CN106692138A - N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用 - Google Patents

N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用。N-苄基咪酰胺衍生物，在畜禽疾病防治和促进生长提高畜禽生产性能方面对多粘菌素类抗生素具有协同增效作用，应用于畜禽疾病防治和促进生长领域，提高动物的生产性能从而提升畜禽养殖的经济效益。另一方面，N-苄基咪酰胺衍生物与多粘菌素类抗生素联合应用可降低多粘菌素类抗生素的使用剂量降低毒副反应，提高多粘菌素类抗生素在人用药物领域的使用效率和使用范围。

Description

N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用
技术领域：
本发明属于生物医药领域，涉及N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用，如人用药物的制备以及作为动物防治疾病用药和饲料添加剂的应用。
背景技术：
多粘菌素(polymyxin)是发现于多粘杆菌(Bacillus polymyxa)培养液中的抗菌性多肽，有A、B、C、D、E等五种，是结构相似，抗菌谱相互类似而范围宽广，特别对革兰氏阴性细菌有杀灭作用，临床常用的是多粘菌素B和多粘菌素E(硫酸粘杆菌素)，由于毒性较大，主要用于局部治疗敏感菌所引起的眼、耳、皮肤、粘膜感染及烧伤时铜绿假单胞菌感染以及口服用于肠道术前准备。在饲料工业中作为饲料添加剂应用，能防治畜禽疾病，还能改善畜禽新陈代谢，提高成活率和饲料转化率促进畜禽生长。
近年来，由于细菌耐药性问题，多粘菌素类抗生素在实际生产和生活中的应用大受影响。在生产实践中已有多种药物与多粘菌素类抗生素配伍使用以便增加药品的疗效，试验证明这些配伍药物与多粘菌素类抗生素联合配伍的治疗效果其实为各自对不同感染菌株的抑制效果的综合结果，而对多粘菌素类抗生素没有任何协同增效的作用。另外，这些配伍药物或为抗菌剂或为杀菌剂或为具有一定毒性的化学试剂，长期联合使用有可能会引发新型的多药耐药菌株或对环境造成严重污染，而有些配伍药物已经被欧盟禁止作为饲料添加剂使用。因此，筛选新型的低毒或无毒的非杀菌非抗菌的多粘菌素类抗生素的协同增效剂或耐药性逆转剂将是解决多粘菌素类抗生素在实际使用中遇到的困难最为有效的手段。
发明内容：
本发明的目的之一是提供一种新型、安全、有效的多粘菌素类抗生素协同增效剂。
本发明提供的硫酸粘杆菌素协同增效剂是N-苄基咪酰胺衍生物。
默沙东的研发人员于1958年曾经报道咪唑双酰胺及相关化合物具有抗球虫活性而被开发为抗寄生虫药(Cuckler A.C.,ect.Antiparasitic drugs.Ⅱ.Anticoccidial activity of4,5-imidazoledicarboxamide and related compounds[J].Proceedings of the Society forExperimental Biology and Medicine,1958,98:167-70.)。广州英赛特生物技术有限公司公开的咪唑双酰胺衍生物也具有抗球虫特性而用于制备抗球虫药物应用于家鸡的饲养保健(CN201510103326.1)。发明人首次发现N-苄基咪酰胺衍生物除了具有抗球虫的活性外还对硫酸粘杆菌素在抗动物细菌感染和促生长方面具有协同增效的作用。
因此本发明提供N-苄基咪酰胺衍生物用作多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用，所述的N-苄基咪酰胺衍生物具有如式(Ⅰ)所示的结构：
其中，R1和R2分别为H、卤素、NO2、S(＝O)2CH3、O-Ph、O-C1-8直链或支链烷基、C1-8直链或支链烷基或C1-8直链或支链的卤代烷基；所述的卤素为F、Cl、Br或I；所述的O-Ph中的苯基是指未被取代或被1，2，3，4个取代基取代的苯基，所述的取代基选自F、Cl、Br、I、C1-8直链或支链烷基。
在一实施方案中，所述的N-苄基咪酰胺衍生物R1优选为H，R2优选为卤素。
在另一实施方案中，所述的N-苄基咪酰胺衍生物R1优选为H，R2优选为Cl。
在另一实施方案中，所述的N-苄基咪酰胺衍生物优选为式(Ⅱ)所示的化合物，
本发明所述的多粘菌素类抗生素选自多粘菌素A、多粘菌素B、多粘菌素C、多粘菌素D或多粘菌素E。
本发明提供的N-苄基咪酰胺衍生物在体外抑菌试验研究过程对硫酸粘杆菌素抑制细菌生长作用具有显著的协同增效效果，硫酸粘杆菌素在相应的实验中的最小抑菌浓度出现明显的下降。
发明人对N-苄基咪酰胺衍生物的革兰氏阴性菌的最小抑制浓度测试，试验结果表明N-苄基咪酰胺衍生物对革兰氏阴性菌无抑制活性。在另外一些实施方案中，测试在培养中分别含有相同浓度不同结构的N-苄基咪酰胺衍生物时多粘菌素类抗生素对相应敏感菌株的体外最小抑制浓度，N-苄基咪酰胺衍生物显示明显的抑菌协同增效作用。
在另外一些实施方案中，测试在培养中分别含有相同浓度不同结构的N-苄基咪酰胺衍生物时多粘菌素类抗生素对相应敏感菌株的体外最小抑制浓度，优选的试验敏感菌株为对多粘菌素类抗生素敏感的大肠杆菌。在另外一些实施方案中，测试在培养中分别含有相同浓度不同结构的N-苄基咪酰胺衍生物时多粘菌素类抗生素对相应耐药菌株的体外最小抑制浓度，N-苄基咪酰胺衍生物显示明显的抑菌协同增效作用，表现为耐药逆转作用。在另外一些实施方案中，不同浓度的同种N-苄基咪酰胺衍生物对多粘菌素类抗生素耐药菌株的协同增效作用呈现剂量效应。
所述的细菌为革兰氏阴性菌，包括大肠杆菌、肠杆菌属、绿脓杆菌、志贺氏菌、克雷伯氏菌、沙门氏菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌等。
本发明的第二个目的是提供所述的N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用是用于制备动物抗细菌感染的药物的应用，如用于制备抗多粘菌素类抗生素敏感菌或耐药菌的药物。
动物常见的细菌感染症状是肠道感染导致的细菌性下痢，表现为拉稀脱水、食欲不振、消化不良、精神萎靡、体形消瘦进而死亡。细菌性下痢具有传染性，可影响同群圈养的其他畜禽的健康。多粘菌素类抗生素对动物细菌性下痢具有治疗和预防作用。
在畜禽的细菌性感染腹泻的治疗，采用N-苄基咪酰胺衍生物与多粘菌素类抗生素的配伍制剂比单独使用多粘菌素类抗生素制剂表现出更好的畜禽健康状态转良率，如在断奶仔猪腹泻控制方面对多粘菌素类抗生素的协同增效作用。
