CN106727824A - 菊叶三七提取物及其复方制剂的制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种菊叶三七提取物的制备方法以及治疗和预防畜禽出血性疾病的菊叶三七复方制剂的制备方法及其应用。具体的是将中药菊叶三七或其提取物与葡萄糖氧化酶等按比例进行复配，制得用于治疗和预防畜禽出血性疾病的复方制剂，包括预混剂、口服液和可溶性复合物。本发明产品主要用于治疗和预防畜禽伴有出血性的疾病，所制备的复方制剂具有稳定性好、效果明显、成本低廉、易于规模化生产和使用方便等特点，可以部分替代或完全替代抗生素，可广泛应用于畜禽疾病的预防，并能够提高畜禽的饲料利用率和抗病能力。

Description

菊叶三七提取物及其复方制剂的制备方法和应用
技术领域
本发明涉及动物用兽药制品领域，特别是涉及一种治疗和预防畜禽出血性疾病的复方制剂的制备方法及其应用。
背景技术
畜禽的多种疾病，不论是细菌、病毒和支原体引起的，还是霉菌引起的，都或多或少地伴有出血性倾向，而由于细菌、病毒、支原体、霉菌等内毒素或外毒素等引发的血管内弥漫性凝血(DIC)一直伴随于疾病的整个发病过程中，因DIC使得畜禽死亡率增加，降低了许多药物治疗疾病的治愈率，为此，针对畜禽的多种伴有出血性疾病制剂的研发势在必行。
在治疗和预防畜禽的多种疾病中，抗生素的使用对于养殖业的发展起到了巨大的推动作用。随着畜禽规模养殖的发展和人们生活水平的提高，人们越来越多地关注于食品安全问题，并且在畜牧业的生产实践中也发现了畜禽疾病中某些细菌耐药性的产生和抗生素在肉、蛋、奶中产生残留的问题，从而担心将来会对人类产生或多或少的潜在性危害。于是，为了人类健康的考虑，同时对国际养殖业提出全面禁抗的更高要求，抗生素替代类新产品作为治疗或预防用制剂已经成为时代发展的必然趋势。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗和预防畜禽出血性疾病的复方制剂，该复方制剂适合于所有畜禽伴有出血性疾病的治疗，并且可以部分或完全替代抗生素。
为此，本发明的技术方案如下：
一种菊叶三七提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)称取100g粉碎并过60目筛的菊叶三七药材，加入到8-12倍量、pH值为7-10的碱水中，浸泡30-60分钟，然后煎熬60-90分钟，过滤得到一次煎熬药液和药渣；
2)将得到的药渣加入到8-12倍量、pH值为7-10的碱水中，煎熬60-90分钟，过滤得到二次煎熬药液和药渣；
3)重复步骤2)的过程，得到三次煎熬药液和药渣；
4)将三次所得药液混合，减压浓缩至相对密度为1.1～1.2，冷却至室温；
5)向减压浓缩后的药液中加乙醇至含醇量为70-85％(v/v)，静置，取下层沉淀，干燥，得到所述菊叶三七提取物。
优选的是，上述步骤1)、2)、3)中，所述碱水用量为10倍量，碱水的pH值为8，煎熬时间为90分钟；步骤1)中，浸泡时间为60分钟。
优选的是，上述步骤4)中，加乙醇至含醇量为80％(v/v)。
一种菊叶三七复方中药口服液的制备方法，包括以下步骤：
(1)称取1kg菊叶三七原生药材，将其杀菌、粉碎，得到原料药粉；
(2)将得到的原料药粉加8-12倍量的水浸泡30-60分钟，然后煎熬60-90分钟，过滤得到一次煎熬药液和药渣；
(3)将步骤(2)得到的药渣加入到8-12倍量的水中，煎熬60-90分钟，过滤得到二次煎熬药液和药渣；
(4)重复步骤(3)的过程，得到三次煎熬药液和药渣；
(5)将三次所得药液混合，减压浓缩，冷却至室温，滤过后，加入10g葡萄糖氧化酶和苯甲酸钠，定容至1L，所述苯甲酸钠在溶液中的浓度为5wt％。
在本发明的一个实施例中，菊叶三七复方中药口服液的规格为：每毫升相当于菊叶三七原生药1g，葡萄糖氧化酶100u。
优选的是，上述步骤(2)、(3)、(4)中，所述水的用量为10倍，煎熬时间为90分钟；步骤(2)中，浸泡时间为60分钟。
上述菊叶三七复方中药口服液还可以直接用菊叶三七提取物制备，包括以下步骤：
取菊叶三七提取物40g和葡萄糖氧化酶10g，溶解后，加入1％吐温-80，加入0.5％苯甲酸钠，定容至1L，煮沸灭菌，过滤，灌封。
在本发明的一个实施例中，菊叶三七复方中药口服液的规格为：每毫升相当于菊叶三七提取物0.04g，葡萄糖氧化酶100u。
