CN106353308B - 一种对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种临床诊断用的体外检测试剂，具体涉及一种对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂的制备方法。本发明的对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂含有银离子、碘离子、硝酸根离子、铂离子及偶氮二异丁脒盐酸盐，然后按比例混合制得，本发明取样容易、操作简单，可以用于大规模肿瘤代谢异常等普查，光谱性高；本发明稳定性和灵敏度高，具有显示特定的颜色及白色沉淀现象，具有非常好的识别效果，检测速度快。

Description

一种对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂的制备方法
技术领域
本发明涉及一种临床诊断用的体外检测试剂，具体涉及一种对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂的制备方法。
背景技术
癌症死亡率在所有疾病中占据首位，是人类健康的第一杀手已成为威胁人类生命和健康的一大病因，据统计每隔25年，癌症患者的人数就要翻一番。不仅如此，癌症的死亡人数也在全球迅猛上升，2030年这个数字可能会增至1320万。早期发现是治疗肿瘤的关键，肿瘤的发展分为五个阶段：良性、肿瘤细胞启动期、肿瘤早期、肿瘤中期、晚期。癌症的可怕之处，就在于前三个阶段，影像学根本无法检测出来，即便到了肿瘤中期，也只有非常专业的医生用较先进的设备才能测出。世界卫生组织的研究认为：目前1/3的癌症是可以预防的；1/3的癌症可以通过积极治疗而延长患者生命；1/3的癌症是可以通过早期发现、早期诊断、早期治疗而痊愈的。代谢类疾病如：恶性肿瘤等的早期诊断是二级预防中最关键的一步，只有在早期诊断的基础上才能进行早期治疗，降低死亡率，提高生存率。无症状人群的普查筛查又是早期诊断的主要手段之一。尿中肿瘤标志物的检测是目前研究的热点之一。尿中肿瘤标志物主要分两大类：一类是特异性蛋白质，如本一周氏蛋白、硫酸酯酶等；另一类则是肿瘤代谢产物，如核酸代谢产物多胺、氨基酸代谢产物5-羟吲哚乙酸、对羟基苯丙铜酸等。对后者的检测方法很多，其中包括含汞试剂，最近的相关技术专利为欧洲专利EP341803和中国专利《癌症显示剂》CN1096374A(申请号93106885.1)，它们分别提出了较为实用的含汞尿检试剂配方，其共同点是均采用了两种汞离子Hg2+和Hg2+，将二者按一定比例溶解在酸性溶液中，即得专利所述试剂。该试剂中的两种汞离子分别与尿中的不同成分反应，Hg2+与底物对羟基苯丙铜酸反应生成红色沉淀，Hg2+与其他阴离子反应(如CL-、NO2-等)生成白色沉淀。中国专利CN1096374提出加入金属镍，用以稳定反应产生的红色沉淀。上述现有技术所提供的试剂在应用中有一定效果，特异性、灵敏度较高，但仍有不足之处，中国专利CN1096374所提供的试剂，其假阳性率偏高，大于10％，不适用于肿瘤的普查筛检，EP341803的标本检测数较少，因而统计学结果可靠性不强。
发明内容
本发明的目的在于克服已有技术存在的问题，提供一种特异性及灵敏度高，效果显著，漏检滤低的对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂，本发明制备成本低，通过尿液检测，通过肉眼观察本发明尿液检测试剂的变化，检测出身体是否健康，检测速度快，灵敏度高。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
一种对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂的制备方法，其特征在于：该对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂含有银离子、碘离子、硝酸根离子、铂离子及偶氮二异丁脒盐酸盐，然后按比例混合制得。
该尿液检测试剂的制备方法包括以下步骤：
(1)A液配制：按体积比1:3～4，取茚三酮与质量分数为80％乙醇溶液混合均匀，备用；
(2)B液配制：按摩尔比1:2～3:1.2～1.8，取甲酸、乙二醇和硝酸银，搅拌均匀，再加入乙二醇体积30～40％无菌水进行稀释，得无色透明液，备用；
(3)C液配制：按质量比10～16:1:3～5，取碘化钾、偶氮二异丁脒盐酸盐及1.2mol/L硝酸铂溶液，混合均匀，再加入混合物质量30～35％无菌水中，并置于50～60℃中静置20～30min，备用；
(4)将上述步骤(1)制得的A液、步骤(2)制得的B液及步骤(3)制得的C液按体积比2～3:1.2～1.8:0.6～0.9，混合均匀，即可得到目标产品对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂。
本发明理论基础：在人的体内发生癌变时，癌变因子会导致引起人体细胞畸变，同时产生某些物质成分激增，产生物质会导致人体排泄物中的硫脲、乙烯硫化物等各种含硫化物与含毒激素和机体的代谢产物多胺，较非癌症病人和健康人的排出量显著增加，这些物质与本试剂混合，则呈阳性显色反应，同时产生白色沉淀，进一步提高了检测试剂的灵敏度，这种情况下，尿液与本发明的对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂发生的紫色显色反应及白色沉淀，这种明显的颜色反应及白色沉淀就是本试剂完成代谢异常尿检的理论基础。
本发明的有益效果：本发明取样容易、操作简单，可以用于大规模肿瘤代谢异常等普查，光谱性高；本发明稳定性和灵敏度高，具有显示特定的颜色及白色沉淀现象，具有非常好的识别效果，检测速度快。
本发明与现有技术相比，具有以下优点和积极效果：
(1)本发明成本低，易于操作，使用时无需使用其他仪器进行结果分析，通过肉眼观察即可得到结论；
(2)本发明用尿液作检测标本对人无损害，减轻了受检者身心压力，安全无毒，同时对操作者无任何伤害；
(3)本发明通过尿液中的游离氨基酸与茚三酮发生紫色反应，检测尿液中是否含有氨基酸，再通过在乙二醇环境中，通过银离子发生反应，产生沉淀，确定氨基酸的存在，通过引发剂偶氮二异丁脒盐酸盐的作用，将铂离子与对羟基苯丙氨酸发生螯合，生成白色沉淀，从而确定人体健康状况，高效快捷，准确率为97％以上，特异度为95.8～98.6％。
具体实施方式
下面通过实施例来描述本发明的实施方式，本领域的技术人员应当认识到，这些具体的实施例仅表明为了达到本发明的目的而选择的实施技术方案，并不是对技术方案的限制。根据本发明的相关内容，结合现有技术对本发明技术方案的改进是显然的，均属于本发明保护的范围。
实例1
A液配制：按体积比1:3，取茚三酮与质量分数为80％乙醇溶液混合均匀，备用；B液配制：按摩尔比1:2:1.2，取甲酸、乙二醇和硝酸银，搅拌均匀，再加入乙二醇体积30％无菌水进行稀释，得无色透明液，备用；C液配制：按质量比10:1:3，取碘化钾、偶氮二异丁脒盐酸盐及1.2mol/L硝酸铂溶液，混合均匀，再加入混合物质量30％无菌水中，并置于50℃中静置20min，备用；将上述制得的A液、制得的B液及制得的C液按体积比2:1.2:0.6，混合均匀，即可得到目标产品对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂。
检测方法：取早晨空腹，2天内未使用中西药物后的新鲜晨尿8mL，加入2mL本发明羟基苯丙氨酸尿液检测试剂，振匀后于40℃水浴中静置8min观察颜色变化及沉淀。
判断标准：与标准色板对照做出判断：无紫色颜色产生及白色沉淀为阴性；有紫色颜色产生、沉淀为白色为阳性；有大量沉淀呈乳白色并直接沉入管底者为急、慢性肾炎、囊肿或良性肿瘤。
对检测人群分析得：本发明敏感性为89.2％，特异度为96.7％，准确率为97.9％。
实例2
A液配制：按体积比1:3。5，取茚三酮与质量分数为80％乙醇溶液混合均匀，备用；B液配制：按摩尔比1:2.5:1.6，取甲酸、乙二醇和硝酸银，搅拌均匀，再加入乙二醇体积35％无菌水进行稀释，得无色透明液，备用；C液配制：按质量比13:1:4，取碘化钾、偶氮二异丁脒盐酸盐及1.2mol/L硝酸铂溶液，混合均匀，再加入混合物质量32％无菌水中，并置于55℃中静置25min，备用；制得的A液、制得的B液及制得的C液按体积比2.5:1.5:0.7，混合均匀，即可得到目标产品对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂。
检测方法：取早晨空腹，2天内未使用中西药物后的新鲜晨尿16mL，加入5mL本发明羟基苯丙氨酸尿液检测试剂，振匀后于40℃水浴中静置10min观察颜色变化及沉淀。
判断标准：与标准色板对照做出判断：无紫色颜色产生及白色沉淀为阴性；有紫色颜色产生、沉淀为白色为阳性；有大量沉淀呈乳白色并直接沉入管底者为急、慢性肾炎、囊肿或良性肿瘤。
对检测人群分析得：本发明敏感性为90.2％，特异度为97.3％，准确率为98.6％。
实例3
A液配制：按体积比1:4，取茚三酮与质量分数为80％乙醇溶液混合均匀，备用；B液配制：按摩尔比1:3:1.8，取甲酸、乙二醇和硝酸银，搅拌均匀，再加入乙二醇体积40％无菌水进行稀释，得无色透明液，备用；C液配制：按质量比16:1:5，取碘化钾、偶氮二异丁脒盐酸盐及1.2mol/L硝酸铂溶液，混合均匀，再加入混合物质量35％无菌水中，并置于60℃中静置30min，备用；将制得的A液、制得的B液及制得的C液按体积比3:1.8:0.9，混合均匀，即可得到目标产品对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂。
检测方法：取早晨空腹，2天内未使用中西药物后的新鲜晨尿20mL，加入8mL本发明羟基苯丙氨酸尿液检测试剂，振匀后于40℃水浴中静置10min观察颜色变化及沉淀。
判断标准：与标准色板对照做出判断：无紫色颜色产生及白色沉淀为阴性；有紫色颜色产生、沉淀为白色为阳性；有大量沉淀呈乳白色并直接沉入管底者为急、慢性肾炎、囊肿或良性肿瘤。
对检测人群分析得：本发明敏感性为92.1％，特异性为98.6％，准确率为99.4％。
以上所述仅为本发明的优选实施例，并非对本发明作出任何形式上和实质上的限制。本领域的技术人员，在不脱离本发明技术方案的范围内，当可利用以上所揭示的技术内容而作出的更改、修饰与演变的等同变化均为本发明的等效实施例；同时，凡依据本发明的实质技术对以上实施例所作的任何等同变化的更改、修饰与演变等均在本发明的由权利要求界定的范围内。

Claims (2)

1.一种对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂的制备方法，其特征在于：该对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂含有茚三酮、乙二醇、银离子、碘离子、硝酸根离子、铂离子及偶氮二异丁脒盐酸盐; 具体制备步骤为:
(1)A液配制：按体积比1:3～4，取茚三酮与质量分数为80％乙醇溶液混合均匀，备用；
(2)B液配制：按摩尔比1:2～3:1.2～1.8，取甲酸、乙二醇和硝酸银，搅拌均匀，再加入乙二醇体积30～40％无菌水进行稀释，得无色透明液，备用；
(3)C液配制：按质量比10～16:1:3～5，取碘化钾、偶氮二异丁脒盐酸盐及1.2mol/L 酸铂溶液，混合均匀，再加入混合物质量30～35％无菌水中，并置于50～60℃中静置20～30min，备用；
(4)将上述步骤(1)制得的A液、步骤(2)制得的B液及步骤(3)制得的C液按体积比2～3：1.2～1.8:0.6～0.9，混合均匀，即可得到目标产品对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂。
2.根据如权利要求1所述的制备方法制备的对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN101738392B (zh) * 2009-11-12 2011-10-05 宁夏伊品生物科技股份有限公司 一种快速测定苏氨酸含量的方法
US9134318B2 (en) * 2009-12-11 2015-09-15 Purdue Research Foundation Detection of oxidized polypeptides
CN102928362A (zh) * 2012-07-18 2013-02-13 新疆天康畜牧生物技术股份有限公司 茚三酮检测法对固相多肽合成中的游离氨基定量方法改进
CN105181687A (zh) * 2015-08-28 2015-12-23 朱建华 对羟基苯丙氨酸酪氨酸尿液检测试剂
CN105136793A (zh) * 2015-09-21 2015-12-09 苏州锐霖生物科技有限公司 一种尿液对羟基苯丙氨酸代谢物检测试剂的制备方法
CN105606605B (zh) * 2016-01-08 2019-09-20 张凤华 一种对羟基苯丙氨酸尿液检测试剂盒及制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Superoxide Reaction with Tyrosyl Radicals Generates para-Hydroperoxy and para一Hydroxy Derivatives of Tyrosine;Matias N. Moller等;《Journal of the American Chemical Society》;20121231;全文 *
苯丙酮尿症尿液生物标志物的研究进展;谭亚琼等;《实用预防医学》;20160531;第23卷(第5期);全文 *

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