CN106236692A - 一种具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法，包括以下步骤：将鹿角盘打磨成粉，称取鹿角盘粉置于烧杯中，加入去离子水，100℃水浴提取后，将提取液搅拌均匀倒入离心管中，离心后，收集沉淀，经烘干、磨粉后获得具有抗氧化活性的鹿角霜。本发明制备的鹿角霜，分别采用Fe2+‑水杨酸法、邻苯三酚自氧化法及铁氰化钾还原比色法检测分析鹿角霜的抗氧化活性。结果显示，鹿角霜具有一定的抗氧化活性，其中鹿角霜对羟自由基的清除作用较强。鹿角盘粉中的一些其它成分对其抗氧化活性有一定的抑制作用，采用本发明的制备方法得到的鹿角霜抗氧化活性得到显著提高。
Description
技术领域
本发明涉及鹿角霜的制备技术领域，具体涉及一种具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法。
背景技术
鹿角盘指的是雄性鹿在锯茸后残留在角柄上的骨化物，到了第二年新茸长出前自动脱落的盘状物质，也命名为“鹿花盘”、“鹿角帽”，主要含有多种必需氨基酸及多种矿物质元素。鹿角盘呈盔状或扁盔状，直径2～5cm，高2～4.5cm，表面为灰黄色或灰褐色，呈蜂窝状，底面较平并富有一定光泽，上部呈现出不规则的半球形形状，质地较为坚硬，颜色呈灰白色。近些年来，对于鹿角盘的成分主要从以下几个部分进行研究，主要是氨基酸、无机元素、蛋白多肽类物质等等，同时也有少量报道称鹿角盘中含有甾体类、多糖类等物质。
鹿角霜味咸、涩,性温，归肾、肝经。《中国药典2010年版》将鹿角霜描述如下：表面灰白色，体轻，质酥，气徽，味淡，嚼之有粘牙感，有吸湿性。其具有补肾助阳、收敛止血、收涩治痢、秘精坚髓补虚等功效。用于治疗肾阳不足,脾胃虚寒、食少便溏、阳痿遗精、尿频遗尿、崩漏、带下无子、创伤出血、疮疡久不愈合等。鹿角霜的主要成份为蛋白质、钙、磷及微量元素等。并含谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸等17种氨基酸。近几年的研究表明，鹿角霜能促进生长发育,振奋机体功能，能促进红细胞、血红蛋白及网状红细胞的生长，具有激素样作用,能促进溃疡伤口的再生过程,加速愈合。同时，鹿角霜对治疗妇女乳房肿胀、乳腺增生、乳腺炎有明显的效果，并对预防乳腺癌、子宫肌瘤也有很好的疗效。
抗氧化是抗氧化自由基的简称，其作用机理是直接或间接消耗掉容易生成自由基的物质。越来越多的研究显示抗氧化能够预防衰老，因为自由基或氧化剂会将细胞和组织分解，影响代谢功能，研究抗氧化可以有效克服其所带来的危害。因此，抗氧化作为化妆品、保健品等行业的主要研发方向，成为市场主要的需求之一。
目前，关于鹿角霜的抗氧化活性以及如何制备具有抗氧化活性的鹿角霜还未见报道。
发明内容
为了研究鹿角霜的抗氧化活性，本发明提供一种具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法。
一种具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将鹿角盘打磨成粉，称取鹿角盘粉置于烧杯中，加入去离子水，100℃水浴热提；
步骤二、提取完毕后，将提取液搅拌均匀倒入离心管中，8500-12000rpm、25℃离心12-20min；
步骤三、离心完毕后，收集沉淀，经烘干、磨粉后获得具有抗氧化活性的鹿角霜。
优选的，鹿角盘粉与去离子水在初始阶段的的用量比为1：(8-15)。
优选的，水浴热提三次，每次5h。
优选的，提取过程中持续搅拌，及时补充去离子水，保持溶液的总量变化控制在5％以内。
本发明的有益效果是：
本发明首先利用热提法制备鹿角霜，再分别采用Fe2+-水杨酸法、邻苯三酚自氧化法及铁氰化钾还原比色法检测分析鹿角霜的抗氧化活性。实验结果显示，鹿角霜具有一定的抗氧化活性，其中鹿角霜对羟自由基和超氧阴离子的清除作用较强。
本发明的鹿角霜制备工艺简单，原料价格便宜，鹿角霜具有一定的抗氧化活性，可应用于一些如保健品、化妆品等产业的开发利用。
本发明中选用的制备方法不仅可以将鹿角盘粉中的有效成分完全提取出来，而且还兼顾了能耗等因素，是一种优选的制备工艺。
附图说明
图1为实施例2中鹿角霜对羟自由基清除作用结果图。
