发明内容
本发明实施例中提供了一种细胞块包埋机及包埋方法,以解决现有技术中的细胞块制备质量差的问题。
为了解决上述技术问题,本发明实施例公开了如下技术方案:
本发明实施例提供了一种细胞块包埋机,包括包埋组件和离心机,其中:
所述离心机包括离心机锅体、第一加热器和离心电机;所述离心机锅体的内表面包围成离心腔;所述离心机锅体的底面内壁上、沿所述离心机锅体的侧面内壁设置第一加热器;所述离心电机设置在离心机的底部、且离心电机的电机主轴穿过所述离心机锅体的底面伸入所述离心腔内;所述离心电机主轴的顶部固定设置有安装座,离心转盘固定安装在所述安装座上;
所述离心转盘包括多个周向均匀分布的转盘支座;每个转盘支座的侧壁上均设置有非贯通的固定槽,所述固定槽与离心转盘的中轴线存在倾角,且所述固定槽的槽口靠近电机主轴;
所述包埋组件包括包埋底座和离心试管;所述包埋底座上设置有第一连接部,所述离心试管的开口端与所述第一连接部可拆卸连接;所述离心试管的挂接端设置有第二连接部,所述第二连接部与所述固定槽相匹配,所述包埋组件通过第二连接部可滑动挂设在相邻转盘支座的相对侧面的2个固定槽上。
可选地,所述包埋底座包括盒体,所述盒体内设置有凹槽;所述盒体的一侧外侧壁上设置有楔形台,所述楔形台的顶部设置有第一卡槽;所述凹槽的底面上设置有相互垂直的加强筋,所述加强筋相交于凹槽底面的中心;在凹槽底壁上与所述第一卡槽相对的位置上设置第二卡槽,所述第二卡槽位于加强筋筋线上;所述第一连接部为圆台状结构,且所述第一连接部内部设置有贯穿圆台状结构的均匀空腔,所述第一连接部的底面中心与凹槽的中心重合;所述第一连接部的内径小于或等于离心试管开口端的外径。
可选地,所述第一连接部与所述离心试管开口端螺纹匹配连接。
可选地,所述包埋组件还包括与所述包埋底座相匹配的包埋盒盖,所述包埋盒盖的一个侧面上设置与第一卡槽相匹配的第一卡扣、另一个侧面上设置与第二卡槽相匹配的第二卡扣。
可选地,在所述固定槽的槽底位置处,沿固定支座的向外延伸方向水平设置第二加热器;相邻的转盘支座相对的两个第二加热器组成一个第二加热器组;每个所述第二加热器组相互独立控温。
可选地,所述转盘支座的每个侧壁上设置有多个相互平行的固定槽,相邻固定槽的槽底水平方向上的间距大于或等于离心试管的长度,而且所述固定槽的长度沿远离离心电机主轴方向逐渐增大。
可选地,所述第二连接部包括第一连接杆和第二连接杆;所述第一连接杆与第二连接杆的中轴线相互重合、且与离心试管的管体垂直;所述第一连接杆与第二连接杆的端部能够分别套设在相应的固定槽内。
可选地,所述第一连接杆与第二连接杆的长度不相等。
本发明实施例还提供一种包埋方法,该方法包括:
通过分析石蜡切片的染色及免疫组化确定细胞块包埋参数,其中,所述细胞块包埋参数包括细胞块包埋基质类型、基质浓度、基质包裹温度、离心机转速和离心温度;
组装包埋底座和离心试管,将含有细胞的混悬液加入该包埋组件中;
通过常规细胞离心,去除上清液;
在离心试管中加入基质,并将包埋底座和离心试管组成的包埋组件安装到离心机上;
在所述细胞块包埋参数中的离心机转速和离心温度条件下,离心机对细胞块和基质的混合液进行高温梯度离心;
将离心试管与包埋底座拆开,包埋底座盖上包埋盒盖,进行固定脱水包埋。
可选地,所述离心机对细胞块和基质的混合液进行高温梯度离心,包括:
设定第一加热器的加热温度,在第一加热温度下,对细胞块和基质的混合液进行离心;
设定各个第二加热器组的加热温度,在第二加热温度下,对细胞块和基质的混合液进行离心。
由以上技术方案可见,本发明实施例提供的一种细胞块包埋机及包埋方法,细胞块包埋机所述离心机包括离心机锅体、第一加热器和离心电机;所述离心机锅体的内表面包围成离心腔;所述离心机锅体的底面内壁上、沿所述离心机锅体的侧面内壁设置第一加热器;所述离心电机设置在离心机的底部、且离心电机的电机主轴穿过所述离心机锅体的底面伸入所述离心腔内;所述离心电机主轴的顶部固定设置有安装座,离心转盘固定安装在所述安装座上;所述离心转盘包括多个周向均匀分布的转盘支座;每个转盘支座的侧壁上均设置有非贯通的固定槽,所述固定槽与离心转盘的中轴线存在倾角,且所述固定槽的槽口靠近电机主轴。