CN106884042A - 一种评估营养元素摄入量的基因检测方法 - Google Patents

一种评估营养元素摄入量的基因检测方法 Download PDF

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CN106884042A CN201611208238.9A CN201611208238A CN106884042A CN 106884042 A CN106884042 A CN 106884042A CN 201611208238 A CN201611208238 A CN 201611208238A CN 106884042 A CN106884042 A CN 106884042A
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Abstract

本发明提供了一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于包括以下步骤:(1)根据在线引物设计软件设计聚合酶链式反应PCR扩增引物和单碱基延伸反应引物;(2)对待测DNA样本进行稀释后,进行PCR扩增反应、虾碱性磷酸酶处理反应、待测基因单碱基延伸反应、样本脱盐程序、点样至芯片程序;(3)使用单核苷酸多态性分型检测技术,分析待测DNA样本的基因类型;(4)根据得到的数据得出基因分型结果。

Description

一种评估营养元素摄入量的基因检测方法
技术领域
本发明涉及一种基因检测方法,尤其涉及一种用于评估营养元素摄入量的基因检测方法。
背景技术
维生素是人体生命活动过程中必需的一类有机化合物,有3个特点:多存在于天然食物中;人体一般不能合成,必须由食物供给;它既不是构成机体组织的原料,也不提供能量,而且生理需要量小,但又是人体绝不能缺少的。
维生素补充的缺乏和过量,都会对人体的健康产生较大的影响。维生素参与生命活动过程中各个环节——维持神经系统正常功能、参与蛋白质脂肪合成及代谢、参与各种酶和抗体的合成等。维生素缺乏,会严重影响生理功能的正常代谢,甚至威胁到生命。而过量的补充维生素不仅会破坏人体内环境的稳定,严重甚至会发生中毒。例如,维生素A缺乏,会导致夜盲症,角膜干燥症,皮肤干燥,脱屑,过量则会引起中毒现象。维生素D缺乏会导致儿童患佝偻病,成人易患骨质疏松症。过量所造成的后果比患佝偻病还危险。据观察,若小儿每日服2万单位,连服几周或数月之后,可出现头痛、厌食、恶心、呕吐、口渴、嗜睡、多尿、脱水、高热及昏迷,尿内出现蛋白和红细胞,如不及时停药,可因高钙血症及肾功能衰竭而致死。孕妇若大量服用维生素A、D,则会引起胎儿骨骼发育异常、先天性白内障、新生儿血钙过高以及智力迟钝等不良后果。维生素E缺乏:不育,流产,肌肉性萎缩等。过量:可能导致血栓,还会引起月经过多或闭经现象,甚至会影响其生育。对于有严重高血压、心肌损害和采用胰岛素治疗的糖尿病患者,使用维生素E稍有不慎,极易引起血小板聚集与血栓形成。维生素K:缺乏易导致新生儿出血疾病,如吐血、肠子、脐带及包皮部位出血;成人不正常凝血,导致牙龈出血、流鼻血、尿血、胃出血及瘀血等症状;低凝血酶原症,症状为血液凝固时间延长、皮下出血;小儿慢性肠炎;热带性下痢。过量则会引起严重的黄癌或溶血性贫血及肝细胞损害等,还会有过敏反应。维生素B9(叶酸)缺乏:一旦机体发生叶酸缺陷或者叶酸代谢酶的缺陷,就会导致细胞周期不正常,DNA、蛋白质甲基化反应异常、DNA碱基无法正常合成等多种生化反应异常。白细胞减少,红细胞的体积变大,发生巨细胞性贫血。叶酸是一种水溶性B族维生素,叶酸缺乏是导致出生缺陷的主要原因。叶酸的临床功能除了预防胎儿神经管缺陷外,还能降低孕妇妊娠高血压、自发性流产和胎儿宫内发育迟缓、早产以及新生儿低出生体重等发病率。叶酸补充不足或是叶酸利用能力差导致体内叶酸缺乏则会造成:导致胎儿出生体重过低、生长缓慢。导致孕妇体虚、神经衰弱、恶性贫血等症状。引发叶酸过敏症。增加结肠腺瘤、乳腺癌的风险。
因此,对这些营养元素的合理科学的补充尤为重要。
随着人类基因组计划的完成,生命科学领域研究的热点转向从已知基因组序列中了解各个基因的功能、表达调控、多个基因及其产物之间的相互作用以及基因组与环境的相互作用等方向上。基因组序列的单核苷酸多态性(SNP)是指在基因组上单个核苷酸的变异,包括置换、颠换、插入和缺失。特定的SNPs等位基因可被认为是人类遗传疾病的致病因子。对基因组序列的单核苷酸多态性(SNP)的研究成为重点。在个人中筛选这类等位基因可以检查其对疾病的遗传易感性。
随着人们生活水平的提高,越来越多的人们喜欢通过日常饮食和/或保健品摄入一些对人体必需的营养元素,以便使身体更加健康,远离亚健康状态。多数人对营养元素的摄入量只是盲目摄入或根据保健产品说明书指示的用量食用,但营养元素的吸收率和代谢率因个体的不同而不同,且这些营养元素大都为人体所需要的微量元素,个体自身对其的需要量本身就很少,稍有不慎,极易导致补充过量。摄入不足,达不到应有的预期效果;摄入过量,则不仅无益,反而会危害身体健康,后果严重者,还可能会造成对内脏器官的不可逆转的损伤。所以,科学地指导个体摄入合理的营养元素至关重要。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,从人体的基因差异出发,通过检测基因位点,了解由人体基因型决定的对营养吸收代谢能力,精准地抓住基因型,快速准确地找到最适合个性特征的营养供给方式,科学指导用户通过改善生活环境和调整饮食生活方式达到营养均衡,实现精准全面的营养健康指导。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本发明提供了一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)根据在线引物设计软件设计聚合酶链式反应PCR扩增引物和单碱基延伸反应引物;
(2)对待测DNA样本进行稀释后,进行PCR扩增反应、虾碱性磷酸酶处理反应、待测基因单碱基延伸反应、样本脱盐程序、点样至芯片程序;
(3)使用单核苷酸多态性分型检测技术,分析待测DNA样本的基因类型;
(4)根据得到的数据得出DNA样本的基因分型结果和建议的营养元素摄入量。
优选地,所述方法可测定与维生素A代谢相关的RBP4基因的C/T基因型,和/或与维生素D代谢相关的VDR基因的C/A基因型,和/或与维生素E代谢相关的ZPR1基因的G/C基因型,和/或与维生素K代谢相关的GGCX基因的G/A基因型和钙代谢代谢相关的VDR基因的G/A基因型,和/或与叶酸代谢相关的MTHFR基因的C/T基因型、MTHFR基因的A/C基因型、MTRR基因的A/G基因型、CBS基因的C/G基因型。
进一步地,根据测得的叶酸代谢相关的基因MTHFR-C/T型,MTHFR-A/C型,MTRR-A/G型,CBS-C/G型的基因型和各基因型系数,得出待测DNA样本个体的叶酸基因型系数G,其中G为测得的4种基因型分别对应的系数之和的平均值,其中叶酸的不同基因型系数为:
进一步地,所述基因型系数,结合个体的年龄和性别,按照下述方法得到营养元素叶酸的建议摄入量,其中:Y表示叶酸建议摄入量(单位:g/天);SA为体表面积;W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);G为个体基因型系数:
1-6个月幼儿:叶酸建议摄入量:(58.5-71.5)g/天;
7-12个月幼儿:叶酸建议摄入量:(72.0-81.1)g/天;
1-8岁儿童:Y=K1×SA×G+B1;SA=K2×W+B2;其中,K1的范围为82.43-100.75,B1的范围为44.22-54.04;K2的范围为0.0315-0.0385,B2的范围为0.09-0.11;
9-18岁男性:Y(Male)=K1×SA×G+B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为128.29-156.81,B1的范围为25.25-30.87;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
9-18岁女性:Y(Female)=K1×SA×G+B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为156.66-191.48,B1的范围为8.19-10.01;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
19岁以上男性:Y(Male)=K1×SA×G+B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为155.73-190.33,B1的范围为34.69-42.39;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
19岁以上女性:Y(Female)=K1×SA×G+B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为179.28-219.12,B1的范围为34.24-41.84;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
妊娠期/哺乳期女性:Y=K1×SA×G+B1;SA=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为168.20-205.58,B1的范围为163.19-199.45;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0142-0.0174,B2的范围为0.0415-0.0507。
进一步地,维生素E代谢相关的基因ZPR1-C/G的基因型系数分别为:GG型系数:0.9-1.1;GC型系数:2.84-3.47;CC型系数:3.33-4.07。
进一步地,所述基因型系数,结合个体的不同年龄、性别按照下述方法得到维生素E的建议摄入量,其中:Y表示维生素E建议摄入量(单位:mg/天);SA为体表面积;W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);G为个体基因型系数G:
1-8岁儿童:Y=K1×SA×G-B1;SA=K2×W+B2;其中,K1的范围为16.85-20.59,B1的范围为2.19-2.67;K2的范围为0.0315-0.0385,B2的范围为0.09-0.11;
9-18岁男性:Y(Male)=K1×SA×G-B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为32.36-39.56,B1的范围为25.49-31.16;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
9-18岁女性:Y(Female)=K1×SA×G-B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为39.31-48.05,B1的范围为30.13-36.83;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
19岁以上男性:Y(Male)=K1×SA×G-B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为40.16-49.08,B1的范围为48.77-59.61;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
19岁以上女性:Y(Female)=K1×SA×G-B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为46.70-57.08,B1的范围为52.17-63.77;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
妊娠期/哺乳期女性:Y=K1×SA×G-B1;SA=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为41.14-50.28,B1的范围为50.34-61.52;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0142-0.0174,B2的范围为0.0415-0.0507。
进一步地,根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄和性别按照下述方法得到维生素A的建议摄入量,其中:Y表示建议摄入量(单位:g/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);
1-8岁儿童:
CC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为12.81-15.65,B1的范围为80.82-98.78;
TC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为10.09-12.34,B1的范围为73.07-89.31;
TT型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为18.12-22.14,B1的范围为95.99-117.32;
9-18岁男性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.02-2.46,K2的范围为4.22-5.16,B1的范围为2.06-2.52;
TC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.37-2.89,K2的范围为4.95-6.05,B1的范围为1.97-2.41;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.25-8.86,K2的范围为15.16-18.52,B1的范围为58.02-70.92;
9-18岁女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.09-2.56,K2的范围为4.66-5.69,B1的范围为8.86-10.82;
TC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.60-3.18,K2的范围为5.79-7.07,B1的范围为12.97-15.85;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为8.14-9.94,K2的范围为18.05-22.06,B1的范围为57.82-70.66;
19岁以上男性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.56-1.90,K2的范围为3.27-3.99,B1的范围为16.75-20.47;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.63-3.21,K2的范围为5.49-6.72,B1的范围为4.46-5.46;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.54-9.22,K2的范围为15.79-19.29,B1的范围为52.06-63.62;
19岁以上女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.48-1.80,K2的范围为3.28-4.00,B1的范围为22.25-27.19;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.17-2.65,K2的范围为4.82-5.89,B1的范围为16.63-20.33;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为8.12-9.92,K2的范围为18.0-22.0,B1的范围为31.64-38.67;
妊娠期/哺乳期女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.29-1.58,K2的范围为3.62-4.42,B1的范围为152.64-186.56;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.52-1.86,K2的范围为4.22-5.16,B1的范围为150.87-184.39;
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为6.85-8.37,K2的范围为19.05-23.29,B1的范围为107.59-131.51。
进一步地,根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄和性别按照下述方法得到维生素D的建议摄入量,其中:Y表示建议摄入量(单位:g/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);
1-8岁儿童:
CC型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为1.47-1.79,B1的范围为40.01-48.91;
CA型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.84-1.02,B1的范围为41.82-51.12;
AA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为0.67-0.81,B1的范围为46.12-56.36;
