CN106822201A - 一种板栗花浸膏及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种板栗花浸膏及其制备方法和应用。本发明首先提供了一种板栗花浸膏的制备方法，包括如下步骤：将鲜重为1质量份的板栗花雄花和1质量份的水加入反应釜中，在蒸汽压力0.1Mpa的条件下112℃循环蒸馏，循环蒸馏3个小时后开始持续收集馏出物，馏出物进行油水分离并收集水相，直至收集得到1质量份水相；反应釜中的剩余部分即为板栗花浸膏；所述板栗的品种为“燕山早丰”。本发明制备的板栗花浸膏对肝损伤、高血压和糖尿病均具有预防治疗效果。在板栗雄花没有产业价值、大量浪费的现状下，本发明的发明人将其用于浸膏制备，对于板栗产业具有非常重大的价值，具有巨大的市场空间。
Description
技术领域
本发明涉及一种板栗花浸膏及其制备方法和应用。
背景技术
栗(Castanea mollissima Bl.)，别称板栗，是双子叶植物纲山毛榉目壳斗科栗属栗种植物的总称。在古书中最早见于《诗经》一书，可知栗的栽培史在中国至少有二千五百余年的历史。板栗的植物学特征：高达20米的乔木，胸径80厘米，冬芽长约5毫米，小枝灰褐色，托叶长圆形，长10-15毫米，被疏长毛及鳞腺；叶椭圆至长圆形、长11-17厘米、宽稀达7厘米，叶柄长1-2厘米；雄花序长10-20厘米、花序轴被毛、花3-5朵聚生成簇，雌花1-3(-5)朵发育结实、花柱下部被毛；坚果高1.5-3厘米，宽1.8-3.5厘米；花期4-6月，果期8-10月。中医认为板栗具有补肾健脾、强身壮骨，益胃平肝等功效，因此栗子又有“肾之果”的美名。板栗作为中国传统的果树，历史悠久，资源丰富，分布广泛，是重要的出口产品。中国的板栗种植区，分布于辽宁、北京、河北、山东、河南、陕西黄龙县等地。
板栗的品种类型多达300余个以上。按其分布区域，基本上可划分为两大品种群，即北方品种群(华北地方品种群)和南方品种群(长江流域地方品种群)。从地理区域划分，板栗主要分为：①迁西板栗(北京以东燕山山脉出产的板栗，主产区在河北省兴隆、遵化、迁西一带，又称“燕山板栗”、“兴隆板栗”等)；②丹东板栗(产于辽宁省丹东市)；③镇安板栗(产于陕南秦巴山区)；④罗田板栗(产于鄂东罗田)；⑤郯城板栗(产于山东省郯城县)；⑥信阳板栗(产于河南省信阳市)；⑦邵店板栗(产于江苏邵店)。现有的板栗品种主要有：①华丰：山东省果树研究所从野杂12(野板栗×板栗)×板栗的杂交后代中选育；②燕山魁栗：河北省迁西县从实生栗树中选出，原代号为107；③红栗1号：山东省果树研究所从红栗×泰安薄壳杂交后代中筛选；④郯城3号山东省果树研究所从实生栗树中选出；⑤石丰：山东省海阳县从实生栗中选出；⑥红光栗：山东省莱西市店埠乡从实生栗树中选出；⑦燕山早丰：河北省农林科学院昌黎果树研究所从迁西县杨家峪村实生树中选出；⑧燕奎：河北省昌黎果树所由实生栗中选出；⑨银丰：北京市林果所从实生栗中选出；⑩尖项油栗：江苏省植物所从实生栗中选出。板栗产业的市场目前主要集中于食品，即板栗果实及其相关加工食品。对于板栗植物来说，果实只是其很少的一部分，如果能对板栗植物的其他部分进行研发，开发其他部分的产业价值，对于板栗产业来说将产生巨大的经济效益。
发明内容
本发明的目的是提供一种板栗花浸膏及其制备方法和应用。
本发明首先提供了一种板栗花浸膏的制备方法，包括如下步骤：
将鲜重为1质量份的板栗花雄花和1质量份的水加入反应釜中，在蒸汽压力0.1Mpa的条件下112℃循环蒸馏，循环蒸馏3个小时后开始持续收集馏出物，馏出物进行油水分离并收集水相，直至收集得到1质量份水相；
反应釜中的剩余部分即为板栗花浸膏；
所述板栗的品种为“燕山早丰”。
所述“收集馏出物”采用的冷却水的温度为20-25℃，具体可为25℃。
所述板栗花建议采用采摘24小时以内板栗花。
所述板栗花建议采用采摘7天内且一直4℃冷藏的板栗花。
以上任一所述方法制备得到的板栗花浸膏也属于本发明的保护范围。
本发明还保护以上任一所述方法制备的板栗花浸膏在制备产品中的应用；所述产品的功能为如下(1)至(13)中的至少一种：
(1)预防肝损伤；
(2)预防急性肝损伤；
(3)治疗肝损伤；
(4)治疗急性肝损伤；
(5)预防高血压；
(6)治疗高血压；
(7)预防糖尿病；
(8)预防2型糖尿病；
(9)预防自发性2型糖尿病；
(10)治疗糖尿病；
(11)治疗2型糖尿病；
(12)治疗自发性2型糖尿病；
(13)保肝护肝。
所述产品为食品、保健品或药品。
本发明还保护一种产品，其活性成分为以上任一所述方法制备得到的板栗花浸膏；所述产品的功能为如下(1)至(13)中的至少一种：
(1)预防肝损伤；
(2)预防急性肝损伤；
(3)治疗肝损伤；
(4)治疗急性肝损伤；
(5)预防高血压；
(6)治疗高血压；
(7)预防糖尿病；
(8)预防2型糖尿病；
(9)预防自发性2型糖尿病；
(10)治疗糖尿病；
(11)治疗2型糖尿病；
(12)治疗自发性2型糖尿病；
(13)保肝护肝。
所述产品为食品、保健品或药品。
在板栗雄花没有产业价值、大量浪费的现状下，本发明的发明人将其用于浸膏制备，并通过大量工艺参数优化，得到了一种对于肝损伤、高血压和糖尿病均具有疗效的浸膏，对于板栗产业具有非常重大的价值，具有巨大的市场空间。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
实施例1、板栗花浸膏的制备以及对照物的制备
一、板栗花浸膏的制备
2016年5月底至6月初，每天上午5点至9点，从河北省迁西县的板栗园(板栗品种为“燕山早丰”)中采集板栗花雄花。
将鲜重为300kg板栗花雄花(采摘24小时以内)和300kg水加入反应釜中，在蒸汽压力0.1Mpa的条件下112℃循环蒸馏，循环蒸馏3个小时后开始持续收集馏出物(冷却水温度为25℃)，馏出物进行油水分离并收集水相，直至收集得到300kg水相，即为板栗花提取物。收集馏出物和馏出物进行油水分离是连续衔接进行的。
反应釜中的剩余部分即为板栗花浸膏。
进行三个批次的生产，得到的板栗花浸膏依次命名为板栗花浸膏Ⅰ(200kg)、板栗花浸膏Ⅱ(208kg)和板栗花浸膏Ⅲ((191kg)。
二、对照物A的制备
2016年5月底至6月初，每天上午5点至9点，从河北省迁西县的板栗园(板栗品种为“燕山早丰”)中采集板栗花雄花。
1、对照物A-Ⅰ的制备
将鲜重为300kg板栗花雄花(采摘24小时以内)和300kg水加入反应釜中，在蒸汽压力0.2Mpa的条件下112℃循环蒸馏，循环蒸馏3个小时后开始持续收集馏出物(冷却水温度为25℃)，馏出物进行油水分离并收集水相，直至收集得到300kg水相，即为板栗花提取物。收集馏出物和馏出物进行油水分离是连续衔接进行的。
反应釜中的剩余部分即为对照物A-Ⅰ。进行两个批次的生产，得到的对照物A-Ⅰ依次命名为对照物A-Ⅰ-1、对照物A-Ⅰ-2。
2、对照物A-Ⅱ的制备
将鲜重为300kg板栗花雄花(采摘24小时以内)和300kg水加入反应釜中，在蒸汽压力0.1Mpa的条件下110℃循环蒸馏，循环蒸馏3个小时后开始持续收集馏出物(冷却水温度为25℃)，馏出物进行油水分离并收集水相，直至收集得到300kg水相，即为板栗花提取物。收集馏出物和馏出物进行油水分离是连续衔接进行的。
反应釜中的剩余部分即为对照物A-Ⅱ。进行两个批次的生产，得到的对照物A-Ⅱ依次命名为对照物A-Ⅱ-1、对照物A-Ⅱ-2。
3、对照物A-Ⅲ的制备
将鲜重为300kg板栗花雄花(采摘24小时以内)和300kg水加入反应釜中，在蒸汽压力0.1Mpa的条件下112℃循环蒸馏，循环蒸馏2个小时后开始持续收集馏出物(冷却水温度为25℃)，馏出物进行油水分离并收集水相，直至收集得到300kg水相，即为板栗花提取物。收集馏出物和馏出物进行油水分离是连续衔接进行的。
反应釜中的剩余部分即为对照物A-Ⅲ。进行两个批次的生产，得到的对照物A-Ⅲ依次命名为对照物A-Ⅲ-1、对照物A-Ⅲ-2。
三、对照物B的制备
2016年5月底至6月初，每天上午5点至9点，从河北省迁西县的板栗园(板栗品种为“燕山魁栗”)中采集板栗花雄花。
将鲜重为300kg板栗花雄花(采摘24小时以内)和300kg水加入反应釜中，在蒸汽压力0.1Mpa的条件下112℃循环蒸馏，循环蒸馏3个小时后开始持续收集馏出物(冷却水温度为25℃)，馏出物进行油水分离并收集水相，直至收集得到300kg水相，即为板栗花提取物。收集馏出物和馏出物进行油水分离是连续衔接进行的。
反应釜中的剩余部分即为对照物B。进行两个批次的生产，得到的对照物B依次命名为对照物B-1、对照物B-2。
实施例2、板栗花浸膏对急性肝损伤的保护作用
脂多糖(LPS)：Sigma公司(产品编号L2880)。D-半乳糖胺(D-GlaN)：Sigma公司(产品编号G0500)。注射脂多糖和D-半乳糖胺的作用为引发急性肝损伤，从而建立急性肝损伤模型。采用南京建成小鼠谷丙转氨酶(ALT)检测试剂盒(产品编号C009)检测小鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)的含量。采用南京建成小鼠谷草转氨酶(AST)检测试剂盒(C010)检测小鼠血清中谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)的含量。清洁级雄性ICR小鼠：长春市亿斯实验动物有限公司。
一、分组处理方式
试验动物为清洁级雄性ICR小鼠(6周龄，体重18～22g)。
