CN1068048C - 利用酵母菌转化制备木糖醇的方法 - Google Patents
利用酵母菌转化制备木糖醇的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1068048C CN1068048C CN96120000A CN96120000A CN1068048C CN 1068048 C CN1068048 C CN 1068048C CN 96120000 A CN96120000 A CN 96120000A CN 96120000 A CN96120000 A CN 96120000A CN 1068048 C CN1068048 C CN 1068048C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- wood sugar
- xylitol
- cell
- debaryomyces hansenii
- inducing culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种用单一微生物细胞转化木糖或木质素、半纤维素水解物制备木糖醇的方法,这种方法工艺简单、成本低、产率高,对于用廉价原料生产木糖醇具有实际意义。
Description
本发明涉及木糖醇的制备方法
木糖醇是一种甜度与蔗糖相当的天然甜味剂。由于它在人体代谢中不依赖胰岛素并有抗龋齿作用,因此是糖尿病与牙病患者理想的蔗糖替代物。它存在于一些水果和蔬菜中,由于含量太低,提取很不经济。目前主要用木糖催化加氢的方法制备(Wisnik,J.etal:Ind.Eng.Chem.Prod.Res.Dev.,3:232-236,1974)。但这种方法需要用纯木糖为原料,因此工艺复杂,成本很高,限制了木糖醇的大量应用。
为了用廉价的原料如木质素、半纤维素水解物来生产木糖醇,已有不少研究涉及利用微生物发酵的制备方法(Roberto,L.C.etal:BioresourseTechnol.36:271-275,1991)由于这些水解物中含有抑制微生物生长的物质,因此发酵这些水解物制备木糖醇的产率不高,即使进行了预处理也提高不大(Dominguez,J.M.etal:Appl.Biochem.Biotechnol.57/58:49-56,1996)。
木质素和半纤维素水解物的主要成份是木糖,从木糖到木糖醇的生化反应是:
许多微生物细胞有木糖还原酶,因此可以通过发酵得到木糖醇。为了避免水解物中一些成份对细胞生长的抑制,也可以用细胞转化的方法制备木糖醇,但还必须考虑辅酶的问题,一般需要两种微生物细胞,并且反应条件也十分复杂,难以实际应用(Nishio,M.etal:J.Ferment.Bioengin.67:356-360,1989)。
本发明是选育了一株具有独立转化木糖为木糖醇能力的酵母菌(异常汉逊酵母Hansenula anomala),保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏中心登记入册的编号为CGMCC0274。微生物菌种保藏管理,细胞培养后,用游离细胞或固定化细胞都可以转化木糖或木质素、半纤维素水解物为木糖醇。将保存在斜面培养基(2%葡萄糖,1%酵母膏,1%蛋白胨,2%琼脂,自然pH)上的酵母菌接于液体培养基(木糖0.1-5.0%,酵母膏1%,蛋白胨0.5%,pH4.8)中,在24-37℃振荡培养,培养时间可控制在8-96小时之间,以24-48小时为最佳,然后冷冻离心收集、洗涤细胞。直接使用或将细胞固定化,与木糖溶液反应。反应温度范围可以为18-58℃,以25-40℃最佳;反应时间可以控制在12-200小时之间,最佳反应时间为24-120小时。反应液中木糖转化为木糖醇,转化率60-70%。由于细胞已经培养好,因此在以木质素、半纤维素水解物为底物时,不存在抑制生长的问题,产率较高。并且转化反应的系统比发酵培养基简单得多,因此产物的分离纯化也相对简单。固定化细胞还能反复使用多次,可进一步节省培养细胞的费用并简化了工艺。这是一种可以利用廉价原料生产木糖醇的有实际意义的制备方法。
实施例1:游离细胞转化木糖为木糖醇(1).将所用酵母菌接一环于液体摇瓶培养基中(D-木糖1%,酵母膏1%,蛋白胨0.5%,pH4.8,20ml培养基/250ml摇瓶)在温度为30℃、220rpm培养36小时后离心收集菌体(BECKMAN GS-15R,F0630,8000rpm,10℃,10min)用生理盐水10ml洗涤菌体2次,离心取菌体。(2).用200ml蒸馏水悬浮菌体,将菌悬液转入250ml三角瓶,称取2gD-木糖置于上述三角瓶中,用纱布封住瓶口,于旋转摇床上进行转化(转化温度在18℃-58℃,但30℃转化效果最好,220rpm), 96小时后取样用TCL检测样品,并以D-木糖和木糖醇为标样,结果D-木糖完全转化为木糖醇。测定反应液中木糖醇的含量并计算反应转化率为70%。实施例2:游离细胞转化木屑水解物
(1).将所用酵母菌接一环于液体摇瓶培养基中(D-木糖1%,酵母膏1%,蛋白胨0.5%,pH 4.8,20ml培养基/250ml摇瓶)在温度为30℃、220rpm培养36小时后离心收集菌体(BECKMAN GS-15R,F0630,8000rpm,10℃,10min)用生理盐水10ml洗涤菌体2次,离心取菌体。