9-18岁男性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.06-0.08,K2的范围为0.13-0.15,B1的范围为25.97-31.75;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.02-0.04,K2的范围为0.06-0.08,B1的范围为25.61-31.29;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.14-0.17,K2的范围为0.27-0.33,B1的范围为23.73-29.00;
9-18岁女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.009-0.011,K2的范围为0.018-0.022,B1的范围为8.26-10.09;
CA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.036-0.044,K2的范围为0.081-0.099,B1的范围为7.90-9.66;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.21-0.25,K2的范围为0.45-0.55,B1的范围为6.53-7.98;
19岁以上男性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.081-0.099,K2的范围为0.171-0.209,B1的范围为35.67-43.59;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.072-0.088,K2的范围为0.162-0.198,B1的范围为35.56-43.46;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.108-0.132,K2的范围为0.216-0.264,B1的范围为33.49-40.93;
19岁以上女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.09-0.11,K2的范围为0.207-0.253,B1的范围为34.98-42.76;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.081-0.099,K2的范围为0.18-0.22,B1的范围为34.89-42.65;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.108-0.132,K2的范围为0.25-0.31,B1的范围为33.33-40.73;
妊娠期/哺乳期女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.41-0.51,K2的范围为1.14-1.39,B1的范围为166.52-203.52;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.39-0.48,K2的范围为1.09-1.33,B1的范围为170.24-208.07;
AA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.297-0.363,K2的范围为0.828-1.01,B1的范围为165.59-202.39;
进一步地,根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄和性别按照下述方法得到维生素K的建议摄入量,其中:Y表示建议摄入量(单位:μg/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);
1-8岁儿童:
TT型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.522-0.638,B1的范围为42.73-52.23;
TC型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.144-0.176,B1的范围为43.80-53.54;
CC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为0.54-0.66,B1的范围为45.78-55.96;
9-18岁男性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.144-0.176,K2的范围为0.306-0.374,B1的范围为23.55-28.79;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.18-0.22,K2的范围为0.387-0.473,B1的范围为23.10-28.24;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.24-0.29,K2的范围为0.50-0.62,B1的范围为22.48-27.48;
9-18岁女性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.25-0.31,K2的范围为0.55-0.67,B1的范围为6.17-7.54;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.26-0.32,K2的范围为0.59-0.73,B1的范围为6.02-7.36;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.32-0.39,K2的范围为0.71-0.87,B1的范围为5.59-6.83;
19岁以上男性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.126-0.154,K2的范围为0.26-0.32,B1的范围为33.27-40.67;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.24-0.29,K2的范围为0.51-0.63,B1的范围为31.86-38.94;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.41-0.49,K2的范围为0.85-1.03,B1的范围为30.02-36.69;
19岁以上女性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.09-0.11,K2的范围为0.21-0.25,B1的范围为33.49-40.93;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.17-0.21,K2的范围为0.39-0.47,B1的范围为32.83-40.13;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.39-0.47,K2的范围为0.86-1.05,B1的范围为31.09-38.00;
妊娠期/哺乳期女性:
TT型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.29-0.36,K2的范围为0.83-1.01,B1的范围为165.59-202.39;
TC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.18-0.22,K2的范围为0.50-0.62,B1的范围为164.66-201.26;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.04-0.06,K2的范围为0.14-0.16,B1的范围为162.80-198.98;
进一步地,根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄和性别按照下述方法得到钙的建议摄入量,其中:Y表示建议摄入量(单位:μg/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);
1-8岁儿童:
GG型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为12.81-15.65,B1的范围为80.82-98.78;
GA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为18.52-22.64,B1的范围为97.14-118.72;
AA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为10.39-12.69,B1的范围为73.89-90.31;
9-18岁男性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.19-5.13,K2的范围为8.77-10.71,B1的范围为22.92-28.02;
GA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.48-5.48,K2的范围为9.39-11.47,B1的范围为26.33-32.18;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.45-7.89,K2的范围为13.5-16.5,B1的范围为48.99-59.87;
9-18岁女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.25-5.19,K2的范围为9.41-11.51,B1的范围为26.26-32.09;
GA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.88-5.96,K2的范围为10.82-13.22,B1的范围为31.38-38.35;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.26-8.88,K2的范围为16.10-19.68,B1的范围为50.74-62.02;
19岁以上男性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为3.04-3.72,K2的范围为6.37-7.79,B1的范围为0.32-0.39;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.93-3.59,K2的范围为6.13-7.49,B1的范围为0.99-1.21;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.26-7.66,K2的范围为13.11-16.03,B1的范围为37.38-45.68;
19岁以上女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.28-4.00,K2的范围为7.27-8.88,B1的范围为7.27-9.32;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为4.15-5.07,K2的范围为9.19-11.24,B1的范围为0.59-0.73;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.75-8.25,K2的范围为14.98-18.30,B1的范围为20.56-25.12;
妊娠期/哺乳期女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.23-3.95,K2的范围为8.98-10.97,B1的范围为136.98-167.42;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.29-4.02,K2的范围为9.14-11.18,B1的范围为136.51-166.85;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为5.63-6.88,K2的范围为15.65-19.13,B1的范围为117.51-143.63。
优选地,所述扩增引物和单碱基延伸反应引物包含:适用于维生素A代谢相关的RBP4基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGCAAGGGTTTAGGATCATTC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGGATGCCGATTCTCTTAAAAGG,单碱基延伸反应引物CTCGTCTCTTAAAAGGGTCCAT;和/或
适用于维生素D代谢相关的VDR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGTAGAGAAGAAGGCACAGGAG,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGTGCCGTTGAGTGTCTGTGTG,单碱基延伸反应引物GGATTGAGCAGTGAGG;和/或
适用于维生素E代谢相关的ZPR1基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGCCTCCATGACACTAATCACC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGGGAACTTGAAGTCTAGTGGG,单碱基延伸反应引物:GGGGAAAAATGACAATAAACAGAT;和/或
适用于维生素K代谢相关的GGCX基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGGGCTCCTCTTATACACACAG,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGTCGGAAGCTGGTGTCCTACT,单碱基延伸反应引物:CCTTGTCCTACTGCCCCC;和/或
适用于钙代谢相关的VDR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGAAGTCTCCAGGGTCAGGCA,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGTGGCCTGCTTGCTGTTCTTA,单碱基延伸反应引物:GCTGTTCTTACAGGGA;和/或
适用于叶酸代谢相关的MTHFR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGCACTTGAAGGAGAAGGTGTC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGAAGTGATGCCCATGTCGGTG,单碱基延伸反应引物:AGAGGCGTGATGATGAAATCG、适用于叶酸代谢相关的MTHFR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGTCTCCCGAGAGGTAAAGAAC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGTCTACCTGAAGAGCAAGTCC,单碱基延伸反应引物:GGAGCTGACCAGTGAAG;适用于叶酸代谢相关的MTRR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGTATGCTACACAGCAGGGACA,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGGAAAATCCATGTACCACAGC,单碱基延伸反应引物:CCACAGCTTGCTCACA;适用于叶酸代谢相关的CBS基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGCTAATTCACGTCTCACTCCC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGCGGCTCAGGTCAGAGCGAT,单碱基延伸反应引物:CCCTCCGCGCAGCTCCGCCG。
本发明与现有技术相比具有明显的优点和有益效果。借由上述技术方案,本发明至少具有下列优点及有益效果:
1.本发明提供的评估营养元素摄入量的基因检测方法通过对营养元素代谢基因型检测,通过检测基因位点,从基因差异出发了解人体体内营养环境及对营养吸收代谢能力的差异,精准地抓住基因型,快速准确地找到最适合个性特征的营养供给方式,科学指导用户通过改善生活环境和调整饮食生活方式达到营养均衡,全方位扫除健康隐患,实现精准全面的营养健康指导。
2.本实验采用的Sequenom MassARRAY SNP基因型分析技术,灵活,可以自由选择感兴趣的SNP位点;准确,直接检测待测物分子量,准确度超过99.7%;高通量,一张芯片上可完成384个样品的多重iPLEX GOLD实验,每个反应孔可实现多达40重反应,每天最多能进行十万个基因型分析;性价比高,无需荧光标记,成本大大降低。
3.本发明提供了影响不同营养元素的吸收率的不同基因型的系数,通过参考不同基因型系数可以直观地为不同个体提供有价值的科学指导。
4.本发明提供的叶酸摄入量的计算方式,为不同个体摄入叶酸的量提供了精确的量值,解决了以往人们补充叶酸的盲目性问题。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段及功效,以下结合较佳实施例,对依据本发明提出的具体实施方式详细说明如后。
一、营养元素代谢相关基因多态性及其解读
1.相关基因多态性(见表1)
(表1)
2.相关基因多态性解读
