CN106905393B - 一种银杏黄酮类化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种银杏黄酮类化合物，7‑对香豆酰基山奈酚‑3‑O‑α‑L‑鼠李糖‑2″‑β‑D‑葡萄糖苷，较好的抗心肌缺血、抗凝、抗缺氧和增强短期记忆力、清除自由基、延缓衰老等药理作用。

Description

一种银杏黄酮类化合物
技术领域
本发明涉及天然药物化学领域，具体涉及一种银杏黄酮类化合物。
背景技术
银杏叶提取物(Ginko Biloba Extract,GBE)是以银杏Ginkgo biloba L.的叶为原料，采用适当的溶剂，提取的有效成分富集的一类产品，为浅黄棕色可流动性粉末，有本品固有的香气，味苦，具有活血、化瘀、通络的功效。目前国际通用的银杏叶提取物质量标准，即标准银杏提取物(银杏总黄酮≥24％，萜内酯≥6％，银杏酸≤10ppm)，由上世纪七十年代德国率先制定。
银杏叶提取物除具有显著的拮抗PAF受体外，还可以在抗炎、抗过敏、扩张血管、保护心脑血管、改善外周血液循环、降低血清胆固醇及辅助抗癌等方面发挥药效，广泛应用于心脑血管、神经等系统疾病的防治和保健。
发明内容
本发明涉及一种银杏黄酮类化合物，7-对香豆酰基山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-2″-β-D-葡萄糖苷(化合物1)，其结构式为式一：
Figure GDA0002232194080000011
以标准银杏叶提取物EGB 50为原料，经水或有机溶剂或它们的混合溶剂提取。制备步骤如下：
⑴将银杏叶提取物用溶剂溶解，过大孔树脂柱分离，不同梯度的乙醇水溶液洗脱，收集40％-70％乙醇水之间的流分，浓缩、干燥，得提取物⑴；
⑵将提取物⑴用溶剂溶解，过硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇不同比例洗脱，收集40∶1～20∶1 之间的流分，浓缩、干燥，得黄酮类成分⑵；
⑶将黄酮类成分⑵用溶剂溶解，过反相层析柱分离，以不同梯度的甲醇-水溶液洗脱，收集 40∶1～20∶1之间的流分，通过TLC、HPLC、HPLC Q-TOF MS分析，
综合文献数据库检索，H-NMR、C-NMR、HMBC谱鉴定其结构为：7-对香豆酰基山奈酚-3-O-α-L- 鼠李糖-2″-β-D-葡萄糖苷，纯度97.08％。
一种银杏黄酮类化合物，所述的化合物能用于制备抗心肌缺血、抗凝、抗缺氧和增强短期记忆力、清除自由基、延缓衰老的组合物。
一种银杏黄酮类化合物，所述药物通过添加药学上可接受的载体制备成各种剂型。
一种银杏黄酮类化合物，所述剂型为片剂、锭剂、丸剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、口服液、悬浮液、乳剂、注射剂、栓剂或贴剂。
本发明的银杏黄酮类成分，具备与其他银杏黄酮类似抗氧化功效，具较好的抗心肌缺血、抗凝、抗缺氧和增强短期记忆力、清除自由基、延缓衰老等药理作用。其化学结构稳定，溶解性好，可与医学上接受的药物辅料组成药物组合及其制剂。
附图说明：
图1：本发明所得化合物HPLC
图2：总黄酮HPLC Q-TOF MS
图3：NMR-H谱
图4：NMR-C谱
图5：HMBC谱
实施例1：本发明所得化合物的HPLC
本发明所得化合物的HPLC条件如下：
A.仪器：安捷伦1260HPLC
B.HPLC的检测条件：紫外360nm条件下检测
C.HPLC流动相：
A相：0.1％甲酸-水
B相：乙腈
D.时间程序：
Figure GDA0002232194080000021
Figure GDA0002232194080000031
E.流速：1ml/min
本发明所得化合物的HPLC如图1。
实施例2：本发明所得化合物的HPLC Q-TOF MS
A：HPLC的检测条件：紫外360nm条件下检测
B：HPLC流动相：
A相：0.1％甲酸-水
B相：乙腈
C：时间程序：
D：质谱条件：
色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(4.6×250mm,5μm)，流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈，梯度洗脱：0～10min，10～10％B；10～20min，10～15B％；20～25min，15～19B％；25～30min，19～ 40％B；30～35min，40～60B％；35～40min，60～90B％流速，1.0mL/min；柱温，25℃；进样量， 1.0μL；裂解电压120V；质量扫描范围为m/z 100～1000，碰撞电压为15～30eV。
本发明所得总黄酮HPLC Q-TOF MS：如图2
实施例3NMR-H谱、NMR-C谱、HMBC谱
NMR-H谱，见图3 ：1H-NMR DMSO-d6 300K AV-300
NMR-C谱，见图4 ：C13-NMR DMSO-d6 300K AV-300
HMBC谱，见图5 。
实施方式3：
取标准银杏叶提取物10克，大孔树脂吸附，分别以不同梯度的乙醇水溶液洗脱，收集40％-70％之间的流分，浓缩、干燥，得提取物⑴；⑵将提取物⑴用溶剂溶解，过硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇不同比例洗脱，收集40∶1～20∶1之间的流分，浓缩、干燥，得黄酮类成分⑵；⑶将黄酮类成分⑵用甲醇溶解，过反相层析柱分离，以不同梯度的甲醇-水溶液洗脱，收集40∶1～20∶1之间的流分，通过HPLC、HPLC Q-TOF MS分析，综合文献数据库检索，H-NMR、C-NMR、HMBC谱鉴定其结构为式一。
HPLC Q-TOF MS负离子模式检测，分子量739.1886，出峰时间43min/50min。反相硅胶纯化至 97％纯度，核磁确认结构。
实施例4
实验材料：黄嘌呤氧化酶(Sigma，USA)，酶标仪(Thermofisher，美国)，黄嘌呤(上海博蕴试剂公司)，其他试剂购自上海沪试。
实验方法：制备含有不含样品的磷酸盐缓冲溶液(75mM，pH7.4)的空白溶液。将含有100μL试验溶液(终浓度为0,15.6,31.25,62.5,125,250,500μM)和50μL 0.08u/mL酶溶液的反应混合物加入 96孔板中，避光室温孵育30分钟。加入50μL的0.48mM黄嘌呤起始反应，在290nm处用酶标仪，每隔15秒测量吸光度一次，测定0-300s内吸光度值。所有样品各4个重复，通过Graph Pad Prism version 6.02软件计算统计分析和IC 50值。
黄嘌呤氧化酶抑制率根据下列公式计算：
抑制率＝[dA/dt(BLANK)-dA/dt(TEST)]/dA/dt(BLANK)*100
实验结果：
Figure GDA0002232194080000041
表1 NMR spectral data of compound 14(DMSO-d6,500MHz)
Figure GDA0002232194080000051

