CN108303295A - 一种细胞块制备方法及容器 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种细胞块制备方法及容器，方法包括以下步骤：将琼脂胶体置入导热容器内；对装有琼脂胶体的导热容器加热，直至琼脂胶体变为熔融状态；将导热容器的上盖取下，将离心聚集后的细胞团加入至熔融状态下的琼脂胶体中后将上盖盖好；将导热容器置于离心机中离心，待细胞团在熔融状态下的琼脂胶体中聚集后，取出导热容器，并使其自然冷却；待导热容器内的琼脂胶体凝固后，将导热容器的上盖、下盖取下，将琼脂胶体捅出，并将琼脂胶体放置在包埋盒中用石蜡包埋。使用方法简单，处理快速，节约人力及时间；过程简便，人员操作熟练程度，环境因素等对结果影响较小，易于实现标准化操作；制得细胞块聚集效果好，干扰小，便于诊断。

Description

一种细胞块制备方法及容器

技术领域

本发明涉及细胞块制备技术领域，具体来说，涉及一种细胞块制备方法及容器。

背景技术

细胞块（cellblock):确切地说是组织学制片方法在细胞学标本中的应用，是将分散的细小组织、细胞团、细胞聚集成团，制得细胞块之后进行石蜡包埋切片。首先，该技术可以保留更多的组织学结构，其次，细胞块切片有助于免疫组化、基因检测等辅助检查在细胞学中的应用。目前正在病理科学界广泛开展及应用。

目前对于细胞块的制备，一般使用试剂固定等预处理后，使用胶体、琼脂包裹或脱脂棉包裹，之后使用石蜡制片。

因涉及的操作流程较多，在石蜡包埋前，预处理过程一般需要人工反复转移标本、静置、过滤等操作过程，较为复杂，耗时长；因此在实际的应用过程中，容易造成标本的遗失，且会占用技术人员的大量时间。

依照对细胞块制备方式一般为以下两个步骤：

1、标本的聚集：

标本中的细胞、组织，颗粒小，不易聚集。目前一般采用三种方式聚集细胞，过滤、离心、静置。

过滤：过滤后，在滤网上会有标本的残留，造成标本遗失，有缺陷；

离心：标本聚集在离心管底部，时间短，但须调整离心速率防止损坏细胞；

静置：通过自然沉降的方式，将标本聚集在试管底部，时间长。

2、标本的包裹：

细胞团或细小组织块，颗粒小，在滴加试剂、吸取试剂等过程中因液体流动分散，影响后期切片的制备，因此需要将标本进行包裹束缚，确保其在整个制片过程中，不会分散，应先制片效果。

目前一般采用蛋清、琼脂和脱脂棉纤维包裹三种方式。

蛋清：通过蛋清的粘附作用包裹细胞团，然后通过加入甲醛使得蛋清变性，凝固包裹标本；

琼脂：通过将琼脂溶融后，呈现液体性质，包裹细胞团，降低温度后，琼脂凝固成固体，包裹标本；

脱脂棉纤维：将脱脂后的棉纤维，直接包裹。

目前细胞块制备，以上两个过程，多数需要人工操作，先聚集然后加入试剂等，严格按照操作流程进行，因采用的技术方式不同，流程不同。 但均需大量的人员操作，流程烦杂，耗时长。

使用琼脂法制备时，一般的制备流程简述如下：

1）将标本离心或将标本置于试管中，静置24小时。弃去上清液；

2）加入甲醛试剂固定，固定2~12小时或离心，弃去上清液；

3）使用滤纸吸干剩余液体，将细胞团聚集；

4）将细胞团放置在容器中，使用熔融的琼脂覆盖细胞团或使用棉纤维包裹细胞团；

5）冷却后，将包裹的细胞团放置在包埋盒中，进行石蜡包埋。

现有的方法，需要单独溶解琼脂胶体，之后转移至容器中。再此期间，要保持琼脂温度，低温会导致琼脂液体凝固，因此需要操作快速、且涉及的物品需加热。

此外，现行的方法需要将标本聚集后，转移至某一容器中，再行进行包裹，期间因聚集过程的刮取、转移会有标本遗留在容器表面，不能全部包裹在胶体内部。

针对相关技术中的问题，目前尚未提出有效的解决方案。

发明内容

针对相关技术中的上述技术问题，本发明提出一种细胞块制备方法，可确保琼脂在转移操作过程中，保持熔融状态；减少了标本的聚集操作，减少了许多操作和等待的过程，更节约时间和人力。

