CN106942469A - 以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂及其制备方法 - Google Patents

以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂，包括：特异性卵黄液、微切玉米芯载体、山梨酸钾、乙氧基喹啉、丙酸钙。本发明还提供了以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂的制备方法，包括取特异性卵黄液，添加山梨酸钾、丙酸钙、乙氧基喹啉，微切玉米芯载体，搅拌，制成软颗粒，晾干，粉碎过筛，制成卵黄抗体制剂。本发明将特异性卵黄液与玉米芯粉混合加工，减少了卵黄抗体的损失，解决了能源消耗难题，成本降低，生产工艺简化，适合大规模生产；本发明结合微切助互作技术，提高了有效成分的生物利用度；本发明产品适用于刺参、大菱鲆、奶牛和仔猪等，可防治细菌感染或其他免疫疾病，提高了动物的存活率和免疫力。

Description

以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物饲料技术领域，更具体地说，涉及一种以微切助互作处理的玉米芯为载体的特异性卵黄液卵黄抗体制剂及其制备方法。
背景技术
由于抗生素的使用而导致的药物残留，已成为制约我国水产产品国际市场竞争力的一个主要问题。卵黄抗体(IgY)具有无毒、无残留、不产生抗药性等优点，发展前景备受瞩目。此外IgY制备成本低、产出率高、提纯简便快捷，并具有耐热、稳定性好等优点，已经被广泛地制成产品来进行动物疾病的预防和治疗。例如用制成的IgY制剂来喂食海参，防治海参腐皮综合征等。
当前的IgY产品大都为冻干粉或片状、膏状制剂，但是冻干粉以及片状、膏状制剂的制备工艺复杂，成本较高，而且有效成分在制备提纯的过程中会有较大损失。
发明内容
本发明的目的在于从节约成本出发，将特异性卵黄液与经过微切助互作处理过的玉米芯载体直接混合，解决有效成分损失、消耗大量能量的问题，降低生产成本，简化制备工艺。
为达到上述目的，本发明提供了一种以微切助互作处理的玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂，所述特异性卵黄液抗体制剂由特异性卵黄液、微切玉米芯载体、山梨酸钾、乙氧基喹啉、丙酸钙组成；所述特异性卵黄液质量百分比为30％～80％、微切玉米芯载体质量百分比为20％～70％，两者质量百分比之和为100％；所述山梨酸钾、乙氧基喹啉、丙酸钙占所述特异性卵黄液和微切玉米芯载体总质量的百分比分别为0.05％～0.2％、0.01％～0.05％、0.1％～0.5％。
优选方式下，所述的微切玉米芯载体采用微切助互作方式进行处理，将玉米芯粗粉进行超微粉碎5min～15min，超微粉碎时加入助剂；所述助剂为碳酸钙或碳酸氢钙，所述助剂的用量为所述微切玉米芯载体质量的1％～8％(w/w)。
优选方式下，所述的特异性卵黄液与微切玉米芯载体的质量比为1～3:1。
本发明还提供了一种上述卵黄抗体制剂的制备方法，包括如下步骤：
S1、将玉米芯粉用微切助互作技术处理后，过60～200目筛子，制得玉米芯载体；
S2、按上述比例取特异性卵黄液，先搅拌，再添加山梨酸钾、丙酸钙、乙氧基喹啉，搅拌均匀，制得混合卵黄液；
S3、将步骤S1制得的玉米芯载体加入到步骤S2制得的混合卵黄液中，搅拌均匀，制成软颗粒，20℃～30℃晾干至水分含量达8％以下；粉碎过筛，制成卵黄抗体制剂。
优选方式下，步骤S1所述的微切玉米芯载体由玉米芯粗粉和助剂组成，采用微切助互作方式进行处理，将玉米芯粗粉进行超微粉碎5min～15min，超微粉碎时加入助剂；所述助剂为碳酸钙或碳酸氢钙，所述助剂的用量为所述微切玉米芯载体质量的1％～8％(w/w)。
优选方式下，步骤S2所述特异性卵黄液取自经过注射灭活细菌免疫后的高免鸡蛋。所述细菌优选为黄海希瓦氏菌、灿烂弧菌或溶藻弧菌。
