CN106613288A - 蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，该方法为挑选颗粒饱满的蚕豆种子，用清水洗净，浸泡至完全膨胀；将蚕豆种子均匀摆在托盘内，光照黑暗交替下培养，并定期观察蚕豆苗生长情况；待蚕豆长到2‑3叶期时，接种2‑3头无翅蚜虫于正面叶片上，观察其感虫情况。蚜虫的生长繁殖受季节影响较大，由于培养室的环境条件较稳定，加之本发明的鉴定体系本身是一个完全封闭的系统，使得鉴定结果的重复性和可靠性得到保证。

Description

蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法

技术领域

本发明涉作物抗性育种技术领域，具体地指一种蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法。

背景技术

蚕豆(Vicia faba L.)是世界上重要的豆科作物，因具有粮食、蔬菜、饲料和绿肥兼用等特点，且适应性广及具有较高的固氮量，在世界范围内种植蚕豆的国家超过70个，种植面积高达260万hm²。中国的蚕豆种植面积和产量均居世界首位，分别占世界的42.76％和46.94％。

豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum Harris)属于半翅目蚜科，是世界范围内豆科作物及牧草的主要害虫，其寄主范围十分广泛，该虫能为害豌豆、蚕豆、苜蓿、大豆等豆科作物，以各龄若虫和成虫聚集在植物幼嫩部分取食为害，以刺吸性口器吸取汁液，被害植株叶子卷缩，蕾和花变黄脱落，影响生长发育、开花结实和产量，大发生时田间植株大量枯死。

豌豆蚜的防治研究是近年来比较关注的方面，通常情况下采用化学防治方法进行防治，也有采用农业防治方法进行防治的研究报道。近年来选育抗虫品种成为一种重要的农业防治措施，对于抗虫品种的选育在苜蓿和豌豆上较多。从现有研究看出，种植抗性品种对豌豆蚜的发生有很大程度的抑制作用，同时减少了化学农药的使用，降低对天敌的影响，加大了天敌的自然控制作用。

因此，选育有抗性的品种进行种植，是防治豌豆蚜的根本途径之一。优异抗性种质资源是进行抗虫育种的物质基础，然而，国内外迄今尚无蚕豆抗豌豆蚜鉴定的评价标准及相关抗性鉴定的报道，所以，建立蚕豆抗豌豆蚜种质资源的鉴定方法，对于开展蚕豆抗豌豆蚜资源的筛选以及抗性育种研究具有重要的意义。

发明内容

本发明目的在于针对蚕豆抗虫育种的特点和现有技术的不足，提供了一种蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，该方法能重复、快速准确鉴定蚕豆资源对豌豆蚜的抗性。

为实现上述目的，本发明提供的一种蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，包括以下步骤：

1)挑选颗粒饱满的蚕豆种子，用清水洗净，浸泡至完全膨胀；

2)将蚕豆种子均匀摆在托盘内，托盘内喷洒清水保湿，光照黑暗交替下培养，并观察蚕豆苗发芽生长情况；

3)待蚕豆长到2～3叶期时，接种2-3头无翅豌豆蚜虫于正面叶片上；

4)接种蚜虫10～15d，采用计数法统计每株蚕豆植株上的蚜虫数量，求相同品种蚕豆植株上蚜虫数量的平均值，从而按以下分级标准进行抗性评价，

以每株的平均单株蚜量比值定级，共分5级：

1)0级：平均蚕豆单株蚜虫量比值为0-0.25；

2)1级：平均蚕豆单株蚜量比值为0.26-0.50；

3)2级：平均蚕豆单株蚜量比值为0.51-0.90；

4)3级：平均单株蚜量比值为0.91-1.25；

5)4级：平均蚕豆单株蚜量比值为＞1.25；

经上统计得知，0级属于高抗虫型，记以HR，1级属于抗虫型，记以R，2级属于中抗虫型，记以MR，3级属于感虫型，记以S，4级属于高感虫型，记以HS。

进一步地，所述步骤2中，培养环境的温度为23±1℃。

再进一步地，所述步骤2中，培养环境的湿度为70～80％。

再进一步地，所述步骤2中，培养环境的湿度为75％。

再进一步地，所述步骤2中，培养环境为恒温恒湿。

本发明的有益效果在于

1、本发明可在较短时间内连续鉴定较大数量的蚕豆苗，有利于大规模筛选蚕豆抗豌豆蚜品种。

2、本发明可以让豌豆蚜在一个可控、密闭的环境中繁殖，保证了鉴定结果的重复性和可靠性。

3、本发明可以直接观察蚕豆苗的感虫情况

4、本发明能够使蚕豆保持正常生长，蚕豆抗豌豆蚜鉴定技术可以准确统计蚜虫的繁殖数量，鉴定区分蚕豆品种的抗蚜性

5、用本发明提供的方法鉴定蚕豆品种的抗豌豆蚜性，能够大量、快速、准确的区分品种间抗豌豆蚜性间的差异，为抗虫亲本选择提供依据，是选育抗豌豆蚜蚕豆品种资源最经济有效的方法，进而从根本上减少豌豆蚜对蚕豆产量和质量的损失。