一种菊叶三七复方中药预混剂的制备方法，称取权利要求1的方法制备的菊叶三七提取物40g和葡萄糖氧化酶20g，加入适量的药用辅料，使用混合机充分混合15分钟，得到所述菊叶三七复方中药预混剂，其中所述药用辅料为淀粉、蔗糖、无水葡萄糖、辅美白、糊精、乳糖和微粉硅胶中的一种，药用辅料的用量可以根据临床实际应用情况进行调整。
在本发明的一个实施例中，菊叶三七复方中药预混剂的规格为：每克相当于菊叶三七原生药0.8g，葡萄糖氧化酶200u。
一种菊叶三七复方中药可溶性粉的制备方法，称取权利要求1的方法制备的菊叶三七提取物40g和葡萄糖氧化酶20g，加入适量的药用辅料，例如940g，使用混合机充分混合15分钟，得到所述菊叶三七复方中药可溶性粉，其中所述药用辅料为蔗糖、无水葡萄糖、辅美白、糊精、乳糖中的一种，药用辅料的用量可以根据临床实际应用情况进行调整。
在本发明的一个实施例中，菊叶三七复方中药可溶性粉的规格为：每克相当于菊叶三七原生药0.8g，葡萄糖氧化酶200u。
一种菊叶三七复方中药口服液在治疗和预防畜禽出血性疾病方面的应用，使用时，每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药口服液1-20ml。
一种菊叶三七复方中药预混剂在治疗和预防畜禽出血性疾病方面的应用，使用时，每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药预混剂1-20g。
一种菊叶三七复方中药可溶性粉在治疗和预防畜禽出血性疾病方面的应用，使用时，每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药可溶性粉1-20g。
本发明中各组分的作用如下：
菊叶三七：为菊科多年生宿根草本植物菊叶三七Gynura segetum(Lour.)Merr.的根、叶及全草。味甘、微苦，性平。具有散瘀止血、解毒消肿功能。适用于衄血、吐血、跌打伤痛、疮痈肿毒、乳痈等。《滇南本草》谓本品“治跌打损伤。生用破血，灸用补血。”《本草纲目·卷十二·三七》，只言其“治金疮折伤出血及上下血病”。《土家族医药学概论》记载其能治疗：跌打损伤，劳伤疼痛、吐血、血痢、无名肿毒、产后腹痛、痛经、乳痈等。《草药针灸治兽病》记载其能：“祛瘀散血，止血止痛，消肿解毒。治跌打损伤，淤血肿痛，外伤出血，内伤疼痛，产后淤血，赤白痢疾，痈疽疔疮，毒蛇咬伤”，为民间兽医常用的治疗畜禽伴有出血性疾病的一味重要中药。研究证明菊叶三七属植物中含有生物碱类、黄酮类、香豆素类、三萜类、甾体类及其皂苷、倍半萜类、酚酸类等化学成分，具有良好的止血、活血、抗炎、解毒、消肿等药理活性。
葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase，GOD)：是从特异青霉(Penicillium notatum)等霉菌和蜂蜜中发现的酶。它能催化D-葡萄糖+O2→D-葡糖酸(的δ-内酯)+H2O2的反应。特异青霉(P.notatum)的酶以其显有抗菌性而引入注意。因此，也有葡糖氧化酶的称呼。现已清楚，抗菌性是由于反应生成的H2O2具灭菌作用，同时生成的葡萄糖酸或葡萄糖酸内酯具有类似肝泰乐的结构，因此也具有解肝脏中毒的作用。
葡萄糖氧化酶在动物养殖中的作用：清除体内，特别是肠道内致病因子，优化肠道环境，提高食欲，增加采食量，替代抗生素和益生素；保护免疫系统，增强肝脏功能，降低动物体内药物残留，提高畜产品品质；并且可以快速解除毒素中毒，特别是霉菌毒素中毒；可以辅助药物，增加疗效，加快痊愈等。
在本发明的治疗和预防畜禽出血性疾病的复方制剂中，菊叶三七与葡萄糖氧化酶的复配比例相当于生药菊叶三七1～20g/kg饲料或饮水：葡萄糖氧化酶20～1000u/kg饲料或饮水。
本发明的方法制备的菊叶三七提取物，1g菊叶三七提取物相当于原生药材5～30g。本发明中使用的葡萄糖氧化酶，酶活力为200～10000u/g。
本发明的方法制备的菊叶三七复方制剂适合于所有畜禽伴有出血性疾病的预防和治疗，例如：猪丹毒、猪肺疫、仔猪副伤寒、猪葡萄球菌感染、猪圆环病毒感染、猪蓝耳病、牛羊血痢及各种肠炎、鸡新城疫、传支、传喉、法氏囊炎、金色葡萄球菌感染、禽球虫病等，并且可以部分或完全替代抗生素。该类制剂具有性能稳定、安全性好、成本低、简便易用等特点，并且其制备方法简单，适合规模化工业生产的需要。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的菊叶三七提取物及其复方制剂的制备方法作进一步说明。
