CN106636214B - 一种银杏外种皮发酵液及其制备方法与应用 - Google Patents

一种银杏外种皮发酵液及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于生物发酵技术领域,具体涉及一种银杏外种皮发酵液及其制备方法与应用。一种银杏外种皮发酵液的制备方法,采用以下步骤:(1)银杏鲜果中加入EM菌液,搅拌均匀,保温发酵;(2)步骤(1)发酵结束后,捞出银杏果,收集发酵液1;(3)破碎步骤(2)所述银杏果的外种皮挤出果仁,收集银杏外种皮加入步骤(2)所述的发酵液1中进行磨浆,保温发酵,得银杏外种皮发酵液。本发明的制备方法操作简单、无臭气产生、无污水排出、易于工业化生产。本发明制备的银杏外种皮发酵液杀菌效果好,营养丰富、对环境无污染,可在药品或肥料中应用。

Description

一种银杏外种皮发酵液及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于生物发酵技术领域,具体涉及一种银杏外种皮发酵液及其制备方法与应用。
技术背景
银杏是地球上现存最古老的中生代孑遗植物之一,为种子、叶、材兼用树种,其种子也称银杏或白果。由于银杏叶、种子具有较高的实用和药用价值而受到国内外的重视,生产规模不断扩大。我国目前银杏种植面积广,年产白果量占世界总产量的90%以上,光银杏新鲜外种皮年产量在10万t以上。银杏的外种皮提取物对苹果炭疽病等11种植物病菌的抑制率达88%~100%。醇提取物对丝棉金尺蠖3天内防治率达100%,同时可防治叶螨、桃蚜、二化螟等害虫。据《民间兽医本草》记载,银杏制剂可治家畜劳伤吊鼻、肺痈咳喘、肺虚咳嗽、尿淋尿血、母畜白带等症。目前银杏去皮一般是用水浸泡后手工剥除,或采用棍棒、箩筐等工具捣烂,清洗,这种方法不仅劳动强度大,去皮效率低,且果核易破损,且果汁易腐蚀操作者接触皮肤的部位,对人体伤害大。
目前大部分的银杏果外种皮被剥除后露天堆放,在雨水浸渍下,其中所含的酚酸类有毒成分被水浸取而排入河沟,不但影响堆放场所周边环境,气味难闻,造成资源浪费,更重要的是对周围水域造成污染,毒死鱼虾,威胁到人畜饮用水的安全,已到了非解决不可的地步,如果对银杏外种皮不进行无害化处理,就谈不上银杏加工的产业化。因此,如何开展银杏外种皮资源的合理利用,治理环境,改善环境,是促进银杏加工进一步产业化工作中的一项迫切任务,而利用生物发酵技术处理和应用银杏外种皮的研究国内外尚未见系统研究和报道。
发明内容
为解决现有技术存在的不足,本发明提供了一种银杏外种皮发酵液的制备方法,该方法操作简单、无臭气产生、无污水排出、易于工业化生产。
本发明还提供了上述制备方法制备的银杏外种皮发酵液,该发酵液杀菌效果好,营养丰富、对环境无污染。
本发明还提供了上述银杏外种皮发酵液在药品或肥料中的应用。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种银杏外种皮发酵液的制备方法,采用以下步骤:
(1)在银杏鲜果中加入EM菌液,搅拌均匀,保温发酵;
(2)步骤(1)发酵结束后,捞出银杏果,收集发酵液1;
(3)破碎步骤(2)所述银杏果的外种皮挤出果仁,收集银杏外种皮加入步骤(2)所述的发酵液1中进行磨浆,保温发酵,得银杏外种皮发酵液。
优选地,步骤(1)所述银杏果和EM菌液的质量体积比为1g:(0.5-1.5)ml;其中所述EM菌液中的活菌数为80-120亿/ml。更优选地,所述银杏果和EM菌液的质量体积比为1g:1ml。
优选地,步骤(1)所述保温发酵的条件为:温度为30-40℃,发酵时间为2-24小时。
优选地,步骤(3)所述保温发酵的条件为:温度为30-40℃,发酵时间≥24小时。
