CN106282025A - 一种活化浓缩藻液的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种活化浓缩藻液的方法，该方法使用的培养基每升水中包括如下组分，柠檬酸铁0.08～0.12g、硝酸钠0.16～0.24g、氯化钾0.018～0.022g、尿素0.008～0.012g、磷酸二氢钾0.018～0.022g、葡萄糖0.08～0.12g、硅酸钠0.08～0.12g。本发明所述的方法不但实现了商品藻转化成可重复培养的藻的问题，解决了培养商品藻困难的问题，且同时保证活化藻的快速生长。本发明实现了商品藻转化成可重复培养的藻的问题，且同时通过不同水环境因素，使转化的藻可适应当时转化的水环境，从而降低了大量购买成品微藻浓缩液的费用。

Description

一种活化浓缩藻液的方法

技术领域

本发明涉及微藻培养技术领域，尤其涉及一种活化浓缩藻液的方法。

背景技术

微藻一般被应用为水产中高密度养殖过程中，是高密度养殖轮虫主要开口饵料，微藻中富含大量的DHA和ARA，有助于提高轮虫的成活率和生长率，市场上的藻液一般为浓缩藻液，环境不稳定，藻液容易变臭。选择适合水生动物生长的藻液，活化培养，喂养时可用离心机将藻进行离心，将藻进行浓缩。但是目前成品藻难以转化，每次均需采购成品藻浓缩液，无疑增加了轮虫养殖的成本。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提出一种活化浓缩藻液的方法，这种方法不但实现了成品藻转化成实用藻的问题，解决了成品藻难以转化的问题，且同时保证转化成的藻成为独立的藻种并且在后期增长具有稳定性，本发明同样适用于培育出不同类型的稳定藻种。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种活化浓缩藻液的方法，使用的培养基每升水中包括如下组分，柠檬酸铁0.08～0.12g、硝酸钠0.16～0.24g、氯化钾0.018～0.022g、尿素0.008～0.012g、磷酸二氢钾0.018～0.022g、葡萄糖0.08～0.12g、硅酸钠0.08～0.12g。

优选的，使用的培养基每升水中包括如下组分，柠檬酸铁0.1g、硝酸钠0.2g、氯化钾0.02g、尿素0.01g、磷酸二氢钾0.02g、葡萄糖0.1g、硅酸钠0.1g。

优选的，将成品藻在水环境中生长，培养温度为26～33℃；光照强度为500～2000lux；每天光照时间为12～16小时；湿度为18～22％。

优选的，所述水环境为淡水、海水或经过处理的残败藻的水；优选的，所述淡水或海水使用前均经过高温高压灭菌处理；所述残败藻的水应过滤掉沉淀和杂质，且水质无发臭现象。

优选的，所述成品藻为淡水浓缩小球藻液，且所述浓缩藻液为颜色和气味良好无坏藻现象。

优选的，所述成品藻的接种量为50000—500000个藻细胞/mL，成品藻需要在超净工作台或无菌条件下进行。

优选的，平均两天加一次组合培养基，加入三次，每次加入完全用量的培养基；第7天时将恢复活性的藻替换培养基再次培养；每天定时摇藻2次。

优选的，残败藻的水是通过以下处理步骤得到：

1)取蒸馏水放入灭菌锅中高温灭菌，接种有活性较好的藻种及组合培养基，并用纱布盖住瓶口以免虫卵和其他杂质的进入；

2)每天在上午八点到十二点之间放在场地开阔且光照良好的场地；其他时间放入室内有光照的地方；

3)在前三天每天都加入培养基，第一天以及第二天均加入完全用量培养基，第三天加入一半用量培养基，从第四天开始无需添加培养基；

4)直至藻残败，水变清，然后用200～400目的筛子过滤，过滤完的水放入冰箱2～6℃保存，用时放入无菌环境用紫外灯照射0.4～1.5小时；优选的，用300目的筛子过滤、过滤完的水放入冰箱4℃保证，用时放入无菌环境用紫外灯照射1小时。

相对于现有技术，本发明所述的一种活化浓缩藻液的方法，具有以下优势：本发明所述方法不但实现了商品藻转化成可重复培养的藻的问题，解决了培养商品藻困难的问题，且同时保证活化藻的快速生长。本发明实现了商品藻转化成可重复培养的藻的问题，且同时通过不同水环境因素，使转化的藻可适应当时转化的水环境，从而降低了大量购买成品微藻浓缩液的费用。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

下面将结合实施例来详细说明本发明。

实施例一

一种活化浓缩藻液的方法，包括如下步骤：

1)藻的接种：在超净工作台或者无菌条件下，将成品藻接种到水环境中，接种量定为500000个藻细胞/ml浓度。

2)培养方法，将接种好的藻放入光照培养箱，温度为26.9℃；光照强度为光照强度为800lux；光照时间为14个小时，湿度为20％，平均两天加一次组合培养基，加入三次，每次加入完全用量的培养基。第7天时将恢复活性的藻替换培养基再次培养。

所述水环境为无菌蒸馏水，成品藻为淡水浓缩小球藻液。

每升无菌蒸馏水中包括如下组分，柠檬酸铁0.1g、硝酸钠0.2g、氯化钾0.02g、尿素0.01g、磷酸二氢钾0.02g、葡萄糖0.1g、硅酸钠0.1g。

在接种好的藻放入光照培养箱中，藻的密度在第二天下降了50﹪到60﹪，在第三天藻的密度又进行反弹增长，直至适应水环境。在第7天培养基替换成BG11培养基再次培养，藻的增长速率平均每天在10﹪到35﹪之间波动。

实施例二

一种活化浓缩藻液的方法，包括如下步骤：

1)藻的接种：在超净工作台或者无菌条件下，将成品藻接种到水环境中，接种量定为60000个藻细胞/ml浓度。

2)培养方法，将接种好的藻放入光照培养箱，温度为26.9℃；光照强度为光照强度为800lux；光照时间为14个小时，湿度为20％，平均两天加一次组合培养基，加入三次，每次加入完全用量的培养基。第7天时将恢复活性的藻替换培养基再次培养。

所述水环境为经过处理的残败藻的水，成品藻为淡水浓缩小球藻液。

每升经过处理的残败藻的水中包括如下组分，柠檬酸铁0.1g、硝酸钠0.2g、氯化钾0.02g、尿素0.01g、磷酸二氢钾0.02g、葡萄糖0.1g、硅酸钠0.1g。

残败藻的水是通过以下处理步骤得到：

1)取蒸馏水放入灭菌锅中高温灭菌，接种有活性较好的藻种及组合培养基，并用纱布盖住瓶口以免虫卵和其他杂质的进入；

2)每天在上午八点到十二点之间放在场地开阔且光照良好的场地；其他时间放入室内有光照的地方；

3)在前三天每天都加入培养基，第一天以及第二天均加入完全用量培养基，第三天加入一半用量培养基，从第四天开始无需添加培养基；

4)直至藻残败，水变清，然后用300目的筛子过滤、过滤完的水放入冰箱4℃保证，用时放入无菌环境用紫外灯照射1小时。

在接种好的藻放入光照培养箱中，藻的密度在第四天下降了40﹪到50﹪，在第5天藻的密度又进行反弹增长，直至适应水环境。在第7天培养基替换成BG11培养基再次培养，藻的增长速率平均每天在10﹪到20﹪之间波动。

实施例三

一种活化浓缩藻液的方法，包括如下步骤：

1)藻的接种：在超净工作台或者无菌条件下，将成品藻接种到水环境中，接种量定为60000个藻细胞/ml浓度。

2)培养方法，将接种好的藻放入光照培养箱，温度为26.9℃；光照强度为光照强度为800lux；光照时间为14个小时，湿度为20％，平均两天加一次组合培养基，加入三次，每次加入完全用量的培养基。第7天时将恢复活性的藻替换培养基再次培养。

所述水环境为盐度为30‰的无菌海水，成品藻为海水浓缩小球藻液。

每升无菌海水中包括如下组分，柠檬酸铁0.1g、硝酸钠0.2g、氯化钾0.02g、尿素0.01g、磷酸二氢钾0.02g、葡萄糖0.1g、硅酸钠0.1g。

在接种好的藻放入光照培养箱中，藻的密度在第二天下降了7﹪到10﹪，在第四天藻的密度下降了2﹪到5﹪，第五天开始保持增长率在16﹪到25﹪之间，直至适应水环境。在第7天培养基替换成BG11培养基再次培养，藻的增长速率平均每天在15﹪到30﹪之间波动。

以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种活化浓缩藻液的方法，其特征在于：使用的培养基每升水中包括如下组分，柠檬酸铁0.08～0.12g、硝酸钠0.16～0.24g、氯化钾0.018～0.022g、尿素0.008～0.012g、磷酸二氢钾0.018～0.022g、葡萄糖0.08～0.12g、硅酸钠0.08～0.12g。

2.根据权利要求1所述的活化浓缩藻液的方法，其特征在于：使用的培养基每升水中包括如下组分，柠檬酸铁0.1g、硝酸钠0.2g、氯化钾0.02g、尿素0.01g、磷酸二氢钾0.02g、葡萄糖0.1g、硅酸钠0.1g。

3.根据权利要求1或2所述的活化浓缩藻液的方法，其特征在于：将成品藻在水环境中生长，培养温度为26～33℃；光照强度为500～2000lux；每天光照时间为12～16小时；湿度为18～22％。

4.根据权利要求3所述的活化浓缩藻液的方法，其特征在于：所述水环境为淡水、海水或经过处理的残败藻的水；优选的，所述淡水或海水使用前均经过高温高压灭菌处理。

5.根据权利要求3所述的活化浓缩藻液的方法，其特征在于：所述成品藻为淡水浓缩小球藻液。

6.根据权利要求3所述的活化浓缩藻液的方法，其特征在于：所述成品藻的接种量为50000—500000个藻细胞/mL。

7.根据权利要求3所述的活化浓缩藻液的方法，其特征在于：平均两天加一次组合培养基，加入三次，每次加入完全用量的培养基；第7天时将恢复活性的藻替换培养基再次培养；每天定时摇藻2次。

8.根据权利要求4所述的活化浓缩藻液的方法，其特征在于：残败藻的水是通过以下处理步骤得到：

1)取蒸馏水放入灭菌锅中高温灭菌，接种有活性较好的藻种及组合培养基，并用纱布盖住瓶口以免虫卵和其他杂质的进入；

2)每天在上午八点到十二点之间放在场地开阔且光照良好的场地；其他时间放入室内有光照的地方；

3)在前三天每天都加入培养基，第一天以及第二天均加入完全用量培养基，第三天加入一半用量培养基，从第四天开始无需添加培养基；

4)直至藻残败，水变清，然后用200～400目的筛子过滤，过滤完的水放入冰箱2～6℃保存，用时放入无菌环境用紫外灯照射0.4～1.5小时；优选的，用300目的筛子过滤、过滤完的水放入冰箱4℃保证，用时放入无菌环境用紫外灯照射1小时。