CN106622173A - Dna免疫吸附剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种DNA免疫吸附剂,其包括碳化树脂载体和P(HEMA‑b‑GMA)聚合物膜层,DNA通过物理包埋作用以及与GMA的环氧基团发生开环反应而固载于碳化树脂载体表面。P(HEMA‑b‑GMA)中的GMA可以和DNA分子发生开环反应将DNA化学固载在膜层上,可防止DNA脱落,提高吸附剂的吸附性能。此外,还提供一种DNA免疫吸附剂的制备方法。
Description
技术领域
本发明涉及血液净化领域,具体涉及碳化树脂DNA免疫吸附剂的制备方法。
背景技术
系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,以下简称SLE)是一种常见的累及多系统多器官的自身免疫性疾病。由于患者机体免疫调节障碍及自身免疫耐受状态被打破,产生多种针对自身组织的抗体,导致组织和器官的损伤,这些抗体主要是抗Sm抗体、抗核抗体以及抗DNA抗体。其中抗DNA抗体可分为抗单链DNA抗体(抗ss-DNA抗体)和抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)。
根据国内外临床及基础研究表明,抗ds-DNA抗体的滴度与疾病严重程度及活动性呈正相关。最近几年,激素及免疫抑制剂的应用使SLE患者的愈后效果得到明显改善,但依旧存在很多患者药物疗效不显著的现象,过度的免疫抑制治疗所引起的感染是引起SLE患者死亡的主要原因。另外,多方面研究证实,抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)与DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底膜沉积,或ds-DNA抗体直接作用于肾小球抗原,从而造成SLE患者的肾损伤。
使用DNA免疫吸附(IA)对患者进行血液灌流,是近二、三十年发展起来的新型疗法。Jones,Frank R(EP0272792A1,1987)对这种方法作了详细说明。DNA免疫吸附剂的吸附作用是依靠DNA对致病性抗ds-DNA抗体的特异识别作用,清除患者血液中的致病物质,缓解病情,改善患者的免疫功能,从而逐渐恢复健康。
美国的TermanDS等人(Lancet,1979,2(8147):824-7)首次使用活性炭为载体材料,采用火棉胶包膜固定DNA,得到DNA免疫吸附剂用于血液灌流治疗一名重度SLE患者,使患者生命延长,从此开辟了DNA吸附剂治疗SLE的先河。使用火棉胶包膜,使DNA免疫吸附剂的安全有效性得到了保证,但吸附率仅为50%左右。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术的缺陷,提供一种吸附性能更好的DNA免疫吸附剂。
为解决上述技术问题,本发明提供的技术方案为:DNA免疫吸附剂,包括碳化树脂载体以及交联P(HEMA-b-GMA)膜层,DNA通过物理包埋作用以及与GMA的环氧基团发生开环反应而固载于碳化树脂表面。
P(HEMA-b-GMA)化学名称为聚(甲基丙烯酸羟乙酯-b-甲基丙烯酸缩水甘油酯),交联P(HEMA-b-GMA)中的GMA可以和DNA分子发生开环反应将DNA化学固载在膜层上,可防止DNA脱落,提高吸附剂的吸附性能。
本发明要解决的另一技术问题是提供一种制备DNA免疫吸附剂的方法。
为解决上述技术问题,本发明提供的技术方案为:DNA免疫吸附剂的制备方法,将碳化树脂载体与包膜溶液混合,然后搅拌、过滤、干燥、冷却,得到DNA免疫吸附剂;其中,包膜溶液与碳化树脂的体积比为(3-5):1;包膜溶液中含有DNA和交联P(HEMA-b-GMA)。
包膜溶液中含有DNA和交联P(HEMA-b-GMA)。在包膜后的后处理过程中,DNA会与交联P(HEMA-b-GMA)侧链中的GMA发生开环反应,使DNA通过化学作用固载在膜层上,可防止DNA脱落,有效提高吸附剂的吸附性能。另外,P(HEMA-b-GMA)中的GMA与HEMA中的羟基可发生开环交联反应,从而降低P(HEMA-b-GMA)的溶解性能,增强膜的稳定性,进而增加DNA分子在膜层内部的物理包埋作用。优选的,包膜溶液中含有DNA的浓度为0.17-0.4mg/ml,P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.4%-0.8%。
较好的方案为交联P(HEMA-b-GMA)中GMA的含量范围为1%-5%。当GMA在聚合物中的含量在1%-5%时,形成的P(HEMA-b-GMA)/DNA膜层溶胀性能不明显,部分DNA与GMA发生化学键合作用,DNA几乎没有脱落,吸附剂的吸附率均可达到75%以上,吸附性能好。
较好的方案为所述包膜溶液通过以下方法制得:将DNA原液与P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液按1:(4-5)的体积比混合,然后搅拌或振荡至DNA完全溶解,得到所述包膜溶液,DNA原液中DNA的浓度为1-2mg/ml,P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%-1.0%。
还好的方案是干燥温度为70℃-85℃,干燥时间为1.5-3小时。
GMA的开环反应需要在加热条件下进行,但DNA在加热条件下会发生变性导致DNA双链双螺旋解开,DNA能耐受的最高温度为85℃,故优选的干燥温度为70℃-85℃,干燥1.5-3小时。更优选的,干燥时间为2小时。
为解决上述技术问题,本发明提供的另一技术方案为DNA免疫吸附剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:将DNA原液与P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液按1:(4-5)的体积比混合,搅拌或振荡至DNA完全溶解,得到包膜溶液;
步骤二:量取一定体积的干燥碳化树脂,倒入所述包膜溶液中,搅拌、过滤、干燥、冷却,得到所述DNA免疫吸附剂;
其中,
DNA原液中DNA的浓度为1-2mg/ml,P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%-1.0%;
包膜溶液与碳化树脂的体积比为(3-5):1。
包膜溶液中含有DNA和交联P(HEMA-b-GMA)。在包膜后的后处理过程中,DNA会与P(HEMA-b-GMA)侧链中的GMA发生开环反应,使DNA通过化学作用固载在膜层上,可防止DNA脱落,有效提高吸附剂的吸附性能。另外,P(HEMA-b-GMA)中的GMA与HEMA中的羟基可发生开环交联反应,从而降低P(HEMA-b-GMA)的溶解性能,增强膜的稳定性,进而增加DNA分子在膜层内部的物理包埋作用。
较好的方案为交联P(HEMA-b-GMA)中GMA的含量范围为1%-5%。当GMA在聚合物中的含量在1%-5%时,形成的P(HEMA-b-GMA)/DNA膜层溶胀性能不明显,部分DNA与GMA发生化学键合作用,DNA几乎没有脱落,吸附剂的吸附率均可达到75%以上,吸附性能好。
