CN106596794A - 高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法 - Google Patents
高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106596794A CN106596794A CN201611263279.8A CN201611263279A CN106596794A CN 106596794 A CN106596794 A CN 106596794A CN 201611263279 A CN201611263279 A CN 201611263279A CN 106596794 A CN106596794 A CN 106596794A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liquid chromatography
- separating
- aramine
- mobile phase
- determining
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,它是采用手性色谱柱并以正己烷、无水乙醇以及异丙胺的混合溶液为流动相;所述流动相中正己烷与无水乙醇以及异丙胺的体积比为(60~95)∶(5~30)∶(0.05~0.5);所述手性色谱柱为以硅胶表面共价键合有直链淀粉‑三‑(3,5‑二甲苯基氨基甲酸酯)为填料的键合型手性色谱柱。本发明采用高效液相色谱法以及手性色谱柱,尤其是通过创造性劳动得到特殊的流动相,从而实现了重酒石酸间羟胺及其异构体的分离测定,最终保证了重酒石酸间羟胺的有效性和安全性。
Description
技术领域
本发明属于分析化学技术领域,具体涉及一种高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法。
背景技术
重酒石酸间羟胺(Metaraminol Bitartrate)为间羟胺的重酒石酸盐,是美国Fresenius Kabi公司研发的一种α肾上腺素受体激动药,主要作用于α受体,适用于休克早期的治疗,防治椎管内阻滞麻醉时发生的急性低血压。
由于重酒石酸间羟胺中的间羟胺存在两个手性碳原子,从而使其存在(1R,2S)、(1S,2R)、(1R,2R)、(1S,2S)四种构型,其中(1R,2S)为有效构型,(1S,2R)为其对映异构体,(1R,2R)和(1S,2S)为其非对映异构体。
间羟胺的四种构型结构分别如下:
(1R,2S)构型:。
(1S,2R)构型:。
(1R,2R)构型:。
(1S,2S)构型:。
尽管目前在重酒石酸间羟胺的制备过程中会采用多种方法控制其它三种异构体,但是最终得到的重酒石酸间羟胺原料药仍然会存在一定量的异构体。
对于含多个手性碳原子的化合物的光学异构体进行分离一直是手性药物质量控制的难点,然而,对于重酒石酸间羟胺及其异构体的分离测定至今未见文献报道。
因此,提供一种分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法对于控制重酒石酸间羟胺的质量、提高药品的疗效、降低毒副作用是本领域急需解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的在于解决上述问题,提供一种高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法。
实现本发明目的的技术方案是:一种高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,它是采用手性色谱柱并以正己烷、无水乙醇以及异丙胺的混合溶液为流动相。
所述流动相中正己烷与无水乙醇以及异丙胺的体积比为(60~95)∶(5~30)∶(0.05~0.5);优选为(75~85)∶(15~25)∶(0.1~0.3);更优选为80∶20∶0.2。
所述流动相的流速为0.4~2.0mL/min,优选为1.0mL/min。
所述手性色谱柱为以硅胶表面共价键合有直链淀粉-三-(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)为填料的键合型手性色谱柱;例如日本大赛璐公司的CHIRALPAK AD/CHIRALPAK AD-H。
所述高效液相色谱法的其它条件:
检测波长为210~255nm,优选为220nm。
色谱柱温度为15~45℃,优选为30℃。
进样量为0.1μL~100μL,优选为1μL~50μL,更优选为20μL。
所述高效液相色谱法之前还包括将重酒石酸间羟胺原料药溶于稀释液中。
所述的稀释液为乙醇、正己烷、甲醇、异丙醇、乙腈中一种或者几种的混合物;优选为乙醇。
所述重酒石酸间羟胺原料药溶于稀释液后的浓度为0.1~5mg/mL,优选为0.2~3mg/mL,更优选为1mg/mL。
本发明具有的积极效果:本发明采用高效液相色谱法以及手性色谱柱,尤其是通过创造性劳动得到特殊的流动相,从而实现了重酒石酸间羟胺及其异构体的分离测定,最终保证了重酒石酸间羟胺的有效性和安全性。
附图说明
图1为实验例中空白溶液的色谱图。
图2为实验例中系统适用性溶液的色谱图。
图3为实施例1中供试品溶液的色谱图。
图4为对比例1中供试品溶液的色谱图。
图5为对比例2中供试品溶液的色谱图。
图6为对比例3中供试品溶液的色谱图。
具体实施方式
(实验例)
本实验例为高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法。
一、仪器。
高效液相色谱仪:岛津,LC-20A,SPD20-UV检测器。
色谱柱:CHIRALPAK AD-H(4.6×250mm,5μm)。
二、色谱条件。
流动相:正己烷∶无水乙醇∶异丙胺(80∶20∶0.2)。
流速1.0mL/min。
检测波长:220nm。
柱温:30℃
进样量:20μL。
三:实验步骤。
分别称取重酒石酸间羟胺及其三种异构体各2.5mg,置于10mL量瓶中,加乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得到系统适用性溶液。
分别精密量取空白溶液和上述系统适用性溶液各20μL,按上述条件进行高效液相色谱分析,记录色谱图,结果分别见图1和图2。
图2中保留时间为27.534min的色谱峰为重酒石酸间羟胺的色谱峰,保留时间为8.229min的色谱峰为(1R,2R)、(1S,2S)非对映异构体的混合峰,保留时间为12.831min为对映异构体(1S,2R)的色谱峰。
由图2可以看出重酒石酸间羟胺与其非对映异构体、对映异构体峰均能够达到基线分离,满足各国药典的要求。
(实施例1)
本实施例为高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺原料药的方法。
一、仪器。
同实验例。
二、色谱条件。
同实验例。
三:实施步骤。
称取重酒石酸间羟胺原料药10mg,置于10mL量瓶中,加乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
精密量取供试品溶液20μL,按上述条件进行高效液相色谱分析,记录色谱图,结果见图3。
图3中保留时间为28.616min的色谱峰为重酒石酸间羟胺的色谱峰。
由图3可以看出:本发明的方法能够有效测定对映异构体、非对映异构体的含量,可以用于重酒石酸间羟胺的质量检测。
(对比例1~对比例3)
各对比例与实施例1基本相同,不同之处在于流动相组成,具体如下:
对比例1:正己烷∶无水乙醇(80∶20)。
对比例2:正己烷∶无水乙醇∶二乙胺(80∶20∶0.2)。
对比例3:正己烷∶无水乙醇∶三乙胺(80∶20∶0.2)。
对比例1~对比例3的色谱图分别见图4~图6。
由图4~图6可以看出:各对比例的方法无法有效分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体。