为实现上述技术目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种细胞块制备方法，包括以下步骤：

S1将琼脂胶体置入具有可拆卸的上盖、下盖的导热容器内；

S2对装有琼脂胶体的所述导热容器加热，直至琼脂胶体变为熔融状态；

S3待熔融状态下的琼脂胶体温度降至50℃~65℃时，将所述导热容器的上盖取下，将离心聚集后的细胞团加入至熔融状态下的琼脂胶体中后将上盖盖好；

S4将所述导热容器置于离心机中离心，待细胞团在熔融状态下的琼脂胶体中聚集后，取出所述导热容器，并使其自然冷却；

S5待所述导热容器内的琼脂胶体凝固后，将所述导热容器的上盖、下盖取下，将琼脂胶体捅出，并将琼脂胶体放置在包埋盒中用石蜡包埋。

进一步地，所述导热容器包括管体，所述管体的上端螺纹连接所述上盖，所述管体的下端螺纹连接所述下盖。

进一步地，所述上盖顶部和所述下盖的底部均为半球形。

进一步地，所述导热容器、上盖和下盖的材质均为聚乙烯或聚丙烯。

进一步地，在S2中，通过水浴或金属浴设备加热所述导热容器。

本发明还提供了一种用于实施上述方法的细胞块制备容器，包括管体，所述管体的上端可拆卸地连接有上盖，所述管体的下端可拆卸地连接有下盖，所述管体、上盖和下盖均由导热材料制成。

进一步地，所述管体通过螺纹连接的方式可拆卸地连接所述上盖和下盖。

进一步地，所述上盖顶部和所述下盖的底部均为半球形。

进一步地，所述导热材料为聚乙烯或聚丙烯。

本发明的有益效果：使用方法简单，处理快速，节约人力及时间；过程简便，人员操作熟练程度，环境因素等对结果影响较小，易于实现标准化操作，便于业内实现统一；制得细胞块聚集效果好，干扰小，便于诊断。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是根据本发明实施例所述的细胞块制备容器的结构示意图。

图中：

1、管体；2、上盖；3、下盖。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

如图1所示，根据本发明实施例所述的一种细胞块制备方法，包括以下步骤：

S1将琼脂胶体置入具有可拆卸的上盖2、下盖3的导热容器内；

S2对装有琼脂胶体的所述导热容器加热，直至琼脂胶体变为熔融状态；

S3待熔融状态下的琼脂胶体温度降至50℃~65℃时，将所述导热容器的上盖2取下，将离心聚集后的细胞团加入至熔融状态下的琼脂胶体中后将上盖2盖好；

S4将所述导热容器置于离心机中离心，待细胞团在熔融状态下的琼脂胶体中聚集后，取出所述导热容器，并使其自然冷却；

S5待所述导热容器内的琼脂胶体凝固后，将所述导热容器的上盖2、下盖3取下，将琼脂胶体捅出，并将琼脂胶体放置在包埋盒中用石蜡包埋。

在本发明的一个具体实施例中，所述导热容器包括管体1，所述管体1的上端螺纹连接所述上盖2，所述管体1的下端螺纹连接所述下盖3。

在本发明的一个具体实施例中，所述上盖2顶部和所述下盖3的底部均为半球形。

在本发明的一个具体实施例中，所述导热容器、上盖2和下盖3的材质均为聚乙烯或聚丙烯。

在本发明的一个具体实施例中，在S2中，通过水浴或金属浴设备加热所述导热容器。

本发明还提供了一种用于实施上述方法的细胞块制备容器，包括管体1，所述管体1的上端可拆卸地连接有上盖2，所述管体1的下端可拆卸地连接有下盖3，所述管体1、上盖2和下盖3均由导热材料制成。

在本发明的一个具体实施例中，所述管体1通过螺纹连接的方式可拆卸地连接所述上盖2和下盖3。

在本发明的一个具体实施例中，所述上盖2顶部和所述下盖3的底部均为半球形。

在本发明的一个具体实施例中，所述导热材料为聚乙烯或聚丙烯。

为了方便理解本发明的上述技术方案，以下通过具体使用方式对本发明的上述技术方案进行详细说明。

本发明所述的可拆卸连接方式可采用卡接、插接等常规技术手段。

细胞块制备容器通过在原有的离心管的基础上，进行结构上的改进，使其达到新的功能。

细胞块制备容器（包括管体1、上盖2和下盖3）为塑料制品，其由聚乙烯或聚丙烯材质制得，细胞块制备容器内设置有琼脂胶体。使用时直接将细胞块制备容器放置在水浴或金属浴设备中直接加热，可将内含的琼脂胶体熔融，并且在短时间内防止琼脂胶体快速凝固；

可对细胞块制备容器直接加热后备用，且因琼脂胶体在细胞块制备容器内部，可以为液体状态的琼脂胶体提供一个相对封闭的环境，确保其在转移操作过程中，琼脂胶体可保持熔融状态。温度一般为45℃~50℃以上。

