CN102812803A - 一种豌豆ems突变体库构建的方法 - Google Patents
一种豌豆ems突变体库构建的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102812803A CN102812803A CN2012102228390A CN201210222839A CN102812803A CN 102812803 A CN102812803 A CN 102812803A CN 2012102228390 A CN2012102228390 A CN 2012102228390A CN 201210222839 A CN201210222839 A CN 201210222839A CN 102812803 A CN102812803 A CN 102812803A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pea
- ems
- seed
- mutant library
- constructing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 6
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 4
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 claims description 3
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 claims description 3
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 9
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 4
- 101150072645 pea gene Proteins 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract 4
- 238000012252 genetic analysis Methods 0.000 abstract 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 abstract 1
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 9
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 9
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 2
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229910000404 tripotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019798 tripotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- 244000196929 Oenothera glazioviana Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003967 crop rotation Methods 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- DENRZWYUOJLTMF-UHFFFAOYSA-N diethyl sulfate Chemical compound CCOS(=O)(=O)OCC DENRZWYUOJLTMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
Abstract
本发明公开了一种豌豆EMS突变体库构建的方法，包括对豌豆EMS诱导浓度和时间进行了系统研究，总结归纳出豌豆EMS诱导的最佳时间和浓度处理，搭建出豌豆EMS诱导的技术平台。利用该方法，对生产上大面积推广种植的中豌6号进行了诱导处理，获得2687个M2株系，并鉴定出株型、叶色和花等多种类型的突变体，为豌豆基因遗传分析及功能基因研究奠定了材料基础，为该品种的改良提供了重要的育种材料。
Description
技术领域
本发明涉及一种豌豆EMS突变体库构建的方法，属于农业育种领域。
背景技术
豌豆是世界第二大食用豆类作物，常年种植面积1亿亩，在农作物轮作倒茬、畜牧业和可持续农业发展中起着重要的作用。近年，随着鲜食豌豆、淀粉加工、畜牧业的发展以及种植结构的调整，豌豆产品收购价格上升，产值明显提高，使广大农户种植生产的积极性显著增加。冬季鲜食豌豆生产中肥料使用少、农药残留低等特点使其成为高端的绿色蔬菜，在保障食品安全和丰富人民菜篮子工程等方面发挥着重要作用。
化学诱变具有成本低、使用方便、诱变作用专一性强等特点，是一种迅速发展的育种途径。甲基磺酸乙酯(Ethylmethame sulfonate，EMS)是一种良好的化学诱变剂，目前已成为在作物诱变育种中应用最广泛、应用效果最好的一种化学诱变剂。化学诱变始于20世纪初。Morgan(1910)，Mc-Dongal(1911)，Bauer(1916)，Sacarov(1936)等相继发现了化学物质能提高果蝇及某些微生物的突变率，1943年Ochlkers用脲脘处理月见草以后，化学药剂的诱变作用得到肯定。1967年Nilan用硫酸二乙脂(DES)处理大麦种子，育成了产量高、茎秆矮、抗倒伏的品种，开创了化学诱变在农作物育种上应用的先河。近几年来，国内外在诱变育种中应用诱导冬小麦、大豆、玉米、大麦、水稻等均获得了重大成就。中国农业科学院石家庄现代化研究所曾利用EMS处理冬小麦，M2代变异率达到15.7％以上，获得9个早熟、矮秆突变系，比原品种增产2.8％～20.5％；陈绍江等采用含有石蜡油的花粉诱变获得高油玉米突变体。王英培等用EMS处理大豆，筛选出一批高蛋白(45％～50％)、高亚油酸(60％以上)、低亚麻酸的优良突变系。据不完全 统计，国际上已有61个国家利用化学诱变在164种植物上育成2277个品种，但在豌豆上没有相关技术。本研究由农业部948项目：豌豆突变体库与普通菜豆抗逆资源引进与利用项目编号：2012-Z52资助。
发明内容
本发明主要解决的技术问题是提供一种豌豆EMS突变体库构建的方法，为豌豆基因遗传分析及功能基因研究奠定了材料基础，为该品种的改良提供了重要的育种材料。
为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：
一种豌豆EMS突变体库构建的方法，包括以下步骤：
(1)用蒸馏水浸泡豌豆种子4小时；
(2)以100mM K3PO4，pH7.5作为缓冲液，配制质量体积比0.7％EMS溶液；
(3)用配好的EMS在室温下浸泡种子，轻轻震荡8小时，转速20rpm/min；
(4)用大量蒸馏水连续充分冲洗种子至无气味；
(5)将洗好的种子称为M1代种子直接播于土壤中，待种子成熟后，单株收种，这些种子称为M2代；
(6)M2代每株取5粒种成株系，单株记载相关性状；
(7)群体诱导。
所述相关性状为株高增高、分枝增多即5-6个、花器官外露、双花、叶片及荚表面蜡质缺失。
本发明的有益效果是：
本发明对豌豆EMS诱导浓度和时间进行了系统研究，总结归纳出豌豆EMS诱导的最佳时间和浓度处理，搭建出豌豆EMS诱导的技术平台，可以重复实施。利用该方法，对生产上大面积推广种植的中豌6号进行了诱变处理，获得2687个M2株系，并鉴定出株型、叶色和花等多种类型的突变体，为豌豆基因遗传分析及功能基因研究奠定了材料基础，为该品种的改良提供了重要的育种材料。
具体实施方式
下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
本发明实施例包括：
1.供试材料
中豌6号。
2.试验设计
试验设5个时间点，4个浓度，1个清水对照。
每个处理用100粒种子。所用缓冲液体积为100ml。
3.试验方法
3.1用蒸馏水浸泡豌豆种子4小时；
3.2以100mM K3PO4，pH7.5作为缓冲液，配制质量体积比0.3％，0.5％，0.7％和0.9％的EMS溶液；
3.3用配好的EMS在室温下浸泡种子，轻轻震荡(20rpm/min)4、6、8、10和12小时；
3.4用大量蒸馏水连续充分冲洗种子至无气味；
3.5将洗好的种子(称为M1代)种子直接播于土壤中。
4.预实验结果统计
出苗后统计每个处理的出苗数，计算出苗率(见表1)。
表1豌豆EMS不同浓度与时间处理出苗率结果
5.中豌6号群体诱变
根据豌豆EMS诱变试验结果，选择EMS处理时间为8小时，处理浓度为0.7％。对中豌6号16000粒种子进行诱变处理。试验方法同3.。
出苗后单株挂牌，单株收获，共获得2678个M2代单株。
每个单株随机选5粒播种，单株调查记载相关性状。
在M2代单株中，有株高增高、分枝增多(5-6个)、花器官外露、双花、叶片及荚表面蜡质缺失等类型突变体单株。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (2)
1.一种豌豆EMS突变体库构建的方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)用蒸馏水浸泡豌豆种子4小时；
(2)以100mM K3PO4，pH7.5作为缓冲液，配制质量体积比0.7％EMS溶液；
(3)用配好的EMS在室温下浸泡种子，轻轻震荡8小时，转速20rpm/min；
(4)用大量蒸馏水连续充分冲洗种子至无气味；
(5)将洗好的种子称为M1代种子直接播于土壤中，待种子成熟后，单株收种，这些种子称为M2代；
(6)M2代每株取5粒种成株系，单株记载相关性状；
(7)群体诱导。
2.根据权利要求1所述的一种豌豆EMS突变体库构建的方法，其特征在于：所述相关性状为株高增高、分枝增多即5-6个、花器官外露、双花、叶片及荚表面蜡质缺失。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210222839.0A CN102812803B (zh) | 2012-07-02 | 2012-07-02 | 一种豌豆ems突变体库构建的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210222839.0A CN102812803B (zh) | 2012-07-02 | 2012-07-02 | 一种豌豆ems突变体库构建的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102812803A true CN102812803A (zh) | 2012-12-12 |
| CN102812803B CN102812803B (zh) | 2016-02-24 |
Family
ID=47297520
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210222839.0A Expired - Fee Related CN102812803B (zh) | 2012-07-02 | 2012-07-02 | 一种豌豆ems突变体库构建的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102812803B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104642104A (zh) * | 2015-02-10 | 2015-05-27 | 山东省林业科学研究院 | 一种紫花苜蓿ems突变体库构建的方法 |
| CN105580523A (zh) * | 2015-03-18 | 2016-05-18 | 上海市农业科学院 | 构建生菜突变体库的ems诱变浓度筛选 |
| CN108450325A (zh) * | 2018-02-06 | 2018-08-28 | 山西省农业科学院玉米研究所 | 一种采用ems诱变剂创制红芸豆突变体的方法及应用 |
| CN108617502A (zh) * | 2018-04-26 | 2018-10-09 | 贵州省蚕业研究所 | 一种利用甲基磺酸乙酯构建辣椒突变体库的方法 |
| CN109089877A (zh) * | 2018-07-10 | 2018-12-28 | 山西省农业科学院玉米研究所 | 一种利用ems诱变产生芸豆或小扁豆突变体的方法 |
| CN112205294A (zh) * | 2019-11-12 | 2021-01-12 | 广东石油化工学院 | 一种油莎豆诱变育种的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006032504A2 (en) * | 2004-09-22 | 2006-03-30 | Vrije Universiteit Brussel | Method for introducing genetic mutations into plant cells |
| CN102047844A (zh) * | 2010-12-13 | 2011-05-11 | 湖北省烟草科研所 | 一种用于烟草花粉的高效诱变方法 |
-
2012
- 2012-07-02 CN CN201210222839.0A patent/CN102812803B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006032504A2 (en) * | 2004-09-22 | 2006-03-30 | Vrije Universiteit Brussel | Method for introducing genetic mutations into plant cells |
| CN102047844A (zh) * | 2010-12-13 | 2011-05-11 | 湖北省烟草科研所 | 一种用于烟草花粉的高效诱变方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 李浩杰等: ""甘蓝型油菜EMS诱变后代农艺性状观察及分子检测"", 《核农学报》 * |
| 王军伟: ""烟草突变体库创建及筛选体系建立"", 《中国优秀硕士论文全文数据库 农业科技辑》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104642104A (zh) * | 2015-02-10 | 2015-05-27 | 山东省林业科学研究院 | 一种紫花苜蓿ems突变体库构建的方法 |
