CN106455600A - 含低聚半乳糖和单糖的减乳糖乳产品以及生产方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种在低温下利用具有高水平转半乳糖基活性的β‑半乳糖苷酶生产含低聚半乳糖(GOS)的乳产品的方法。此外，本发明涉及所得乳产品，这些乳产品包含GOS和单糖甜味剂，这些单糖甜味剂的特征在于葡萄糖与半乳糖间的重量比为至少2:1。

Description

含低聚半乳糖和单糖的减乳糖乳产品以及生产方法
发明领域
本发明涉及一种在低温下利用具有高水平转半乳糖基活性的β-半乳糖苷酶生产含低聚半乳糖(GOS)的乳产品的方法。此外，本发明涉及所得乳产品，这些乳产品包含GOS和单糖甜味剂，这些单糖甜味剂的特征在于葡萄糖与半乳糖间的重量比为至少2:1。
背景技术
低聚半乳糖(GOS)长期以来一直被认为是健康促进剂，它充当哺乳动物肠胃系统内多种有益菌株的生长因子。GOS的摄取已经与降低的患上腹泻和其他肠胃感染的风险以及强化的免疫系统相关联。参见例如麦克法兰(Macfarlane)等人(消化药理学与治疗学(Aliment Pharmacol Ther)24，701–714)。
GOS已被用作婴儿配方产品的功能性食品成分，且已被建议用于多种不同食品应用中。
最初在脱脂乳中直接生产GOS的尝试先前报道在罗德里格斯-科里纳斯(Rodrigues-Colinas)2012(罗德里格斯-科里纳斯等人；农业化学和食品化学杂志(J.Agric.Food Chem.)2012，60，6391-6398)中，但GOS的最高收率仅为约0.7％(w/w)，对应于约15％的总碳水化合物。
类似的方法描述在利用两种不同孵育温度(4℃和40℃)的罗德里格斯-科里纳斯(Rodrigues-Colinas)2014(罗德里格斯-科里纳斯等人；食品化学(Food Chemistry)145(2014)，388-394)中。获得了包括痕量GOS-DP4在内的仅为0.8％(w/w)的GOS含量。
WO 2013/182,686还建议在乳和酸奶中合成GOS。然而，WO 2013/182,686既没有提供关于此类含GOS乳的化学组成的具体细节，也没有提供在合成期间使用低温。
发明内容
诸位发明人对用于制备长保质期产品的含GOS乳产品特别感兴趣，这些长保质期产品是诸如长保质期液体乳产品或长保质期粉末状乳产品。
诸位发明人已经发现，GOS含量为至少0.9％(w/w)、单糖含量为至多3.0％(w/w)，且葡萄糖与半乳糖间的重量比为至少2:1的液体乳产品尤其适合用于制备长保质期产品，且已经看到此类产品具有改进的稳定性和感官性质的迹象。
因此，本发明的一个方面涉及pH为至少5.0的液体乳产品，该液体乳产品包含：
-至少0.9％(w/w)GOS，
-至多3％(w/w)乳糖，和
-之间的重量比为至少2:1的葡萄糖和半乳糖。
例如，该液体乳产品可具有总含量为至多3.0％(w/w)的单糖。
在本发明的上下文中，术语“低聚半乳糖”或“GOS”是指具有化学计量式(Gal)iGlc或(Gal)j的低聚糖，其中i＝1-8且j＝2-9。GOS通常作为具有不同聚合度和不同键联结构的各种GOS分子的混合物而存在。该混合物可包括直链GOS分子和支链GOS分子两者。乳糖不被视为GOS分子。
附图简要说明
图1示出已经在8℃下用BIF917酶处理24小时的脱脂乳样品中碳水化合物的分布。
发明详细说明
本发明的一个宽泛方面涉及pH为至少5.0的液体乳产品，该液体乳产品包含：
-至少0.9％(w/w)GOS，
-至多3％(w/w)乳糖。
例如，该液体乳产品可另外包含总量为至少0.1％(w/w)的葡萄糖和半乳糖。
该液体乳产品可另外具有之间的重量比为至少2:1的葡萄糖与半乳糖。
诸位发明人已发现，上述液体乳产品提供改进的甜味/可消化碳水化合物卡路里的乳产品。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有总含量为至多3.0％(w/w)的单糖。
该液体乳产品可以例如通过本文所述方法获得。
有时，此外优选的是，该液体乳产品尚未在其整个处理过程中加热至高于10℃的温度持续超过30分钟，且优选地不持续超过15分钟。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有至多5100EU脂多糖(LPS)/升，且任选地甚至更少含量的脂多糖。例如，该液体乳产品可以具有至多1000EU LPS/升含量的脂多糖。该液体乳产品可以例如具有至多200EU LPS/升含量的脂多糖。
与革兰氏阳性菌相反，革兰氏阴性菌的外膜包含脂多糖(LPS)，所述脂多糖为内毒素。单个细菌细胞包含约3.5x 106个LPS分子。LPS是一种复杂的、带负电的分子，它由以下项组成：称为O-特异性链的远侧多糖链、核心多糖和称为脂质A的脂质部分。LPS充当内毒素，导致在动物和人类体内诱导强烈的炎症反应，且参与若干疾病如败血症的发展。LPS的毒性部分是脂质A部分，它由两个磷酸化的葡糖胺残基和至少6个脂肪酸组成。这两个磷酸酯基团对LPS的生物活性至关重要。如果掺入革兰氏阴性菌细胞膜的外部叶状结构中，LPS分子是相对无毒的，因为脂质A部分或多或少地被收起来。然而，当分裂中的或垂死的细菌自发地将LPS释放到哺乳动物循环中时，它可与若干蛋白质相互作用，这些蛋白质是诸如白蛋白、乳铁蛋白、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和细菌通透性增加蛋白(BPI)。就此而言，LPS结合蛋白(LBP)是最重要的蛋白。LBP-LPS复合物在从髓系细胞(巨噬细胞、单核细胞和多形核白细胞)的膜释放后结合至CD 14(‘分化簇14’)。CD 14需要辅助受体复合物toll样受体4/髓样分化-2复合物(TLR4/MD-2)来在细胞中起始细胞信号转导级联。这个级联促进NF-KB的核转运和促炎性细胞因子如肿瘤坏死因子α(TNFcc)的转录。TNFcc和其他促炎性细胞因子诱导血管渗透性、增强的血流和向LPS源的中性粒细胞募集以及全身性反应如发烧。在高浓度下，LPS通过过度刺激TLR4信号传导而变得有毒，导致过量的炎症反应，这导致不良反应如败血性休克。已将对LPS或其他细菌抗原(例如鞭毛蛋白或T细胞表位)的异常免疫反应与炎性肠病(IBD)和坏死性小肠结肠炎(NEC)联系起来。NEC主要影响早产儿，且被认为是由对出生后寄居肠道的共生生物的未成熟免疫反应引起。
早产儿可能具有受损的LPS感知，因为他们错过了来自TLR4诱导的信号传导途径的必要分子，且因此新生儿在微生物寄居未成熟肠时易患NEC，因为脊椎动物所遇到的LPS的最丰富来源之一是他们的肠道寄居微生物群。这些肠道微生物群在成年宿主中不会引发病理性炎症。还有迹象表明，LPS在诱导全身性炎症中起到重要作用。因为新生儿在他们生命的头几个月期间具有较高的肠上皮渗透性，所以病原性物质跨过上皮屏障并在儿童体内诱导炎症的几率较高。
生乳可以包含大量革兰氏阴性菌。出于健康安全考虑，在食品中，包括革兰氏阴性菌在内的细菌通过巴氏灭菌和消毒技术而被杀死。遗憾的是，杀死革兰氏阴性菌不会造成革兰氏阴性菌的膜完全降解，且LPS分子大体上保持完好，且因此被释放到组合物中。此外，在食品组合物加工期间，LPS因食品加工技术引起的剪切力而从细菌壁释放。LPS在100℃下具有热稳定性，且可以在食物产品加工期间存活。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品包含已经用于乳内GOS生产中的失活β-半乳糖苷酶。失活β-半乳糖苷酶可以是例如热致失活的β-半乳糖苷酶。在本发明的上下文中，术语“失活酶”意指该酶已被变性、改性或降解，且已丧失其β-半乳糖苷酶活性。
在本发明的一些实施例中，该液体乳产品具有总含量为至多15％(w/w)的碳水化合物。该液体乳产品可具有总含量为至多10％(w/w)的碳水化合物。该液体乳产品可例如具有总含量为至多5％(w/w)的碳水化合物。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至多3％(w/w)的碳水化合物。例如，在施加酶前初始乳糖浓度已经减少约30％-35％的液体乳产品中可为这种情况。
在本发明的上下文中，术语“碳水化合物”涵盖小型碳水化合物(如单糖和二糖)以及较大的糖(如多糖和低聚糖)两者。
在本发明的上下文中，当称组合物包含、含有或具有X％(w/w)的具体组分时，除非另外说明，否则该具体组分的重量百分比是相对于该组合物的总重量来计算。
该液体乳产品可例如具有总含量在1％-15％(w/w)范围内的碳水化合物。例如，该液体乳产品可以具有总含量在2％-10％(w/w)范围内，如在3％-8％(w/w)范围内的碳水化合物。可替代地，该液体乳产品可以具有总含量在4％-6％(w/w)范围内，如约5％(w/w)的碳水化合物。
在本发明的一些低碳水化合物实施例中，优选的是该液体乳产品具有总含量在1％-4％(w/w)范围内，如在2％-3％(w/w)范围内的碳水化合物。
在本发明的一些实施例中，该液体乳产品具有总含量为至多10％(w/w)的单糖和二糖。该液体乳产品可具有总含量为至多8％(w/w)的单糖和二糖。该液体乳产品可例如具有总含量为至多5％(w/w)，如至多3％(w/w)的单糖和二糖。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至多2％(w/w)，如至多1％(w/w)的单糖和二糖。
该液体乳产品可例如具有总含量在0.1％-10％(w/w)范围内的单糖和二糖。例如，该液体乳产品可以具有总含量在1％-8％(w/w)范围内，如在1.5％-6％(w/w)范围内的单糖和二糖。可替代地，该液体乳产品可以具有总含量在2％-4％(w/w)范围内，如约3％(w/w)的单糖和二糖。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有总含量为至多3％(w/w)的乳糖。该液体乳产品可具有总含量为至多2.5％(w/w)的乳糖。该液体乳产品可例如具有总含量为至多2.0％(w/w)的乳糖。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至多1.5％(w/w)的乳糖。
该液体乳产品可例如具有总含量为至多1.0％(w/w)，如至多0.5％(w/w)的乳糖。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至多0.2％(w/w)，如至多0.1％(w/w)的乳糖。
该液体乳产品可例如具有总含量在0.05％-3％(w/w)范围内的乳糖。例如，该液体乳产品可以具有总含量在0.1％-2％(w/w)范围内，如在0.2％-1.5％(w/w)范围内的乳糖。可替代地，该液体乳产品可以具有总含量在0.3％-1.0％(w/w)范围内，如约0.4％(w/w)的乳糖。
乳糖浓度(相对于总DP2的％)可例如通过高效阴离子交换色谱外加脉冲安培检测器(HPAEC-PAD)来测定。这种方法可量化乳中的乳糖浓度(mg/L)，且还可以量化乳糖相对于总二糖(DP2)的％。相对于总DP2的乳糖％的量化在量化GOS混合物中的乳糖中是重要的，因为利用传统HPLC方法，乳糖与其他二糖(包括转半乳糖基的二糖)在相同峰中共洗脱。例如，可使用由GS50梯度泵、具有金工作电极的ED50电化学检测器、LC25色谱炉和AS50自动取样机组成的戴安(Dionex)系统。可使用基于薄膜型阴离子交换树脂的CarboPac PA-1分析柱(4mm×250mm)进行分离，该柱连接至CarboPac PA1防护罩(4mm×50mm)。将该柱维持在25℃下；用梯度洗脱，以1ml/min的流速进行洗脱。
优选使用以下4种洗脱液：A：8mM NaOH；B：125mM NaOH；C：125mM NaOH和400mM(乙酸钠)；D：8mM乙酸钠。这四种洗脱液以梯度模式混合，以便在洗脱的最初几分钟内存在痕量NaOH。4-5分钟后，NaOH和乙酸钠的浓度逐步升高，以允许洗脱二糖、三糖、四糖等。所有氢氧化钠溶液的pH>8，且大部分>10。乙酸钠溶液单独具有约8的pH。
在这些条件下，乳糖作为与其他二糖分开的峰被洗脱，这允许利用标准校准曲线和适当的DP2标准物对其进行量化。所有色谱分析都应该一式两份地进行。
待分析的GOS-DP2馏分可通过制备型凝胶过滤法与总碳水化合物群体分离。在本发明的一些实施例中，该液体乳产品具有总含量为至多10％(w/w)的半乳糖和葡萄糖。该液体乳产品可具有总含量为至多10％(w/w)的半乳糖和葡萄糖。该液体乳产品可例如具有总含量为至多5％(w/w)，如至多3％(w/w)的半乳糖和葡萄糖。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至多2％(w/w)，如至多1％(w/w)的半乳糖和葡萄糖。
该液体乳产品可例如具有总含量在0.1％-10％(w/w)范围内的半乳糖和葡萄糖。例如，该液体乳产品可以具有总含量在0.3％-8％(w/w)范围内，如在0.5％-6％(w/w)范围内的半乳糖和葡萄糖。可替代地，该液体乳产品可以具有总含量在1％-3％(w/w)范围内，如约2％(w/w)的半乳糖和葡萄糖。
通常，该液体乳产品包含至少一些葡萄糖和半乳糖。例如，该液体乳产品通常包含至少0.1％(w/w)葡萄糖和至少0.1％(w/w)半乳糖。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品包含总量在0.5％-3％(w/w)范围内的葡萄糖和总量在0.1％-1.0％范围内的半乳糖。例如，该液体乳产品可包含总量在0.8％-2.0％(w/w)范围内的葡萄糖和总量在0.2％-0.6％(w/w)范围内的半乳糖。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有总含量为至多3.0％(w/w)的单糖。该液体乳产品可具有总含量为至多2.5％(w/w)的单糖。该液体乳产品可例如具有总含量为至多2.0％(w/w)，如至多1.5％(w/w)的单糖。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至多1.0％(w/w)，如至多0.5％(w/w)的单糖。
该液体乳产品可例如具有总含量在0.1％-3.0％(w/w)范围内的单糖。例如，该液体乳产品可以具有总含量在0.2％-2.5％(w/w)范围内，如在0.5％-2.0％(w/w)范围内的单糖。可替代地，该液体乳产品可以具有总含量在0.1％-2.0％(w/w)范围内，如约1.5％(w/w)的单糖。
诸位发明人已发现，本发明的具有相对低含量单糖的液体乳产品对于涉及高温加热或甚至将液体乳产品转化为粉末的使用尤其有利，且提供比具有更高含量的单糖的含GOS乳产品具有更好的长期稳定性的产品。不受理论的约束，据信，更高水平的单糖引起更多的美拉德(Maillard)反应，它是由减少糖类和含伯氨基的蛋白质(例如通过赖氨酸残基)起始的不令人希望的链反应。美拉德反应会降低乳产品的营养价值，且会破坏它的颜色和味道。
在本发明的一些实施例中，该液体乳产品具有总含量为至多3％(w/w)的半乳糖。该液体乳产品可具有总含量为至多2.5％(w/w)的半乳糖。该液体乳产品可例如具有总含量为至多2.0％(w/w)的半乳糖。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至多1.5％(w/w)的半乳糖。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有总含量为至多1.0％(w/w)的半乳糖。该液体乳产品可具有总含量为至多0.5％(w/w)的半乳糖。该液体乳产品可例如具有总含量为至多0.4％(w/w)，如至多0.3％(w/w)的半乳糖。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至多0.2％(w/w)，如至多0.1％(w/w)的半乳糖。
该液体乳产品可例如具有总含量在0.05％-3％(w/w)范围内的半乳糖。例如，该液体乳产品可以具有总含量在0.1％-2％(w/w)范围内，如在0.2％-1.5％(w/w)范围内的半乳糖。可替代地，该液体乳产品可以具有总含量在0.3％-1.0％(w/w)范围内，如约0.4％(w/w)的半乳糖。
该液体乳产品优选地具有总含量为至少0.9％(w/w)，且优选地至少1.0％(w/w)的GOS。该液体乳产品可具有总含量为至少1.2％(w/w)的GOS。该液体乳产品可例如具有总含量为至少1.4％(w/w)的GOS。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至少2.0％(w/w)的GOS。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有总含量为至少2.2％(w/w)的GOS。该液体乳产品可具有总含量为至少2.4％(w/w)的GOS。该液体乳产品可例如具有总含量为至少2.6％(w/w)，如至少2.8％(w/w)的GOS。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至少3.0％(w/w)，如至少3.5％(w/w)的GOS。
该液体乳产品可例如具有总含量在0.9％-10％(w/w)范围内的GOS。可替代地，该液体乳产品可具有总含量在1％-10％(w/w)范围内的GOS。例如，该液体乳产品可以具有总含量在1.0％-8.0％(w/w)范围内，如在1.2％-6.0％(w/w)范围内的GOS。可替代地，该液体乳产品可以具有总含量在1.4％-5.0％(w/w)范围内，如约2％(w/w)的GOS。
优选的是该液体乳产品包含大量聚合度(DP)为3和更高的GOS。DP为3的GOS分子(DP3)为三糖，DP为4的GOS分子(DP4)为四糖，以此类推。
因此，优选的是该液体乳产品包含总量为至少0.5％(w/w)的GOS-DP3+。在本发明的上下文中，术语“GOS-DPx+”意指具有DPx或更高的GOS分子的总和。例如，术语“DP3+”意指具有DP3、DP4、DP5、DP6等的GOS分子的总和。
该液体乳产品优选地具有总含量为至少0.9％(w/w)，且甚至更优选地至少1.0％(w/w)的GOS-DP3+。该液体乳产品可具有总含量为至少1.2％(w/w)的GOS-DP3+。该液体乳产品可例如具有总含量为至少1.4％(w/w)的GOS-DP3+。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至少2.0％(w/w)的GOS-DP3+。
据信，相对高含量的GOS并且尤其是GOS-DP3+相对于现有技术的液体乳产品增加液体乳产品的益生效果。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有总含量为至少2.2％(w/w)的GOS-DP3+。该液体乳产品可具有总含量为至少2.4％(w/w)的GOS-DP3+。该液体乳产品可例如具有总含量为至少2.6％(w/w)，如至少2.8％(w/w)的GOS-DP3+。可替代地，该液体乳产品可具有总含量为至少3.0％(w/w)，如至少3.5％(w/w)的GOS-DP3+。
该液体乳产品可例如具有总含量在0.5％-10％(w/w)范围内的GOS-DP3+。例如，该液体乳产品可以具有总含量在1.0％-8.0％(w/w)范围内，如在1.2％-6.0％(w/w)范围内的GOS-DP3+。可替代地，该液体乳产品可以具有总含量在1.4％-5.0％(w/w)范围内，如约2％(w/w)的GOS-DP3+。
在本发明的上下文中，术语“GOS-DPx”意指具有DPx的GOS分子的总和。例如，术语“DP3”意指具有DP3的GOS分子的总和，但不包括具有更高或更低DP的GOS。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比为至少0.15的GOS-DP4+和GOS-DP3。
GOS-DP4+与GOS-DP3间比例较高的液体乳产品通常比GOS-DP4+与GOS-DP3间比例较低的液体乳产品包含更广泛的各种各样的GOS-DP4种类、GOS-DP5种类、GOS-DP6种类和GOS-DP7种类，且因此，据信提供更好、更多样的益生效果，且据信以比只有GOS-DP2和GOS-DP3更慢的速率发酵。据信，每个DP簇内的高度多样化的聚合度和高度多样化的种类对更多的益生菌菌株和胃肠道健康微生物群物种内的物种提供更宽的功效。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比为至少0.2的GOS-DP4+和GOS-DP3。例如，GOS-DP4+与GOS-DP3间的重量比可为至少0.25。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比为至少0.30的GOS-DP4+和GOS-DP3。甚至更优选地，GOS-DP4+与GOS-DP3间的重量比可为至少0.4。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比在0.15-2范围内的GOS-DP4+和GOS-DP3。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比在0.2-1范围内的GOS-DP4+和GOS-DP3。甚至更优选地，GOS-DP4+与GOS-DP3间的重量比可在0.25-1.0的范围内。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比可在0.30-0.8范围内的GOS-DP4+和GOS-DP3。甚至更优选地，GOS-DP4+与GOS-DP3间的重量比可在0.4-0.6的范围内。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比为至少0.01的GOS-DP5和GOS-DP3。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比为至少0.02的GOS-DP5和GOS-DP3。例如，GOS-DP5与GOS-DP3间的重量比可为至少0.03。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比为至少0.04的GOS-DP5和GOS-DP3。甚至更优选地，GOS-DP5与GOS-DP3间的重量比可为至少0.5。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比在0.01-0.2范围内的GOS-DP5和GOS-DP3。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比在0.02-0.15范围内的GOS-DP5和GOS-DP3。甚至更优选地，GOS-DP5与GOS-DP3间的重量比可在0.03-0.1的范围内。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比可在0.03-0.09范围内的GOS-DP5和GOS-DP3。GOS-DP5与GOS-DP3间的重量比可例如在0.04-0.08的范围内。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有之间的重量比为至少3:1，且优选地至少3.0:1.0的葡萄糖和半乳糖。例如，葡萄糖与半乳糖间的重量比可为至少3.5:1.0。葡萄糖与半乳糖间的重量比可例如为至少4.0:1.0，诸如至少4.5:1.0。可替代地，葡萄糖与半乳糖间的重量比可为至少5.0:1.0，诸如至少6.0:1.0。
蛋白质是液体乳产品中的重要营养组分，且在本发明的一个实施例中，该液体乳产品包含总量在1％-10％(w/w)范围内的蛋白质。例如，该液体乳产品可包含总量在2％-8％(w/w)范围内的蛋白质。例如，该液体乳产品可包含总量在2.5％-6％(w/w)范围内的蛋白质。可替代地，该液体乳产品可包含总量在3.0％-5％(w/w)范围内的蛋白质。
蛋白质的总量优选地根据ISO 8968-3:2004(氮含量的测定分块-消化法(Determination of nitrogen content Block-digestion method))来测定。
酪蛋白通常为乳产品中的主要蛋白质，且在本发明的一个实施例中，该液体乳产品包含总量在0.5％-8％(w/w)范围内的酪蛋白。例如，该液体乳产品可包含总量在1％-6％(w/w)范围内，且优选地在2.0％-5％(w/w)范围内，且甚至更优选地在2.5％-4％(w/w)范围内的酪蛋白。
酪蛋白通常为乳中的主要蛋白质，且在本发明的一些实施例中，该液体乳产品包含总量在0.5％-8％(w/w)范围内的酪蛋白。例如，该液体乳产品可包含总量在1％-6％(w/w)范围内，且优选地在2.0％-5％(w/w)范围内，且甚至更优选地在2.5％-4％(w/w)范围内的酪蛋白。
除酪蛋白以外，液体乳产品通常包含天然乳清蛋白，诸如β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白等。在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品包含总量在0.2％-4％(w/w)范围内的乳清蛋白。例如，该液体乳产品可包含总量在0.4％-3％(w/w)范围内，且优选地在0.5％-2％(w/w)范围内，且甚至更优选地在0.6％-1.5％(w/w)范围内的乳清蛋白。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品在生产后7天，在储存期间保持在25℃的温度下时具有至多60mg/100g蛋白质的糠氨酸值。优选地，该液体乳产品在生产后7天，在储存期间保持在25℃的温度下时具有至多55mg/100g蛋白质的糠氨酸值。甚至更优选地，该液体乳产品在生产后7天，在储存期间保持在25℃的温度下时可具有至多50mg/100g蛋白质的糠氨酸值。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品在生产后7天，在储存期间保持在25℃的温度下时具有至多40mg/100g蛋白质的糠氨酸值。优选地，该液体乳产品在生产后7天，在储存期间保持在25℃的温度下时具有至多30mg/100g蛋白质的糠氨酸值。甚至更优选地，该液体乳产品在生产后7天，在储存期间保持在25℃的温度下时可具有至多20mg/100g蛋白质的糠氨酸值。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品包含至少0.20mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。
每g乳清蛋白的可用NH2-基团的量可如F.希瓦利埃(Chevalier)等人(国际乳品期刊(International Dairy Journal)11(2001)145–152)中所述来测定。乳清相可通过酪蛋白的酸沉降从乳产品中分离，并且随后用0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.5)透析乳清相。
例如，该液体乳产品可包含至少0.25mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。优选地，该液体乳产品包含至少0.25mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。该液体乳产品可例如包含至少0.30mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品包含至少0.35mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。例如，该液体乳产品可包含至少0.40mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。优选地，该液体乳产品包含至少0.45mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。该液体乳产品可例如包含至少0.50mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。
脂肪也是液体乳产品中的重要营养组分，且此外可为脂溶性维生素的载体。在本发明的一个实施例中，该液体乳产品包含总量在0.01％-40％(w/w)范围内的脂肪。例如，该液体乳产品可包含总量在0.1％-20％(w/w)范围内的脂肪。可替代地，该液体乳产品可包含总量在0.5％-5％(w/w)范围内的脂肪。例如，该液体乳产品可包含总量在1％-4％(w/w)范围内的脂肪。
本发明还允许低脂肪液体乳产品。因此，在本发明的一个实施例中，该液体乳产品包含总量在0.01％-1.0％(w/w)范围内的脂肪。例如，该液体乳产品可包含总量在0.05％-0.6％(w/w)范围内的脂肪。可替代地，该液体乳产品可包含总量在0.1％-0.4％(w/w)范围内的脂肪。
该液体乳产品的脂肪优选地包含乳脂或甚至由其组成。然而，在本发明的一些实施例中，脂肪还包括植物性脂肪。有用植物性脂肪的非限制性实例包括玉米油、芝麻油、大豆油、亚麻籽油、葡萄籽油、菜籽油、橄榄油、花生油、葵花油、红花油、棕榈油、棕榈仁油、椰子油及其组合。
在本发明的上下文中，术语脂肪和油可互换使用。
固体脂肪含量可根据ISO 8292-1&2:2008或ISO 1736:2008(奶粉和乳产品-脂肪含量的测定-重量分析法(参考方法)(Dried milk and milk products-Determination offat content-Gravimetric method(Reference method)))来测定。
该液体乳产品此外可包含通常存在于反刍动物乳中的矿物质，且该液体乳产品还可补充有另外的矿物质。
在本发明的一些实施例中，该液体乳产品的钠含量为至多300mg/100g液体乳产品，优选地至多200mg/100g液体乳产品，且甚至更优选地至多100mg/100g液体乳产品，例如像在30-60mg/100g液体乳产品的范围内。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品的固体含量相对于该产品的总重量优选为至多25％(w/w)。例如，该液体乳产品可具有至多20％(w/w)的固体含量。该液体乳产品的固体含量可例如为至多15％(w/w)。可替代地，该液体乳产品的固体含量可例如为至多10％(w/w)。
例如，该液体乳产品可具有至多20％(w/w)的固体含量。该液体乳产品的固体含量可例如为至多15％(w/w)。可替代地，该液体乳产品的固体含量可例如为至多10％(w/w)。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品具有相对于该液体乳产品的总重量在2％-30％(w/w)范围内的固体含量。优选地，该液体乳产品可具有在4％-20％(w/w)范围内的固体含量。甚至更优选地，该液体乳产品可具有相对于该乳产品的总重量在6％-16％(w/w)范围内，例如像在7％-14％(w/w)范围内的固体含量。
该液体乳产品的pH可为弱酸性、中性或碱性。pH优选地为至少5，且优选地至少6，诸如约7。在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品的pH在5.0-9的范围内。例如，该液体乳产品的pH可在6.0-8的范围内。该液体乳产品的pH可例如在6.5-7.5的范围内。除非另外提出，否则本文所述的所有pH值都是在10℃下测定。
在本发明的一些实施例中，该液体乳产品是未通过添加预先生产的低聚半乳糖而被浓缩的液体乳产品。
在本发明的一个优选实施例中，该液体乳产品的pH在5.0-8的范围内，该液体乳产品包含：
-至少1.0％(w/w)GOS，
-至多1％(w/w)乳糖，
-总含量为至多3.0％(w/w)的单糖，和
-总量在3％-6％(w/w)范围内的碳水化合物。
在本发明的其他优选实施例中，例如可通过本文所定义方法获得的液体乳产品的pH在5.0-8的范围内，且包含：
-至少1.0％(w/w)GOS，
-至多1％(w/w)乳糖，
-总含量为至多3.0％(w/w)的单糖，
-总量在3％-6％(w/w)范围内的碳水化合物，和
-之间的重量比为至少2:1，且优选地至少3:1的葡萄糖和半乳糖。
在本发明的又其他优选实施例中，例如可通过本文所定义方法获得的液体乳产品的pH在5.0-8的范围内，且包含：
-至少1.0％(w/w)GOS，
-至多1％(w/w)乳糖，
-总含量为至多3.0％(w/w)的单糖，
-总量在3％-6％(w/w)范围内的碳水化合物，和
-总量在0.8％-2.0％(w/w)范围内的葡萄糖和总量在0.2％-0.6％(w/w)范围内的半乳糖。
在本发明的一个优选实施例中，例如可通过本文所定义方法获得的液体乳产品的pH在5.0-8的范围内，该液体乳产品包含：
-至少1.0％(w/w)GOS，
-总含量为至少0.9％(w/w)的GOS-DP3+
-至多1％(w/w)乳糖，
-总含量为至多3.0％(w/w)的单糖，和
-总量在3％-6％(w/w)范围内的碳水化合物。
在本发明的其他优选实施例中，例如可通过本文所定义方法获得的液体乳产品的pH在5.0-8的范围内，且包含：
-至少1.0％(w/w)GOS，
-总含量为至少0.9％(w/w)的GOS-DP3+，
-至多1％(w/w)乳糖，
-总含量为至多3.0％(w/w)的单糖，
-总量在3％-6％(w/w)范围内的碳水化合物，和
-之间的重量比为至少2:1，且优选地至少3:1的葡萄糖和半乳糖。
在本发明的又其他优选实施例中，例如可通过本文所定义方法获得的液体乳产品的pH在5.0-8的范围内，且包含：
-至少1.0％(w/w)GOS，
-总含量为至少0.9％(w/w)的GOS-DP3+
-至多1％(w/w)乳糖，
-总含量为至多3.0％(w/w)的单糖，
-总量在3％-6％(w/w)范围内的碳水化合物，和
-总量在0.8％-2.0％(w/w)范围内的葡萄糖和总量在0.2％-0.6％(w/w)范围内的半乳糖。
这样一种液体乳产品的脂肪和蛋白质组成优选地类似于正常低脂乳，例如像脱脂乳的脂肪和蛋白质组成，主要不同是本发明液体乳产品可包含失活酶。
该液体乳产品的视觉外观可例如类似于低脂乳或脱脂乳的视觉外观，或者调味低脂乳或脱脂乳的视觉外观。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品是无菌的，例如通过UHT处理或杀死所有微生物的类似处理获得。在本发明的上下文中，术语“无菌”意指所讨论的产品不含任何活微生物。
在本发明的一些优选实施例中，该液体乳产品在生产后储存在25℃时具有至少180天的保质期，优选地在生产后储存在25℃时具有至少240天的保质期，且甚至更优选地在生产后储存在25℃时具有至少360天的保质期。这样一种长保质期液体乳可例如已经经受UHT处理或类似热处理并且经受纤溶酶失活。
本发明的又一个方面涉及含液体乳产品的固体的粉末状乳产品。例如，粉末状乳产品可基本上由液体乳产品的固体和水组成。
在本发明的一些优选实施例中，该粉末状乳产品包含量为90％-97％(w/w)的液体乳产品的固体和量为3％-10％(w/w)的水。
这样一种粉末状乳产品可通过喷雾干燥液体乳产品获得。
在本发明的一些优选实施例中，该粉末状乳产品包含固体含量为12％(w/w)的如本文所述的液体乳产品的固体。这意味着关于液体乳产品的固体组分的浓度的实施例可以通过用在液体乳产品语境中提到的固体组分的浓度乘以8.3(＝100％/12％)的系数而转换为粉末状乳产品的固体的组成。
因此，如果固体含量为12％(w/w)的液体乳产品包含
-至少1.0％(w/w)GOS，
-至多3％(w/w)乳糖，
-总量为至少0.1％(w/w)的葡萄糖和半乳糖，和
-之间的重量比为至少3:1的葡萄糖和半乳糖，
那么相应的粉末状乳产品的固体将包含
-相对于固体总重量至少8.3％(w/w)的GOS，
-相对于固体总重量至多25％(w/w)的乳糖，
-相对于固体总重量的总量为至少0.8％(w/w)的葡萄糖和半乳糖，和
-之间的重量比为至少3:1的葡萄糖和半乳糖。
将10g粉末状乳产品溶解在90g脱矿质水中时获得的pH为至少5.0，且可与在液体乳产品语境中描述的相同。
该液体或粉末状乳产品优选地存在于密封容器中。
诸位发明人已发现，上述液体乳产品可在乳中通过低温、酶促GOS合成而直接生产，GOS的收率出乎意料的高。
因此，本发明的另一个方面涉及一种生产含低聚半乳糖的乳产品的方法，该方法包括以下步骤：
a)提供具有转半乳糖基活性的酶，
b)提供含有相对于固体总重量的量为至多10％(w/w)的乳糖的乳源性组合物，该乳源性组合物具有至少5的pH，
c)在至多10℃的温度下使该乳源性组合物与该酶接触，持续时间足以发生低聚半乳糖(GOS)的合成，
d)使至少一些该酶失活和/或将其移除，
e)任选地，将从步骤d)获得的该含GOS的乳源性组合物转化为粉末，
f)任选地，例如以液体形式或以粉末形式包装该含GOS的乳源性组合物。
诸位发明人已出乎意料地发现，有可能在酶处理期间利用低温在乳中生产高收率的GOS。
该方法可以几种变体实现。
在本发明的一些实施例中，该方法包括步骤a)、b)、c)和d)。
在本发明的其他实施例中，该方法包括步骤a)、b)、c)、d)和e)。
在本发明的仍其他实施例中，该方法包括步骤a)、b)、c)、d)、e)和f)。
在本发明的其他实施例中，该方法包括步骤a)、b)、c)、d)和f)，但不包括步骤e)。
在本发明的仍其他实施例中，该方法包括步骤a)、b)、c)、d)和f)，但不包括步骤e)。
步骤优选地以字母表次序进行。然而，步骤a)和b)可以次序a)、b)和次序b)、a)两者进行。
用于本发明的酶具有转半乳糖基活性，意味着它能够将供体底物如乳糖的半乳糖基基团转移至并非水的受体分子。优选地，该酶对具有β(1-4)构象的半乳糖基键联有活性。这有效地将该酶归入β-半乳糖苷酶的IUBMB EC 3.2.1.23类。
在本发明的一些优选实施例中，该酶具有之间的比例为至少1的转半乳糖基活性和水解酶活性，意味着对于每个分成半乳糖和葡萄糖的乳糖分子，约1个乳糖分子分成葡萄糖和转移至非水受体的半乳糖基基团。
酶的转半乳糖基活性与水解酶活性间的比例优选地根据WO 2013/182686的方法4来测定。
例如，该酶的转半乳糖基活性与水解酶活性间可具有至少2的比例。该酶的转半乳糖基活性与水解酶活性间可例如具有至少3的比例。可替代地，该酶的转半乳糖基活性与水解酶活性间可具有至少4的比例。
甚至更高的比例可以是优选的，因此，该酶的转半乳糖基活性与水解酶活性间可具有至少5的比例。该酶的转半乳糖基活性与水解酶活性间可例如具有至少7的比例。可替代地，该酶的转半乳糖基活性与水解酶活性间可具有至少10的比例。
如上所述的，第一酶除β-半乳糖苷酶活性以外还具有转半乳糖基化活性。也可以优选的是，该第一酶具有至多0.9的T-值。
在本发明的上下文中，术语β-半乳糖苷酶的“转半乳糖基化活性”是指该酶将半乳糖基基团从供体分子如乳糖分子转移至非水分子如另一乳糖分子的能力。
T-值是利用乳糖作为半乳糖基供体和受体两者的β-半乳糖苷酶的转半乳糖基化功效的替代量度。β-半乳糖苷酶的T-值的测定是根据实例4中所述分析和公式来进行。利用以下公式计算T-值：
T-值＝所产生的半乳糖量:所用的乳糖量
所产生的半乳糖量和所用的乳糖量都应该以mol为单位，以测定T-值。
对于每mol使用的乳糖，没有任何转半乳糖基化活性的乳糖酶将产生一mol半乳糖，且将具有1的T-值。具有极高转半乳糖基化活性的β-半乳糖苷酶将使用来自乳糖的几乎所有半乳糖基基团来进行转半乳糖基化作用而非生成半乳糖，且因此将具有接近0的T-值。
优选的是，该酶具有至多0.6的T-值。在本发明的一些实施例中，该酶的T-值为至多0.5，优选地至多0.4，且甚至更优选地至多0.3。例如，该酶的T-值可为至多0.2。优选地，该酶的T-值可为至多0.1。甚至更优选的是，该酶的T-值可为至多0.05。
有用酶的非限制性实例可见于专利申请WO 2001/90317A2、WO 2013/182686A1、WO2011/120993A1中，出于所有目的将这些专利申请全部通过引用而并入本文。
在本发明的一些优选实施例中，该酶选自下组，该组由以下各项组成：
-相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至1142(Ile)的序列的多肽具有至少80％序列一致性的多肽，
-相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至887(Thr)的序列的多肽具有至少80％序列一致性的多肽，和
-相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至965(Leu)的序列的多肽具有至少80％序列一致性的多肽。
已发现，来自两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)DSM20215的成熟胞外乳糖的截短体(SEQ ID NO 1-对应于从UniProt-序列UPI00001B62C5的位置33(Val)到位置1752(Gly)的序列，www.uniprot.org)具有高水平的转半乳糖基活性。
在本发明的上下文中，术语“序列一致性”涉及两个具有相等长度的氨基酸序列之间或两个具有相等长度的核酸序列之间的一致性程度的定量度量。如果有待比较的两个序列不具有相等长度，必须将它们比对以尽可能最好地配合。序列一致性可以被计算为
(Nref-Ndif)*100)/(Nref)，
其中Ndif是对齐时这两个序列中不一致的残基的总数，并且其中Nref是序列之一中的残基的数目。因此，DNA序列AGTCAGTC将与序列AATCAATC具有75％的序列一致性(Ndif＝2并且Nref＝8)。空位被算作一个或多个特定残基的不一致性，即DNA序列AGTGTC将与DNA序列AGTCAGTC具有75％的序列一致性(Ndif＝2并且Nref＝8)。可以例如使用适当的BLAST程序，诸如由美国国家生物技术信息中心(NCBI)提供的BLASTp算法来计算序列一致性。
在本发明的其他优选实施例中，该酶的氨基酸序列相对于SEQ ID NO.1的肽具有至少80％的序列一致性。例如，第一酶的氨基酸序列相对于SEQ ID NO.2的肽可具有至少90％，优选地至少95％，且甚至更优选地至少97.5％的序列一致性。在一些情况下，第一酶的氨基酸序列相对于SEQ ID NO.2的肽可具有至少99％的序列一致性。
在本发明的一些优选实施例中，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至887(Thr)的序列的多肽具有至少90％序列一致性的多肽。优选地，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至887(Thr)的序列的多肽具有至少95％序列一致性的多肽。甚至更优选地，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至887(Thr)的序列的多肽具有至少98％序列一致性的多肽。
在本发明的一些优选实施例中，该酶是具有从位置1(Val)至887(Thr)的序列的多肽。
在本发明的一些优选实施例中，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至1142(Ile)的序列的多肽具有至少90％序列一致性的多肽。优选地，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至1142(Ile)的序列的多肽具有至少95％序列一致性的多肽。甚至更优选地，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至1142(Ile)的序列的多肽具有至少98％序列一致性的多肽。
在本发明的一些优选实施例中，该酶是具有从位置1(Val)至1142(Ile)的序列的多肽。
在本发明的一些优选实施例中，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至965(Leu)的序列的多肽具有至少90％序列一致性的多肽。优选地，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至965(Leu)的序列的多肽具有至少95％序列一致性的多肽。甚至更优选地，该酶是相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至965(Leu)的序列的多肽具有至少98％序列一致性的多肽。
在本发明的一些优选实施例中，该酶是具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至965(Leu)的序列的多肽。
步骤b)中所提供的乳源性组合物优选地为液体组合物。
在本发明的上下文中，术语“乳源性组合物”意指含酪蛋白和/或乳清蛋白且另外含乳糖和矿物质的组合物。
在本发明的上下文中，短语“Y和/或X”意指“Y”或“X”或“Y和X”。沿着相同的逻辑线，短语“n1、n2、…、ni-1和/或ni”意指“n1”或“n2”或…或“ni-1”或“ni”或组分n1、n2、...ni-1和ni的任何组合。
在本发明的一些优选实施例中，该乳源性组合物包含总量在固体基础上为至少25％(w/w)，优选地至少50％(w/w)，甚至更优选地至少75％(w/w)，诸如在固体基础上为至少90％(w/w)的非脂乳固体。
在本发明的一些实施例中，该乳源性组合物包含总量在固体基础上为100％(w/w)的非脂乳固体。
在本发明的一些优选实施例中，该乳源性组合物具有相对于该组合物的总重量在2％-30％(w/w)范围内，优选地在4％-20％(w/w)范围内，且甚至更优选地在6％-16％(w/w)范围内，例如像相对于该组合物的总重量在7％-14％(w/w)范围内的固体含量。
该乳源性组合物通常包含总量相对于非脂乳固体的总量在5％-80％(w/w)范围内的乳糖。
该乳源性组合物相对于该组合物的总重量可例如包含总量为至多10％(w/w)的乳糖。优选地，该乳源性组合物包含总量为至多7％(w/w)的乳糖。例如，该乳源性组合物相对于该组合物的总重量可包含总量为至多5％(w/w)，诸如至多3％(w/w)的乳糖。
除受GOS合成影响的酶和碳水化合物以外，该乳源性组合物可包含相同浓度的与液体乳产品相同的组分。因此，各种组分和它们在液体乳产品的语境中描述的浓度范围可按相同浓度范围存在于该乳源性组合物中。
该乳源性组合物可例如为选自下组的组合物，该组由以下各项组成：全脂乳、低脂乳、脱脂乳、酪乳、复配乳粉、炼乳、UHT乳、乳清、乳清渗透物和奶油。
在本发明的一些优选实施例中，该乳源性组合物为选自下组的组合物，该组由以下各项组成：全脂乳、低脂乳、脱脂乳、酪乳、复配乳粉、炼乳、UHT乳和奶油。
在本发明的另一个实施例中，步骤a)的乳源性组合物包含至多40％w/w乳脂。这样一种乳源性组合物的实例为搅打奶油。
在本发明的又一个实施例中，步骤a)的乳源性组合物包含至多20％w/w乳脂。这样一种乳源性组合物的实例为含约18％w/w乳脂的淡奶油/稀奶油。
在本发明的又一实施例中，步骤a)的乳源性组合物包含至多4％w/w乳脂。这样一种乳源性组合物的实例为通常含2％-4％w/w乳脂，且优选地约3％w/w乳脂的全脂乳。
在本发明的又一实施例中，步骤a)的乳源性组合物包含至多2％w/w乳脂。这样一种乳源性组合物的实例为通常含0.7％-2％w/w乳脂，且优选地1％-1.5％w/w乳脂的半脱脂乳。
在本发明的一个另外的实施例中，步骤a)的乳源性组合物包含至多0.7％w/w乳脂。这样一种乳源性组合物的实例为通常包含0.1％-0.7％w/w乳脂，且优选地0.3％-0.6％w/w乳脂，诸如约0.5％w/w乳脂的脱脂乳。
在本发明的一个优选实施例中，步骤a)的乳源性组合物包含至多0.1％w/w乳脂。
该乳源性组合物另外可包含一种或多种食品成分。此类食品成分的实例为甜味剂、调味剂、pH缓冲剂、稳定剂、着色剂、抗氧化剂、乳化剂、矿物质和维生素。
甜味剂可以包括碳水化合物甜味剂，例如像蔗糖、果糖、麦芽糖和/或甘露糖，将它们添加到已经存在于乳源性组合物中的乳糖里。
可替代地或另外地，甜味剂可以包括一种或多种糖醇，例如像山梨醇、甘露醇和/或木糖醇。
可替代地或另外地，甜味剂可以包括一种或多种高强度甜味剂，例如像阿斯巴甜、安赛蜜、三氯蔗糖、糖精、阿力甜和/或纽甜。
步骤c)包括使该乳源性组合物与该酶接触，意味着该酶和乳源性组合物被布置成这样，使得该酶能够将该乳源性组合物的乳糖转化为GOS。
在本发明的一些优选实施例中，将该酶简单混合于该乳源性组合物中，且因此将形成所形成的含GOS的乳源性组合物的活性或失活形式部分。
在本发明的其他优选实施例中，将该酶附接至固体相，可使该固体相与该乳源性组合物接触，并且随后再次从该乳源性组合物移除。在此类实施例中，含GOS的乳源性组合物不含酶或只含痕量酶。
该乳源性组合物在步骤c)期间的温度优选地在0℃-10℃的范围内。例如，该乳源性组合物在步骤c)期间的温度可在2℃-8℃的范围内。该乳源性组合物在步骤c)期间的温度可例如在3℃-6℃的范围内。
如应被技术人员领会到的，将乳源性组合物的温度带到10℃以上的极小、短暂的温度波动是可接受的，只要它们不为增加的细菌生长或新陈代谢提供基础。
步骤c)的接触持续时间取决于若干因素，包括使用多少酶和应将多少乳糖转化为GOS。
该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如为至多48小时。优选地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间为至多24小时。甚至更优选地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间为至多12小时。
例如，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如在0.1-48小时范围内。该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如在1-24小时范围内。可替代地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可在1-16小时范围内，诸如在6-14小时范围内。
当将该酶与该乳源性组合物混合时，该乳源性组合物可在不影响所得乳产品的感官性质的情况下包含多少酶存在上限。
在本发明的一些优选实施例中，该酶以1-10000ppm范围内的量添加至该乳源性组合物中。例如，该酶可以1-1000ppm范围内的量添加至该乳源性组合物中。该酶可例如以1-100ppm范围内的量添加至该乳源性组合物中。
然而，如果该酶在与该乳源性组合物接触时形成酶反应器的一部分，可利用极高的酶活性，且在此类情况中，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如在0.1-2小时范围内。例如，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可在0.2-1.5小时范围内。可替代地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可在0.1-1小时范围内，诸如在0.2-0.8小时范围内。
优选地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间足以转化该乳源性组合物的至少20％乳糖，从而将该乳源性组合物中乳糖的起始量减少至80％(w/w)。例如，如果步骤a)中所提供的乳源性组合物的乳糖含量为3.0％，因此优选的是，在步骤c)的酶处理后至少20％已被转化，且留下至多80％(对应2.4(w/w)乳糖)。
例如，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可足以转化该乳源性组合物的至少40％乳糖。该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如足以转化该乳源性组合物的至少60％乳糖。可替代地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如足以转化该乳源性组合物的至少70％乳糖。
甚至更高水平的乳糖转化可以是优选的，因此，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可足以转化该乳源性组合物的至少80％乳糖。例如，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如足以转化该乳源性组合物的至少90％乳糖。可替代地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如足以转化该乳源性组合物的至少95％乳糖。
在本发明的一些优选实施例中，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间足以转化该乳源性组合物的20％-90％范围内的乳糖。该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如足以转化该乳源性组合物的30％-70％范围内的乳糖。可替代地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可足以转化该乳源性组合物的40％-60％范围内的乳糖。
诸位发明人已发现，当试图转化含GOS的乳源性组合物的残留乳糖时，单糖含量显著增加，导致所得液体和粉末状乳产品具有较差的稳定性。
因此，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间优选地足以转化该乳源性组合物的至多70％乳糖。
例如，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可足以转化该乳源性组合物的至多60％乳糖。该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如足以转化该乳源性组合物的至多50％乳糖。可替代地，该酶与该乳源性组合物间的接触持续时间可例如足以转化该乳源性组合物的至多45％乳糖。
该方法优选地包括使至少一些酶失活和/或将其移除，从而显著减少β-半乳糖苷酶(水解酶活性兼转半乳糖基活性)。优选地，步骤d)包括完全地或至少几乎完全地使酶失活和/或将其移除。
诸位发明人已发现，仅冷却酶并不停止其酶活性，且含活性酶的液体乳产品在低温下的延长储存将导致合成的GOS降解，且导致单糖含量增加。
该酶可例如通过热失活而失活，例如通过将含GOS的乳源性组合物加热至至少90℃的温度持续至少10分钟。例如，可将含GOS的乳源性组合物加热至至少95℃的温度持续至少10分钟。
热失活也可以包括例如从80℃开始的低温。β-半乳糖苷酶可例如通过将含GOS的乳源性组合物加热至至少80℃的温度持续至少2分钟而失活。例如，可将含GOS的乳源性组合物加热至至少85℃的温度持续至少5分钟。可替代地，可将含GOS的乳源性组合物加热至至少80℃的温度持续至少10分钟。
可替代地或另外地，步骤d)可包括将从步骤c)获得的该含GOS的乳源性组合物加热至至少140℃持续至少0.1秒，例如像至少1秒。
加热处理步骤也可以包括高温处理，该高温处理包括将含GOS的乳源性组合物加热至至少140℃的温度持续至多5秒。例如，高温处理可包括将含GOS的乳源性组合物加热至140℃-160℃范围内的温度持续0.5-5秒范围内的持续时间。高温处理可例如包括将含GOS的乳源性组合物加热至150℃-180℃范围内的温度持续0.1-1秒范围内的持续时间。可替代地，高温处理可包括将含GOS的乳源性组合物加热至160℃-180℃范围内的温度持续0.1-0.5秒范围内的持续时间。
可替代地或另外地，该酶可通过使含GOS的乳源性组合物经受压力失活而失活。
优选地，失活提供该酶的至少90％的β-半乳糖苷酶活性的降低。例如，失活可提供该酶的至少95％的β-半乳糖苷酶活性的降低。失活可例如提供该酶的至少99％的β-半乳糖苷酶活性的降低。可替代地，失活可提供该酶的至少99.9％的β-半乳糖苷酶活性的降低。
已经受步骤d)的含GOS的乳源性组合物优选地具有至多1LAU/kg的β-半乳糖苷酶活性。例如，它可具有至多0.1LAU/kg的β-半乳糖苷酶活性。已经受步骤d)的含GOS的乳源性组合物可例如具有至多0.01LAU/kg的β-半乳糖苷酶活性。可替代地，已经受步骤d)的含GOS的乳源性组合物可例如具有至多0.001LAU/kg的β-半乳糖苷酶活性。
β-半乳糖苷酶活性(以单位LAU计)的测定优选地利用WO 2013/182686中所述的方法3来进行。包括可干扰分析的酪蛋白胶束的颗粒物优选地通过过滤移除。
除用于GOS合成的β-半乳糖苷酶的失活以外，此类温度处理还降低内源性乳酶如纤溶酶及其酶原纤溶酶原的活性。
酶失活步骤应优选地使经处理液体的纤溶酶和纤溶酶原的组合活性相对于未经处理液体的活性降低至少60％，优选地至少65％，且甚至更优选地至少70％。
组合活性是液体乳产品中纤溶酶的活性加上可从将纤溶酶原转化为纤溶酶所获得的活性的量度。根据WO 2012/010699A1的实例I中所述分析G来测定组合活性。
本发明的一些实施例要求甚至更低水平的组合纤溶酶和纤溶酶原活性，且对于此类实施例，酶失活步骤应优选地使经处理液体的纤溶酶和纤溶酶原的组合活性相对于未经处理液体的活性降低至少80％，优选地至少85％，且甚至更优选地至少90％。
在本发明的优选实施例中，酶失活步骤应使经处理液体的纤溶酶和纤溶酶原的组合活性相对于未经处理液体的活性降低至少95％，优选地至少97.5％，且甚至更优选地至少99％。
在本发明的一些实施例中，该液体乳产品的纤溶酶和纤溶酶原的组合活性为至多8.000微单位/mL，优选地至多5.000微单位/mL，且甚至更优选地至多3.000微单位/mL。
在本发明的上下文中，一单位(U)的纤溶酶活性是在25℃、pH 8.9下，利用Chromozyme PL(对甲苯磺酰基-Gly-Pro-Lys-4-苯基重氮酸乙酸酯)作为底物，每分钟可产生1微摩尔对硝基苯胺的纤溶酶活性。
在本发明的其他优选实施例中，该液体乳产品的纤溶酶和纤溶酶原的组合活性为至多2.500微单位/mL，优选地至多1.000微单位/mL，且甚至更优选地至多750微单位/mL。甚至优选的是，该液体乳产品的纤溶酶和纤溶酶原的组合活性为至多600微单位/mL，优选地至多400微单位/mL，且甚至更优选地至多200微单位/mL。
在本发明的一些优选实施例中，将从步骤d)获得的含GOS的乳源性组合物转化为粉末。
这种转化可例如通过常见的干燥技术例如像冷冻干燥或喷雾干燥来进行。
在本发明的一些实施例中，步骤d)构成喷雾干燥方法的一部分，意味着通常用于喷雾干燥方法的预加热和/或加热有助于酶的热失活。
在本发明的其他实施例中，热失活包括独立步骤d)和步骤e)中的后续喷雾干燥，在这种情况下，喷雾干燥可有助于酶的另外的热失活。
可利用常用于乳产品的喷雾干燥的相同参数进行喷雾干燥。入口空气的温度可例如在150℃-200℃范围内，诸如在160℃-180℃范围内。
在本发明的一些优选实施例中，最后例如以液体或粉末形式包装含GOS的乳源性组合物。
在这种情况下，液体或粉末形式的含GOS的乳源性组合物组成该液体或粉末状乳产品。
步骤f)的包装可例如为无菌包装，即液体或粉末状乳相关产品在无菌条件下包装。例如，无菌包装可以通过使用无菌填充系统来进行，并且它优选地涉及将乳填充到一个或多个无菌容器中。
包装通常在室温或室温以下进行。因此，包装过程中液体或粉末状乳产品的温度通常为至多30℃，优选地至多25℃，且甚至更优选地至多20℃。
包装过程中液体或粉末状乳产品的温度可例如在0℃-30℃范围内。
当前优选的是，包装过程中液体或粉末状乳产品的温度在1℃-10℃范围内。液体乳产品可例如被包装在消费者会购买的容器中。此类容器的有用但非限制性实例为瓶、罐、袋、小袋或小囊。
同样，粉末状乳产品可被包装在消费者会购买的容器中。此类容器的有用但非限制性实例为罐、袋、小袋或小囊。
本发明的又一个方面涉及一种生产食物产品(包括饮料和固体食品两者)的方法，该方法包括以下步骤：
i)提供含GOS的液体乳产品和/或含GOS的粉末状乳产品，
ii)任选地，提供一种或多种另外的成分，
iii)将该含GOS的乳产品和任选地还有一种或多种另外的成分转化为该食物产品，并且
iv)任选地，包装该食物产品。
将乳产品和其他成分转化为食物产品的一般方法为本领域技术人员所熟知。
本发明的另一个方面涉及一种含有含GOS的乳产品的食物产品。例如，该食物产品可以是通过上述生产食物产品的方法可获得的。
在本发明的一些实施例中，该食物产品是酸化乳制品。酸化乳制品可例如为酸奶或酸奶油。如果酸化乳制品是酸奶，它可以是凝固型酸奶、搅拌型酸奶或饮用型酸奶。
在本发明的一些实施例中，该食物产品是奶酪。奶酪可例如是白奶酪、黄奶酪、新鲜奶酪(奶油奶酪)或加工奶酪。
在本发明的一些实施例中，该食物产品是饮料。例如，饮料可为风味乳、液体代餐或乳清饮料。
在本发明的一些实施例中，该食物产品是固体食物产品。例如，固体食物产品可以为蛋白棒、代餐或乳面食。
本发明的又一个方面涉及如本文所定义的β-半乳糖苷酶，该β-半乳糖苷酶优选地具有：
-至多0.6的T-值，和/或
-之间的比例至少为1的转半乳糖基活性与水解酶活性，
在生产减乳糖乳产品中的用途，以降低最终乳产品中的美拉德反应水平和/或延长最终乳产品的保质期。
该用途可例如涉及生产作为经过UHT处理的低乳糖乳或无乳糖乳的乳产品。在本发明的上下文中，术语“低乳糖乳”涉及含至多1g乳糖/100g乳的乳，且无乳糖乳涉及含至多0.1g乳糖/100g乳，且优选地至多0.01g乳糖/100g乳的乳。
实例
实例1根据本发明的液体乳产品的生产
将3个10mL含5％(w/w)乳糖的巴氏灭菌脱脂乳样品加热至4℃、6℃和8℃，并与10微升含BIF917的酶溶液混合(BIF917及其制备描述在WO2013/182686中)。
在用酶孵育20和24小时后取1mL子样品。
将卡瑞(Carrez)试剂1&2以足以使得所有固体凝聚的量添加至子样品中。利用标准滤纸过滤后续双相混合物，并利用一次性PTFE微过滤器(0.45微米)再次过滤。此时，使澄清溶液经受加热，以使任何剩余的蛋白质变性，经受离子交换固相萃取。然后将糖类的最终澄清溶液放在HPLC小瓶中并分析。
使用的HPLC方法如下：
系统：安捷伦(Agilent)
柱安捷伦HiPlex Na聚合离子交换柱
洗脱液：MilliQ水
柱：温度：85℃
流速：0.2mL/min
压力：21巴(对这种柱而言最大为25)
检测器：RID，在35℃下
量化是基于峰面积和已知的乳糖浓度。还计算了所有糖的响应系数。先前已经利用来自英国卡博森斯(Carbosynth UK)的单糖以及DP2、DP3和DP4低聚糖的分析标准物测定了低聚糖的保留时间。
结果：
子样品都包含大量的GOS，且很明显，尽管孵育温度较低，BIF917仍保留其转半乳糖基活性。
出乎意料地，所有样品中的GOS收率都高于1.0％(w/w)(且相对于碳水化合物的总量高于20％(w/w))，且单糖的总量低于2.2％(w/w)(相对于碳水化合物的总量为43％(w/w))。
图1中示出了与在8℃下孵育的样品有关的结果。可以看到，24h子样品中的GOS收率为约1.4％(w/w)(相对于碳水化合物的总量为约27％(w/w))，且单糖的总量为约2.1％(w/w)(相对于碳水化合物的总量为42％(w/w))。
下表中示出了样品在20h和24h后的详细碳水化合物组成：
表1 20h乳样品和24h乳样品的碳水化合物组成的表征
值得注意的是，考虑到该乳是在8℃下通过合成产生，该乳包含出乎意料高的GOS含量和高含量的GOS-DP3+馏分。此外，葡萄糖与半乳糖间的比例出乎意料的高。
诸位发明人已观察到，通过延长用酶孵育的持续时间可甚至进一步降低乳糖水平，同时维持GOS-DP3+的总含量>1.0％(w/w)，并且维持葡萄糖与半乳糖间的重量比为至少3:1。此外，他们已观察到，在较低温度如4℃下孵育也提供具有与在8℃下孵育获得的同样吸引人的特性的液体乳产品。
已经评估了如上所述制备的乳样品的感官性质，且据报道，尝起来比基于乳糖完全水解的减乳糖乳更像乳且更不甜。
诸位发明人还看到以下迹象：由上述方法产生的产品提供具有更好长期稳定性的产品，例如，归因于更为有利的碳水化合物谱，且归因于酶促加工是在至多10℃而不是现有技术中视为正常范围的40℃-45℃下进行的事实。
实例2根据本发明的经过UHT处理的液体乳产品或粉末状乳产品的生产
在控温罐中将100kg巴氏灭菌脱脂乳(5％乳糖，0.1％乳脂)加热至8℃，并与100g用于实例1的含BIF917的相同酶溶液混合。允许将该混合物在储罐中、在严格温度控制下孵育24小时，并且然后经受热处理(95℃持续10分钟)，以使BIF917酶失活。随后将所获得的含GOS的乳冷却至5℃。
通过标准喷雾干燥，利用180℃的入口空气温度将50kg含GOS的乳转化为含GOS的乳粉。该含GOS的乳粉含约4％(w/w)水。
使50kg含GOS的乳在143℃下经UHT处理2秒，并且随后无菌地填充在1L烧瓶中。
将经过UHT处理的含GOS的乳和含GOS的乳粉两者的包装样品储存在25度下，并针对化学稳定性和感官性质变化进行测试。
实例3与现有技术比较
已将实例1中所获得的结果与通过罗德里格斯-科里纳斯(Rodrigues-Colinas)2014所获得的那些进行比较，并将比较数据呈现在表2中。
表2实例1的乳样品与罗德里格斯-科里纳斯(Rodriguez-Colinas)2014中所获得的含GOS的乳样品相比的在20h和24h后的详细碳水化合物组成(浓度数据已从g/mL转换为g/100g，假定乳密度为1.03g/mL)。
罗德里格斯-科里纳斯(Rodriguez-Colinas)等人获得的GOS(包括GOS-DP2)的最大收率为0.8％(w/w)，对应于约15％的总碳水化合物，并获得它，且仍然有2.4％(w/w)乳糖留在乳样品中，因此没有资格成为低乳糖乳。应当指出的是，如果罗德里格斯-科里纳斯(Rodriguez-Colinas)等人尝试通过进一步的酶促作用来降低表2中描述的乳的乳糖水平(生物乳糖酶，4℃)，那么将降低GOS的浓度，且将显著增加单糖的含量。
此外，值得注意的是，罗德里格斯-科里纳斯(Rodriguez-Colinas)2014的Glc/Gal比为1.8，即明显小于2:1。此外，罗德里格斯-科里纳斯(Rodriguez-Colinas)2014的乳样品只含痕量GOS-DP4，且不含GOS-DP5或GOS-DP6。实例4β-半乳糖苷酶T-值的测定
根据下文给出的分析和公式测定β-半乳糖苷酶的T-值。
分析：
制备3.3mL由待测试的β-半乳糖苷酶、10mM柠檬酸钠、1mM柠檬酸镁、1mM柠檬酸钙、Milli-Q水(密理博(Millipore)，美国)组成且具有6.5的pH的酶溶液。该酶溶液应包含量足以在本分析条件下在1小时内使用33％(w/w)外加乳糖的β-半乳糖苷酶。该酶溶液的温度应为37℃。
在时间＝T0时，向该酶溶液中添加82.5mg乳糖一水合物(关于生物化学，德国默克(Merck Germany))并与之混合，并且随后该混合物在37℃下孵育4小时。在T0后恰好1小时，收集100微升样品，并用Milli-Q水以1:5稀释，并通过加热至95℃持续10min来失活。将失活混合物保持在–20℃下，直到进行表征。
表征：
所产生的半乳糖的量(以mol计)和所使用的乳糖的量(以mol计)的测定可利用任何合适的分析技术来进行。例如，可通过HPLC，根据里奇蒙(Richmond)等人(通过高效液相色谱法分离乳制品中的碳水化合物(Separation of Carbohydrates in Dairy Productsby High Performance Liquid Chromatography)，乳制品科学期刊(J.of DairyScience)，65(8)，1394-1400，1982)和西姆斯(Simms)等人(通过高效液相色谱法分离乳糖、乳糖酸和乳糖酸乳糖(Separations of lactose,lactobionic and lactobionolactoseby high performance liquid chromatography).色谱法期刊(J.of Chromatography)，667，67-73.，1994)所述的方法来分析经稀释的混合物。
合适的分析技术的另一个实例为ISO 5765-2:2002(IDF 79-2：2002)“奶粉、干冰混合物和加工奶酪–乳糖含量的测定–第2部分：利用乳糖的半乳糖部分的酶催化方法(Dried milk,dried ice-mixes and processed cheese–Determination of lactosecontent–Part 2:Enzymatic method utilizing the galactose moiety of thelactose)”。
T-值的计算：
根据以下公式，利用从该分析的经稀释混合物的表征获得的数据计算T-值：
实例-BIF917酶的T-值：
利用WO 2013/182686的BIF917酶进行上述分析。
通过分析型HPLC，针对被转化(即被使用)的乳糖和所生成的半乳糖分析从该分析所获得的经稀释混合物。HPLC装置来自沃特斯(Waters)，且配备有差示折射计(RI-检测器)和BioRad Aminex HPX-87C柱(300x 7.8mm，125-0055)。用0.05g/L乙酸钙、0.3mL/min.的流速和20微升的注射体积进行糖类等度洗脱。
通过自动化软件对所获得的数据进行了适当基线校正，单独地确定峰并进行整合。通过使用乳糖一水合物(关于生物化学，默克，德国)、D-(+)-葡萄糖一水合物(关于生物化学，默克欧洲实验室(Merck Eurolab)，法国)和D-(+)-半乳糖(≥99％，西格玛-奥德里奇(Sigma-Aldrich)，意大利)的外部标准物进行量化。
从量化数据计算每个时间T的乳糖转化和半乳糖形成。在时间T＝1h时，收集的100微升样品中29％的乳糖已经转化，这对应于2.3微摩尔乳糖。在时间T＝1时，收集的100微升样品中已经形成0.5微摩尔半乳糖。因此，T-值可计算为0.5微摩尔/2.3微摩尔＝0.2。
还通过酶催化方法ISO 5765-2，针对被转化(即被使用)的乳糖和所生成的半乳糖分析从该分析所获得的经稀释混合物。使用来自拜发(R-Biopharm)的宝灵曼(BoehringerMannheim)乳糖/D-半乳糖测试试剂盒(目录号10 176303 035)，并根据方案进行测试。酶催化方法确认BIF917酶的T-值为0.2。
实例-常规乳糖酶的T-值：
利用可商购获得的常规乳糖酶Lactozym Pure 2600L(诺维信(Novozymes)，丹麦)进行上述分析。如针对BIF917酶所述的分析从该分析获得的经稀释混合物。三糖和四糖不以可检测的量存在，且观察到等量的葡萄糖和半乳糖。相应的T-值为1。
还测定了来自大肠杆菌(Escherichia coli)(产品编号：G6008，西格玛-奥德里奇，德国)和米曲霉(Aspergillus oryzae)(产品编号：G5160，西格玛-奥德里奇，德国)的可商购获得的β-半乳糖苷酶的T-值，且两种酶都具有约1.0的T-值。

Claims (29)

1.一种生产pH为至少5.0的含低聚半乳糖的乳产品的方法，该方法包括以下步骤：
a)提供具有转半乳糖基活性的酶，
b)提供含有量为至多10％(w/w)的乳糖的乳源性组合物，该乳源性组合物具有至少5.0的pH，
c)在至多10℃的温度下使该乳源性组合物与该酶接触，持续时间足以发生低聚半乳糖(GOS)的合成，
d)使至少一些该酶失活和/或将其移除，
e)任选地，将该含GOS的乳源性组合物转化为粉末，
f)任选地，例如以液体形式或以粉末形式包装该含GOS的乳源性组合物。
2.根据权利要求1所述的方法，其中该酶的转半乳糖基活性与水解酶活性间的比例为至少1。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中该酶选自下组，该组由以下各项组成：
-相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至1142(Ile)的序列的多肽具有至少80％序列一致性的多肽，
-相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至887(Thr)的序列的多肽具有至少80％序列一致性的多肽，和
-相对于具有从SEQ ID NO 1的位置1(Val)至965(Leu)的序列的多肽具有至少80％序列一致性的多肽。
4.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中该乳源性组合物包含总量在固体基础上为至少25％(w/w)的非脂乳固体。
5.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中该乳源性组合物具有相对于该组合物的总重量在2％-30％(w/w)范围内的固体含量。
6.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中该乳源性组合物为选自下组的组合物，该组由以下各项组成：全脂乳、低脂乳、脱脂乳、酪乳、复配乳粉、炼乳、UHT乳、乳清、乳清渗透物和奶油。
7.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中步骤d)包括该酶的热失活。
8.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中步骤d)包括将从步骤c)获得的该含GOS的乳源性组合物加热至至少140℃持续至少0.1秒，例如像至少1秒。
9.根据以上权利要求中任一项所述的方法，该方法包括将该含GOS的乳源性组合物转化为粉末的步骤e)。
10.根据以上权利要求中任一项所述的方法，该方法包括包装该含GOS的乳源性组合物的步骤f)。
11.一种pH为至少5.0的液体乳产品，该液体乳产品包含
-至少0.9％(w/w)GOS，
-至多1.5％(w/w)乳糖，
-总含量为至多3.0％(w/w)的单糖，和
-之间的重量比为至少2:1的葡萄糖和半乳糖。
12.根据权利要求11所述的液体乳产品，该液体乳产品包含至少1.0％(w/w)GOS。
13.根据权利要求11或12所述的液体乳产品，该液体乳产品包含至多1.0％(w/w)乳糖。
14.根据权利要求11-13中任一项所述的液体乳产品，该液体乳产品具有总含量为至多2.0％(w/w)的单糖。
15.根据权利要求11-14中任一项所述的液体乳产品，该液体乳产品具有总量在0.8％-2.0％(w/w)范围内的葡萄糖和总量在0.2％-0.6％(w/w)范围内的半乳糖。
16.根据权利要求11-15中任一项所述的液体乳产品，该液体乳产品具有之间的重量比为至少3:1的葡萄糖和半乳糖。
17.根据权利要求11-16中任一项所述的液体乳产品，该液体乳产品包含失活的β-半乳糖苷酶。
18.根据权利要求11-17中任一项所述的液体乳产品，该液体乳产品包含总量为至少0.5％(w/w)的GOS-DP3+。
19.根据权利要求11-18中任一项所述的液体乳产品，其中GOS-DP4+与GOS-DP3间的重量比为至少0.15。
20.根据权利要求11-19中任一项所述的液体乳产品，其中GOS-DP5与GOS-DP3间的重量比为至少0.01。
21.根据权利要求11-20中任一项所述的液体乳产品，该液体乳产品在生产后7天，在储存期间保持在25℃的温度下时具有至多60mg/100g蛋白质的糠氨酸值。
22.根据权利要求11-21中任一项所述的液体乳产品，该液体乳产品包含至少0.20mmol可用NH2-基团/g乳清蛋白。
23.根据权利要求11-22中任一项所述的液体乳产品，其中该液体乳产品是无菌的。
24.一种粉末状乳产品，包含根据权利要求11-23中任一项所述的液体乳产品的固体。
25.一种生产食物产品的方法，该方法包括以下步骤：
i)提供根据权利要求11-23中任一项所述的含GOS的液体乳产品和/或根据权利要求24所述的含GOS的粉末状乳产品，
ii)任选地，提供一种或多种另外的成分，
iii)将该含GOS的乳产品和任选地还有该一种或多种另外的成分转化为该食物产品，并且
iv)任选地，包装该食物产品。
26.一种食物产品，包含根据权利要求11-23中任一项所述的含GOS的液体乳产品和/或根据权利要求24所述的含GOS的粉末状乳产品。
27.根据权利要求26所述的食物产品，其中该食物产品是以下中的一种或多种：
-酸化乳制品
-奶酪
-饮料，和
-固体凝聚产品。
28.一种具有以下的β-半乳糖苷酶
-至多0.6的T-值，和/或
-之间的比例至少为1的转半乳糖基活性与水解酶活性，
在生产减乳糖乳产品中的用途，以降低最终乳产品中的美拉德反应水平和/或延长最终乳产品的保质期。
29.根据权利要求28所述的用途，其中该乳产品是经过UHT处理的低乳糖乳或无乳糖乳。
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