1)RBP4基因
该基因与维生素A在体内的代谢相关,其编码的蛋白属于载脂蛋白超家族,是血液中视黄醇(维生素A)的主要载体,负责将肝脏储存的维生素A传递到周围各组织中。与RBP4基因基因突变相关的疾病包括:视网膜营养性萎缩症、虹膜缺损、粉刺痤疮综合征、小眼畸形、腹壁多脂症等。
基因多态性分析如下:
CC:正常型,基因编码蛋白质功能正常,体内代谢循环稳定,个体补充维生素A的量按照正常水平补充即可。
CT:弱风险型,可能会出现维生素A代谢异常,维生素A摄入量应该适量增加。
TT:风险型,可能带来腹壁多脂症(肥胖)风险,需要加大维生素A的摄入量。
2)VDR基因
该基因位于染色体12q13,与维生素D在体内的合成代谢相关。其编码的蛋白质在体内是维生素D(1,25-二羟维生素D3)的细胞核激素受体,是一种基因转录调节蛋白,在维持机体钙磷平衡、骨代谢、调节免疫、内分泌和细胞分化等方面都发挥重要作用,该基因的突变与骨质疏松症、再生障碍性贫血症和II型抗维生素D佝偻病相关。
基因多态性分析如下:
AA:正常型,基因编码蛋白质功能正常,体内代谢循环稳定,个体补充维生素D的量按照正常水平补充即可。
AC:弱风险型,可能会出现维生素D代谢异常,维生素D摄入量应该适量增加。
CC:风险型,与再生障碍性贫血症风险呈正相关,需要加大维生素D的摄入量。
3)ZPR1基因
该基因编码的蛋白和运动神经元蛋白相互作用,增强mRNA前体剪接来诱导神经元分化和轴突生长。该基因缺陷可导致前列腺癌、脊髓性肌萎缩和肌肉萎缩。作为一种信号分子,将细胞内的增殖生长信号传递到细胞核。研究表明维生素E(α-生育酚)在细胞生长和分化的调控中起着关键的作用,ZPR1基因的多态性参与维生素E的代谢和运转,可降低患前列腺癌的风险。
基因多态性分析如下:
GG:正常型,基因编码的蛋白能够维持体内维生素E的正常的代谢与运转,补充维生素E的量按照正常水平补充即可。
GC:弱风险型,可能会出现维生素E代谢异常,维生素E摄入量应该适量增加。
CC:风险型,导致体内维生素E代谢出现异常,大大增加患前列腺癌的风险,需要加大维生素E的补充摄入量。
4)GGCX基因
该基因负责编码糙面内质网的整体膜蛋白,一种维生素K依赖性蛋白γ-羧基谷氨酸,维生素K依赖性的蛋白质影响许多生理过程,包括影响血液凝固、预防血管钙化和一些炎症反应等等,这个基因的等位基因变异已经与弹性假黄瘤样相关的多种凝血因子缺乏症相关。另外维生素K还参与人体的骨骼代谢,调节骨骼中磷酸钙的合成,特别是老年人,他们的骨密度(BMD)与维生素K呈正相关,经常补充维生素K的妇女能有效预防骨折的风险。
基因多态性分析如下:
AA:正常型,基因编码的蛋白能够维持体内维生素K的正常的代谢与运转,补充维生素K的量按照正常水平补充即可。
GA:弱风险型,可能会出现维生素K代谢异常,维生素K摄入量应该适量增加。
GG:风险型,骨质疏松高风险人群,维生素K在体内代谢异常,需要加大维生素K的补充摄入量。
5)MTHFR基因CT型
MTHFR基因第五个外显子上677位mRNA上的一个C/T多态,引起其编码的蛋白质第222个氨基酸由Ala(A)变为Val(V),与体内叶酸的代谢有关。MTHFR基因编码的蛋白能催化5,10-亚甲基四氢叶酸转变成5-甲基四氢叶酸,该基因的突变与亚甲基四氢叶酸还原酶的缺乏有关系,该基因的遗传变异可增加闭塞性血管疾病、神经管缺陷、结肠癌、和急性白血病的易感性。
基因多态性分析如下:
CC:正常型,MTHFR活性为100%,体内叶酸代谢正常,个体结合自身其他条件按照正常水平补充叶酸即可。
CT:风险型,MTHFR活性为71%,亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)活性中等,建议适当增加叶酸的补充量,具体摄入量需结合个体自身条件与基因型。
TT:高风险型,MTHFR活性为34%,亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)活性低,建议增加叶酸的补充量,具体摄入量需结合个体自身条件与基因型。
6)MTHFR基因AC型
MTHFR基因第五个外显子上677位mRNA上的一个C/T多态,引起其编码的蛋白质第222个氨基酸由Ala(A)变为Val(V),与体内叶酸的代谢有关。MTHFR基因编码的蛋白能催化5,10-亚甲基四氢叶酸转变成5-甲基四氢叶酸,该基因的突变与亚甲基四氢叶酸还原酶的缺乏有关系,该基因的遗传变异可增加闭塞性血管疾病、神经管缺陷、结肠癌、和急性白血病的易感性。
基因多态性分析如下:
AA:MTHFR活性为100%,体内叶酸代谢正常,个体结合自身其他条件按照正常水平补充叶酸即可。
AC:MTHFR活性为68%,亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)活性中等,建议适当增加叶酸的补充量,具体摄入量需结合个体自身条件与基因型。
CC:MTHFR活性为46%,亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)活性低,建议增加叶酸的补充量,具体摄入量需结合个体自身条件与基因型。
7)MTRR基因
该基因位于5p15.3-p15.2之间,其第2个外显子处的一个A/G多态性,引起编码的蛋白第22个氨基酸由Ile变为Met(Ile22Met)。MTRR基因编码5-甲基四氢叶酸高半胱氨酸甲基转移酶还原酶,该酶的活性对于叶酸代谢有重要的作用。该基因发生突变常引起甲基维生素缺乏症、巨红细胞性贫血,并经常用来研究与脊柱裂、唐氏综合症、神经管缺陷、白血病等疾病的关系。
基因多态性分析如下:
AA:MTRR活性为100%,体内叶酸代谢正常,个体结合自身其他条件按照正常水平补充叶酸即可
AG:MTRR活性为47.6%,酶活性中等,建议适当增加叶酸的补充量,具体摄入量需结合个体自身条件与基因型。
GG:MTRR活性为31%,酶活性较低,建议增加叶酸的补充量,具体摄入量需结合个体自身条件与基因型。
8)CBS基因
该基因是一个蛋白编码基因,其编码的酶用于催化同型半胱氨酸转化为胱硫醚,与叶酸在体内的代谢也有相关性,该基因突变可以引起胱硫醚合成酶缺乏症,导致高胱氨酸尿症,有研究表明CC型多态性可能导致先天心脏病等出生缺陷的发病率升高。
基因多态性分析如下:
GG:保护型,与正常叶酸补充剂量相比应当适量减少叶酸的补充摄入量,具体剂量应该结合个体自身条件与相应基因型。
CG:保护型,与正常叶酸补充剂量相比应当适量减少叶酸的补充摄入量,具体剂量应该结合个体自身条件与相应基因型。
CC:风险型,应该按照正常的叶酸补充剂量来补充,具体剂量应该参考个体的相关条件与基因型。
9)VDR基因
维生素D的关联受体(VDR)基因多态性影响膳食中钙摄入量与骨密度的关系。
基因多态性分析如下:
GG:正常型,基因编码蛋白质功能正常,体内代谢循环稳定,个体补充钙元素的量按照正常水平补充即可
GA:弱风险型,与正常人相比,该基因型的钙元素吸收能力较弱,需要额外进行补充。
AA:高风险型,该基因型突变频率占人群总数的14.8%,属于钙元素的极弱吸收类型,应该加大剂量补充钙元素,以维持人体正常的生理机能。若补充不及时容易造成由于身体钙缺失而影响骨骼与牙齿的发育,可导致婴幼儿佝偻病、成人骨软化症与骨质疏松症的发生;血清钙含量不足,可使神经肌肉的兴奋性提高,引起抽搐。
二、本实施例提供了一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,包括以下步骤:
(1)根据Agena公司在线引物设计软件设计核酸质谱检测法基因分型引物(见表2),其中1st-PCRP和2nd-PCRP为PCR扩增引物,UEP_SEQ为单碱基延伸反应引物。
本实施例中包含的引物包含适用于维生素A相关的RBP4基因,维生素D相关的VDR基因,维生素E相关的ZPR1基因,维生素K相关的GGCX基因和钙代谢相关的VDR基因,和与叶酸代谢相关的MTHFR基因、MTHFR基因、MTRR基因、CBS基因的PCR引物和单碱基延伸反应引物。需要说明的是,每种营养元素相关的基因的PCR引物和单碱基延伸反应引物可根据检测需要单独或组合其中的几种适用于本方法中。
(表2)
(2)采集待测样本,对待测DNA样本进行稀释后,进行PCR扩增反应、虾碱性磷酸酶(SAP)处理反应、待测基因单碱基延升反应、样本脱盐程序、点样至芯片程序;
1)采样:采用口腔拭子来刮取口腔上皮脱落细胞,样本信息见下表3。
(表3)
2)gDNA提取与浓度测定。
使用QIAamp DNA Mini Kit试剂盒提取基因组DNA,使用Qubit ds DNA HS AssayKit(REF:Q32854)测定基因组DNA的浓度。
gDNA浓度测定结果见下表4:
样本编号 姓名缩写 原始浓度(μg/ml)
(1)160328003 GKZ 19.2
(2)160328006 LS 55.0
(3)160113002 WDY 13.4
(4)160119004 LJW 25.2
(5)160221006 LLJ 47.7
(6)160331006 QMM 56.0
(7)161205001 SY 15.2
(表4)
3)样本稀释及编排
将保存于-20℃冰箱的样本出库,编排样本在96孔板上的位置。在有裙边96孔板中稀释样品至5ng/μL,并加入2μL稀释好的样品至无裙边96孔板中。
4)PCR反应
配制1μM(每个引物)PCR引物混合物,里面包含多重反应里每个SNP位点的forward(正向)和reverse(反向)引物,在0.6mL离心管中配制PCR反应混液,将配好的PCR混液用排枪取3μL加至无裙边96孔板中,把板用膜封好,涡旋震荡并离心。
将96孔板放上PCR仪进行PCR反应热循环,循环数如下表5:
(表5)
PCR完成后取出96孔板备用。
5)虾碱性磷酸酶(SAP)处理反应
在0.6mL离心管中配制SAP混液。将无裙边96孔板的封板膜撕开,加2μL SAP混液到每一个孔里(加混液后总体积:7μL)。把板用膜封好,涡旋震荡并离心。将96孔板放上PCR仪进行SAP反应热循环,PCR完成后取出96孔板备用。循环数如下表6:
(表6)
6)延伸反应
在0.6mL离心管中配制iPLEX延伸引物混液。将无裙边96孔板的封板膜撕开,加2μLiP LEX延伸引物混液到每一个孔里(加混液后总体积:9μL)。把板用膜封好,涡旋震荡并离心。将96孔板放上PCR仪进行iPLEX延伸反应热循环,PCR完成后取出96孔板备用。循环数如下表7。
(表7)
7)调节(样本脱盐)
把洁净树脂(Resin)铺平在96/15mg dimple plate上,风干15分钟。在样本板的每一个有样本的孔里加入42μl水,封板,涡旋振荡,简短离心。加入洁净树脂(Resin):轻轻将样本板凌空缓慢反转180°,倒置于铺有树脂的dimple plate上,然后将dimple plate连96孔样本板同时缓慢反转180°(过程中两板不可水平移动),让树脂掉到孔里。用PCR封板膜将96孔板封好,固定在静音混合器上旋转颠倒摇匀15分钟。将96孔样本板用大型台式冷冻高速离心机3200g,离心5分钟。
8)点样至芯片
点样仪的周清洗与日清洗:进入主界面,点击Solution Drain排空残余液体;点击So lution Fill,打开点样仪玻璃窗,向容器中加满100%乙醇,取出96孔板,向左上角的6孔中(A1-3;B1-3)每孔加入30μl0.1M NaOH,放置好后,关闭点样仪玻璃窗,点击TOOLS→WEEKLY,进入周清洗环节,周清洗结束后,点击DAILY开始日清洗。日清洗结束后,点击Solution Drain排尽100%乙醇;点击“Solution Fill”,打开玻璃窗,向容器中加满50%乙醇,取出装有0.1M NaOH的96孔板,关闭玻璃窗。
开启Typer 4.0软件,双击Plate Editor,进入编辑页面,新建一个New Plate,进入A ssay界面,使用Assay Editor导入assay信息,进入Sample界面新建New SampleProject,导入样本信息,完成面板的编辑。
将无裙边96孔板放在带裙边的转换器上。对点样仪进行点样前的设置。
放入新的芯片,记录下芯片ID号,开始进行点样。
(3)使用飞行时间质谱生物芯片系统(Sequenom MassARRAY SNP)基因型分析技术,分析待测DNA样本各基因的类型
点样完成后,使用芯片连接(Chip Linker)软件连结编板信息与芯片号。
开启RT workstation(RT工作站)软件。
将芯片放到 Typer Workstation MA4(核酸质谱数据处理工作站)里打质谱,使用MALDI-TOF(基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱)质谱仪获得数据。
根据得到的数据进行基因分型,包括检测维生素A相关的RBP4基因的C/T基因型、维生素D相关的VDR基因的C/A基因型、维生素E相关的ZPR1基因的G/C基因型、维生素K相关的GGCX基因的G/A基因型和钙相关的VDR基因的G/A基因型,以及叶酸代谢相关的MTHFR(C/T型)、MTHFR(A/C型)、MTRR(A/G型)、CBS(C/G型)基因型。
三营养元素建议摄入量
1.叶酸相关各基因型系数及营养元素建议摄入量
根据测得的叶酸代谢相关的基因MTHFR(C/T型),MTHFR(A/C型),MTRR(A/G型),CBS(C/G型)的基因型和各基因型对应的基因型系数,评估待测DNA样本个体的叶酸基因型系数G,其中G为测得的4种基因型分别对应的系数之和的平均值,其中叶酸的不同基因型系数如下表8:
(表8)
结合叶酸不同基因型系数,和个体的不同年龄按照下述方法可得到叶酸建议摄入量。其中:Y表示叶酸建议摄入量(单位:g/天);SA为体表面积;W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);G为个体基因型系数G。
1-6个月幼儿:叶酸建议摄入量:(58.5-71.5)g/天;
7-12个月幼儿:叶酸建议摄入量:(72.0-81.1)g/天;
1-8岁儿童:Y=K1×SA×G+B1;SA=K2×W+B2;其中,K1的范围为82.43-100.75,B1的范围为44.22-54.04;K2的范围为0.0315-0.0385,B2的范围为0.09-0.11;
9-18岁男性:Y(Male)=K1×SA×G+B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为128.29-156.81,B1的范围为25.25-30.87;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
9-18岁女性:Y(Female)=K1×SA×G+B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为156.66-191.48,B1的范围为8.19-10.01;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
19岁以上男性:Y(Male)=K1×SA×G+B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为155.73-190.33,B1的范围为34.69-42.39;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
19岁以上女性:Y(Female)=K1×SA×G+B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为179.28-219.12,B1的范围为34.24-41.84;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
妊娠期/哺乳期女性:Y=K1×SA×G+B1;SA=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为168.20-205.58,B1的范围为163.19-199.45;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0142-0.0174,B2的范围为0.0415-0.0507;
2.维生素E相关各基因型系数及营养元素建议摄入量
12.根据测得的维生素E代谢相关的基因ZPR1-C/G型的基因型和基因型对应的基因型系数,评估待测DNA样本个体的维生素E基因型系数G,其中维生素E的不同基因型系数为:GG型系数:0.9-1.1;GC型系数:2.84-3.47;CC型系数:3.33-4.07。
结合维生素E不同基因型系数,和个体的不同年龄按照下述方法可得到维生素E建议摄入量。其中:Y表示维生素E建议摄入量(单位:mg/天);SA为体表面积;W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);G为个体基因型系数G。
1-8岁儿童:Y=K1×SA×G-B1;SA=K2×W+B2;其中,K1的范围为16.85-20.59,B1的范围为2.19-2.67;K2的范围为0.0315-0.0385,B2的范围为0.09-0.11;
9-18岁男性:Y(Male)=K1×SA×G-B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为32.36-39.56,B1的范围为25.49-31.16;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
9-18岁女性:Y(Female)=K1×SA×G-B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为39.31-48.05,B1的范围为30.13-36.83;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