在一实施方案中，本发明所述的多粘菌素类抗生素协同增效剂N-苄基咪酰胺衍生物是通过口服剂型经口服用。
所述的口服剂型除了主药成分N-苄基咪酰胺衍生物还包含有药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、抗氧化剂、抗结块剂、溶媒或它们的组合。
所述的治疗用口服剂型是片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、口服液、散剂、预混剂等。
在另一实施方案中，本发明所述的多粘菌素类抗生素协同增效剂与多粘菌素类抗生素按配比制备成复方制剂。
所述的复方制剂可经口服用，除了N-苄基咪酰胺衍生物和多粘菌素类抗生素外还含有药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、抗氧化剂、抗结块剂、溶媒或它们的组合。
所述的复方制剂是片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、口服液、散剂、预混剂等。
N-苄基咪酰胺衍生物在治疗用药的使用剂量为1-200ppm，优选为10-200ppm。
N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂用于抗动物细菌感染，所述的动物主要是家禽和家畜，具体包括鸡、鸭、鹅、鸽、鹌鹑、猪、牛、羊、马、兔、驴、狗、猫、狐、貂或貉。
本发明的第三个目的是提供所述的N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用是用于制备动物生长促进剂。
多粘菌素类抗生素在饲料加工业中作为抗生素类动物生长促进剂对改善动物的生产性能具有显著的效果，所述的N-苄基咪酰胺衍生物与多粘菌素类抗生素配伍使用具有协同增强促动物生长性能的效果。
在一实施方案中，N-苄基咪酰胺衍生物与饲用载体、稀释剂、抗氧化剂、抗结块剂、溶媒或它们的组合制成饲料添加剂用于动物的促生长。
在另一实施方案中，N-苄基咪酰胺衍生物和多粘菌素类抗生素与饲用载体、稀释剂、抗氧化剂、抗结块剂、溶媒或它们的组合制成复方饲料添加剂用于动物的促生长。
所述的饲料添加剂是片剂、粉剂、散剂、颗粒剂、口服液、胶囊剂、预混剂等。
在一实施方案中，本发明提供的饲料添加剂以单独形式添加到动物的每日口粮中使用
在另一实施方案中，本发明提供的饲料添加剂与饲料原料、饲料添加剂、载体或稀释剂等按照一定比例制备成添加剂预混合饲料、浓缩饲料、配合饲料、精料补充饲料等饲料形式供动物食用。
所述的饲料添加剂以N-苄基咪酰胺衍生物剂量在饲料中的使用量是1-1000ppm，优选为10-500ppm。
N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂用于动物促生长，所述的动物主要是家禽和家畜，具体包括鸡、鸭、鹅、鸽、鹌鹑、猪、牛、羊、马、兔、驴、狗、猫、狐、貂或貉。
本发明还提供了N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素的协同增效剂应用于制备人用抗革兰氏阴性菌感染的药物。
多粘菌素类抗生素临床应用毒性大，具有神经系统毒性和瘙痒、发热和皮疹的变态反应等不良反应，限制了该药品在临床上的使用范围以及使用率。
N-苄基咪酰胺衍生物对多粘菌素类抗生素具有协同增效作用，与其联合应用可显著减少多粘菌素类抗生素的使用剂量从而降低毒副反应发生的概率以及强度。
本发明所述的N-苄基咪酰胺衍生物联合多粘菌素类抗生素在制备人用复方治疗药物中的应用。复方治疗药物包含N-苄基咪酰胺衍生物和多粘菌素类抗生素中的一种以及其他药用辅料，可以是散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、软膏剂、眼膏剂、凝胶剂、气雾剂、膜剂、口服液、滴眼剂、注射液、栓剂等。该复方治疗药物可用于人体细菌所致的胃肠道感染、败血症、尿路感染、痢疾、百日咳、呼吸道感染、胆道感染、烧伤或外伤创面感染等由革兰氏阴性菌感染引起的疾病治疗。
由此可见，本发明提供的N-苄基咪酰胺衍生物可作为新型有效安全的多粘菌素类抗生素配伍制剂可用于动物的疾病预防和治疗、作为协同增效剂提高所谓抗生素类动物生长促进剂的使用效率从而改善动物的生产性能提高饲养的经济效益，并能在人用药物临床使用中降低多粘菌素类抗生素的使用剂量从而减少毒副反应的发生提高药物的使用效率。
另一方面，本发明还涉及所述N-苄基咪酰胺衍生物的制备、分离、纯化等方法和过程。
本发明的任一方面的任一实施方案可以与其他实施方案进行组合，只要它们之间不出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们之间不会出现矛盾。
前面所述内容只是概述了本发明的某些方面，但不限于这些方面。
本发明其他方面的进一步详细描述。
现在详细描述本发明的某些实施方案，其实例由随附的结构式和化学式加以说明。本发明的意图涵盖所有的替代、修改和等同的技术方案，它们均包括在如权利要求定义的本发明的范围内。另外，本发明的某些技术特征为清楚可见，在多个独立的实施方案中分别进行描述，但也可以在单个实施例中以组合形式提供或以任意适合的子组合形式提供。
本发明涉及的名词定义。
除非另有说明，本发明涉及的名词定义具有与本领域技术人员通常理解相同的含义。
本发明所涉及的一些化学基团表达：“C1-4直链或支链烷基”代表含有甲基、乙基、丙基、异丙基、C4烷基直链或带支链的烷烃基；“C1-4直链或支链卤代烷基”代表甲基、乙基、丙基、异丙基、C4烷基直链或带支链的烷烃基并且烷烃基被至少一个卤素原子取代；“O-C1-4”代表烷氧基；“S(＝O)2C”代表的是烷基磺酰基。
如上文式(I)所示的苯环上的取代基R1和R2通过一个单键链接到苯环的中心表示可以取代环上任一可取代位置上的氢原子。
一般而言，术语“取代”表示所给结构中的一个或多个氢原子被具体取代基所取代。除非其他方面表明，一个取代的基团可以有一个或多个取代基在基团各个可取代的位置进行取代。当所给出的结构式中不只有一个位置能被选自具体基团的一个或多个取代基所取代，那么取代基可以相同或不同地在各个位置取代。
在本发明的各部分，描述了连接取代基。当该结构清楚地需要链接基团时，针对该基团所列举的马库什变量应理解为连接基团。例如，如果该结构需要连接基团并且针对该变量的马库什基团定义列举了“烷基”，则应该理解，该“烷基”代表连接的亚烷基基团。
一般合成步骤
为了描述本发明，以下列出了实施例。但需要理解，本发明不限于这些实施例，只是提供实践本发明的方法。一般地，本发明的N-苄基咪酰胺衍生物可以通过本发明描述的方法制备得到，除非有进一步的说明，其中取代基的定义如式(I)所示。下面的反应方案和实施例用于进一步举例说明本发明的内容。
所属领域的技术人员将认识到，本发明所描述的化学反应可以用来合适的制备许多本发明的其他化合物，且用于制备本发明的N-苄基咪酰胺衍生物的其他方法都被认为是在本发明的范围之内。例如，根据本发明那些非例正的N-苄基咪酰胺衍生物的合成可以成功的被所述领域技术人员通过修饰方法完成，如适当的保护干扰基团，通过利用其他试剂或将反应条件做一些常规修改。另外，本发明所公开的反应或已知的反应条件也公认的适用于本发明的其他化合物的制备。
制备本发明的N-苄基咪酰胺衍生物的合成步骤如下面合成方案所示:
具体实施方式：
为了描述本发明，以下列出了实施例。但需要理解，本发明不限于这些实施例，只是提供实践本发明的方法。
实施例1 1-(2-氯-6-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15031)的制备
步骤1：1-(2-氯-6氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(9.2g，50mmol，1eq)、2-氯-6-氟苄氯(17.9g，100mmol，2eq)和碳酸钾(17.3g，125mmol，2.5eq)依次溶于70mL N,N-二甲基甲酰胺中，100℃搅拌反应15h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(2-氯-6氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-(2-氯-6-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(2-氯-6氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(2-氯-6-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)11.8g。总产率79.8％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.563(1H，s)，7.954(1H，s)，7.794(1H，s)，7.659(1H，s)，7.579(1H，s)，7.424-7.468(1H，m),7.370-7.386(1H，d)，7.229-7.268(1H，m)，5.826(2H，s)。
实施例2 1-(4-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15037)的制备
步骤1：1-(4-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(7.6g，41mmol，1eq)、对氯苄氯(13.2g，82mmol，2eq)和碳酸钾(14.2g，103mmol，2.5eq)依次溶于50mL N,N-二甲基甲酰胺中，90℃搅拌反应16h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(4-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-(4-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(4-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(4-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)5.0g。总产率44％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.931(1H，s)，7.6(1H，s)，7.505(1H，s)，7.301-7.318(2H，d)，7.135-7.152(2H，d)，5.708(2H，s)，5.578-5.603(2H，s)。
实施例3 1-(3-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15041)的制备
步骤1：1-(3-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(5.0g，27mmol，1eq)、3-氯苄溴(11.5g，56mmol，2eq)和碳酸钾(9.3g，67.5mmol，2.5eq)依次溶于50mL N,N-二甲基甲酰胺中，90℃搅拌反应10h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(3-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-(3-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(3-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(3-氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)5.3克。总产率71％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.641(1H，s)，8.138(1H，s)，8.009(1H，s)，7.821(1H，s)，7.556(1H，s)，7.331-7.369(2H，m)，7.240(1H，s)，7.094-7.108(1H，d)，5.713(2H，s)。
实施例4 1-(4-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15042)的制备
步骤1：1-(4-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(8.37g，45.5mmol，1eq)、对氟苄氯(13.1g，91mmol，2eq)和碳酸钾(18.5g，133.8mmol，2.5eq)依次溶于70mL N,N-二甲基甲酰胺中，90℃搅拌反应10h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(4-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-(4-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(4-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(4-氟苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)2.9克。总产率24.4％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.622(1H，s)，8.110(1H，s)，7.985(1H，s)，7.795(1H，s)，7.534(1H，s)，7.229-7.258(2H，m)，7.127-7.162(2H，m)，5.696(2H，s)。
实施例5 1-(4-硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15045)的制备
步骤1：1-(4-硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(6.0g，32.6mmol，1eq)、对硝基苄氯(11.2g，65.2mmol，2eq)和碳酸钾(11.3g，81.5mmol，2.5eq)依次溶于50mL N,N-二甲基甲酰胺中，120℃搅拌反应15h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(4-硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-(4-硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(4-硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(4-硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)4.8g。总产率50.5％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.664(1H，s)，8.161-8.195(3H，m)，8.041(1H，s)，7.847(1H，s)，7.526(1H，s)，7.329-7.347(2H，d)，5.839(2H，s)。
实施例6 1-(4-甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15046)的制备
步骤1：1-(4-甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(7.0g，38.0mmol，1eq)、对甲基苄氯(10.7g，76.0mmol，2eq)和碳酸钾(13.1g，95.0mmol，2.5eq)依次溶于50mL N,N-二甲基甲酰胺中，120℃搅拌反应15h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(4-甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-(4-甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(4-甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(4-甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)7.8克。总产率79％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.583(1H，s)，8.069(1H，s)，7.968(1H，s)，7.776(1H，s)，7.503(1H，s)，7.126-7.110(2H，d)，7.074-7.058(2H，d),5.671(2H，s)，2.254(3H，s)。
实施例7 1-(4-三氟甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15051)的制备
步骤1：1-(4-三氟甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(7.0g，38.0mmol，1eq)、对三氟甲基苄溴(18.2g，76.0mmol，2eq)和碳酸钾(13.1g，95.0mmol，2.5eq)依次溶于50mL N,N-二甲基甲酰胺中，120℃搅拌反应15h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(4-三氟甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2:1-(4-三氟甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(4-三氟甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(4-三氟甲基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)8.73克。总产率73％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.651(1H，s)，8.149(1H，s)，8.026(1H，s)，7.833(1H，s)，7.697-7.681(2H，d)，7.524(1H，s)，7.319-7.303(2H，d),5.808(2H，s)。
实施例8 1-(4-甲氧基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15053)的制备