优选地,所述EM菌液的培养基由以下质量百分比的组分组成:红糖2-3%、食用尿素0.5-1%、维生素K0.1-0.12%、半胱氨酸0.08-0.1%、锌0.08-0.12%、余量为水;其中所述的水为蒸馏水煮沸后冷却至23-25℃制备而成。
所述EM菌液的制备过程如下:将EM原露按1-5%的接种量接种到上述培养基中,搅拌均匀,保持温度35℃-37℃密封培养,22-24小时放气一次,当溶液pH值为3.0-5.0时,停止发酵,得EM菌液。
一种上述制备方法制备得到的银杏外种皮发酵液。
一种上述发酵液在农药中的应用,所述发酵液经离心,收集上清液,所述上清液单独或与其他药物复配在药品中应用。
一种上述发酵液在肥料中的应用,所述发酵液经离心,分离收集滤渣,所述滤渣单独或与其他肥料复配在肥料中应用。
EM菌,其英文名称为“Effective Miero-origanisms”,它是选自光合菌、放线菌、酵母菌、复合乳酸菌、芽孢杆菌等10多个属80多种微生物复合培养而成的活菌制剂,EM菌剂中各种微生物互相共生、互相作用,共同发展,发挥出多种功能,可以迅速促进动植物残留物等有机物质分解,抑制腐败菌和其它病菌的生长;在水生态环境中,EM菌剂能有效抑制腐败生物的生长以及某些病原菌的生长,使含氨物和硫化物等恶臭物质不易形成,并加速有机恶臭物质的分解,使水体溶氧系数大大提高,从而可有效地消除被污染水体的COD、氨氮、总磷,降解有机质。EM菌在工业、农业及医药行业都有着极高的使用价值,也得到了普遍的应用。EM菌的开发需求有着非常广泛的应用前景,但是现有生产EM菌的方法,在生产成本以及生产工艺上均有待改进之处,行业内对低成本且便于操作的EM菌规模化生产方法有着迫切的需求。由于EM菌剂产品大部分是液体状态,由此在运输方面也存在诸多不便,若能就地培养并使用将可节约大笔运输成本,也为EM 菌的推广使用提供了便利的条件。
有益效果
(1)采用生物发酵方法处理银杏外种皮,不仅操作简单、处理后的银杏外种皮容易去除、不易损伤银杏果,生产效率高,易于工业化大规模生产,而且生产过程中不产生废气、废水、废渣,有利于生态农业的发展,绿色环保,减少了环境污染。
(2)本发明采用生物发酵方法处理银杏外种皮,在容易得到银杏果的同时,还可得到银杏外种皮发酵液,该发酵液抑菌效率高,营养丰富,可在药品和肥料中得到广泛应用,使银杏外种皮变废为宝,具有明显的经济效益、环境效益和社会效益。
具体实施方式
结合实例对本发明作进一步的说明,并不对其内容进行现定。
接种量:接种量是指移入种子液的体积和接种后培养液体积的比例。
EM原露采购自江西天意生物集团。
实施例1
EM菌液的培养基由以下质量百分比的组分组成:红糖2%、食用尿素1%、维生素K0.1%、半胱氨酸0.1%、锌0.08%、余量为水;其中的水是蒸馏水煮沸后冷却至23-25℃制备而成。
EM菌液的制备过程如下:将EM原露以5%的接种量接种到上述培养基中,搅拌均匀,保持温度35℃-37℃密封培养,22-24小时放气一次,当溶液pH值为3.0时,停止发酵,制备得到活菌数为80-120亿/ml的EM菌液。
银杏外种皮发酵液的制备方法,采用以下步骤:
(1)称取成熟的银杏鲜果100kg,放入容器内,加入50L EM菌液,搅拌均匀,维持温度为30℃发酵24小时,每隔12小时进行一次翻料;
(2)步骤(1)发酵结束后,捞出银杏果,收集发酵液1;
(3)破碎步骤(2)所述银杏果的外种皮挤出果仁,收集银杏外种皮加入步骤(2)所述的发酵液1中进行磨浆,维持温度为30℃发酵7天,得银杏外种皮发酵液;其中发酵过程中每隔12小时进行一次搅拌。
实施例2
EM菌液的培养基由以下质量百分比的组分组成:红糖3%、食用尿素0.5%、维生素k0.12%、半胱氨酸0.08%、锌0.12%、余量为水;其中所述的水为蒸馏水煮沸后冷却至23-25℃制备而成。
