CN106769327A - 一种收集蠕虫虫卵的夹层杯及检验方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种收集蠕虫虫卵的夹层杯及检验方法,包括设有顶盖和底盖的杯体、过滤网和截留膜,所述的过滤网和截留膜设置于杯体内且将杯体分为三部分,过滤网靠近顶盖设置,截留膜靠近底盖设置。本发明的技术效果在于,标本通过截留膜浓集,可以显著提高蠕虫虫卵检出率,标本中全部虫卵可以进入阅片环节。整个过程在装置中进行,废液集中收集,操作环境完全无标本及气味溢出,符合实验室生物安全要求,克服了实验人员对标本检验的臭气和感观的不适。操作简单快捷,每份标本完成时间在3分钟以内。适合于各种标本如污泥、粪便,以及含有蠕虫虫卵的水体进行寄生虫卵检验。无需手工涂片,集卵与涂片同时完成,降低人工成本。
Description
技术领域
本发明专利涉及一种收集蠕虫虫卵的夹层杯及检验方法。
背景技术
现有蠕虫虫卵检查有直接涂片检查法与集卵法两种,其中集卵法又分漂浮集卵法、沉淀集卵法等。直接涂片检查法的检查方法是将50%的甘油水溶液或普通水1-2滴放于载玻片上,镊取黄豆大小的被检标本,如污泥、粪便等,与之混匀,剔除粗渣,加上盖玻片镜检虫卵。此方法操作简单,但是检出率不高,据统计不到30%,难以满足检验的需求。而虽然集卵法检测能将检出率提高至80%以上,但是现有集卵法仍然存在种种不足。漂浮集卵法一般采用饱和盐水浮卵,方法是取大约10g标本放置于一容器内,压碎,加入适量饱和盐水搅匀,过滤,静置0.5小时左右(或2000转/分离心5-10分钟),用直径0.5-0.1cm的金属圈蘸取表面液膜,抖落于载玻片上,盖片后镜检,或用盖玻片直接蘸取液面,放于载玻片上在显微镜下检查。该检查方法,检出率高,但是操作复杂,容易污染仪器设备,且在检验过程中操作人员需要接触粪便,加大感染几率,同时标本和试剂气味严重影响操作环境。传统沉淀集卵法的方法是取5-10g标本捣碎后,放于一容器内,加5-10倍清水搅匀,经40-60孔铜筛过滤后,让滤液自然沉淀约20分钟,倒掉上清液,反复2-3次,至上清液清亮为止。左后倾倒掉大部分上清液,留约为沉淀物1/2的溶液量,用胶吸管吹吸,均匀后,吸取少量于载玻片上,加盖玻片镜检。这种方法仍然需要在离心沉淀后由操作人员手工涂片镜检,耗时费工,并且仍然存在大部分寄生虫卵不能进入阅片环节(因为只能够取部分离心沉淀制作标本片)。
发明内容
为了解决上述方法所存在的检出率不足、操作复杂、污染操作环境等技术问题,本发明提供一种能够显著提高蠕虫虫卵检出率、且操作简单,能够保持操作环境清洁的收集蠕虫虫卵的夹层杯及检验方法。
为了实现上述技术目的,本发明的技术方案是,
一种收集蠕虫虫卵的夹层杯,包括设有顶盖和底盖的杯体、过滤网和截留膜,所述的过滤网和截留膜设置于杯体内且将杯体分为三部分,过滤网靠近顶盖设置,截留膜靠近底盖设置。
所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯,所述的过滤网的孔径为100μm-200μm并用于过滤标本的粗颗粒杂质,所述的截留膜的孔径为5μm-10μm并用于排出水份及细颗粒杂质且截留蠕虫虫卵。
所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯,所述的顶盖上设有用于插取标本的标本叉,所述的标本叉包括叉杆和叉头,所述的叉杆的一端固定于顶盖上,另一端延伸至杯体内且固定有叉头,标本叉在杯体内的长度小于过滤网与顶盖之间的距离。
所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯,所述的叉杆为空心的管状结构,且顶盖在固定叉杆的位置开有连通叉杆空心管状部位的顶盖孔,所述的叉头在连接叉杆的部分开有多个叉头孔。
一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,采用所述的夹层杯,包括以下步骤:
步骤1,采集标本,从杯体的顶盖一端放入杯体中,注入溶解液;
步骤2,对杯体进行振荡,使杯体内的混合液体呈悬浊液状;
步骤3,从杯体的底盖一端加负压,将混合液体从底盖一端吸走,使粗颗粒杂质被拦截在过滤网上,细颗粒杂质和水份被吸走,蠕虫虫卵被截留在截留膜上;