Claims (8)
1.一种高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,其特征在于:采用手性色谱柱并以正己烷、无水乙醇以及异丙胺的混合溶液为流动相。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,其特征在于:所述流动相中正己烷与无水乙醇以及异丙胺的体积比为(60~95)∶(5~30)∶(0.05~0.5)。
3.根据权利要求2所述的高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,其特征在于:所述流动相中正己烷与无水乙醇以及异丙胺的体积比为(75~85)∶(15~25)∶(0.1~0.3)。
4.根据权利要求3所述的高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,其特征在于:所述流动相中正己烷与无水乙醇以及异丙胺的体积比为80∶20∶0.2。
5.根据权利要求1至4之一所述的高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,其特征在于:所述流动相的流速为0.4~2.0mL/min。
6.根据权利要求5所述的高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,其特征在于:所述流动相的流速为1.0mL/min。
7.根据权利要求1至4之一所述的高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,其特征在于:所述手性色谱柱为以硅胶表面共价键合有直链淀粉-三-(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)为填料的键合型手性色谱柱。
8.根据权利要求1至4之一所述的高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法,其特征在于:所述高效液相色谱法的检测波长为210~255nm,色谱柱温度为15~45℃,进样量为0.1μL~100μL。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201611263279.8A CN106596794B (zh) | 2016-12-30 | 2016-12-30 | 高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201611263279.8A CN106596794B (zh) | 2016-12-30 | 2016-12-30 | 高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106596794A true CN106596794A (zh) | 2017-04-26 |
CN106596794B CN106596794B (zh) | 2019-03-26 |
Family
ID=58581487
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201611263279.8A Active CN106596794B (zh) | 2016-12-30 | 2016-12-30 | 高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106596794B (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108947854A (zh) * | 2018-06-30 | 2018-12-07 | 常州市阳光药业有限公司 | 重酒石酸间羟胺及其异构体的拆分方法 |
CN110988185A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-04-10 | 上海禾丰制药有限公司 | 杂质的检测方法及重酒石酸间羟胺注射液的制备方法 |
CN112326810A (zh) * | 2020-09-28 | 2021-02-05 | 南京斯泰尔医药科技有限公司 | 重酒石酸间羟胺注射液前处理及对映异构体的分离测定 |
CN114527205A (zh) * | 2022-01-21 | 2022-05-24 | 石家庄四药有限公司 | 2-叔丁氧羰基氨基-n-苄基-3-甲氧基丙酰胺异构体的检测方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3629285A (en) * | 1967-05-08 | 1971-12-21 | Merck & Co Inc | Derivatives of 3-hydroxy-alpha-(1-aminoethyl)-benzyl alcohol |
CN103739504A (zh) * | 2013-12-31 | 2014-04-23 | 广州普星药业有限公司 | 一种重酒石酸间羟胺的合成方法 |
-
2016
- 2016-12-30 CN CN201611263279.8A patent/CN106596794B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3629285A (en) * | 1967-05-08 | 1971-12-21 | Merck & Co Inc | Derivatives of 3-hydroxy-alpha-(1-aminoethyl)-benzyl alcohol |
CN103739504A (zh) * | 2013-12-31 | 2014-04-23 | 广州普星药业有限公司 | 一种重酒石酸间羟胺的合成方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
GOKULAKRISHNAN K 等: "Validated HPLC method for the determination of enantiomeric impurity of l-Ephedrine Sulfate", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF APPLIED CHEMISTRY》 * |
MARCIAN E.VAN DORT: "Direct chromatographic resolution and isolation of the four stereoisomers of meta‐hydroxyphenylpropanolamine", 《CHIRALITY》 * |
田洁 等: "反相高效液相色谱法测定重酒石酸间羟胺及其注射液的有关物质和含量", 《中国药学杂志》 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108947854A (zh) * | 2018-06-30 | 2018-12-07 | 常州市阳光药业有限公司 | 重酒石酸间羟胺及其异构体的拆分方法 |
CN108947854B (zh) * | 2018-06-30 | 2020-09-08 | 常州市阳光药业有限公司 | 重酒石酸间羟胺及其异构体的拆分方法 |
CN110988185A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-04-10 | 上海禾丰制药有限公司 | 杂质的检测方法及重酒石酸间羟胺注射液的制备方法 |
CN110988185B (zh) * | 2019-12-20 | 2022-03-18 | 上海禾丰制药有限公司 | 杂质的检测方法及重酒石酸间羟胺注射液的制备方法 |
CN112326810A (zh) * | 2020-09-28 | 2021-02-05 | 南京斯泰尔医药科技有限公司 | 重酒石酸间羟胺注射液前处理及对映异构体的分离测定 |