所述EM菌液的制备过程如下:将EM原露以1%的接种量接种到上述培养基中,搅拌均匀,保持温度35℃-37℃密封培养,22-24小时放气一次,当溶液pH值为5.0时,停止发酵,制备得到活菌数为80-120亿/ml的EM菌液。
(1)称取成熟的银杏鲜果100kg,放入容器内,加入150L EM菌液,搅拌均匀,维持温度为40℃发酵2小时;
(2)步骤(1)发酵结束后,捞出银杏果,收集发酵液1;
(3)破碎步骤(2)所述银杏果的外种皮挤出果仁,收集银杏外种皮加入步骤(2)所述的发酵液1中进行磨浆,维持温度为40℃发酵24小时,得银杏外种皮发酵液;其中发酵过程中每隔12小时进行一次搅拌。
实施例3
EM菌液的培养基由以下质量百分比的组分组成:红糖2.5%、食用尿素0.8%、维生素K0.12%、半胱氨酸0.08%、锌0.12%、余量为水;其中所述的水为蒸馏水煮沸后冷却至23-25℃制备而成。
所述EM菌液的制备过程如下:将EM原露以3%的接种量接种到上述培养基中,搅拌均匀,保持温度35℃-37℃密封培养,22-24小时放气一次,当溶液pH值为4.0时,停止发酵,制备得到活菌数为100-120/ml的EM菌液。
(1)称取成熟的银杏鲜果100kg,放入容器内,加入100L EM菌液,搅拌均匀,维持温度为35℃发酵12小时;
(2)步骤(1)发酵结束后,捞出银杏果,收集发酵液1;
(3)破碎步骤(2)所述银杏果的外种皮挤出果仁,收集银杏外种皮加入步骤(2)所述的发酵液1中进行磨浆,维持温度为35℃发酵3天,得银杏外种皮发酵液;其中发酵过程中每隔12小时进行一次搅拌。
实施例4
EM菌液的培养基由以下质量百分比的组分组成:红糖3%、、维生素k0.15%、半胱氨酸0.06%、余量为水;其中所述的水为蒸馏水煮沸后冷却至23-25℃制备而成。
所述EM菌液的制备过程如下:将EM原露以6%的接种量接种到上述培养基中,搅拌均匀,保持温度35℃-37℃密封培养,22-24小时放气一次,当溶液pH值为5.0时,停止发酵,制备得到活菌数为80-100亿/ml的EM菌液。
(1)称取成熟的银杏鲜果100kg,放入容器内,加入100L EM菌液,搅拌均匀,维持温度为40℃发酵2小时;
(2)步骤(1)发酵结束后,捞出银杏果,收集发酵液1;
(3)破碎步骤(2)所述银杏果的外种皮挤出果仁,收集银杏外种皮加入步骤(2)所述的发酵液1中进行磨浆,维持温度为48℃发酵48小时,得银杏外种皮发酵液;其中发酵过程中每隔12小时进行一次搅拌。
对上述实施例中制备的发酵液进行离心处理,转速为3000r/min,分别收集上清液和滤渣,上清液中的银杏酚酸具有很强的生物毒性,可用于制造生物农药,经检测,上述各实施例制备的发酵液中银杏酚酸的含量见下表1;滤渣中含有大量的营养物质,可用于制造肥料,结果如表1所示:
表1
Figure DEST_PATH_IMAGE002
实施例5
将实施例1制备的银杏外种皮发酵液和乳化剂(30wt%烷基酚聚氧乙烯醚水溶液)、丙酮以体积比4:4:2配制100ml,加水稀释500倍,喷洒10m2竹柳林,柳蓝叶甲死亡率88.2%。
将实施例1制备的发酵液过滤后的发酵液残渣干燥后粉碎至粒度为120目,用于配制叶面肥,该叶面肥包括以下重量比的组分:硼酸10g、碳酸钾15g、ε-聚赖氨酸5g、腐殖酸5g、己酸二乙氨基乙醇脂0.1 g、水50g、铜0.2g、铁0.2g、锰0.2g、钼0.2g和乙二胺四乙酸二钠0.1g和发酵液残渣14g,将该叶面肥料中各成分按重量混合搅拌转200-300r/min,75-80℃反应30min即得到该叶面肥;使用该叶面肥料进行黄瓜种植,增产25.2%,虫害率降低19.6%。
实施例6