优选方式下，步骤S2所述特异性卵黄液与微切玉米芯载体的质量比为1～3:1。
优选方式下，步骤S2将特异性卵黄液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状，再添加山梨酸钾、丙酸钙、乙氧基喹啉。经过本步骤处理，搅拌更加均匀，融合性更好。
步骤S3搅拌均匀至形成软硬适中的团状固体后，制成软颗粒。
本发明的技术创新在于：
1、本发明改变了传统的制备IgY产品的方法，不再将IgY制成冻干粉或者提纯以后当做饲料添加剂加入到饲料当中。而是直接将含有富含特异性IgY的特异性卵黄液与玉米芯粉进行混合加工，与全蛋液相比，卵黄液与载体结合效果更好，单位质量含更多特异性卵黄抗体，此工艺还减少了在分离、提纯以及冻干过程中IgY的损失，减少了10％以上，而且还简化了生产工艺，本产品很重要的一点就是，天然的玉米芯载体解决了以往卵黄抗体生产提纯过程中需要大量消耗能源的难题，极大的降低了成本。
2、本发明将微切助互作技术用于饲料添加剂的制备，破碎细胞壁和改性天然活性物质，使得粉碎过程中，固体原料颗粒团经过微切变，细胞壁破碎，细胞表面产生新鲜切面，化学助剂与有效成分之间发生基团或分子间的相互吸附或作用，改变植物有效成分的微观性能，表面能增加，比表面积增大，吸附性、极性增加，改变其溶解性，进而提高目标有效成分的生物利用度。
3、本发明的产品适于直接喂食刺参、大菱鲆、奶牛和仔猪等动物，可以用来防治细菌感染或者其他免疫疾病，大大的提高了动物的存活率和免疫力。另外，本发明产品的生产工艺大为简化，生产成本大为降低，更适合大规模生产。
附图说明
图1为普通玉米芯颗粒图；
图2为微切助互作技术处理的玉米芯载体；
图3为标准IgY曲线；
图4为不同时期IgY制剂的吸光值；
图5为本发明生产该特异性卵黄液抗体制剂的流程图。
具体实施方式
下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
将玉米芯粗粉进行超微粉碎，超微粉碎时加入助剂，使用的助剂为碳酸钙，助剂用量为5％(w/w)，粉碎时间10min。
通过扫描电镜照片进行对比，可以发现采用微切助互作技术处理后的玉米芯载体其表面更加粗糙，表面积变得更大，相应的其结合吸附能力更强。实验表明，相对于普通玉米芯载体(见图1)，采用微切助互作技术处理后的玉米芯载体(见图2)吸附能力可增加30％～100％。
将玉米芯粉用微切助互作技术处理后，过100目筛子，称取300g备用；将经过注射灭活黄海希瓦氏菌免疫后的高免蛋，用蛋黄分离器取蛋黄600g打入容器中，搅拌；将蛋黄液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状；添加0.9g山梨酸钾、2.7g丙酸钙、0.23g乙氧基喹啉，搅拌均匀；将备用的300g玉米芯粉加入到卵黄液中，搅拌至均匀，形成软硬度适中的团块状固体；然后用制粒机制成直径3mm软颗粒；室温下晾干；用粉碎机粉碎后过100目筛子，包装；制成饲料添加剂。
实施例2
微切玉米芯载体的制备方法与实施例1相同。
将玉米芯粉用微切助互作技术处理后，过60目筛子，称取500g备用；将经过注射灭活灿烂弧菌免疫后的高免蛋，用蛋黄分离器取蛋黄900g打入容器中，搅拌；将蛋黄液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状；添加1.5g山梨酸钾、4.5g丙酸钙、0.38g乙氧基喹啉，搅拌均匀；将备用的500g玉米芯粉加入到卵黄液中，搅拌至均匀，形成软硬度适中的团块状固体；然后用制粒机制成直径3mm软颗粒；室温下晾干；用粉碎机粉碎后过100目筛子，包装；制成饲料添加剂。
IgY含量检测
称取实施例1制得的IgY制剂1g加30mL包被液，超声波震荡15min，稀释100倍后，每孔加100uL包被96孔酶标板，4℃过夜。用洗涤液洗涤酶标板3次，每孔加100uL封闭液，37℃温育2h后甩干、洗涤3次，再向各孔加兔抗鸡IgG-HRP100uL，37℃反应lh；洗涤液洗涤各孔5次，每孔加100uL TMB底物缓冲液，室温下显色20min，每孔加50uL 2M硫酸终止反应，用酶标仪测OD450/630nm。然后与标准IgY曲线(见图3)对比，算出不同时期样品里的特异性IgY含量(见图4)。
由图4可以看出，本产品在半年内特异性IgY含量并无明显降低并维持在较高的状态，说明本产品可在较长的时间内持续有效。
本发明生产特异性卵黄液抗体制剂的流程图如图5所示。
将各种方法生产IgY制剂进行比较，具体结果如表1所示：
表1 各种方法生产IgY制剂综合比较
从表1可以看出，在不考虑人工成本及设备折旧等因素的情况下，本方法前期投入的设备成本最低，单位能耗降到了原来的1/5甚至更多，节能效果显著，而且生产过程简单，生产方式灵活，制约因素较少，具有很强的实际应用价值。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂，其特征在于，所述特异性卵黄液抗体制剂由特异性卵黄液、微切玉米芯载体、山梨酸钾、乙氧基喹啉、丙酸钙组成；
所述特异性卵黄液质量百分比为30％～80％、微切玉米芯载体质量百分比为20％～70％，两者质量百分比之和为100％；
所述山梨酸钾、乙氧基喹啉、丙酸钙占所述特异性卵黄液和微切玉米芯载体总质量的百分比分别为0.05％～0.2％、0.01％～0.05％、0.1％～0.5％。
2.根据权利要求1所述一种以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂，其特征在于，所述的微切玉米芯载体由玉米芯粗粉和助剂组成，采用微切助互作方式进行处理，将玉米芯粗粉进行超微粉碎5min～15min，超微粉碎时加入助剂；
所述助剂为碳酸钙或碳酸氢钙，所述助剂的用量为微切玉米芯载体质量的1％～8％(w/w)。
3.根据权利要求1所述一种以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂，其特征在于，所述的特异性卵黄液与微切玉米芯载体的质量比为1～3:1。
4.权利要求1所述以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、将玉米芯粉用微切助互作技术处理后，过60～200目筛子，制得玉米芯载体；
S2、按上述比例取特异性卵黄液，先搅拌，再添加山梨酸钾、丙酸钙、乙氧基喹啉，搅拌均匀，制得混合卵黄液；
S3、将步骤S1制得的玉米芯载体加入到步骤S2制得的混合卵黄液中，搅拌均匀，制成软颗粒，20℃～30℃晾干至水分含量达8％以下，粉碎过筛，制成卵黄抗体制剂。
5.根据权利要求4所述以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂的制备方法，其特征在于，步骤S1所述的微切玉米芯载体采用微切助互作方式进行处理，将玉米芯粗粉进行超微粉碎5min～15min，超微粉碎时加入助剂；
所述助剂为碳酸钙或碳酸氢钙，所述助剂的用量为所述微切玉米芯载体质量的1％～8％(w/w)。
6.根据权利要求4所述以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂的制备方法，其特征在于，步骤S2所述特异性卵黄液取自经过注射灭活黄海希瓦氏菌、灿烂弧菌、溶藻弧菌等免疫后的高免鸡蛋；
所述的特异性卵黄液与微切玉米芯载体的质量比为1～3:1。
7.根据权利要求4所述以玉米芯为载体的特异性卵黄液抗体制剂的制备方法，其特征在于，步骤S2将特异性卵黄液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状，再添加山梨酸钾、丙酸钙、乙氧基喹啉。
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