CN106508759A - 一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于，采集A、B两个不同地理群体的魁蚶亲本，先后经过海上暂养、室内升温促熟，同时在升温促熟过程中配合解剖镜检，以此控制不同地理群体魁蚶性腺的同步发育；将不同地理群体魁蚶亲贝进行收集暂养和升温促熟，通过升温促熟过程中的温度和饵料调控，使不同地理群体魁蚶亲贝的性腺同步成熟，同时排放精子和卵子，使杂交育种可行、易操作，为魁蚶杂交选育提供技术支持，推进贝类产业的发展。

Description

一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法

技术领域

本发明涉及贝类杂交育种中的关键技术，具体的说，涉及的是一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育的控制方法，属于海洋生物技术领域。

背景技术

魁蚶(Scapharca broughtonii Schrenck)俗称赤贝、大毛蛤，是一种营埋栖生活的大型双壳贝类，生活在近岸水深3米至外海近50米的泥质或泥沙质海底，广泛分布于太平洋西北部日本海、黄海、渤海、东海，我国辽东半岛、山东半岛及东海沿海资源量丰富，犹以黄海北部的魁蚶资源最集中，以产量大、品质佳享有盛名。魁蚶肉味鲜美，营养丰富，经济价值很高，属海珍品，冷冻赤贝肉在国际市场，特别是日本市场深受欢迎。上世纪80年代以来，我国山东、辽宁等科研和生产单位开始了魁蚶人工育苗、中间育成等试验研究，并取得了人工繁育魁蚶的技术突破。

根据每年的渔业资源统计数字，由于长期的过量捕捞，再加上机械化的捕捞方式（底拖网、吸贝机等）严重破坏了海洋底质，使魁蚶等底栖贝类的生存环境恶化，魁蚶自然资源大幅度下降，至今已形不成大批量捕捞，使得魁蚶远远不能满足国内市场和出口需求。

杂交育种通过获得杂种优势提高杂交后代的质量和产量，是动植物改良遗传性状、培育优良品种的重要手段之一。杂交育种在水生生物的品种改良和生产中发挥了重大作用，目前，有关海洋贝类杂交的相关研究也已很多报道，如扇贝、牡蛎、珠母贝、鲍鱼等，其中已有多个研究成果得到大规模的推广养殖，并且取得了良好的效果。研究发现韩国魁蚶具有生长快速、抗逆性强等优良性状特征，但是其壳顶比较薄，受到碰撞后容易破碎。而且韩国魁蚶遗传结构上与中国群体有一定的遗传分化，具有遗传差异，但能够顺利完成受精发育等生物学过程。最近几年，有些单位从韩国引进了魁蚶种贝进行魁蚶的杂交选育，将魁蚶中国群体与韩国群体进行杂交，能够聚合优良性状对我国魁蚶进行种质改良，是获得新品种（系）的有效途径。在进行杂交的实际操作过程中，由于地理差距大，两个群体的亲贝性腺发育不能保持同步成熟，因而影响了杂交育种的进程，而且如果强行进行人为刺激使其排放精卵，效果往往适得其反，精卵发育不良，后代就不能表现出优良性状，达不到选育良种的目的。因此，控制性腺同步发育是不同地理群体魁蚶杂交育苗首先要解决的技术难题，只有性腺同步成熟了，才能更好的进行魁蚶良种选育的研究。

发明内容

本发明目的是通过控制魁蚶亲贝促熟过程中的水温和饵料搭配，并结合解剖镜检的方法，建立一种成熟、稳定的可控制不同地理群体魁蚶性腺同步发育的技术体系，从而解决不同群体魁蚶性腺发育不同步的问题，使得魁蚶杂交育种变得可行、易操作，为魁蚶杂交选育顺利进行提供技术支撑。

为解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：

一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特殊之处在于，采集A、B两个不同地理群体的魁蚶亲本，先后经过海上暂养、室内升温促熟，同时在升温促熟过程中配合解剖镜检，以此控制不同地理群体魁蚶性腺的同步发育；其具体控制步骤包括：

一、亲本选择

分别采集A、B两个不同地理海区深水中的野生魁蚶亲本，采集水温4-6℃，要求2-4龄、壳高7-12厘米、体形正常、贝壳无缺损、软体部肥满、活力好；

所述不同地理海区深水温度要求相对较低，以4-6℃为宜；

采集好的亲贝用保温箱装运，并用胶带封严，装满压实，防止亲贝张壳失水而死亡或冻伤。

二、海上暂养

将不同地理群体的魁蚶亲本放在同一海区内过渡暂养，暂养时间为2-4周，暂养方式为不同群体区分扇贝笼吊养，每层放置3-6个亲贝，挂养水深为2-4米；

暂养海区要求风浪、潮涌较小，饵料丰富；

养殖筏架采用扇贝养殖用筏架，养殖笼挂在平行的筏架上，筏架上设有浮子，浮子与筏架之间用浮绳连接，筏架间距8-10米。

三、室内升温促熟

暂养后的亲贝经预处理后，按照每立方米水体30-45个亲贝送入室内培养池中培养，经自然水温暂养一周后，开始升温促熟，升温期间通过饵料控制加强营养促进发育，并利用解剖镜检随时观察控制不同群体亲贝性腺的同步发育。

所述暂养后的亲贝预处理包括从中挑拣死亡、受伤的亲贝，将预培养的亲贝壳面进行洗刷，清理浮泥及附着物；

所述培养方式为单层浮动网箱蓄养；不同群体亲贝放在不同的浮动网箱内，做好标记，不同群体放在不同的养殖池内促熟，方便进行温度和饵料的调控。

所述温度控制过程包括：亲贝经自然水温暂养一周后开始升温，每天升温1℃，升至12℃时恒温暂养3天；然后每天升温1℃，升至15℃时恒温暂养一周；再每天升温0.5℃，至18℃恒温暂养一周；然后每天升温0.5℃，升至21℃时恒温待产；

升温促熟期间，视具体摄食情况投喂一定量的饵料，每天总投喂量不超过养殖水体的10%；主要饵料是硅藻，即三角褐指藻，备用饵料是金藻和螺旋藻；

升温促熟期间，每天早上倒池一次，晚上换水1/2，培养池内保持持续充气。

所述解剖镜检的操作选择在升温促熟期间的12℃、15℃、18℃和21℃四个恒温暂养点进行，如果性腺发育同步，则按照步骤三中的温度和饵料控制方式继续促熟；如果有一个群体性腺发育较慢，无需暂停升温，而是继续升温至下个恒温暂养点，观察性腺发育是否同步；如果有多个群体性腺发育较慢，则全部暂停升温，延长恒温暂养点的时间，直至性腺发育同步；在21℃时性腺发育出现不同步现象，则将待产温度升高至21.5℃，直至发育同步。发育缓慢的群体同时投喂金藻和螺旋藻，以进行营养强化。

在魁蚶升温促熟过程中的其他注意事项：当恒温暂养点升到18℃时，在倒池和换水过程中，动作一定要轻柔，避免大幅度搬动和水流直接冲击亲蚶；在投喂饵料时，切勿避免饵料冲击亲蚶，以免亲蚶流产。在升温过程中，一定要实时检测培养池内水温变化，做好保温工作，防止温度变化幅度过大造成亲蚶流产。

开展杂交育种的前提是不同地理群体亲贝的性腺同步发育、精卵细胞同步成熟。大量研究表明，温度是影响海洋无脊椎动物生殖周期的最重要因素，温度直接作用于性腺，影响一些酶和激素的活性作用，在一定温度范围内，水温和发育速度成正相关，并且要积累到一定的温度总和，才能完成性腺发育。饵料的供应和搭配也是一个重要因素，繁殖期间亲贝所摄食的全部能量可被迅速同化并转化为性腺发育所需营养，仅凭体内的能量储备不足以满足性腺发育的需要，已有研究表明魁蚶在低饵料密度条件下性腺会退化；同时，混合投喂效果要优于单一饵料投喂，因为混合饵料刺激了亲贝的摄食，使之摄食量增加，营养上也能协调和互补。因此，通过控制温度和饵料，是可以控制魁蚶亲本的性腺发育速度的，也就能确保不同地理群体魁蚶性腺能够同步发育、同步成熟，顺利完成杂交育种。本发明通过控制魁蚶促熟过程中温度与饵料供应等技术要点，解决了不同地理群体魁蚶性腺发育不同步的问题，确保不同地理群体魁蚶性腺同步成熟，保证不同地理群体魁蚶能够进行杂交育种，为魁蚶杂交选育提供技术支持，推进贝类产业的发展。而且通过逐步控温、调控饵料的方式，避免了环境改变剧烈所引起的精子、卵子的畸形，提高了怀卵率和受精率。

具体实施方式

下面给出本发明的具体实施方式，以对本发明一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法作进一步详细说明，使本发明描述的方法更加清楚具体。

实施例1

一、种贝选择

2014年2月18日在韩国和长岛各收集野生魁蚶亲贝1000个，魁蚶亲贝要选择生活在深水、温度相对较低（4-6℃）海区的野生魁蚶，平均壳高8.5 厘米，2-4龄亲贝，体形正常、贝壳无缺损、软体部肥满、活力好。韩国亲本采集时水温5.7℃，用保温箱装运，并用胶带封严，装满压实，防止亲贝张壳失水而死亡或冻伤，长岛亲本采集时水温4℃。

二、海上暂养

2014年2月19日将不同地理群体魁蚶亲本采集后，运至长岛庙岛塘海区进行过渡暂养，海区风浪、潮涌较小，饵料丰富。暂养方式为扇贝笼吊养，每层放5个亲贝，挂养水深为3.5米。养殖筏架为扇贝养殖用筏架，养殖笼挂在平行的筏架上，筏架上设有浮子，浮子与筏架之间用浮绳连接，筏架间距10米。

三、室内升温促熟

1、2014年3月25日将暂养的亲蚶运到中国水产科学研究院长岛增殖实验站进行室内促熟，将死亡的、受伤的挑出，洗刷掉壳面浮泥及附着物，入池培养，培养方式为单层浮动网箱蓄养，每立方米水体按45个培养，自然水温培养（6.5℃）。

2、温度控制：2014年4月1日开始升温，初始温度为8℃，每天升温1℃，2014年4月5日升至12℃时暂养3天。2014年4月8日开始每天升温1℃，2014年4月10日升至15℃，恒温暂养一周。2014年4月17日开始每天升温0.5℃，2014年4月22日升至18℃，解剖发现长岛魁蚶群体性腺发育较慢。韩国群体恒温暂养至4月24日，长岛群体以每天0.5℃幅度继续升温，至4月24日升至20摄氏度恒温暂养。4月25日韩国群体魁蚶开始升温，每天升温0.5℃，至4月28日升至20℃，解剖发现两个群体魁蚶性腺发育无差异。然后每天升温0.5℃，2014年4月30日升至21℃，解剖发现性腺发育无差异，恒温待产。

3、饵料控制：升温期间，2014年3月25日至2014年4月22日两个群体魁蚶都投喂硅藻（三角褐指藻），视具体摄食情况增减饵料，每天总投喂量不超过养殖水体的10%。4月22日解剖发现长岛群体性腺发育较慢，开始增加投喂金藻和螺旋藻进行营养强化，而韩国群体继续投喂硅藻。2014年4月28日温度升至20摄氏度，解剖发现两个群体性腺发育基本同步，两个群体都投喂硅藻，隔一天投喂金藻和螺旋藻进行营养强化。

4、每天早上为种贝倒池一次，晚上换水1/2，培养池保持持续充气。

四、解剖镜检

2014年4月5日温度升至12℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异。2014年4月10日温度升至15℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异。2014年4月16日温度升至16℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育出现差异，长岛群体魁蚶性腺发育稍慢，继续同时升温促熟。2014年4月22日温度升至18℃，解剖镜检发现长岛群体魁蚶性腺发育较慢，韩国群体恒温暂养，长岛群体升温促熟。2014年4月25日，长岛群体升至20℃恒温培养，韩国群体开始升温。2014年4月28日韩国群体温度升至20℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异，两个群体继续升温促熟。2014年4月30日两个群体温度升至21℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异，两个群体继续恒温培养。2014年5月7日，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异，两个群体继续恒温培养。2014年5月12日，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异，性腺发育成熟，性腺肥满度高，开始催产，排放精子和卵子后进行杂交和自交。

在魁蚶升温过程中的其他注意事项：在升温促熟过程中，当恒温点升到18℃时，在倒池和换水过程中动作一定要轻柔，避免大幅度搬动和水流直接冲击亲蚶；在投喂饵料时，切勿将饵料冲击亲蚶，以免亲蚶流产。在升温过程中，一定要实时监测培养池内水温变化，做好保温工作，防止温度变化幅度过大造成亲蚶流产。

实施例2

一、种贝选择

2015年3月9日，在日本太平洋沿岸和中国大连收集野生魁蚶种贝，两个种群各收集1000个个体，魁蚶种贝选择生活在深水、温度相对较低海区的野生个体，平均壳高8厘米，3-4龄，体形正常、贝壳无缺损、软体部肥满、活力好。日本亲本采集时水温5.4℃，用保温箱装运，并用胶带封严，装满压实，防止种贝张壳失水而损伤或死亡，大连亲本采集时水温4.7℃。

二、海上暂养

2015年3月10日，将两个地理群体的魁蚶亲本运至长岛庙岛塘海区进行过渡暂养，长岛庙岛塘海区风浪、潮涌较小，饵料丰富。暂养方式为扇贝笼吊养，每层放5个亲贝，挂养水深为3.5米。养殖筏架为扇贝养殖用筏架，养殖笼挂在平行的筏架上，筏架上设有浮子，浮子与筏架之间用浮绳连接，筏架间距10米。

三、室内升温促熟

1、2015年4月13日，将暂养的种贝运至中国水产科学研究院长岛增殖实验站进行室内促熟，将死亡的、受伤的挑出，洗刷掉壳面浮泥及附着物，入池培养，培养方式为单层浮动网箱蓄养，每立方米水体按45个培养，自然水温培养（7℃）。

2、温度控制：2015年4月18日开始升温，初始温度为9℃，每天升温1℃，2015年4月21日升至12℃时暂养3天。2015年4月24日开始升温，每天升温1℃，2015年4月27日升至15℃，恒温暂养一周。2015年5月4日开始升温，每天升温0.5℃，2015年5月10日升至18℃，恒温暂养一周。2015年5月17日开始升温，每天升温0.5℃，2015年5月23日升至21℃，恒温待产。

3、饵料控制：升温期间，2015年4月13日至2015年5月10日两个群体魁蚶都投喂硅藻（三角褐指藻），每天根据水体中饵料剩余、池底粪便及种贝的性腺发育情况增减饵料的投喂量，每天投喂4-6次，每天总投喂量不超过养殖水体的10%。2015年5月10日，温度升至18℃，投喂饵料坚持少量多次的原则，硅藻每天投喂8-10次。2015年5月23日温度升至21℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺成熟度较低，继续投喂硅藻，并每天投喂金藻和螺旋藻进行营养强化。

4、每天上午为亲蚶倒池一次，晚上换水1/2，并持续充气，充气量不宜过大，刚刚泛起水花为宜。并持续充气。

四、解剖镜检

2015年4月21日温度升至12℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异。2015年4月27日温度升至15℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异。2015年5月10日温度升至18℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异。2015年5月14日温度升至18℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异。2015年5月23日温度升至21℃，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异，性腺成熟度较低，继续恒温培养。2015年5月25日，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异，性腺还未完全成熟，继续恒温培养。2015年5月28日，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异，性腺基本成熟，但是不够肥满，继续恒温培养。2015年6月1日，解剖镜检发现两个群体魁蚶性腺发育无差异，性腺完全成熟，开始催产，同时排放精子和卵子后进行杂交和自交。

在魁蚶升温过程中的其他注意事项：在升温促熟过程中当恒温点升到18℃时，在倒池和换水过程中动作一定要轻柔，避免大幅度搬动和水流直接冲击亲蚶；在投喂饵料时，切勿将饵料冲击亲蚶，以免亲蚶流产。在升温过程中，一定要实时监测培养池内水温变化，做好保温工作，防止温度变化幅度过大造成亲蚶流产。在恒温待产时，密切关注种贝性腺发育、成熟情况，根据性腺的成熟程度合理安排杂交时间。

Claims (10)

1.一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

采集A、B两个不同地理群体的魁蚶亲本，先后经过海上暂养、室内升温促熟，同时在升温促熟过程中配合解剖镜检，以此控制不同地理群体魁蚶性腺的同步发育；其具体控制步骤包括：

亲本选择

分别采集A、B两个不同地理海区深水中的野生魁蚶亲本，采集水温4-6℃，要求2-4龄、壳高7-12厘米、体形正常、贝壳无缺损、软体部肥满、活力好；

海上暂养

将不同地理群体的魁蚶亲本放在同一海区内过渡暂养，暂养时间为2-4周，暂养方式为不同群体区分扇贝笼吊养，每层放置3-6个亲贝，挂养水深为2-4米；

三、室内升温促熟

暂养后的亲贝经预处理后，按照每立方米水体30-45个亲贝送入室内培养池中培养，经自然水温暂养一周后，开始升温促熟，升温期间通过饵料控制加强营养促进发育，并利用解剖镜检随时观察控制不同群体亲贝性腺的同步发育。

2.如权利要求1所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

步骤一亲本选择中，所述不同地理海区深水温度要求4-6℃。

3.如权利要求2所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

步骤一亲本选择中，采集好的亲贝用保温箱装运，并用胶带封严，装满压实。

4.如权利要求3所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

步骤二海上暂养中，暂养海区要求风浪、潮涌较小，饵料丰富；

养殖筏架采用扇贝养殖用筏架，养殖笼挂在平行的筏架上，筏架上设有浮子，浮子与筏架之间用浮绳连接，筏架间距8-10米。

5.如权利要求4所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

步骤三室内升温促熟中，所述暂养后的亲贝预处理包括从中挑拣死亡、受伤的亲贝，将预培养的亲贝壳面进行洗刷，清理浮泥及附着物。

6.如权利要求5所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

所述步骤三室内升温促熟中，所述培养方式为单层浮动网箱蓄养；不同群体的亲贝放在不同的养殖池内养殖，方便对温度和饵料的调控。

7.如权利要求6所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

所述步骤三室内升温促熟中，所述温度控制过程包括：亲贝经自然水温暂养一周后开始升温，每天升温1℃，升至12℃时恒温暂养3天；然后每天升温1℃，升至15℃时恒温暂养一周；再每天升温0.5℃，至18℃恒温暂养一周；然后每天升温0.5℃，升至21℃时恒温待产。

8.如权利要求7所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

升温促熟期间，视具体摄食情况投喂饵料，每天总投喂量不超过养殖水体的10%；主要饵料是硅藻，即三角褐指藻，备用饵料是金藻和螺旋藻。

9.如权利要求8所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

升温促熟期间，每天早上倒池一次，晚上换水1/2，培养池内保持持续充气。

10.如权利要求9所述的一种不同地理群体魁蚶性腺同步发育控制方法，特征在于

所述解剖镜检的操作选择在升温促熟期间的12℃、15℃、18℃和21℃四个恒温暂养点进行，如果性腺发育同步，则按照步骤三中的温度和饵料控制方式继续促熟；如果有一个群体性腺发育较慢，无需暂停升温，而是继续升温至下个恒温暂养点，观察性腺发育是否同步；如果有多个群体性腺发育较慢，则全部暂停升温，延长恒温暂养点的时间，直至性腺发育同步；在21℃时性腺发育出现不同步现象，则将待产温度升高至21.5℃，直至发育同步；发育缓慢的群体同时投喂金藻和螺旋藻，以进行营养强化。