CN106455651A - 用于降低氧化胁迫的表面用组合物和方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于在哺乳动物皮肤上表面施用的组合物，其包含选自下列的一种或多种芥属(Brassica)植物提取物：芥菜(Brassica juncea)提取物，意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)提取物，结球甘蓝(Brassica oleracea capitata)提取物，花椰菜(Brassica oleracea botrytis)提取物和羽衣甘蓝(Brassica oleracea acephala)提取物。所述组合物还包含选自下列的一种或多种物质：姜黄(Curcuma longa)提取物，姜黄素类化合物，四氢姜黄素类化合物，姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的代谢物，和姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的衍生物。所述组合物还包含选自下列的一种或多种物质：油茶(Camellia oleifera)提取物，茶树(Camellia sinensis)提取物，绿茶提取物和白茶提取物；山萮菜(Wasabia japonica)提取物；假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物；水飞蓟(Silybum marianum)提取物；以及黑胡椒(Piper nigrum)提取物或四氢胡椒碱中的一者或两者。

Description

用于降低氧化胁迫的表面用组合物和方法

相关申请

本申请要求2014年4月23日提交的美国专利申请号14/260,149的优先权，所述专利申请的全部内容通过参考并入本文。

技术领域

总的来说，本发明涉及皮肤护理组合物，更具体来说，涉及用于在哺乳动物受试者的皮肤中降低氧化胁迫的表面用组合物和方法。

背景技术

皮肤衰老的主要原因之一是氧化胁迫。氧化胁迫与反应性氧物质例如自由基和过氧化物的生产增加或身体的抗氧化防御的有效性显著降低相关。如不及时治疗，氧化胁迫可能造成皮肤表现出皱纹、肤色不均、皮肤厚度和弹性丧失以及皮肤衰老的其他迹象。氧化胁迫也可能造成双链DNA断裂，其属于更严重类型的DNA损伤。

尽管需求极大，但许多抗衰老皮肤护理产品和疗法尚未被证明表现出所需正面效果。即使是性能最好的霜剂，通常也只能提供皮肤外观的轻微、短期的改善。在目前市场上的抗衰老霜剂中，可以发现极为多样化的活性成分及其组合。尽管可能已知许多活性成分疑似对皮肤提供有益的抗衰老效果，但这些活性成分与提供协同抗衰老效果的其他成分的最适组合，仍然是未知的。

发明概述

本文中描述的组合物优选用于表面施用在哺乳动物受试者的皮肤、毛发、指甲或其他外表面上。所述组合物据信刺激皮肤固有防御机制以改善皮肤的外观和总体健康。已证实，所述组合物的表面施用刺激某些Nfr2靶基因以降低氧化胁迫。具体来说，作为身体对抗氧化胁迫的防御中的关键抗氧化酶的过氧化氢酶被高度表达。所述组合物的表面施用还刺激DNA修复反应，其有助于维持细胞凋亡与增生之间的体内平衡。还已证明，所述组合物的表面给药通过增加皮肤的厚度、提高表皮网嵴(epidermal rete ridge)的缓解和/或提高真皮中胶原蛋白网络的密度来改善皮肤外观。所述组合物可以以适合于表面施用的各种不同形式提供，例如化妆品、药物组合物、防晒霜、洗剂、霜剂、精华液、爽肤水和洁面乳。所述组合物也可以提供在包含洁面乳、洗剂、眼部精华液和抗衰老霜剂的套装中。

在一个实施方式中，描述了用于表面施用在哺乳动物受试者皮肤上的组合物。所述组合物可以包含选自下列的一种或多种芥属(Brassica)植物提取物：芥菜(Brassicajuncea)提取物，意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)提取物，结球甘蓝(Brassicaoleracea capitata)提取物，花椰菜(Brassica oleracea botrytis)提取物和羽衣甘蓝(Brassica oleracea acephala)提取物。所述组合物还可以包含选自下列的一种或多种物质：姜黄(Curcuma longa)提取物，姜黄素类化合物，四氢姜黄素类化合物，姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的代谢物，和姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的衍生物。所述组合物还可以包含选自下列的一种或多种物质：油茶(Camellia oleifera)提取物，茶树(Camellia sinensis)提取物，绿茶提取物和白茶提取物。所述组合物还可以包含山萮菜(Wasabia japonica)提取物、假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物、水飞蓟(Silybummarianum)提取物以及黑胡椒(Piper nigrum)提取物或四氢胡椒碱中的一者或两者。

根据第一种情况，所述一种或多种芥属植物提取物包含芥菜(Brassica juncea)提取物、意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)提取物、结球甘蓝(Brassica oleraceacapitata)提取物、花椰菜(Brassica oleracea botrytis)提取物和羽衣甘蓝(Brassicaoleracea acephala)提取物。

根据第二种情况，所述组合物还包含长叶车前草(Plantago lanceolata)提取物。

根据第三种情况，所述四氢姜黄素类化合物的衍生物是选自下列的一种或多种物质：四氢二阿魏酰基甲烷，四氢去甲氧基二阿魏酰基甲烷和四氢双去甲氧基二阿魏酰基甲烷。

根据第四种情况，所述假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物、水飞蓟(Silybummarianum)提取物、四氢胡椒碱和四氢姜黄素类化合物分别以至少2:2:1:1的量比存在于所述组合物中。

在另一个实施方式中，描述了用于表面施用在哺乳动物受试者皮肤上的组合物。所述组合物可以包含选自下列的一种或多种物质：姜黄(Curcuma longa)提取物，姜黄素类化合物，四氢姜黄素类化合物，以及姜黄素类化合物和/或四氢姜黄素类化合物的代谢物和/或衍生物。所述组合物还可以包含选自下列的一种或多种物质：油茶(Camelliaoleifera)提取物，茶树(Camellia sinensis)提取物，绿茶提取物和白茶提取物。所述组合物还可以包含假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物、水飞蓟(Silybum marianum)提取物以及黑胡椒(Piper nigrum)提取物或四氢胡椒碱中的一者或两者。

根据第一种情况，所述假马齿苋(Bacopa monnieri)、水飞蓟(Silybummarianum)、白茶提取物、四氢胡椒碱和姜黄(Curcuma longa)提取物分别以至少4:4:4:1:1的量比存在于所述组合物中。

根据第二种情况，所述假马齿苋(Bacopa monnieri)、水飞蓟(Silybummarianum)、白茶提取物、四氢胡椒碱和姜黄(Curcuma longa)提取物分别以至少7:7:7:2:1的量比存在于所述组合物中。

在另一个实施方式中，描述了用于表面施用在哺乳动物受试者皮肤上的组合物。所述组合物可以包含一种或多种异硫氰酸酯；选自下列的一种或多种物质：姜黄(Curcumalonga)提取物，姜黄素类化合物，四氢姜黄素类化合物，姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的代谢物，和姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的衍生物；一种或多种苯基丙烷类化合物；以及四氢胡椒碱。

根据第一种情况，所述一种或多种异硫氰酸酯以500-1,500ppm的量存在于所述组合物中。

根据第二种情况，所述一种或多种异硫氰酸酯包含萝卜硫素。

根据第三种情况，所述一种或多种苯基丙烷类化合物是大车前苷。所述大车前苷可以以100至2,500ppm、优选地250至2,000ppm、最优选地500至1,500ppm的量存在于所述组合物中。

根据第三种情况，所述组合物还包含选自下列的一种或多种物质：油茶(Camelliaoleifera)提取物，茶树(Camellia sinensis)提取物、绿茶提取物和白茶提取物。

根据第四种情况，所述组合物还包含一种或多种假马齿苋素。优选地，所述一种或多种假马齿苋素包含假马齿苋素A。

根据第五种情况，所述组合物还包含一种或多种黄酮木酯素。优选地，所述一种或多种黄酮木酯素是选自水飞蓟素、水飞蓟宾、水飞蓟亭、水飞蓟宁、脱氢水飞蓟宾、脱氧水飞蓟亭、脱氧水飞蓟宁、水飞蓟兰君、silybinome、silyhermin和neosilyhermin中的一者或多者。

根据第六种情况，所述组合物还包含四氢胡椒碱。

在又一个实施方式中，描述了治疗哺乳动物受试者的皮肤的方法。所述方法可以包括以在所述哺乳动物受试者中有效刺激皮肤固有防御的量向所述受试者的皮肤施用任一上述组合物。

根据第一种情况，所述皮肤固有防御是在所述哺乳动物受试者中控制核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)靶基因的转录和受Nrf2调控的通路以恢复或维持所需的细胞氧化还原平衡。

根据第二种情况，所述皮肤固有防御是上调所述Nrf2靶基因。

所述Nrf2靶基因可以是选自下列的一个或多个基因：过氧化氢酶(CAT)基因，转录激活因子3(ATF3)基因和过氧化物氧化还原酶3(PRDX3)基因。

根据第三种情况，所述皮肤防御是在所述哺乳动物受试者中恢复或维持所需的内源Nrf2细胞水平。

根据第四种情况，所述皮肤防御是通过Nrf2经磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)的细胞质磷酸化并通过形成阻止受Nrf2调控的基因的永久诱导的核复合体Nrf2-胸腺素α原(PTMA)，调控Nrf2活性。

根据第五种情况，所述皮肤防御是提高所述哺乳动物受试者中过氧化氢酶的量和活性。

根据第六种情况，所述皮肤防御是维持表皮细胞凋亡与表皮细胞过度增殖之间的平衡。

根据第七种情况，所述皮肤防御是抑制在暴露于UV-A和UV-B辐射后胸腺嘧啶二聚体的产生。

根据第八种情况，所述皮肤防御是修复DNA双链断裂并调节细胞周期进程以允许DNA修复。所述修复和调节可以由任一个或多个下列基因的上调触发：BCLAF1，BRCC3，GHR，IMMT，SENP7，SMC1A，PTPN11，SMARCE1，SRRT，SUMO1和TNFSF10。

根据第九种情况，所述皮肤防御是增加皮肤的厚度、表皮网嵴的缓解和/或乳突真皮层中胶原蛋白网络的密度。

对于本领域技术人员来说，从下面的详细描述，所描述的具体实施方式的其他目的、特点和优点将变得显而易见。然而，应该理解，所述详细描述和具体实例尽管指示了本发明的特定实施方式，但仅仅作为说明给出，而不是限制性的。可以在本发明的范围之内做出许多改变和修改而不背离其精神，并且本发明包括所有这些修改。

附图简述

在本文中参考附图描述了本公开的说明性实施方式，在所述附图中：

图1示出了在已用试验霜剂(P)或基本霜剂(E)处理7天的皮肤外植体样本上通过免疫染色检测到的过氧化氢酶的量。免疫染色在对照外植体上在第0天(B0；无处理)并且在用试验霜剂(PJ3，PJ7)或基本霜剂(ED3，EJ7)处理的皮肤外植体样本上在第3天和第7天进行。

图2示出了在未处理的对照皮肤外植体样本上在第0天和第6天通过免疫染色检测到的Nrf2的量(B0和BD6)。将用试验霜剂(P)或基本霜剂(E)处理5天的皮肤外植体样本在第6天暴露于UVA-B辐射，并在UV暴露后6小时在用试验霜剂(PUVD6)或基本霜剂(EUVD6)处理的外植体上进行Nfr2免疫染色。

图3比较了UV辐射后胸腺嘧啶二聚体阳性的表面百分率。BUVD6是指在第6天接受UV辐射的未处理的皮肤外植体。PUVD6是指用试验霜剂处理5天，在第6天暴露于UV辐射，并在6小时后分析胸腺嘧啶二聚体的皮肤外植体。EUVD6是指用基本霜剂处理5天，在第6天暴露于UV辐射，并在6小时后分析胸腺嘧啶二聚体的皮肤外植体。

特定实施方式的详细描述

现在将参考附图描述本发明的特定的非限制性实施方式。应该理解，这些实施方式仅仅是示例性的，并且只是说明了本发明范围之内的少量实施方式。对于本发明所属领域的技术人员来说显而易见的各种不同改变和修改，被视为在本发明的精神、范围和考虑之内，正如在随附的权利要求书中进一步定义的。

芥属植物提取物。芥属植物(Brassica)是指十字花科植物中的一个属，被俗称为十字花科蔬菜、卷心菜或芥菜植物。在一个特定实施方式中，所述组合物包含来自于芜菁(Brassica rapa)、黑芥(Brassica nigra)、白芥(Brassica alba)、埃塞俄比亚芥(Brassica carinata)和甘蓝(Brassica oleracea)的一种芥属植物提取物或其组合。在特定实施方式中，所述组合物包含来自于下述植物的一种芥属植物提取物或其组合：芥菜，羽衣甘蓝(Brassica oleracea acephala)(无头甘蓝和羽衣甘蓝)，花椰菜(Brassicaoleracea botrytis)(花椰菜、罗马花椰菜和球花甘蓝)，结球甘蓝(Brassica oleraceacapitata)(卷心菜)，意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)(西兰花)，芥蓝(Brassicaoleracea alboglabra)(芥兰菜)，抱子甘蓝(Brassica oleracea gemmifera)(抱子甘蓝)和苤蓝(Brassica oleracea Gongylodes)(大头菜)。在特别具体的实施方式中，所述组合物包含所有下列芥属植物提取物：芥菜，羽衣甘蓝(Brassica oleracea acephala)，花椰菜(Brassica oleracea botrytis)，结球甘蓝(Brassica oleracea capitata)和意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)。

所述芥属植物提取物含有异硫氰酸酯(ITC)，其是天然存在的生物活性化合物：

R–N＝C＝S

已在植物提取物中鉴定到超过100种ITC，并且许多所述ITC在细胞培养物、动物和人类研究中已被证明具有强的生物活性。

据信ITC抑制由UV光引起的炎症。据信ITC还通过下调激活前致癌物的第I阶段酶例如细胞色素P450的生产来阻断前致癌物向致癌物的转化。据信ITC还激活第II阶段酶和抗氧化酶例如谷胱甘肽S-转移酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶。当这些第II阶段酶被某些化合物“打开”时，身体变得更加能够对第I阶段酶产生的致癌物进行脱毒。第II阶段酶可以直接攻击致癌物或使它们变得惰性。据信第II阶段酶也失活反应性氧物质并降低氧化胁迫。

