CN106496356A - 长白山林蛙皮提取透明质酸(ha)提高得率的新工艺 - Google Patents

Abstract

本发明长白山林蛙皮提取透明质酸(HA)提高得率的新工艺用生物酶解法从长白山林蛙皮中经600Mpa超高压设备细胞压爆破壁处理，分离提取纯天然保温因子透明质酸(Hyaluronic acid，HA)。提高得率0.5％工艺。外观为白色或微黄粉状，内含葡糖醛酸和氨基萄糖，为纯天然无臭、无味、无毒产品，可用于保健食品、化妆品及医药行业。工艺流程：取中国长白山林蛙皮→医用超微胶体磨磨浆→以600Mpa超高压设备处理→第一次酶解→过滤→醇沉→脱水干燥→HA中间品。HA中间品再溶解→乙醚处理→第二次酶解→络合沉淀→解离沉淀物→超滤、脱色→乙醇沉淀→得上清后进入冷冻干燥灌装流水线→得HA精品并包装完毕。

Description

长白山林蛙皮提取透明质酸(HA)提高得率的新工艺

技术领域：

本发明属于中医药科技生物工程领域，产品可用于保健食品及医疗领域。

背景技术：

本人在日本留学期间以牛眼为原料提取透明质酸(HA)质量达十万道尔顿。

发明内容：

以林蛙皮为原料，以胶体磨作微粉匀浆，用超高压设备作细胞压爆破壁、灭菌。提取透明质酸(HA)为国内首创，且可提高HA的得率达0.5％。

工艺流程：

1、取长白山林蛙皮以30％Nacl溶液浸洗10min后进入胶体磨磨浆，磨浆标准是使物料干燥后直径达5μm。以600Mpa超高压设备做超高压10min灭菌，作细胞压爆破壁，加入20倍物料体积的去离子水，用1mol/L Nacl溶液调PH值至9。加入等量2％的由脂肪酶、菠萝酶、碱性蛋白酶混合制成的复合酶，在37℃条件下酶解8h，之后加入物料的1％硅藻土加压0.1Mpa过滤于药典规定七号筛，使用布袋式离心尼龙滤过器过滤，得滤液。

2、取滤液以0.1mol/L Nacl溶液调PH值至6.5后加入2倍体积的95％乙醇搅拌，待沉淀发生充分后，取沉淀物加入乙醚、乙醇依次脱水2次。在真空度为0.1Mpa，温度为37℃条件下真空干燥得HA中间品。

3、将中间品溶于0.1mol/L Nacl溶液中，溶解浓度为0.5％，同时加入3％乙醚，以0.1mol/L NaoH调PH值至5.5。再加入等体积的乙醚以60r/min搅拌均匀，静置6h分离出水相。

4、将上述分离出的水相用1mol/L NaoH调PH值至8.2后加入5％等量的中性蛋白酶和链霉蛋白酶组成的复合酶，于33℃酶解2h，得酶解液。

5、酶解液加入等体积的1％溴化十六烷基呲啶静置8h，收集沉淀物。将沉淀物放入0.1mol/L Nacl溶液中，搅拌均匀，解离2h得解液。

6、解液加5％活性炭压滤得澄清液，后用0.45μm微孔纤维膜滤器精滤，得长白山林蛙皮透明质酸液。再以双螺旋速冻机干燥进入SGSFGX-30型灌装流水线，灌装后进行小包装，外包装出厂。本工艺提高得率0.5％，总得率为1.8％，质量为十万道尔顿。

Claims (4)

1.凡用中国长白山林蛙皮经超高压设备，细胞压爆破壁提取透明质酸(HA)而提高得率工艺的。

2.凡用本工艺中PH值数据的。

3.凡用本工艺中温度数据的。

4.提取前经药用胶体磨粉碎、风选超微粉碎、球磨机超微粉碎、剪切超微粉碎的，即粉碎达超微标准的。