CN106943428B - 一种犬猫用氨基酸腹膜透析液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种犬猫用氨基酸腹膜透析液及其制备方法,属于畜牧兽医养殖业领域。该腹膜透析液由如下按1000mL中所含重量计的成分组成:L‑精氨酸1.0~2.0 g、L‑组氨酸1.0~1.6 g、L‑异亮氨酸0.6~0.9 g、L‑亮氨酸1.3~1.5 g、L‑赖氨酸0.8~1.0 g、L‑蛋氨酸0.4~0.6 g、L‑苯丙氨酸0.7~0.8 g、L‑苏氨酸0.4~0.6 g、L‑色氨酸0.2~0.4 g、L‑缬氨酸0.8~1.2 g、牛磺酸0.1~0.3g,维生素B60.2~0.3 g、黄芪多糖0.1~0.3 g和氯化钙0.1~0.3 g,余量为注射用水。本发明的氨基酸腹膜透析液可以很好地缓解肾功能衰竭所引起的高氮血症、高磷血症、低蛋白血症等,降低传统葡萄糖透析引起的并发症,改善腹膜的超滤功能和物质清除率。

Description

一种犬猫用氨基酸腹膜透析液及其制备方法
技术领域
本发明属于畜牧兽医养殖业领域,特别涉及一种用于治疗犬猫肾功能衰竭氨基酸腹膜透析液。
背景技术
肾功能衰竭是在发生各种肾脏疾病基础上,由于肾单位逐渐受损,缓慢发展的肾功能减退以致不可逆转的肾衰。该病主要表现为肾功能减退,代谢废物(尤其是蛋白分解后的含氮代谢产物)滞溜,水、电解质和酸碱平衡失调,以及与肾脏有关的多种内分泌功能失调,以至于不能维持机体内环境的稳定而引发的临床综合征。近几年来,犬猫的肾功能衰竭问题日益受到广泛的关注,研究有效治疗犬猫肾衰新方法势在必行。
目前,关于犬猫肾功能衰竭的治疗主要采用对症治疗手段,改善机体由于排泄功能、调节功能以及生物合成功能紊乱引起的各种临床症状,从而延长患病犬猫的生命,但治疗效果不确定。近年来,肾替代疗法治疗犬猫肾衰成为宠物临床研究热点,肾替代疗法包括腹膜透析、血液透析和肾移植。但由于血液透析和肾移植由于其昂贵的费用和较高的技术要求,在我国小动物临床还很难得到应用。腹膜透析作为肾脏替代疗法的一个重要组成部分,其所需费用及对技术的要求均较低,比较易为动物主人接受,已在肾衰犬猫的治疗中应用。
腹膜透析是利用腹膜的弥散和超滤作用,使透析液与血液进行物质交换,从而达到清除体内代谢废物,纠正机体水和电解质平衡的医学治疗手段,可用于肾衰、尿毒症、急性中毒等病例的治疗。在动物医学上,腹膜透析技术的研究报道较少,即使在宠物疾病的治疗上,国内外近些年来才有一些试验性的研究报道。Cowgill (1995)以及 Dew-angan等(2004)分别研究发现连续腹膜透析可用来治疗犬和牛的尿毒症,王姜维等 (2008)通过血液生化分析证明腹膜透析能够清除血液中的尿素和肌酐,对肾衰犬猫都有良好的治疗效果。目前犬猫腹膜透析液普遍使用人用的以葡萄糖作为主要渗透剂的透析液,由于它高糖、高渗、低pH值以及有葡萄糖降解产物产生,会引起腹膜结构和功能的变化,并最终导致腹膜纤维化和使腹膜发生超滤失败,此外还可导致犬猫发生低蛋白血症、高脂血症、高胰岛素血症等伴随疾病,严重影响宠物犬的生活质量,增加了养犬人的经济负担和情感困扰。
因此研究具有能维护恒定的溶质清除率和超滤作用,对腹膜无不良影响,并补充患宠缺乏的物质及副作用小的新型犬猫用腹膜透析液成为关注的热点。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术中存在的缺点与不足,提供一种犬猫用氨基酸腹膜透析液。
本发明所采用的技术方案是:
一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,每1000mL透析液由如下按重量计的成分组成: L-精氨酸1.0~2.0 g、L-组氨酸1.0~1.6 g、L-异亮氨酸0.6~0.9 g、L-亮氨酸1.3~1.5 g、L-赖氨酸0.8~1.0 g、L-蛋氨酸0.4~0.6 g、L-苯丙氨酸0.7~0.8 g、L-苏氨酸0.4~0.6 g、L-色氨酸0.2~0.4 g、L-缬氨酸0.8~1.2 g、牛磺酸0.1~0.3g,维生素B6 0.2~0.3 g、黄芪多糖0.1~0.3 g和氯化钙0.1~0.3 g,余量为注射用水。
每1000 mL透析液制备具体步骤如下:
(1)采用量筒量取适量注射用水,加入至1000 mL烧杯中;
(2)按照上述重量计分别称取L-精氨酸、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸、牛磺酸,加入至烧杯中,放置于磁力搅拌器,搅拌溶解;
(3)进一步按照上述重量计分别称取维生素B6、黄芪多糖、氯化钙加入上述溶液中,继续使用磁力搅拌器,搅拌溶解,在溶解过程中采用稀盐酸调节溶液PH值6~7。
(4) 用孔径0.6 μm 的微孔滤膜对上述溶液进行微粒过滤,然后用0.2μm 的微孔滤膜进行热敏元的除菌过滤,完成后在医用超净台中分装成250 mL/袋,制得氨基酸腹膜透析液4袋。
(5)最后采用高压蒸气灭菌法对袋状氨基酸腹膜透析液进行灭菌,121 ℃灭菌15分钟。
本发明腹膜透析液中的氨基酸可产生高渗作用,形成渗透梯度,以促进液体由血浆转移到腹腔,从而使血液中高浓度的有毒物质和代谢产物可通过腹膜进入透析液。
本发明腹膜透析液中, L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-缬氨酸为支链氨基酸,L-苯丙氨酸、L-色氨酸为芳香氨基酸。
本发明中,11种氨基酸均为犬猫的必需氨基酸,其中精氨酸可以预防高血氨,组氨酸可调节代谢对尿毒症治疗十分重要,苯丙氨酸可保护泌尿系统。同时这些氨基酸本身就具有对肾功能衰竭的辅助治疗作用。
与传统的葡萄糖透析液比较,本发明中应用大量犬猫必需的碱性氨基酸,可使透析液pH值升高(6<pH<7),接近血液的pH值,可以减少透析液酸性对腹膜的刺激,提高透析效果,改善酸中毒;此外,本发明中物质的代谢产物中无葡萄糖降解产物,不会导致腹膜纤维化和腹膜发生超滤失败。
肾功能衰竭可导致低蛋白血症,进一步加重病情,严重影响犬猫的康复。本发明中含有犬猫11种必需氨基酸以及能促进氨基酸代谢的维生素B6,可以明显改善机体的蛋白质正氮平衡,改善低蛋白血症。
此外,本发明中含有浓度较低的氯化钙,可调节血钙水平。本发明还含有适量的黄芪多糖,可提高机体免疫力,对维持腹膜超滤作用有重要调节作用。
上述的氨基酸腹膜透析液,其特征是总氨基酸含量7.3g/L~10.9 g/L,支链氨基酸/芳香氨基酸比值为3.0以上,pH值为6~7,渗透压为320~360 m0sm/Kg。
上述的腹膜透析液主要在犬猫腹膜透析中应用,亦可用于直肠透析。
优选的,所述的一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,每1000 mL透析液由如下按重量计的成分组成:L-精氨酸1.44 g、L-组氨酸1.12 g、L-异亮氨酸0.62 g、L-亮氨酸1.35 g、L-赖氨酸0.95 g、L-蛋氨酸0.48 g、L-苯丙氨酸0.70 g、L-苏氨酸0.48 g、L-色氨酸0.25 g、L-缬氨酸0.88 g、牛磺酸0.25 g,维生素B6 0.25 g、黄芪多糖0.30 g和氯化钙0.2 g,余量为注射用水。