| CN105580523A (zh) * | 2015-03-18 | 2016-05-18 | 上海市农业科学院 | 构建生菜突变体库的ems诱变浓度筛选 |
| CN108450325A (zh) * | 2018-02-06 | 2018-08-28 | 山西省农业科学院玉米研究所 | 一种采用ems诱变剂创制红芸豆突变体的方法及应用 |
| CN108450325B (zh) * | 2018-02-06 | 2021-08-03 | 山西省农业科学院玉米研究所 | 一种采用ems诱变剂创制红芸豆突变体的方法及应用 |
| CN108617502A (zh) * | 2018-04-26 | 2018-10-09 | 贵州省蚕业研究所 | 一种利用甲基磺酸乙酯构建辣椒突变体库的方法 |
| CN109089877A (zh) * | 2018-07-10 | 2018-12-28 | 山西省农业科学院玉米研究所 | 一种利用ems诱变产生芸豆或小扁豆突变体的方法 |
| CN109089877B (zh) * | 2018-07-10 | 2021-11-09 | 山西省农业科学院玉米研究所 | 一种利用ems诱变产生芸豆或小扁豆突变体的方法 |
| CN112205294A (zh) * | 2019-11-12 | 2021-01-12 | 广东石油化工学院 | 一种油莎豆诱变育种的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102812803B (zh) | 2016-02-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103733859B (zh) | 一种木薯开花调控技术 | |
| CN102812803A (zh) | 一种豌豆ems突变体库构建的方法 | |
| CN103070076B (zh) | 一种花生离体诱变定向筛选耐盐体的方法 | |
| CN106258747A (zh) | 一种花椒的引种栽培方法 | |
| CN112673918A (zh) | 一种菜用大豆耐涝性的鉴定方法 | |
| CN103314840B (zh) | “三选两早一促”的苹果育种法 | |
| CN104938328B (zh) | 一种抗根腐病甘薯品种的选育方法 | |
| CN101536671A (zh) | 一种苋菜优良种质的创新方法 | |
| Ali et al. | Optimizing the growth and yield of mungbean (Vigna radiata L.) cultivars by altering sowing dates | |
| CN107155866A (zh) | 利用非整倍玉米异源多倍体培育多年生饲草玉米的方法 | |
| CN103828714A (zh) | 一种黔西北玉米不同种质单倍体诱导及二倍化方法 | |
| CN100425125C (zh) | 一种紫菜快速育种的方法 | |
| CN104585014A (zh) | 一种良种大豆的选育方法 | |
| CN105010126A (zh) | 一种抗黑斑病甘薯品种的快速选育方法 | |
| Fukano et al. | Genotype‐aggregated planting improves yield in Jerusalem artichoke (Helianthus tuberosus) due to self/non‐self‐discrimination | |
| Sharma | Lac insect-host plant interaction: Implications on quantity and quality of lac | |
| CN106034756A (zh) | 基于嫁接苗整株辐照的芒果突变体育种方法 | |
| Toplu et al. | Assessment of growth behaviour, yield, and quality parameters of some olive (Olea europaea) cultivars in Turkey | |
| CN107360865A (zh) | 一种无刺花椒引种嫁接方法 | |
| Makarova et al. | Introduction of large-fruited strawberry varieties on the territory of the Novosibirsk region in the conditions of Western Siberia | |
| Zhang et al. | Review of walnut breeding research at the Shandong Institute of Pomology | |
| Anyaegbu | Comparative assessment of the effect of moringa extracts, NPK fertilizer and poultry manure on soil properties and growth performance of garden egg (Solanium menlongina) in Abuja, Nigeria | |
| CN1537411A (zh) | 树茄的培育方法 | |
| CN110122323A (zh) | 优质蛋白玉米选育方法 | |
| Mahdy et al. | Response of sesame for intercropping with some forage crops |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Wan Shuwei Inventor after: Wang Zhenqing Inventor after: Sun Jilu Inventor after: Hao Junjie Inventor after: Zhang Xiaoyan Inventor after: Cui Xiao Inventor after: Li Hongwei Inventor after: Yang Tao Inventor after: Zong Xuxiao Inventor after: Qiu Shizuo Inventor after: Wang Junwei Inventor before: Hao Junjie Inventor before: Wang Zhenqing Inventor before: Sun Jilu Inventor before: Zhang Xiaoyan Inventor before: Wan Shuwei Inventor before: Cui Xiao Inventor before: Li Hongwei Inventor before: Yang Tao Inventor before: Zong Xuxiao Inventor before: Qiu Shizuo Inventor before: Wang Junwei |
|
| COR | Change of bibliographic data | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20160224 |