据信ITC在非常低的水平下提供抗炎和抗氧化效果。使用少至45ppm的ITC已观察到显著的抗炎活性。在特定实施方式中，本文中描述的组合物包含至少45ppm ITC，优选为45至2,500ppm，更优选为100至2,000ppm，最优选为500至1,500ppm。

在特定实施方式中，所述ITC包含萝卜硫素：

萝卜硫素(SFN)是一种天然存在的异硫氰酸酯(ITC)，具有显著的癌症化学预防潜力。它调节细胞死亡、细胞周期、血管生成、对致癌物的易感性、侵入和转移，并具有抗氧化活性。它通过不同方式起到第I阶段酶的抑制剂和第II阶段脱毒酶的诱导物的作用。Nrf2以及有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)受到SFN调控。

山萮菜提取物。山萮菜(Wasabia japonica)是包括卷心菜、辣根和芥菜的十字花科的成员。山萮菜中为其提供初始的辛辣性的化学物质是挥发性的异硫氰酸烯丙酯，其通过天然根茎的硫代葡萄糖苷(葡萄糖与含硫有机化合物的偶联物)的水解产生。所述水解反应由黑芥子酶催化，并且当所述酶在由植物根茎的浸渍例如磨碎引起的细胞破裂后被释放时发生。

山萮菜可能是ITC的另一个来源，因为它包含异硫氰酸甲基硫代烷基酯，例如异硫氰酸6-甲基硫代己基酯、异硫氰酸7-甲基硫代庚基酯和异硫氰酸8-甲基硫代辛基酯。研究显示，这些异硫氰酸酯抑制微生物生长，并可能与保护食品对抗腐败和抑制口腔细菌生长相关。因此，山萮菜根提取物可以与芥属植物提取物组合，以提供如上所述的所需ITC水平。

姜黄(姜黄(Curcuma longa))提取物。姜黄是一种姜科根茎型多年生草本植物。姜黄的最重要的化学组分是被称为姜黄素类化合物的一类化合物，其包括姜黄素(二阿魏酰基甲烷)、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素。研究得最多的化合物是姜黄素，其占姜黄粉的3.14％(平均)。此外还存在其他重要的挥发性油，例如姜黄酮、大西洋酮和姜烯。一些一般性组分是糖类、蛋白质和树脂。

据报道，由于其分子结构，姜黄素类化合物是强力抗氧化和化学预防化合物。也已证实，姜黄素类化合物的某些代谢物和衍生物具有抗氧化活性，例如四氢姜黄素类化合物(THC)。THC是源自于姜黄素类化合物的加氢产物，并且据信起到高效抗氧化化合物的作用。四氢姜黄素类化合物的衍生物包括四氢二阿魏酰基甲烷、四氢去甲氧基二阿魏酰基甲烷和四氢双去甲氧基二阿魏酰基甲烷。

长叶车前草(Plantago lanceolata)提取物。长叶车前草(Plantago lanceolata)是车前属(Plantago)物种，常用名为车前草、英国车前草、长叶车前、窄叶车前、叶骨和羊舌。长叶车前草(Plantago lanceolata)含有苯乙醇类化合物、苯基丙烷类化合物、毛蕊花糖苷、肉苁蓉苷F、lavanulifolioside、大车前苷和异毛蕊花糖苷。它还含有环烯醚萜苷类化合物桃叶珊瑚苷和梓醇。

苯基丙烷类化合物是一类多样化的有机化合物，并据信提供针对UV光的保护。在特定实施方式中，所述组合物中存在的苯基丙烷类化合物是大车前苷。在特定实施方式中，所述组合物包含长叶车前草(Plantago lanceolata)提取物。在另一个特定实施方式中，所述组合物包含一种或多种苯基丙烷类化合物。在其他特定实施方式中，所述组合物包含大车前苷。所述大车前苷可以以100至2,500ppm、优选地250至2,000ppm、最优选地500至1,500ppm的量存在于所述组合物中。

黑胡椒(黑胡椒(Piper nigrum))提取物。黑胡椒(Piper nigrum)是胡椒科(Piperaceae)的开花藤本植物，为其胡椒子而栽培，所述胡椒子通常被干燥并用作辛香料和调味品。

四氢胡椒碱是胡椒碱的一种衍生物，是在黑胡椒和荜茇中发现的一种生物碱。四氢胡椒碱的衍生物例如烷基四氢胡椒碱、二烷基四氢胡椒碱、烷氧基化四氢胡椒碱、羟基化四氢胡椒碱、卤代四氢胡椒碱、烷基二氢胡椒碱、二烷基二氢胡椒碱、烷氧基化二氢胡椒碱和卤代二氢胡椒碱，可用于配制抗炎化合物、天然调制剂、驱肠虫药、杀虫剂和药物活性成分。题为“使用四氢胡椒碱及其类似物和衍生物提高营养物和药物制剂的生物可利用性的方法(Method of increased bioavailability of nutrients and pharmaceuticalpreparations with tetrahydropiperine and its analogues and derivatives)”的美国专利号6,849,645，以其全部内容通过参考并入本文，如同完全陈述在本文中一样。

在特定实施方式中，所述组合物包含黑胡椒(黑胡椒(Piper nigrum))提取物。在另一个特定实施方式中，所述组合物包含胡椒碱、四氢胡椒碱和/或胡椒碱和/或四氢胡椒碱的衍生物和/或类似物。

假马齿苋(Bacopa(Brahmi)monnieri)提取物。假马齿苋(Bacopa monnieri)是一种南印度、澳大利亚、欧洲、非洲、亚洲和南北美洲的湿地土生的多年生匍匐草本植物。据信假马齿苋(Bacopa monnieri)表现出抗氧化和细胞保护效果。据信它还抑制乙酰胆碱酯酶、激活胆碱乙酰转移酶并提高脑部血流量。

在假马齿苋(Bacopa monnieri)中表征最充分的化合物是被称为假马齿苋素的达玛烷型三萜烯类皂苷，其具有酸枣仁皂苷元或假酸枣仁皂苷元组成部分作为糖苷配基单元。假马齿苋素包含一类12种已知的类似物。最近已鉴定到被称为假马齿苋皂苷I–XII的新的皂苷。生物碱类物质brahmine、烟碱和核佩斯亭(herpestine)，以及D-甘露糖醇、芹菜素、hersaponin、monnierasides I–III、葫芦素和车前草苷B，已被编入其中。

假马齿苋(Bacopa monnieri)包含假马齿苋素A，其据信是假马齿苋素A3、bacopacide II、假马齿苋皂苷C和bacosaponin C的酸枣仁皂苷元异构体的掺混物。据信假马齿苋素A增强抗氧化作用并提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性。

在特定实施方式中，所述组合物包含假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物。在另一个特定实施方式中，所述组合物包含一种或多种假马齿苋素。在其他特定实施方式中，所述假马齿苋素包含假马齿苋素A。

水飞蓟(水飞蓟(Silybum marianum))提取物。水飞蓟是菊科一年生或二年生植物。这种相当典型的蓟具有红色至紫色的花和带有白色叶脉的闪亮的浅绿色叶片。最初是南欧到亚洲的土生物种，它现在已遍及全世界。

水飞蓟素是一种类黄酮复合物，其可以从水飞蓟的种子提取，由三种异构体组成。标准的水飞蓟提取物含有黄酮木酯素例如水飞蓟素、水飞蓟宾、水飞蓟亭、水飞蓟宁、脱氢水飞蓟宾、脱氧水飞蓟亭、脱氧水飞蓟宁、水飞蓟兰君(siladrin)、silybinome、silyhermin和neosilyhermin的混合物。其他组分包括脱氢水飞蓟宾、脱氧水飞蓟宁和聚水飞蓟宾。

已证实水飞蓟提取物具有抗细菌活性和抗癌效果。据信表面施用的水飞蓟素减轻UVB和化学诱导的致癌作用。

在特定实施方式中，所述组合物包含水飞蓟(水飞蓟(Silybum marianum))提取物。在另一个特定实施方式中，所述组合物包含一种或多种黄酮木酯素。在其他特定实施方式中，所述组合物包含选自水飞蓟素、水飞蓟宾、水飞蓟亭、水飞蓟宁、脱氢水飞蓟宾、脱氧水飞蓟亭、脱氧水飞蓟宁、水飞蓟兰君、silybinome、silyhermin和neosilyhermin的一种或多种黄酮木酯素。

茶提取物。各种不同的茶叶提取物可以并入到所述组合物中。优选地，所述茶提取物源自于油茶(Camellia oleifera)提取物、茶树(Camellia sinensis)提取物、绿茶提取物和白茶提取物之一或其组合。据信所述茶提取物含有许多有用的抗氧化化合物。

绿茶提取物中的主要抗氧化成分是绿茶儿茶素(GTC)，其包含4种主要的表儿茶素衍生物，即表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)。

其他组分包括三种类黄酮化合物，即山奈酚、槲皮素和杨梅酮。与许多其他植物相比，在茶及其提取物中检测到明显更高含量的杨梅酮，并且这种高的杨梅酮浓度可能与茶及其提取物的生物活性有一定关联。

其他药剂。本文中描述的组合物的特定实施方式可以包括任一种其他成分或其组合。其他成分的非限制性实例包括化妆剂、防晒剂、保湿剂、抗氧化剂、结构剂、乳化剂、含硅酮药剂、增稠剂和/或药剂，并且也包括植物油。

化妆剂。本文中描述的组合物可以另外包含任一种化妆剂或其组合。《CTFA国际化妆品成分字典和手册》(CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary andHandbook)(2008)第12版，描述了可用于本文描述的组合物中的广泛的各种非限制性化妆品成分。这些成分类别的实例包括：香料(人造和天然的)，染料和颜料成分(例如1号蓝、1号湖蓝、40号红、二氧化钛、D&C 4号蓝、D&C 5号绿、D&C 4号橙、D&C 17号红、D&C 33号红、D&C2号紫、D&C 10号黄和D&C 11号黄)，吸附剂，乳化剂，稳定剂，润滑剂，溶剂(包括例如异戊二醇)，保湿剂(包括例如润肤剂、湿润剂、成膜剂、密封剂和影响皮肤的天然保湿机制的药剂)，排水剂，UV吸收剂(物理和化学吸收剂例如对氨基苯甲酸(“PABA”)和相应的PABA衍生物、二氧化钛、氧化锌等)，植物油，维生素(例如A、B、C、D、E和K)，痕量金属(例如锌、钙和硒)，抗刺激剂(例如甾类和非甾类消炎药)，植物提取物(例如芦荟、甘菊、黄瓜提取物、银杏、人参和迷迭香)，抗微生物剂，抗氧化剂(例如BHT和生育酚)，螯合剂(例如EDTA二钠和EDTA四钠)，防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)，pH调节剂(例如氢氧化钠和柠檬酸)，吸收剂(例如淀粉辛烯基琥珀酸铝、高岭土、玉米淀粉、燕麦淀粉、环糊精、滑石和沸石)，皮肤漂白和亮白剂(例如对苯二酚和烟酰胺乳酸盐)，湿润剂(例如甘油、丙二醇、丁二醇、戊二醇、山梨糖醇、尿素和甘露糖醇)，剥离剂(例如α-羟基酸和β-羟基酸例如乳酸、乙醇酸和水杨酸，及其盐)，防水剂(例如氢氧化镁/铝硬脂酸盐)，皮肤调理剂(例如芦荟提取物、尿囊素、没药醇、神经酰胺、聚二甲基硅氧烷、透明质酸、棕榈酰基肽、蛋白质水解物和甘草酸二钾)，增稠剂(例如可以提高组合物粘度的物质例如羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖和树胶)，以及含硅酮化合物(例如硅油和聚有机硅氧烷)。

防晒剂。本文中描述的组合物可以另外包含任一种防晒剂或其组合，包括化学和物理防晒剂。可以使用的化学防晒剂的非限制性实例包括对氨基苯甲酸(PABA)、PABA酯(PABA甘油酯、PABA戊基二甲基酯和PABA辛基二甲基酯)、PABA丁酯、PABA乙酯、PABA乙基二羟基丙基酯、二苯甲酮类化合物(氧苯酮、磺异苯酮、二苯甲酮和二苯甲酮-1至12)、肉桂酸酯(辛基甲氧基肉桂酸酯、异戊基对甲氧基肉桂酸酯、辛基甲氧基肉桂酸酯、西诺沙酯、二异丙基甲基肉桂酸酯、DEA-甲氧基肉桂酸酯、乙基二异丙基肉桂酸酯、甘油基辛酸酯二甲氧基肉桂酸酯和乙基甲氧基肉桂酸酯)、肉桂酸酯、水杨酸酯(水杨酸高甲基酯、水杨酸苯甲基酯、水杨酸乙二醇酯、水杨酸异丙基苯甲基酯等)、邻氨基苯甲酸酯，尿刊酸乙酯、胡莫柳酯、水杨酸辛酯、二苯甲酰基甲烷衍生物(例如阿伏苯宗)、奥克立林、辛基三嗪酮、二没食子酰基三油酸酯、氨基苯甲酸甘油酯、含有二羟基丙酮的指甲花醌、乙基己基三嗪酮、二辛基丁酰氨基三嗪酮、苯亚甲基丙二酸酯聚硅氧烷、对苯二亚甲基二樟脑磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸二钠、二乙基氨基羟基苯甲酰基苯甲酸己酯、双二乙基氨基羟基苯甲酰基苯甲酸酯、双苯并噁唑基苯基乙基己基亚氨基三嗪、甲酚曲唑三硅氧烷、亚甲基双苯并三唑基四甲基丁基酚和双乙基己氧基酚甲氧基苯基三嗪、4-甲基亚苯甲基樟脑和4-甲氧基肉桂酸异戊基酯。物理防晒剂的非限制性实例包括高岭土、滑石、凡士林和金属氧化物(例如二氧化钛和氧化锌)。本文中描述的组合物可能具有UV-A和UV-B吸收性质。所述组合物可以具有2、3、4、56、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90或更高的防晒系数(SPF)，或其中的任何整数或衍生数。