细胞块制备容器外形为圆柱状，顶部和底部为半球形，可以与金属浴、离心机等现有的试验设备配合使用。

细胞块制备容器由管体1、上盖2和下盖3构成，管体1通过螺纹连接上盖2和下盖3；通过旋转螺纹，可将上盖2和下盖3取下。

具体使用时：

将细胞块制备容器，直接放置在金属浴中加热，使得内含的琼脂胶体熔融备用；然后拧开上盖2，使用滴管或针管将离心聚集后的细胞团直接加入到琼脂胶体内，并拧上上盖2；然后将细胞块制备容器放入离心机中离心，取出细胞块制备容器后，自然冷却；最后将上盖2和下盖3拧开，将胶体捅出，放置在包埋盒中，石蜡包埋。

利用细胞块制备容器可通过将细胞团直接加入琼脂胶体中离心，通过离心力，使得细胞团直接在琼脂胶体中聚集，待琼脂胶体凝固后，自然完成包裹+聚集过程。与现有的操作方法相比，减少了细胞团的聚集操作，减少了许多操作和等待的过程，更节约时间和人力。

本发明因将细胞团直接加入琼脂胶体中，所有的细胞团均得到聚集，减少了细胞团遗失的可能，由其是对于标本量少的细胞团样本更重要。对比现有方法，更能提高标本的利用率，减少遗漏。

将细胞团加入琼脂胶体中离心，可以使得细胞团得到充分包裹，所有的细胞标本均在琼脂胶体内部聚集成团。现行的方法需要将标本聚集后，转移至某一容器中，再行进行包裹，期间因聚集过程的刮取、转移会有细胞团遗留在容器表面，不能全部包裹在琼脂胶体内部。

本发明通过塑料制品来将琼脂胶体装在封闭环境中，使得琼脂胶体不易凝结，且后续的操作均在细胞块制备容器中，直至琼脂胶体冷却凝固。不会因外部低温导致琼脂胶体非预期的凝结，对人员操作、环境的要求相对低。而现有技术需要尽快操作，琼脂胶体在与细胞团或容器接触时可能因为温度不均产生空腔，因此，人员操作熟练度、环境温度等均会影响后期效果，从而相对与现有技术而言，本发明更便于实现细胞块制备的标准化。

综上所述，借助于本发明的上述技术方案，使用方法简单，处理快速，节约人力及时间；过程简便，人员操作熟练程度，环境因素等对结果影响较小，易于实现标准化操作，便于业内实现统一；制得细胞块聚集效果好，干扰小，便于诊断。

以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种细胞块制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1将琼脂胶体置入具有可拆卸的上盖（2）、下盖（3）的导热容器内；

S2对装有琼脂胶体的所述导热容器加热，直至琼脂胶体变为熔融状态；

S3待熔融状态下的琼脂胶体温度降至50℃~65℃时，将所述导热容器的上盖（2）取下，将离心聚集后的细胞团加入至熔融状态下的琼脂胶体中后将上盖（2）盖好；

S4将所述导热容器置于离心机中离心，待细胞团在熔融状态下的琼脂胶体中聚集后，取出所述导热容器，并使其自然冷却；

S5待所述导热容器内的琼脂胶体凝固后，将所述导热容器的上盖（2）、下盖（3）取下，将琼脂胶体捅出，并将琼脂胶体放置在包埋盒中用石蜡包埋。

2.根据权利要求1所述的细胞块制备方法，其特征在于，所述导热容器包括管体（1），所述管体（1）的上端螺纹连接所述上盖（2），所述管体（1）的下端螺纹连接所述下盖（3）。

3.根据权利要求2所述的细胞块制备方法，其特征在于，所述上盖（2）顶部和所述下盖（3）的底部均为半球形。

4.根据权利要求1所述的细胞块制备方法，其特征在于，所述导热容器、上盖（2）和下盖（3）的材质均为聚乙烯或聚丙烯。

5.根据权利要求1所述的细胞块制备方法，其特征在于，在S2中，通过水浴或金属浴设备加热所述导热容器。

6.一种用于实施如权利要求1-5任一项所述方法的细胞块制备容器，其特征在于，包括管体（1），所述管体（1）的上端可拆卸地连接有上盖（2），所述管体（1）的下端可拆卸地连接有下盖（3），所述管体（1）、上盖（2）和下盖（3）均由导热材料制成。

7.根据权利要求6所述的细胞块制备容器，其特征在于，所述管体（1）通过螺纹连接的方式可拆卸地连接所述上盖（2）和下盖（3）。

8.根据权利要求6所述的细胞块制备容器，其特征在于，所述上盖（2）顶部和所述下盖（3）的底部均为半球形。

9.根据权利要求6所述的细胞块制备方法，其特征在于，所述导热材料为聚乙烯或聚丙烯。