还好的方案是干燥温度为70℃-85℃,干燥时间为1.5-3小时。
GMA的开环反应需要在加热条件下进行,但DNA在加热条件下会发生变性导致DNA双链双螺旋解开,由于DNA能耐受的最高温度为85℃,故优选的干燥温度为70℃-85℃,干燥1.5-3小时。更优选的,干燥时间为2小时。
本发明DNA免疫吸附剂的载体为碳化树脂,但对碳化树脂的选择没有严格的限制,可以通过商业途径购买,可以通过任何公知的方法制备,亦可以通过以下方法制得:
以苯乙烯和二乙烯苯为单体,二乙烯苯占混合单体总质量的0.5%,以三倍于单体(重量比)的甲苯为致孔剂,以过氧化苯甲酰为引发剂,用量为混合单体总质量的1%,以1%明胶水溶液为分散介质,进行悬浮聚合,在80℃下反应5小时,获得大孔树脂;
将上述制备的树脂放入电阻炉中,在惰性气体保护下,在300℃的温度下烧灼10小时,然后升温至800℃,即获得碳化树脂。
本发明对DNA原液亦没有严格的要求,可通过公知技术手段制备,如通过以下的方法制备:
将高纯度小牛胸腺DNA(DNA含量85%以上)溶解于0.2mol/L Tris-HCL(pH=7.9)缓冲溶液中,配制DNA浓度为1-2mg/ml的DNA原液,备用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步说明。
实施例1制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为0.5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为2mg/ml的DNA原液10ml加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即制得均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min,过滤后在70℃下烘干2小时,然后冷却,即得DNA免疫吸附剂。
实施例2制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为1.0%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为2mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干1.5小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例3制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为2.5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为2mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例4制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为2mg/ml的DNA原液10ml,加入到40ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干3小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例5制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为7.5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为2mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例6制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液溶液,备用。
取浓度为1.5mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为187.5ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例7制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入到45ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为250ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干3小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例8制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.25%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为2mg/ml的DNA原液10ml,加入50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例9制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.75%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入40ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例10制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为1%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干2.5小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例11制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为1.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在70℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例12制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在60℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例13制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在75℃下烘干1.5小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例14制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在80℃下烘干1.5小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例15制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入到50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中,搅拌或振荡至DNA完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在85℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