保湿剂。本文中描述的组合物可以另外包含任一种保湿剂或其组合。可用于本文中描述的组合物的保湿剂的非限制性实例包括氨基酸、硫酸软骨素、双甘油、赤藓糖醇、果糖、葡萄糖、甘油、甘油聚合物、二醇、1,2,6-己三醇、蜂蜜、透明质酸、氢化蜂蜜、氢化淀粉水解物、肌醇、乳糖醇、麦芽糖醇、麦芽糖、甘露糖醇、天然保湿因子、PEG-15丁二醇、聚甘油基山梨糖醇、吡咯烷酮羧酸的盐、PCA钾、丙二醇、葡萄糖醛酸钠、PCA钠、山梨糖醇、蔗糖、海藻糖、尿素和木糖醇。

其他实例包括乙酰化羊毛脂、乙酰化羊毛脂醇、丙烯酸酯/丙烯酸C10-30烷基酯交联聚合物、丙烯酸酯共聚物、丙氨酸、藻类提取物、库拉索芦荟、库拉索芦荟提取物、库拉索芦荟凝胶、药蜀葵提取物、淀粉辛烯基琥珀酸铝、硬脂酸铝、杏(prunus armeniaca)仁油、精氨酸、精氨酸天冬氨酸酯、山金车提取物、抗坏血酸、棕榈酸抗坏血酸酯、天冬氨酸、鳄梨(persea gratissima)油、硫酸钡、屏障神经鞘脂类、丁醇、蜂蜡、山嵛醇、β-谷甾醇、BHT、桦树(betula alba)皮提取物、琉璃苣(borago officinalis)提取物、2-溴-2-硝基丙-1,3-二醇、假叶树提取物、丁二醇、金盏花提取物、金盏花油、小烛树(euphorbia cerifera)蜡、芥花油、辛酸/癸酸甘油三酯、小豆蔻(elettaria cardamomum)油、巴西棕榈(coperniciacerifera)蜡、卡拉胶(chondrus crispus)、胡萝卜(daucus carota sativa)油、蓖麻(ricinus communis)油、神经酰胺、地蜡、鲸蜡硬脂醇聚醚-5、鲸蜡硬脂醇聚醚-12、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇辛酸酯、鲸蜡醇聚醚-20、鲸蜡醇聚醚-24、鲸蜡基乙酸酯、鲸蜡基辛酸酯、鲸蜡基棕榈酸酯、洋甘菊(anthemis nobilis)油、胆甾醇、胆甾醇酯、胆甾醇基羟基硬脂酸酯、柠檬酸、鼠尾草(salvia sclarea)油、可可(theobroma cacao)脂、椰油醇辛酸酯/癸酸酯、椰子(cocos nucifera)油、胶原蛋白、胶原蛋白氨基酸、玉米(zea mays)油、脂肪酸、油酸癸基酯、糊精、重氮烷基咪唑脲、聚二甲基硅氧烷共聚醇、聚二甲基硅氧烷醇、己二酸二辛基酯、琥珀酸二辛基酯、六辛酸/六癸酸二季戊四醇酯、DMDM海因、DNA、赤藓糖醇、乙氧基二甘醇、亚油酸乙酯、蓝桉油、月见草(oenothera biennis)油、脂肪酸、果糖、明胶、斑点老鹳草油、葡萄糖胺、葡萄糖谷氨酸酯、谷氨酸、甘油聚醚-26、甘油、二硬脂酸甘油酯、羟基硬脂酸甘油酯、月桂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、肉豆蔻酸甘油酯、油酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯SE、甘氨酸、硬脂酸乙二酯、硬脂酸乙二酯SE、糖胺聚糖、葡萄(vitisvinifera)籽油、美洲榛子(corylus americana)油、欧洲榛子(corylus avellana)油、己二醇、蜂蜜、透明质酸、混杂红花(carthamus tinctorius)油、氢化蓖麻油、氢化椰油酸甘油酯、氢化椰子油、氢化羊毛脂、氢化卵磷脂、氢化棕榈酸甘油酯、氢化棕榈仁油、氢化大豆油、氢化牛脂酸甘油酯、氢化植物油、水解胶原蛋白、水解弹性蛋白、水解糖胺聚糖、水解角蛋白、水解大豆蛋白、羟基化羊毛脂、羟脯氨酸、咪唑烷基脲、碘代丙炔基丁基氨基甲酸酯、硬脂酸异鲸蜡基酯、硬脂酰基硬脂酸异鲸蜡基酯、油酸异癸基酯、异硬脂酸异丙基酯、羊毛脂酸异丙基酯、肉豆蔻酸异丙基酯、棕榈酸异丙基酯、硬脂酸异丙基酯、异硬脂酰胺DEA、异硬脂酸、乳酸异硬脂基酯、新戊酸异硬脂基酯、茉莉(jasminum officinale)油、霍霍巴(buxuschinensis)油、海带、石栗(aleurites moluccana)坚果油、乳酰胺MEA、羊毛脂醇聚醚-16、羊毛脂醇聚醚-10乙酸酯、羊毛脂、羊毛脂酸、羊毛脂醇、羊毛脂油、羊毛脂蜡、薰衣草(lavandula angustifolia)油、卵磷脂、柠檬(citrus medica limonum)油、亚油酸、亚麻酸、澳洲坚果油、硬脂酸镁、硫酸镁、麦芽糖醇、洋甘菊(chamomilla recutita)油、甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、甲基硅醇PCA、微晶体蜡、矿物油、貂油、被孢霉油、乳酸肉豆蔻基酯、肉豆蔻酸肉豆蔻基酯、丙酸肉豆蔻基酯、新戊基二醇二辛酸酯/二癸酸酯、辛基十二烷醇、肉豆蔻酸辛基十二烷基酯、硬脂酰基硬脂酸辛基十二烷基酯、羟基硬脂酸辛基酯、棕榈酸辛基酯、水杨酸辛基酯、硬脂酸辛基酯、油酸、橄榄(olea europaea)油、柑橘(citrus aurantiumdulcis)油、棕榈(elaeis guineensis)油、棕榈酸、泛硫乙胺、泛醇、泛醇基乙基醚、石蜡、PCA、桃(prunus persica)仁油、花生(arachis hypogaea)油、PEG-8C12-18酯、PEG-15椰油胺、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-60甘油基异硬脂酸酯、PEG-5甘油基硬脂酸酯、PEG-30甘油基硬脂酸酯、PEG-7氢化蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-20甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、PEG40失水山梨糖醇全油酸酯、PEG-5大豆甾醇、PEG-10大豆甾醇、PEG-2硬脂酸酯、PEG-8硬脂酸酯、PEG-20硬脂酸酯、PEG-32硬脂酸酯、PEG40硬脂酸酯、PEG-50硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-150硬脂酸酯、十五酸内酯、胡椒薄荷(mentha piperita)油、凡士林、磷脂类、聚氨基糖缩合物、聚甘油基-3二异硬脂酸酯、聚季铵盐-24、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯85、肉豆蔻酸钾、棕榈酸钾、山梨酸钾、硬脂酸钾、丙二醇、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇月桂酸酯、丙二醇硬脂酸酯、丙二醇硬脂酸酯SE、PVP、吡哆素二棕榈酸酯、季铵盐-15、季铵盐-18水辉石、季铵盐-22、视黄醇、棕榈酸视黄酯、米(oryza sativa)糠油、RNA、迷迭香(rosmarinus officinalis)油、玫瑰油、红花(carthamus tinctorius)油、鼠尾草(salviaofficinalis)油、水杨酸、檀香(santalum album)油、丝氨酸、血清蛋白、芝麻(seamumindicum)油、乳木果油(butyrospermum parkii)、蚕丝粉、硫酸软骨素钠、透明质酸钠、乳酸钠、棕榈酸钠、PCA钠、聚谷氨酸钠、硬脂酸钠、可溶性胶原蛋白、山梨酸、失水山梨糖醇月桂酸酯、失水山梨糖醇油酸酯、失水山梨糖醇棕榈酸酯、失水山梨糖醇倍半油酸酯、失水山梨糖醇硬脂酸酯、山梨糖醇、大豆(glycine soja)油、神经鞘脂类、角鲨烷、角鲨烯、硬脂酰胺MEA-硬脂酸酯、硬脂酸、硬脂酰氧基聚二甲基硅氧烷、硬脂酰氧基三甲基硅烷、硬脂醇、甘草次酸硬脂基酯、庚酸硬脂基酯、硬脂酸硬脂基酯、葵花(helianthus annuus)籽油、甜杏仁(prunus amygdalus dulcis)油、合成蜂蜡、生育酚、生育酚乙酸酯、生育酚亚油酸酯、三山嵛酸甘油酯、新戊酸十三烷基酯、硬脂酸十三烷基酯、三乙醇胺、三硬脂酸甘油酯、尿素、植物油、水、蜡、小麦(triticum vulgare)胚芽油和依兰(cananga odorata)油。

抗氧化剂。本文中描述的组合物可以另外包含任一种抗氧化剂或其组合，例如乙酰基半胱氨酸、抗坏血酸多肽、抗坏血酸基二棕榈酸酯、抗坏血酸基甲基硅醇果胶酸酯、抗坏血酸基棕榈酸酯、抗坏血酸基硬脂酸酯、BHA、BHT、叔丁基对苯二酚、半胱氨酸、半胱氨酸HCl、二戊基对苯二酚、二叔丁基对苯二酚、硫代二丙酸二鲸蜡基酯、二油基生育酚基甲基硅醇、抗坏血酸基硫酸二钠、硫代二丙酸二硬脂基酯、硫代二丙酸双十三基酯、没食子酸十二基酯、异抗坏血酸、抗坏血酸的酯、阿魏酸乙酯、阿魏酸、没食子酸酯、对苯二酚、硫代乙醇酸异辛基酯、曲酸、抗坏血酸镁、抗坏血酸基磷酸镁、甲基硅醇抗坏血酸酯、天然植物抗氧化剂例如绿茶或葡萄籽提取物、新二氢愈创木酸、没食子酸辛基酯、苯基硫代乙醇酸、抗坏血酸基生育酚基磷酸钾、亚硫酸钾、没食子酸丙酯、醌类、迷迭香酸、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、异抗坏血酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、超氧化物歧化酶、硫代乙醇酸钠、山梨醇缩糠醛、硫代二甘醇、硫代二乙酰胺、硫代二乙醇酸、硫代乙醇酸、硫代乳酸、硫代水杨酸、生育酚聚醚-5、生育酚聚醚-10、生育酚聚醚-12、生育酚聚醚-18、生育酚聚醚-50、生育酚、托可索仑、生育酚基乙酸酯、生育酚基亚油酸酯、生育酚基烟酸酯、生育酚基琥珀酸酯和三(壬基苯基)亚磷酸酯。

结构剂。本文中描述的组合物可以另外包含任一种结构剂或其组合。在某些情况下，结构剂协助为所述组合物提供流变学特性，有助于所述组合物的稳定性。在其他情况下，结构剂也可以起到乳化剂或表面活性剂的作用。结构剂的非限制性实例包括硬脂酸、棕榈酸、硬脂醇、鲸蜡醇、山嵛醇、硬脂酸、棕榈酸、具有平均约1至约21个氧化乙烯单元的硬脂醇的聚乙二醇醚、具有平均约1至约5个氧化乙烯单元的鲸蜡醇的聚乙二醇醚，及其混合物。

乳化剂。本文中描述的组合物还可以另外包含任一种乳化剂或其组合。乳化剂可以降低相之间的界面张力并改善乳液的配制和稳定性。所述乳化剂可以是非离子型、阳离子型、阴离子型和两性离子乳化剂。非限制性实例包括甘油的酯、丙二醇的酯、聚乙二醇的脂肪酸酯、聚丙二醇的脂肪酸酯、山梨糖醇的酯、失水山梨糖醇的酯、羧酸共聚物、葡萄糖的酯和醚、乙氧基化的醚、乙氧基化的醇、烷基磷酸酯、聚氧乙烯脂肪醚磷酸酯、脂肪酸酰胺、酰基乳酸酯、皂类、TEA硬脂酸酯、DEA油醇聚醚-3磷酸酯、聚乙二醇20失水山梨糖醇单月桂酸酯(聚山梨醇酯20)、聚乙二醇5大豆甾醇、硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-20、硬脂醇聚醚-21、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、PPG-2甲基葡萄糖醚二硬脂酸酯、鲸蜡醇聚醚-10、聚山梨醇酯80、鲸蜡基磷酸酯、鲸蜡基磷酸钾、二乙醇胺鲸蜡基磷酸酯、聚山梨醇酯60、甘油基硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯及其混合物。

含硅酮药剂。本文中描述的组合物可以另外包含任一种含硅酮药剂或其组合。在非限制性情况下，含硅酮化合物包括一类分子骨架由交替的硅和氧原子构成且侧链基团附连到硅原子的聚合产物的任一成员。通过改变—Si—O—链的长度、侧链基团和交联，可以将硅酮合成为广泛的各种不同材料。它们的稠度可以从液体到凝胶到固体不等。