19岁以上男性:Y(Male)=K1×SA×G-B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为40.16-49.08,B1的范围为48.77-59.61;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
19岁以上女性:Y(Female)=K1×SA×G-B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为46.70-57.08,B1的范围为52.17-63.77;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
妊娠期/哺乳期女性:Y=K1×SA×G-B1;SA=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为41.14-50.28,B1的范围为50.34-61.52;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0142-0.0174,B2的范围为0.0415-0.0507;
3.其他不同营养元素的建议摄入量(根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄按照下述方法得到相应营养元素建议摄入量)
其中:Y表示营养元素建议摄入量(单位:μg/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);G为个体基因型系数G。
维生素A(RBP4,C/T型):
1-8岁儿童:
CC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为12.81-15.65,B1的范围为80.82-98.78;
TC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为10.09-12.34,B1的范围为73.07-89.31;
TT型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为18.12-22.14,B1的范围为95.99-117.32;
9-18岁男性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.02-2.46,K2的范围为4.22-5.16,B1的范围为2.06-2.52;
TC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.37-2.89,K2的范围为4.95-6.05,B1的范围为1.97-2.41;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.25-8.86,K2的范围为15.16-18.52,B1的范围为58.02-70.92;
9-18岁女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.09-2.56,K2的范围为4.66-5.69,B1的范围为8.86-10.82;
TC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.60-3.18,K2的范围为5.79-7.07,B1的范围为12.97-15.85;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为8.14-9.94,K2的范围为18.05-22.06,B1的范围为57.82-70.66;
19岁以上男性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.56-1.90,K2的范围为3.27-3.99,B1的范围为16.75-20.47;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.63-3.21,K2的范围为5.49-6.72,B1的范围为4.46-5.46;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.54-9.22,K2的范围为15.79-19.29,B1的范围为52.06-63.62;
19岁以上女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.48-1.80,K2的范围为3.28-4.00,B1的范围为22.25-27.19;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.17-2.65,K2的范围为4.82-5.89,B1的范围为16.63-20.33;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为8.12-9.92,K2的范围为18.0-22.0,B1的范围为31.64-38.67;
妊娠期/哺乳期女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.29-1.58,K2的范围为3.62-4.42,B1的范围为152.64-186.56;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.52-1.86,K2的范围为4.22-5.16,B1的范围为150.87-184.39;
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为6.85-8.37,K2的范围为19.05-23.29,B1的范围为107.59-131.51;
维生素D(VDR,C/A型):
1-8岁儿童:
CC型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为1.47-1.79,B1的范围为40.01-48.91;
CA型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.84-1.02,B1的范围为41.82-51.12;
AA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为0.67-0.81,B1的范围为46.12-56.36;
9-18岁男性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.06-0.08,K2的范围为0.13-0.15,B1的范围为25.97-31.75;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.02-0.04,K2的范围为0.06-0.08,B1的范围为25.61-31.29;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.14-0.17,K2的范围为0.27-0.33,B1的范围为23.73-29.00;
9-18岁女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.009-0.011,K2的范围为0.018-0.022,B1的范围为8.26-10.09;
CA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.036-0.044,K2的范围为0.081-0.099,B1的范围为7.90-9.66;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.21-0.25,K2的范围为0.45-0.55,B1的范围为6.53-7.98;
19岁以上男性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.081-0.099,K2的范围为0.171-0.209,B1的范围为35.67-43.59;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.072-0.088,K2的范围为0.162-0.198,B1的范围为35.56-43.46;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.108-0.132,K2的范围为0.216-0.264,B1的范围为33.49-40.93;
19岁以上女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.09-0.11,K2的范围为0.207-0.253,B1的范围为34.98-42.76;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.081-0.099,K2的范围为0.18-0.22,B1的范围为34.89-42.65;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.108-0.132,K2的范围为0.25-0.31,B1的范围为33.33-40.73;
妊娠期/哺乳期女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.41-0.51,K2的范围为1.14-1.39,B1的范围为165.88-203.52;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.39-0.48,K2的范围为1.09-1.33,B1的范围为170.24-208.07;
AA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.297-0.363,K2的范围为0.828-1.01,B1的范围为165.59-202.39;
维生素K(GGCX,G/A型):
1-8岁儿童:
TT型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.522-0.638,B1的范围为42.73-52.23;
TC型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.144-0.176,B1的范围为43.80-53.54;
CC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为0.54-0.66,B1的范围为45.78-55.96;
9-18岁男性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.144-0.176,K2的范围为0.306-0.374,B1的范围为23.55-28.79;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.18-0.22,K2的范围为0.387-0.473,B1的范围为23.10-28.24;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.24-0.29,K2的范围为0.50-0.62,B1的范围为22.48-27.48;
9-18岁女性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.25-0.31,K2的范围为0.55-0.67,B1的范围为6.17-7.54;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.26-0.32,K2的范围为0.59-0.73,B1的范围为6.02-7.36;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.32-0.39,K2的范围为0.71-0.87,B1的范围为5.59-6.83;
19岁以上男性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.126-0.154,K2的范围为0.26-0.32,B1的范围为33.27-40.67;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.24-0.29,K2的范围为0.51-0.63,B1的范围为31.86-38.94;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.41-0.49,K2的范围为0.85-1.03,B1的范围为30.02-36.69;
19岁以上女性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.09-0.11,K2的范围为0.21-0.25,B1的范围为33.49-40.93;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.17-0.21,K2的范围为0.39-0.47,B1的范围为32.83-40.13;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.39-0.47,K2的范围为0.86-1.05,B1的范围为31.09-38.00;
妊娠期/哺乳期女性:
TT型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.29-0.36,K2的范围为0.83-1.01,B1的范围为165.59-202.39;
TC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.18-0.22,K2的范围为0.50-0.62,B1的范围为164.66-201.26;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.04-0.06,K2的范围为0.14-0.16,B1的范围为162.80-198.98;
钙(VDR,G/A型):
1-8岁儿童:
GG型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为12.81-15.65,B1的范围为80.82-98.78;
GA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为18.52-22.64,B1的范围为97.14-118.72;
AA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为10.39-12.69,B1的范围为73.89-90.31;
9-18岁男性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.19-5.13,K2的范围为8.77-10.71,B1的范围为22.92-28.02;
GA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.48-5.48,K2的范围为9.39-11.47,B1的范围为26.33-32.18;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.45-7.89,K2的范围为13.5-16.5,B1的范围为48.99-59.87;
9-18岁女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.25-5.19,K2的范围为9.41-11.51,B1的范围为26.26-32.09;
GA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.88-5.96,K2的范围为10.82-13.22,B1的范围为31.38-38.35;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.26-8.88,K2的范围为16.10-19.68,B1的范围为50.74-62.02;
19岁以上男性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为3.04-3.72,K2的范围为6.37-7.79,B1的范围为0.32-0.39;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.93-3.59,K2的范围为6.13-7.49,B1的范围为0.99-1.21;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.26-7.66,K2的范围为13.11-16.03,B1的范围为37.38-45.68;
19岁以上女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.28-4.00,K2的范围为7.27-8.88,B1的范围为7.62-9.32;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为4.15-5.07,K2的范围为9.19-11.24,B1的范围为0.59-0.73;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.75-8.25,K2的范围为14.98-18.30,B1的范围为20.56-25.12;
妊娠期/哺乳期女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.23-3.95,K2的范围为8.98-10.97,B1的范围为136.98-167.42;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.29-4.02,K2的范围为9.14-11.18,B1的范围为136.51-166.85;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为5.63-6.88,K2的范围为15.65-19.13,B1的范围为117.51-143.63;
四本实施例实验结果
1.叶酸相关基因多态性检测结果及摄入指导建议:
(1)样本编号:160328003,男,4岁,身高:104cm,体重:18kg,跟据实验检测结果160328003基因型为:AG(MTHFR)、TT(MTHFR)、GG(MTRR)、GG(CBS)。
则叶酸摄入量最小值为:
基因型系数最小值为:G=(1.34+0.9+2.88+0.36)/4=1.37
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.0315×18+0.1=0.667
最小叶酸摄入量:Y=82.43×SA×G+44.22=119.54μg/天
叶酸摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=(1.64+1.1+3.52+0.44)/4=1.675
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.0385×18+0.1=0.793
最大叶酸摄入量:Y=100.75×SA×G+54.04=187.86μg/天
叶酸推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=(1.49+1+3.2+0.4)/4=1.52
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.035×18+0.1=0.73
推荐叶酸摄入量:Y=91.59×SA×G+49.13
=91.59×0.73×1.52+49.13
=150.76μg/天
补充指导建议:叶酸摄入量推荐为150.76μg/天,最小摄入量:119.54g/天,最大摄入量不得超过187.86g/天。
(2)样本编号:160328006,男,11岁,身高:153cm,体重:60kg,跟据实验检测结果160328006基因型为:、AA(MTHFR)、TT(MTHFR)、GA(MTRR)、CG(CBS)。
则叶酸摄入量最小值为:
基因型系数最小值为:G=(3.6+0.9+1.89+0.6)/4=1.7475
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00546×153+0.0114×60-0.0628=1.4566
最小叶酸摄入量:Y=128.29×SA×G+25.25=351.80μg/天
叶酸摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=(4.4+1.1+2.31+0.74)/4=2.1375
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00668×153+0.0139×60-0.0768=1.7792
最大叶酸摄入量:Y=156.81×SA×G+30.87=627.22μg/天
叶酸推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=(4+1+2.1+0.67)/4=1.94
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00607×153+0.0127×60-0.0698=1.62
推荐叶酸摄入量:Y=142.55×SA×G+28.06
=142.55×1.62×1.94+28.06
=476.07μg/天
补充指导建议:叶酸摄入量建议为476.07μg/天,最小摄入量:351.80μg/天,最大摄入量不得超过627.22μg/天。
(3)样本编号:160113002,女,11岁,身高:155cm,体重:43.4kg,跟据实验检测结果160113002基因型为:、AG(MTHFR)、TT(MTHFR)、GA(MTRR)、CG(CBS)。
则叶酸摄入量最小值为:
系数最小值为:G=(1.34+0.9+1.89+0.6)/4=1.18
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00511×155+0.0113×43.4-0.0415=1.241
最小叶酸摄入量:Y=156.66×SA×G+8.19=237.59μg/天
叶酸摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=(1.64+1.1+2.31+0.74)/4=1.45
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00625×155+0.0139×43.4-0.0507=1.4649
最大叶酸摄入量:Y=191.48×SA×G+10.01=416.73μg/天
叶酸推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=(1.49+1+2.1+0.67)/4=1.315
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00568×155+0.0126×43.4-0.0461=1.3811
推荐叶酸摄入量:Y=174.07×SA×G+9.1
=174.07×1.3811×1.315+9.1
=325.24μg/天
补充指导建议:叶酸摄入量建议为325.24μg/天,最小摄入量:237.59μg/天,最大摄入量不得超过416.73μg/天。
(4)样本编号:160221006,男,30岁,身高:174cm,体重:72kg,跟据实验检测结果160221006基因型为:、AG(MTHFR)、TT(MTHFR)、GA(MTRR)、CC(CBS)。
则叶酸摄入量最小值为:
系数最小值为:G=(1.34+0.9+1.89+0.9)/4=1.2575
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00546×174+0.0114×72-0.0628=1.708
最小叶酸摄入量:Y=155.73×SA×G+34.69=369.17μg/天
叶酸摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=(1.64+1.1+2.31+1.1)/4=1.5375
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00668×174+0.0139×72-0.0768=2.0863
最大叶酸摄入量:Y=190.33×SA×G+42.39=652.91μg/天
叶酸推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=(1.49+1+2.1+1)/4=1.3975
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00607×174+0.0127×72-0.0698=1.9008
推荐叶酸摄入量:Y=173.03×SA×G+38.54
=173.03×1.9008×1.3975+38.54
=498.17μg/天
补充指导建议:叶酸摄入量建议为498.17μg/天,最小摄入量:369.17μg/天,最大摄入量不得超过652.91μg/天。
(5)样本编号:160119004,女,29岁,身高:164cm,体重:42kg,跟据实验检测结果160119004基因型为:、AA(MTHFR)、TT(MTHFR)、GA(MTRR)、GG(CBS)。
则叶酸摄入量最小值为:
系数最小值为:G=(3.6+0.9+1.89+0.36)/4=1.6875
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00511×164+0.0113×42-0.0415=1.2711
最小叶酸摄入量:Y=179.28×SA×G+34.24=418.79μg/天
叶酸摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=(4.4+1.1+2.31+0.44)/4=2.0625
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00625×164+0.0139×42-0.0507=1.5581
最大叶酸摄入量:Y=219.12×SA×G+41.84=745.99μg/天
叶酸推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=(4+1+2.1+0.4)/4=1.875
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00568×164+0.0126×42-0.0461=1.4146
推荐叶酸摄入量:Y=199.2×SA×G+38.04
=199.2×1.4146×1.875+38.04
=566.39μg/天
补充指导建议:叶酸摄入量建议为566.39μg/天,最小摄入量:418.79μg/天,最大摄入量不得超过745.99μg/天。
(6)样本编号:160331006,女,29岁,身高:164cm,体重:70kg,妊娠期。
跟据实验检测结果160331006基因型为:AG(MTHFR)、GT(MTHFR)、AA(MTRR)、CC(CBS)。
则叶酸摄入量最小值为:
系数最小值为:G=(1.34+1.32+0.9+0.9)/4=1.115
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00511×164+0.0142×70-0.0415=1.7905
最小叶酸摄入量:Y=168.2×SA×G+163.19=498.99μg/天
叶酸摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=(1.64+1.62+1.1+1.1)/4=1.365
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00625×164+0.0174×70-0.0507=2.1923
最大叶酸摄入量:Y=205.58×SA×G+199.45=814.65μg/天
叶酸推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=(1.49+1.47+1+1)/4=1.24
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00568×164+0.0158×70-0.0461=1.9914
推荐叶酸摄入量:Y=186.89×SA×G+181.32
=186.89×1.9914×1.24+181.32
=642.81μg/天
补充指导建议:叶酸摄入量建议为642.81μg/天,最小摄入量:498.99μg/天,最大摄入量不得超过814.65μg/天。
(7)样本编号:161205001,女,36岁,身高:161cm,体重:83kg,哺乳期。
跟据实验检测结果161205001基因型为:GG(MTHFR)、TT(MTHFR)、GA(MTRR)、CG(CBS)。
则叶酸摄入量最小值为:
系数最小值为:G=(0.9+0.9+1.89+0.6)/4=1.0725
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00511×161+0.0142×83-0.0415=1.9598
最小叶酸摄入量:Y=168.2×SA×G+163.19=516.73μg/天
叶酸摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=(1.1+1.1+2.31+0.74)/4=1.3125
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00625×161+0.0174×83-0.0507=2.3998
最大叶酸摄入量:Y=205.58×SA×G+199.45=846.97μg/天
叶酸推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=(1+1+2.1+0.67)/4=1.1925
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00568×161+0.0158×83-0.0461=2.1798
推荐叶酸摄入量:Y=186.89×SA×G+181.32
=186.89×1.1925×2.1798+181.32
=667.12μg/天
补充指导建议:叶酸摄入量建议为667.12μg/天,最小摄入量:516.73μg/天,最大摄入量不得超过846.97μg/天。
2.维生素E相关基因多态性检测结果及摄入指导建议:
(1)样本编号:160328003,男,4岁,身高:104cm,体重:18kg,跟据实验检测结果160328003基因型为:、GC(ZPR1)。
则维生素E摄入量最小值为:
基因型系数最小值为:G=2.84
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.0315×18+0.1=0.667
最小维生素E摄入量:Y=16.85×SA×G-2.19=29.73mg/天
维生素E摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=3.47
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.0385×18+0.1=0.793
最大维生素E摄入量:Y=20.59×SA×G-2.67=53.99mg/天
维生素E推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=3.15
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.035×18+0.1=0.73
推荐维生素E摄入量:Y=18.72×SA×G-2.43
=18.72×0.73×3.15-2.43
=40.62mg/天
补充指导建议:维生素E摄入量建议为40.62mg/天,最小摄入量:29.73mg/天,最大摄入量不得超过53.99mg/天。
(2)样本编号:160328006,男,11岁,身高:153cm,体重:60kg,跟据实验检测结果160328006基因型为:GC(ZPR1)。
则维生素E摄入量最小值为:
基因型系数最小值为:G=2.84
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00546×153+0.0114×60-0.0628=1.4566
最小维生素E摄入量:Y=32.36×SA×G-25.49=108.38mg/天
维生素E摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=3.47
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00668×153+0.0139×60-0.0768=1.7792
最大维生素E摄入量:Y=39.56×SA×G-31.16=213.08mg/天
维生素E推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=3.15
推荐体表面积系数:
SA(Female)=0.00607×153+0.0127×60-0.0698=1.62
推荐维生素E摄入量:Y=35.96×SA×G-28.33
=35.96×1.62×1.94-28.33
=213.08mg/天
补充指导建议:维生素E摄入量建议为213.08mg/天,最小摄入量:108.38mg/天,最大摄入量不得超过213.08mg/天。
(3)样本编号:160113002,女,11岁,身高:155cm,体重:43.4kg,跟据实验检测结果160113002基因型为:CC(ZPR1)。
则维生素E摄入量最小值为:
系数最小值为:G=3.33
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00511×155+0.0113×43.4-0.0415=1.241
最小维生素E摄入量:Y=39.31×SA×G-30.13=132.32mg/天
维生素E摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=4.07
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00625×155+0.0139×43.4-0.0507=1.4649
最大维生素E摄入量:Y=48.05×SA×G-36.83=249.65mg/天
维生素E推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=3.7
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00568×155+0.0126×43.4-0.0461=1.3811
推荐维生素E摄入量:Y=43.68×SA×G-33.48
=43.68×1.3811×3.7-33.48
=189.73mg/天
补充指导建议:维生素E摄入量建议为189.73mg/天,最小摄入量:132.32mg/天,
最大摄入量不得超过249.65mg/天。
(4)样本编号:160221006,男,30岁,身高:174cm,体重:72kg,跟据实验检测结果160221006基因型为:GC(ZPR1)。
则维生素E摄入量最小值为:
系数最小值为:G=2.84
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00546×174+0.0114×72-0.0628=1.708
最小维生素E摄入量:Y=40.16×SA×G-48.77=146.03mg/天
维生素E摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=3.47
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00668×174+0.0139×72-0.0768=2.0863
最大维生素E摄入量:Y=49.08×SA×G-59.61=295.70mg/天
维生素E推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=3.15
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00607×174+0.0127×72-0.0698=1.9008
推荐维生素E摄入量:Y=44.62×SA×G-54.19
=173.03×1.9008×1.3975+38.54
=212.97mg/天
补充指导建议:维生素E摄入量建议为212.97mg/天,最小摄入量:146.03mg/天,最大摄入量不得超过295.70mg/天。
(5)样本编号:160119004,女,29岁,身高:164cm,体重:42kg,跟据实验检测结果160119004基因型为:GC(ZPR1)。
则维生素E摄入量最小值为:
系数最小值为:G=2.84
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00511×164+0.0113×42-0.0415=1.2711
最小维生素E摄入量:Y=46.7×SA×G-52.17=116.41mg/天
维生素E摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=3.47
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00625×164+0.0139×42-0.0507=1.5581
最大维生素E摄入量:Y=57.08×SA×G-63.77=244.84mg/天
维生素E推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=3.15
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00568×164+0.0126×42-0.0461=1.4146
推荐维生素E摄入量:Y=51.89×SA×G-57.97
=51.89×1.4146×1.875-57.97
=173.25mg/天
补充指导建议:维生素E摄入量建议为173.25mg/天,最小摄入量:116.41mg/天,最大摄入量不得超过244.84mg/天。
(6)样本编号:160331006,女,29岁,身高:164cm,体重:70kg,妊娠期。
跟据实验检测结果160331006基因型为:GC(ZPR1)。
则维生素E摄入量最小值为:
系数最小值为:G=2.84
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00511×164+0.0142×70-0.0415=1.7905
最小维生素E摄入量:Y=41.14×SA×G-50.34=158.86mg/天
维生素E摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=3.47
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00625×164+0.0174×70-0.0507=2.1923
最大维生素E摄入量:Y=50.28×SA×G-61.52=320.97mg/天
维生素E推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=3.15
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00568×164+0.0158×70-0.0461=1.9914
推荐维生素E摄入量:Y=45.71×SA×G-55.93
=45.71×1.9914×1.24-55.93
=230.8mg/天
补充指导建议:维生素E摄入量建议为230.8mg/天,最小摄入量:158.86mg/天,最大摄入量不得超过320.97mg/天。
(7)样本编号:161205001,女,36岁,身高:161cm,体重:83kg,哺乳期。
跟据实验检测结果161205001基因型为:GG(ZPR1)。
则维生素E摄入量最小值为:
系数最小值为:G=0.9
最小体表面积系数:SA(Female)最小=0.00511×161+0.0142×83-0.0415=1.9598
最小维生素E摄入量:Y=41.14×SA×G-50.34=22.22mg/天
维生素E摄入量最大为:
基因型系数最大值为:G=1.1
最大体表面积系数:SA(Female)最大=0.00625×161+0.0174×83-0.0507=2.3998
最大维生素E摄入量:Y=50.28×SA×G-61.52=71.20mg/天
维生素E推荐摄入量为:
则推荐基因型系数为:G=1
推荐体表面积系数:SA(Female)=0.00568×161+0.0158×83-0.0461=2.1798
推荐维生素E摄入量:Y=45.71×SA×G-55.93
=45.71×2.1798×1-55.93
=43.71mg/天
补充指导建议:维生素E摄入量建议为43.71mg/天,最小摄入量:22.22mg/天,最大摄入量不得超过71.20mg/天。
3.维生素A相关基因多态性检测结果及摄入指导建议:
(1)样本编号:160328003,男,4岁,身高:104cm,体重:18kg,跟据实验检测结果160328003基因型为:TT(RBP4)。
则维生素A摄入量最小值为:Y=18.12×W+95.99=422.15μg/天
维生素A摄入量最大为:Y=22.14×W+117.32=515.84μg/天
维生素A推荐摄入量为:Y=20.13×W+106.65=468.99μg/天
补充指导建议:维生素A摄入量建议为468.99μg/天,最小摄入量:422.15μg/天,最大摄入量不得超过515.84μg/天。
(2)样本编号:160328006,男,11岁,身高:153cm,体重:60kg,跟据实验检测结果160328006基因型为:TT(RBP4)。
则维生素A摄入量最小值为:Y=7.25×H+15.16×W-58.02=1960.83μg/天
维生素A摄入量最大为:Y=8.86×H+18.52×W-70.92=2395.86μg/天
维生素A推荐摄入量为:Y=8.05×H+16.84×W-64.47=2177.58μg/天
补充指导建议:维生素A摄入量建议为2177.58μg/天,最小摄入量:1960.83μg/天,最大摄入量不得超过2395.86μg/天。
(3)样本编号:160113002,女,11岁,身高:155cm,体重:43.4kg,跟据实验检测结果160113002基因型为:TT(RBP4)。
则维生素A摄入量最小值为:Y=8.14×H+18.05×W-57.82=1987.25μg/天
维生素A摄入量最大为:Y=9.94×H+22.06×W-70.66=2427.44μg/天
维生素A推荐摄入量为:Y=9.04×H+20.05×W-64.24=2207.13μg/天
补充指导建议:维生素A摄入量建议为2207.13μg/天,最小摄入量:1987.25μg/天,最大摄入量不得超过2427.44μg/天。
(4)样本编号:160221006,男,30岁,身高:174cm,体重:72kg,跟据实验检测结果160221006基因型为:TT(RBP4)。
则维生素A摄入量最小值为:Y=7.54×H+15.79×W-52.06=2396.78μg/天
维生素A摄入量最大为:Y=9.22×H+19.29×W-63.62=2929.54μg/天
维生素A推荐摄入量为:Y=8.38×H+17.54×W-57.84=2663.16μg/天
补充指导建议:维生素A摄入量建议为2663.16μg/天,最小摄入量:2396.78μg/天,最大摄入量不得超过2929.54μg/天。
(5)样本编号:160119004,女,29岁,身高:164cm,体重:42kg,跟据实验检测结果160119004基因型为:TC(RBP4)。
则维生素A摄入量最小值为:Y=2.17×H+4.82×W+16.63=574.95μg/天
维生素A摄入量最大为:Y=2.65×H+5.89×W+20.33=702.31μg/天
维生素A推荐摄入量为:Y=2.41×H+5.35×W+18.48=638.42μg/天
补充指导建议:维生素A摄入量建议为638.42μg/天,最小摄入量:574.95μg/天,最大摄入量不得超过702.31μg/天。
(6)样本编号:160331006,女,29岁,身高:164cm,体重:70kg,妊娠期。
跟据实验检测结果160331006基因型为:TT(RBP4)。
则维生素A摄入量最小为:Y=6.85×H+19.05×W+107.59=2564.49μg/天
维生素A摄入量最大为:Y=8.37×H+23.29×W+131.51=3134.49μg/天
维生素A推荐摄入量为:Y=7.61×H+21.17×W+119.55=2849.49μg/天
补充指导建议:维生素A摄入量建议为2849.49μg/天,最小摄入量:2564.49μg/天,最大摄入量不得超过3134.49μg/天。
(7)样本编号:161205001,女,36岁,身高:161cm,体重:83kg,哺乳期。
跟据实验检测结果161205001基因型为:TT(RBP4)。
则维生素A摄入量最小值为:Y=6.85×H+19.05×W+107.59=2791.59μg/天
维生素A摄入量最大为:Y=8.37×H+23.29×W+131.51=3412.15μg/天
维生素A推荐摄入量为:Y=7.61×H+21.17×W+119.55=3101.87μg/天
补充指导建议:维生素A摄入量建议为3101.87μg/天,最小摄入量:2791.59μg/天,最大摄入量不得超过3412.15μg/天。
4.维生素D相关基因多态性检测结果及摄入指导建议:
(1)样本编号:160328003,男,4岁,身高:104cm,体重:18kg,跟据实验检测结果160328003基因型为:CC(VDR)。
则维生素D摄入量最小值为:Y=-1.47×W+40.1=13.55μg/天
维生素D摄入量最大为:Y=-1.79×W+48.91=16.69μg/天
维生素D推荐摄入量为:Y=-1.63×W+44.46=15.12μg/天
补充指导建议:维生素D摄入量建议为15.12μg/天,最小摄入量:13.55μg/天,最大摄入量不得超过16.69μg/天。
(2)样本编号:160328006,男,11岁,身高:153cm,体重:60kg,跟据实验检测结果160328006基因型为:CC(VDR)。
则维生素D摄入量最小为:Y=-0.06×H-0.13×W+25.97=8.99μg/天
维生素D摄入量最大为:Y=-0.08×H-0.15×W+31.75=10.51μg/天
维生素D推荐摄入量为:Y=-0.07×H-0.14×W+28.86=9.75μg/天
补充指导建议:维生素D摄入量建议为9.75μg/天,最小摄入量:8.99μg/天,最大摄入量不得超过10.51μg/天。
(3)样本编号:160113002,女,11岁,身高:155cm,体重:43.4kg,跟据实验检测结果160113002基因型为:CA(VDR)。
则维生素D摄入量最小值为:Y=0.036×H+0.081×W+7.9=16.99μg/天
维生素D摄入量最大为:Y=0.044×H+0.099×W+9.66=20.78μg/天
维生素D推荐摄入量为:Y=0.04×H+0.09×W+8.78=18.88μg/天
补充指导建议:维生素D摄入量建议为18.88μg/天,最小摄入量:16.99μg/天,最大摄入量不得超过20.78μg/天。
(4)样本编号:160221006,男,30岁,身高:174cm,体重:72kg,跟据实验检测结果160221006基因型为:CA(VDR)。
则维生素D摄入量最小值为:Y=-0.072×H-0.162×W+35.56=11.37μg/天
维生素D摄入量最大为:Y=-0.088×H-0.198×W+43.46=13.89μg/天
维生素D推荐摄入量为:Y=-0.08×H-0.18×W+39.51=12.63μg/天
补充指导建议:维生素D摄入量建议为12.63μg/天,最小摄入量:11.37μg/天,最大摄入量不得超过13.89μg/天。
(5)样本编号:160119004,女,29岁,身高:164cm,体重:42kg,跟据实验检测结果160119004基因型为:CA(VDR)。
则维生素D摄入量最小值为:Y=-0.081×H-0.18×W+34.89=14.05μg/天
维生素D摄入量最大为:Y=-0.099×H-0.22×W+42.65=17.17μg/天
维生素D推荐摄入量为:Y=-0.09×H-0.2×W+38.77=15.61μg/天
补充指导建议:维生素D摄入量建议为15.61μg/天,最小摄入量:14.05μg/天,最大摄入量不得超过17.17μg/天。
(6)样本编号:160331006,女,29岁,身高:164cm,体重:70kg,妊娠期。
跟据实验检测结果160331006基因型为:CC(VDR)。
则维生素D摄入量最小值为:Y=-0.41×H-1.14×W+165.88=18.84μg/天
维生素D摄入量最大为:Y=-0.51×H-1.39×W+203.52=22.58μg/天
维生素D推荐摄入量为:Y=-0.46×H-1.27×W+185.02=20.68μg/天
补充指导建议:维生素D摄入量建议为20.68μg/天,最小摄入量:18.84μg/天,最大摄入量不得超过22.58μg/天。
(7)样本编号:161205001,女,36岁,身高:161cm,体重:83kg,哺乳期。
跟据实验检测结果161205001基因型为:CC(VDR)。
则维生素D摄入量最小值为:Y=-0.41×H-1.14×W+165.88=5.25μg/天
维生素D摄入量最大为:Y=-0.51×H-1.39×W+203.52=6.04μg/天
维生素D推荐摄入量为:Y=-0.46×H-1.27×W+185.02=5.55μg/天
补充指导建议:维生素D摄入量建议为5.55μg/天,最小摄入量:5.25μg/天,最大摄入量不得超过6.04μg/天。
5.维生素K相关基因多态性检测结果及摄入指导建议:
(1)样本编号:160328003,男,4岁,身高:104cm,体重:18kg,跟据实验检测结果160328003基因型为:TC(GGCX)。
则维生素K摄入量最小值为:Y=-0.144×W+43.8=41.21μg/天
维生素K摄入量最大为:Y=-0.176×W+53.54=50.37μg/天
维生素K推荐摄入量为:Y=-0.16×W+48.67=45.79μg/天
补充指导建议:维生素K摄入量建议为45.79μg/天,最小摄入量:41.21μg/天,最大摄入量不得超过50.37μg/天。
(2)样本编号:160328006,男,11岁,身高:153cm,体重:60kg,跟据实验检测结果160328006基因型为:TC(GGCX)。
则维生素K摄入量最小值为:Y=0.18×H+0.387×W+23.1=73.86μg/天
维生素K摄入量最大为:Y=0.22×H+0.473×W+28.24=90.28μg/天
维生素K推荐摄入量为:Y=0.2×H+0.43×W+25.67=82.07μg/天
补充指导建议:维生素K摄入量建议为82.07μg/天,最小摄入量:73.86μg/天,最大摄入量不得超过90.28μg/天。
(3)样本编号:160113002,女,11岁,身高:155cm,体重:43.4kg,跟据实验检测结果160113002基因型为:CC(GGCX)。
则维生素K摄入量最小值为:Y=0.32×H+0.71×W+5.59=86.0μg/天
维生素K摄入量最大为:Y=0.39×H+0.87×W+6.83=105.04μg/天
维生素K推荐摄入量为:Y=0.36×H+0.79×W+6.21=96.29μg/天
补充指导建议:维生素K摄入量建议为96.29μg/天,最小摄入量:86.0μg/天,最大摄入量不得超过105.04μg/天。
(4)样本编号:160221006,男,30岁,身高:174cm,体重:72kg,跟据实验检测结果160221006基因型为:TC(GGCX)。
则维生素K摄入量最小值为:Y=0.24×H+0.51×W+31.86=110.34μg/天
维生素K摄入量最大为:Y=0.29×H+0.63×W+38.94=134.76μg/天
维生素K推荐摄入量为:Y=0.27×H+0.57×W+35.4=123.42μg/天
补充指导建议:维生素K摄入量建议为123.42μg/天,最小摄入量:110.34μg/天,最大摄入量不得超过134.76μg/天。
(5)样本编号:160119004,女,29岁,身高:164cm,体重:42kg,跟据实验检测结果160119004基因型为:TC(GGCX)。
则维生素K摄入量最小值为:Y=0.17×H+0.39×W+32.83=77.09μg/天
维生素K摄入量最大为:Y=0.21×H+0.47×W+40.13=94.31μg/天
维生素K推荐摄入量为:Y=0.19×H+0.43×W+36.48=85.70μg/天
补充指导建议:维生素K摄入量建议为85.70μg/天,最小摄入量:77.09μg/天,最大摄入量不得超过94.31μg/天。
(6)样本编号:160331006,女,29岁,身高:164cm,体重:70kg,妊娠期。