步骤1：1-(4-甲氧基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(9.2g，50mmol，1eq)、对甲氧基苄氯(15.7g，100.0mmol，2eq)和碳酸钾(17.3g，125.0mmol，2.5eq)依次溶于70mL N,N-二甲基甲酰胺中，120℃搅拌反应15h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(4-甲氧基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-(4-甲氧基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(4-甲氧基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(4-甲氧基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)8.55克。总产率62％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.587(1H，s)，8.069(1H，s)，7.957(1H，s)，7.766(1H，s)，7.519(1H，s)，7.180-7.163(2H，d)，6.881-6.864(2H，d),5.640(2H，s)。
实施例9 1-(3，4-二氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15054)的制备
步骤1：1-(3，4-二氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(9.2g，50mmol，1eq)、3，4-二氯苄溴(24.0g，100.0mmol，2eq)和碳酸钾(17.3g，125.0mmol，2.5eq)依次溶于70mL N,N-二甲基甲酰胺中，110℃搅拌反应14h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(3，4-二氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤2：1-(3，4-二氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤1所得的产物1-(3，4-二氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(20mL×3)，55℃减压干燥，得产物(1-(3，4-二氯苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)11.8克。总产率75％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.653(1H，s)，8.146(1H，s)，8.014(1H，s)，7.827(1H，s)，7.595-7.569(2H，m)，7.473(1H，s)，7.131-7.111(1H，d),5.689(2H，s)。
实施例10 1-(3，5-二硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15056)的制备
步骤1：3，5-二硝基苄醇的制备
3，5-二硝基苯甲酸(12g，56.6mmol，1eq)溶于100ml四氢呋喃中，降温至0℃后加入硼氢化钠(4.3g，113.2mmol，2.0eq)，搅拌反应1h，缓慢滴加三氟化硼.乙醚(40.2g，283.0mmol，5eq)，逐渐升温至室温，搅拌反应过夜得浓稠反应物，缓慢倒入冷稀盐酸水溶液中，乙酸乙酯萃取(150mL×3)，合并有机层、饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、减压浓缩除得浸膏状粗产物，经柱层析(PE/EA＝1/1)分离纯化得产物(3，5-二硝基苄醇)9.4g，产率84.1％。1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)8.718(1H，s)，8.579(2H，s)，5.796(1H，m)，4.763(2H，d)。
步骤2：3，5-二硝基苄氯的制备
3，5-二硝基苄醇(2.4g,12.12mmol,1eq)溶于干燥50mL二氯甲烷中，降温至0℃，加入三乙胺(4.9g,48.2mmol,4eq),缓慢滴加氯化亚砜(2.9g,24.2mmol,2eq)，滴毕，逐渐升温至回流，反应3h，停止加热冷却至室温，滴加50mL水淬灭反应，分层。有机层用无水硫酸钠干燥、减压浓缩除去有机溶剂得粗产物，经硅胶柱层析(PE/EA＝4/3)得产物(3，5-二硝基苄氯)2.5g,产率95.3％。
步骤3：1-(3，5-二硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(1.28g，6.94mmol，1eq)、3，5-二硝基苄氯(3.0g，13.9mmol，2eq)和碳酸钾(2.4g，17.4mmol，2.5eq)依次溶于5mL N,N-二甲基甲酰胺中，120℃搅拌反应17h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入15mL水，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(10mL×3)和饱和食盐水洗涤(10mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体(1-(3，5-二硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤4：1-(3，5-二硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤3所得的产物1-(3，5-二硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约25ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得灰色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(10mL×3)，40℃减压干燥，得产物(1-(3，5-二硝基苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)1.7克。两步总产率75％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.727(1H，s)，8.748(1H，s)，8.517(2H，s)，8.287(1H，s)，8.062(1H，s)，7.871(1H，s)，7.665(1H，s),5.908(2H，s).