(2).称取50g木屑,加2%硫酸溶液至500ml体积,80℃水浴保温12小时进行水解。用CaOH中和水解物至pH=6.0,待CaSO4充分析出后抽滤除去沉淀,得木屑水解液,其中D-木糖含量约为0.7%。
(3).取上述水解液30ml悬浮本例(1)所述的菌体转入250ml三角瓶中,纱布封口,于摇床上进行转化(30℃,220rpm),48小时后取样,用TCL分析,已转化完全,只有木糖醇的斑点,测定反应液中木糖醇含量并计算反应转化率为60%。实施例3:固定化细胞转化D-木糖为木糖醇
(1).将所用酵母菌接一环于液体摇瓶培养基中(D-木糖1%,酵母膏1%,蛋白胨0.5%,pH 4.8,20ml培养基/250ml摇瓶,共计四瓶)在温度为30℃、220rpm培养36小时后离心收集菌体(BECKMAN GS-15R,F0630,8000rpm,10℃,10min)用生理盐水10ml洗涤菌体2次,离心取菌体。
(2).称6g海藻酸钠,加94ml蒸馏水加热使其溶解,待用。
(3).用7.0ml蒸馏水悬浮菌体,加7.0ml溶液(2)(冷至40℃),充分混匀。将此液体吸入注射器中呈滴状滴入2%CaCl2液体中固化。滴完后将装有CaCl2的烧杯置于冰箱中继续固化10小时。用砂芯漏斗将固定化细胞颗粒滤出,用蒸馏水洗涤3次,得固定化细胞。
(4).于250ml三角瓶中称取2gD-木糖,加20ml蒸馏水,将本例(3)所述的固定化细胞转入三角瓶中,纱布封口,于摇床上转化(30℃ 220rpm),120小时后用TCL检测已转化完全。测定反应液中木糖醇含量并计算反应转化率68%。实施例4:固定化细胞转化木屑水解物
(1).如实施例3(1),(2),(3)得固定化细胞。
(2).如实施例2(2)得木屑水解液。
(3).于250ml三角瓶中加30ml水解液,与固定化细胞混合后,用纱布封口,在摇床转化(30℃,220rpm),48小时后用TCL检测,已转化完全。测定反应液中木糖醇含量并计算反应转化率为59%。
Claims (8)
1.一种用于制备木糖醇的异常汉逊酵母TX6913,其保藏号为CGM-CC0274。
2.一种制备木糖醇的方法,包括:
用木糖诱导培养权利要求1所述的异常汉逊酵母并收集其细胞;和
将收集的细胞与木糖液混合进行生化反应得到木糖醇。
3.如权利要求2所述的方法,其中,对异常汉逊酵母菌的木糖诱导培养是在含0.1-5.0%的木糖的培养基中进行的。
4.如权利要求3所述的方法,其中,对异常汉逊酵母菌的木糖诱导培养是在含1%的木糖的培养基中进行的。
5.如权利要求2所述的方法,其中,对异常汉逊酵母菌的木糖诱导培养是在28℃-32℃的温度下进行的。
6.如权利要求2所述的方法,其中,对异常汉逊酵母菌的木糖诱导培养进行24-48小时。
7.如权利要求2所述的方法,其中,所述的生化反应是在25℃-40℃下进行的。
8.如权利要求2所述的方法,其中,所述的生化反应的时间为24-120小时。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN96120000A CN1068048C (zh) | 1996-09-25 | 1996-09-25 | 利用酵母菌转化制备木糖醇的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN96120000A CN1068048C (zh) | 1996-09-25 | 1996-09-25 | 利用酵母菌转化制备木糖醇的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1177641A CN1177641A (zh) | 1998-04-01 |
CN1068048C true CN1068048C (zh) | 2001-07-04 |
Family
ID=5126059
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN96120000A Expired - Fee Related CN1068048C (zh) | 1996-09-25 | 1996-09-25 | 利用酵母菌转化制备木糖醇的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1068048C (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10759727B2 (en) | 2016-02-19 | 2020-09-01 | Intercontinental Great Brands Llc | Processes to create multiple value streams from biomass sources |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103184164A (zh) * | 2011-12-30 | 2013-07-03 | 天津工业生物技术研究所 | 一株可同时生产d-阿拉伯糖醇和木糖醇的酵母菌及其应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1993001299A1 (en) * | 1991-07-01 | 1993-01-21 | Xyrofin Oy | Novel yeast strains for the production of xylitol |