跟据实验检测结果160331006基因型为:CC(GGCX)。
则维生素K摄入量最小值为:Y=0.04×H+0.15×W+162.8=179.86μg/天
维生素K摄入量最大为:Y=0.06×H+0.16×W+198.98=220.02μg/天
维生素K推荐摄入量为:Y=0.05×H+0.15×W+180.89=199.59μg/天
补充指导建议:维生素K摄入量建议为199.59μg/天,最小摄入量:179.86μg/天,最大摄入量不得超过220.02μg/天。
(7)样本编号:161205001,女,36岁,身高:161cm,体重:83kg,哺乳期。
跟据实验检测结果161205001基因型为:TT(GGCX)。
则维生素K摄入量最小值为:Y=-0.29×H-0.83×W+165.59=50.01μg/天
维生素K摄入量最大为:Y=-0.36×H-1.01×W+202.39=60.6μg/天
维生素K推荐摄入量为:Y=-0.33×H-0.92×W+183.99=54.5μg/天
补充指导建议:维生素K摄入量建议为54.5μg/天,最小摄入量:50.01μg/天,最大摄入量不得超过60.6μg/天。
6.钙元素相关基因多态性检测结果及摄入指导建议:
(1)样本编号:160328003,男,4岁,身高:104cm,体重:18kg,跟据实验检测结果160328003基因型为:GG(VDR)。
则钙元素摄入量最小值为:Y=12.81×W+80.82=311.4mg/天
钙元素摄入量最大为:Y=15.65×W+98.78=380.48mg/天
钙元素推荐摄入量为:Y=14.23×W+89.8=345.94mg/天
补充指导建议:钙元素摄入量建议为345.94mg/天,最小摄入量:311.4mg/天,最大摄入量不得超过380.48mg/天。
(2)样本编号:160328006,男,11岁,身高:153cm,体重:60kg,跟据实验检测结果160328006基因型为:GA(VDR)。
则钙元素摄入量最小值为:Y=4.48×H+9.39×W-26.33=1275.17mg/天
钙元素摄入量最大为:Y=5.48×H+11.47×W-32.18=1558.82mg/天
钙元素推荐摄入量为:Y=4.98×H+10.43×W-29.25=1358.49mg/天
补充指导建议:钙元素摄入量建议为1358.49mg/天,最小摄入量:1275.17mg/天,最大摄入量不得超过1558.82mg/天。
(3)样本编号:160113002,女,11岁,身高:155cm,体重:43.4kg,跟据实验检测结果160113002基因型为:GA(VDR)。
则钙元素摄入量最小值为:Y=4.88×H+10.82×W-31.38=1194.61mg/天
钙元素摄入量最大为:Y=5.96×H+13.22×W-38.35=1459.19mg/天
钙元素建议摄入量为:Y=5.42×H+12.02×W-34.87=1326.89mg/天
补充指导建议:钙元素摄入量建议为1326.89mg/天,最小摄入量:1194.61mg/天,最大摄入量不得超过1459.19mg/天。
(4)样本编号:160221006,男,30岁,身高:174cm,体重:72kg,跟据实验检测结果160221006基因型为:GA(VDR)。
则钙元素摄入量最小值为:Y=2.93×H+6.13×W+0.99=952.17mg/天
钙元素摄入量最大为:Y=3.59×H+7.49×W+1.21=1165.15mg/天
钙元素推荐摄入量为:Y=3.26×H+6.81×W+1.1=1058.66mg/天
补充指导建议:钙元素摄入量建议为1058.66mg/天,最小摄入量:952.17mg/天,最大摄入量不得超过1165.15mg/天。
(5)样本编号:160119004,女,29岁,身高:164cm,体重:42kg,跟据实验检测结果160119004基因型为:GG(VDR)。
则钙元素摄入量最小值为:Y=3.28×H+7.27×W+7.62=850.88mg/天
钙元素摄入量最大为:Y=4.00×H+8.88×W+9.32=1038.28mg/天
钙元素推荐摄入量为:Y=3.64×H+8.08×W+8.47=944.79mg/天
补充指导建议:钙元素摄入量建议为944.79mg/天,最小摄入量:850.88mg/天,最大摄入量不得超过1038.28mg/天。
(6)样本编号:160331006,女,29岁,身高:164cm,体重:70kg,妊娠期。
跟据实验检测结果160331006基因型为:GG(VDR)。
则钙元素摄入量最小值为:Y=3.23×H+8.98×W+136.98=1295.30mg/天
钙元素摄入量最大为:Y=3.95×H+10.97×W+167.42=1583.12mg/天
钙元素推荐摄入量为:Y=3.59×H+9.98×W+152.2=1439.56mg/天
补充指导建议:钙元素摄入量建议为1439.56mg/天,最小摄入量:1295.30mg/天,最大摄入量不得超过1583.12mg/天。
(7)样本编号:161205001,女,36岁,身高:161cm,体重:83kg,哺乳期。
跟据实验检测结果161205001基因型为:GA(VDR)。
则钙元素摄入量最小值为:Y=3.29×H+9.14×W+136.51=1424.82mg/天
钙元素摄入量最大为:Y=4.02×H+11.18×W+166.85=1742.01mg/天
钙元素推荐摄入量为:Y=3.65×H+10.16×W+151.68=1582.61mg/天
补充指导建议:钙元素摄入量建议为1582.61mg/天,最小摄入量:1424.82mg/天,最大摄入量不得超过1742.01mg/天。
需要说明的是,本实施例提供的评估营养元素摄入量的基因检测方法,同时评估了多种营养元素的建议摄入量,但本实施例并不对此进行任何限制,可根据需要,仅仅采用本发明提供的技术方案中的一种或其中某几种方案的组合,对某一种营养元素或某几种营养元素的建议摄入量选择性地进行评估。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非对本发明作任何形式上的限制,虽然本发明已以较佳实施例揭露如上,然而并非用以限定本发明,任何熟悉本专业的技术人员,在不脱离本发明技术方案范围内,当可利用上述揭示的方法及技术内容作出些许的更动或修饰为等同变化的等效实施例,但凡是未脱离本发明技术方案的内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰,均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (11)

1.一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)根据在线引物设计软件设计聚合酶链式反应PCR扩增引物和单碱基延伸反应引物;
(2)对待测DNA样本进行稀释后,进行PCR扩增反应、虾碱性磷酸酶处理反应、待测基因单碱基延伸反应、样本脱盐程序、点样至芯片程序;
(3)使用单核苷酸多态性分型检测技术,分析待测DNA样本的基因类型;
(4)根据得到的数据得出DNA样本的基因分型结果和建议的营养元素摄入量。
2.根据权利要求1所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于所述方法测定与维生素A代谢相关的RBP4基因的C/T基因型,和/或与维生素D代谢相关的VDR基因的C/A基因型,和/或与维生素E代谢相关的ZPR1基因的G/C基因型,和/或与维生素K代谢相关的GGCX基因的G/A基因型和钙代谢代谢相关的VDR基因的G/A基因型,和/或与叶酸代谢相关的MTHFR基因的C/T基因型、MTHFR基因的A/C基因型、MTRR基因的A/G基因型、CBS基因的C/G基因型。
3.根据权利要求2所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于根据测得的叶酸代谢相关的基因MTHFR-C/T型,MTHFR-A/C型,MTRR-A/G型,CBS-C/G型的基因型和各基因型系数,得出待测DNA样本个体的叶酸基因型系数G,其中G为测得的4种基因型分别对应的系数之和的平均值,其中叶酸的不同基因型系数为:
4.根据权利要求3所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于所述基因型系数,结合个体的年龄和性别,按照下述方法得到营养元素叶酸的建议摄入量,其中:Y表示叶酸建议摄入量(单位:μg/天);SA为体表面积;W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);G为个体基因型系数:
1-6个月幼儿:叶酸建议摄入量:(58.5-71.5)g/天;
7-12个月幼儿:叶酸建议摄入量:(72.0-81.1)g/天;
1-8岁儿童:Y=K1×SA×G+B1;SA=K2×W+B2;其中,K1的范围为82.43-100.75,B1的范围为44.22-54.04;K2的范围为0.0315-0.0385,B2的范围为0.09-0.11;
9-18岁男性:Y(Male)=K1×SA×G+B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为128.29-156.81,B1的范围为25.25-30.87;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
9-18岁女性:Y(Female)=K1×SA×G+B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为156.66-191.48,B1的范围为8.19-10.01;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
19岁以上男性:Y(Male)=K1×SA×G+B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为155.73-190.33,B1的范围为34.69-42.39;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
19岁以上女性:Y(Female)=K1×SA×G+B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为179.28-219.12,B1的范围为34.24-41.84;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
妊娠期/哺乳期女性:Y=K1×SA×G+B1;SA=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为168.20-205.58,B1的范围为163.19-199.45;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0142-0.0174,B2的范围为0.0415-0.0507。
5.根据权利要求2所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于维生素E代谢相关的基因ZPR1-C/G的基因型系数分别为:GG型系数:0.9-1.1;GC型系数:2.84-3.47;CC型系数:3.33-4.07。
6.根据权利要求5所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于所述基因型系数,结合个体的不同年龄、性别按照下述方法得到维生素E的建议摄入量,其中:Y表示维生素E建议摄入量(单位:mg/天);SA为体表面积;W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);G为个体基因型系数G:
1-8岁儿童:Y=K1×SA×G-B1;SA=K2×W+B2;其中,K1的范围为16.85-20.59,B1的范围为2.19-2.67;K2的范围为0.0315-0.0385,B2的范围为0.09-0.11;
9-18岁男性:Y(Male)=K1×SA×G-B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为32.36-39.56,B1的范围为25.49-31.16;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
9-18岁女性:Y(Female)=K1×SA×G-B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为39.31-48.05,B1的范围为30.13-36.83;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
19岁以上男性:Y(Male)=K1×SA×G-B1;SA(Male)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为40.16-49.08,B1的范围为48.77-59.61;K2的范围为0.00546-0.00668,K3的范围为0.0114-0.0139,B2的范围为0.0628-0.0768;
19岁以上女性:Y(Female)=K1×SA×G-B1;SA(Female)=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为46.70-57.08,B1的范围为52.17-63.77;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0113-0.0139,B2的范围为0.0415-0.0507;
妊娠期/哺乳期女性:Y=K1×SA×G-B1;SA=K2×H+K3×W-B2;其中,K1的范围为41.14-50.28,B1的范围为50.34-61.52;K2的范围为0.00511-0.00625,K3的范围为0.0142-0.0174,B2的范围为0.0415-0.0507。
7.根据权利要求2所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄和性别按照下述方法得到维生素A的建议摄入量,其中:Y表示建议摄入量(单位:g/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);
1-8岁儿童:
CC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为12.81-15.65,B1的范围为80.82-98.78;
TC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为10.09-12.34,B1的范围为73.07-89.31;
TT型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为18.12-22.14,B1的范围为95.99-117.32;
9-18岁男性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.02-2.46,K2的范围为4.22-5.16,B1的范围为2.06-2.52;
TC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.37-2.89,K2的范围为4.95-6.05,B1的范围为1.97-2.41;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.25-8.86,K2的范围为15.16-18.52,B1的范围为58.02-70.92;
9-18岁女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.09-2.56,K2的范围为4.66-5.69,B1的范围为8.86-10.82;
TC型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为2.60-3.18,K2的范围为5.79-7.07,B1的范围为12.97-15.85;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为8.14-9.94,K2的范围为18.05-22.06,B1的范围为57.82-70.66;
19岁以上男性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.56-1.90,K2的范围为3.27-3.99,B1的范围为16.75-20.47;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.63-3.21,K2的范围为5.49-6.72,B1的范围为4.46-5.46;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.54-9.22,K2的范围为15.79-19.29,B1的范围为52.06-63.62;
19岁以上女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.48-1.80,K2的范围为3.28-4.00,B1的范围为22.25-27.19;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.17-2.65,K2的范围为4.82-5.89,B1的范围为16.63-20.33;
TT型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为8.12-9.92,K2的范围为18.0-22.0,B1的范围为31.64-38.67;
妊娠期/哺乳期女性:
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.29-1.58,K2的范围为3.62-4.42,B1的范围为152.64-186.56;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为1.52-1.86,K2的范围为4.22-5.16,B1的范围为150.87-184.39;
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为6.85-8.37,K2的范围为19.05-23.29,B1的范围为107.59-131.51。
8.根据权利要求2所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄和性别按照下述方法得到维生素D的建议摄入量,其中:Y表示建议摄入量(单位:g/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);
1-8岁儿童:
CC型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为1.47-1.79,B1的范围为40.01-48.91;
CA型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.84-1.02,B1的范围为41.82-51.12;
AA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为0.67-0.81,B1的范围为46.12-56.36;
9-18岁男性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.06-0.08,K2的范围为0.13-0.15,B1的范围为25.97-31.75;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.02-0.04,K2的范围为0.06-0.08,B1的范围为25.61-31.29;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.14-0.17,K2的范围为0.27-0.33,B1的范围为23.73-29.00;
9-18岁女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.009-0.011,K2的范围为0.018-0.022,B1的范围为8.26-10.09;
CA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.036-0.044,K2的范围为0.081-0.099,B1的范围为7.90-9.66;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.21-0.25,K2的范围为0.45-0.55,B1的范围为6.53-7.98;
19岁以上男性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.081-0.099,K2的范围为0.171-0.209,B1的范围为35.67-43.59;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.072-0.088,K2的范围为0.162-0.198,B1的范围为35.56-43.46;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.108-0.132,K2的范围为0.216-0.264,B1的范围为33.49-40.93;
19岁以上女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.09-0.11,K2的范围为0.207-0.253,B1的范围为34.98-42.76;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.081-0.099,K2的范围为0.18-0.22,B1的范围为34.89-42.65;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.108-0.132,K2的范围为0.25-0.31,B1的范围为33.33-40.73;
妊娠期/哺乳期女性:
CC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.41-0.51,K2的范围为1.14-1.39,B1的范围为166.52-203.52;
CA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.39-0.48,K2的范围为1.09-1.33,B1的范围为170.24-208.07;
AA型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.297-0.363,K2的范围为0.828-1.01,B1的范围为165.59-202.39。
9.根据权利要求2所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄和性别按照下述方法得到维生素K的建议摄入量,其中:Y表示建议摄入量(单位:μg/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);
1-8岁儿童:
TT型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.522-0.638,B1的范围为42.73-52.23;
TC型:Y=-K1×W+B1;其中,K1的范围为0.144-0.176,B1的范围为43.80-53.54;
CC型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为0.54-0.66,B1的范围为45.78-55.96;
9-18岁男性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.144-0.176,K2的范围为0.306-0.374,B1的范围为23.55-28.79;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.18-0.22,K2的范围为0.387-0.473,B1的范围为23.10-28.24;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.24-0.29,K2的范围为0.50-0.62,B1的范围为22.48-27.48;
9-18岁女性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.25-0.31,K2的范围为0.55-0.67,B1的范围为6.17-7.54;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.26-0.32,K2的范围为0.59-0.73,B1的范围为6.02-7.36;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.32-0.39,K2的范围为0.71-0.87,B1的范围为5.59-6.83;
19岁以上男性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.126-0.154,K2的范围为0.26-0.32,B1的范围为33.27-40.67;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.24-0.29,K2的范围为0.51-0.63,B1的范围为31.86-38.94;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.41-0.49,K2的范围为0.85-1.03,B1的范围为30.02-36.69;
19岁以上女性:
TT型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.09-0.11,K2的范围为0.21-0.25,B1的范围为33.49-40.93;
TC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.17-0.21,K2的范围为0.39-0.47,B1的范围为32.83-40.13;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.39-0.47,K2的范围为0.86-1.05,B1的范围为31.09-38.00;
妊娠期/哺乳期女性:
TT型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.29-0.36,K2的范围为0.83-1.01,B1的范围为165.59-202.39;
TC型:Y=-K1×H-K2×W+B1;其中,K1的范围为0.18-0.22,K2的范围为0.50-0.62,B1的范围为164.66-201.26;
CC型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为0.04-0.06,K2的范围为0.14-0.16,B1的范围为162.80-198.98。
10.根据权利要求2所述的一种评估营养元素摄入量的基因检测方法,其特征在于根据基因检测结果对应的基因型,结合个体的不同年龄和性别按照下述方法得到钙的建议摄入量,其中:Y表示建议摄入量(单位:μg/天);W为体重(单位:kg);H为身高(单位:cm);
1-8岁儿童:
GG型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为12.81-15.65,B1的范围为80.82-98.78;
GA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为18.52-22.64,B1的范围为97.14-118.72;
AA型:Y=K1×W+B1;其中,K1的范围为10.39-12.69,B1的范围为73.89-90.31;
9-18岁男性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.19-5.13,K2的范围为8.77-10.71,B1的范围为22.92-28.02;
GA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.48-5.48,K2的范围为9.39-11.47,B1的范围为26.33-32.18;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.45-7.89,K2的范围为13.5-16.5,B1的范围为48.99-59.87;
9-18岁女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.25-5.19,K2的范围为9.41-11.51,B1的范围为26.26-32.09;
GA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为4.88-5.96,K2的范围为10.82-13.22,B1的范围为31.38-38.35;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为7.26-8.88,K2的范围为16.10-19.68,B1的范围为50.74-62.02;
19岁以上男性:
GG型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为3.04-3.72,K2的范围为6.37-7.79,B1的范围为0.32-0.39;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为2.93-3.59,K2的范围为6.13-7.49,B1的范围为0.99-1.21;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.26-7.66,K2的范围为13.11-16.03,B1的范围为37.38-45.68;
19岁以上女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.28-4.00,K2的范围为7.27-8.88,B1的范围为7.27-9.32;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为4.15-5.07,K2的范围为9.19-11.24,B1的范围为0.59-0.73;
AA型:Y=K1×H+K2×W-B1;其中,K1的范围为6.75-8.25,K2的范围为14.98-18.30,B1的范围为20.56-25.12;
妊娠期/哺乳期女性:
GG型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.23-3.95,K2的范围为8.98-10.97,B1的范围为136.98-167.42;
GA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为3.29-4.02,K2的范围为9.14-11.18,B1的范围为136.51-166.85;
AA型:Y=K1×H+K2×W+B1;其中,K1的范围为5.63-6.88,K2的范围为15.65-19.13,B1的范围为117.51-143.63。
11.根据权利要求1所述的一种基因检测方法,其特征在于所述扩增引物和单碱基延伸反应引物包含:适用于维生素A代谢相关的RBP4基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGCAAGGGTTTAGGATCATTC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGGATGCCGATTCTCTTAAAAGG,单碱基延伸反应引物CTCGTCTCTTAAAAGGGTCCAT;和/或
适用于维生素D代谢相关的VDR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGTAGAGAAGAAGGCACAGGAG,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGTGCCGTTGAGTGTCTGTGTG,单碱基延伸反应引物GGATTGAGCAGTGAGG;和/或
适用于维生素E代谢相关的ZPR1基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGCCTCCATGACACTAATCACC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGGGAACTTGAAGTCTAGTGGG,单碱基延伸反应引物:GGGGAAAAATGACAATAAACAGAT;和/或
适用于维生素K代谢相关的GGCX基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGGGCTCCTCTTATACACACAG,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGTCGGAAGCTGGTGTCCTACT,单碱基延伸反应引物:CCTTGTCCTACTGCCCCC;和/或
适用于钙代谢相关的VDR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGAAGTCTCCAGGGTCAGGCA,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGTGGCCTGCTTGCTGTTCTTA,单碱基延伸反应引物:GCTGTTCTTACAGGGA;和/或
适用于叶酸代谢相关的MTHFR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGCACTTGAAGGAGAAGGTGTC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGAAGTGATGCCCATGTCGGTG,单碱基延伸反应引物:AGAGGCGTGATGATGAAATCG、适用于叶酸代谢相关的MTHFR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGTCTCCCGAGAGGTAAAGAAC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGTCTACCTGAAGAGCAAGTCC,单碱基延伸反应引物:GGAGCTGACCAGTGAAG;适用于叶酸代谢相关的MTRR基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGTATGCTACACAGCAGGGACA,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGGAAAATCCATGTACCACAGC,单碱基延伸反应引物:CCACAGCTTGCTCACA;适用于叶酸代谢相关的CBS基因的PCR扩增引物1:ACGTTGGATGCTAATTCACGTCTCACTCCC,PCR扩增引物2:ACGTTGGATGCGGCTCAGGTCAGAGCGAT,单碱基延伸反应引物:CCCTCCGCGCAGCTCCGCCG。
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