所述包埋组件包括包埋底座和离心试管;所述包埋底座上设置有第一连接部,所述离心试管的开口端与所述第一连接部可拆卸连接;所述离心试管的挂接端设置有第二连接部,所述第二连接部与所述固定槽相匹配,所述包埋组件通过第二连接部可滑动挂设在相邻转盘支座的相对侧面的2个固定槽上。在细胞块包埋过程中,通过离心机精确控温能够对细胞块进行多个温度梯度的离心操作,从而保证细胞块与基质的有效包裹,有效防止细胞丢失,进而提高细胞块包埋质量;而且,通过使用包埋底座和离心试管可拆卸的组合,能够一次实现细胞块的采集,进一步提高了细胞块包埋效率。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案,下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。
本发明实施例提供了一种细胞块包埋机,该细胞块包埋机包括包埋组件1和离心机2。
参见图1,为本发明实施例提供的一种包埋组件的结构示意图,如图1所示,所述包埋组件1包括包埋底座11和离心试管12。所述包埋底座11上设置有连接部117,所述离心试管的开口端121与所述连接部117可拆卸连接。
在本发明实施例中,所述离心试管12包括两端开口的管体122,所述管体122内设置有均有贯穿所述管体的中空空腔;所述离心试管开口端121可以理解为所述管体的任意一个端部,所述管体122的另一端可以理解为离心试管的挂接端;所述离心试管的挂接端上设置有第二连接部123;在一示例性实施例中,所述第二连接部123可以为管帽状结构,所述第二连接部123一次成型方式实现与管体122的固定连接,或者所述第二连接部123可以通过螺纹连接的方式与管体122实现可拆卸连接;所述第二连接部123的外壁上设置有第一连接杆124和第二连接杆125,在使用过程中,所述包埋底座11通过第一连接部117与离心试管12相连接,所述离心试管12进一步通过第二连接部123挂设在离心机上,从而使得离心机2对包埋组件1进行离心操作。而且,所述管体122上还设置有刻度线,方便用户在使用过程中进行计量。
参见图2,为本发明实施提供的一种包埋底座的结构示意图,如图2所示,所述包埋底座11包括盒体111,其中所述盒体111可以为长方形、正方形和圆形中的任意一种,在本发明实施例中不做限定;所述盒体111内设置有凹槽112,所述凹槽112的形状可以与盒体111的形状一致或不同,例如所述盒体111位长方形盒体,所述凹槽112可以设置为长方形凹槽或者圆形凹槽等。所述凹槽112的底面上设置有多个均匀分布的孔状结构;所述盒体111的一个外侧壁上设置有楔形台113,所述楔形台113的顶部设置有第一卡槽114;所述凹槽112的底面上设置有相互垂直的加强筋115,所述加强筋115相交于凹槽112底面的中心、用于提高所述包埋底座11的强度,提高耐用性;在凹槽112底壁上与所述第一卡槽114相对的位置上设置第二卡槽116,所述第二卡槽116位于加强筋筋线上;所述连接部117为圆台状结构,且所述连接部117内沿所述连接部117的中轴线设置有贯穿圆台状结构的均匀空腔,所述连接部117的底面中心与所述凹槽112的中心重合,所述加强筋115在具体实施时仅设置在所述连接部117外的正方形凹槽112内;所述连接部117的内径小于或等于离心试管开口端121的外径,或者所述连接部117的外径大于或等于离心试管开口端121的内径,这样在具体使用过程中,离心试管开口端121可以与连接部117过盈配合,进而实现离心试管12与包埋底座11的可拆卸连接。所述连接部117的底面与侧面构成半封闭空间,这样当离心试管12连接到连接部117上进行离心时,细胞块能够帖附在连接部117的底面上。
为了进一步加强离心试管12与包埋底座11连接的可靠性,以及离心试管12与包埋底座11连接的灵活性,在本发明实施例中,所述连接部117与所述离心试管开口端121螺纹匹配连接。在一示例性实施例中,所述连接部117的内壁上还设置有内螺纹,所述离心试管开口端121的外壁上还设置有外螺纹,或者,所述连接部117的外壁上设置有外螺纹,所述离心试管开口端121的内壁上设置有内螺纹,通过内螺纹和外螺纹的相互匹配,实现离心试管开口端121与连接部117的螺纹连接,进而实现离心试管12与包埋底座11的可拆卸连接。