正常对照组(15只)：连续21天每天灌胃1次生理盐水(单次灌胃体积为每千克体重给予12mL生理盐水)；第21天，灌胃生理盐水后禁食12h，然后一次性腹腔注射无菌生理盐水(注射剂量为每千克体重30mg无菌生理盐水)；
模型组(15只)：连续21天每天灌胃1次生理盐水(单次灌胃体积为每千克体重给予12mL生理盐水)；第21天，灌胃生理盐水后禁食12h，然后一次性腹腔注射LPS和D-GlaN(注射剂量为“每千克体重50μg LPS和300mgD-GlaN”；50μg LPS和300mgD-GlaN溶解于12mL无菌PBS缓冲液)；
试验组Ⅰ(15只)：连续21天每天灌胃1次实施例1制备的板栗花浸膏Ⅰ(板栗花浸膏Ⅰ的单次灌胃剂量为0.3g/kg体重；单次灌胃体积为“每千克体重每次给予12mL板栗花浸膏Ⅰ溶液”；板栗花浸膏Ⅰ溶液的制备方法：取板栗花浸膏Ⅰ，用生理盐水调整体积)；第21天，灌胃板栗花浸膏Ⅰ后禁食12h，然后一次性腹腔注射LPS和D-GlaN(注射剂量为“每千克体重50μgLPS和300mgD-GlaN”；50μg LPS和300mgD-GlaN溶解于12mL无菌PBS缓冲液)；
试验组Ⅱ(15只)：用实施例1制备的板栗花浸膏Ⅱ代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
试验组Ⅲ(15只)：用实施例1制备的板栗花浸膏Ⅲ代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅰ-1(15只)：用实施例1制备的对照物A-Ⅰ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅰ-2(15只)：用实施例1制备的对照物A-Ⅰ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅱ-1(15只)：用实施例1制备的对照物A-Ⅱ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅱ-2(15只)：用实施例1制备的对照物A-Ⅱ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅲ-1(15只)：用实施例1制备的对照物A-Ⅲ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅲ-2(15只)：用实施例1制备的对照物A-Ⅲ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组B-1(15只)：用实施例1制备的对照物B-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组B-2(15只)：用实施例1制备的对照物B-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ。
二、血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肝脏抗氧化指标含量的测定
第22天，取各组小鼠，摘眼球取血，室温凝固60min后3000r/min离心15min，收集上清(血清)。检测小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量。结果见表1。
表1
与正常对照组相比，模型组小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性显著升高，表明腹腔注射LPS/D-GaLN引起了急性肝损伤。与模型组相比，试验组小鼠血清中的谷丙转氨酶活性和谷草转氨酶的活性显著降低，表明预先灌胃板栗花浸膏能够显著降低LPS/D-GaLN引起的血清转氨酶的增加，表明板栗花浸膏具有减轻肝损伤的作用，且其作用效果优于实施例1制备的各个对照物。
实施例3、板栗花浸膏对高血压的治疗作用
一、制备模型动物
实验动物为六周龄清洁剂雄性wistar大鼠。雄性wistar大鼠：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所试验动物中心。
实验动物饮用10g/100mL果糖水溶液，正常饲喂，12h昼夜周期喂养，4周后选取收缩压大于140mm Hg的大鼠，即为模型动物。
二、板栗花浸膏对高血压的治疗作用
正常对照组：取10只正常雄性wistar大鼠，每天灌胃一次生理盐水(每只大鼠的单次灌胃体积为2mL)，连续28天；
模型组：取10只模型动物，每天灌胃一次生理盐水(每只大鼠的单次灌胃体积为2mL)，连续28天；
试验组Ⅰ：取10只模型动物，每天灌胃一次实施例1制备的板栗花浸膏Ⅰ(每只大鼠的单次灌胃剂量为0.3g板栗花浸膏Ⅰ/kg体重；每只大鼠的单次灌胃体积为2mL，用生理盐水调整)，连续28天；
试验组Ⅱ：用实施例1制备的板栗花浸膏Ⅱ代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
试验组Ⅲ：用实施例1制备的板栗花浸膏Ⅲ代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅰ-1：用实施例1制备的对照物A-Ⅰ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅰ-2：用实施例1制备的对照物A-Ⅰ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅱ-1：用实施例1制备的对照物A-Ⅱ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅱ-2：用实施例1制备的对照物A-Ⅱ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅲ-1：用实施例1制备的对照物A-Ⅲ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅲ-2：用实施例1制备的对照物A-Ⅲ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组B-1：用实施例1制备的对照物B-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组B-2：用实施例1制备的对照物B-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ。
第29天测量收缩压，结果见表2。模型组大鼠的血压显著高于正常对照组。相对于模型组大鼠，试验组大鼠的血压显著下降，且效果显著优于实施例1制备的各个对照物。
表2
| 血压(mm Hg) | |
| 正常对照组 | 122.5±2.6 |
| 模型组 | 140.3±3.1 |
| 试验组Ⅰ | 119.4±2.3 |
| 试验组Ⅱ | 120.1±2.1 |
| 试验组Ⅲ | 118.4±1.9 |
| 对照组A-Ⅰ-1 | 128.7±2.6 |
| 对照组A-Ⅰ-2 | 129.3±2.8 |
| 对照组A-Ⅱ-1 | 130.1±3.1 |
| 对照组A-Ⅱ-2 | 129.7±3.0 |
| 对照组A-Ⅲ-1 | 127.3±3.1 |
| 对照组A-Ⅲ-2 | 128.7±3.0 |
| 对照组B-1 | 132.6±3.2 |
| 对照组B-2 | 133.3±2.9 |
实施例4、板栗花浸膏对糖尿病的治疗作用
OLETF大鼠(自发性2型糖尿病大鼠)：日本大冢制药株式会社德岛研究所，常规饲料饲养至32周，体重＞560g。Wistar大鼠(正常大鼠)：中国医学科学院实验动物中心。
正常对照组：取10只Wistar大鼠，每天灌胃一次生理盐水(每只大鼠的单次灌胃体积为2mL)，连续28天。
模型组：取10只OLETF大鼠，每天灌胃一次生理盐水(每只大鼠的单次灌胃体积为2mL)，连续28天；
试验组Ⅰ：取10只OLETF大鼠，每天灌胃一次实施例1制备的板栗花浸膏Ⅰ(每只大鼠的单次灌胃剂量为0.3g板栗花浸膏Ⅰ/kg体重；每只大鼠的单次灌胃体积为2mL，用生理盐水调整)，连续28天；
试验组Ⅱ：用实施例1制备的板栗花浸膏Ⅱ代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
试验组Ⅲ：用实施例1制备的板栗花浸膏Ⅲ代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅰ-1：用实施例1制备的对照物A-Ⅰ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅰ-2：用实施例1制备的对照物A-Ⅰ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅱ-1：用实施例1制备的对照物A-Ⅱ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅱ-2：用实施例1制备的对照物A-Ⅱ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅲ-1：用实施例1制备的对照物A-Ⅲ-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组A-Ⅲ-2：用实施例1制备的对照物A-Ⅲ-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组B-1：用实施例1制备的对照物B-1代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ；
对照组B-2：用实施例1制备的对照物B-2代替板栗花浸膏Ⅰ，其他同试验组Ⅰ。
第29天，尾静脉取血，One-touchⅡ血糖仪(美国强生)测定大鼠的空腹血糖。
结果见表3。与正常对照组比较，模型组大鼠的空腹血糖明显升高。相对于模型组大鼠，试验组大鼠的空腹血糖显著下降，且效果显著优于实施例1制备的各个对照物。
表3
| 空腹血糖(mg/dl) | |
| 正常对照组 | 98.6±6.8 |
| 模型组 | 139.3±7.9 |
| 试验组Ⅰ | 103.7±8.2 |
| 试验组Ⅱ | 105.6±7.8 |
| 试验组Ⅲ | 102.1±7.4 |
| 对照组A-Ⅰ-1 | 120.4±8.3 |
| 对照组A-Ⅰ-2 | 121.6±7.2 |
| 对照组A-Ⅱ-1 | 118.5±8.5 |
| 对照组A-Ⅱ-2 | 117.9±7.8 |
| 对照组A-Ⅲ-1 | 123.4±8.1 |
| 对照组A-Ⅲ-2 | 121.3±7.5 |
| 对照组B-1 | 130.6±8.5 |
| 对照组B-2 | 131.3±9.2 |
Claims (8)
1.一种板栗花浸膏的制备方法，包括如下步骤：将鲜重为1质量份的板栗花雄花和1质量份的水加入反应釜中，在蒸汽压力0.1Mpa的条件下112℃循环蒸馏，循环蒸馏3个小时后开始持续收集馏出物，馏出物进行油水分离并收集水相，直至收集得到1质量份水相；反应釜中的剩余部分即为板栗花浸膏；所述板栗的品种为“燕山早丰”。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述“收集馏出物”采用的冷却水的温度为20-25℃。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述“收集馏出物”采用的冷却水的温度为25℃。
4.权利要求1至4中任一所述方法制备得到的板栗花浸膏。
5.权利要求4所述板栗花浸膏在制备产品中的应用；所述产品的功能为如下(1)至(13)中的至少一种：
(1)预防肝损伤；
(2)预防急性肝损伤；
(3)治疗肝损伤；
(4)治疗急性肝损伤；
(5)预防高血压；
(6)治疗高血压；
(7)预防糖尿病；
(8)预防2型糖尿病；
(9)预防自发性2型糖尿病；
(10)治疗糖尿病；
(11)治疗2型糖尿病；
(12)治疗自发性2型糖尿病；
(13)保肝护肝。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述产品为食品、保健品或药品。
7.一种产品，其活性成分为权利要求4所述板栗花浸膏；所述产品的功能为如下(1)至(13)中的至少一种：
(1)预防肝损伤；
(2)预防急性肝损伤；
(3)治疗肝损伤；
(4)治疗急性肝损伤；
(5)预防高血压；
(6)治疗高血压；
(7)预防糖尿病；
(8)预防2型糖尿病；
(9)预防自发性2型糖尿病；
(10)治疗糖尿病；
(11)治疗2型糖尿病；
(12)治疗自发性2型糖尿病；
(13)保肝护肝。
8.如权利要求7所述的产品，其特征在于：所述产品为食品、保健品或药品。
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| CN201710056391.2A CN106822201A (zh) | 2017-01-25 | 2017-01-25 | 一种板栗花浸膏及其制备方法和应用 |
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|---|---|---|---|---|
| CN109287852A (zh) * | 2018-09-18 | 2019-02-01 | 青岛农业大学 | 一种利用板栗花水提取物提高动物精液品质的方法 |
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| CN102972838A (zh) * | 2012-08-28 | 2013-03-20 | 中国科学院唐山高新技术研究与转化中心 | 板栗花健康饮料及其制备方法 |
| CN106309261A (zh) * | 2016-11-22 | 2017-01-11 | 迁西县栗神生物有限公司 | 一种板栗花提取物及其应用 |
-
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