CN106255744B - 培养皿 - Google Patents

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Abstract

描述用于保持一个或多个待培养对象的培养皿。培养皿具有主体,所述主体包括至少一个孔和储存器,该至少一个孔用于接收待培养对象和用于所述对象的一定量的培养基,例如水基生长基,该储存器用于接收一定量的覆盖介质,例如矿物油。该至少一个孔设在储存器的底板中,使得当在正常使用时,储存器中的覆盖介质覆盖该至少一个孔中的培养基。储存器由储存器底板和从储存器底板延伸出去的储存器壁限定。储存器壁的至少一部分离开竖直方向成角度,从而在正常使用所述培养皿时所述储存器壁的所述至少一部分相对于由储存器中的覆盖介质的表面限定的水平面倾斜。储存器壁的成角度的部分可以帮助减少覆盖孔的覆盖介质中的弯月面的出现,并且还可以定位成提供何时储存器包含适当水平的用于培养的覆盖介质的准备就绪指示。

Description

培养皿
技术领域
本发明涉及培养皿。更具体地,某些实施例涉及用于孵育胚胎的培养皿。
背景技术
不孕影响全世界超过8000万人。据估计,10%的夫妇经历原发性或继发性不孕。体外受精(IVF)是一种选择性医学治疗,其可以为否则不能怀孕的一对夫妇提供建立怀孕的机会。它是一个过程,其中卵子(卵母细胞)取自女性的卵巢并且然后在实验室中用精子受精。然后将在该过程中产生的胚胎置于子宫中用于潜在植入。在受精(授精)和转移之间,胚胎典型地在孵育器的孵育室中储存2-6天,在此期间可以例如通过成像定期监测它们以评估它们的发育。通常为了模拟输卵管和子宫中的条件,控制孵育器内的条件,例如温度和大气组成。
用于孵育的胚胎典型地置于培养皿中,所述培养皿然后可以储存在孵育器中。培养皿也可以称为载玻片、载体或托盘。
用于孵育胚胎并且也提供时移胚胎成像以评估胚胎发育的一种公知装置是由Unisense FertiliTech A/D(Aarhus,Denmark)开发并且可从其获得的具有其相关的EmbryoViewer(RTM)软件的EmbryoScope(RTM)设备。EmbryoScope(RTM)装置具有在由载玻片载体支撑的六个可移动载玻片上孵育胚胎的能力。每个载玻片(皿)包括容器的3×4阵列并且因此能够容纳多达12个胚胎。在使用中,将待孵育的每个胚胎放置在独立容器中的独立于其它的其自己的培养基液滴中。EmbryoScope(RTM)装置具有内置的显微镜和平移台以允许胚胎在它们的整个孵育过程中在不同阶段顺序地成像。
图1是典型地在EmbryoScope(RTM)设备中使用的类型的胚胎皿/载玻片2的示意性透视图。皿2具有大约7.5cm(长度)×2.5cm(宽度)×1.5cm(高度)的总尺寸,并且成形为塑料材料(例如透明聚酯材料)的单注射模制成形。皿2包括主体4,用于保持皿的手柄6,和贴标签区域8,具有关于载玻片上的胚胎的信息(例如患者ID和孵育协议信息)的标签可以粘贴在所述区域上。用于接收用于培养的单独的胚胎的容器(孔)10的3×4阵列设置在主体4的凹陷12内。凹陷12由容器10设在其中的凹陷底板14和凹陷壁16限定。凹陷具有大约3.5cm(长度)×2.0cm(宽度)×0.8cm(深度)的尺寸。在使用期间载玻片2的正常取向是凹陷底板14水平并且凹陷壁16竖直。容器10在凹陷底板处具有大约3.5mm的直径,并且具有从凹陷底板向下延伸大约2.5mm的竖直壁,之后渐缩到更小的亚毫米(例如大约0.2mm直径)的孔18,胚胎位于所述孔中以便培养。在凹陷12内也设有四个(每个端部两个)冲洗储存器20。这些可以用于储存在根据所遵循的任何方案准备用于培养/孵育的胚胎时使用的液体,例如清洁液体。尽管在图1中未显示,载玻片2具有独立的盖,其可以放置在包含凹陷12的主体4的一部分上。
在正常使用中,单独的胚胎位于容器10的底部处的亚毫米孔18中的相应的一个中。在任何给定载玻片上包含胚胎的孔10的数量将取决于将使用该载玻片孵育的胚胎的数量。通常避免在同一侧混合来自不同患者的胚胎,因此如果没有来自患者的足够胚胎来填充完整的载玻片,则载玻片的剩余容器将一般保持未使用。包含胚胎的每个容器10由用于胚胎的水基培养基填充(达到凹陷底板14下方的水平)。凹陷12然后至少部分地填充有覆盖容器10中的培养(生长)基的油层。油层提供屏障以帮助减少胚胎位于其中的培养基的蒸发。
图1中所示的皿2的几何形状和尺寸适合于匹配特定装置的几何形状和尺寸,使用载玻片在该特定装置中孵育胚胎。然而,培养皿/胚胎载玻片的广泛的相应设计可以用于其它孵育器/培养装置。
关于适合用于胚胎孵育的已知培养皿的特征的更多细节可以在例如以下文献中找到:WO 09/003487(Unisense Fetilitech A/S)[1]和WO 01/002539(The DanishInstitute of Agricultural Sciences)[2]。
尽管已发现图1中所示类型的培养皿在促进胚胎孵育方面是成功的,特别是在时移成像系统的背景下,但是本发明人仍然认识到,仍然存在一些设计方面可以改进。
发明内容
根据本发明的第一方面,提供一种用于保持一个或多个待培养对象的培养皿,其中所述培养皿具有主体,所述主体包括:至少一个孔,用于接收待培养的对象和用于所述对象的一定量的培养基;以及用于接收一定量的覆盖介质的储存器,其中所述至少一个孔设在储存器的底板中,从而在正常使用时所述储存器中的覆盖介质覆盖所述至少一个孔中的培养基,其中所述储存器由所述储存器底板和从所述储存器底板延伸出去的储存器壁限定,并且其中所述储存器壁的至少一部分离开竖直方向成角度,从而在正常使用所述培养皿时所述储存器壁的所述至少一部分相对于由所述储存器中的覆盖介质的表面限定的水平面倾斜。
根据一些实施例,所述储存器壁的成角度的部分在所述储存器周围延伸。
根据一些实施例,所述储存器壁的成角度的部分相对于所述水平面倾斜选自以下的范围内的角:10度至80度;20度至70度;30度至60度;以及40度至50度。
根据一些实施例,所述储存器壁的成角度的部分位于所述储存器壁的下部部分上方,并且其中所述成角度的部分和所述下部部分与所述水平面成不同的角度。
根据一些实施例,根据在正常使用所述培养皿时将要使用的覆盖介质的最小水平来选择在所述储存器底板上方的所述储存器壁的下部部分和所述储存器壁的成角度的部分之间的界面的高度。
根据一些实施例,所述储存器壁的成角度的部分位于所述储存器壁的上部部分下方,并且其中所述成角度的部分和所述上部部分与所述水平面成不同的角。
根据一些实施例,所述储存器壁的上部部分限定在所述主体的表面上方围绕所述储存器延伸的所述储存器壁的一部分。
根据一些实施例,所述培养皿还包括在所述储存器的底板中的凹部,其中所述凹部由凹部底板和凹部壁限定,并且其中所述至少一个孔设在所述凹部底板中。
根据一些实施例,所述凹部壁的至少一部分成角度地离开竖直方向从而相对于所述水平面倾斜。
根据一些实施例,所述凹部壁的成角度的部分在所述凹部周围延伸。
根据一些实施例,所述凹部壁的成角度的部分在所述凹部壁的底部处邻近所述凹部底板。
根据一些实施例,所述凹部壁的成角度的部分相对于所述水平面倾斜选自以下的范围内的角:10度至80度;20度至70度;30度至60度;以及40度至50度。
根据一些实施例,所述凹部底板包括底板的凸起部分,所述凸起部分比周围凹部底板高。
根据一些实施例,所述凹部壁的一部分是凹陷的,使得比邻近凹陷部分的所述凹部壁的部分更远离所述至少一个孔。
根据一些实施例,所述至少一个孔包括设在所述凹部的凹部底板中的多个孔。
根据一些实施例,所述至少一个孔包括多个孔,并且所述培养皿包括在所述储存器的底板中的至少一个另外的凹部,并且其中不同的孔设在不同的凹部中。
根据一些实施例,所述至少一个孔包括由搁架部分分离的上孔部分和下孔部分。
根据一些实施例,所述至少一个孔的至少上部部分在水平横截面中为非圆形。
根据一些实施例,所述至少一个孔包括多个孔。
根据一些实施例,所述培养皿还包括从所述主体延伸出去以提供用于所述培养皿的手柄的一对翼片。
根据一些实施例,所述培养皿还包括所述一对翼片之间的布置在所述主体上的贴标签区域以便接收包含与所述培养皿相关的信息的标签。
根据一些实施例,所述贴标签区域相对于所述水平面倾斜。
根据一些实施例,所述培养皿还包括用于覆盖所述储存器的可移除盖。
根据一些实施例,所述可移除盖的上表面包括在其周边处的向上延伸唇缘。
根据一些实施例,当覆盖所述储存器时所述盖不从所述主体悬突。
根据一些实施例,所述培养皿还包括用于介质的至少一个容器,所述介质将被用于制备用于培养的对象。
根据一些实施例,所述至少一个容器在所述储存器内。
根据一些实施例,所述至少一个容器的内壁的至少一部分相对于所述水平面倾斜。
根据一些实施例,所述培养皿还包括具有表面纹理的注释区域,所述表面纹理与所述培养皿的其它部分的表面纹理不同。
根据一些实施例,所述至少一个孔包括沿着圆弧布置的多个孔。
根据一些实施例,所述多个孔在空间上分组布置,其中在不同组中的相邻孔比在相同组中的相邻孔分离更大的距离。
根据本发明的第二方面,提供一种包括孵育室的孵育器装置,所述孵育室包括至少一个根据本发明的第一方面的培养皿。
根据本发明的第三方面,提供一种培养至少一个对象的方法,所述方法包括:提供具有主体的培养皿,所述主体包括:至少一个孔和储存器,所述至少一个孔用于接收待培养的对象和用于所述对象的一定量的培养基;所述储存器用于接收一定量的覆盖介质,其中所述至少一个孔设在所述储存器的底板中,从而在正常使用时所述储存器中的覆盖介质覆盖所述至少一个孔中的培养基,其中所述储存器由所述储存器底板和从所述储存器底板延伸出去的储存器壁限定,并且其中所述储存器壁的至少一部分离开竖直方向成角度,从而在正常使用所述培养皿时所述储存器壁的所述至少一部分相对于由所述储存器中的覆盖介质的表面限定的水平面倾斜;并且其中所述方法还包括用覆盖介质将所述储存器填充到与离开竖直方向成角度的所述储存器壁的部分相遇的水平。
将领会上面关于本发明的第一和其它方面描述的本发明的特征和方面同样适用于根据本发明的其它方面的本发明的实施例,并且可以与本发明的实施例组合,而不仅仅是上述的特定组合。
附图说明
现在参照以下附图仅通过例子描述本发明,其中:
图1在透视图中示意性地表示将用于孵育胚胎的已知培养皿;
图2至图13示意性地表示根据本发明的实施例的培养皿的不同视图;
图14在透视图中示意性地表示与图2至13中所示的培养皿结合使用的整合装置;
图15和16示意性地表示在图14中所示的孵育器装置的载玻片载体中的位置的图2至13中所示的培养皿的不同视图;
图17和18示意性地表示根据本发明的某些另外的实施例的培养皿的特征;
图19至21示意性地表示根据本发明的另一个实施例的培养皿的不同视图;以及
图22示意性地表示根据本发明的另一个实施例的培养皿的平面图。
具体实施方式
本文中讨论/描述本发明的某些例子和实施例的方面和特征。某些例子和实施例的一些方面和特征可以常规地实现,并且为了简洁起见,不对这些进行详细讨论/描述。因此将领会可以根据用于实现这样的方面和特征的常规技术来实现未详细描述的本文中讨论的装置和方法的方面和特征。
除非上下文另有要求,本文中使用的术语应当根据本公开所属领域的普通技术人员通常理解的含义来解释。
胚胎通常在受精后孵育高达3至5天的时期。在某些方面,术语“胚胎”有时可以用于表示在植入子宫中后直到受精后8周的受精卵母细胞(卵子),在该阶段它变为胎儿。根据该术语,受精卵母细胞在植入发生之前有时可以称为前胚胎或受精卵。然而,为了方便起见,术语“胚胎”有时也可以用于包含植入前的受精卵阶段,并且一般地将在本文中遵循该方法。也就是说,术语“胚胎”在广义上用于涵盖从卵母细胞的受精到桑葚胚、囊胚阶段、孵化和植入的所有发育阶段。因此,术语胚胎在本文中可以用于表示以下各阶段:受精卵母细胞,2-细胞,4-细胞,8-细胞,16-细胞,压缩,桑葚胚,囊胚,扩张囊胚和孵化囊胚,以及以上阶段之间的所有阶段(例如3-细胞或5-细胞)。因此,例如,术语胚胎和受精卵可以在本文中可互换使用。使用根据本发明的实施例(例如本文中所述)的培养皿孵育的胚胎可以预先冷冻,例如,胚胎在受精后立即冷冻保存(例如在1-细胞阶段)并且然后解冻。或者,它们可以是新鲜制备的,例如通过IVF或ICSI技术从卵母细胞新鲜制备的胚胎。
胚胎是近似球形的,并且由被明胶状壳体(称为透明带的非细胞基质)包围的一个或多个细胞(卵裂球)组成。透明带执行多种功能直到胚胎孵化,并且是胚胎评估的良好地标。透明带是球形和半透明的,并且应当与细胞碎片清楚地区分开。
如上所述,胚胎有时储存/保持在培养皿中,例如在体外受精(IVF)过程期间。在本文中,培养皿也可以称为(胚胎)载玻片、(胚胎)载体或(胚胎)托盘。也如上所述,用于胚胎学的培养皿将典型地包括用于接收待培养胚胎的多个孔。相应的孔中的胚胎浸没在由油层覆盖的水基生长基(培养基)中。
使用胚胎培养皿的研究所可能同时处理来自许多患者的许多胚胎。这意味着培养皿方便使用和操作很重要。然而,也期望以这样的方式设计培养皿,所述方式旨在帮助用户遵循良好实验室实践的总目标,例如在减小操作错误的风险(例如损坏或混合胚胎)、最小化耗材(例如油)的使用和便于对胚胎应用分析(例如时移成像)方面。考虑到这一点,本发明人已想到胚胎培养皿的新配置,其例如用于在孵育器(例如在提供胚胎的时移成像的装置中的孵育器)中孵育胚胎。
图2至图13示意性地表示根据本发明的某些实施例的培养皿22。培养皿22包括主体24,所述主体可以根据常规技术制造,例如合适的塑料材料的注射模制。对于本发明的某些实施例重要的不是用于制造培养皿的具体技术,而是培养皿的形状和配置。在这方面,用于培养皿22的制造技术和材料可以与用于已知培养皿(例如图1所示和上面讨论的培养皿2)的制造技术和材料大致相同。特别地,培养皿22可以通过注射模制大体上透明的聚合物(例如聚酯,例如PEN,PETg,和/或PET)形成。主体24可以包括单模制。如下面进一步讨论,培养皿22在一些情况下还可以包括从主体24分离和可移除的盖。盖可以再次根据常规技术制造,例如透明聚合物材料的注射模制。
在讨论图2至13中所示的培养皿(载玻片/托盘/载体)22的特定特征和方面之前,提供不同图的总体概述。
图2在透视图中从上方示意性地表示培养皿22,特别是培养皿22的主体24。
图3在透视图中从下方示意性地表示培养皿22。从图2中的上方看到的培养皿22的各种特征的下侧可以在图3中看到。这显示主体24是大体片状的而不是实心的,这在下面进一步讨论的一些横截面图中也是明显的。包括主体24的材料的横截面厚度通常可以为大约1或2mm,但是根据通常理解的用于培养皿的注射模制的构造原理,在不同位置可以更厚或更薄。
图4在透视图中从上方并且从与图2中所示的方向不同的方向示意性地表示培养皿22。此外,如图4中所示的培养皿22显示为具有覆盖主体24的一部分的盖60。如上所述,盖可以根据常规技术制造,例如透明聚合物材料的注射模制。
图5在平面图中从上方示意性地表示培养皿22。
图6示意性地表示沿水平方向延伸并且穿过如图5中所示的培养皿22的中间的切割的培养皿22的剖视侧视图。
图7示意性地表示从图5中所示的取向的右侧看到的培养皿22的端视图。
图8示意性地表示培养皿22的剖视透视图。
图9和图10示意性地表示培养皿22的某些部分的剖视透视图。
图11和12示意性地表示类似于图8中所示的视图的培养皿22的剖视透视图,但是显示包含培养基和覆盖介质(油)的培养皿。在图11中培养皿中的培养基和覆盖介质显示为纯白以更清楚地表示表面,而在图12中培养基和覆盖介质显示为透明。
图13示意性地表示类似于图6中所示的视图的培养皿22的剖视侧视图(尽管具有略微不同的切割平面),并且显示包含介质(包括胚胎培养基和覆盖介质的覆盖层)的培养皿。
在该特定例子中,图2至图13中所示的培养皿22旨在用于例如在图14中的透视图中示意性地表示的孵育器装置100中。图14中所示的孵育器装置100可以例如是共同未决英国专利申请GB 1401773.5[3](在2014年2月3日提交)和/或GB 1401774.3[4](在2014年2月3日提交)中所述的类型。然而,将领会用于根据本发明的实施例的培养皿(如果确实培养皿将用于孵育胚胎)的特定孵育器装置不是非常重要的。
该例子中的孵育器装置100具有大约60cm×50cm的特征占位面积和大约50cm的高度。装置100包括在图14中未显示的外壳从而露出孵育器装置的各种内部部件。装置100包括基板110,各种其它部件安装到所述基板。在其核心处孵育器100包括由孵育室壳体112和载玻片载体114限定的孵育室。载玻片载体114包括多个隔室,用于保持图2至13中所示类型的用于保持将在孵育室内孵育的胚胎的相应的胚胎培养皿。尽管在图14中只能看到载玻片载体114的一小部分,但是载玻片载体114大体上是圆盘的形式。在图15中的示意性透视图中显示载玻片载体114的更大部分,没有周围的孵育器室壳体112并且培养皿22位于载玻片载体的隔室中的一个中。图16类似于图15,但是显示通过培养皿22和载玻片载体114的部分透视剖视图。
孵育器装置100还包括成像设备120,在该情况下是数字显微镜。显微镜120安装在孵育室外部,与孵育室壳体112中的观察口对准,从而允许显微镜记录储存在培养皿中的胚胎的图像。
孵育室壳体112和载玻片载体114都是大致圆形的并且相对薄(即盘状)。孵育室壳体112相对于基板110固定就位。载玻片载体114在由孵育室壳体112限定的孵育室内围绕旋转轴线116可旋转。在该例子中,载玻片载体114直接安装到安装在孵育室下方和外部的马达的轴。因此,马达的轴穿过孵育室的下侧中的开口并且联接到载玻片载体,使得马达可以驱动载玻片载体在孵育室内旋转。因此,孵育室内的不同培养皿可以旋转到与用于监测的成像设备对准(图像采集)。
总的来说,孵育器装置100的操作和构造可以遵循已知技术,例如在英国专利申请GB 1401773.5[3]和GB 1401774.3[4]中描述的技术。
因此,在正常使用中,根据本发明的实施例的培养皿22可以放置在图14中所示类型的孵育器装置100的载玻片载体114的隔室中。培养皿22的特征的相对空间布置可以参考其在正常使用期间的取向进行描述。
因此,术语水平可以用于描述如图5中所示的培养皿22的平面,在该例子中,所述平面大体上是培养皿22具有其最大面积范围的平面。术语竖直可以用于描述垂直于水平的方向。因此,可以称为培养皿的竖直方向的方向由图6和7中标记为V的方向箭头示意性地表示。本文中称为培养皿的水平方向的方向是平行于图5的平面的方向,例如由图6和7中标记为H的方向箭头示意性地表示。竖直方向也可以被称为培养皿22的Z方向。由于该例子中的培养皿22旨在用于孵育器中,其中培养皿围绕轴线旋转以用于顺序地使胚胎与成像系统对准,因此在一些情况下方便的是在圆形坐标系统内参考培养皿22的水平面中的方向,所述圆形坐标系统具有其在载玻片载体的旋转中心116处的原点,从旋转中心延伸出去的径向方向R和垂直于径向方向延伸的方位方向A。因此,在一些情况下可以参考径向方向R、方位方向A和竖直方向Z来描述培养皿22的特征的相对布置,如图2中示意性地所示。径向方向R也可以被称为培养皿的延伸轴/长度方向L。培养皿的宽度方向W可以被限定为水平并且与长度方向L正交的方向。培养皿的高度方向H可以被限定为竖直方向。当然,将领会限定这些各种方向仅仅是为了方便解释培养皿的一些特征的相对布置,特别是考虑到在正常使用时培养皿的取向,并且术语本身不旨在绝对意义上对培养皿22的整体配置强加任何特定结构限制。
考虑到在正常使用时载玻片的竖直方向,在本文中将使用诸如“上”和“下”以及“顶部”和“底部”的术语。因此培养皿的“顶部”是当培养皿在正常使用时(例如当包含胚胎和介质时)面向上的培养皿的表面。培养皿的“底部”是当培养皿在正常使用时面向下的培养皿的表面。培养皿的主体的大体上与其延伸轴线正交的边缘表面可以被称为培养皿的端部。培养皿的主体的大体上平行于其延伸轴线的边缘表面可以称为培养皿的侧部。
从图中可以看出,在该例子中培养皿22的端部大体上是直的,而侧部围绕它们的中部大体弯曲使得侧部向内渐缩。当放置在图15和16中所示类型的载玻片载体114中时,该渐缩允许多个培养皿方便地围绕圆布置。
培养皿的侧部中的弯曲部和端部与侧部之间的外角部是圆形的。在该特定例子中培养皿22具有约6.5cm的特征长度L,约5cm左右的特征宽度W(在最宽点处)和约1.5cm的特征高度H。然而,将领会可以根据当前的实现方式来选择培养皿的其它尺寸和形状,从而例如匹配用于培养皿的保持器的几何形状。例如,根据本发明的各种实施例,并且根据实现方式,培养皿可以具有选自以下的范围内的特征长度L:2cm至20cm;2cm至15cm;3cm至12cm和5cm至10cm;和/或在选自以下的范围内的特征宽度W:1cm至10cm;2cm至8cm;3cm至7cm和4cm至6cm;和/或小于或等于选自以下的量的特征高度H:2cm;1.5cm;1.0cm;和0.5cm。然而,将领会培养皿的总体尺寸不是主要的,并且可以根据当前的实现方式来选择,例如考虑到预期用途。
参考图2至图13,培养皿22用于保持待培养的一个或多个对象,例如胚胎,并且包括主体24,如上所述。
主体包括用于接收用于培养的胚胎的十六个孔42。在正常使用中胚胎培养基(例如水基营养丰富基质)也放置在具有胚胎的孔中。在使用中,典型地在每个孔中将有一个胚胎直到待培养的胚胎的数量。例如,如果有来自患者的9个胚胎将使用给定培养皿进行培养,则在九个孔42的每一个中将放置一个胚胎,在剩余的七个孔中没有胚胎。也就是说,至少对于人类IVF,通过在相同的培养皿/载玻片上混合来自不同患者的胚胎同时填充特定培养皿的所有孔是不常见的。尽管在每个孔中典型地可能有一个胚胎,但在一些应用中可能期望将多个胚胎作为单个孔中的良好培养物进行检查。因此,在一些情况下单独的孔可以包括多个胚胎。
在该例子中十六个孔42沿着包括圆弧的单线在空间上布置。当培养皿22定位成在载玻片载体114(例如在图15中表示)中使用时,根据孔42和载玻片载体114的旋转轴线116之间的分离来选择该弧的半径。这可以通过简单地将培养皿22保持在其上的载玻片载体旋转到适当位置允许孵育装置100的监测站(例如成像设备120)将与不同的孔42对准。在一个例子中,可以使用140mm的弧半径,但是将领会适当的弧半径将取决于孵育器的几何形状。
在该例子中十六个孔42在空间上布置成四个的四组。组内相邻的孔对之间的距离小于不同组的端部处的相邻孔之间的距离。已发现这种将孔空间分离成多个不同组帮助用户更容易地定位特定孔。例如,如果用户希望从样本载体的一侧识别第十个孔,则用户可以简单地查看第三组中的第二个孔,而不必从培养皿的一侧沿着孔计数。在该例子中孔也带有识别标记64以帮助用户识别不同的孔。识别标记64可以模制到与相应的孔相邻的培养皿的主体中,并且可以例如包括从1到16的数字索引。这样的标记可以模制到培养皿的下侧,使得它们仍然从上方可见,但是不引入可能潜在地在孔的附近捕获污染物的表面粗糙度。识别标记64可以例如在图3中所示的下侧透视图上看到。(在该情况下包括用于下面进一步讨论的冲洗储存器46的字母A、B、C、D的对应识别标记65也可以在图3的下侧视图中被看到)。
在该例子中孔42关于垂直轴大致圆形对称,并且具有大约2.5mm的深度。组内相邻孔的中心分离约1.75mm。当然,在其它实现方式中可以使用其它分离。在孔的相邻组的端部处的相邻孔的中心分离该量的大约两倍,即3.5mm。在图10中可以看到,每个孔42包括由大致水平的搁架部分56分离的上孔部分54和下孔部分58,即,下孔部分的顶部处的水平横截面小于上孔部分的底部处的水平横截面。
上孔部分54大体上为圆柱体(即具有竖直壁)的形式。下孔部分58大体上为截头圆锥的形式,其随着深度的增加而缩小到孔42的基部处的孔底板,所述孔底板大体上是胚胎在培养期间将停留的地方。在其基部处的孔的特征宽度/直径可以为亚毫米,例如大约0.25mm左右。在该例子中上孔部分具有约1.0mm的高度并且下孔部分具有约1.5mm的高度。
提供搁架部分56以帮助防止悬浮在培养皿内的液体介质中的颗粒污染物沉降到孔42的底板。沉降到孔中的颗粒污染物的一部分将沉降在搁架部分56上,而不是在下孔部分58的底部处的孔的底板上。搁架部分56的相对尺寸越大,将被防止沉降在孔42的底板上的颗粒污染物的部分越大。搁架部分在该例子中具有大约0.5mm的水平面中的宽度。搁架部分56的大部分可以是水平的。然而,在其它情况下,搁架部分56可以离开水平方向成角度,例如向下离开孔的中心,使得任何沉降颗粒被偏置离开孔的中心。在图10中可以看到,孔的不同部分之间的过渡部大体上为圆形。在培养皿的不同部分之间提供平滑/圆形过渡部可以在通过注射模制的制造期间帮助,并且也可以减小污染物和/或气泡被捕获在角部中的可能性。圆角部和过渡部也可以帮助正在被培养的对象(例如胚胎)沉降在孔42的底部处。
培养皿22包括由储存器壁34和储存器底板32限定的储存器30。孔42设在储存器30的底板32中。更特别地,在该示例性实现方式中,孔42设在位于储存器底板32中的凹部(槽)44。所有孔在单个槽44的底板中,但是在其它例子中孔可以在储存器底板32中的不同槽中分组在一起。
当培养皿在使用时,储存器用于在胚胎及其培养基上方保持一定量的覆盖介质。覆盖培养基的使用一般遵循常规培养技术,由此在包含胚胎的孔中的培养基由覆盖介质(例如,油基介质,例如矿物油)的层覆盖,所述覆盖介质比培养基更轻并且不与培养基混合。覆盖介质在培养基和培养皿周围的环境之间提供屏障,从而例如帮助防止培养基的蒸发。图11至13示意性地表示当包含一定量的覆盖介质70时的培养皿22。覆盖介质70(例如矿物油)通常是透明的,但在图11中表示为纯白以帮助表示。在图12和13中覆盖介质表示为透明,使得仅仅其上表面72是明显的。
在水平横截面中储存器30具有带有圆角部的大致四边形形状。因此,储存器壁34包括大体上平行于培养皿22的端部延伸的两个侧部和大致平行于培养皿22的侧部延伸的两个侧部。由于培养皿22的侧部相对于彼此成角度,因此大体上平行于培养皿22的侧部延伸的储存器壁34的部分也相对于另一个成角度。
在该例子中储存器的顶部具有在平行于培养皿22的端部延伸的侧部之间的约3cm的特征范围,以及在平行于培养皿的侧部延伸的侧部之间的约4cm的特征宽度(在最宽点处)。储存器具有约0.8cm的特征深度(从储存器壁34的顶部到储存器底板32)。然而,将领会可以根据当前的实施方式选择储存器的其它尺寸和形状。例如,根据本发明的各种实施例,并且根据实现方式,储存器可以具有在选自以下的范围内的沿着径向方向的特征范围:1cm至5cm;2cm至4cm和2.5cm至3.5cm;和/或在选自以下的范围内的特征宽度:1cm至8cm;3cm至7cm和4cm至6cm;和/或小于或等于选自以下的量的特征高度H:2cm;1.5cm;1.0cm和0.5cm。然而,将领会在水平横截面中的储存器的总体尺寸和精确几何形状不是主要的,并且可以根据当前的实现方式来选择,例如考虑到预期用途(例如将使用的覆盖介质的期望量)。
储存器壁34从储存器底板32向上延伸,并且在该例子中包括三个部分,每个部分都围绕储存器30延伸。因此,储存器壁包括竖直下储存器壁部分36,其与储存器底板32相遇并且大致从其垂直向上延伸。在下储存器壁部分36上方是中间储存器壁部分38。其从下储存器壁部分向上延伸并且离开竖直方向(即,相对于水平平面倾斜)成角度。中间储存器壁部分38也可以称为成角度的储存器壁部分38,该中间储存器壁部分38相对于储存器向外成角度,具有在储存器底板上方的增加距离(即,因此储存器的水平横截面随着在储存器底板32上方的高度的增加而增加)。在成角度的(中间)储存器壁部分38上方的是上储存器壁部分40。其从成角度的储存器壁部分38的顶部大致竖直向上延伸。因此,储存器壁32的至少一个部分38远离竖直方向成角度以便当培养皿在正常使用时相对于由储存器中的覆盖介质的表面限定的水平面倾斜。在该例子中储存器壁34的成角度的部分38围绕储存器壁延伸,但是在所有实现方式中不一定是这种情况。
在储存器壁34中提供成角度的部分38可以用于各种目的。
例如,当培养皿在正常使用时可以根据将使用的覆盖介质的期望最小水平来选择在储存器底板上方的下储存器壁部分36和成角度的储存器壁部分38之间的接合部的高度(即,下储存器壁部分的高度)。本发明人已认识到,当用透明覆盖介质填充透明培养皿时,在某些情况下用户可能难以可靠地确定覆盖介质已被填充的高度。这通常导致用户放入比所需的更多的覆盖介质,使得用户确信到已达到期望的最小水平。这可能是有害的,原因是不仅使用比所需更多的覆盖介质是浪费,而且在意外溢出的情况下产生有更大影响的可能性的风险(原因是将有更多的覆盖介质溢出)。本发明人已认识到,使壁的一部分相对于壁的另一部分成角更大允许用户容易地看到何时储存器中的介质的深度经过壁角的变化的高度。这是由于当介质在壁的成角度的部分上延伸时介质的扩张周边将是显而易见的。也就是说,用户可以简单地继续用覆盖介质填充储存器,直到用户看到覆盖介质开始在壁38的成角度的部分上延伸(即,当覆盖介质开始溢出储存器壁36的下部部分时)。在该阶段用户知道引入到储存器中的覆盖介质的深度至少为下壁部分的高度。因此,如果对于指定应用的覆盖介质(例如油)的最小深度被认为是1.5mm,则下壁部分38的高度可以被设置为1.5mm。当油开始在成角度的储存器壁部分38上扩展时,用油填充储存器30的用户将容易地看到何时超过该高度。
可以实现储存器壁34的成角度的部分38的该介质深度指示功能,而储存器壁34的成角部分38不围绕储存器30延伸。然而,除了提供介质深度的指示之外,成角度的储存器壁部分38也用于有效地使覆盖介质的弯月面(即,覆盖介质与储存器壁34相遇的地方)比对于覆盖介质的给定深度和体积的情况更远离孔移动。这在其中培养皿旨在用于具有时移成像功能的孵育器装置(例如图14中所示类型的孵育器装置100)的实现方式中可以是特别有利的。这是由于用于该类型的孵育器装置的成像系统通常依赖于穿过覆盖介质的光路(例如,用于成像或照明)。所以重要的是减小失真,该失真否则可能与和其弯月面相关联的覆盖介质中的曲率相关联。提供储存器壁的成角度的部分,并且特别是围绕储存器参数的大部分延伸的成角度的部分,该提供以上部分允许覆盖介质的弯月面比对于覆盖介质的给定体积的情况更远离储存器中的孔。此外,由于覆盖介质以有别于直角以外的角度与储存器壁相遇,可以减小弯月面效应的大小。
在图2至13中所示的特定示例性培养皿中,并且如图9中示意性地所示,下储存器壁36具有约1.5mm的高度,上储存器壁40具有约2.5mm的高度,并且储存器壁38的成角度的部分延伸超过大约4mm的竖直高度并且相对于水平面倾斜大约45度。然而,将领会储存器的几何形状在不同的实现方式中可以不同。例如,下储存器壁部分36的高度可以根据用于当前应用的覆盖介质的期望最小深度来选择。同样,在不同的实施方式中角部分38的倾斜角可以不同。例如,储存器壁的成角度的部分可以相对于水平面倾斜选自以下的范围内的角:10度至80度;20度至70度;30度至60度;和40度至50度。
如上所述,下壁部分36和成角度的壁部分38之间的壁角的变化实际上提供标记/视觉提示,用户可以容易地看到和使用以识别何时覆盖介质的水平大于标记的高度(由于将看到覆盖介质表面的周边开始延伸超过标记)。在其它例子中可以没有竖直下壁部分36,即,储存器壁的成角度的部分38可以向下延伸到储存器底板。在该情况下可以在成角度的表面中以适当的高度提供表面标记,例如模制线,从而有效地提供用于最小填充水平的标记。因此,当覆盖介质的表面开始延伸超过设在成角度的壁部分上的标记时,用户可以识别已获得期望水平。
上壁部分40在围绕储存器的培养皿22的主体24的部分的水平上方延伸,例如如图8中所见。因此,上壁部分40实际上提供围绕储存器的竖直延伸唇缘,从而例如帮助避免溢出。此外,由上壁部分40提供的向上延伸唇缘为图4中所示的盖60提供容座。
盖60的内部的几何形状可以被选择为在水平横截面中与上壁部分40的外部范围大致匹配,并且盖60的高度可以选择为大致对应于上壁部分40的高度。因此,盖60可以容易地位于储存器30上,如图4中示意性所示。在该例子中盖60还带有围绕其周边的向上延伸的唇缘62。本发明人已发现,当操作培养皿22的盖62和/或主体24时,这自然有助于防止用户移动他们的手指划过盖60的表面。如果培养皿预期用于具有时移成像功能的孵育器装置,这可能是特别有利的。这是由于该类型的孵育器装置中的成像系统通常将依赖于穿过盖60的光路(例如用于成像或照明),并且因此可能重要的是减小可能从盖60上的指纹或其它标记发生的散射和/或阴影。
如图4的例子中所示的盖60的另一重要方面是其布置成比培养皿更窄。也就是说,当盖60就位时,其不会从培养皿22的主体24的侧部悬突。这意味着如果用户通过其侧部保持培养皿,则用户仅抓住盖60并且允许培养皿22的主体24脱落的风险减小。然而,在其它例子中盖可以从主体悬突。
如上所述,在该例子中孔42设在储存器底板32中的凹部(槽)44的底部处。例如,在图10中可以看到,槽(凹部)44由槽底板(凹部底板)45和槽壁(凹部壁)47限定。在水平横截面中槽44具有大体弓形的形状以容纳如上所述的在其上布置孔42的弧线。因此,槽壁47包括越过培养皿22的宽度方位延伸的两个弯曲侧部和大致平行于培养皿22的侧部延伸的两个较短端部,如图中所示。
在该例子中槽的顶部具有沿其弯曲侧部的约3.5cm的特征长度和在其弯曲侧部之间的约0.7cm的特征宽度。槽44具有约0.5cm的特征深度(从槽壁47的顶部到槽底板45)。然而,将领会水平横截面中的槽的总体尺寸和精确几何形状不是主要的,并且可以根据当前的实现方式来选择,例如考虑到将容纳在槽内的孔的布置。
槽壁47从槽底板45向上延伸,并且在该例子中包括两个部分,每个部分都围绕槽44延伸。因此,槽壁包括成角度的槽壁部分52,其与水平的槽底板45相遇(在圆角部处)并且在离开竖直方向成角度(即,相对于水平面倾斜)的方向上大体上延伸离开槽底板45。成角度的槽壁部分52也可以称为下槽壁部分52,该成角度的槽壁部分52相对于槽向外成角度,具有在槽底板上方的增加距离(即,因此槽的水平横截面随着在槽底板45上方的高度的增加而增加)。在成角度的槽壁部分52上方的是上槽壁部分53。上壁部分53从成角度的槽壁部分52的顶部大致竖直向上延伸。
提供槽44使得如果期望不同孔42中的培养基在培养期间流体连通,则它可以部分地(或完全地)用培养基填充。也就是说,单独的孔42可以实际上被填充到溢流,使得培养基开始填充周围的槽。此外,可以通过简单地将培养基引入槽中使其流入孔中而同时填充单独的孔42。这通常将比单独地填充孔42更快和更方便。由于槽具有小于储存器30的水平横截面,因此不同孔42中的培养基能够保持流体连通,同时使用比否则将会需要的更小体积的培养基(即,如果必须用培养基部分地填充整个储存器以保持培养基和不同的孔处于流体连通)。图11示意性地显示填充到槽44的顶部的培养基的表面水平76。然而,在实践中可以预期槽可以仅仅仅部分被填充。在这方面可以提供槽壁的成角度的部分上的多个标记以指示何时已超过特定培养基填充水平,例如以类似于上面针对储存器中的覆盖介质水平所述的方式。类似地,在一些例子中槽44的壁47可以在成角度的槽壁部分下方带有附加的下槽壁部分,并且其在功能上对应于上述用于储存器30的下储存器壁部分36以提供当到达培养基的特定水平时的指示。
除了可能用于帮助用户识别用于培养基的填充水平之外,并且关于储存器壁的成角度的部分38,槽壁47中的成角度的部分52减少到达某个介质水平所需的介质的量。
在图2至13中所示的特定示例性培养皿22中,上部槽壁部分53具有约2mm的高度,并且槽壁52的成角度的部分在约2mm的竖直高度上延伸并且相对于水平面成约45度倾斜。然而,将领会对于不同的实现方式槽的几何形状可以不同。例如,槽壁47的成角度的部分52可以相对于水平面倾斜选自以下的范围内的角:10度至80度;20度至70度;30度至60度;和40度至50度。
为了将培养基引入孔中,用户通常将使用注射器或移液管。例如,可以使用预装有适当体积的培养基的注射器或移液管,并且将培养基简单地喷射到槽45中。为了在这方面帮助用户,槽壁47可以带有凹陷部分49。这在槽44中提供最初可以引入培养基到其中的区域,并且特别地提供可以引入培养基到其中的、比其它情况更远离孔的区域。例如如果孔已经包含胚胎,这可能是有利的,原因是它可以帮助避免由培养基中的流体流动导致的对胚胎的干扰。
除了槽44和孔42之外,储存器30也可以包含一个或多个冲洗储存器46。这些是在储存器的底板中的开口,例如具有大约3mm的直径和深度。冲洗储存器可以用于包含液体,该液体是在根据通常的常规技术制备用于培养的胚胎(例如洗涤)期间使用的液体。在这方面,冲洗储存器46可以以类似于图1中所示的已知培养皿2的储存器20的方式使用。冲洗储存器46包括大体竖直的壁,但是具有在基部处相对于水平面倾斜的成角度的部分48。这些成角度的部分可以帮助定位冲洗储存器中的对象,例如通过将对象(例如正被洗涤的胚胎)朝着冲洗储存器底板的中心引导,从那里它们可以更方便地被拾取以便从冲洗储存器46移除,例如用于转移到孔42中的一个。尽管在图2至13中所示的示例性培养皿22中未显示,但是在一些示例性实现方式中冲洗储存器46的壁可以在它们的竖直范围的大部分上成角度,要么围绕它们的整个参数,要么在一个或多个特定方向上,从而允许更符合人体工程学的接近(例如,当从离开竖直方向的增加角接近时,允许拾取或分配移液管/注射器到达储存器的底部)。
除了培养皿22的储存器30内的上述特征之外,储存器外部的培养皿还有各种显著特征有助于其方便使用。例如,在一些实现方式中,培养皿22的主体24可以带有可以被称为笔记记录区域50的区域。这是主体的大致平坦部分,其被提供以允许用户在培养皿上例如使用毛毡笔书写以进行与培养皿相关的注释/注解。例如,用户可能希望写出与正在培养的胚胎相关的某个事件发生的时间。然而,将领会由用户在注释区域50上书写的要记录的信息的特定性质不重要。通常优选的是本文中所述类型的培养皿包括平滑表面以减小污染物被捕获的可能性。然而,为了便于在注释区域上书写,它可以带有表面纹理,所述表面纹理与培养皿的其它部分(例如更可能与介质和/或正在培养的对象接触的部分)的表面纹理不同,例如更粗糙。
图2至13中所示的培养皿22的另一方面是朝着培养皿的一个端部(在该例子中,当皿位于图14中所示类型的孵育器装置100中时将背离旋转载玻片载体114的中心的端部)提供一对突起/翼片26。这些翼片26被提供以便于操作。翼片26大体上彼此平行并且从培养皿22的主体24竖直地延伸出去。例如,翼片具有的尺寸可以为,面积大约为1cm2(以大致匹配拇指和食指的接触面积),并且厚度大约为1mm。在一些方面,单独的翼片26可以类似于图1中所示的已知载玻片设计的翼片6。然而,与单个操作翼片相反,提供两个操作翼片26在一些情况下可以是有利的。例如,两个翼片26允许用户用在一个翼片的外表面上的拇指并且在另一个翼片的外表面上的食指夹持培养皿(即,使用类似捏掐的夹持)。具有两个翼片提供更大的手柄以帮助为用户提供更显著的/可靠的夹持。
此外,翼片26之间的空间提供用于贴标签的方便区域28。也就是说,培养皿22带有在一对翼片26之间布置在主体上的贴标签区域28。贴标签区域28可以用于接收包含与培养皿相关的信息的标签,例如粘纸标签。例如,标签可以包括与已获得胚胎的患者相关的识别信息,和/或关于将要培养胚胎的方式的培养协议信息。该信息可以以通用文本格式和/或以机器可读格式例如使用条形码或QR码格式记录在标签上。重要的是,在两个翼片26之间提供贴标签区域28可以帮助保护贴标签区域中的标签在操作培养皿22时不被用户的手指损坏。在图1所示的示例性培养皿2中,粘性标签典型地应用于邻近操作翼片6的区域8。用于贴标签的该位置可以导致用户的手指和拇指在操作期间损坏标签上的识别信息的表示(例如通过将其撕掉或使其变脏)。使用图2至图13中所示的培养皿22的双翼片布置发生该情况的可能性较小,原因是当使用翼片26操作时,用户的手指/拇指通常不会与贴标签区域中的标签接触。
贴标签区域28的表面可以相对于水平面倾斜例如大约30度左右的角,如图6中所示。该倾斜允许从上方和从相对于培养皿的端点方向方便地看到贴标签区域。
因此,并且如上所述,存在有助于改进现有设计的根据本发明的实施例提供的培养皿的各种方面。将领会根据本发明的各种实施例的培养皿可以单独地或以各种组合包含一些或所有上述特征。此外,根据本发明的某些实施例,培养皿可以包括上述特征的附加特征和/或变化。
例如,尽管上述培养皿22中的孔42关于垂直轴线是圆形对称的,但是在另一例子中,孔可以不是圆形对称的。例如,孔的至少上部分可以在水平横截面中为非圆形。特别地,限定孔的顶部的储存器底板中的开口可以是长形的,例如如图17中示意性地表示。图17在透视横截面中显示根据本发明的另一实施例的培养皿122的槽144的一部分。除了如本文中所述的,培养皿122可以遵循与上述培养皿22相同的一般配置。然而,在该例子中槽144与图10中所示的培养皿22的槽44稍微不同,原因是其不包括槽壁的成角度的部分。
图17中所示的培养皿122的孔142均包括由大体水平的搁架部分156分离的上孔部分154和下孔部分158(类似于图2至13中所示的培养皿22的孔42)。例如在图10中看到的孔42和在图17中看到的孔142的下孔部分和水平壳体部分大致相同。然而,尽管在图10中看到的上孔部分54当然是对称的,但是图17中所示的上孔部分154是长形的。特别地,孔142在一个方向(在该例子中大体上平行于培养皿122的延伸轴线)比在另一方向(在该例子中大体上平行于培养皿122的宽度)上具有更大的范围。该方法允许沿着一个方向提供相对于相应孔142的上部分的相对浅的角156,并且这可以帮助用户设法操作孔142内的对象(原因是用户的操作工具可以从比其它情况更浅的角接近)。
图18示意性地表示根据本发明的某些其它实施例的可以设在图2至13中所示的培养皿22的槽44中的附加特征。附加特征是在凹陷49附近的槽底板45的凸起部分150。例如,凸起部分150可以向上延伸以提供离槽底板45大约1mm高度的表面。在胚胎的孵育期间培养基有时被替换。这通常涉及从覆盖介质(例如油)下面抽出一定量的培养基,并且然后用相同体积的新培养基替换。如上所述,通过提供可以引入新培养基并且可以从其移除现有培养基的区域,邻近凹陷49的槽底板45的区域可以促进该过程。当移除培养基时,重要的是不要过多地移除以避免胚胎意外地与覆盖介质接触。另外,重要的是避免移除太多的培养基使得覆盖介质接触槽的底板。这是由于存在新引入的培养基将在槽底板上方的覆盖介质中形成中间层并且因此实际上不可用于胚胎的风险。通常可以在给定的培养基更新周期中移除大约80%的培养基。然而,通常的情况是用户将不会移除多达80%的培养基,原因是担心移除太多的培养基并且损害胚胎。然而,根据本发明的某些实施例,凸起部分150提供平台,当移除培养基时用户可以将用于移除培养基的工具的喷嘴抵靠在所述平台上。这防止用户移除将导致其水平下降到平台150的水平之下的培养基的量。因此,认识到如果过多的培养基被抽出,则过量将来自油覆盖层,而不是来自旨在保留在培养皿中的残余培养基,用户可以感觉放心地移除所需量的培养基。因此,提供凸起部分150允许方便而准确地移除所需体积的培养基。
如已经解释的,当然将领会根据本发明的其它实施例可以修改上述的各种示例性尺寸和几何配置。例如,培养皿的整体形状和大小可以根据其中将储存培养皿的孵育器装置来选择。此外,尽管上述例子集中在16个孔的弓形线上,但是孔的数量及其空间布置对于不同的实现方式当然可以是不同的。例如,不同于孔的单个弓形线,可以存在不同半径上的孔的多个弓形线,或者布置在一个或多个直线中的孔。也将领会尽管上述实施例集中于用于孵育胚胎的培养皿,但是根据本发明的其它实施例的培养皿可用于培养其它对象。
还将领会根据本发明的其它实施例的培养皿可以包含上述培养皿22的一些或全部特征,而没有上述培养皿22的一些其它特征。也就是说,将领会上述本发明的实施例的各种特征是独立有益的,并且可以与上述本发明的实施例的各种特征中的其它特征分开使用。例如,根据本发明的一些实施例,培养皿可以设置成具有上述类型的设计的孔,例如包含搁架部分以帮助防止颗粒下沉到孔的底部和/或非圆形横截面,但是培养皿可以不包括与储存器壁的成角度的部分和/或操作翼片和/或标签区域和/或如上所述的其它特征相关的特征。类似地,根据一些实施例,培养皿可带有上述类型的操作翼片,但没有上述各种其它特征中的一些或全部。概括地说,将领会本发明的实施例可以包括上述特征的任何适当组合,并且特别地,在功能上彼此独立的特征可以在不同的实施例中一起或单独地结合。
此外,上述实施例的各种特征可能不存在于一些其它实施例中。例如,上述培养皿22包括储存器30,所述储存器具有设在储存器底板32中的凹部(槽)44中的孔42。这允许槽部分地填充有胚胎培养基,使得在不同孔中围绕每个胚胎的胚胎培养基是流体连通的。然而,在一些情况下可能希望胚胎由不与其它胚胎周围的胚胎培养基流体连通的胚胎培养基围绕(从而例如允许分析特定胚胎的培养基)。因此孔可以单独地设在储存器的底板中而没有共用槽。根据该配置的示例性培养皿222在图19、20和21中示意性地表示。
图19、20和21分别对应于上述培养皿22的图2、5和8(尽管图19从与图2中所示的培养皿22的视图相比略微不同的方向显示培养皿222)。图19、20和21中所示的培养皿222的设计的几个方面类似于上述培养皿22并且将从其被理解,并且为了简洁起见不再进行描述。然而,图19至21中所示的培养皿222与图2至13中所示的培养皿22的区别在于其包括用于容纳待培养对象的更少的孔,并且孔不设在储存器的底板的共同凹部中(即,培养皿222不包括上述类型的共用槽)。
因此,图19至21的培养皿222包括用于接收用于培养的胚胎的六个孔242。六个孔242沿着包括圆弧的单个线在空间上布置(如上述的培养皿22的十六个孔42)。这可以再次允许孵育装置(例如成像设备)的监测站通过简单地旋转载玻片载体而与不同的孔242对准,培养皿222适当定位在该载玻片载体上。单独的孔242可以与上述用于培养皿22的孔42大致相同,例如在其特征尺寸和形状方面。培养皿222包括由储存器壁234和储存器底板232限定的储存器230。储存器230的一般功能和目的与上面针对储存器30所述的相同。此外,储存器壁234可以与上述用于培养皿22的大致相同。孔242设在储存器230的底板232中。更特别地,在该示例性实现方式中,孔242设在位于储存器底板232中的单独的凹部244内。也就是说,尽管对于图2中所示的培养皿22,孔42设在共同凹部(槽)44中,但是对于图19至21中所示的培养皿222,相应的孔242均设在它们自己的单独的凹部244中。单独的凹部244的设计的各个方面(例如在深度和凹部壁的竖直轮廓方面)可以类似于上述槽44的相应方面。在一些方面图19中所示的实施例可以被视为图2中所示的实施例的变型,其中存在多个槽,每个槽包含单个孔而不是单个槽包含多个孔。该方法可以允许与每个孔关联的培养基在孵育期间保持独立于与其它孔关联的培养基,但是在其它方面培养皿222的使用可以与上述培养皿22的使用大致相同。
图22在平面图中从上方示意性地表示根据本发明的另一实施例的培养皿322。图22的培养皿322在大多数方面类似于上述的并且在图5中在平面图中从上方表示的培养皿22并且将从其被理解,但是在孔42位于其中的凹部(槽)方面有区别。特别地,并且如上所述,图5的培养皿22中的孔42全部设在位于储存器底板32中的单个凹部(槽)44中。然而,如上所述,在其它例子中孔可以在不同的槽中分组在一起,并且这是图22的培养皿322所采用的方法。
因此,图22中所示的培养皿322可以大致被认为对应于图5的培养皿22,但是图5的培养皿22的凹部44实际上被分成图22的培养皿322的两个凹部344A、344B。因此,每个凹部344A、344B相应地由凹部底板345A、345B和凹部壁347A、347B限定。在这方面,图22中的两个部陷344A、344B的组合实际上对应于图5的凹部44,但是具有围绕其中心延伸穿越凹部的分隔壁345(在平行于皿的延伸轴的方向上)。在该例子中分隔壁345具有比凹部的深度稍高(在这种情况下为0.5mm)的高度,使得其升高到储存器的底板的略上方。分隔壁345实际上将否则将是单个凹部的隔室分为两个独立的凹部344A、344B。已发现这在一些实现方式中是有利的,原因是其可以帮助减小凹部中的液体介质中的波/体流体运动的幅度,否则这些运动可能干扰孔中的胚胎。这样的效果可以例如在培养皿322的手动操作期间产生,例如,当在孵育器外部时,或者在培养皿322在孵育器中在其运动(例如旋转)期间停止和开始运动时。在图22的例子中,每个凹部隔室344A、344B包含8个孔。然而,将领会在其它配置中可以存在不同数量的凹部隔室(即,可以提供与分成两个以上分开的凹部的图5的凹部44对应的多个凹部),凹部中具有不同数量的孔。
凹部344A、344B的每一个包括凹陷部分349A、349B,其一起大致对应于图5的培养皿22的凹陷部分49,但是由分隔壁345分成两部分(即,分隔壁345也将图5中所示的示例性培养皿的凹陷部分49分隔成图22中所示的例子的两个凹陷部分349A、349B)。此外,在示例性培养皿322中每个凹陷部分349A、349B通过从分隔壁延伸出去的相应保护壁343A、343B与其对应凹部344A、344B的剩余部分(部分地)分离。保护壁343A、343B不一直延伸横越它们相应的凹陷部分349A、349B,因此凹陷部分349A、349B保持与它们相应的凹部隔室344A、344B的剩余部分流体连通。因此例如使用移液管引入相应凹陷部分中的流体可以围绕保护壁流动并且进入包含孔的凹部的部分中。保护壁343A、343B的功能是在离开相应凹陷部分349A、349B附近的孔42填充期间,帮助被引入凹陷部分中的流体转向,以帮助减少对孔内的胚胎的干扰。为了容纳保护壁343A、343B,图22的示例性培养皿322中的平行于分隔壁345的方向上的凹陷部分349A、349B的宽度略大于图5中所示的示例性培养皿中的凹陷部分的相应宽度。
因此,已描述用于保持一个或多个待培养对象的培养皿。培养皿具有主体,所述主体包括至少一个孔,该孔用于接收待培养对象和用于所述对象的一定量的培养基,例如水基生长基,和储存器,用于接收一定量的覆盖介质,例如矿物油。该至少一个孔设在储存器的底板中,使得当在正常使用时,储存器中的覆盖介质覆盖该至少一个孔中的培养基。储存器由储存器底板和从储存器底板延伸出去的储存器壁限定。储存器壁的至少一部分离开竖直方向成角度,从而当在正常使用培养皿时储存器壁的该至少一部分相对于由储存器中的覆盖介质的表面限定的水平面倾斜。储存器壁的成角度的部分可以帮助减少覆盖孔的覆盖介质中的弯月面的出现,并且还可以定位成提供何时储存器包含适当水平的用于培养的覆盖介质的准备就绪指示。
本发明的另外的特定和优选方面在所附的独立和从属权利要求中阐述。将领会除了在权利要求中明确阐述的那些组合之外,从属权利要求的特征可以与独立权利要求的特征组合。
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Claims (34)

1.一种用于保持一个或多个待培养的对象的培养皿,其中所述培养皿具有主体,所述主体包括:
至少一个孔,用于接收待培养的对象和用于所述对象的一定量的培养基;以及
用于接收一定量的覆盖介质的储存器,其中所述至少一个孔设在储存器的底板中,从而在正常使用时所述储存器中的覆盖介质覆盖所述至少一个孔中的培养基,其中所述储存器由储存器底板和从储存器底板延伸出去的储存器壁限定,并且其中所述储存器壁的至少一部分离开竖直方向成角度,从而在正常使用所述培养皿时所述储存器壁的所述至少一部分相对于由所述储存器中的覆盖介质的表面限定的水平面倾斜,其中所述储存器壁的成角度的部分位于所述储存器壁的下部部分上方,并且其中所述成角度的部分和所述下部部分与所述水平面成不同的角。
2.根据权利要求1所述的培养皿,其中所述储存器壁的成角度的部分在所述储存器周围延伸。
3.根据权利要求1或2所述的培养皿,其中所述储存器壁的成角度的部分相对于所述水平面倾斜以下范围内的角:10度至80度。
4.根据权利要求1所述的培养皿,其中根据正常使用所述培养皿时将要使用的覆盖介质的最小水平来选择在储存器底板上方的所述储存器壁的下部部分和所述储存器壁的成角度的部分之间的界面的高度。
5.根据权利要求1或2所述的培养皿,其中所述储存器壁的成角度的部分位于所述储存器壁的上部部分下方,并且其中所述成角度的部分和所述上部部分与所述水平面成不同的角。
6.根据权利要求5所述的培养皿,其中所述储存器壁的上部部分限定在所述主体的表面上方围绕所述储存器延伸的所述储存器壁的一部分。
7.根据权利要求1或2所述的培养皿,其中所述培养皿还包括在所述储存器的底板中的凹部,其中所述凹部由凹部底板和凹部壁限定,并且其中所述至少一个孔设在所述凹部底板中。
8.根据权利要求7所述的培养皿,其中所述凹部壁的至少一部分离开竖直方向成角度,从而相对于所述水平面倾斜。
9.根据权利要求8所述的培养皿,其中所述凹部壁的成角度的部分在所述凹部周围延伸。
10.根据权利要求8所述的培养皿,其中所述凹部壁的成角度的部分在所述凹部壁的底部处邻近所述凹部底板。
11.根据权利要求8所述的培养皿,其中所述凹部壁的成角度的部分相对于所述水平面倾斜以下范围内的角:10度至80度。
12.根据权利要求7所述的培养皿,其中所述凹部底板包括底板的凸起部分,所述凸起部分比周围的凹部底板高。
13.根据权利要求7所述的培养皿,其中所述凹部壁的一部分是凹陷的,使得比邻近凹陷部分的所述凹部壁的部分更远离所述至少一个孔。
14.根据权利要求13所述的培养皿,其还包括布置在所述凹部壁的凹陷部分和所述至少一个孔中的至少一个之间的另外的壁部分。
15.根据权利要求7所述的培养皿,其中所述至少一个孔包括设在所述凹部的凹部底板中的多个孔。
16.根据权利要求7所述的培养皿,其中所述至少一个孔包括多个孔,并且所述培养皿包括在所述储存器的底板中的至少一个另外的凹部,并且其中不同的孔设在不同的凹部中。
17.根据权利要求16所述的培养皿,其中不同的凹部由一个或多个分隔壁彼此分离。
18.根据权利要求1或2所述的培养皿,其中所述至少一个孔包括由搁架部分分离的上孔部分和下孔部分。
19.根据权利要求1或2所述的培养皿,其中所述至少一个孔的至少上部部分在水平横截面中为非圆形。
20.根据权利要求1或2所述的培养皿,其中所述至少一个孔包括多个孔。
21.根据权利要求1或2所述的培养皿,其还包括从所述主体延伸出去以提供用于所述培养皿的手柄的一对翼片。
22.根据权利要求21所述的培养皿,其还包括所述一对翼片之间的布置在所述主体上的贴标签区域,以便接收包含与所述培养皿相关的信息的标签。
23.根据权利要求22所述的培养皿,其中所述贴标签区域相对于所述水平面倾斜。
24.根据权利要求1或2所述的培养皿,其还包括用于覆盖所述储存器的可移除盖。
25.根据权利要求24所述的培养皿,其中所述可移除盖的上表面包括在其周边处的向上延伸唇缘。
26.根据权利要求24所述的培养皿,其中当覆盖所述储存器时所述盖不从所述主体悬突。
27.根据权利要求1或2所述的培养皿,其还包括用于介质的至少一个容器,所述介质将被用于制备用于培养的对象。
28.根据权利要求27所述的培养皿,其中所述至少一个容器在所述储存器内。
29.根据权利要求27所述的培养皿,其中所述至少一个容器的内壁的至少一部分相对于所述水平面倾斜。
30.根据权利要求1或2所述的培养皿,其还包括具有表面纹理的注释区域,所述表面纹理与所述培养皿的其它部分的表面纹理不同。
31.根据权利要求1或2所述的培养皿,其中所述至少一个孔包括沿着圆弧布置的多个孔。
32.根据权利要求31所述的培养皿,其中所述多个孔在空间上分组布置,其中在不同组中的相邻孔比在相同组中的相邻孔分离更大的距离。
33.一种包括孵育室的孵育器装置,所述孵育室包括至少一个根据权利要求1-32中任一项所述的培养皿。
34.一种培养至少一个对象的方法,所述方法包括:
提供具有主体的培养皿,所述主体包括:
至少一个孔和储存器,所述至少一个孔用于接收待培养的对象和用于所述对象的一定量的培养基;所述储存器用于接收一定量的覆盖介质,其中所述至少一个孔设在所述储存器的底板中,从而在正常使用时所述储存器中的覆盖介质覆盖所述至少一个孔中的培养基,其中所述储存器由储存器底板和从储存器底板延伸出去的储存器壁限定,并且其中所述储存器壁的至少一部分离开竖直方向成角度,从而在正常使用所述培养皿时所述储存器壁的所述至少一部分相对于由所述储存器中的覆盖介质的表面限定的水平面倾斜,其中所述储存器壁的成角度的部分位于所述储存器壁的下部部分上方,并且其中所述成角度的部分和所述下部部分与所述水平面成不同的角;并且其中所述方法还包括
用覆盖介质将所述储存器填充到与离开竖直方向成角度的所述储存器壁的部分相遇的水平。
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