 武汉市农业科学院 一种油菜田间茎秆接种核盘菌的方法
CN114634879A (zh) * 2022-04-20 2022-06-17 陕西省杂交油菜研究中心 一种作物菌核病病原菌核盘菌田间接种及抗性鉴定方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
孙晓敏等: "陕西汉中地区抗菌核病油菜材料检测", 《江苏农业科学》 *
张志元等: "油菜对菌核病抗(耐)病性鉴定与抗病育种研究进展", 《湖北农业科学》 *
杭淑莲: "宜宾油菜资源对菌核病的抗性评价及川南核盘菌生物学特性研究", 《万方中国学位论文全文数据库》 *
韩广振等: "大豆菌核病田间快速接种鉴定方法研究", 《中国农业科学》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108271685A (zh) * 2018-01-21 2018-07-13 孙晓敏 一种选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法
CN110343739A (zh) * 2019-06-27 2019-10-18 武汉市农业科学院 一种油菜田间茎秆接种核盘菌的方法
CN114634879A (zh) * 2022-04-20 2022-06-17 陕西省杂交油菜研究中心 一种作物菌核病病原菌核盘菌田间接种及抗性鉴定方法
CN114634879B (zh) * 2022-04-20 2023-12-08 陕西省杂交油菜研究中心 一种作物菌核病病原菌核盘菌田间接种及抗性鉴定方法

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