参见图3,为本发明实施例提供的一种包埋盒盖的结构示意图,如图3所示,所述包埋盒盖13为盖状结构,所述包埋盒盖13的尺寸与所述包埋底座11的尺寸相匹配,以使所述包埋盒盖13能够覆盖所述包埋底座11,从而实现对包埋底座11的密封。所述包埋盒盖13的底面上沿所述包埋底座11的边缘设置有第一边框131,且所述第一边框131的尺寸与所述凹槽112的尺寸相匹配,在将包埋盒盖13扣合到包埋底座12时,使所述包埋底座11的内壁能够与所述第一边框131的外壁紧密接触;所述第一边框131内、所述包埋盒盖13的底面上设置有2个加强筋和多个均匀分布的孔状结构,所述加强筋相互垂直、且相交于所述包埋盒盖13的中心;所述包埋盒盖13的中心还设置有第二边框132,所述第二边框132为圆形边框,所述第二边框132的中心与所述包埋盒盖13的中心重合,所述第二边框132的内径大于或等于所述连接部117顶端的外径,这样将包埋盒盖13扣合到包埋底座12时,第二边框132能够对连接部117内的空腔实现密封;所述盒盖的一个侧面上设置与第一卡槽114相匹配的第一卡扣133、另一个侧面上设置与第二卡槽116相匹配的第二卡扣134,通过第一卡槽114和第一卡扣133,以及第二卡槽116和第二卡扣134的配合扣接,实现包埋盒盖13与包埋底座11的可拆卸连接,方便对存储在包埋底座11内的细胞块进行保存。
参见图4,为本发明实施例提供的一种离心机的结构示意图,如图4所示,所述离心机2包括离心机锅体21、第一加热器22和离心电机23;所述离心机锅体21的内表面包围成离心腔24;所述离心机锅体21的底面内壁上、沿所述离心机锅体21的侧面内壁设置第一加热器22;所述离心电机23设置在离心机2的底部、且离心电机23的电机主轴231穿过所述离心机锅体21的底面伸入所述离心腔24内;所述离心电机主轴231的顶部固定设置有安装座25,离心转盘26固定安装在所述安装座25上。在具体实施时,所述离心机锅体21可以为圆柱状锅体,所述第一加热器22可以为圆盘状加热器。
参加图5,为本发明实施例提供的一种离心转盘的结构示意图,同时参见图6,为本发明实施例提供的一种离心转盘局部结构示意图,所述离心转盘26包括多个沿离心转盘26周向均匀分布的转盘支座261;每个转盘支座261的侧壁上均设置有非贯通的固定槽262;所述固定槽262与离心转盘26的中轴线存在角度,且所述固定槽262的槽口靠近电机主轴231,通过设置倾斜的固定槽,离心机对包埋组件进行离心时,离心力的作用能够使得包埋组件始终处于固定槽的槽底,防止包埋组件滑脱,进而保证离心操作的顺利进行;所述包埋组件1通过第一连接杆124和第二连接杆125与相邻转盘支座相对侧面上的2个固定槽262连接,也可以非常方便地实现与所述离心转盘26的脱离。需要说明的是,所述固定槽262的槽口可以理解为沿离心电机主轴231的延伸方向,靠近转盘支座261上表面的端部,所述固定槽262的槽口可以理解为沿离心电机231的延伸方向,远离转盘支座261上表面的端部。
在一示例性实施例中,所述离心转盘26包括6个均匀分布的转盘支座261,所述转盘支座261为扇形结构的支座;所述离心转盘26上还设置有6个螺孔,通过螺栓与安装座25固定,并在离心电机主轴231的带动下转动。当然在具体实施时,所述转盘支座261的数量并不局限于上述实施例中的数量,本领域技术人员可以根据离心需求设置任意多个转盘支座261,在本发明实施例中不做限定。
在使用过程中,首先将离心试管12的开口端固定在包埋底座11的第一连接部117上,将离心试管12与包埋底座11组装起来;然后,第二连接部123中的第一连接杆124和第二连接杆125的端部分别套设在两个相邻的固定槽262内,其中所述两个相邻的固定槽262可以理解为相邻的转盘支座261相对的两个侧面上的固定槽262,这样,通过第二连接部123的第一连接杆124和第二连接杆125实现了包埋组件1与离心机2的可拆卸连接。而且,所述第一连接杆124与第二连接杆125的中轴线相互重合、且与离心试管12的管体122垂直;所述第一连接杆124与第二连接杆125的端部的间距等于相邻转盘支座261相对侧面上固定槽262的槽面间距;在本发明实施例中,所述第一连接杆124与第二连接杆125的长度可以相同,即第一连接杆124与第二连接杆125相对于离心试管12的中轴线对称设置。