实施例16制备DNA免疫吸附剂
步骤一 均相DNA包膜溶液的配制
将GMA含量为5%的交联P(HEMA-b-GMA)溶于无水乙醇中,配制交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%的P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,备用。
取浓度为1mg/ml的DNA原液10ml,加入50ml P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液,搅拌或振荡至完全溶解,即为均相DNA包膜溶液。
步骤二 吸附剂包膜
量取50ml干燥碳化树脂,倒入到体积为150ml的包膜溶液中,搅拌10min过滤后在90℃下烘干2小时后冷却,即为包膜吸附剂。
性能测试:
取实施例1至实施例16制备的DNA免疫吸附剂样品各2ml,分别加入至20ml SLE患者血浆中,于37℃下震荡吸附2小时,取吸附前后的SLE患者血浆检测抗ds-DNA抗体浓度。检测方法为酶联免疫吸附法,试剂盒为上海科新生产,仪器为深圳爱康Uranus AE120。
DNA免疫吸附剂样品制备方式汇总如下表1所示,性能检测结果如下表2所示:
表1 DNA免疫吸附剂样品制备方式汇总表
表2 吸附性能检测结果
根据表2的数据,我们可以得出:
(1)从实施例1-16的结果来看,本发明的DNA免疫吸附剂的吸附率均在65%以上。
(2)从实施例1-5的结果来看,当GMA在聚合物中的含量在1%-5%时,DNA免疫吸附剂的吸附性能最好,均在75%以上。这是因为形成的P(HEMA-b-GMA)/DNA膜层溶胀性能不明显,部分DNA与GMA发生化学键合作用,DNA几乎没有脱落。
(3)对比实施例4、6和7,包膜溶液与碳化树脂体积间优选的比例为(3-5):1。当包膜溶液与碳化树脂比例较低时,吸附剂的吸附性能较低,随着包膜溶液的增加,吸附剂的吸附性能有一定增加,当体积比达到5时,吸附剂的吸附性能已能达到较高水平。
对比实施例4和8-11实施例的结果可知,在P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.25%时吸附剂的吸附性能较低(72.5%),随着P(HEMA-b-GMA)质量浓度的增加吸附剂的吸附性能有很大程度提升均达到了80%以上,当P(HEMA-b-GMA)质量浓度为1.5%时吸附剂的吸附性能再次降低(74.9%),因此最优的P(HEMA-b-GMA)质量浓度为0.5-1%。
(4)对比实施例4和12-16实施例的结果可知,干燥温度对DNA免疫吸附剂的性能有一定影响,在温度为60℃时吸附剂的性能仅为73.1%,随着温度的提高吸附剂的性能有很大程度的提升,在温度为90℃时,吸附剂的性能再次下降,这与高温导致DNA变性有关,因此最优的DNA接枝温度为70-85℃。
总之,本发明提供了DNA固载在碳化树脂表面形成对ds-DNA有特异性吸附的吸附剂及其制备方法。该免疫吸附剂聚合物膜层通过物理包埋和化学键合作用将DNA固载在碳化树脂表面,提高了DNA的固载量,有效防止了DNA的脱落,从而大幅度提高了该免疫吸附剂的吸附性能。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述,但其只是作为范例,本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言,任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此,在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改,都应涵盖在本发明的范围内。
Claims (8)
1.DNA免疫吸附剂,包括碳化树脂载体,其特征在于:
所述DNA免疫吸附剂还包括交联P(HEMA-b-GMA)膜层,DNA通过物理包埋作用以及与GMA的环氧基团发生开环反应而固载于所述碳化树脂载体表面。
2.DNA免疫吸附剂的制备方法,其特征在于:
将碳化树脂与包膜溶液混合,然后搅拌、过滤、干燥、冷却,得到所述DNA免疫吸附剂;其中,
所述包膜溶液与所述碳化树脂的体积比为(3-5):1;
所述包膜溶液中含有DNA和交联P(HEMA-b-GMA)。
3.根据权利要求2所述DNA免疫吸附剂的制备方法,其特征在于:
所述交联P(HEMA-b-GMA)中GMA的含量为1%-5%。
4.根据权利要求2所述DNA免疫吸附剂的制备方法,其特征在于:
所述包膜溶液通过以下方法制得:
将DNA原液与P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液按1:(4-5)的体积比混合,然后搅拌或振荡至DNA完全溶解,得到所述包膜溶液,其中,所述DNA原液中DNA的浓度为1-2mg/ml,所述P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%-1.0%。
5.根据权利要求2或3任一项所述DNA免疫吸附剂的制备方法,其特征在于:
所述干燥温度为70℃-85℃,干燥时间为1.5-3小时。
6.DNA免疫吸附剂的制备方法,其特征在于:所述制备方法包括以下步骤:
步骤一:将DNA原液与P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液按1:(4-5)的体积比混合,搅拌或振荡至DNA完全溶解,得到包膜溶液;其中,所述DNA原液中DNA的浓度为1-2mg/ml,所述P(HEMA-b-GMA)乙醇溶液中交联P(HEMA-b-GMA)的质量浓度为0.5%-1.0%;
步骤二:将干燥的碳化树脂倒入所述包膜溶液中,再依次搅拌、过滤、干燥、冷却,得到所述DNA免疫吸附剂;其中,
所述包膜溶液与所述碳化树脂的体积比为(3-5):1。
7.根据权利要求6所述DNA免疫吸附剂的制备方法,其特征在于:
所述交联P(HEMA-b-GMA)中GMA的含量为1%-5%。
8.根据权利要求5至7任一项所述DNA免疫吸附剂的制备方法,其特征在于:
所述干燥温度为70℃-85℃,干燥时间为1.5-3小时。
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