图2为实施例3中鹿角霜对超氧阴离子清除作用结果图。
图3为实施例4中鹿角霜和Vc还原能力的测定结果图。
具体实施方式
本发明公开了一种具有抗氧化活性的鹿角霜及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的产品进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
实施例1鹿角霜的制备
一种具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、采用热提法，将鹿角盘打磨成粉，准确称取10g鹿角盘粉，置于干净的250mL烧杯中，加入去离子水100g，100℃水浴热提三次，每次5h，提取过程中采用玻璃棒不断持续搅拌，并且及时用去离子水补充蒸发掉的水分，保持溶液的总量变化控制在5％以内；
步骤二、提取完毕后，将热提三次后的提取液放在一起搅拌均匀，倒入离心管中并放入离心机，条件为：10000rpm、25℃离心15min；
步骤三、离心完毕后，取出离心管(此时应轻拿轻放，防止震荡使原本沉淀的提取物重新漂浮在上清中)，收集沉淀，将沉淀置于烘箱内进行烘干并进行磨粉，获得具有抗氧化活性的鹿角霜。
实施例2Fe2+-水杨酸法测定鹿角霜抗氧化活性
实验原理：Fe2+与H2O2反应产生-OH，羟自由基易攻击芳环化合物生成羟基化合物，因此，水杨酸可以捕捉-OH。在反应期间产生有色物质，这种有色物质在510nm下有最大吸收值。研究表明，鹿角霜加入反应体系后能够清除-OH，使有色中间产物的形成受阻，导致吸光值下降，进而来表示鹿角霜的抗氧化活性能力的高低。
准确称取20mg鹿角霜，加入20mL蒸馏水，37℃恒温水浴加热30min对鹿角霜进行溶解，期间要用玻璃棒进行不断搅拌，用100目标准筛进行过滤，要求筛上无明显大颗粒物，最后收集实验所需的滤液。在该反应体系中，依据反应原理，取5组干净的试管进行标号，在反应体系中分别加入1mL 9mmol/LFeSO4和1mL 9mmol/L的水杨酸乙醇溶液，混匀后，加入1mL所测的样品溶液(见表1)，最后加入1mL 8.8mmol/L的H2O2来启动反应。在空白对照液中加入1mL的蒸馏水代替等体积的水解液，37℃条件下保温30min，利用紫外分光光度计510nm测定相应吸光值。根据所测吸光光度值，与相应的鹿角霜的浓度进行比对，从而得出鹿角霜抗氧化活性的能力。
表1鹿角霜浓度梯度
所求清除率(％)＝(A0-(AX-Ax0))/A0×100％ (1)
式(1)中：A0为空白对照液的吸光度；AX为加入样品溶液后的吸光度；Ax0为水解液的本底吸光度。
将相应的空白对照液的吸光度值A0、加入样品溶液后的吸光度值AX、水解液的本底吸光度值Ax0带入公式，得到相应的清除率，清除率可间接代表该鹿角霜浓度条件下，相应的抗氧化能力高低，所得结果见表2。
表2分光光度计数值及相应清除率
如图1所示，通过计算得出鹿角霜在不同浓度条件下(0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL)羟自由基清除率分别为：25.2％、37.8％、53.9％、57.7％、62.7％。由此可见，随着鹿角霜浓度的增加，抗氧化的能力逐渐增强，清除率逐渐增加。当鹿角霜浓度为1.0mg/mL时，羟自由基清除率达到62.7％。说明鹿角霜对羟自由基的清除作用较强。
实施例3邻苯三酚自氧化法测定鹿角霜抗氧化活性
实验原理：在一定条件下，邻苯三酚能够快速氧化并同时产生超氧化物阴离子，生成有色中间产物，吸光度也随之增加，在反应体系加入鹿角霜后，能够催化超氧化物阴离子生成H2O2，进而阻碍有色中间产物形成，降低邻苯三酚反应速率，导致吸光值增长速率降低。
取五支干净的试管，分别标记为“空白对照”、“1”、“2”、“3”、“4”，在“1”、“2”、“3”、“4”号试管中按顺序依次加入不同浓度(1mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、15mg/mL)鹿角霜溶液0.2mL(空白管中加入0.2mL蒸馏水作为对照)。之后，向各管中分别加入5.6mL Tris-HCl缓冲液(pH 8.0)，充分混匀后加入7mmol/L邻苯三酚溶液0.2mL，在325nm的条件下每隔30s记录其吸光值，直到4.5min后反应结束。各个时间段内，不同浓度的鹿角霜对应的分光光度计吸光度值见表3。