可用于本文描述的组合物中的含硅酮化合物包括在本说明书中描述的或本领域普通技术人员已知的含硅酮化合物。非限制性实例包括硅油(例如挥发性和不挥发性油)、凝胶和固体。在特定情况下，所述含硅酮化合物包括硅油例如聚有机硅氧烷。聚有机硅氧烷的非限制性实例包括聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、聚硅氧烷-11、苯基聚三甲基硅氧烷、三甲基甲硅烷基氨基聚二甲基硅氧烷、硬脂酰氧基三甲基硅烷，或它们与其他有机硅氧烷材料以任何给定比率的混合物，以便根据目标应用获得所需稠度和施用特性(例如施用到特定区域例如皮肤、毛发或眼睛)。“挥发性硅油”包括具有低的、即通常小于约50cal/克硅油的汽化热的硅油。挥发性硅油的非限制性实例包括：环聚二甲基硅氧烷类例如DowCorning 344流体、Dow Corning 345流体、Dow Corning 244流体和Dow Corning 245流体、Volatile Silicon 7207(Union Carbide Corp.，Danbury，Conn.)；低粘度聚二甲基硅氧烷，即粘度为约50cst或更低的聚二甲基硅氧烷(诸如Dow Corning 200-0.5cst流体的聚二甲基硅氧烷)。所述Dow Corning流体可以从Dow Corning Corporation,Midland,Mich.获得。环聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷在《CTFA化妆品成分字典》(CTFA CosmeticIngredient Dictionary)第三版(通过参考并入本文)中分别被描述为环状二甲基聚硅氧烷化合物和末端用三甲基硅氧基单元阻断的完全甲基化的直链硅氧烷聚合物的混合物。可用于本文描述的组合物中的其他非限制性挥发性硅油包括可以从General Electric Co.,Silicone Products Div.,Waterford,N.Y.和SWS Silicones Div.of Stauffer ChemicalCo.,Adrian,Mich.获得的那些。

植物油。本文中描述的组合物可以另外包含任一种植物油或其组合。植物油包括源自于草本植物、开花植物、树木和其他植物的油。这些油通常作为小液滴存在于植物细胞之间，并且可以通过本领域技术人员已知的几种方法提取(例如蒸气蒸馏、脂吸法(即使用脂肪的提取)、浸渍、溶剂提取或机械压榨)。当这些类型的油暴露于空气时，它们趋于蒸发(即挥发性油)。结果，许多植物油是无色的，但随着时间过去它们可能氧化并变深。植物油不溶于水并且可溶于醇、醚、不挥发性油(植物的)和其他有机溶剂。植物油中发现的典型物理性质包括在约160℃至240℃之间变化的沸点和约0.759至约1.096范围内的密度。

植物油通常以发现所述油的植物来命名。例如，玫瑰油或胡椒薄荷油分别源自于玫瑰或胡椒薄荷植物。可用于本文描述的组合物中的植物油的非限制性实例包括芝麻油、澳洲坚果油、茶树油、月见草油、西班牙鼠尾草油、西班牙迷迭香油、芫荽油、百里香油、众香果油、玫瑰油、茴香油、凤仙花油、佛手柑油、花梨木油、香柏油、洋甘菊油、鼠尾草油、香紫苏油、丁香油、柏油、桉树油、小茴香油、海茴香油、乳香油、香叶油、姜油、葡萄柚油、茉莉油、杜松子油、薰衣草油、柠檬油、柠檬草油、梨莓油、橘子油、甘牛至油、没药油、苦橙花油、柑橘油、广藿香油、胡椒油、黑胡椒油、苦橙叶油、松油、奥图玫瑰油、迷迭香油、檀香油、留兰香油、甘松油、香草根油、冬青油或依兰油。也设想了本领域技术人员已知的其他植物油当配制在本文描述的组合物中时是有用的。

增稠剂。本文中描述的组合物可以另外包含任一种增稠剂或其组合。包括稠化剂或胶凝剂的增稠剂，包括可以提高组合物的粘度的物质。稠化剂包括可以提高组合物的粘度而不显著改变组合物中的活性成分的效能的物质。稠化剂也可以提高本文描述的组合物的稳定性。

可用于本文描述的组合物中的其他增稠剂的非限制性实例包括羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖和树胶。羧酸聚合物的实例包括含有源自于丙烯酸、取代的丙烯酸以及这些丙烯酸和取代的丙烯酸的盐和酯的一种或多种单体的交联化合物，其中所述交联剂含有两个或更多个碳-碳双键并源自于多元醇(参见美国专利号5,087,445、4,509,949、2,798,053，《CTFA国际化妆品成分字典》(CTFA InternationalCosmetic Ingredient Dictionary)，第四版，1991,pp.12和80)。可商购的羧酸聚合物的实例包括卡波姆，其是用蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交联的丙烯酸的均聚物(例如来自于B.F.Goodrich的Carbopol^TM900系列)。

交联的聚丙烯酸酯聚合物的非限制性实例包括阳离子型和非离子型聚合物。实例描述在美国专利号5,100,660、4,849,484、4,835,206、4,628,078和4,599,379中。

聚丙烯酰胺聚合物(包括非离子型聚丙烯酰胺聚合物，包括取代的支链或无支链聚合物)的非限制性实例包括聚丙烯酰胺、异链烷烃和月桂醇聚醚-7，丙烯酰胺和取代的丙烯酰胺与丙烯酸类和取代的丙烯酸类的多嵌段共聚物。

多糖的非限制性实例包括纤维素、羧甲基羟乙基纤维素、纤维素乙酸丙酸羧酸酯、羟乙基纤维素、羟乙基乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、微晶体纤维素、纤维素硫酸钠及其混合物。另一个实例是烷基取代的纤维素，其中所述纤维素聚合物的羟基被羟烷基化(优选为羟乙基化或羟丙基化)以形成羟烷基化的纤维素，然后将其用C10-C30直链或支链烷基通过醚键进一步改性。通常，这些聚合物是C10-C30直链或支链醇与羟烷基纤维素的醚。其他有用的多糖包括硬葡聚糖，其包含(1-3)连接的葡萄糖单元的直链，并且每3个单元具有(1-6)连接的葡萄糖。

可用于本文描述的组合物的树胶的非限制性实例包括阿拉伯胶、琼脂、褐藻胶、藻酸、藻酸铵、支链淀粉、藻酸钙、卡拉胶钙、肉毒碱、卡拉胶、糊精、明胶、结冷胶、瓜尔胶、瓜尔羟丙基三甲基氯化铵、水辉石、透明质酸、水合二氧化硅、羟丙基壳聚糖、羟丙基瓜尔胶、刺梧桐胶、昆布胶、刺槐豆胶、纳豆胶、藻酸钾、卡拉胶钾、藻酸丙二酯、小核菌胶、羧甲基葡聚糖钠、卡拉胶钠、黄蓍胶、黄原胶及其混合物。

药剂。本文中描述的组合物可以另外包含任一种药剂或其组合。药物成分的非限制性实例包括抗痤疮剂、用于治疗红斑痤疮的药剂、镇痛剂、麻醉剂、肛肠药、抗组胺药、消炎药包括非甾类消炎药、抗生素、抗真菌剂、抗病毒剂、抗微生物剂、抗癌活性药物、抗疥螨剂、杀虱剂、抗肿瘤药、止汗剂、止痒剂、抗银屑病药、抗皮脂溢出剂、生物活性蛋白质和肽类、烧伤治疗剂、烧灼剂、去色素沉着剂、脱毛剂、尿布疹治疗剂、酶类、毛发生长刺激剂、毛发生长阻滞剂包括DFMO及其盐和类似物、止血剂、去角质剂、口腔溃疡治疗剂、唇疱疹治疗剂、牙和牙周治疗剂、光敏活性物质、皮肤保护/屏障剂、甾类包括激素和皮质甾类、晒伤治疗剂、防晒剂、透皮活性物质、鼻用活性物质、阴道用活性物质、疣治疗剂、创伤治疗剂、创伤愈合剂等。

实施例1：组合物套装

所述组合物可以配制成洁面乳、爽肤水、眼部精华液和霜剂，其可以分开地或作为套装一起提供。

洁面乳。在示例性实施方式中，所述洁面乳包含假马齿苋(Bacopa monnieri)(Brahmi)提取物、水飞蓟(Silybum marianum)(水飞蓟)提取物、黑胡椒(Piper nigrum)(胡椒)籽提取物、油茶(Camellia oleifera)叶提取物和姜黄(Curcuma longa)(姜黄)根提取物。这些成分的量比优选是假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物、水飞蓟(Silybummarianum)提取物、油茶(Camellia oleifera)叶提取物、姜黄(Curcuma longa)根提取物和黑胡椒(Piper nigrum)籽提取物分别为至少5:5:5:1:1。

所述洁面乳还可以包含其他成分之一或其组合，所述其他成分包括水、丙烯酸酯共聚物、椰油酰基羟乙基磺酸钠、甲基椰油酰基牛磺酸钠、氨基甲基丙醇、羟基瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、谷氨酸二乙酸四钠、泛醇、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、苯基聚三甲基硅氧烷、环甲硅油、氢化卵磷脂、苯氧基乙醇、辛乙二醇、乙基己基甘油、己二醇、α-葡聚糖寡糖、木糖醇葡萄糖苷、脱水木糖醇、芦荟(Aloe barbardensis)叶汁、藻类提取物和苯氧基乙醇。

爽肤水。在示例性实施方式中，所述爽肤水包含芥菜(Brassica Juncea)提取物、意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)芽提取物、结球甘蓝(Brassica oleraceacapitata)叶提取物、花椰菜(Brassica oleracea botrytis)提取物、羽衣甘蓝(Brassicaoleracea acephala)叶提取物、山萮菜(Wasabia japonica)根提取物、假马齿苋(Bacopamonnieri)(Bramhi)提取物、水飞蓟(Silybum marianum)(水飞蓟)水醇提取物(种子)、黑胡椒(Piper nigrum)(胡椒)籽提取物、油茶(Camellia oleifera)(绿茶)水醇提取物(叶)和姜黄(Curcuma longa)(姜黄)水醇提取物(根)。

所述爽肤水还可以包含其他成分之一或其组合，所述其他成分包括水、甘油、黄芪(Astragalus membranaceus)根提取物、白术(Atractyloides macrocephala)根提取物、柴胡(Bupleurum Falcatum)根提取物、苯氧基乙醇、木糖醇葡萄糖苷、脱水木糖醇、木糖醇、异鲸蜡醇聚醚-20、谷氨酸二乙酸四钠、氢氧化钠、苯氧基乙醇、乙基己基甘油、黄原胶和孔雀石。

眼部精华液。在示例性实施方式中，所述眼部精华液包含芥菜(Brassica Juncea)提取物、意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)芽、结球甘蓝(Brassica oleraceacapitata)叶提取物、花椰菜(Brassica oleracea botrytis)提取物、羽衣甘蓝(Brassicaoleracea acephala)叶提取物、山萮菜(Wasabia japonica)根提取物、长叶车前草(Plantago lanceolata)叶提取物、假马齿苋(Bacopa monnieri)(Bramhi)提取物、水飞蓟(Silybum marianum)(水飞蓟)水醇提取物(种子)、黑胡椒(Piper nigrum)(胡椒)籽提取物、油茶(Camellia oleifera)(绿茶)水醇提取物(叶)和姜黄(Curcuma longa)(姜黄)水醇提取物(根)。

所述眼部精华液还可以包含其他成分之一或其组合，所述其他成分包括水、甘油、苯氧基乙醇、辛乙二醇、卡波姆、丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯共聚物、合欢(Albiziajulibrissin)皮提取物、豨莶苷、芦荟叶汁、藻类提取物、尿囊素、泛醇、棕榈酸乙基己基酯、聚山梨醇酯20、生育酚乙酸酯、α-葡聚糖寡糖、黄原胶、柠檬酸、氢氧化钠、乙基己基甘油、己二醇和谷氨酸二乙酸四钠。

抗衰老霜剂。在示例性实施方式中，所述霜剂包含芥菜(Brassica Juncea)提取物、意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)(西兰花)芽提取物、结球甘蓝(Brassicaoleracea capitata)(卷心菜)叶提取物、花椰菜(Brassica oleracea botrytis)(菜花)提取物、羽衣甘蓝(Brassica oleracea acephala)叶(芥蓝)提取物、山萮菜(Wasabiajaponica)根提取物、假马齿苋(Bacopa monnieri)(Brahmi)提取物、水飞蓟(Silybummarianum)(水飞蓟)提取物、黑胡椒提取物(四氢胡椒碱)、姜黄提取物(四氢姜黄素类化合物)、长叶车前草(Plantago lanceolata)叶提取物和油茶(Camellia oleifera)或茶(sinensis)提取物。

所述抗衰老霜剂还可以包含其他成分之一或其组合，所述其他成分包括甘油、水、丁二醇、卡波姆、聚山梨醇酯20、棕榈酰基寡肽、棕榈酰基四肽-7、苯氧基乙醇、甘油基硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、硬脂酰基乳酸钠、戊二醇、羟基甲硫氨酸钙、3-氨基丙磺酸、聚山梨醇酯20、羟乙基纤维素、异戊二醇、聚二甲基硅氧烷、甜菜碱、SD醇40-B、黄原胶、柠檬酸、糖脂类、大豆植物甾醇、透明质酸钠、海盐、卡拉胶、檀香木(Santalum album)(檀香)提取物、黄柏(Phellodendron amurense)皮提取物、二棱大麦(Hordeum distichon)(大麦)提取物、油橄榄(Olea europaea)(橄榄)果不皂化物、辛乙二醇、乙基己基甘油、己二醇、MPC-牛乳肽复合物/乳清蛋白、抗坏血酸四己基癸基酯、EDTA四钠、生育酚乙酸酯、生育酚、库拉索芦荟叶汁和泛醇三乙酸酯。

实施例2：表面用组合物的抗氧化能力

将包含十二种氧化胁迫减轻剂的试验抗氧化霜剂(“试验霜剂”)每天两次表面施用到人类中年女性供体的皮肤外植体，共7天。所述试验霜剂中包含的十二种氧化胁迫减轻剂包括：五种芥属植物提取物，芥菜(Brassica Juncea)、羽衣甘蓝(Brassica oleraceaacephala)、花椰菜(Brassica oleracea botrytis)、结球甘蓝(Brassica oleraceacapitata)和意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)；山萮菜(Wasabia japonica)；四氢姜黄素类化合物；黑胡椒四氢胡椒碱；油茶(Camellia oleifera)叶提取物；长叶车前草(Plantago lanceolata)叶提取物；假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物；以及水飞蓟(Silybum marianum)提取物。同样地，将不包含这些(12种)氧化胁迫减轻剂但除此之外具有与试验霜剂相同的基本成分的基本霜剂，在相同条件下施用到同一供体的皮肤外植体。还准备了未用所述试验或基本霜剂处理的对照外植体。