Claims (2)

1.一种银杏黄酮类化合物的分析方法，其特征在于，
所述银杏黄酮类化合物为7-对香豆酰基山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-2″-β-D-葡萄糖苷，其HPLC条件如下：
A.仪器：安捷伦1260HPLC
B.HPLC的检测条件：紫外360nm条件下检测
C.HPLC流动相：
A相：0.1％甲酸-水
B相：乙腈
D.时间程序：
Figure FDA0002115301470000011
E.流速：1ml/min
7-对香豆酰基山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-2″-β-D-葡萄糖苷的HPLC Q-TOF MS条件如下：
A：HPLC的检测条件：紫外360nm条件下检测
B：HPLC流动相：
A相：0.1％甲酸-水
B相：乙腈
C：时间程序：
Figure FDA0002115301470000012
Figure FDA0002115301470000021
D：质谱条件：
色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(4.6×250mm,5μm)，
流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈，
梯度洗脱：
0～10min，10～10％B；
10～20min，10～15B％；
20～25min，15～19B％；
25～30min，19～40％B；
30～35min，40～60B％；
35～40min，60～90B％
流速，1.0mL/min；柱温，25℃；进样量，1.0μL；
裂解电压120V；质量扫描范围为m/z 100～1000，碰撞电压为15～30eV。
2.一种银杏黄酮类化合物在制备抑制黄嘌呤氧化酶的组合物上的用途，其特征在于，
所述银杏黄酮类化合物为7-对香豆酰基山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-2″-β-D-葡萄糖苷。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1403080A (zh) * 2002-10-21 2003-03-19 中国人民解放军第二军医大学 山奈酚及其衍生物用于制备防治心脑血管疾病药物的用途
CN101813674A (zh) * 2010-03-11 2010-08-25 北京市药品检验所 测定银杏叶或其相关制剂中山柰酚葡萄糖鼠李糖苷含量的方法
CN103110670A (zh) * 2012-10-23 2013-05-22 北京华润高科天然药物有限公司 一种银杏叶中高纯度黄酮组分的高效提取分离制备方法
CN104523771A (zh) * 2015-01-13 2015-04-22 中国药科大学 一种银杏叶总黄酮及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1403080A (zh) * 2002-10-21 2003-03-19 中国人民解放军第二军医大学 山奈酚及其衍生物用于制备防治心脑血管疾病药物的用途
CN101813674A (zh) * 2010-03-11 2010-08-25 北京市药品检验所 测定银杏叶或其相关制剂中山柰酚葡萄糖鼠李糖苷含量的方法
CN103110670A (zh) * 2012-10-23 2013-05-22 北京华润高科天然药物有限公司 一种银杏叶中高纯度黄酮组分的高效提取分离制备方法
CN104523771A (zh) * 2015-01-13 2015-04-22 中国药科大学 一种银杏叶总黄酮及其制备方法

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