表3各时间段分光光度计相应吸光度值
所求超氧阴离子清除率(％)＝(B0－BXn)/B0×100％ (2)
式(2)中：B0为空白对照邻苯三酚的自氧化速率；BXn为不同浓度试管邻苯三酚的自氧化速率，n＝1、2、3、4。根据所得数值进行计算，求得B0＝0.054，Bx1＝0.031，Bx2＝0.023，Bx3＝0.020，Bx4＝0.019。
如图2所示，通过所得的吸光度值进行计算，得出各个浓度条件下(1mg/mL、5mg/mL、10mg/mL、15mg/mL)超氧阴离子清除率分别为：42.59％、57.41％、62.96％、64.81％。由此可见，随着鹿角霜浓度的增加，抗氧化的能力逐渐增强，
清除率逐渐增加。当鹿角霜浓度为15mg/mL时，超氧阴离子清除率达到64.81％。说明鹿角霜对超氧阴离子的清除作用也较强。
实施例4铁氰化钾还原比色法测定鹿角霜还原能力
实验原理：还原能力可以反映待测物提供电子的能力，一般而言，抗氧化剂的还原能力与其抗氧化能力呈正相关，可以通过测定抗氧化剂的还原能力来衡量其抗氧化活性。铁氰化钾还原比色法可以通过颜色改变反映出体系中氧化还原状态的改变，是测定抗氧化剂还原能力的常规方法。待测的鹿角霜样品溶液在弱酸性条件下可提供电子，将Fe3+还原为Fe2+，Fe2+与Fe3+反应可生成蓝色物质使体系溶液颜色改变，在波长700nm条件下测得的吸光度A值变大。测定的A值越大，则样品的还原能力越强。
按表4配置浓度梯度为0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL和0.10mg/mL的鹿角霜样品溶液。取五只试管分别标号，顺序加入不同浓度梯度的鹿角霜样品溶液0.5mL，加入lmL磷酸盐缓冲溶液(0.2mol/L、pH6.6)及lmL1％铁氰化钾溶液，充分混匀，并置于50℃水浴中反应20min，然后迅速冷却，再加入1mL10％三氯乙酸溶液，取1mL该混合溶液，加入4mL蒸馏水及1mL0.1％三氯化铁溶液，混合均匀，静置10min后于700nm处测定其吸光值。按表5配置浓度梯度为0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL和0.10mg/mL的Vc溶液，作为对照组，重复上述步骤。
表4
表5
由图3可知，鹿角霜浓度分别为0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL和0.10mg/mL，测得反应体系的吸光值依次为：0.092、0.116、0.142、0.149、0.176。VC浓度分别为0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL和0.10mg/mL时，测得反应体系的吸光值依次为：0.147、0.216、0.298、0.339、0.465。鹿角霜和Vc都呈现出随着浓度增加，还原能力随之上升的趋势，说明鹿角霜和Vc的还原能力都具有一定的量效关系。还原能力越强，说明其抗氧化能力越强，还原能力与抗氧化能力呈正相关。
实施例5提取次数对鹿角霜最终制备产量的影响。
将实施例1中提取次数进行调整，研究最终得到的鹿角霜的产量与提取次数之间的关系。
表6：鹿角霜的产量与提取次数之间的关系
表6可以知道，提取次数为3次和4次时，鹿角霜的产量的差别已经小于1％，为控制成本，降低能耗，优选的提取次数为3次。
实施例6提取前的鹿角盘粉与提取后的鹿角霜抗氧化活性的区别。
将实施例2中鹿角霜替换为提取前的鹿角盘粉，得到鹿角盘粉对-OH的清除率，并与实施例2的鹿角霜对-OH的清除率进行对比。
表7：鹿角盘粉与鹿角霜对-OH的清除率的对比数据。
以上对比数据可以知道，将鹿角盘粉提取后的鹿角霜，对-OH的清除率大大提高，即使考虑到鹿角盘粉中鹿角霜提取率约为80％，将鹿角盘粉的浓度提高至1.25倍进行对比，提取后的鹿角霜对-OH的清除率仍要高出50％以上，说明鹿角盘粉中的一些其它成分对其抗氧化活性有一定的抑制作用，采用本发明的制备方法得到的鹿角霜抗氧化活性得到显著提高。
综上所述：近年来，对于鹿角盘抗氧化活性的相关研究较少，其热提后剩余物即鹿角霜的开发利用更是少之又少。根据当今市场需求，越来越多的人想要保持青春，这与人体自身抗氧化能力有着密不可分的关系。本发明的鹿角霜可以充当这样的角色，其具有一定的食用、药用等应用价值，可经过一些简单的加工，制成保健品、化妆品等，原料制作工艺简单，价格便宜，又可起到人们所需的效果。
本发明的具有抗氧化活性的鹿角霜，它是向鹿角盘粉中加入去离子水，100℃水浴热提三次所得的提取液，10000rpm、25℃离心15min，收集沉淀，经烘干、磨粉后获得的。分别采用Fe2+-水杨酸法、邻苯三酚自氧化法及铁氰化钾还原比色法检测分析鹿角霜的抗氧化活性，结果显示，鹿角霜具有一定的抗氧化活性，其中鹿角霜对羟自由基和超氧阴离子的清除作用较强。
根据上述实施例所得出的实验结果中可以看出，鹿角霜浓度越高的溶液，其抗氧化能力越强，证明鹿角霜具有一定的抗氧化活性。通过铁氰化钾还原比色法测定鹿角霜还原能力可知，还原能力越强，说明其抗氧化能力越强，还原能力与抗氧化能力呈正相关。
实施例中所用仪器：722可见分光光度计选用上海佑科仪器仪表有限公司生产，数显恒温水浴锅选用金坛市富华仪器有限公司生产，管式高速离心机选用德国赛多利斯有限公司生产，保温箱选用东莞市立显仪器科技有限公司生产。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步的详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本领域的普通技术人员来说，可以根据本发明的技术方案和发明构思，做出相应改变和替代，而且得到与本发明具有相同抗氧化活性的鹿角霜，其性能也必然相同，都应当视为本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、将鹿角盘打磨成粉，称取鹿角盘粉置于烧杯中，加入去离子水，100℃水浴热提；
步骤二、提取完毕后，将提取液搅拌均匀倒入离心管中，8500-12000rpm、25℃离心12-20min；
步骤三、离心完毕后，收集沉淀，经烘干、磨粉后获得具有抗氧化活性的鹿角霜。
2.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法，其特征在于，鹿角盘粉与去离子水在初始阶段的用量比为1：(8-15)。
3.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法，其特征在于，水浴热提三次，每次5h。
4.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法，其特征在于，提取过程中持续搅拌，及时补充去离子水，保持溶液的总量变化控制在5％以内。
5.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的鹿角霜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、采用热提法，将鹿角盘打磨成粉，准确称取10g鹿角盘粉，置于干净的250mL烧杯中，加入去离子水100g，100℃水浴热提三次，每次5h，提取过程中采用玻璃棒不断持续搅拌，并且及时用去离子水补充蒸发掉的水分，保持溶液的总量变化控制在5％以内；
步骤二、提取完毕后，将热提三次后的提取液放在一起搅拌均匀，倒入离心管中并放入离心机，条件为：10000rpm、25℃离心15min；
步骤三、离心完毕后，取出离心管，收集沉淀，将沉淀置于烘箱内进行烘干并进行磨粉，获得具有抗氧化活性的鹿角霜。
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Non-Patent Citations (3)
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|---|
| 叶定江等: "《中药炮制学辞典》", 30 June 2005 * |
| 朱晓晖等: "《中国鹿科动物源药材药理作用十年研究进展（二）》", 《吉林中医药》 * |
| 谢鑫梅: "《正交实验法优选鹿角的水提工艺》", 《时珍国医国药》 * |
Cited By (4)
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