步骤4,将截留膜浇注透明液后待截留膜半干燥,进行观察分析。
所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,所述的步骤1中,采集标本是取下顶盖,用固定于顶盖上的标本叉进行标本插取后,再将顶盖盖于杯体上。
所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,所述的步骤1中,注入溶解液,是将溶解液直接经管状结构的叉杆注入至叉头并冲淋标本。
所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,所述的步骤3中,在吸走混合液体后,再加入清洗液抽吸一次以进一步去除杂质。
所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,溶解液的成分为胰蛋白酶,氯化钠、缓冲对试剂和去离子水,透明液的成分为石蜡油和甲基硅油。
所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,清洗液的成分为5%曲拉通X100,缓冲对和去离子水。
本发明的技术效果在于,标本通过截留膜浓集,可以显著提高蠕虫虫卵检出率,标本中全部虫卵可以进入阅片环节(截留膜阻拦大于10μm的所有颗粒)。整个过程在装置中进行,废液集中收集,操作环境完全无标本及气味溢出,符合实验室生物安全要求,克服了实验人员对标本检验的臭气和感观的不适。操作简单快捷,每份标本完成时间在3分钟以内。适合于各种标本如污泥、粪便,以及含有蠕虫虫卵的水体进行寄生虫卵检验。无需手工涂片,集卵与涂片同时完成,降低人工成本。
附图说明
图1为本发明的结构示意图;
其中,1叉杆、2顶盖、3杯体、4叉头、5过滤网、6截留膜、7底盖。
具体实施方式
参见图1,本发明包括设有顶盖和底盖的杯体、过滤网和截留膜,过滤网和截留膜设置于杯体内且将杯体分为三部分,过滤网靠近顶盖设置,截留膜靠近底盖设置。
其中过滤网的孔径为100μm-200μm并用于过滤标本的粗颗粒杂质,截留膜的孔径为5μm-10μm并用于排出水份及细颗粒杂质且截留蠕虫虫卵。
进一步的,为了便于操作,顶盖上设有用于插取标本的标本叉,标本叉包括叉杆和叉头,叉杆的一端固定于顶盖上,另一端延伸至杯体内且固定有叉头,标本叉在杯体内的长度小于过滤网与顶盖之间的距离。
进一步的,所述的叉杆为空心的管状结构,且顶盖在固定叉杆的位置开有连通叉杆空心管状部位的顶盖孔,所述的叉头在连接叉杆的部分开有多个叉头孔。
实施例1
1、标本采集者拧开顶盖,用与杯盖连接在一起的标本叉来叉取污泥标本1-2克,放回杯体中,拧紧杯盖送检。
2、检验人员将收集有污泥标本的杯体的底盖打开,插入带有震荡装置和负压装置的仪器中。
3、从叉杆加入溶解液5ml,溶解液直接冲洗标本叉上的污泥标本。开启仪器震荡按钮约1分钟,使污泥标本呈悬浊液。按下抽吸按钮,将液体抽干。此时较粗的渣质被过滤网拦截,小于截留膜孔径的细颗粒杂质直接通过截留膜(孔径5-8微米)被抽吸去除,蠕虫虫卵不能被过滤网拦截,却完全被截留膜截留。
4、加注透明液5ml,约10秒钟后抽吸去除,使截留膜呈现半干燥的透明状态。
5、取出集卵夹层杯,用镊子取下截留膜直接置于显微镜下观察。
实施例2
1、标本采集者拧开顶盖,用与杯盖连接在一起的标本叉来叉取粪便标本1-2克,放回杯体中,拧紧杯盖送检。
2、检验人员将收集有粪便标本的杯体的底盖打开,插入带有震荡装置和负压装置的仪器中。
3、从叉杆加入溶解液5ml,溶解液直接冲洗标本叉上的粪便标本。开启仪器震荡按钮约1分钟,使粪便标本呈悬浊液。按下抽吸按钮,将液体抽干。此时较粗的渣质被过滤网拦截,小于截留膜孔径的细颗粒杂质直接通过截留膜(孔径5-8微米)被抽吸去除,蠕虫虫卵不能被过滤网拦截,却完全被截留膜截留。
4、加注清洗液5ml,再抽吸一遍,进一步去掉较细的残渣。
5、加注透明液5ml,约10秒钟后抽吸去除,使截留膜呈现半干燥的透明状态。
6、取出集卵夹层杯,用镊子取下截留膜直接置于显微镜下观察。
实施例3
1、标本采集者拧开顶盖,将可能含有虫卵的水体标本倒入杯体中,拧紧杯盖送检。
2、检验人员将收集有水体标本的杯体的底盖打开,插入带有震荡装置和负压装置的仪器中。