基因表达结果。

基因表达情况研究使用Agilent technology微阵列来进行，所述微阵列靶向源自于美国国家生物技术信息中心参考序列(NCBI)RefSeq的超过62,976个探针且没有对照。将这些微阵列杂交到使用从人类皮肤外植体提取的总RNA合成的Cy3-cRNA，所述皮肤外植体用试验霜剂、基本霜剂处理1天，或留置不处理不同的温浴时间(3、9和24小时)。目的是鉴定通过所述试验霜剂中的12种氧化胁迫减轻剂和DNA修复剂的表面施用被上调或下调的基因。所述基因根据倍数变化方法进行选择。受到调节的基因，在基本处理与试验处理的样品之间必须相差至少1.5倍才被正激活，或者在对照与处理样品之间小于0.55倍变化才被负激活。

在Nrf2靶基因中，在所有3个时间点(3、9和24小时)观察到过氧化氢酶(CAT)的显著过表达，而在9小时时观察到转录激活因子3(ATF3)和过氧化物氧化还原酶3(PRDX3)的略微上调。

过氧化氢酶(CAT)是对抗氧化胁迫的身体防御中关键的抗氧化酶。CAT是存在于几乎所有好氧细胞的过氧化物酶体中的一种亚铁血红素酶。过氧化氢酶将反应性氧物质过氧化氢转变成水和氧，由此减轻过氧化氢的毒性效应。在广范围的细胞类型以及特别是皮肤中，CAT通过清除和脱毒过氧化氢，有助于维护基因组完整性并保持ROS(反应性氧物质)体内平衡。

接下来，根据下述标准进行对试验霜剂做出应答而显著表达的基因的选择。

在用试验霜剂处理的所有条件中低于背景(根据Agilent标准)的强度值被除去。

从用试验霜剂处理的条件的强度值与用基本霜剂处理的条件的强度值的比较推演比率。为所有组合(每个时间点三份平行的试验和对照条件)计算这些比率，为每个时间点产生9个比率。

在表现出变化倍数≥1.25的基因中，在至少一个时间点(3、9或24h)中在9个比率中的至少7个中表现出变化倍数≥1.45的基因，被考虑送去进行PredictSearch分析。这种标准导致选择了282个带注释的基因。

在这组基因中，在前十个上调基因中，对使用PredictSearch与CAT共同引证的基因进行分析。发现了5个基因对所述产物做出应答被高度诱导，它们按照字母顺序编码：ABL2/ARG(c-abl致癌基因2，非受体酪氨酸激酶)，GHR(生长激素受体)，IMMT(内膜蛋白，线粒体)，PIK3CA(磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶，催化亚基α)和RALBP1(ralA结合蛋白1)。据信ABL2/ARG表现出与CAT的直接功能联系。

将所选的基因送去进行PredictSearch分析，以确定它们是否可以被整合在相关功能网络内。PredictSearch是一种强有力的数据和文本挖掘软件，其通过数以百万计的科学出版物搜索并检索基因与生物过程或疾病之间的关联性。基于Fisher检验的功能关联性允许对带注释的关键词进行统计学共同引证分析，以便确定基因、生物过程和概念、代谢物、疾病和组织/细胞/器官之间的关系。

事实上，最近的研究显示，CAT活性受到ABL2/ARG刺激，这是非受体酪氨酸蛋白激酶的Abelson家族的成员，高度类似于c-Abl(c-abl致癌基因1蛋白)。已证实，除了刺激CAT活性之外，c-Abl和ABL2/ARG还在氧化胁迫反应中促进CAT降解。此外，H₂O₂相互作用并诱导c-Abl和ABL2/ARG与CAT的结合。这种相互作用的功能重要性得到下述例证的支持，即c-Abl和ABL2/ARG两者缺陷的细胞表现出显著提高的H₂O₂水平。此外，c-abl-/-ABL2/ARG-/-细胞与不存在任一激酶的情况相比表现出H₂O₂诱导的凋亡的显著增加。这些发现表明c-Abl和ABL2/ARG调控过氧化氢酶，并且这个信号传导通路对于氧化胁迫反应中的凋亡来说是重要的。

ABL2/ARG通过其C-端F-肌动蛋白和微管蛋白结合序列，在细胞骨架重排中发挥作用。调查正常人类表皮角化细胞(NHEK)中蛋白质酪氨酸激酶(PTK)对UV-A和UV-B做出应答的表达情况，发现ABL2/ARG是具有最高普及率的PTK(所有PTK的30％)。UV-A引起ABL2/ARG表达的进一步诱导，在辐照后17h达到9倍的mRNA基线表达。在UV-B后ABL2/ARG mRNA一开始下调，随后提高，在24h后达到5倍的基线水平。根据这些观察，ABL2/ARG似乎在角化细胞对UV的反应中具有主要作用。

另一方面，据信ABL2/ARG与促凋亡的Siva-1蛋白相关。ABL2/ARG-Siva-1相互作用的功能重要性得到下述发现的支持，即ABL2/ARG也被氧化胁迫激活，并且这种应答涉及ABL2/ARG介导的Siva-1在Tyr(48)上的磷酸化。Siva-1的促凋亡效应在稳定表达ABL2/ARG的细胞中突出，并且在ABL2/ARG缺陷细胞中被抑制。Siva-1的这些促凋亡效应被Tyr(48)位点的突变废止，并且在ABL2/ARG缺陷细胞中对氧化胁迫的凋亡性应答减弱，所述缺陷通过重建ABL2/ARG表达得到校正。这些发现支持ABL2/ARG被氧化胁迫的激活通过Siva-1依赖性机制诱导凋亡这一模型。

据信与ABL2/ARG相互作用的另一种因子是RAD51。RAD51在DNA双链断裂(DSB)的修复中发挥重要作用。已报道，在通过定向破坏从鸡B细胞系产生的ABL2/ARG缺陷细胞中，电离辐射(IR)诱导的RAD51病灶的形成减少。这与下述发现相一致，即ABL2/ARG缺陷细胞表现出对IR的高敏感性，IR诱导的染色体畸变的频率升高并且定向整合频率降低。在ATM(共济失调性毛细血管扩张突变基因)缺陷的细胞中，也观察到DNA损伤修复的所有这些异常。ATM是参与DNA DSB修复的一种蛋白质，并且已知与RAD51相互作用并将其磷酸化。对DNA损伤做出应答，ABL2/ARG通过将RAD51磷酸化刺激同源重组型(HR)DNA修复。

合在一起，这些观察建议所述产品模拟UV或氧化胁迫的效果，并因此导致刺激皮肤固有防御(即角化细胞、成纤维细胞等)以对抗这些胁迫。所述保护性效应可能依赖于ABL2/ARG，其与CAT相互作用以减少氧化缺陷或与RAD51相互作用以刺激DNA修复过程。

这种由所述产品引发的活性，得到由上调的基因例如BCLAF1、BRCC3、GHR、IMMT、SENP7和SMC1A所编码的几种蛋白质在DNA DSB修复/基因组稳定性中发挥的作用的支持。

BCLAF1、即BCL2相关转录因子1，编码与BCL2蛋白家族的几个成员相互作用的一种转录阻遏物。这种蛋白的过表达诱导凋亡，其可以被BCL2蛋白的共表达抑制。BCLAF1仅在高剂量辐射下显示出与γH2AX的结合提高，所述γH2AX是组蛋白H2A变体H2AX的磷酸化的形式，其在对DNA双链断裂的细胞应答中具有关键作用。在被急性辐射的细胞中，BCLAF1通过扰乱半胱天冬酶/周期蛋白E依赖性线粒体介导的通路的p21介导的抑制，促进不可修复的细胞的凋亡。同时，BCLAF1在存活细胞中促进基于非同源性末端联合(NHEJ)的DNA DSB修复。

SENP7、即Sumo1/sentrin特异性肽酶7，据信为对DNA损伤做出应答的染色质松弛、同源重组修复和细胞对DNA损伤试剂的抗性所需。SENP7将SUMO前体加工成SUMO1，参与类泛素化(sumoylation)这种可逆的蛋白质翻译后修饰。这种由小的类似泛素的SUMO蛋白的添加引起的类泛素化为许多细胞过程所需，并且已知在哺乳动物细胞中对双链DNA断裂做出应答发生SUMO偶联。

SMC1A、即染色体结构维持蛋白1A，是姐妹染色单体粘连所需的粘连蛋白(cohesin)多蛋白复合体的一部分。姐妹染色单体的正确粘连是细胞分裂期间染色体正确分离的先决条件。这种复合体部分由两种染色体结构维持(SMC)蛋白SMC3与SMC1B或SMC1A构成。在DNA损伤后，粘连蛋白积累在DNA DSB处并促进其修复。

最近在酵母中的工作显示，DNA DSB诱导粘连蛋白向损伤位点的召集，并引起在该位点处粘连的重新形成。在哺乳动物细胞中，已显示粘连蛋白亚基SMC1A被蛋白激酶ATM的磷酸化对DNA修复来说是重要的。SMC1A蛋白似乎是ATM激酶的特别重要的靶点，在控制DNA复制叉和损伤后的DNA修复中发挥关键作用。

此外，被认为是有功能的着丝粒的重要部分的SMC1A，与BRCA1相互作用，所述BRCA1可以与BRCC3结合。后者允许BRCA1积累在DNA DBS位点处。

NBS1和BRCA1蛋白的主要作用似乎是在活化的ATM激酶分子向DNA断裂位点的召集中，使得ATM可以将SMC1A磷酸化。NBS1被ATM的磷酸化为SMC1A的磷酸化所需，确立了NBS1在ATM/NBS1/SMC1A通路中作为转接物的作用。事实上，NBS1是Mre11/RAD503/NBS1复合体的一部分，所述复合体在协调对DSB的细胞应答中发挥中枢作用。在这种复合体内，已发现被ATM磷酸化的RAD503作为特异性ATM依赖性下游信号传导的转接物，发挥关键的调控作用。

此外，SMC1A亚基的磷酸化有助于DNA损伤诱导的细胞周期检查点调控。SMC1A和SMC3的ATM依赖性磷酸化由H2AX、53BP1和MDC1介导，并且SMC1A的磷酸化为G2期细胞中DNA损伤后的移动性增加所需，表明ATM依赖性磷酸化促进DNA损伤后粘连蛋白复合体的动员。

BRCC3/BRCC36，即含有BRCA1/BRCA2的复合体亚基3，编码含有BRCA1-BRCA2的复合体(BRCC)的一个亚基，所述复合体是E3泛素蛋白连接酶。这种复合体在DNA损伤应答中发挥作用，其中它负责BRCA1在DNA断裂位点处的稳定积累。由这个基因编码的组分可以特异性切开Lys 63连接的聚泛素蛋白链，并且它调控这些聚泛素蛋白链在染色质中的丰度。已经鉴定到一条包含RAP80-BRCC3/BRCC36作为去泛素化酶复合体的通路，其为逆转侧翼带有DNA DSB的染色质上的RNF8-Ubc13依赖性泛素化事件所需。

生长激素受体GHR编码I型细胞因子受体家族的一个成员，其是生长激素的跨膜受体。生长激素与所述受体的结合引起受体二聚化和细胞内和细胞间信号传导通路的激活，引起生长。已描述，由生长激素诱导的对辐射和博来霉素处理做出应答的存活率提高，与细胞修复受损DNA的能力提高相关。如在衰老动物中，IGF-1受体和GHR的表达减弱，引起细胞对IGF-1的耐受性。

据认为，在整个生物体的寿命中随机DNA损伤的积累促成衰老。相反，衰老似乎是在表型上可重现的，并且通过遗传通路例如作为身体生长轴的中心介导物的胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和生长激素(GH)受体进行调控。已报道在来自于小鼠的原代细胞中持久的DNA损伤引发整体基因表达的变化，类似于在自然衰老的动物的各种不同器官中发生的情况。

已显示，IMMT、即线粒体内膜蛋白/mitofilin，与聚(ADP-核糖)聚合酶-1(PARP-1)相互作用，所述聚合酶是核中的一种主要酶，其在细胞生理和病理中执行从DNA稳定性的维护到转录调控的大量功能。IMMT促进PARP-1的线粒体定位并且为PARP-1的线粒体定位所需。剥夺PARP-1或Mitofilin中的任一者废止了所述酶的线粒体定位，引起mtDNA损伤的积累(19762472)。

就此而言，结果证实了所述试验霜剂模拟了与胁迫例如UV或氧化胁迫所触发的相似的效果。然而，基于前十种受调控的基因，主要效果似乎与细胞针对DNA损伤以及尤其是DNA双链断裂的固有保护性应答相关，正如由SENP7和SUMO1所说明的。上游信号传导可能依赖于ATM或ATM样活性，其涉及ABL2/ARG和RAD503。有趣的是，与ABL2/ARG高度相似的c-ABL以及ATM差异地牵连到细胞对DNA损伤和氧化胁迫的应答，尽管两者都需要PKC来触发这些效应。这些通路导致靶向SMC1A的强烈DNA修复应答的激活，所述SMC1A是DNA损伤应答网络的一个组分，其在ATM/NBS1依赖性S期检查点通路中起到效应物的作用。例如，c-ABL的缺陷和ATM的缺陷通过细胞死亡和对NRF2的不同效应差异地改变细胞对氧化胁迫的应答。

在排名第二的被高度上调的基因中，据信只有WDR3、即WD重复结构域3与DNA修复相关。

通过协调检查点的激活和受损DNA的修复，DNA损伤应答对于维持基因组完整性和预防癌症来说是关键的。DNA损伤应答的中心是两个检查点激酶，即已经提到过的ATM和对广范围底物进行磷酸化的ATR。RING指和WD重复结构域3(RFWD3)最初从蛋白质组筛查中被鉴定为ATM/ATR的底物。后续的研究显示，RFWD3是一种E3泛素蛋白连接酶，其在体外将p53泛素化，并对DNA损伤作出应答正调控p53水平。RFWD3与复制蛋白A(RPA)结合，这是一种在DNA复制、重组和修复中发挥必不可少作用的单链DNA结合蛋白。RPA与由DNA损伤和修复产生的单链DNA(ssDNA)的结合，对于DNA修复因子向受损位点的召集和检查点信号传导的激活来说是必不可少的。RFWD3与RPA物理结合并以RPA依赖性方式快速定位到DNA损伤位点。此外，DNA损伤诱导的RPA的磷酸化与RFWD3彼此依赖。因此，在受损细胞中RFWD3的丧失引起DNA损伤标志物γH2AX和修复蛋白Rad51的持久病灶。这些发现表明RFWD3被召集到DNA损伤位点并促进RPA介导的DNA损伤信号传导和修复。

尽管在我们的研究中未观察到RFWD3的调节，但检测到了相关成员WDR3即WD重复结构域3的上调。WDR3编码含有10个WD重复序列的核蛋白。WD重复序列是含有几个保守残基的约30至40个氨基酸的结构域，其通常在C末端包括trp-asp。属于WD重复序列家族的蛋白质参与各种不同的细胞过程，包括细胞周期进程、信号传导、凋亡和基因调控。

胰岛素样生长因子-I(IGF-I)信号传导与细胞生长强烈相关，并调控作为核糖体生物合成的第一和关键阶段的rRNA前体合成的速率。在被转化的细胞中，IGF-I诱导WDR3的表达。WDR3在40S核糖体亚基合成中，以及在癌细胞中向细胞周期进程的p53介导的调控的核糖体胁迫信号传导中，具有必不可少的作用。

前十个被上调基因中存在的两个其他基因与氧化胁迫相关。磷脂酰肌醇3-激酶PIK3CA已知参与对氧化胁迫的应答并作用于NRF2级联的上游。PIK3CA由85kDa的调控亚基和110kDa的催化亚基构成。由PIK3CA编码的蛋白代表所述催化亚基，其利用ATP将PtdIns、PtdIns4P和PtdIns(4,5)P2磷酸化。已发现PIK3CA是致癌性的，并且与宫颈癌有牵连。

核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)是一种调控大量细胞保护性基因的表达的氧化还原敏感的转录因子。抗癌药物芹菜素(APG)通过PIK3CA/Akt通路的下调在信使RNA和蛋白质两种水平上急剧降低Nrf2表达，引起Nrf2下游基因的降低。

为了抵消ROS和亲电剂介导的损伤，细胞可以诱导大量编码II阶段脱毒酶和抗氧化蛋白的基因。一种被称为抗氧化响应元件(ARE)或亲电响应元件(EpRE)的顺式作用的转录调控元件，介导多个基因例如血红素加氧酶-1、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、硫氧还蛋白还原酶、谷胱甘肽-S转移酶和NAD(P)H:醌氧化还原酶的转录激活。其他抗氧化酶例如超氧化物歧化酶和过氧化氢酶以及非酶清除剂例如谷胱甘肽，也参与清除ROS。Nrf2在ARE介导的抗氧化基因表达中发挥重要作用。Kelch样ECH结合蛋白-1(Keap1)通常在细胞质中与肌动蛋白细胞骨架相结合螯合Nrf2，但是在半胱氨酸残基氧化后，Nrf2从Keap1解离，易位到核并结合到ARE序列，引起抗氧化和II阶段脱毒基因的转录活化。蛋白激酶C(PKC)、有丝分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)和PIK3CA已被暗示与Nrf2/ARE信号传导的调控及其对抗持续氧化胁迫的保护活性有牵连。

RALBP1/RLIP76，即ralA1结合蛋白1，在受体介导的内吞作用中发挥作用，并且是小的GTP结合蛋白RAL的下游效应物。小的G蛋白例如RAL，具有GDP结合无活性和GTP结合有活性形式，其通过RALGDS的作用从无活性转变成有活性状态，所述RALGDS反过来被RAS激活。RALBP1是一种细胞表面蛋白，其催化还原型谷胱甘肽(GSH)偶联物从细胞挤出，这一过程是重要的脱毒机制的一部分。此外，已发现RALBP1参与线粒体分裂(确保线粒体向子代细胞的适合分配)，它的丧失与线粒体功能障碍包括能量生产受损相关。

在根据所选判据在所有时间点时处理后被诱导的82个基因中的61个剩余基因中，对与“DNA修复”和/或“氧化胁迫”共同被引的基因进行分析。

CCNG2、即周期蛋白G2，编码与生长抑制关联的非常规周期蛋白同系物周期蛋白G2(CycG2)。它的表达被有丝分裂原阻遏，但是在针对抗增殖信号的细胞周期停滞响应期间被上调。在HCT116细胞中，CCNG2的过表达诱导p53依赖性G(1)/S期细胞周期停滞，并且这种停滞响应还需要DDR检查点蛋白激酶Chk2。与这一发现相符，CCNG2表达增加Chk2在68位苏氨酸上的磷酸化。此外，诱导DNA双链断裂的化疗剂刺激CCNG2表达，并且将它的上调与检查点诱导的细胞周期停滞和毛细血管扩张性共济失调突变(ATM)和Rad3相关(ATR)信号传导通路中蛋白质的磷酸化修饰相关联。

CENPC1、即着丝粒蛋白C 1，是一种着丝粒自体抗原，并且是内部动粒板的一个组分。所述蛋白为维持适合的动粒大小和向分裂后期的及时转变所需。

已发现，编码使PIK3CA/AKT通路失活的脂质磷酸酶的PTEN中的广范围的突变与原发肿瘤相关。已报道了PTEN在控制染色体完整性中的核功能。PTEN的破坏引起广泛的着丝粒断裂和染色体易位。已发现PTEN定位在着丝粒处并与CENPC1物理结合。PTEN作用于染色质并调控RAD51的表达，后者降低自发DSB的发生率。这些结果证实，PTEN通过与着丝粒的物理相互作用和DNA修复的控制，在染色体稳定性的维持中发挥基础作用。已提出PTEN起到基因组完整性的守护者的作用。

DHX40/PAD/DDX40编码ATP依赖性RNA解旋酶的DExH/D盒家族的一个成员，其在RNA代谢例如pre-mRNA拼接、核糖体生物发生等中具有必不可少的作用。它含有DEAH(Asp-Glu-Ala-His)序列基序和其他保守基序。已发现，均参与DNA修复的该家族的近缘成员DEAH盒多肽30同工型1与PARP、即聚(ADP-核糖)聚合酶-1两者，在电离辐射后与H2AX发生短暂相互作用。

NAMPT、即烟酰胺磷酸核糖基转移酶，编码一种催化烟酰胺与5-磷酸核糖基-1-焦磷酸缩合以产生烟酰胺单核苷酸的蛋白质，所述缩合反应是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的生物合成中的一个步骤。所述蛋白质属于烟酸磷酸核糖基转移酶(NAPRTase)家族，并且据认为参与许多重要的生物过程，包括代谢、胁迫响应和衰老。

DNA DSB是最严重的DNA损伤形式，其主要通过高保真性同源重组(HR)或易错非同源末端接合(NHEJ)来修复。DNA损伤应答的缺乏造成基因组不稳定性，并且最终使器官倾向于癌症。NAMPT与CtIP和DNA-PKcs/Ku80物理结合，后两者分别是HR和NHEJ中的关键因子。通过小干扰RNA(siRNA)耗尽NAMPT，引起有缺陷的NHEJ介导的DSB修复并增强HR介导的修复。因此，已建议NAMPT是HR介导的DSB修复的抑制物和NHEJ介导的DSB修复的增强物，对细胞衰老的加速有贡献。

NCOR1、即核受体辅阻遏物1，编码一种通过促进染色质凝聚和阻止转录复合体接近来介导甲状腺激素和视黄酸受体的配体不依赖性转录阻遏的蛋白质。它是还包含组蛋白脱乙酰基酶例如Hdac3和类似于酵母蛋白Sin3p的转录调控物的复合体的一部分。

Hdac3对于高效DNA复制和DNA损伤控制来说是必不可少的。Hdac3的缺失削弱DNA修复，并极大降低染色质密实度和异染色质含量。这些缺点对应于在细胞周期的S期晚期中组蛋白H3K9、K14ac、H4K5ac和H4K12ac的增加。尽管HDAC3的表达仅在少量人类肝癌中被下调，但在三分之一的这些病例中HDAC3辅因子NCOR1的mRNA水平降低。NCOR1和SMRT(NCOR2)的siRNA靶向增加H4K5ac并引起DNA损伤，表明HDAC3/NCOR/SMRT轴对于维持染色质结构和基因组稳定性来说是关键的。

细胞衰老是抑制具有突变的细胞扩增的关键策略。衰老由对基因毒性和氧化胁迫做出响应而诱导。已显示，抑制氧化胁迫可诱导的基因的转录因子Bach1(BTB和CNC同源物1，碱性亮氨酸拉链转录因子1)，是氧化胁迫诱导的细胞衰老的关键负调控物。Bach1缺陷的鼠类胚胎成纤维细胞与对照野生细胞相比，显示出对氧化胁迫做出响应经历更快速深远的p53依赖性过早衰老的倾向性。Bach1形成含有p53、组蛋白脱乙酰基酶1和NCOR1的复合体。Bach1被召集到一部分p53靶基因，并通过促进组蛋白脱乙酰化而对妨碍p53作用有贡献。由于Bach1受到氧化胁迫和血红素调控，因此有可能Bach1作为p53的负调控物连接氧代谢和细胞衰老。

值得注意的是，与上述所有基因相反，HNRNPA2B1编码一种功能是阻断DNA修复的蛋白质。

HNRNPA2B1属于遍在表达的核不均一核糖核蛋白(hnRNP)的A/B亚家族。hnRNP是RNA结合蛋白，并且它们与核不均一RNA(hnRNA)复合。这些蛋白质与核中的pre-mRNA结合并显得影响pre-mRNA加工和mRNA代谢和运输的其他方面。尽管所有hnRNP都存在于核中，但有些hnRNP似乎在核与细胞质之间穿梭。

DNA DSB的基因组广度的作图揭示出DSB热点沿着染色体散在，并划分出受保护的50-250kb DNA结构域。已确定，约30％的所述结构域(被称为论坛结构域(forum domain))具有协同表达的基因，并且PARP1和HNRNPA2B1特异性结合论坛结构域末端处的DNA序列。

乳腺癌易感性基因1(BRCA1)的失活在一部分家族性乳腺癌和卵巢癌的发生中发挥显著作用，但是越来越多的证据指出也在散发性肿瘤中发挥作用。BRCA1是一种多功能核蛋白，参与许多核细胞过程包括DNA修复、细胞周期、转录和染色质重塑的调控。参与BRCA1网络的蛋白质的鉴定导致发现了HNRNPA2B1和KHSRP，它们的表达对BRCA1丧失做出响应而增加。此外，用针对HNRNPA2B1的siRNA处理减少HNRNPA2B1，诱导了更快速的DNA修复。考虑到这些结果，假设了在癌发生的早期阶段中发生的HNRNPA2B1的过表达抑制DNA-PK活性，引起随后DNA双链断裂的错误重连的积累，造成肿瘤进展。

根据这些基因，DNA修复应答是揭示出的主要过程。正如预期，这种应答与引起生长停滞的信号以及调控增殖和衰老的因子相关。通过基因PTPN11、SMARCE1、SRRT、SUMO1和TNFSF10验证了所有这些活性。

在这些基因中，TNFSF10/TRAIL的诱导在p53依赖性DNA损伤应答中有助于细胞死亡。该基因的表达可以表明，产物将首先引发诱导DNA损伤应答的信号，其进而会产生ROS生产，引起氧化胁迫。同时，将刺激保护性应答包括DNA修复和抗氧化活性。

下面描述的基因的持续上调证实，所述处理引起强烈的DNA双链断裂应答以及抗氧化效应，然而后者由针对ROS生产的DNA损伤信号引发。必须注意到，在3、9和24小时时被上调的其余基因既不与“DNA修复”和/或“氧化胁迫”显著相关，也不与共有功能相关。

因此，重要的是通过鉴定在3小时时被上调的基因来调查这种应答是如何起始的。

因此，在过滤出仅在3小时时在所有组合比率中的调节表现出≥1.45的倍数变化的基因的基础上，进行了更加剧烈的选择。

在根据这些标准选择的65个基因中，6个基因RAD50、SMC6、TDG、THOC2、UPF2和USP47与“DNA损伤”显著共同被引，同样支持了这一过程发生在对处理做出响应的早期阶段。

在具体在9和24小时时对处理做出响应被上调的基因中，观察到SDHD(琥珀酸脱氢酶复合物亚基D，整合膜蛋白)和TFAM(线粒体的转录因子A)的诱导。这些基因编码参与线粒体DNA修复和线粒体生物发生的蛋白质。

SDHD编码呼吸链的复合体II的成员，所述复合体负责琥珀酸的氧化。所编码的蛋白是将所述复合体锚定到线粒体内膜的基质侧的两个整合膜蛋白之一。SDHD的表达受到GABPA(GA结合蛋白转录因子，α亚基，60kDa)正调控，后者的表达在3小时时被观察到。

GABPA编码三个GA结合蛋白转录因子亚基之一，其起到DNA结合亚基的作用。由于该亚基与编码核呼吸因子2基因的亚基具有一致性，因此它可能参与细胞色素氧化酶表达的激活和线粒体功能的细胞核控制。

与SDHD相同，在9和24小时时观察到的TFAM的表达可以被GABPA或PPARGC1A/PGC-1(过氧化物酶体增殖物活化受体γ，辅激活物1α)诱导。

TFAM编码一种含有两个高迁移率组基序的关键线粒体转录因子。TFAM也在线粒体DNA复制和修复中起作用。此外，TFAM可以被AMPKA的ATM依赖性磷酸化激活。已报道ATM将AMP活化蛋白激酶(AMPK)的α亚基磷酸化，所述亚基感应细胞中的AMP/ATP比率，并且可以被上游激酶激活。事实上，在探测到双链DNA断裂(DSB)之后，ATM通过自磷酸化被激活，并将大量用于DNA修复、细胞周期调控和凋亡的底物磷酸化。已报道，DNA损伤例如DSB刺激线粒体生物发生。正如较早时在这份报告中提到的，对DSB做出响应的主要参与者是ATM(毛细血管扩张性共济失调突变)。

值得注意的是，线粒体具有它们自己的基因组，其对于细胞中大部分ATP生产所需的正确氧化磷酸化来说是必不可少的。线粒体DNA(mtDNA)对氧化胁迫高度易感，并且mtDNA损伤导致线粒体功能障碍。

同样地，在9和24小时时观察到MRE11A的诱导。MRE11A(减数分裂重组11同源物A)与RAD50/NBS1形成复合体，其起到ATM的双链断裂感应器的作用，并将ATM召集到断裂的DNA分子。在体外，无活性的ATM二聚体在这种复合体存在下被DNA激活，导致下游细胞靶p53和Chk2的磷酸化。MRE11A编码参与同源重组、DNA双链断裂修复和端粒长度维持的核蛋白。

BRD3(含有溴结构域的蛋白3)也在9和24小时时被诱导。它基于与编码RING3蛋白这种丝氨酸/苏氨酸激酶的基因的同源性而被鉴定。溴结构域蛋白Brd2和BRD3(后者在9和24小时时被诱导)在体内偏好性地与沿着被转录基因的整个长度的超乙酰化的染色质结合。结合有Brd2和BRD3的染色质显著富含H4K5、H4K12和H3K14乙酰化，并含有相对少的二甲基化H3K9。在限定的转录系统中，Brd2和BRD3两者都允许RNA聚合酶II转录通过核小体。

与这一网络相关，在9和24小时时，对处理做出响应诱导了由SMARCA2/BRM1(SWI/SNF相关的基质结合的肌动蛋白依赖性染色质调控物，亚家族a，成员2)编码的另一种染色质调控物。该家族的成员具有解旋酶和ATP酶活性，并且据认为通过改变某些基因周围的染色质结构来调控这些基因的转录。所编码的蛋白是大的ATP依赖性染色质重塑复合体SNF/SWI的一部分，所述复合体为正常情况下被染色质阻遏的基因的转录激活所需。另外，这种复合体的失活降低细胞存活率。

DMTF(周期蛋白D结合性myb样转录因子1)在9和24小时时被诱导。它是一种含有周期蛋白D结合性结构域、三个中央Myb样重复序列以及N和C末端处的两个侧翼酸性反式激活结构域的转录因子。DMTF被致瘤的Ras信号传导通路诱导，并通过激活ARF的转录并因此激活ARF-p53通路以阻滞细胞生长或诱导凋亡，而起到肿瘤抑制物的作用。已发现，在哺乳动物细胞中，DMTF1和p53可以通过p53的羧基末端和DMTF1的DNA结合结构域直接相互作用。DMTF1的表达拮抗了p53被Mdm2的泛素化并促进p53的核定位。DMTF1-p53结合不依赖于DMTF1的DNA结合活性显著提高p53的水平。

肿瘤抑制蛋白p53的活化是对各种不同的胁迫刺激和促进生长的蛋白质例如Myc、Ras、E2F和β-连环蛋白的不适当活性的关键的细胞应答。p53的蛋白稳定性和转录活性受到蛋白质-蛋白质相互作用和翻译后修饰包括乙酰化的调节。

在处理后9和24小时时被试验霜剂诱导的另一个基因PTMA(前胸腺素α)能够刺激p53响应性报告基因的转录。结果，在报告基因测定法中，通过RNA干扰方法下调内源PTMA抑制了p53肿瘤抑制物的转录水平。PTMA是一种12-kDa的酸性蛋白，具有多种生物功能。其功能之一是通过它与Keap1蛋白的相互作用增强细胞的抗氧化防御系统的能力。Keap1是负责编码防御性蛋白的基因的激活的转录因子NFE2L2/NRF2的阻遏物。当结合到NFE2L2/NRF2时，Keap1将NFE2L2/NRF2从核输出到细胞质，并且作为泛素蛋白连接酶的接头蛋白，促进NRF2的泛素化及其随后被26S蛋白酶体的降解。PTMA和NRF2竞争与Keap1的相互作用，因此，PTMA能够将NRF2从与Keap1形成的复合物中释放，并因此有助于NRF2依赖性转录。此外，PTMA通过调节Keap1/Cul3-Rbx1的核输入以便降低核中的NFE2L2/NRF2水平，允许细胞返回到正常状况，而在NFE2L2/NRF2信号传导通路中发挥反馈作用。一旦在核中之后，PTMA从Keap1/Cul3-Rbx1复合物解离，允许NFE2L2/NRF2结合到所述复合物以备降解。因此，PTMA通过将Keap1与NRF2解离或通过降解NRF2以关闭维持保护性活性的准确体内平衡所需的NRF2下游基因表达的激活，触发NRF2活性的紧密控制。

转录因子NFE2L2/NRF2在所有组织中组成性表达，尽管在不同器官中水平可能不同，其中关键的脱毒器官(肾脏和肝脏)表现出最高水平。NFE2L2/NRF2还可以被细胞胁迫物包括内源反应性氧物质或外源亲电剂诱导。通过激活在药物和毒素代谢、对抗氧化胁迫和炎症的保护中关键的以及在蛋白质的稳定性和通过蛋白酶体降解或自吞噬除去受损蛋白中发挥整体作用的超过200个基因的转录，NFE2L2/NRF2信号传导通路介导多种细胞保护手段。NFE2L2/NRF2与其他重要的细胞调控物例如肿瘤抑制物蛋白53(p53)和核因子-κβ(NF-κB)相互作用，并通过它们的组合相互作用成为健康寿命的守护者，针对许多与衰老相关的疾病包括癌症和神经变性提供保护。

与p53调控相关，已发现ZEB1/DELTAEF1在角化细胞分化期间在p53家族成员的转录调控中发挥作用。

与DNA修复的诱导相一致，对使用试验霜剂的处理做出响应的几种被阻遏的基因参与生长停滞，并支持所述处理抑制增殖并诱导DNA修复这一事实。那些被阻遏的基因在下文中列出。

其中，在3小时时IGF2(胰岛素样生长因子2)被阻遏。它是参与生长和细胞增殖的多肽生长因子的胰岛素家族的成员。IGF2诱导KRT19的表达。作为结果，在我们的研究中，在9小时时KRT19也被阻遏。KRT19编码负责上皮细胞的结构完整性的角蛋白中间丝蛋白，并且被细分为细胞角蛋白和毛发角蛋白。I型细胞角蛋白由酸性蛋白质构成，其排列成成对的异型角蛋白链。KRT19具体表达在周皮中，所述周皮是包围正在发育的表皮的暂时性浅表层。当过表达时，IGF2与细胞过度增殖期间基质金属蛋白酶7(MMP7)的诱导相关。IGF2、KRT19和MMP7的阻遏支持降低细胞过度增殖的可能性。

已知LIF(白血病抑制因子)引发STAT3的强烈酪氨酸磷酸化和特异性DNA结合活性，所述STAT3是G1到S期细胞周期转变所必需的转录因子，因此与细胞增殖相关。在这里，LIF在3小时时被阻遏。

同样地，SERTAD3具有两个具有短的mRNA半衰期的转录本变体，并且所述变体之一在细胞周期的整个G1和S期中被严密调控。SERTAD3的过表达在体外诱导细胞转化并在小鼠中诱导肿瘤形成，然而通过小干扰RNA(siRNA)抑制SERTAD3引起细胞生长速率的降低。在这里，SERTAD3在9和24小时时被阻遏。

由S100A3编码的S100钙结合蛋白A3是含有2个EF-手钙结合基序的蛋白质的S100家族的成员。S100A3位于广范围的细胞的细胞质和/或核中，并参与多种细胞过程例如细胞周期进程和分化的调控。S100A3在24小时时被阻遏。

类似于S100A3，毛透明蛋白TCHH为表皮结构蛋白和钙结合蛋白编码，两种蛋白都位于染色体基因座1q21处。基因座1q21构成被称为表皮分化复合体的基因复合体。TCHH在24小时时被阻遏。

最后，由TAGLN基因编码的转凝蛋白是在成纤维细胞和平滑肌中发现的一种对转化和形状变化敏感的肌动蛋白交联/胶凝蛋白。在许多细胞系中它的表达被下调，在我们的研究中在3小时时情况也是如此，并且这种下调可能是转化发生的早期和灵敏的标志物。

本发明的转录组学研究表明，所述试验霜剂刺激皮肤(即角化细胞、成纤维细胞等)的皮肤固有防御，以对抗氧化胁迫并且甚至更强烈地对抗DNA损伤。鉴定到了一种重要的上游因子ABL2/ARG，其可以被认为是这两个过程之间的联系。事实上，所述保护效果据信依赖于ABL2/ARG与CAT相互作用以减少氧化缺陷以及与RAD51相互作用以刺激DNA修复响应的能力。这种DNA修复响应主要靶向DNA双链断裂的修复，正如由编码与该特定过程相关的蛋白质的大量基因所说明的。

对所述试验霜剂做出响应而刺激的上游信号传导据信依赖于ATM(毛细血管扩张性共济失调突变)通路的激活，其涉及ABL2/ARG和RAD50。值得注意的是，通过前胸腺素α(PTMA)的上调表达确保了Nrf2活性的紧密控制，以保护所述响应的体内平衡。此外，抗氧化和DNA修复应答与引起生长停滞的信号相关，以避免在修复过程完全实现之前不健康的细胞的繁殖。

蛋白质表达结果。

对来自于用试验霜剂、基本霜剂处理7天的皮肤外植体和未处理的外植体的横断切片在第3和7天进行针对过氧化氢酶的免疫染色。具体来说，将外植体横断切片与抗过氧化氢酶抗体反应，以可视化过氧化氢酶的存在。

图1是比较了皮肤外植体样本所表现出的CAT免疫染色的程度的图，其中B0表示在37℃和加湿、5％-CO₂气氛中在BEM培养基中维持存活24小时的未处理的外植体；ED3表示用1mg基本霜剂每天处理两次共3天的外植体；PJ3表示用1mg试验霜剂每天处理两次共3天的外植体；EJ7表示用1mg基本霜剂每天处理两次共7天的外植体；PJ7表示用1mg试验霜剂每天处理两次共7天的外植体。

图1证实了在用试验霜剂每天处理两次共7天的外植体PJ7中，角质层中的免疫染色程度最强。

形态学结果。

对对照皮肤外植体和用试验霜剂和基本霜剂处理的皮肤外植体的横断切片进行用于组织学分析的处理，以显示出皮肤层的形态。将样品切片按照Masson’s三色法Goldner变化形式进行染色。样品的显微镜观察使用Leica DMLB或Olympus BX43显微镜来实现。将照片用Olympus DP72相机和Cell^D数据储存软件进行数字化。描述了试验霜剂对改善衰老皮肤以及所述皮肤的各个不同层或组分的品质的益处，并与基本霜剂处理的样品和未处理的样品进行比较。

对于所有外植体横断切片来说，在第0天的总体形态揭示出厚、适度分层、在表面适度角化并且基部清晰的角质层。表皮呈现出具有良好形态的4至5个细胞层。真皮-表皮连接部的缓解清晰。乳突真皮层呈现出厚的胶原蛋白束，形成相当致密的网络。它是充分细胞化的。在3h、9h和24h，无论何时进行处理，总体形态不改变。

在第3天，对照皮肤外植体和用基本霜剂处理的皮肤外植体表现出与在第0天观察到的相似的总体形态。用试验霜剂处理的皮肤外植体表现出表皮网嵴的明显增加。

在第7天，对照皮肤外植体和用基本霜剂处理的皮肤外植体再次表现出与在第0天观察到的相似的总体形态。用试验霜剂处理的皮肤外植体表现出细胞层数目的适度增加(6至7层)，并且乳突真皮层略微致密化。

总的来说，试验霜剂诱导了以表皮厚度适度增加(从4-5个细胞层到6-7个细胞层)为特征的适度表皮刺激。试验霜剂还增加了表皮网嵴的缓解并提高乳突真皮层中胶原蛋白网络的致密化。相反，对照皮肤外植体和基本霜剂外植体没有显示出值得注意的皮肤改变。

实施例3：针对来自于UV辐射的损伤的保护效应

通过在按照Nrf2免疫染色和胸腺嘧啶二聚体免疫染色对皮肤外植体进行染色后观察总体形态，研究了试验霜剂对暴露于UV-A和UV-B的处理过的皮肤外植体的保护效应。

皮肤外植体从47岁女性供体获得，并在处理前在37℃和加湿的5％-CO₂气氛下温育24h。在D0、D1、D2和D5，将试验和基本霜剂表面施用(早晨1mg，晚上1mg)在外植体的表面上，并用小刮刀涂抹。

在D6，将皮肤外植体留置不辐照或使用Vilbert Lourmat UV模拟器RMX 3W以9J/cm2UV-A(2DEM)和0.3J/cm2UV-B(2DEM)的剂量辐照。在辐照之前，将外植体在HBSS培养基中培养。未辐照的批次保持在暗处。在辐照后，将所有外植体在BEM中培养。在辐照后6小时获取每个外植体的样品进行免疫染色。

Nrf2免疫染色。

Nrf2免疫染色在石蜡化切片上，使用1/100稀释的小鼠抗人类Nrf2多克隆抗体(Santa Cruz ref.Sc-722)，在室温下进行2小时。染色使用Vector’s Vectastain试剂盒和Vector’s VIP过氧化物酶底物，利用亲和素/生物素放大系统来揭示。

Nrf2是对氧化胁迫的细胞应答中的关键转录因子。人类Nrf2具有66kDa的预测分子量，并遍在表达在广范围的组织和细胞类型中。在氧化胁迫包括UV辐射下，Nrf2通过磷酸化被激活并从细胞质易位到细胞核。到目前为止，已显示不同的胞浆激酶包括蛋白激酶C(PKC)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)和ER定位的胰内质网激酶(PERK)修饰Nrf2，并可能参与Nrf2与其抑制剂Keap1的解离。一旦进入细胞核，Nrf2在也被称为hARE(人类抗氧化响应元件)的抗氧化响应元件(ARE)位置处结合DNA，所述元件是总的抗氧化系统的主要调控物。

