CN106770076A - 油田回注水杀菌剂快速评价方法 - Google Patents

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徐明明
周海刚
董晓通
李霖
王炳升
代海鹰
陈松
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China Petroleum and Chemical Corp
Technology Inspection Center of Sinopec Shengli Oilfield Co
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China Petroleum and Chemical Corp
Technology Inspection Center of Sinopec Shengli Oilfield Co
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Abstract

本发明提供一种油田回注水杀菌剂快速评价方法，该油田回注水杀菌剂快速评价方法包括：步骤1，取待测水样进行过滤并截留待测水样中的微生物；步骤2，取裂解液以裂解待测水样中的微生物，并放入具有缓冲液的样品管中；步骤3，将ATP检测器与电脑连接；步骤4，取ATP标准溶液并采用ATP检测器标定荧光素酶活性；步骤5，取步骤2中样品管中的溶液，检测样品ATP含量。该油田回注水杀菌剂快速评价方法可以大大提高油田回注水杀菌剂的评价效率，有效缩短检测时间。

Description

油田回注水杀菌剂快速评价方法
技术领域
本发明涉及油田开发技术领域，特别是涉及到一种油田回注水杀菌剂快速评价方法。
背景技术
目前国内油田在回注水杀菌剂检测中依据SY/T5757－2010《油田注入水杀菌剂通用技术条件》，该标准在使用过程中存在以下缺点：①检测周期长。空白细菌培养采用绝迹稀释法，即将加入过培养基的待测定水样用无菌注射器逐级注入到测试瓶中进行接种稀释，恒温培养7天，再通过细菌瓶的阳性反应和稀释倍数来计算细菌数目，进而进行杀菌剂评价。②检测效率低。在上述细菌培养中，若7天后空白细菌过高或过低，则需要重新培养再对杀菌剂进行评价。③评价复现性差。难以对某次杀菌剂评价过程进行复现，因为每次试验用水样中细菌生长情况都不会相同。因此，针对现阶段杀菌剂检测的各种弊端，我们发明了一种新的油田回注水杀菌剂快速评价方法，解决了以上技术问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种能大大提高油田回注水杀菌剂的评价效率，有效缩短检测时间的油田回注水杀菌剂快速评价方法。
本发明的目的可通过如下技术措施来实现：油田回注水杀菌剂快速评价方法，该油田回注水杀菌剂快速评价方法包括：步骤1，取待测水样进行过滤并截留待测水样中的微生物；步骤2，取裂解液以裂解待测水样中的微生物，并放入具有缓冲液的样品管中；步骤3，将ATP检测器与电脑连接；步骤4，取ATP标准溶液并采用ATP检测器标定荧光素酶活性；步骤5，取步骤2中样品管中的溶液，检测样品ATP含量。
本发明的目的还可通过如下技术措施来实现：
在步骤1中，将一次性注射器与过滤头连接在一起，取待测水样于一次性注射器中过滤以截留待测水样中的微生物；然后取下过滤头，将注射器吸满空气后再连接上过滤头，使用空气吹干过滤头，重复3次。
步骤1还包括，在吹干过滤头后，将一次性注射器与过滤过待测水样的过滤头连接在一起，取清洗液清洗过滤头，使用空气吹干3次。
在步骤2中，将一次性注射器与已清洗过的过滤头连接在一起，取裂解液于注射器中，用于裂解已清洗过的过滤头上截留的微生物；过滤后的裂解液收集到已放入缓冲液的样品管中，使用空气吹干3次，吹出的裂解液也收集到样品管中，摇匀待用。
在步骤4中，取ATP标准溶液滴于比色皿中，加入荧光素酶，迅速摇匀后立即放入ATP检测器中，标定荧光素酶活性,以便继续测定待测样品的ATP含量。
在步骤5中，取步骤2中样品管中的溶液于比色皿中，加入荧光素酶，迅速摇匀后立即放入ATP检测器中，测定出待测水样中的ATP含量，单位为pg/Ml,同一样品平行做三次。
在步骤5中，ATP的杀菌率的计算公式为：
在步骤5中，ATP的杀菌率不低于95％或ATP残留量不高于100pg/ml时，可量化绝迹稀释法的残留菌量在25个/ml以下。
本发明中的油田回注水杀菌剂快速评价方法，利用腺嘌呤核苷三磷酸(AdenosineTriphosphate,ATP)试剂中若干组分如荧光素‐荧光素酶等与被测样本反应产生光子，再利用专门研制的荧光检测仪来捕捉和检测发光值，由于被测样本所含细菌等微生物的数量与所含的ATP值、以及ATP值与发光值之间存在一定的函数关系，因此通过检测发光值即能得到被测标本所含细菌等微生物含量。
附图说明
图1为本发明的油田回注水杀菌剂快速评价方法的一具体实施例的流程图。
具体实施方式
为使本发明的上述和其他目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举出较佳实施例，并配合附图所示，作详细说明如下。
如图1所示，图1为本发明的油田回注水杀菌剂快速评价方法的流程图。
在步骤101，过滤待测水样：将20mL一次性注射器与22μm过滤头连接在一起，取5mL待测水样于20mL一次性注射器中过滤以截留待测水样中的微生物。然后取下过滤头，将注射器吸满空气后再连接上过滤头，使用空气吹干过滤头，重复3次。
在步骤102，清洗过滤头：将20mL一次性注射器与过滤过待测水样的22μm过滤头连接在一起，取5mL清洗液清洗过滤头，同样使用空气吹干3次。
在步骤103，裂解微生物：将20mL一次性注射器与已清洗过的22μm过滤头连接在一起，取1mL裂解液于注射器中，用于裂解已清洗过的过滤头上截留的微生物。过滤后的裂解液收集到已放入9mL缓冲液的样品管中，同样使用空气吹干3次，吹出的裂解液也收集到样品管中，摇匀待用。
在步骤104，将检测器与电脑连接，运行LumiCalc软件，并创建样品表。测定油田回注水中细菌使所用实际包为QGO-M，检测方法为QGOM-XLPD，应用目标为Process andFuel-Associated Water，No Oxidizing Biocide。
在步骤105，标定荧光素酶活性：取ATP标准溶液2滴于比色皿中，加入0.1mL荧光素酶，迅速摇匀后立即放入检测器中，标定荧光素酶活性。
在步骤106，检测样品ATP含量：取0.1mL步骤103中样品管中的溶液于比色皿中，加入0.1mL荧光素酶，迅速摇匀后立即放入检测器中，测定ATP含量，测定后在Volume列输入测试使用的待测水样的体积(5mL)，软件即可测定出待测水样中的ATP含量，单位为pg/mL。同一样品平行做三次。
在原行标SY/T5757－2010中，规定了细菌的抑菌浓度，而ATP检测方法中只能确定回注水中微生物的总量，无法确定和SRB菌的对应关系。经大量实验发现，ATP的杀菌率不低于95％或ATP残留量不高于100pg/ml时，可量化绝迹稀释法的残留菌量在25个/ml以下。

Claims (8)

1.油田回注水杀菌剂快速评价方法，其特征在于，该油田回注水杀菌剂快速评价方法包括：
步骤1，取待测水样进行过滤并截留待测水样中的微生物；
步骤2，取裂解液以裂解待测水样中的微生物，并放入具有缓冲液的样品管中；
步骤3，将ATP检测器与电脑连接；
步骤4，取ATP标准溶液并采用ATP检测器标定荧光素酶活性；
步骤5，取步骤2中样品管中的溶液，检测样品ATP含量。
2.根据权利要求1所述的油田回注水杀菌剂快速评价方法，其特征在于，在步骤1中，将一次性注射器与过滤头连接在一起，取待测水样于一次性注射器中过滤以截留待测水样中的微生物；然后取下过滤头，将注射器吸满空气后再连接上过滤头，使用空气吹干过滤头，重复3次。
3.根据权利要求2所述的油田回注水杀菌剂快速评价方法，其特征在于，步骤1还包括，在吹干过滤头后，将一次性注射器与过滤过待测水样的过滤头连接在一起，取清洗液清洗过滤头，使用空气吹干3次。
4.根据权利要求3所述的油田回注水杀菌剂快速评价方法，其特征在于，在步骤2中，将一次性注射器与已清洗过的过滤头连接在一起，取裂解液于注射器中，用于裂解已清洗过的过滤头上截留的微生物；过滤后的裂解液收集到已放入缓冲液的样品管中，使用空气吹干3次，吹出的裂解液也收集到样品管中，摇匀待用。
5.根据权利要求1所述的油田回注水杀菌剂快速评价方法，其特征在于，在步骤4中，取ATP标准溶液滴于比色皿中，加入荧光素酶，迅速摇匀后立即放入ATP检测器中，标定荧光素酶活性,以便继续测定待测样品的ATP含量。
6.根据权利要求1所述的油田回注水杀菌剂快速评价方法，其特征在于，在步骤5中，取步骤2中样品管中的溶液于比色皿中，加入荧光素酶，迅速摇匀后立即放入ATP检测器中，测定出待测水样中的ATP含量，单位为pg/Ml,同一样品平行做三次。
7.根据权利要求6所述的油田回注水杀菌剂快速评价方法，其特征在于，在步骤5中，ATP的杀菌率的计算公式为：
8.根据权利要求6所述的油田回注水杀菌剂快速评价方法，其特征在于，在步骤5中，ATP的杀菌率不低于95％或ATP残留量不高于100pg/ml时，可量化绝迹稀释法的残留菌量在25个/ml以下。
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