3、从叉杆加入溶解液5ml以溶解水体中可能存在的杂质。开启仪器震荡按钮约1分钟,使标本呈悬浊液。按下抽吸按钮,将液体抽干。此时较粗的渣质被过滤网拦截,小于截留膜孔径的细颗粒杂质直接通过截留膜(孔径5-8微米)被抽吸去除,蠕虫虫卵不能被过滤网拦截,却完全被截留膜截留。
4、加注清洗液5ml,再抽吸一遍,进一步去掉较细的残渣。
5、加注透明液5ml,约10秒钟后抽吸去除,使截留膜呈现半干燥的透明状态。
6、取出集卵夹层杯,用镊子取下截留膜直接置于显微镜下观察。
上述实施例中,溶解液:用于溶解粪便中的粘液,充分释放寄生虫卵。配方:胰蛋白酶,氯化钠、缓冲对试剂,去离子水组成,其中胰蛋白酶的含量为0.25%。
清洗液:增强截留膜通透性,将标本中杂质快速去除。配方:5%曲拉通X100,缓冲对,去离子水组成,其中缓冲对即为磷酸盐缓冲对,PH6.8~7.2。
透明液:使截留膜完全透明,符合显微镜光学要求。配方:石蜡油、甲基硅油,石蜡油和甲基硅油之间的配比为1:1.8~2.2,采用1:2.0的配比尤佳。
震荡抽液器:由负压泵、管道、密封装置、震荡装置组成,用于混匀液体,抽吸标本。
Claims (10)
1.一种收集蠕虫虫卵的夹层杯,其特征在于,包括设有顶盖和底盖的杯体、过滤网和截留膜,所述的过滤网和截留膜设置于杯体内且将杯体分为三部分,过滤网靠近顶盖设置,截留膜靠近底盖设置。
2.根据权利要求1所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯,其特征在于,所述的过滤网的孔径为100μm-200μm并用于过滤标本的粗颗粒杂质,所述的截留膜的孔径为5μm-10μm并用于排出水份及细颗粒杂质且截留蠕虫虫卵。
3.根据权利要求1所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯,其特征在于,所述的顶盖上设有用于插取标本的标本叉,所述的标本叉包括叉杆和叉头,所述的叉杆的一端固定于顶盖上,另一端延伸至杯体内且固定有叉头,标本叉在杯体内的长度小于过滤网与顶盖之间的距离。
4.根据权利要求3所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯,其特征在于,所述的叉杆为空心的管状结构,且顶盖在固定叉杆的位置开有连通叉杆空心管状部位的顶盖孔,所述的叉头在连接叉杆的部分开有多个叉头孔。
5.一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,其特征在于,采用如权利要求1-4任一所述的夹层杯,包括以下步骤:
步骤1,采集标本,从杯体的顶盖一端放入杯体中,注入溶解液;
步骤2,对杯体进行振荡,使杯体内的混合液体呈悬浊液状;
步骤3,从杯体的底盖一端加负压,将混合液体从底盖一端吸走,使粗颗粒杂质被拦截在过滤网上,细颗粒杂质和水份被吸走,蠕虫虫卵被截留在截留膜上;
步骤4,将截留膜浇注透明液后待截留膜半干燥,进行观察分析。
6.根据权利要求5所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,其特征在于,所述的步骤1中,采集标本是取下顶盖,用固定于顶盖上的标本叉进行标本插取后,再将顶盖盖于杯体上。
7.根据权利要求5所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,其特征在于,所述的步骤1中,注入溶解液,是将溶解液直接经管状结构的叉杆注入至叉头并冲淋标本。
8.根据权利要求5所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,其特征在于,所述的步骤3中,在吸走混合液体后,再加入清洗液抽吸一次以进一步去除杂质。
9.根据权利要求5所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,其特征在于,溶解液的成分为胰蛋白酶,氯化钠、缓冲对试剂和去离子水,透明液的成分为石蜡油和甲基硅油。
10.根据权利要求8所述的一种收集蠕虫虫卵的夹层杯检验方法,其特征在于,清洗液的成分为5%曲拉通X100,缓冲对和去离子水。
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