实例一：菊叶三七提取物的制备
称取100g粉碎并过60目筛的菊叶三七药材，加入10倍量的碱水中，碱水的pH值为8，浸泡60分钟，然后煎熬90分钟，过滤得到一次煎熬药液和药渣。
将得到的药渣再次加入到10倍量、pH值为8的碱水中，煎熬90分钟，过滤得到二次煎熬药液。重复前述步骤，得到三次煎熬药液。
将三次所得药液混合，减压浓缩至相对密度为1.1～1.2，放冷，加乙醇至含醇量为80％(v/v)，静置，取下层沉淀，干燥，得菊叶三七提取物。
实例二：菊叶三七复方中药口服液的制备(1L)
称取1kg菊叶三七原生药材，将其杀菌、粉碎，得到原料药粉；将得到的原料药粉，加10倍量的水浸泡60分钟，再煎熬90分钟，过滤得到一次煎熬药液和药渣。
将得到的药渣加入到10倍量的水中，煎熬90分钟，过滤得到二次煎熬药液和药渣；重复前述步骤，得到三次煎熬药液和药渣。
将三次所得药液混合，减压浓缩，放冷，滤过后，加入10g葡萄糖氧化酶和苯甲酸钠，最后定容至1L，所述苯甲酸钠在溶液中的浓度为5wt％。最终的菊叶三七复方中药口服液规格为：每毫升相当于菊叶三七原生药1g，葡萄糖氧化酶100u。
使用时，每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药口服液1-20ml。
实例三：菊叶三七复方中药预混剂的制备(1kg)
称取实施例1制备的菊叶三七提取物40g，葡萄糖氧化酶20g，加入940g的药用淀粉，使用混合机充分混合15分钟，即得菊叶三七复方中药预混剂。最终的复方中药预混剂规格为：每克相当于菊叶三七原生药0.8g，葡萄糖氧化酶200u。
使用时，每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药预混剂1-20g。
实例四：菊叶三七复方中药可溶性粉的制备(1kg)
称取实施例1制备的菊叶三七提取物40g，葡萄糖氧化酶20g，加入940g无水葡萄糖，使用混合机充分混合15分钟，即得菊叶三七复方制剂中药可溶性粉。最终的复方中药可溶性粉规格为：每克相当于菊叶三七原生药0.8g，葡萄糖氧化酶200u。
使用时，每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药可溶性粉1-20g。
应用例
例1：实施例2制备的菊叶三七复方中药口服液对猪圆环病毒感染猪的临床试验
某猪场仔猪断奶后，粪便呈灰白色或淡黄色水样，出现呕吐，不久严重脱水，眼球凹陷，皮肤干燥，无弹；生长缓慢，发育不良，表现为渐进性消瘦，肋骨凸显，被毛粗糙无光泽，眼圈发黑；有的病猪为颈部、肩部、腹底甚至全身皮肤结痂、龟裂，双耳背侧、腹底、股内侧皮内弥漫分布黑紫色小点。经实验室诊断，确诊为猪圆环病毒感染。所有病猪服用菊叶三七复方中药口服液(相当于生药菊叶三七1～20g/kg饮水：葡萄糖氧化酶20～1000u/kg饮水)，连续饮用5-7天，在治疗的同时，对猪舍和周围环境进行彻底消毒进行喷洒，每天一次，连用7d。2周后病猪逐渐恢复健康。
例2：实施例3制备的菊叶三七复方中药预混剂对金黄色葡萄球菌感染猪的临床试验
选择洁净级广西巴马小型猪，隔离饲养观察一周后，供试验用。
将确认未受金黄色葡萄球感染的试验猪随机分成三组，第一组为空白对照组(10头)，第二组为攻毒对照组(10头)，第三组为攻毒治疗组(10头)。第一组为空白对照组，不注射任何药品，隔离饲养。第二组和第三组每头猪注射金黄色葡萄球菌菌液2ml，约含10亿个活菌。于攻毒呈现发病症状后，第三组饲喂混有菊叶三七复方中药预混剂的饲料(相当于生药菊叶三七1～20g/kg饲料：葡萄糖氧化酶20～1000u/kg饲料)，连续饲喂5-7天，第二组饲喂不含有任何药物的饲料。观察猪的发病和死亡情况至第30天，结果见表1。
表1各组猪的发病和死亡情况
例3：实施例4制备的菊叶三七复方中药可溶性粉对患有鸡球虫病家禽的防治试验
某鸡场的病鸡精神不振，闭目呆立，羽毛蓬松，双翅下垂，食欲不振，喜多喝水，先便秘后下痢，肛门周围羽毛粘在一起。以后双翅轻瘫，走路失调，嗉囊充满液体，拒食，粪便由水样带血到血粪，粘膜和冠呈苍白，消瘦。大多数病雏在发病6至10天内死亡。剖检显示盲肠肠管显著肿大，充满暗红色血液凝块，并伴有严重的糜烂；有的含有一种混杂血液的黄白色干酪样坏死物质，其它脏器无明显变化。鸡尸体消瘦，鸡冠和年末苍白或者发青，泄殖腔周围羽毛被液体排泄物污染，往往带有血液。经实验室诊断，确诊为鸡球虫病。所有病鸡用菊叶三七复方中药可溶性粉兑水服用(相当于生药菊叶三七1～20g/kg饮水：葡萄糖氧化酶20～1000u/kg饮水)，连续饮用5-7天，在治疗的同时，对鸡舍和周围环境进行彻底消毒进行喷洒，每天一次，连用7天。2周后病鸡逐渐恢复健康。
上述治疗和预防畜禽出血性疾病的菊叶三七复方制剂的制备方法及其应用的实施例仅是说明性的而不是限定性的，可按照所限定范围列举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改，应属本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种菊叶三七提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)称取100g粉碎并过60目筛的菊叶三七药材，加入到8-12倍量、pH值为7-10的碱水中，浸泡30-60分钟，然后煎熬60-90分钟，过滤得到一次煎熬药液和药渣；
2)将得到的药渣加入到8-12倍量、pH值为7-10的碱水中，煎熬60-90分钟，过滤得到二次煎熬药液和药渣；
3)重复步骤2)的过程，得到三次煎熬药液和药渣；
4)将三次所得药液混合，减压浓缩至相对密度为1.1～1.2，冷却至室温；
5)向减压浓缩后的药液中加乙醇至含醇量为70-85％(v/v)，静置，取下层沉淀，干燥，得到所述菊叶三七提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1)、2)、3)中，所述碱水用量为10倍量，碱水的pH值为8，煎熬时间为90分钟；步骤1)中，浸泡时间为60分钟。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤4)中，加乙醇至含醇量为80％(v/v)。
4.一种菊叶三七复方中药口服液的制备方法，包括以下步骤：
(1)称取1kg菊叶三七原生药材，将其杀菌、粉碎，得到原料药粉；
(2)将得到的原料药粉加8-12倍量的水浸泡30-60分钟，然后煎熬60-90分钟，过滤得到一次煎熬药液和药渣；
(3)将步骤(2)得到的药渣加入到8-12倍量的水中，煎熬60-90分钟，过滤得到二次煎熬药液和药渣；
(4)重复步骤3)的过程，得到三次煎熬药液和药渣；
(5)将三次所得药液混合，减压浓缩，冷却至室温，滤过后，加入10g葡萄糖氧化酶和苯甲酸钠，定容至1L，所述苯甲酸钠在溶液中的浓度为5wt％。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)、(3)、(4)中，所述水的用量为10倍，煎熬时间为90分钟；步骤(2)中，浸泡时间为60分钟。
6.一种菊叶三七复方中药预混剂的制备方法，其特征在于：称取权利要求1的方法制备的菊叶三七提取物40g和葡萄糖氧化酶20g，加入适量的药用辅料，使用混合机充分混合15分钟，得到所述菊叶三七复方中药预混剂，其中所述药用辅料为淀粉、蔗糖、无水葡萄糖、辅美白、糊精、乳糖和微粉硅胶中的一种。
7.一种菊叶三七复方中药可溶性粉的制备方法，其特征在于：称取权利要求1的方法制备的菊叶三七提取物40g和葡萄糖氧化酶20g，加入适量的药用辅料，使用混合机充分混合15分钟，得到所述菊叶三七复方中药可溶性粉，其中所述药用辅料为蔗糖、无水葡萄糖、辅美白、糊精、乳糖中的一种。
8.一种权利要求4的方法制备的菊叶三七复方中药口服液在治疗和预防畜禽出血性疾病方面的应用，其特征在于：每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药口服液1-20ml。
9.权利要求6的方法制备的菊叶三七复方中药预混剂在治疗和预防畜禽出血性疾病方面的应用，其特征在于：每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药预混剂1-20g。
10.权利要求7的方法制备的菊叶三七复方中药可溶性粉在治疗和预防畜禽出血性疾病方面的应用，其特征在于：每公斤饲料或饮水中，加入所述菊叶三七复方中药可溶性粉1-20g。
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