CN114527205A (zh) * | 2022-01-21 | 2022-05-24 | 石家庄四药有限公司 | 2-叔丁氧羰基氨基-n-苄基-3-甲氧基丙酰胺异构体的检测方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106596794B (zh) | 2019-03-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Ribeiro et al. | Enantioseparation of chiral pharmaceuticals in biomedical and environmental analyses by liquid chromatography: An overview | |
CN106596794A (zh) | 高效液相色谱法分离测定重酒石酸间羟胺及其异构体的方法 | |
Gumustas et al. | Analytical and preparative scale separation of enantiomers of chiral drugs by chromatography and related methods | |
Ghanem et al. | Enantioselective separation of racemates using CHIRALPAK IG amylose-based chiral stationary phase under normal standard, non-standard and reversed phase high performance liquid chromatography | |
Camacho-Muñoz et al. | Multi-residue enantiomeric analysis of human and veterinary pharmaceuticals and their metabolites in environmental samples by chiral liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry detection | |
Camacho-Munoz et al. | Enantioselective simultaneous analysis of selected pharmaceuticals in environmental samples by ultrahigh performance supercritical fluid based chromatography tandem mass spectrometry | |
Haginaka | Pharmaceutical and biomedical applications of enantioseparations using liquid chromatographic techniques | |
CN104634887A (zh) | 一种分离和测定替格瑞洛及其光学异构体的方法 | |
CN104820028B (zh) | 一种用液相色谱法分离测定阿普斯特及其对映异构体的方法 | |
Pittler et al. | Enantioseparation of dansyl amino acids by HPLC on a monolithic column dynamically coated with a vancomycin derivative | |
Adhikari et al. | Chiral separation using chiral crown ethers as chiral selectors in chirotechnology | |
CN111189947B (zh) | 一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法 | |
CN108947854B (zh) | 重酒石酸间羟胺及其异构体的拆分方法 | |
Fu et al. | Enantiomeric fraction determination of chiral drugs in environmental samples using chiral liquid chromatography and mass spectrometry | |
Kasprzyk-Hordern et al. | Chiral liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry for environmental analysis of pharmacologically active compounds | |
Sun et al. | Stereoselective separation of isomeric sertraline with analytical countercurrent chromatography | |
Taraji et al. | Determination of carvedilol enantiomers in pharmaceutical dosages by SBSE–HPLC based on diastereomer formation | |
Cârje et al. | Enantioseparation of indapamide by high performance liquid chromatography using ovomucoid glycoprotein as chiral selector | |
CN104502499B (zh) | 一种异构体的高效液相检测方法 | |
CN107328874B (zh) | 一种盐酸帕洛诺司琼光学异构体的拆分试剂及分离检测方法 | |
Alcantara et al. | Determination of levetiracetam in human plasma by dispersive liquid-liquid microextraction followed by gas chromatography-mass spectrometry | |
CN107045025A (zh) | 液相色谱法测定盐酸托莫西汀及其有关物质的方法 | |
Tanaka et al. | High-performance enantiomer separation of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) by 3 μm reversed-phase chiral columns and application to the optical purity testing of naproxen drug substances and its formulations | |
Zongde et al. | Analytical and semipreparative resolution of enatiomers of albendazole sulfoxide by HPLC on amylose tris (3, 5-dimethylphenylcarbamate) chiral stationary phases | |
Hefnawy et al. | Stereoselective HPLC analysis of tertatolol in rat plasma using macrocyclic antibiotic chiral stationary phase |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |