CN106665344A - 葡萄的组培快繁方法 - Google Patents

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CN106665344A CN201510762618.6A CN201510762618A CN106665344A CN 106665344 A CN106665344 A CN 106665344A CN 201510762618 A CN201510762618 A CN 201510762618A CN 106665344 A CN106665344 A CN 106665344A
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Abstract

本发明公开了一种葡萄的组培快繁方法，包括：挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段；取得的茎段用流水冲洗20分钟，再将茎段依次于70～75％的酒精中浸泡30s、0.2～0.3％的升汞浸泡3min、0.3～0.5％次氯酸钠浸泡5min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s；将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段依次经分化培养、增殖培养、生根培养后，获得葡萄组培苗。本发明葡萄的组织培养方法简单、高效，污染率低。

Description

葡萄的组培快繁方法
技术领域
本发明涉及组织培养技术领域，尤其涉及一种葡萄的组培快繁方法。
背景技术
葡萄是广受人们欢迎的水果，可直接食用，还可以做成葡萄干、葡萄酒等。葡萄的繁殖是葡萄种植中非常关键的环节，目前，葡萄的繁殖方法主要是生物学的方法，包括扦插繁殖和嫁接繁殖。传统的繁殖方法周期非常的长，成活率也不理想。组织培养的方法能够大大缩短葡萄的繁殖周期，但是需要在无菌条件下进行，外植体的消毒是组织培养中的关键，目前，组织培养的污染率仍较高。
发明内容
发明目的：针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种葡萄的组培快繁方法，污染率低。
一种葡萄的组培快繁方法，包括：
1)挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段；
2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再将茎段依次于70～75％的酒精中浸泡30s、0.2～0.3％的升汞浸泡3min、0.3～0.5％次氯酸钠浸泡5min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s；
3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段依次经分化培养、增殖培养、生根培养后，获得葡萄组培苗。
所述分化培养的培养基的配方为MS+GA30.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
所述增殖培养的培养基的配方为MS+GA30.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
所述生根培养的培养基的配方为1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
葡萄的品种为“巨峰”。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明葡萄的组培快繁方法简单、高效，污染率低。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
实施例1
一种葡萄的组培快繁方法，具体步骤如下：
(1)于每年的3月份，挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段。
(2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再在超净工作台中进行消毒处理，消毒时，将茎段于70％的酒精中浸泡30s后，再用0.2％的升汞浸泡3min，最后用0.5％次氯酸钠浸泡5min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s。
(3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段接种在培养基(MS+GA30.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上，25℃光照培养，45天左右分化成2cm左右的小苗，再将小苗接种到增殖培养基(MS+GA30.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行增殖培养，温度为25℃，每天光照10个小时，50天后形成丛生苗。增殖系数为4.9。
(4)取增殖培养后的小苗，对根部进行修剪后接种到生根培养基(1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行生根培养，温度为25℃，一般15天左右生根，生根率可达95％。
茎段接种到培养基上25天统计污染率，经统计，采用本发明三步消毒后，污染率仅为2％。
实施例2
一种葡萄的组培快繁方法，具体步骤如下：
(1)于每年的3月份，挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段。
(2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再在超净工作台中进行消毒处理，消毒时，将茎段于75％的酒精中浸泡30s后，再用0.3％的升汞浸泡2min，最后用0.3％次氯酸钠浸泡8min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s。
(3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段接种在培养基(MS+GA30.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上，25℃光照培养，45天左右分化成2cm左右的小苗，再将小苗接种到增殖培养基(MS+GA30.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行增殖培养，温度为25℃，每天光照10个小时，50天后形成丛生苗。增殖系数为4.9。
(4)取增殖培养后的小苗，对根部进行修剪后接种到生根培养基(1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行生根培养，温度为25℃，一般15天左右生根，生根率可达95％。
茎段接种到培养基上25天统计污染率，经统计，采用本发明三步消毒后，污染率仅为1.4％。
对比例1
一种葡萄的组培快繁方法，具体步骤如下：
(1)于每年的3月份，挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段。
(2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再在超净工作台中进行消毒处理，消毒时，将茎段于75％的酒精中浸泡30s后，再置于0.2％的升汞中浸泡5min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s。
(3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段接种在培养基(MS+GA30.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上，25℃光照培养，，45天左右分化成2cm左右的小苗，再将小苗接种到增殖培养基(MS+GA30.3mg/L+6-BA0.6mg/L+IBA0.3mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行增殖培养，温度为25℃，每天光照10个小时，50天后形成丛生苗。增殖系数为5.3。
(4)取增殖培养后的小苗，对根部进行修剪后接种到生根培养基(1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行生根培养，温度为25℃，一般15天左右生根，生根率可达95％。
茎段接种到培养基上25天统计污染率，经统计，本发明的污染率为8％。

Claims (5)

1.一种葡萄的组培快繁方法，其特征在于，包括：
1)挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段；
2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再将茎段依次于70～75％的酒精中浸泡30s、0.2～0.3％的升汞浸泡3min、0.3～0.5％次氯酸钠浸泡5min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s；
3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段依次经分化培养、增殖培养、生根培养后，获得葡萄组培苗。
2.如权利要求1所述的葡萄的组培快繁方法，其特征在于，所述分化培养的培养基的配方为MS+GA3 0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
3.如权利要求1所述的葡萄的组培快繁方法，其特征在于，所述增殖培养的培养基的配方为MS+GA3 0.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
4.如权利要求1所述的葡萄的组培快繁方法，其特征在于，所述生根培养的培养基的配方为1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
5.如权利要求1所述的葡萄的组培快繁方法，其特征在于，葡萄的品种为“巨峰”。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108901442A (zh) * 2018-06-30 2018-11-30 贵州京源生态农业发展有限公司 一种预防黄精炭疽病的培育方法

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