参见图6,为本发明实施例提供的另一种离心机局部结构示意图,如图6所示,在所述转盘支座26的侧壁上、所述固定槽262的槽底位置处,沿固定支座261的向外延伸方向水平设置第二加热器27。相邻的转盘支座261相对的两个第二加热器27组成一个第二加热器组;每个所述第二加热器组相互独立控温,在具体实施时可以为每个第二加热器组设置相应的PLC温控单元,从而实现独立控温。在离心操作时,包埋组件1中的离心试管12会成水平状态,通过将第二加热器27设置在槽底位置处、且水平方向设置,则能够保证第二加热器27能够沿离心试管12的管体对其内部的细胞块和基质的混合液进行有效加热,进而精确控温。通过设置第二加热器27,以及所述第二加热器27组成的第二加热器组,在进行高温离心的过程中,能够进一步对相应的离心试管12和包埋底座11内的细胞块和基质的混合液进行加热,通过微调第二加热器组的温度,实现对温度的精确控制;而且,在具体实施时,由于不同的第二加热器组独立控温,可以在同一个离心机内,同时进行不同温度梯度的离心,从而进一步提高了细胞块包埋机的包埋质量以及包埋操作的灵活性。
在离心操作过程中,可能需要同时对多个细胞块进行离心,为了提高细胞块包埋机的实用性,在第一种实施情况下,参见图7,为本发明实施例提供的另一种转盘支座的结构示意图,在本发明实施例中,所述转盘支座261的每个侧壁上可以设置有多个相互平行的固定槽262,相邻固定槽的槽底水平方向上的间距大于或等于离心试管的长度,而且所述固定槽的长度沿远离离心电机主轴方向逐渐增大。如图7所示,在一示例性实施例中,所述转盘支座261的每个侧壁上设置有2个相互平行的固定槽262,即第一固定槽和第二固定槽;第一固定槽远离离心电机主轴231,第二固定槽靠近离心电机主轴231,第一固定槽的长度L1大于第二固定槽L2的长度;而且,第一固定槽与第二固定槽的槽底水平方向上的间距D大于离心试管12的长度;在第一固定槽的底部位置外侧沿水平方向设置有一个第二加热器,在第二固定槽的底部位置外侧沿水平方向设置有另一个第二加热器,其中固定槽的底部位置外侧,可以理解为穿过固定槽的槽底与离心电机主轴231的中轴线垂直的延长线上、且原理离心电机主轴231的位置。
在第二种实施情况下,在图7所示的实施例的基础上,在每个转盘支座261的侧壁上的固定槽262可以设置为相同长度,通过设置第一连接杆124和第二连接杆125为不同长度,实现多个包埋组件11的同时离心。例如可以设置第一连接杆124的长度大于第二连接杆125的长度,这样在同一对相邻的转盘支座261内,将同时离心的包埋组件11的第一连接杆124设置在不同的转盘支座261的侧壁上,可以实现包埋组件11在离心转盘26的周向上错开,保证多个包埋组件11的同时离心。而且,根据离心操作的需要,可以设置多个不同长度的第一连接杆124和第二连接杆125的组合,满足任意多个包埋组件11的同时离心。
这样,在同时安装多个包埋底座11以及相应的离心试管12时,各个包埋底座11和离心式管12可以相互交错、互不影响,既能够满足多个包埋组件同时离心,又能够有效节省空间。
由上述实施例的描述可见,本发明实施例提供的细胞块包埋机,包括包埋组件和离心机;其中,所述包埋组件包括包埋底座和离心试管;所述包埋底座上设置有连接部,所述离心试管开口端与所述连接部117可拆卸连接;所述离心机包括离心机锅体、第一加热器和离心电机;所述离心机锅体的内表面包围成离心腔;所述离心机锅体的底面内壁上、沿所述离心机锅体的侧面内壁设置第一加热器;所述离心电机设置在离心机的底部、且离心电机的电机主轴穿过所述离心机锅体的底面伸入所述离心腔内;所述离心电机主轴的顶部固定设置有安装座,离心转盘固定安装在所述安装座上;所述离心转盘包括多个沿离心转盘周向均匀分布的转盘支座;每个转盘支座的侧壁上均设置有非贯通的固定槽;所述固定槽与离心转盘的中轴线存在倾角,且所述固定槽的槽口靠近电机主轴;所述包埋组件包括包埋底座和离心试管;所述包埋底座上设置有第一连接部,所述离心试管的开口端与所述连接部117可拆卸连接;所述离心试管的挂接端设置有第二连接部,所述第二连接部与所述固定槽相匹配,所述包埋组件通过第二连接部可滑动挂设在相邻转盘支座的相对侧面的2个固定槽上。在细胞块包埋过程中,通过离心机精确控温能够对细胞块进行多个温度梯度的离心操作,从而保证细胞块与基质的有效包裹,有效防止细胞丢失,进而提高细胞块包埋质量;而且,通过使用包埋底座和离心试管可拆卸的组合,能够一次实现细胞块的采集,进一步提高了细胞块包埋效率。