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:本发明一种犬猫用氨基酸腹膜透析液是一种新型动物专用的透析液,克服了现有产品的不足,减少透析液对腹膜的刺激,维持腹膜超滤功能的稳定性,适合反复透析,并有利于改善机体蛋白质代谢,从而减少低蛋白血症,可维持血钙水平,几乎没有副作用,有较大的应用价值,对犬猫肾功能衰竭具有治疗作用,从而改善宠物犬的生活质量,减轻了养犬人的经济负担。
附图说明
图1为本发明氨基酸腹膜透析液对病犬的肾功能指标影响结果图;
图2为本发明氨基酸腹膜透析液对病犬的血气分析图;
图3为本发明各组犬只的血中TP、ALB及Ca2+浓度的检测结果;
图4为本发明氨基酸腹膜透析液对腹膜超滤功能的影响;
图5为本发明氨基酸腹膜透析液对腹膜物质清除功能的影响;
图6为本发明氨基酸腹膜透析液对血液葡萄糖及脂肪代谢的影响。
具体实施方式
实施例1
一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,每1000 mL透析液由如下按重量计的成分组成:L-精氨酸1.0 g、L-组氨酸1.0 g、L-异亮氨酸0.6 g、L-亮氨酸1.3 g、L-赖氨酸0.8 g、L-蛋氨酸0.4 g、L-苯丙氨酸0.7 g、L-苏氨酸0.4 g、L-色氨酸0.2 g、L-缬氨酸0.8 g、牛磺酸0.1g,维生素B6 0.2 g、黄芪多糖0.1 g和氯化钙0.1 g,余量为注射用水。
每1000 mL透析液制备具体步骤如下:
(1)采用量筒量取适量注射用水,加入至1000 mL烧杯中;
(2)按照上述重量计分别称取L-精氨酸、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸、牛磺酸,加入至烧杯中,放置于磁力搅拌器,搅拌溶解;
(3)进一步按照上述重量计分别称取维生素B6、黄芪多糖、氯化钙加入上述溶液中,继续使用磁力搅拌器,搅拌溶解,在溶解过程中采用稀盐酸调节溶液pH值6~7。
(4) 用孔径0.6 μm 的微孔滤膜对上述溶液进行微粒过滤,然后用0.2 μm 的微孔滤膜进行热敏元的除菌过滤,完成后在医用超净台中分装成250 mL/袋,制得氨基酸腹膜透析液4袋。
(5)最后采用高压蒸气灭菌法对袋状氨基酸腹膜透析液进行灭菌,121℃灭菌15分钟。
实施例2
一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,每1000 mL透析液由如下按重量计的成分组成:L-精氨酸1.32 g、L-组氨酸1.22 g、L-异亮氨酸0.63 g、L-亮氨酸1.40 g、L-赖氨酸0.90 g、L-蛋氨酸0.45 g、L-苯丙氨酸0.72g、L-苏氨酸0.58 g、L-色氨酸0.20 g、L-缬氨酸0.80 g、牛磺酸0.20 g,维生素B6 0.20 g、黄芪多糖0.25 g和氯化钙0.15 g,余量为注射用水。
其余同实施例1。
实施例3
一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,每1000 mL透析液由如下按重量计的成分组成:L-精氨酸1.44g、L-组氨酸1.12 g、L-异亮氨酸0.62 g、L-亮氨酸1.35 g、L-赖氨酸0.95 g、L-蛋氨酸0.48 g、L-苯丙氨酸0.70 g、L-苏氨酸0.48 g、L-色氨酸0.25 g、L-缬氨酸0.88g、牛磺酸0.25 g,维生素B6 0.25 g、黄芪多糖0.30 g和氯化钙0.20 g,余量为注射用水。
其余同实施例1。
实施例4
一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,每1000 mL透析液由如下按重量计的成分组成:L-精氨酸1.50 g、L-组氨酸1.15 g、L-异亮氨酸0.64 g、L-亮氨酸1.45 g、L-赖氨酸0.90 g、L-蛋氨酸0.50 g、L-苯丙氨酸0.70 g、L-苏氨酸0.50 g、L-色氨酸0.27 g、L-缬氨酸0.94 g、牛磺酸0.28 g,维生素B6 0.15 g、黄芪多糖0.28 g和氯化钙0.15g,余量为注射用水。
其余同实施例1。
实施例5
一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,每1000 mL透析液由如下按重量计的成分组成:L-精氨酸1.57 g、L-组氨酸1.25 g、L-异亮氨酸0.66 g、L-亮氨酸1.30 g、L-赖氨酸1.00 g、L-蛋氨酸0.42g、L-苯丙氨酸0.75 g、L-苏氨酸0.53 g、L-色氨酸0.22 g、L-缬氨酸1.00g、牛磺酸0.10 g,维生素B6 0.20 g、黄芪多糖0.30 g和氯化钙0.10 g,余量为注射用水。
其余同实施例1。
实施例6
一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,每1000mL透析液由如下按重量计的成分组成: L-精氨酸2.0g、L-组氨酸1.6 g、L-异亮氨酸 0.9 g、L-亮氨酸1.5 g、L-赖氨酸1.0g、L-蛋氨酸0.6 g、L-苯丙氨酸0.8 g、L-苏氨酸0.6 g、L-色氨酸0.4 g、L-缬氨酸1.2 g、牛磺酸0.3g,维生素B6 0.3 g、黄芪多糖0.3 g和氯化钙0.3 g,余量为注射用水。
其余同实施例1。
上述实施例所设计、制备的犬猫用氨基酸腹膜透析液经过临床动物试验验证,实施例3在缓解肾功能衰竭所引起的高氮血症、高磷血症、低蛋白血症和代谢性酸中毒,降低传统葡萄糖透析引起的高唐血症、高脂血症,改善腹膜的超滤功能和物质清除率等方面效果较佳,临床试验效果如下。
犬猫用氨基酸腹膜透析液对肾功能衰竭的临床治疗试验
1.病例资料
本研究于2015年7月至2016年10月在泰州市泰爱牧宠物医院共收集18例犬肾功能衰竭病例,年龄3~9岁不等,随机等分成3组:
常规治疗对照组(A组),只采用输液疗法,对症治疗,纠正水、电解质和酸碱平衡紊乱,饲喂肾脏处方粮等方法治疗;
葡萄糖透析治疗组(B组),除采用相同常规方法治疗以外,配合使用4.25%葡萄糖透析液进行治疗,每天按50 mL/Kg体重给药,留置4小时后取出;
氨基酸腹膜透析液试验组(C组),除采用相同常规方法治疗以外,配合使用氨基酸腹膜透析液进行治疗。每天按50 mL/Kg体重给药,留置4小时后取出。
治疗时间15天。
2.体征指标测定
试验期间,观察采食情况、精神状态、临床三数(体温、脉搏、呼吸数)变化及排便排粪情况等,并做详细记录,实验结束后对实验结果进行数理统计分析。
3.血液生化指标测定
每次透析治疗完成后分别采血,使用M149928-全自动干式生化分析仪测定血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、钙离子、无机磷、尿素氮及肌酐等含量;采用ELISA法测定血清胱抑素C的浓度。从而判断肾功能衰竭治疗效果。
4.血气分析
分别在治疗前、治疗1天、治疗5天、治疗10天及治疗疗程结束时(治疗15天),股动脉采血,应用PL2200锐锋血气分析仪,测定犬只动脉血的pH值,从而判断机体的酸碱代谢情况。
5.数据处理用SPSS17.0,单因素方差进行统计学分析,各组数据均以平均值±标准差表示。
6.结果
6.1体征指标的测定
三个组的犬只经过治疗,体征都有好转,食欲较好,采食较快,精神状态活泼,临床三数正常,粪便正常,排尿正常,被毛光滑柔顺。
6.2血液生化指标测定结果
6.2.1 肾功能指标变化
如图1所示,在试验期间,三组犬只反应肾脏功能的指标,如血清尿素氮、肌酐、无机磷及胱抑素C的浓度都逐渐趋于正常,说明三种治疗方案都具有治疗效果。但氨基酸腹膜透析液治疗组的效果与其他两组比较更为明显(P<0.05),本发明的氨基酸腹膜透析液对犬的肾功能衰竭更具有治疗价值。
6.2.2 肾衰并发症指标变化
如图3所示,经过治疗,C组的血清总蛋白(TP)含量及白蛋白(ALB)含量都有提高,在治疗结束后,明显高于A组和B组(P<0.05)。表明,本发明的氨基酸腹膜透析液可以改善肾功能衰竭引起的低蛋白血症,提高机体的康复速度。此外,试验组的血Ca2+水平保持较好,优于其他两组(P<0.05),很好地改善了肾功能衰竭引起的低血钙症。
6.3 血气分析结果
如图2所示,氨基酸腹膜透析液试验组的犬只经过治疗,其血液pH值得到明显提高,在治疗结束时,已经达到健康范围,明显优于其他两组(P<0.05)。本发明的氨基酸腹膜透析液可以改善使用传统的葡萄糖透析液引起的酸中毒并发症,进而提高治疗效果。
犬猫用氨基酸腹膜透析液对犬猫用氨基酸腹膜透析液对犬腹膜功能、血糖及血脂代谢的影响试验
1.病例资料
成年Beagle犬15只(江苏省宠物繁育中心提供),雄性8只,雌性7只,年龄3~5岁,犬只体重10 kg~15 kg,动物实验室室温(22±5)℃,湿度60%~80%。,将15只Beagle犬根据体重随机等分成3组:假腹膜透析对照组、葡萄糖腹膜透析组与氨基酸腹膜透析液试验组,将三组试验动物安装腹膜透析管。
假腹膜透析组:每天按50mL/Kg体重通过透析管注入0.9%氯化钠溶液;
葡萄糖腹膜透析组:每天按50mL/Kg体重通过透析管注入1.5%葡萄糖透析液;
氨基酸腹膜透析液试验组,每天按50mL/Kg体重通过透析管注入氨基酸腹膜透析液。
每天透析1次,每次透析液保留2~4 h,试验周期20天。
2.腹膜功能检测
动物试验结束后,腹腔注射4.25%葡萄糖透析液100 mL,保留2 h,然后将犬倒提保定,在腹白线附近选择腹腔最低点,穿刺针引流,记录引流总量。同时头净脉采血,制备血清。计算腹膜的超滤量,超滤量=引流总量-腹腔注射量;使用全自动生化分析仪分别检测引流的透析液中和血清中的尿素氮和肌酐量,并计算它们的清除率,物质清除率=(透析液中物质浓度/血清中同物质浓度)×引流总量/透析时间。
3.对血液葡萄糖及脂肪代谢的影响
试验前及试验末分别采血,分离血清,用全自动生化分析仪测定血糖(Glu)、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(Chol)的含量。
4. 所有数据用SPSS17.0软件单因素方差分析方法(ANOVA)进行组间差异的统计学分析,各组数据均以平均值±标准差表示。
5.结果
5.1 氨基酸腹膜透析液对腹膜超滤功能的影响
腹膜超滤量是反应腹膜对体内多余水分清除能力的有效指标。如图4所示,试验组腹膜超滤量与葡萄糖腹膜透析液组相比较,有增加趋势(P<0.05);但与假腹膜透析组比较,差异不显著(P>0.05)。本发明的腹膜透析液对腹膜的超滤功能无明显的影响,优于传统的葡萄糖透析液。
5.2氨基酸腹膜透析液对腹膜物质清除功能的影响