图2是比较皮肤外植体样本所表现出的Nrf2免疫染色的程度的图，其中B0表示在37℃和加湿、5％-CO₂气氛中在BEM培养基中维持存活24小时的未处理的外植体；BD6表示在37℃和加湿、5％-CO₂气氛中在BEM培养基中维持存活6天的未处理的外植体；BUVD6表示在37℃和加湿、5％-CO₂气氛中在BEM培养基中维持存活6天并在第6天暴露于UV辐射的未处理的外植体；EUVD6表示用1mg基本霜剂每天处理两次共3天并在第6天暴露于UV辐射的外植体；PUVD6表示用1mg试验霜剂每天处理两次共3天并在第6天暴露于UV辐射的外植体。所有样品在UV暴露后6小时进行免疫染色。

在24小时后(B0)，更显著地在6天后(BD6)，在两种未处理的皮肤外植体中清楚地存在Nrf2。这代表了Nfr2基因的基线间歇表达。在UV辐射后，未处理的外植体(BUVD6)和用基本霜剂处理的外植体(EUVD6)表现出Nrf2浓度的显著降低，而用试验霜剂处理的外植体(PUVD6)与BUVD6和EUVD6相比经历了Nrf2的更少降低。这表明试验霜剂通过提高Nfr2基因的表达并使更多的Nfr2可用于易位和保护性酶的翻译，部分抑制了UV-A和UV-B对表皮的负面效应。

胸腺嘧啶二聚体免疫染色。

胸腺嘧啶二聚体免疫染色在石蜡化切片上，使用1/1000稀释的小鼠抗人类胸腺嘧啶二聚体Kamiya单克隆抗体(ref.MC-062)克隆KTM53，在室温下进行1h。染色使用Vector’sVectastain试剂盒和Vector’s VIP过氧化物酶底物，利用亲和素/生物素放大系统来揭示。免疫染色通过显微镜观察并通过使用Cell^D软件的图像分析来评估。

紫外光被DNA中的胸腺嘧啶和胞嘧啶碱基中的双键吸收。这种附加的能量打开所述双键并允许它与邻近的碱基反应。如果所述邻近碱基是另一个胸腺嘧啶或胞嘧啶碱基，它可以在两个碱基之间形成共价键。这些二聚体是不适合的并在DNA中形成僵硬的扭结。因此，当细胞需要复制其DNA时，这种事件的影响是有害的。DNA聚合酶难以读取所述二聚体，因为它不平滑地契合到活性位点中。

图3是示出了胸腺嘧啶二聚体阳性表面的百分率的图。对于用UV处理的皮肤外植体来说，胸腺嘧啶二聚体的表达通过图像分析来定量。对于这些批次，表皮中被胸腺嘧啶二聚体标记的表面的百分率被概述在下面的表和图3中。

表.被胸腺嘧啶二聚体标记的表面的百分率

在用UV-A和UV-B辐照的皮肤外植体上(BUVD6)，发现7.7％的表面对胸腺嘧啶二聚体免疫染色为阳性。相反，在用试验霜剂处理并用UV-A和UV-B辐照的皮肤外植体上(PUVD6)，发现仅有5.5％的表面对胸腺嘧啶二聚体免疫染色为阳性，显示出在UV-A和UV-B辐照后胸腺嘧啶二聚体的形成程度降低29％。在用基本霜剂处理的皮肤外植体上(EUVD6)，发现8.6％的表面对胸腺嘧啶二聚体免疫染色为阳性。

本文中描述和要求权利的发明不限于本文中公开的特定实施方式的范围，因为这些实施方式旨在说明本发明的几种情况。事实上，对于本领域技术人员来说，从上面的描述可以明显看出除了本文中示出并描述的之外的本发明的各种不同修改。这些修改也打算落于权利要求书的范围之内。

Claims (32)

1.一种组合物，其包含：

选自下列的一种或多种芥属(Brassica)植物提取物：芥菜(Brassica juncea)提取物，意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)提取物，结球甘蓝(Brassica oleraceacapitata)提取物，花椰菜(Brassica oleracea botrytis)提取物和羽衣甘蓝(Brassicaoleracea acephala)提取物；

选自下列的一种或多种物质：姜黄(Curcuma longa)提取物，姜黄素类化合物，四氢姜黄素类化合物，姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的代谢物，和姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的衍生物；

选自下列的一种或多种物质：油茶(Camellia oleifera)提取物，茶树(Camelliasinensis)提取物，绿茶提取物和白茶提取物；

山萮菜(Wasabia japonica)提取物；

假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物；

水飞蓟(Silybum marianum)提取物，以及

黑胡椒(Piper nigrum)提取物或四氢胡椒碱中的一者或两者。

2.权利要求1的组合物，其中所述一种或多种芥属(Brassica)植物提取物包含芥菜(Brassica juncea)提取物、意大利甘蓝(Brassica oleracea italica)提取物、结球甘蓝(Brassica oleracea capitata)提取物、花椰菜(Brassica oleracea botrytis)提取物和羽衣甘蓝(Brassica oleracea acephala)提取物。

3.权利要求1的组合物，其还包含长叶车前草(Plantago lanceolata)提取物。

4.权利要求1的组合物，其中所述四氢姜黄素类化合物的衍生物是选自下列的一种或多种物质：四氢二阿魏酰基甲烷，四氢去甲氧基二阿魏酰基甲烷和四氢双去甲氧基二阿魏酰基甲烷。

5.权利要求1的组合物，其中所述组合物包含假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物、水飞蓟(Silybum marianum)提取物、四氢胡椒碱和四氢姜黄素类化合物。

6.权利要求6的组合物，其中所述假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物、水飞蓟(Silybum marianum)提取物、四氢胡椒碱和四氢姜黄素类化合物分别以至少2:2:1:1的量比存在。

7.一种治疗哺乳动物受试者的皮肤的方法，所述方法包括：

以在所述哺乳动物受试者中有效刺激皮肤固有防御的量向所述受试者的皮肤施用权利要求1的组合物。

8.权利要求7的方法，其中所述皮肤固有防御是选自下列的一种或多种：

(a)在所述哺乳动物受试者中控制Nrf2靶基因的转录和受Nrf2调控的通路以恢复或维持所需的细胞氧化还原平衡；

(b)上调Nrf2靶基因；

(c)在所述哺乳动物受试者中恢复或维持所需的内源Nrf2细胞水平；

(d)通过Nrf2经磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)的细胞质磷酸化并通过形成阻止受Nrf2调控的基因的永久诱导的核复合体Nrf2-胸腺素α原(PTMA)，调控Nrf2活性；

(e)提高所述哺乳动物受试者中过氧化氢酶的量和活性；

(f)维持表皮细胞凋亡与表皮细胞过度增殖之间的平衡；

(g)抑制在暴露于UV-A和UV-B辐射后胸腺嘧啶二聚体的产生；

(h)修复DNA双链断裂并调节细胞周期进程以允许DNA修复；以及

(i)增加皮肤的厚度、表皮网嵴的缓解和/或乳突真皮层中胶原蛋白网络的密度。

9.权利要求8的方法，其中所述Nrf2靶基因是选自下列的一个或多个基因：过氧化氢酶(CAT)基因，转录激活因子3(ATF3)基因和过氧化物氧化还原酶3(PRDX3)基因。

10.权利要求8的方法，其中所述(h)修复DNA双链断裂并调节细胞周期进程以允许DNA修复，由选自下列的一个或多个基因的上调触发：BCLAF1，BRCC3，GHR，IMMT，SENP7，SMC1A，PTPN11，SMARCE1，SRRT，SUMO1和TNFSF10。

11.一种组合物，其包含：

选自下列的一种或多种物质：姜黄(Curcuma longa)提取物，姜黄素类化合物，四氢姜黄素类化合物，以及姜黄素类化合物和/或四氢姜黄素类化合物的代谢物和/或衍生物；

选自下列的一种或多种物质：油茶(Camellia oleifera)提取物，茶树(Camelliasinensis)提取物，绿茶提取物和白茶提取物；

假马齿苋(Bacopa monnieri)提取物；

水飞蓟(Silybum marianum)提取物，以及

黑胡椒(Piper nigrum)提取物或四氢胡椒碱中的一者或两者。

12.权利要求11的组合物，其中所述组合物包含假马齿苋(Bacopa monnieri)、水飞蓟(Silybum marianum)、白茶提取物、四氢胡椒碱和姜黄(Curcuma longa)提取物。

13.权利要求12的组合物，其中所述假马齿苋(Bacopa monnieri)、水飞蓟(Silybummarianum)、白茶提取物、四氢胡椒碱和姜黄(Curcuma longa)提取物分别以至少7:7:7:2:1的量比存在。

14.一种治疗哺乳动物受试者的皮肤的方法，所述方法包括：

以在所述哺乳动物受试者中有效刺激皮肤固有防御的量向所述受试者的皮肤施用权利要求11的组合物。

15.权利要求14的方法，其中所述皮肤固有防御是选自下列的任一种或其组合：

(a)在所述哺乳动物受试者中控制Nrf2靶基因的转录和受Nrf2调控的通路以恢复或维持所需的细胞氧化还原平衡；

(b)上调Nrf2靶基因；

(c)在所述哺乳动物受试者中恢复或维持所需的内源Nrf2细胞水平；

(d)通过Nrf2经磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)的细胞质磷酸化并通过形成阻止受Nrf2调控的基因的永久诱导的核复合体Nrf2-胸腺素α原(PTMA)，调控Nrf2活性；

(e)提高所述哺乳动物受试者中过氧化氢酶的量和活性；

(f)维持表皮细胞凋亡与表皮细胞过度增殖之间的平衡；

(g)抑制在暴露于UV-A和UV-B辐射后胸腺嘧啶二聚体的产生；

(h)修复DNA双链断裂并调节细胞周期进程以允许DNA修复；以及

(i)增加皮肤的厚度、表皮网嵴的缓解和/或乳突真皮层中胶原蛋白网络的密度。

16.权利要求15的方法，其中所述Nrf2靶基因是选自下列的一个或多个基因：过氧化氢酶(CAT)基因，转录激活因子3(ATF3)基因和过氧化物氧化还原酶3(PRDX3)基因。

17.权利要求15的方法，其中所述(h)修复DNA双链断裂并调节细胞周期进程以允许DNA修复，由任一个或多个下列基因的上调触发：BCLAF1，BRCC3，GHR，IMMT，SENP7，SMC1A，PTPN11，SMARCE1，SRRT，SUMO1和TNFSF10。

18.一种组合物，其包含：

一种或多种异硫氰酸酯；

选自下列的一种或多种物质：姜黄(Curcuma longa)提取物，姜黄素类化合物，四氢姜黄素类化合物，姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的代谢物，和姜黄素类化合物或四氢姜黄素类化合物的衍生物；

一种或多种苯基丙烷类化合物；以及

四氢胡椒碱。

19.权利要求18的组合物，其中所述一种或多种异硫氰酸酯以500-1,500ppm的量存在于所述组合物中。

20.权利要求18的组合物，其中所述一种或多种异硫氰酸酯包含萝卜硫素。

21.权利要求18的组合物，其中所述一种或多种苯基丙烷类化合物是大车前苷。

22.权利要求21的组合物，其中所述大车前苷以500至1,500ppm的量存在于所述组合物中。

23.权利要求18的组合物，其还包含选自下列的一种或多种物质：油茶(Camelliaoleifera)提取物，茶树(Camellia sinensis)提取物和白茶提取物。

24.权利要求18的组合物，其还包含一种或多种假马齿苋素。

25.权利要求24的组合物，其中所述一种或多种假马齿苋素包含假马齿苋素A。

26.权利要求18的组合物，其还包含一种或多种黄酮木酯素。

27.权利要求26的组合物，其中所述一种或多种黄酮木酯素是选自水飞蓟素、水飞蓟宾、水飞蓟亭、水飞蓟宁、脱氢水飞蓟宾、脱氧水飞蓟亭、脱氧水飞蓟宁、水飞蓟兰君、silybinome、silyhermin和neosilyhermin中的一者或多者。

28.权利要求26的组合物，其还包含四氢胡椒碱。

29.一种治疗哺乳动物受试者的皮肤的方法，所述方法包括：

以在所述哺乳动物受试者中有效刺激皮肤固有防御的量向所述受试者的皮肤施用权利要求18的组合物。

30.权利要求29的方法，其中所述皮肤固有防御是选自下列的任一种或其组合：

(a)在所述哺乳动物受试者中控制Nrf2靶基因的转录和受Nrf2调控的通路以恢复或维持所需的细胞氧化还原平衡；

(b)上调Nrf2靶基因；

(c)在所述哺乳动物受试者中恢复或维持所需的内源Nrf2细胞水平；

(d)通过Nrf2经磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)的细胞质磷酸化并通过形成阻止受Nrf2调控的基因的永久诱导的核复合体Nrf2-胸腺素α原(PTMA)，调控Nrf2活性；

(e)提高所述哺乳动物受试者中过氧化氢酶的量和活性；

(f)维持表皮细胞凋亡与表皮细胞过度增殖之间的平衡；

(g)抑制在暴露于UV-A和UV-B辐射后胸腺嘧啶二聚体的产生；

(h)修复DNA双链断裂并调节细胞周期进程以允许DNA修复；以及

(i)增加皮肤的厚度、表皮网嵴的缓解和/或乳突真皮层中胶原蛋白网络的密度。

31.权利要求30的方法，其中所述Nrf2靶基因是选自下列的一个或多个基因：过氧化氢酶(CAT)基因，转录激活因子3(ATF3)基因和过氧化物氧化还原酶3(PRDX3)基因。

32.权利要求30的方法，其中所述(h)修复DNA双链断裂并调节细胞周期进程以允许DNA修复，由任一个或多个下列基因的上调触发：BCLAF1，BRCC3，GHR，IMMT，SENP7，SMC1A，PTPN11，SMARCE1，SRRT，SUMO1和TNFSF10。