实施例11 (1-(4-(甲磺酰基)苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15150)的制备
步骤1：4-甲砜基苄醇的制备
对甲砜基苯甲酸(12g，60.3mmol，1eq)溶于100ml四氢呋喃中，降温至0℃后加入硼氢化钠(4.6g，120.6mmol，2.0eq)，搅拌反应1h，缓慢滴加三氟化硼.乙醚(42.8g，301.5mmol，5eq)，逐渐升温至室温，搅拌反应过夜得浓稠反应物，缓慢倒入冰水中，乙酸乙酯萃取(150mL×3)，合并有机层、饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、减压浓缩除得浸膏状粗产物，经柱层析(PE/EA＝1/1)分离纯化得产物(4-甲砜基苄醇)9.2g，产率81.9％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)7.888-7.905(2H，d)，7.543-7.560(2H，d)，4.806(2H，s)，3.035(3H，s)。
步骤2：4-甲砜基苄氯的制备
对甲砜基苄醇(11.2g,60.0mmol,1eq)溶于干燥的70mL二氯甲烷中，降温至0℃，加入三乙胺(24.3g,240.0mmol,4eq),缓慢滴加氯化亚砜(14.3g,120.0mmol,2eq)，滴毕，逐渐升温至回流，反应3h，停止加热冷却至室温，滴加50mL水淬灭反应，分层。有机层用无水硫酸钠干燥、减压浓缩除去有机溶剂得粗产物，经硅胶柱层析(PE/EA＝4/3)得产物(4-甲砜基苄氯)11.2g,产率91.3％。
步骤3：(1-(4-(甲磺酰基)苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(9.2g，50mmol，1eq)、对甲砜基苄氯(20.5g，100mmol，2eq)和碳酸钾(17.3g，125.0mmol，2.5eq)依次溶于50mL N,N-二甲基甲酰胺中，120℃搅拌反应20h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去有机溶剂得产物为无色透明液体((1-(4-(甲磺酰基)苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯)，直接用于下一步反应。
步骤4：(1-(4-(甲磺酰基)苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
步骤3所得的产物(1-(4-(甲磺酰基)苄基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯溶于约50ml氨水中，45℃搅拌反应过夜，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(10mL×3)，50℃减压干燥，得产物((1-(4-(甲磺酰基)苄基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)6.6g。最后两步总产率41％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.666(1H，s)，8.156(1H，s)，8.032(1H，s)，7.868-7.885(2H，d)，7.838(1H，s)，7.527(1H，s)，7.337-7.354(2H，d)，5.823(2H，s),3.178(3H，s)。
实施例12 1-(4-(4-氯苯氧基)苯基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺(15167)的制备
步骤1：4-(4-氯苯氧基)苯甲醛的制备
对氟苯甲醛(18.6g，150mmol，1eq)与对氯苯酚(19.3g，150mmol，1eq)及碳酸钾(51.8g，375mmol，2.5eq)溶于100mL N,N-二甲基甲酰胺中，70℃搅拌反应5小时，TLC监控反应至终点，冷却至室温，加入200mL水稀释，乙酸乙酯萃取(200mL×3)，合并有机层、饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、减压浓缩得浸膏状粗产物，硅胶柱层析分离(PE/EA＝4/1)得产物(4-(4-氯苯氧基)苯甲醛)，该产物直接进行下一步反应。
1H NMR(CDCl3，500MHz):δ(ppm)9.926(1H，s)，7.864-7.847(2H，d)，7.358-7.376(2H，d)，7.013-7.065(4H，m)。
步骤2：(4-(4-氯苯氧基)苯基)甲醇的制备
4-(4-氯苯氧基)苯甲醛(11.6g，50mmol，1eq)溶于100mL四氢呋喃中，降温至0℃，分批加入氢化铝锂(11.6g，150mmol，3eq)，逐渐升温至室温，搅拌反应4h，TLC监控反应至终点，加入10H2O.H2SO4淬灭反应，再加入200mL乙酸乙酯搅拌约半小时，抽滤除去不溶物，滤液100mL水洗3遍、饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、减压浓缩得产物((4-(4-氯苯氧基)苯基)甲醇)，直接进行下一步反应。
步骤3：1-氯-4-(4-(氯甲基)苯氧基)苯的制备
(4-(4-氯苯氧基)苯基)甲醇(12g，51.3mmol，1eq)溶于100mL二氯甲烷中，降温至0℃，加入三乙胺(20.8g,205.2mmol,4eq)，然后缓慢滴加氯化亚砜(12.2g,102.6mmol,2eq)，滴毕升温至室温，搅拌反应3小时，TLC监控反应至终点，加50mL水淬灭反应，反应液分层，有机层用水洗涤(50mL×3)、饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、减压浓缩得浸膏状产物(1-氯-4-(4-(氯甲基)苯氧基)苯)直接用于下一步反应。
步骤4：1-(4-(4-氯苯氧基)苯基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸甲酯的制备
游离的1H-咪唑-4，5-二甲酸二甲酯(9.2g，50mmol，1eq)、1-氯-4(4-(氯甲基)苯氧基)苯(20.5g，100mmol，2eq)和碳酸钾(17.3g，125.0mmol，2.5eq)依次溶于60mL N,N-二甲基甲酰胺中，120℃搅拌反应20h，TLC监控反应至终点。反应液冷却至室温，加入150mL水，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并乙酸乙酯层，依次水洗(100mL×3)和饱和食盐水洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析分离(PE/EA＝4/3)得产物(1-(4-(4-氯苯氧基)苯基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸甲酯)，直接用于下一步反应。
1H NMR(CDCl3，500MHz):δ(ppm)7.734(1H，s)，7.287-7.305(2H，d)，7.161-7.178(2H，d)，6.920-6.912(4H，m)，5.389(2H，s)，3.920(3H，s)，3.873(3H，s)。
步骤5：1-(4-(4-氯苯氧基)苯基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺的制备
1-(4-(4-氯苯氧基)苯基)-1H-咪唑-4，5-二甲酸甲酯(10g，25mmol，1eq)加入到60ml氨水中，50℃搅拌10小时，有白色固体生成，得白色混悬液，过滤，滤饼用水洗涤(10mL×3)，50℃减压干燥，得产物(1-(4-(4-氯苯氧基)苯基)-1H-咪唑-4，5-二酰胺)11.8g。最后两步反应总产率是63.7％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6):δ(ppm)10.663(1H，s)，8.130(1H，s)，8.026(1H，s)，7.834(1H，s)，7.831(1H，s)，7.400-7.589(2H，d)，7.229-7.252(2H，d)，6.982-7.016(4H，m)，5.707(2H，s)。
实施例13 N-苄基咪酰胺衍生物对硫酸粘杆菌素敏感大肠杆菌抑制活性的协同增效作用。
利用试管二倍稀释法测试硫酸粘杆菌素和N-苄基咪酰胺衍生物对硫酸粘杆菌素耐药大肠杆菌(对硫酸粘杆菌素耐药，MIC值大于4.0ppm)的体外最小抑制浓度(MIC)，同时测试在培养时培养液中分别含有100.0ppmN-苄基咪酰胺衍生物时硫酸粘杆菌素对相应菌株的体外最小抑制浓度(其是以N-苄基咪酰胺衍生物和硫酸粘杆菌素联用作为测试药物，测试时，N-苄基咪酰胺衍生物的浓度固定为100.0ppm，而硫酸粘杆菌素进行梯度稀释，其目的是测试在含有100.0ppmN-苄基咪酰胺衍生物时硫酸粘杆菌素对相应菌株的体外最小抑制浓度)。结果显示，所有试验菌株对硫酸粘杆菌素耐药而所有试验的N-苄基咪酰胺衍生物对耐药大肠杆菌无抑制活性(表1)；而在含有100.0ppmN-苄基咪酰胺衍生物的测试组硫酸粘杆菌素对相应试验菌株的最小抑制浓度均有不同程度的降低，降低50-100倍(表2)。
表1不同N-苄基咪酰胺衍生物对硫酸粘杆菌素耐药大肠杆菌的体外最小抑制浓度(MIC，ppm)
表2N-苄基咪酰胺衍生物存在下硫酸粘杆菌素对硫酸粘杆菌素耐药大肠杆菌的体外最小抑制浓度(MIC，ppm)
实施例14 N-苄基咪酰胺衍生物对硫酸粘杆菌素敏感大肠杆菌抑制活性的协同增效作用。
利用试管二倍稀释法测试硫酸粘杆菌素和N-苄基咪酰胺衍生物对大肠杆菌(对硫酸粘杆菌素敏感，MIC值小于4.0ppm)的体外最小抑制浓度(MIC)，同时测试在培养中分别含有100.0ppmN-苄基咪酰胺衍生物时硫酸粘杆菌素对相应菌株的体外最小抑制浓度(其是以N-苄基咪酰胺衍生物和硫酸粘杆菌素联用作为测试药物，测试时，N-苄基咪酰胺衍生物的浓度固定为100.0ppm，而硫酸粘杆菌素进行梯度稀释，其目的是测试在含有100.0ppmN-苄基咪酰胺衍生物时硫酸粘杆菌素对相应菌株的体外最小抑制浓度)。结果如表3所示，从表3可以看出，所有试验菌株对硫酸粘杆菌素敏感而所有试验用N-苄基咪酰胺衍生物对试验菌株无抑制活性。而含有100.0ppmN-苄基咪酰胺衍生物的测试组硫酸粘杆菌素对相应试验菌株的最小抑制浓度有不同程度的降低，约2-4倍(表4)。
表3 N-苄基咪酰胺衍生物对硫酸粘杆菌素敏感大肠杆菌的体外最小抑制浓度(MIC，ppm)
大肠杆菌3Y-9 大肠杆菌2S-19 大肠杆菌5W-7 大肠杆菌3B-24
硫酸粘杆菌素 2.0 2.0 1.0 2.0
15031 >800 >800 >800 >800
15037 >800 >800 >800 >800
15041 >800 >800 >800 >800
15042 >800 >800 >800 >800
15045 >800 >800 >800 >800
15046 >800 >800 >800 >800
15051 >800 >800 >800 >800
15053 >800 >800 >800 >800
15054 >800 >800 >800 >800
15056 >800 >800 >800 >800
15167 >800 >800 >800 >800
表4 N-苄基咪酰胺衍生物存在下硫酸粘杆菌素对硫酸粘杆菌素敏感大肠杆菌的体外最小抑制浓度(MIC，ppm)
实施例15不同浓度N-苄基咪酰胺衍生物(15037)对不同种类的硫酸粘杆菌素耐药菌株的耐药性逆转作用。
利用试管二倍稀释法测试硫酸粘杆菌素和N-苄基咪酰胺衍生物(15037)对不同种类硫酸粘杆菌素耐药的革兰氏阴性细菌(对硫酸粘杆菌素耐药，MIC值大于4.0ppm)的体外最小抑制浓度，同时测试在培养时培养液中分别含有不同浓度N-苄基咪酰胺衍生物(15037)时硫酸粘杆菌素对相应菌株的体外最小抑制浓度。结果显示，所有试验菌株对硫酸粘杆菌素均耐药；N-苄基咪酰胺衍生物(15037)对所有测试菌株无抑制活性；而含有N-苄基咪酰胺衍生物(15037)的测试组硫酸粘杆菌素对相应菌株的最小抑制浓度均有不同程度的降低，呈明显的剂量效应(表5)。
表5不同浓度的15037存在下硫酸粘杆菌素对不同种类细菌的体外最小抑制浓度(MIC，ppm)
实施例16 N-苄基咪酰胺衍生物与硫酸粘杆菌素在断奶仔猪料中的协同应用效果。
130头28日龄体重相近的杜长大三元杂瘦肉型断奶仔猪分成13组，每组10头。各组在不含抗生素的教槽料中添加硫酸粘杆菌素和/或不同种类的N-苄基咪酰胺衍生物，试验期间自由采食和饮水，统计10天内各试验组试验猪的增重、饲料报酬和腹泻率。结果显示(表6)，在断奶仔猪料中仅添加硫酸粘杆菌素不能有效降低试验猪的腹泻率，对增重和饲料报酬未见明显改善；而同时添加N-苄基咪酰胺衍生物和硫酸粘杆菌素的测试组可不同程度降低试验组的腹泻率并对生产性能有不同程度改善。
表6 N-苄基咪酰胺衍生物和硫酸粘杆菌素在断奶仔猪料中的协同应用效果
实施例17 N-苄基咪酰胺衍生物(15037)和硫酸粘杆菌素在断奶仔猪料中协同应用的效果。
120头28日龄体重相近的杜长大三元杂瘦肉型断奶仔猪分12组，每组10头。各组在不含抗生素的教槽料中添加硫酸粘杆菌素和/或N-苄基咪酰胺衍生物(15037)。试验期间自由采食和饮水，统计10天内各试验组试验猪的增重、饲料报酬和腹泻率。结果显示在断奶仔猪料中仅添加硫酸粘杆菌素或N-苄基咪酰胺衍生物(15037)均不能有效降低试验猪的腹泻率，对增重和饲料报酬未见明显改善；而添加硫酸粘杆菌素和N-苄基咪酰胺衍生物(15037)试验组(组10、11和12)可降低腹泻率，平均日增重和饲料报酬均显著改善(表7)。
表7 N-苄基咪酰胺衍生物(15037)和硫酸粘杆菌素在断奶仔猪料中的应用效果
实施例18 不同剂量N-苄基咪酰胺衍生物(15037)和硫酸粘杆菌素在断奶仔猪料中协同应用的效果。
90头28日龄体重相近的杜长大三元杂瘦肉型断奶仔猪分9组，每组10头。各组在不含抗生素的教槽料中添加硫酸粘杆菌素和/或不同剂量的N-苄基咪酰胺衍生物(15037)。试验期间自由采食和饮水，统计10天内各试验组试验猪的增重、饲料报酬和腹泻率。结果显示在断奶仔猪料中仅添加硫酸粘杆菌素或N-苄基咪酰胺衍生物(15037)均对试验猪的腹泻率，增重和饲料报酬改善有限。而同时添加硫酸粘杆菌素和N-苄基咪酰胺衍生物(15037)协同应用时，对腹泻率和生产性能均有明显改改善，且呈明显的剂量效应，随着N-苄基咪酰胺衍生物(15037)剂量的增加，效果越明显(表8)。
表8不同剂量的15037和硫酸粘杆菌素在断奶仔猪料中的协同应用效果
实施例19 N-苄基咪酰胺衍生物(15037)与硫酸粘杆菌素在鸡料中的联合应用效果。
800羽1日龄快大黄羽肉鸡随机分成4个试验组，每个试验组包含4个平行试验组，每个平行试验组为50羽，并分别在每组饲料中添加硫酸粘杆菌素或/和N-苄基咪酰胺衍生物(15037)。试验期笼养，自由采食和自由饮水，试验期共28天。试验结果显示，N-苄基咪酰胺衍生物(15037)与硫酸粘杆菌素对试验鸡的增重及饲料报酬表现出协同增效的效应(表9)。
表9 N-苄基咪酰胺衍生物(15037)与硫酸粘杆菌素在肉鸡料中的联合应用效果
实施例20 N-苄基咪酰胺衍生物(15037)与硫酸粘杆菌素在肉鸭料中的联合应用效果。
800羽1日龄樱桃谷肉鸭按表10随机分成4个试验组，每个试验组包含4个平行试验组，每个平行试验组为50羽，并分别在每组饲料中添加硫酸粘杆菌素或/和N-苄基咪酰胺衍生物(15037)。试验期笼养，自由采食和自由饮水。试验期共21天。试验结果显示，N-苄基咪酰胺衍生物(15037)与硫酸粘杆菌素对试验鸭的增重及饲料报酬表现出协同增效的效应(表10)。
表10 N-苄基咪酰胺衍生物(15037)与硫酸粘杆菌素在肉鸭料中的联合应用效果

Claims (12)

1.N-苄基咪酰胺衍生物用作多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用，其特征在于，所述的N-苄基咪酰胺衍生物的结构如式(Ⅰ)所示：
其中，R1和R2分别为H、卤素、NO2、S(＝O)2CH3、O-Ph、O-C1-8直链或支链烷基、C1-8直链或支链烷基、或、C1-8直链或支链的卤代烷基；
所述的卤素为F、Cl、Br或I；
所述的O-Ph中的苯基是指未被取代或被1，2，3，4个取代基取代的苯基，所述的取代基选自F、Cl、Br、I、C1-8直链或支链烷基。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的N-苄基咪酰胺衍生物，其R1为H，R2为卤素。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的N-苄基咪酰胺衍生物，其具有式(Ⅱ)所示的结构：
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的多粘菌素类抗生素为多粘菌素A、多粘菌素B、多粘菌素C、多粘菌素D或多粘菌素E。
5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述的N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用是用于制备抗多粘菌素类抗生素敏感菌或耐药菌的药物。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述N-苄基咪酰胺衍生物使用剂量为10-200ppm。
7.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述的N-苄基咪酰胺衍生物作为硫酸粘杆菌素协同增效剂的应用是用于制备动物生长促进剂。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的N-苄基咪酰胺衍生物在饲料中的添加剂量是10-500ppm。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的动物是畜禽。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的畜禽是各个生长阶段的鸡、鸭、鹅、鸽、鹌鹑、猪、牛、羊、马、兔、驴、鹿、狗、猫、狐、貂或貉。
11.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述的N-苄基咪酰胺衍生物作为多粘菌素类抗生素协同增效剂的应用是用于制备人用抗革兰氏阴性菌感染的药物。
12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述的抗革兰氏阴性菌感染的药物是通过口服方式、注射方式或外用方式给药的抗革兰氏阴性菌感染的药物。
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