与本发明提供的一种细胞块包埋机实施例相对应,本发明还提供了一种基于上述细胞块包埋机的细胞块包埋方法,该方法包括以下步骤:
步骤S101:通过分析石蜡切片的染色及免疫组化确定细胞块包埋参数,其中,所述细胞块包埋参数包括细胞块包埋基质类型、基质浓度、基质包裹温度、离心机转速和离心温度;在具体实施时,制备不同浓度的琼脂作为细胞基质,并将不同浓度的琼脂分别在不同的温度下加入上述细胞块中,并分别在高温梯度离心机中进行离心,比较加入琼脂基质前后离心的细胞块大小,探讨合适的离心温度等条件,保证细胞块能在琼脂基质中被有效聚集包裹并保持良好的形态;将包裹了琼脂基质的细胞块分离,进入后续的梯度酒精脱水及石蜡包埋程序对细胞蜡块进行石蜡切片,一方面进行常规染色,观察细胞形态,另一方面进行细胞组化,观察细胞组化结果,根据细胞形态及组化结果摸索最优的琼脂基质配方及高温梯度离心条件;
步骤S102:通过常规细胞离心,去除上清液;
步骤S103:组装包埋底座和离心试管,在离心试管中加入基质,并将包埋底座和离心试管组成的包埋组件安装到离心机上;
步骤S104:在所述细胞块包埋参数中的离心机转速和离心温度条件下,离心机对细胞块和基质的混合液进行高温梯度离心;在具体实施时,离心温度条件控制在20℃至70℃范围内;
步骤S105:将离心管与包埋底座拆开,包埋底座盖上盖子,进行后续的(固定)脱水包埋。
为了实现不同温度梯度的精确控温,在本发明实施例中,可选地,所述离心机对细胞块和基质的混合液进行高温梯度离心,包括:
步骤S1041:设定第一加热器的加热温度,在第一加热温度下,对细胞块和基质的混合液进行离心;这样实现细胞块和基质的混合液在第一加热温度下进行离心;
步骤S1042:设定各个第二加热器组的加热温度,在第二加热温度下,对细胞块和基质的混合液进行离心。当需要进行第二次离心时或者需要对离心温度进行调整时,可以使用第二加热器组加热,调整离心温度,从而在达到第二加热温度时,对细胞块和基质的混合液进行第二次离心。
当然,需要说明的是,在具体的离心过程中,上述高温梯度离心的过程仅是一示例性实施例,在具体实施时,可以进行任意多次、不同温度梯度的离心操作;而且,还可以在一次离心的过程中,通过调整不同第二加热器组的功率,实现多种细胞块多温度梯度的离心操作。
由上述实施例可见,本发明实施例提供的一种细胞块包埋方法,通过分析石蜡切片的染色及免疫组化确定细胞块包埋参数,其中,所述细胞块包埋参数包括细胞块包埋基质类型、基质浓度、基质包裹温度、离心机转速和离心温度;通过常规细胞离心,去除上清液;在离心试管中加入基质;在所述细胞块包埋参数中的离心机转速和离心温度条件下,离心机对细胞块和基质的混合液进行高温梯度离心;将离心后的被基质包裹住的细胞块分离,脱水包埋。在细胞块包埋过程中,通过离心机精确控温能够对细胞块进行多个温度梯度的离心操作,从而保证细胞块与基质的有效包裹,有效防止细胞丢失,进而提高细胞块包埋质量;而且,通过使用包埋底座和离心试管可拆卸的组合,能够一次实现细胞块的采集,进一步提高了细胞块包埋效率。
需要说明的是,在本文中,诸如“第一”和“第二”等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下,由语句“包括一个……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上所述仅是本发明的具体实施方式,使本领域技术人员能够理解或实现本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。