将实施例3制备的银杏种皮发酵液和乳化剂(30wt%烷基酚聚氧乙烯醚水溶液)、丙酮以体积比5:4:1配制100ml,加水稀释500倍,喷洒10m2竹柳林,柳蓝叶甲死亡率91.2%。
将实施例3制备的发酵液过滤后的发酵液残渣干燥后粉碎至粒度为120目,用于配制叶面肥,该叶面肥包括以下重量比的组分:硼酸10g、碳酸钾15g、ε-聚赖氨酸5g、腐殖酸5g、己酸二乙氨基乙醇脂0.1 g、水50g、铜0.2g、铁0.2g、锰0.2g、钼0.2g和乙二胺四乙酸二钠0.1g和发酵液残渣14g,将该叶面肥料中各成分按重量混合搅拌转200-300r/min,75-80℃反应30min即得到该叶面肥;使用该叶面肥料进行黄瓜种植,增产27.4%,虫害率降低21.3%。
除上述应用外,银杏外种皮发酵液离心制备的上清液还可以单独或与其他肥料复配制备生态冲施肥,该冲施肥可应用于韭菜、大蒜等农作物的种植中,提高个农作物产量的同时可有效根除根蛆等害虫。
银杏外种皮发酵液离心制备的滤渣干燥粉碎后还可用于制备粉末状、或颗粒状有机、无机生态肥,应用于各种农作物中,在提高农作物产量的同时,可有效抵抗重茬病。

Claims (6)

1.一种银杏外种皮发酵液的制备方法,其特征在于,采用以下步骤:(1)在银杏鲜果中加入EM菌液,搅拌均匀,保温发酵;
(2)步骤(1)发酵结束后,捞出银杏果,收集发酵液1;
(3)破碎步骤(2)所述银杏果的外种皮挤出果仁,收集银杏外种皮加入步骤(2)所述的发酵液1中进行磨浆,保温发酵,得银杏外种皮发酵液;
步骤(1)所述银杏果和EM菌液的质量体积比为1g:(0.5-1.5)ml;其中所述EM菌液中的活菌数为80-120亿/ml;
步骤(1)所述保温发酵的条件为:温度为30-40℃,发酵时间为2-24小时;
所述EM菌液的培养基由以下质量百分比的组分组成:红糖2-3%、食用尿素0.5-1%、维生素K0.1-0.12%、半胱氨酸0.08-0.1%、锌0.08-0.12%、余量为水;其中所述的水为蒸馏水煮沸后冷却至23-25℃制备而成;
所述EM菌液的制备过程如下:将EM原露按1-5%的接种量接种到上述培养基中,搅拌均匀,保持温度35℃-37℃密封培养,22-24小时放气一次,当溶液pH值为3.0-5.0时,停止发酵,得EM菌液。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述银杏果和EM菌液的质量体积比为1g:1ml。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)所述保温发酵的条件为:温度为30-40℃,发酵时间≥24小时。
4.一种权利要求1-3任一项所述的制备方法制备得到的银杏外种皮发酵液。
5.一种权利要求4所述的发酵液在防治竹柳林的柳蓝叶甲中 的应用。
6.一种权利要求4所述的发酵液作为黄瓜的叶面肥的应用。
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A simple HPLC-UVmethod for the assay of ginkgolic acids in Ginkgo biloba extracts;N. Fuzzati 等;《Fitoterapia》;20030430;第74卷(第3期);第247-256页 *
Ginkgolic acids induce neuronal death and activate protein phosphatase type-2C;Barbara Ahlemeyer 等;《European Journal of Pharmacology》;20011026;第430卷(第1期);第1-7页 *

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