具体实施方式

为了更好地解释本发明，以下结合具体实施例进一步阐明本发明的主要内容，但本发明的内容不仅仅局限于以下实施例。

实施例1供试豌豆蚜的准备

1)豌豆蚜的室内大量饲养：豌豆蚜为蚕豆上田间采集，在本实验室种植的蚕豆苗上继代饲养，温度为(23±1)℃，光照周期为16L:8D，湿度为75％。

2)供试豌豆蚜的准备：采用改进的叶子圆片法，在人工光照培养箱中培养供试若蚜。具体为：将新鲜的蚕豆叶片用巴斯消毒液浸泡10min后放在含有琼脂层(1.5％)的培养皿内，挑选健康的成蚜置于叶片上，盖上盖子，并用封口膜封上以防止豌豆蚜爬出。24h后，将培养皿内的成蚜取出。第4天后取4日龄若蚜进行人工接虫实验。蚜虫培养条件为：温度为(23±1)℃，光照周期为16L:8D，湿度为75％。

实施例2室内抗虫性鉴定

将各蚕豆资源为实验材料，待蚕豆长到2-3叶期时，接种2-3头无翅蚜虫于正面叶片。接种豌豆蚜虫10d后采用计数法统计蚜虫数量，求得各相同品种蚕豆植株上蚜虫数量的平均值，从而按以下分级标准进行抗性评价，

以每株的平均单株蚜量比值定级，共分5级：

1)0级：平均蚕豆单株蚜虫量比值为0-0.25；

2)1级：平均蚕豆单株蚜量比值为0.26-0.50；

3)2级：平均蚕豆单株蚜量比值为0.51-0.90；

4)3级：平均单株蚜量比值为0.91-1.25；

5)4级：平均蚕豆单株蚜量比值为＞1.25；

经上统计得知，0级属于高抗虫型，记以HR，1级属于抗虫型，记以R，2级属于中抗虫型，记以MR，3级属于感虫型，记以S，4级属于高感虫型，记以HS。

实施例3绿豆资源抗性鉴定结果

利用上述方法对生产上应用的4份蚕豆资源进行了抗豌豆蚜的鉴定评价，鉴定结果见表1。

表1蚕豆室内抗蚜性鉴定结果

品种	平均单株蚜量比值	抗性程度
			成都大白	0.4176	R
临蚕5号	0.7848	MR
			鄂蚕1号	1.0609	S
靖蚕豆130	2.4280	HS

由上表可知，供试各蚕豆资源抗蚜性表现显著的差异，证明应用本发明提供的鉴定方法能够快速、准确地区分蚕豆抗豌豆蚜品种和感豌豆蚜品种。

由此可见，关于品种抗蚜性鉴定，利用室内人工接虫的方法，使材料感虫。实验结果表明，蚕豆的抗蚜性存在差异，其中培养条件对感虫程度有很大的影响。因此以后在对育种材料进行抗蚜性鉴定时，应控制温度和湿度，提供具有实际育种意义的抗性评价。该方法可以用来快速地筛选出抗豌豆蚜的蚕豆品种，为以后的蚕豆生产上种子品系的选择提供参考。

其它未详细说明的部分均为现有技术。尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (5)

1.一种蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)挑选颗粒饱满的蚕豆种子，用清水洗净，浸泡至完全膨胀；

2)将蚕豆种子均匀摆在托盘内，托盘内喷洒清水保湿，光照黑暗交替下培养，并观察蚕豆苗发芽生长情况；

3)待蚕豆长到2～3叶期时，接种2-3头无翅豌豆蚜虫于正面叶片上；

4)接种蚜虫10～15d，采用计数法统计每株蚕豆植株上的蚜虫数量，求相同品种蚕豆植株上蚜虫数量的平均值，从而按以下分级标准进行抗性评价，

以每株的平均单株蚜量比值定级，共分5级：

1)0级：平均蚕豆单株蚜虫量比值为0-0.25；

2)1级：平均蚕豆单株蚜量比值为0.26-0.50；

3)2级：平均蚕豆单株蚜量比值为0.51-0.90；

4)3级：平均单株蚜量比值为0.91-1.25；

5)4级：平均蚕豆单株蚜量比值为＞1.25；

经上统计得知，0级属于高抗虫型，记以HR，1级属于抗虫型，记以R，2级属于中抗虫型，记以MR，3级属于感虫型，记以S，4级属于高感虫型，记以HS。

2.根据权利要求1所述蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，其特征在于：所述步骤2中，培养环境的温度为23±1℃。

3.根据权利要求1或2所述蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，其特征在于：所述步骤2中，培养环境的湿度为70～80％。

4.根据权利要求3所述蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，其特征在于：所述步骤2中，培养环境的湿度为75％。

5.根据权利要求3所述蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，其特征在于：所述步骤2中，培养环境为恒温恒湿。