如图5所示,氨基酸腹膜透析液试验组的尿素氮清除率和肌酐清除率均明显高于葡萄糖腹膜透析组,差异具有统计学意义(P<0.05);与假腹膜透析组比较差异不显著(P>0.05)。表明,氨基酸腹膜透析液对血液中尿素氮和肌酐具有较高的清除作用,可以更好地用于治疗犬的肾功能衰竭。
5.3氨基酸腹膜透析液对血液葡萄糖及脂肪代谢的影响
如图5所示,氨基酸腹膜透析液对血液中葡萄糖、甘油三酯及总胆固醇的含量无明显影响,与假腹膜透析组无差异(P>0.05),而传统的葡萄糖腹膜透析液可使这些指标升高(P<0.05)。表明,该氨基酸腹膜透析液可以促进犬的血糖及血脂代谢,不会产生高血糖、高血脂等透析并发症。
综上所述,本发明的氨基酸腹膜透析液可以缓解肾功能衰竭所引起的高氮血症、高磷血症、低蛋白血症和代谢性酸中毒,降低传统葡萄糖透析引起的高唐血症、高脂血症,改善腹膜的超滤功能和物质清除率可以很好地用于肾功能衰竭犬猫的长期治疗。

Claims (3)

1.一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,其特征在于,由如下按1000mL中所含重量计的成分组成:L-精氨酸1.0~2.0g、L-组氨酸1.0~1.6g、L-异亮氨酸0.6~0.9g、L-亮氨酸1.3~1.5g、L-赖氨酸0.8~1.0g、L-蛋氨酸0.4~0.6g、L-苯丙氨酸0.7~0.8g、L-苏氨酸0.4~0.6g、L-色氨酸0.2~0.4g、L-缬氨酸0.8~1.2g、牛磺酸0.1~0.3g,维生素B60.2~0.3g、黄芪多糖0.1~0.3g和氯化钙0.1~0.3g,余量为注射用水;
上述L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-缬氨酸为支链氨基酸,L-苯丙氨酸、L-色氨酸为芳香氨基酸,支链氨基酸/芳香氨基酸比值为3.0以上;
上述氨基酸腹膜透析液总氨基酸含量7.3g/L~10.9g/L;
上述氨基酸腹膜透析液pH值为6<pH<7,渗透压为320~360mOsm/Kg。
2.如权利要求1所述的一种犬猫用氨基酸腹膜透析液,其特征在于,由如下按1000mL中所含重量计的成分组成:L-精氨酸1.44g、L-组氨酸1.12g、L-异亮氨酸0.62g、L-亮氨酸1.35g、L-赖氨酸0.95g、L-蛋氨酸0.48g、L-苯丙氨酸0.70g、L-苏氨酸0.48g、L-色氨酸0.25g、L-缬氨酸0.88g、牛磺酸0.25g,维生素B60.25g、黄芪多糖0.30g和氯化钙0.2g,余量为注射用水。
3.如权利要求1所述的一种犬猫用氨基酸腹膜透析液的制备方法,其特征在于,每1000mL透析液制备具体步骤如下:
(1)采用量筒量取适量注射用水,加入至1000mL烧杯中;
(2)按照权利要求1所述的重量计分别称取L-精氨酸、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸、牛磺酸,加入至烧杯中,放置于磁力搅拌器,搅拌溶解;
(3)进一步按照权利要求1所述的重量计分别称取维生素B6、黄芪多糖、氯化钙加入上述溶液中,继续使用磁力搅拌器,搅拌溶解,在溶解过程中采用稀盐酸调节溶液pH值6~7;
(4)用孔径0.6μm的微孔滤膜对上述溶液进行微粒过滤,然后用0.2μm的微孔滤膜进行热敏元的除菌过滤,完成后在医用超净台中分装成250mL/袋,制得氨基酸腹膜透析液4袋;
(5)最后采用高压蒸气灭菌法对袋状氨基酸腹膜透析液进行灭菌,121℃灭菌15分钟。
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