-
1996
- 1996-09-25 CN CN96120000A patent/CN1068048C/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1993001299A1 (en) * | 1991-07-01 | 1993-01-21 | Xyrofin Oy | Novel yeast strains for the production of xylitol |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10759727B2 (en) | 2016-02-19 | 2020-09-01 | Intercontinental Great Brands Llc | Processes to create multiple value streams from biomass sources |
US11840500B2 (en) | 2016-02-19 | 2023-12-12 | Intercontinental Great Brands Llc | Processes to create multiple value streams from biomass sources |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1177641A (zh) | 1998-04-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI106265B (fi) | Menetelmä ksylitolin valmistamiseksi ksyloosia sisältävistä seoksista | |
EP0511238B1 (en) | A process for the simultaneous production of xylitol and ethanol | |
CN103374534B (zh) | 解脂亚罗酵母菌株及其用于合成赤藓糖醇的方法 | |
KR970009295B1 (ko) | 트레할룰로스 및 이소말툴로스의 제조방법 | |
CN101392278B (zh) | 微生物混合发酵制备d-泛解酸内酯的方法 | |
CA1236415A (en) | Process for the biotechnological preparation of poly- d-(-)-3-hydroxybutyric acid | |
CN110229852B (zh) | 一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ-聚谷氨酸的方法 | |
CN101372700A (zh) | 从木糖母液以及生物质酸水解液中提取l-阿拉伯糖的方法 | |
Klingspohn et al. | Utilization of potato pulp from potato starch processing | |
CN101358173B (zh) | 黑曲霉zjut712及其在固态发酵炮制牛蒡子中的应用 | |
CN111607622B (zh) | 一种利用小麦b淀粉生产3-羟基丁酮的工艺方法 | |
Lu et al. | Effect of nitrogen sources on xylitol production from D-xylose by Candida sp. L-102 | |
CN1068048C (zh) | 利用酵母菌转化制备木糖醇的方法 | |
CN1173042C (zh) | 微生物酶法制备d-泛醇的方法 | |
CN1030530C (zh) | 固定化α-葡糖基转移酶制备帕拉金糖 | |
JPH0358715B2 (zh) | ||
CN1133746C (zh) | 游离细胞重复利用多次转化制备木糖醇的方法 | |
CN1124349C (zh) | 酵母细胞转化葡萄糖制备阿拉伯糖醇的方法 | |
CN102268468B (zh) | 一种利用啤酒废酵母制备甘露寡糖的方法 | |
CN1458278A (zh) | 两步发酵法生产酵母胞外海藻糖的方法 | |
CN102634463B (zh) | 一株产木糖醇的酵母菌及其应用 | |
CN101857886A (zh) | 一种木糖醇联产l-阿拉伯糖的制备方法 | |
Barron et al. | Ethanol production by Kluyveromyces marxianus IMB3 during growth on straw-supplemented whiskey distillery spent wash at 45 C | |
CN109750073A (zh) | 一种从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法 | |
CN1212386C (zh) | 炭黑曲霉突变株k58固体发酵生产果胶酶 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C19 | Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |