CN106170293A - β‑抑制蛋白效应物的晶体形式和非晶体形式 - Google Patents

Abstract

本公开内容提供了用作β‑抑制蛋白效应物的化合物的新颖晶体形式，用于制备用作β‑抑制蛋白效应物的化合物的新颖晶体形式和非晶体形式的方法及其用途。

Description

β-抑制蛋白效应物的晶体形式和非晶体形式

相关申请的引用

本申请要求2014年2月7日提交的美国临时申请号61/936,914的优先权和权益，将该临时申请的全部内容通过引用合并到本文中。

技术领域

本公开内容描述了用作β-抑制蛋白效应物的化合物的新型晶体形式，用于制备和沉淀该化合物的非晶体形式和晶体形式的方法，以及其应用。

背景技术

美国专利号8,486,885公开了用作GPCR受体的GPCR激动剂的肽(例如，血管紧张肽II)。GPCR激动剂引起异源三聚体“G蛋白”的激活。这种激活导致引起生理机能(例如，血压和液体平衡)变化的第二信使/下游信号(例如，通过甘油二酯、肌醇三磷酸、钙等)。美国专利号8,486,885中公开的一种特别的肽在其中被称为“SEQ ID NO.27”，该肽具有下述氨基酸序列：NH₂-肌氨酸L-精氨酸L-缬氨酸L-酪氨酸L-异亮氨酸L-组氨酸L-脯氨酸D-丙氨酸-OH，被称为NH₂-Sar Arg Val Tyr Ile His Pro D-Ala-OH。

美国专利号8,486,885中提及的SEQ ID NO.27(下文称为SEQ.ID.NO.1)为通过AT1血管紧张肽受体进行β-抑制蛋白/GRK-介导信号转导的激动剂。在美国专利号8,486,885中公开了：包括但不限于SEQ ID NO.1的肽或肽模拟物的分子式、可变物、衍生物的氨基酸序列；化合物实现G蛋白介导信号或GPCR活性的能力，或这种信号/活性的缺失；用于制备SEQ.ID.NO.1的方法；以及其他相关肽，将该专利的全部内容通过引用合并到本文中。

本领域仍然需要具有改善性质的SEQ.ID.NO.1的改良形式。本领域还需要用于制备SEQ.ID.NO.1的肽的改良方法。

发明内容

本公开内容提供了SEQ.ID.NO.1的肽的新颖晶体变型、用于制备SEQ.ID.NO.1并可选地分离这些形式的方法。

令人惊讶地，SEQ ID NO.1的肽可以被晶体化，并且性质是优越的。令人惊讶地，可以通过沉淀SEQ.ID.NO.1来制备非晶体SEQ ID NO.1。SEQ ID NO.1的晶体形式与现有技术的区别在于提高的稳定性、可加工性，并且还可以用于药物制剂(配方)中。

在一些实施方式中，提供了SEQ.ID.NO.1的晶体形式。在一些实施方式中，晶体形式为SEQ.ID.NO.1的形式I(下文中称为形式I)。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约18.5±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约10.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约18.5以及约10.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约10.1以及约8.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2以及约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约20.2以及约10.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约20.2以及约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约20.2、约10.1以及约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2、约18.5以及约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约18.5、约10.1、约8.2、约20.2以及约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括如图4中所示的一个或多个峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约10.7、约8.7、约4.7、约4.1以及约3.6±0.5度埃的一个或多个d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，提供了包括SEQ.ID.NO.1的晶体形式的药物组合物。

在一些实施方式中，提供了包括SEQ.ID.NO.1的晶体形式I的药物组合物。

在一些实施方式中，药物组合物包括形式I，其中形式I为SEQ.ID.NO.1的肽或肽模拟物。

在一些实施方式中，药物组合物包括形式I，其中，肽或肽模拟物是环状的。

在一些实施方式中，药物组合物包括形式I，其中，肽或肽模拟物是二聚的(二聚体的，二聚化的)。

在一些实施方式中，药物组合物包括形式I，其中，肽或肽模拟物是三聚的(三聚体的，三聚化的)。

在一些实施方式中，药物组合物包括形式I，还包括用于治疗心血管或心肾障碍的额外药物。

在一些实施方式中，提供了一种用于制备SEQ.ID.NO.1的晶体形式的方法，包括使SEQ.ID.NO.1晶体化以形成形式I以及可选地分离SEQ.ID.NO.1的形式I。

在一些实施方式中，提供了一种用于制备SEQ.ID.NO.1的方法，包括使SEQ.ID.NO.1沉淀以及可选地分离SEQ.ID.NO.1。

在一些实施方式中，提供了包括通过使SEQ.ID.NO.1沉淀而制备的SEQ.ID.NO.1的药物组合物。

在一些实施方式中，提供了一种治疗心血管或心肾障碍的方法，包括给予需要其的患者SEQ.ID.NO.1的晶体形式或非晶体形式。

在一些实施方式中，提供了一种治疗心血管或心肾障碍的方法，包括给予需要其的患者SEQ.ID.NO.1的晶体形式I。

在下面的描述中阐述了一个或多个实施方式的细节。根据实施例的描述以及所附的权利要求，本教导的其他特征、目的和优点将变得明显。

附图说明

图1示出了非晶体SEQ ID.NO.1的X射线粉末衍射图。

图2示出了非晶体SEQ.ID.NO.1的差示扫描量热(DSC)温谱图。

图3示出了非晶体SEQ ID.NO.1的吸附/解吸曲线。

图4示出了SEQ ID.NO.1的晶体形式I的X射线粉末衍射图。

图5示出了SEQ.ID.NO.1的晶体形式I的差示扫描量热(DSC)温谱图。

图6示出了SEQ ID.NO.1的形式I的HPLC色谱图。

图7示出了非晶体SEQ ID.NO.1和SEQ ID.NO.1的晶体形式I的重叠X射线粉末衍射图。

图8示出了SEQ ID.NO.1的非晶体形式和晶体形式I的HPLC色谱图。

图9示出了在正交偏振光下SEQ ID.NO.1的晶体形式I的显微图像。

图10示出了在平面偏振光下SEQ ID.NO.1的晶体形式I的显微图像和颗粒大小。

图11示出了来自乙醇的SEQ.ID.NO.1的沉淀物和非晶体SEQ.ID.NO.1的重叠X射线粉末衍射图。

图12示出了来自水和丙酮的SEQ.ID.NO.1的沉淀物的X射线粉末衍射图。

图13示出了来自水和异丙醇的SEQ.ID.NO.1的沉淀物的X射线粉末衍射图。

图14示出了SEQ.ID.NO.1的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1的重叠X射线粉末衍射图。在图16中示出了对应的DSC温谱图。

图15示出了SEQ.ID.NO.1的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1的重叠X射线粉末衍射图。在图16中示出了对应的DSC温谱图。

图16示出了用于根据实施例1E、1F、1G和1H产生的化合物的DSC温谱图。

图17示出了用于SEQ.ID.NO.1的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1的重叠X射线粉末衍射图。在图16中示出了对应的DSC温谱图。

图18示出了用于SEQ.ID.NO.1的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1的重叠X射线粉末衍射图。在图16中示出了对应的DSC温谱图。

图19示出了晶体SEQ.ID.NO.1的TGA曲线。

图20示出了晶体SEQ.ID.NO.1的DVS曲线。

图21示出了在完成DVS分析后晶体形式SEQ.ID.NO.1的PXRD。

图22示出了在各种温度和湿度条件下非晶体SEQ.ID.NO.1的PXRD图。

图23示出了在各种温度和湿度条件下晶体SEQ.ID.NO.1的PXRD图。

定义

术语“肽基”和“肽的”包括根据本发明实施方式的肽的活性衍生物、变体和/或模拟物。肽化合物是与根据本发明实施方式的肽在结构上类似的生物活性等同物。

术语“在结构上类似的生物活性等同物”是指具有与已识别生物活性肽的结构足够类似的结构以产生基本等同的治疗效果的肽基化合物。例如，源自肽的氨基酸序列或者具有肽的氨基酸序列主链的肽化合物被视为在结构上与肽类似的生物活性等同物。

术语“变体”是指相比于蛋白质或肽的氨基酸序列其中存在一种或多种氨基酸取代、缺失和/或插入并且包括蛋白质或肽的天然存在的等位基因变体或可替换的剪接变体的蛋白质或多肽。

术语“变体”包括用一种或多种类似或同源氨基酸或一种或多种不同氨基酸替代肽序列中的一种或多种氨基酸。在一些实施方式中，变体包括在氨基酸位置中的一个或多个位置处的丙氨酸取代。其他优选的取代包括对蛋白质的整体静电荷、极性或疏水性具有很小的影响或没有影响的保守取代。

术语“变体”还涵盖具有本发明化合物的蛋白质/肽的氨基酸序列的多肽，其中，至少一个并且最高达25个(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20个)额外氨基酸位于氨基酸序列的3'端侧或5'端侧或上述两端侧。术语“变体”还指其氨基酸序列至少60％至99％(例如，60、65、70、75、80、85、90、95、98、99或100％，包括的)与如通过通常用于比较两个多肽的氨基酸的位置的相似度的标准方法确定的本发明化合物的蛋白质相同的蛋白质。可以通过已知的方法容易地计算出两个蛋白质之间的相似度或相同度(同一性)。

术语“衍生物”是指通过天然过程(诸如，加工和其他翻译后修饰)以及通过化学修饰技术(例如，通过添加一个或多个聚乙二醇分子、糖、磷酸盐和/或其他这样的分子，其中该一个或多个分子并不自然附着于野生型蛋白质)而经过化学修饰的化学修饰蛋白质或多肽。衍生物包括盐。在基础课本和更详细的专著以及研究文献中很好地描述了这样的化学修饰，并且本领域技术人员熟知这样的化学修饰。可以理解，同一类型的修饰可以以相同或变化程度存在于指定蛋白质或多肽的若干位点。另外，指定蛋白质或多肽可以包括许多类型的修饰。修饰可以在蛋白质或多肽的任何位置发生，包括肽主链、氨基酸侧链以及氨基或羧基末端。修饰包括例如乙酰化、酰化、ADP-核糖基化、酰胺化、黄素的共价结合(连接)、亚铁血红素部分的共价结合、核苷酸或核苷酸衍生物的共价结合、脂质或脂质衍生物的共价结合、磷脂酰肌醇的共价结合、交联、环化、二硫键形成、脱甲基、共价交联的形成、半胱氨酸的形成、焦谷氨酸盐的形成、甲酰化、γ-羧化、糖基化、GPI锚形成、羟基化、碘化、甲基化、豆蔻酰化、氧化、蛋白酶解加工、磷酸化、异戊烯化、外消旋、糖基化、脂质结合、硫酸盐化、谷氨基酸残留的γ羧化、羟基化和ADP-核糖基化、硒化、硫酸盐化、氨基酸到蛋白质的转移-RNA介导添加，诸如精氨酰化和泛素化。参见例如Proteins—Structure and MolecularProperties，第二版，T.E.Creighton，W.H.Freeman and Company公司，纽约(1993年)以及Wold,F.,“Posttranslational Protein Modifications:Perspectives and Prospects”，1-12页，Posttranslational Covalent Modification Of Proteins,B.C.Johnson,Ed.,Academic Press，纽约(1983年)；Seifter等人Meth.Enzymol.182:626-646(1990)以及Rattan等人“Protein Synthesis:Posttranslational Modifications and Aging”，AnnN.Y.Acad.Sci.663:48-62(1992)。

术语“衍生物”包括导致蛋白质或多肽变为支链或者具有或不具有支链的环状的化学修饰。环状、支链和支链环形蛋白质或多肽可能是由翻译后的天然过程产生的，并且还可以通过完全合成的方法制成。

术语“肽模拟物”或“模拟物”是指模拟肽或蛋白质的生物活性但在化学本质上不再是肽的生物活性化合物，即，它们不再包含任何肽键(即，氨基酸之间的酰胺键)。术语肽模拟物以较广泛的意义使用，以包括本质上不再完全是肽的分子，诸如，伪肽、半肽和类肽。根据实施方式的完全或部分非肽、肽模拟物均提供与肽模拟物所基于的肽中的活性基团的三维布置非常类似的活性化学部分的空间布置。作为这种类似活性位点几何结构的结果，肽模拟物对与肽的生物活性类似的生物系统具有影响。

优选地，实施方式的肽模拟物基本上在三维形状和生物活性上与本文所述的肽类似。根据一些实施方式，本发明化合物的肽模拟物在化合物的一端或两端具有保护基团，和/或用非肽键代替一个或多个肽键。这些修饰可以使化合物比化合物本身较不容易受到溶蛋白性裂解的影响。例如，可以用可替换类型的共价键(例如，碳-碳键或酰基键)代替一个或多个肽键。肽模拟物还可以包含氨基末端或羧基末端阻断基团，诸如，t-叔丁氧羟基、乙酰基、烷基、琥珀酰基、甲氧基琥珀酰基、环庚基、己二酰、壬二酰基、丹酰、苄氧羰基、芴甲氧羰基、甲氧基壬二酰基、甲氧基己二酰、甲氧基环庚基和2,4,-二硝基苯基，从而使模拟物较不容易受到蛋白质水解的影响。可以单独或组合来使用非肽键和羧基末端阻断基团或氨基末端阻断基团，以使模拟物比对应的肽/化合物较不容易受蛋白质水解的影响。另外，可以实现用D-氨基酸取代标准的L-立体异构体，例如，以增加分子的半衰期。

术语“盐(salt)”或“多种盐(salts)”可以指任何酸加成盐，包括游离酸的加成盐或游离碱的加成盐。所有这些盐(或其他类似盐)可以通过常规手段来制备。所有这样的盐都是可接受的，条件是它们是无毒的，并且基本上不会干扰期望的药理活性。

术语“治疗有效量”是指当向哺乳动物施用化合物以用于治疗状态、障碍或病症时足以实现治疗目的的化合物的量(如下文所定义的)。“治疗有效量”将取决于化合物、疾病及其严重程度、待治疗哺乳动物的年龄、体重、身体状况和反应性而变化。

术语“药物可接受的”是指在动物或人类体内使用是生物或药理相容的，并且优选地是指经过联邦或州政府的管理机构批准的或列入美国药典或其他公认药典用于动物更特别地用于人类的。

术语“治疗”的所有动词形式均指缓解或减轻受试者的心血管障碍或心肾障碍的至少一种症状，包括慢性高血压、高血压危象、急性充血性心力衰竭、心绞痛、急性心肌梗塞、左心室衰竭、脑血管机能不全、颅内出血、心力衰竭、急性失代偿性心力衰竭、原发性高血压、术后高血压、高血压心脏病、高血压肾病、肾血管性高血压、恶性高血压、肾移植术后患者稳定、扩张性心肌病、心肌炎、心脏移植术后患者稳定、支架后管理相关障碍、神经源性高血压、先兆子痫、腹主动脉瘤以及任何涉及血液动力的心血管障碍。具体地，在一些方面，心血管障碍是急性心血管障碍。在其他具体方面，急性心血管障碍是急性高血压危象、妊娠毒血症、急性心肌梗塞、急性充血性心力衰竭、急性缺血性心脏病、肺动脉高血压、术后高血压、偏头痛、视网膜病和术后心脏/瓣膜手术。

术语“协同”被定义为两种或多种药剂的相互作用，使得它们的组合效果大于它们的单独效果的总和。例如，如果单独药物A治疗疾病的效果为25％，而单独药物B治疗疾病的效果为25％，但当这两种药物结合时，治疗疾病的效果为75％，则A和B的效果是协同的。

术语“加成的”被定义为两种或多种药剂的相互作用，使得它们的结合效果与它们的单独效果的总和相同。例如，如果单独药物A治疗疾病的效果为25％，而仅药物B治疗疾病的效果为25％，但当这两种药物结合时，治疗疾病的效果为50％，则A和B的效果是加成的。

术语“药物可接受的”或“治疗可接受的”是指当施用至人类时是生理可容忍的并且优选地通常不会产生过敏或类似的不良反应(诸如肠胃不适、眩晕等)的分子实体和组合物。优选地，如本文所用的，术语“药物可接受的”指经过联邦或州政府的管理机构批准的或列入美国药典或其他公认药典(例如，Remington's Pharmaceutical Sciences，MackPublishing Co.公司(A.R.Gennaro编辑，1985))的用于动物并且更特别地用于人类的。

术语“大约”是指﹢/-5％。

大约80％和20％v/v的乙醇并且溶液的剩余部分大约为水是指包括大约80％v/v的乙醇和20％v/v的水至大约20％v/v的乙醇和80％v/v的水的溶液。

大约80％和20％v/v的异丙醇并且溶液的剩余部分大约为水是指包括大约80％v/v的异丙醇和20％v/v的水至大约20％v/v的异丙醇和80％v/v的水的溶液。

大约80％和20％v/v的丙酮和溶液的剩余部分大约为水是指包括大约80％v/v的丙酮和20％v/v的水至大约20％v/v的丙酮和80％v/v的水的溶液。

具体实施方式

本发明的实施方式涉及合成八肽，即SEQ.ID.NO.1，其具有如下氨基酸序列结构：NH₂-Sar Arg Val Tyr Ile His Pro D-Ala-OH。SEQ.ID NO.1是通过AT1血管紧张肽受体进行β-抑制蛋白/GRK-介导信号转导的激动剂。

可以使用利用在氯三苯甲基树脂上进行FMOC基固态合成的固相肽合成来制备SEQID.NO.1的非晶体形式。可以通过反相色谱法对粗肽进行提纯，并且可以进行离子交换，以移除三氟乙酸并且用乙酸替换它。然后可以使用冻干法来分离SEQ ID.NO.1的非晶体形式。对于因商业生产而大规模制造肽，冻干法可能是不可行的。

本申请涉及沉淀SEQ.ID.NO.1的新颖方法以及SEQ.ID.NO.1的新颖晶体形式。

在图1中示出了SEQ.ID.NO.1的非晶体形式的实例，该图示出了非晶体SEQID.NO.1的X-射线粉末衍射图。图2示出了非晶体SEQ.ID.NO.1的差示扫描量热(DSC)温谱图的实例。图3示出了非晶体SEQ ID.NO.1的吸附/解吸曲线的实例。

图2中所示的DSC温谱图显示了在76℃左右以及159℃左右的两个较宽的吸热，以及250℃左右急剧的吸热。SEQ.ID.NO.1是高度吸湿的，因为其随着％RH的增加吸收水分。超过约25％(按重量计)的水分在95％RH、25℃时被吸收，如图3所示。图1-3表明SEQ.ID.NO.1的肽是非晶体的。

在一些实施方式中，提供了SEQ ID NO.1的晶体形式。在一些实施方式中，提供了SEQ ID NO.1的晶体形式I。

在一些实施方式中，形式I的特征在于基本如图4所示的X-射线粉末衍射图。在一些实施方式中，形式I的特征在于包括如表1提供的一个或多个峰的X-射线粉末衍射图。在一些实施方式中，形式I的特征在于基本上包括或包括如表1提供的所有峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约10.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约15.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约16.5±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约18.5±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约23.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约30.8±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ、约10.1±0.5度2θ、约18.5±0.5度2θ、约20.2±0.5度2θ、约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约6.1±0.5度2θ、约8.2±0.5度2θ、约10.1±0.5度2θ、约11.4±0.5度2θ、约13.2±0.5度2θ、约16.1±0.5度2θ、约18.5±0.5度2θ、约20.2±0.5度2θ、约23.1±0.5度2θ、约24.4±0.5度2θ以及约30.8±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约6.1±0.5度2θ、约8.2±0.5度2θ、约10.1±0.5度2θ、约10.7±0.5度2θ、约12.3±0.5度2θ、约14.0±0.5度2θ、约15.4±0.5度2θ、约16.1±0.5度2θ、约17.3±0.5度2θ、约18.5±0.5度2θ、约19.1±0.5度2θ、约20.2±0.5度2θ、约20.9±0.5度2θ、约21.5±0.5度2θ、约24.4±0.5度2θ以及约30.8±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ以及约10.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约10.1±0.5度2θ以及约18.5±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约18.5±0.5度2θ以及约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约20.2±0.5度2θ以及约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ、约10.1±0.5度2θ以及约18.5±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约18.5±0.5度2θ、约20.2±0.5度2θ以及约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ、约10.1±0.5度2θ、约18.5±0.5度2θ以及约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ、约10.1±0.5度2θ、约18.5±0.5度2θ的峰以及可选地约16.5±0.5度2θ和/或约23.1±0.5度2θ的一个或多个峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ、约10.1±0.5度2θ、约18.5±0.5度2θ、约20.2±0.5度2θ、约24.4±0.5度2θ的峰以及可选地具有约6.1±0.5度2θ、约11.4±0.5度2θ、约13.2±0.5度2θ、约16.1±0.5度2θ、约23.1±0.5度2θ、约30.8±0.5度2θ的一个或多个峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括在约8.2±0.5度2θ、约10.1±0.5度2θ、约18.5±0.5度2θ、约20.2±0.5度2θ、约24.4±0.5度2θ的峰以及可选地具有约6.1±0.5度2θ、约10.7±0.5度2θ、约12.3±0.5度2θ、约14.0±0.5度2θ、约15.4±0.5度2θ、约16.1±0.5度2θ、约17.3±0.5度2θ、约19.1±0.5度2θ、约20.2±0.5度2θ、约20.9±0.5度2θ、约21.5±0.5度2θ、约30.8±0.5度2θ的一个或多个峰的X-射线粉末衍射图。

除非另有指示，否则如本文所用的词组“一个或多个峰”应当理解为包括(i)具有在该词组后列举的每个峰值的XRD峰的晶体形式，(ii)具有在该词组后列举的峰值中仅一个值的XRD峰的晶体形式，以及(iii)具有在该词组后列举的峰值中两个或多个(例如，三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个、六个或更多个或者甚至七个或更多个)值的XRD峰的晶体形式。

在一些实施方式中，形式I的特征在于如图5所示的DSC温谱图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于上述数据的任意组合。

在一些实施方式中，本文中针对具体实施方式列举的X-射线粉末衍射峰可以变化±0.4度2θ、±0.3度2θ、±0.2度2θ或±0.1度2θ。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括具有约10.7、约8.7、约4.7、约4.3以及约3.6±0.5埃的d-间隔值的峰的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括约10.7±0.5埃的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括约8.7±0.5埃的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括约5.7±0.5埃的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括约5.3±0.5埃的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括约4.7±0.5埃的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括约4.3±0.5埃的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括约3.8±0.5埃的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括约3.6±0.5埃的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，形式I的特征在于包括基本上如表1中所示的d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

在一些实施方式中，本文中针对具体实施方式列举的具有d-间隔值的X-射线粉末衍射峰可以变化±4％nm、±3％nm、±2％nm或±1％nm或者±4％埃、±3％埃、±2％埃或±1％埃。

本领域技术人员可以理解，通过X-射线粉末衍射获得的峰的相对强度和位置可以根据尤其是样本制备技术、样品固定程序和采用的具体仪器而变化。例如，在一些实施方式中，SEQ ID.NO.1的晶体形式I的所列X-射线粉末衍射图峰为约±0.2度2θ。

在一些实施方式中，SEQ.ID.NO.1的晶体形式I的特征在于使用高效液相色谱法并使用显微镜检查。图6示出了形式I的HPLC色谱图的实例。还可以使用用于表征形式I的其他方法。

相对于制剂中的其他物质或成分，形式I可以具有任何期望的纯度。在一些实施方式中，提供了形式I使得相对于制剂中的其他物质或成分其基本上是纯的，诸如具有大于30％、大于40％、大于50％、大于60％、大于70％、大于80％、大于85％、大于90％、大于95％、大于96％、大于97％、大于98％、大于99％、大于99.2％、大于99.4％、大于99.5％、大于99.6％、大于99.7％或大于99.9％的纯度。

在示例性的实施方式中，形式I相对于制剂中的其他物质或成分为约45％至95％的纯度，诸如约50％至95％的纯度、约55％至90％的纯度、约60％至95％的纯度或约70％至99％的纯度。在一些实施方式中，形式I为约95％至99％的纯度。在一些实施方式中，形式I为约90％至95％的纯度。在一些实施方式中，形式I为约85％至90％的纯度。在一些实施方式中，形式I为约80％至85％的纯度。在一些实施方式中，形式I为约75％至80％的纯度。在一些实施方式中，形式I为约70％至75％的纯度。在某些实施方式中，形式I为约65％至70％的纯度。在一些实施方式中，形式I为约60％至65％的纯度。在其他实施方式中，形式I为约55％至60％的纯度。在其他实施方式中，形式I为约50％至55％的纯度。在一些实施方式中，形式I为约45％至50％的纯度。

在一些实施方式中，形式I可以包括一种或多种杂质和/或降解产物，诸如水解产物、乙酰化产物、甲酰化产物、氧化产物、水介导的降解产物和/或脱酰胺产物。在一些实施方式中，包括形式I的组合物可以包括一种或多种杂质和/或降解产物，诸如水解产物、乙酰化产物、甲酰化产物、氧化产物、水介导的降解产物和/或脱酰胺产物。在一些实施方式中，上述一种或多种杂质可以是生物学上活性的。

在一些实施方式中，形式I和/或包括形式I的组合物可以包括相对于一种或多种水解产物的任何期望纯度。在一些实施方式中，该组合物包括相对于形式I和/或组合物的总重量按重量计小于约10％的一种或多种水解产物，诸如小于约7.5wt.％、小于约5wt.％或小于约2wt.％的一种或多种水解产物。在一些实施方式中，形式I和/或组合物可以包括按重量计约0.05％至约5％的一种或多种水解产物。在一些实施方式中，形式I和/或组合物包括按重量计约0.05％至约2％的一种或多种水解产物。在一些实施方式中，形式I和/或组合物可以包括按重量计约0.1％至约2％的一种或多种水解产物。在一些实施方式中，形式I和/或组合物可以包括按重量计约0.01％至约2％的一种或多种水解产物。

可替换地或另外地，形式I和/或包括形式I的组合物可以包含相对于一种或多种乙酰化产物的任何期望纯度。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的10％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的7.5％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的5％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的2％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的1％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的0.5％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约5％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约2％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.1％至约2％。在一些实施方式中，乙酰化产物按重量计可以占组合物的约0.01％至约2％。

可替换地或另外地，形式I和/或包括形式I的组合物可以包括相对于一种或多种甲酰化产物的任何期望纯度。在一些实施方式中，甲酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的10％。在一些实施方式中，甲酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的7.5％。在一些实施方式中，甲酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的5％。在一些实施方式中，甲酰化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的2％。在一些实施方式中，甲酰化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约5％。在一些实施方式中，甲酰化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约2％。在一些实施方式中，甲酰化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.1％至约2％。

可替换地或另外地，形式I和/或包括形式I的组合物可以包括相对于一种或多种氧化产物的任何期望纯度。在一些实施方式中，氧化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的10％。在一些实施方式中，氧化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的7.5％。在一些实施方式中，氧化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的5％。在一些实施方式中，氧化产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的2％。在一些实施方式中，氧化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约5％。在一些实施方式中，氧化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约2％。在一些实施方式中，氧化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.1％至约2％。在一些实施方式中，氧化产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.01％至约2％。

可替换地或另外地，形式I和/或包括形式I的组合物可以包括相对于一种或多种水介导的降解产物的任何期望纯度。在一些实施方式中，一种或多种水介导的降解产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的10％。在一些实施方式中，一种或多种水介导的降解产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的7.5％。在一些实施方式中，一种或多种水介导的降解产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的5％。在其他实施方式中，一种或多种水介导的降解产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的2％。在一些实施方式中，一种或多种水介导的降解产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约5％。在例示实施方式中，一种或多种水介导的降解产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约2％。在一些实施方式中，一种或多种水介导的降解产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.1％至约2％。在一些实施方式中，一种或多种水介导的降解产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.01％至约2％。

可替换地或另外地，形式I和/或包括形式I的组合物可以包括相对于一种或多种脱酰胺产物的任何期望纯度。在一些实施方式中，脱酰胺产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的10％。在一些实施方式中，脱酰胺产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的7.5％。在一些实施方式中，脱酰胺产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的5％。在其他实施方式中，脱酰胺产物按重量计可以占小于形式I和/或组合物的2％。在一些实施方式中，脱酰胺产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约5％。在一些实施方式中，脱酰胺产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.05％至约2％。在一些实施方式中，脱酰胺产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.1％至约2％。在一些实施方式中，脱酰胺产物按重量计可以占形式I和/或组合物的约0.01％至约2％。

在一些实施方式中，组合物被提供为包括形式I和组合总量小于10wt.％，诸如小于8wt.％、小于6wt.％、小于5wt.％、小于4wt.％、小于3wt.％、小于2wt.％、小于1wt.％、小于0.5wt.％或小于0.25wt.％的降解产物，诸如水解产物、甲酰化产物、氧化产物、水介导降解产物和/或脱酰胺产物。

在一些实施方式中，组合物被提供为包括形式I和组合总量小于20wt.％，诸如小于18wt.％、小于16wt.％、小于14wt.％、小于12wt.％、小于10wt.％、小于8wt.％、小于6wt.％、小于5wt.％、小于4wt.％小于3wt.％、小于2wt.％、小于1wt.％、小于0.5wt.％或小于0.25wt.％的降解产物，诸如水解产物、乙酰化产物、甲酰化产物、氧化产物、水介导是降解产物和/或脱酰胺产物。

在一些实施方式中，组合物被提供为包括形式I和组合总量小于10wt.％，诸如小于8wt.％、小于6wt.％、小于5wt.％、小于4wt.％、小于3wt.％、小于2wt.％、小于1wt.％、小于0.5wt.％或小于0.25wt.％的一种或多种杂质和/或降解产物，诸如水解产物、甲酰化产物、氧化产物、水介导的降解产物和/或脱酰胺产物。

在一些实施方式中，组合物被设置为包括形式I和组合总量小于20wt.％，诸如小于18wt.％、小于16wt.％、小于14wt.％、小于12wt.％、小于10wt.％、小于8wt.％、小于6wt.％、小于5wt.％、小于4wt.％小于3wt.％、小于2wt.％、小于1wt.％、小于0.5wt.％或小于0.25wt.％的一种或多种杂质和/或降解产物，诸如水解产物、乙酰化产物、甲酰化产物、氧化产物、水介导的降解产物和/或脱酰胺产物。

在一些实施方式中，组合物被设置为包括形式I和多聚体。在一些实施方式中，可以由于二硫键而形成多聚体。在一些实施方式中，可以由于非二硫键而形成多聚体。在一些实施方式中，组合物可以包括相对于多聚体的任何期望纯度。在一些实施方式中，组合物包括小于约20wt.％的多聚体，诸如例如小于约18wt.％、小于约16wt.％、小于约14wt.％、小于约12wt.％、小于约10wt.％、小于约8wt.％、小于约6wt.％、小于约5wt.％、小于约4wt.％、小于约3wt.％、小于约2wt.％、小于约1wt.％、小于约0.5wt.％或小于约0.1wt.％的多聚体。

在一些实施方式中，组合物被提供为包括形式I和/或SEQ ID.NO.1的肽模拟物。在一些实施方式中，组合物可以包括相对于SEQ ID.NO.1的肽模拟物的任何期望纯度。例如，组合物可以包括小于约20wt.％的肽模拟物，诸如例如小于约18wt.％、小于约16wt.％、小于约14wt.％、小于约12wt.％、小于约10wt.％、小于约8wt.％、小于约6wt.％、小于约5wt.％、小于约4wt.％、小于约3wt.％、小于约2wt.％、小于约1wt.％、小于约0.5wt.％或小于约0.1wt.％的肽模拟物。在一些实施方式中，肽模拟物是环状的。在一些实施方式中，肽模拟物是二聚物。在一些实施方式中，肽模拟物是三聚物。

在一些实施方式中，组合物可以包括形式I和二聚物。在一些实施方式中，组合物包括小于约20wt.％的二聚物，诸如例如小于约18wt.％、小于约16wt.％、小于约14wt.％、小于约12wt.％、小于约10wt.％、小于约8wt.％、小于约6wt.％、小于约5wt.％、小于约4wt.％、小于约3wt.％、小于约2wt.％、小于约1wt.％、小于约0.5wt.％或小于约0.1wt.％的二聚物。

在一些实施方式中，组合物可以包括形式I和三聚物。在一些实施方式中，组合物包括小于约20wt.％的三聚物，诸如小于约18wt.％、小于约16wt.％、小于约14wt.％、小于约12wt.％、小于约10wt.％、小于约8wt.％、小于约6wt.％、小于约5wt.％、小于约4wt.％、小于约3wt.％、小于约2wt.％、小于约1wt.％、小于约0.5wt.％或小于约0.1wt.％的三聚物。

在一些实施方式中，组合物被提供为包括形式I和同分异构物。在一些实施方式中，组合物包括小于约20wt.％的同分异构物，诸如例如小于约18wt.％、小于约16wt.％、小于约14wt.％、小于约12wt.％、小于约10wt.％、小于约8wt.％、小于约6wt.％、小于约5wt.％、小于约4wt.％、小于约3wt.％、小于约2wt.％、小于约1wt.％、小于约0.5wt.％或小于约0.1wt.％的同分异构物。

在一些实施方式中，组合物被提供为包括形式I和小于约40wt％，诸如小于约30wt.％、小于约20wt.％、小于约15wt.％、小于约10wt.％、小于约8wt.％、小于约6wt.％、小于约5wt.％、小于约4wt.％、小于约3wt.％、小于约2wt.％、小于约1wt.％、小于约0.5wt.％、小于约0.1wt.％或小于约0.01wt.％的非晶体SEQ.ID.NO.1。

在一些实施方式中，组合物被设置为包括约50:50至99:1的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1，诸如例如约55:45至95:5的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1、约60:40至90:10的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1、约70:30至85:15的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1、或者约75:25至99:1的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1。

在一些实施方式中，提供了用于制备SEQ ID.NO.1的晶体形式的方法。在一些实施方式中，通过使SEQ ID.NO.1沉淀和晶体化并且可选地分离形式I来产生晶体形式I。在一些实施方式中，通过使SEQ ID.NO.1在水溶液中沉淀和晶体化并且可选地分离形式I来制备形式I。在一些实施方式中，通过使SEQ ID.NO.1在过饱和水溶液中沉淀和晶体化并且可选地分离形式I来制备形式I。

在这一点上，可以使用各种强度或浓度的任何适合的水溶液，诸如例如水、DMSO、酸和极性溶剂。这样的溶液可以包括但不限于：DMSO、水、乙醇、丁醇、甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、丙酮、二甲基甲酰胺、乙腈、二甲亚砜、碳酸丙烯酯、甲酸、异丙醇、丙醇、乙酸和硝基甲烷。在一些实施方式中，所述水溶液选自水、乙醇、丙醇、二甲亚砜、丙酮和异丙醇。在一些实施方式中，没有向水中添加任何额外的成分或溶剂。在一些实施方式中，水溶液包括水和丙酮。在一些实施方式中，水溶液包括水和异丙醇。在一些实施方式中，水溶液不包含乙醇。在一些实施方式中，水溶液不包含丙酮。在一些实施方式中，水溶液不包含有机溶剂。

可以使用任何适合的方式来识别、表征SEQ ID NO.1的晶体形式I并且将其与非晶体形式区分开。本领域技术人员将已知许多识别和表征SEQ ID NO.1的形式I的不同方法。例如，可以基于非晶体和晶体形式的衍射、热、强度和/或光谱性质差异来识别和表征SEQID NO.1的晶体形式I。适合的方法包括但不限于：X-射线衍射测定法、毛细管熔点测定、热重量分析(TGA)、差示扫描量热法(DSC)和/或光谱法。

在一些实施方式中，形式I从水中沉淀。图4和5示出了使用X-射线粉末衍射和DSC的形式I的示例表征。在一些实施方式中，形式I从水中沉淀，并且通过HPLC和显微镜检查进行表征。图6示出了形式I的示例HPLC色谱图。

图7示出了非晶体SEQ ID.NO.1和使用水溶液获得的SEQ ID.NO.1的晶体形式I的叠加X射线粉末衍射图。在一些实施方式中，形式I从过饱和水溶液中沉淀。来自过饱和水溶液的XRD表征表明，形式I是如图7所示的晶体材料。图5中形式I的DSC温谱图也显示出与非晶体SEQ.ID.NO.1不同的吸热转换，其中最后一个吸热峰在255℃-259℃左右出现。

图8示出了SEQ ID.NO.1的非晶体形式和晶体形式I的示例性HPLC色谱图。图8中所示的HPLC色谱图证实了由水溶液制备的晶体形式在化学上与SEQ.ID.NO.1非晶体形式是相同的。这些结果证明了形式I是SEQ.ID.NO.1的晶体形式。

使用偏光显微术进一步检查了形式I。图9示出了在正交偏振光下晶体形式I的示例性显微图像。图10示出了在平面偏振光下晶体形式I的示例性显微图像和颗粒大小。这些结果证实了形式I是晶体材料，因为在将样本台从0°旋转至90°后在正交偏正光下在样本中观察到了双折射，如图9中所示。还确定了颗粒大小，如图10和表2所示。

在一些实施方式中，提供了用于制备SEQ ID.NO.1的方法。在一些实施方式中，通过使SEQ ID.NO.1沉淀并可选地分离SEQ.ID.NO.1来制备非晶体SEQ.ID.NO.1。在一些实施方式中，从包含乙醇的溶液中沉淀非晶体SEQ.ID.NO.1。在一些实施方式中，从包括丙酮的溶液中沉淀非晶体SEQ.ID.NO.1。在一些实施方式中，从包括异丙醇的溶液中沉淀非晶体SEQ.ID.NO.1。

在一些实施方式中，SEQ.ID.NO.1可以在例如但不限于乙醇的水溶液中溶解，其中溶液中乙醇的百分比可以为大约80％至20％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中乙醇的百分比可以为大约60％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中乙醇的百分比可以为大约50％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中乙醇的百分比可以为大约55％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中乙醇的百分比可以为大约40％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。

在一些实施方式中，SEQ.ID.NO.1可以溶解在例如但不限于异丙醇的水溶液中，其中溶液中异丙醇的百分比可以为大约80％至30％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中异丙醇的百分比可以为大约60％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中异丙醇的百分比可以为大约50％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中异丙醇的百分比可以为大约55％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中异丙醇的百分比可以为大约40％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。

在一些实施方式中，SEQ.ID.NO.1可以溶解在例如但不限于丙酮的水溶液中，其中溶液中丙酮的百分比可以为大约80％至20％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中丙酮的百分比可以为大约60％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中丙酮的百分比可以为大约50％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中丙酮的百分比可以为大约55％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。在一些实施方式中，溶液中丙酮的百分比可以为大约40％v/v，并且溶液的剩余部分大约为水。

另外地，在这一点上，可以使用各种强度或浓度的任何适合的水溶液，诸如例如水、DMSO、酸和极性溶剂。这样的溶液可以包括但不限于：DMSO、水、乙醇、丁醇、甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、丙酮、二甲基甲酰胺、乙腈、二甲亚砜、碳酸丙烯酯、甲酸、异丙醇、丙醇、乙酸和硝基甲烷。在一些实施方式中，溶剂选自水、乙醇、丙醇、二甲亚砜、丙酮和异丙醇。

来自例如但不限于本文所述的溶液(包括但不限于乙醇、丙酮/水和异丙醇/水)的沉淀物产生显示出与非晶体SEQ.ID.NO.1相同的XRD图的沉淀物。本文所描述的结果证明，沉淀物包括非晶体形式、大部分非晶体形式、非晶体形式和晶体形式的混合物、一种或多种晶体形式，或者非晶体形式和一种或多种晶体形式的混合物。前述的每种均被视为单独的实施方式。

在一些实施方式中，来自例如但不限于乙醇、丙酮或异丙醇的SEQ.ID.NO.1的沉淀物可以包括非晶体形式、大部分非晶体形式、非晶体形式和晶体形式的混合物、一种或多种晶体形式，或者非晶体形式和一种或多种晶体形式的混合物。这些中的每一种均被视为单独的实施方式。

在一些实施方式中，提供了包括约50:50至99:1的形式I和非晶体SEQ.ID.NO.1的沉淀物。在一些实施方式中，沉淀物可以包括非晶体SEQ.ID.NO.1。在一些实施方式中，例如，沉淀物可以包括大部分非晶体SEQ.ID.NO.1，按重量计约99％至约1％，范围按重量计从约小于90％、小于80％、小于70％、小于60％、小于40％、小于30％、小于20％、小于10％、小于5％、小于1％、小于0.50％、小于0.25％。

在一些实施方式中，沉淀物可以包括大部分晶体SEQ.ID.NO.1，按重量计约99％至约1％，范围按重量计从约小于90％、小于80％、小于70％、小于60％、小于40％、小于30％、小于20％、小于10％、小于5％、小于1％、小于0.50％、小于0.25％。在一些其他实施方式中，例如，沉淀物可以包括SEQ.ID.NO.1的一种或多种晶体形式。

在一些实施方式中，沉淀物可以包括SEQ.ID.NO.1的一种或多种晶体形式与非晶体SEQ.ID.NO.1的混合物。例如，沉淀物可以包括晶体SEQ.ID.NO.1，按重量计为约99％至约1％，范围按混合物的重量计从约小于90％、小于80％、小于70％、小于60％、小于40％、小于30％、小于20％、小于10％、小于5％、小于10％、小于0.50％或小于0.25％。可替换地，沉淀物可以包括非晶体SEQ.ID.NO.1，按重量计为约99％至约1％，范围按混合物的重量计从约小于90％、小于80％、小于70％、小于60％、小于40％、小于30％、小于20％、小于10％、小于5％、小于1％、小于0.50％或小于0.25％。

沉淀的方法还可以包括将包括SEQ.ID.NO.1的溶液加热，然后允许溶液冷却至环境温度。在一些实施方式中，环境温度为20-25℃。在一些实施方式中，将溶液冷却至10-20℃。在一些实施方式中，溶液在被冷却或允许冷却至环境温度或具体温度之前被加热至至少或约10℃、20℃、30℃、40℃、50℃或60℃。在一些实施方式中，溶液被加热至约10-20℃、10-30℃、10-40℃、10-50℃、20-30℃、20-40℃、20-50℃、20-60℃、30-40℃、30-50℃、30-60℃、40-50℃、40-60℃、50-60℃、25-45℃、35-45℃或35-50℃、45-55℃或45-60℃。在一些实施方式中，溶液在指定的温度下被加热约0.5至约2小时、约1至约2小时、约0.5至约1.5小时或约1至约1.5小时。

在一些实施方式中，在约15至约25℃、约15至约23℃、约15至约20℃、约15至约18℃、约17至约25℃、约17至约23℃、约17至约21℃、约17至约20℃、约18至约25℃、约18至约23℃、约18至约21℃、约18至约20℃、约19至约25℃、约19至约23℃或约19至约21℃或上述各范围之间的任何温度下沉淀晶体形式。在一些实施方式中，允许沉淀物形成约或至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、18或24小时。在一些实施方式中，允许沉淀物形成约2至约24、约2至约18、约2至约12、约2至约10、约2至约8、约2至约6、约2至约4、约4至约24、约4至约18、约2至约12、约4至约10、约4至约8、约4至约6、约5至约24、约5至约18、约5至约12、约5至约10、约5至约8、约5至约6、约6至约24、约6至约18、约6至约12、约6至约10、约6至约8、约8至约24、约8至约18、约8至约12或约8至约10小时。

在一些实施方式中，一旦溶液被加热并且在溶液被冷却至环境温度或接近环境温度之前向溶液中添加额外体积的水。在一些实施方式中，溶液被进一步冷却至约或低于15、10、5、0、-5或-10℃。在一些实施方式中，溶液被冷却至约-5℃至约15℃、约-5℃至约10℃、约-5℃至约5℃、约-10℃至约15℃、约-10℃至约10℃、约-10℃至约5℃、约-10℃至约0℃、约-10℃至约-5℃、约-5℃至约15℃、约-5℃至约10℃、约-5℃至约5℃、约-5℃至约0℃、约0℃至约15℃、约0℃至约10℃、约0℃至约5℃、约5℃至约15℃或约5℃至约10℃。在一些实施方式中，溶液被冷却约或至少1、2、3、4、5、6、12、18或24小时。

在一些实施方式中，方法包括使沉淀物干燥。在一些实施方式中，沉淀物在真空下干燥。在一些实施方式中，沉淀物在约30℃至约50℃、约35℃至约50℃、约30℃至约45℃、约35℃至约45℃或约40℃至约45℃的温度下干燥。在一些实施方式中，沉淀物在约30℃、约35℃、约40℃或约45℃至约50℃的温度下干燥。为了避免疑问，可以在真空下在特定的温度下执行干燥。在一些实施方式中，还对经干燥的材料进行冻干。

在一些实施方式中，可以重复上述沉淀步骤。在一些实施方式中，方法被重复一次、两次或三次。

药物组合物/制剂

本文所述的实施方式可以用于药物组合物，并且可以通过使用一种或多种生理可接受的载体或赋形剂的标准技术进行配制。在一些实施方式中，制剂可以包括缓冲剂和/或防腐剂。可以配制形式I以及它们的生理可接受的盐、无水物、水合物和/或溶剂化物，用于通过任何适合的途径施用，包括通过包括一种或多种药物可接受载体的媒介物经过局部、鼻部、口腔、肠胃外(例如，静脉、腹腔、膀胱或鞘内)或直肠吸入，吸入的比例由施用的途径和标准生物实践来确定。本文还描述了并且还可以使用施用的其他途径。

在一些实施方式中，药物组成物被提供给包括有效量的形式I以及例如药物可接受的稀释液、防腐剂、增溶剂、乳化剂、佐药和/或其他载体。本领域技术人员已知这样的组合物，并且可以使用标准技术来配制所述组合物。例如，可以使用各种缓冲剂含量的稀释液，诸如但不限于，TRIS或其他胺类、碳酸盐、磷酸盐、氨基酸例如甘氨酰胺盐酸盐(特别地是在生理pH范围内)、N-双甘氨肽、磷酸钠或磷酸钾(二盐基、三盐基)等或TRIS-HCl或乙酸盐、pH和离子强度；添加剂，诸如清洗剂和加溶剂(例如，表面活性剂，诸如Pluronics、吐温20、吐温80(聚山梨醇酯80)、Cremophor、多元醇诸如聚乙二醇、丙二醇等)、抗氧化剂(例如，抗坏血酸、焦亚硫酸钠)、防腐剂(例如，硫柳汞、苯甲醇、对羟苯甲酸酯等)和膨胀物质(例如：糖，诸如蔗糖、乳糖；甘露醇；聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮或右旋糖酐等)；和/或将材料并入到聚合物(诸如，聚乳酸、聚乙醇酸等)的微粒制备中或并入到脂质体中。还可以使用透明质酸。可以采用这样的组合物来影响如本文所述包括形式I的组合物的物理状态、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。参见例如Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版(1990,Mack Publishing Co.,Easton,Pa.18042)1435-1712页，其通过引用合并到本文中。在制剂中包括缓冲剂的情况下，缓冲剂可以为例如但不限于乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、双甘氨肽、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠和三(羟甲基)-硝基甲烷或者它们的混合物。每种缓冲剂可以独立使用或与另一缓冲剂结合使用。在一些实施方式中，缓冲剂为双甘氨肽、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠或者它们的混合物。

在制剂中包括药物可接受的防腐剂的情况下，防腐剂可以为但不限于，苯酚、间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2-苯氧乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2-苯基乙醇、苯甲醇、氯丁醇和硫柳汞或者它们的混合物。在一些实施方式中，防腐剂为苯酚和/或间甲酚。

在一些实施方式中，防腐剂以约0.1mg/ml至约100mg/ml的浓度存在，更优选地以约0.1mg/ml至约50mg/ml的浓度，约0.1mg/ml至约25mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，防腐剂以约0.1mg/ml至约10mg/ml的浓度存在。

本领域技术人员熟知在药物组合物中使用防腐剂。为了方便起见，参考了Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995。

在一些实施方式中，制剂可以进一步包括螯合剂，其中螯合剂可以为乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸和天冬氨酸的盐或者它们的混合物。

在一些实施方式中，螯合剂以0.1mg/ml至10mg/ml的浓度存在，特别地以0.1mg/ml至5mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，螯合剂以0.1mg/ml至2mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，螯合剂以2mg/ml至5mg/ml的浓度存在。

本领域技术人员熟知在药物组合物中使用螯合剂。为了方便起见，参考了Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995。

在一些实施方式中，制剂可以进一步包括选自高分子量聚合物或低分子化合物的组的稳定剂，其中这些稳定剂包括但不限于聚乙二醇(例如PEG3350)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、不同的盐(例如氯化钠)、L-甘氨酸、L-组氨酸、咪唑、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸和它们的混合物。在一些实施方式中，稳定剂为L-组氨酸、咪唑、精氨酸或者它们的任意组合。

在一些实施方式中，高分子量聚合物以0.1mg/ml至100mg/ml的浓度存在，以0.1mg/ml至50mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，高分子量聚合物以0.1mg/ml至5mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，高分子量聚合物以5mg/ml至10mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，高分子量聚合物以10mg/ml至20mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，高分子量聚合物以20mg/ml至30mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，高分子量聚合物以30mg/ml至50mg/ml的浓度存在。

在一些实施方式中，低分子量聚合物以0.1mg/ml至100mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合物以0.1mg/ml至50mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合物以0.1mg/ml至5mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合化合物以5mg/ml至10mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合物以10mg/ml至20mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合物以20mg/ml至30mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合物以30mg/ml至50mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合物以50mg/ml至60mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合物以60mg/ml至80mg/ml的浓度存在。在一些实施方式中，低分子量聚合物以80mg/ml至100mg/ml的浓度存在。

本领域技术人员熟知在药物组合物中使用稳定剂。为了方便起见，参考了Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995。

在一些实施方式中，制剂可以包括表面活性剂，其中表面活性剂可以为清洗剂、乙氧基化蓖麻油、聚乙二醇化甘油酯、乙酰化单酸甘油乙酯、山梨醇酐脂肪酸酯、泊咯沙姆诸如188和407、聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯衍生物诸如烷基化和烷氧基化衍生物(吐温类，例如吐温-20或吐温-80)、甘油一酸酯或其乙氧基化衍生物、甘油二酯或其聚氧乙烯衍生物、甘油、胆酸或其衍生物、卵磷脂、醇和磷脂、甘油磷脂(卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰丝氨酸)、甘油糖脂(半乳糖苷)、鞘氨醇磷脂类(鞘磷脂)和神经鞘糖脂类(神经酰胺、神经节苷脂)、DSS(多库酯钠、多库酯钙、多库酯钾)、SDS(十二烷基硫酸钠或十二醇硫酸钠)、二棕榈酰磷脂酸、辛酸钠、胆汁酸及其盐和甘氨酸或牛磺酸轭合物、熊去氧胆酸、胆酸钠、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、甘氨胆酸钠、N-十六烷基-N,N-二甲基-3-铵基-1-丙磺酸盐、阴离子(烷基-芳基-磺酸盐)单价表面活性剂、棕榈酰溶血磷脂-L-丝氨酸、溶血磷脂(例如，乙醇胺、胆碱、丝氨酸或苏氨酸的1-酰基-sn-丙三基-3-磷酸酯)、烷基、烷氧基(烷基酯)、溶血磷脂和卵磷脂胆碱的烷氧基(烷基醚)-衍生物，例如溶血卵磷脂胆碱的月桂酰和豆蔻酰衍生物，二棕榈酰磷脂酰胆碱和极性头基的变型，即胆碱、乙醇胺、磷脂酸、丝氨酸、苏氨酸、甘油、肌糖和带正电荷的DODAC、DOTMA、DCP、BISHOP、溶血磷脂丝氨酸和溶血磷脂苏氨酸、两性离子表面活性剂(例如，N-烷基-N,N-二甲基氨基-1-丙磺酸盐、3-胆酰胺-1-丙基二甲基氨基-1-丙磺酸盐、十二烷基胆碱磷酸、豆蔻酰溶血磷脂酰胆碱、鸡蛋溶血卵磷脂)、阳离子表面活性剂(季铵碱)(例如，溴化十六烷基三甲铵、氯化十六烷基吡啶)、非离子表面活性剂、聚氧化乙烯/聚环氧丙烷嵌段共聚物(Pluronics/Tetronics、Triton X-100、十二烷基β-D-吡喃葡萄糖苷)或聚合表面活性剂(吐温-40、吐温-80、Brij-35)、梭链孢酸衍生物—(例如，牛磺双氢褐霉素钠等)、长链脂肪酸及其盐C6-C12(例如，油酸和辛酸)、酰肉碱和衍生物，赖氨酸、精氨酸或组氨酸的N_α-酰化衍生物，或者赖氨酸或精氨酸的侧链酰化衍生物，包括赖氨酸、精氨酸或组氨酸和中性或酸性氨基酸的任意组合的二肽的N_α-酰化衍生物，包括中性氨基酸和两种带电氨基酸的任意组合的三肽的N_α-酰化衍生物，咪唑啉衍生物或者它们的任何混合物。

技术人员熟知在药物组合物中使用表面活性剂。为了方便起见，参考了Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第19版，1995。

制剂还可以包括药物可接受的甜味剂。在一些实施方式中，甜味剂包括至少一种强力甜味剂，诸如但不限于，糖精、糖精钠或糖精钙、阿司帕坦、乙酰氨基磺酸钾、环己基氨基磺酸钠、阿力甜、二氢查耳酮甜味剂、莫内林、甜菊苷或三氯蔗糖(4,1′,6′-三氯4,1′,6′-三去氧半乳蔗糖)，优选糖精、糖精钠或糖精钙，并且可选地包括填充型甜味剂，诸如山梨醇、甘露醇、果糖、蔗糖、麦芽糖、异麦芽、葡萄糖、氢化葡萄糖浆、木糖醇、焦糖或蜂蜜。

方便地以低的浓度采用强力甜味剂。例如，在糖精钠的情况下，根据最终制剂的总体积，浓度的范围可以从0.04％至0.1％(w/v)，或者从低剂量制剂中的约0.06％至高剂量制剂中的约0.08％。可以以较大数量有效地使用填充型甜味剂，范围从约10％至约35％或者从约10％至15％(w/v)。

制剂可以通过常规技术来制备，例如如在Remington’s PharmaceuticalSciences,1985，或Remington:The Science and Practice of Pharmacy(第19版，1995)中所述的，其中制药工业的这些常规技术涉及适当地溶解并混合成分，以产生期望的最终产品。

可以使用本领域中任何已知的方法来施用本文所述的化合物或制剂。例如，施用可以为经皮的、肠胃外的、静脉内的、动脉内的、皮下的、肌肉内的、颅内的、眶内的、眼睛的、心室内的、囊内的、脊柱内的、脑池内的、腹膜内的、脑室内的、鞘内的、鼻内的、喷雾的、通过栓剂、吸入或通过口服给药。在一些实施方式中，通过静脉内或通过注射来施用化合物或制剂。

对于口服给药，形式I或其治疗可接受的盐可以以单位剂型配制，诸如囊形片、胶囊片、小丸、锭剂、块状粉末、胶囊或片剂。可以通过常规的手段用药物可接受的赋形剂来制备片剂或胶囊，药物可接受的赋形剂包括：粘合剂，例如预胶化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羟丙甲纤维素；填充剂，例如乳糖、微晶纤维素或磷酸氢钙；润滑剂，例如硬脂酸镁、滑石粉或二氧化硅；崩解剂，例如马铃薯淀粉或羧基乙酸淀粉钠；或润湿剂，例如十二烷硫酸钠。可以通过本领域中已知的方法来包覆片剂。

用于口服给药的液体制剂可以采用例如溶液、糖浆或悬浮液的形式，或者它们可以呈现为干燥产品，在使用前与水或其他适合的媒介物结合。可以通过常规手段用该药物可接受的添加剂来制备这些液体制剂，添加剂例如：悬浮剂，例如山梨糖醇液、纤维素衍生物或氢化食用脂肪；乳化剂，例如卵磷脂或阿拉伯树胶；无水媒介物，例如杏仁油、油酯、乙醇或分馏植物油；以及防腐剂，例如甲基或丙基-对羟苯酸盐或山梨酸。根据情况，制剂还可以包括缓冲盐、增味剂、着色剂和/或甜味剂。如果需要，可以适合地配制用于口服给药的制剂，以给出活性化合物的受控释放。

对于局部施用，可以将形式I配制在含0.1至10％，优选地0.5至5％的活性化合物的药物可接受媒介物中。这些制剂可以为乳膏、涂剂、舌下片、气雾剂和/或乳剂的形式，并且可以包含在本领域中用于该目的的常规的基质类型或贮液囊类型的皮肤药贴或口腔贴片中。

对于肠胃外施用，可以将化合物的形式I或非晶体形式放入具有药物可接受的媒介物或载体的组合物中通过静脉注射、皮下注射或肌内注射施用。形式I可以配制成通过注射例如通过弹丸式注射或持续输注用于肠胃外施用。用于注射的制剂可以以具有添加防腐剂的单位剂型存在，例如，在安瓿或多剂量容器中。组合物可以采取下述形式，诸如油性或水性媒介物中的悬浮液、溶液或乳剂，并且可以包含配方药剂，例如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。另外，化合物可以沉淀并存储在安瓿或其他容器中，然后在施用给受试者之前溶解在溶液中。

对于通过注射的施用，化合物可以在溶液中使用，并且例如在无菌水性媒介物中使用，无菌水性媒介物还可以包括其他溶质，诸如缓冲剂或防腐剂，并包括足量的药物可接受盐化物或葡萄糖，以使溶液等张。在一些实施方式中，可以用药物可接受载体来配制药物组合物，以提供用于可注射施用的无菌溶液或悬浮液。特别地，可注射物可以制备成常规形式，制备为液体溶液或悬浮液、在注射前适用于液体状的溶液或悬浮液的固体形式，或者乳剂。适合的赋形剂为例如水、盐、右旋糖、甘露醇、乳糖、卵磷脂、白蛋白、谷氨酸钠、半胱氨酸盐酸盐等。另外，如有需要，可注射药物组合物可以包含微量的无毒辅助物质，诸如润湿剂、pH缓冲剂等。如有需要，可以利用吸收增强制剂(例如脂质体)。在E.W.Martin撰写的“Remington’s pharmaceutical Sciences”中描述了合适的药物载体。

对于通过吸入的施用，化合物可以方便地以气雾喷雾的形式利用适合的推进剂(例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他适合的气体)从压力包或喷雾器中输送。在压力气雾剂的情况下，可以通过设置用来递送计量数量的阀门来确定计量单位。用于在吸入器或吹入器中使用的例如胶的胶囊和柱体可以配制成包含化合物和适合的粉末基质(例如，乳糖或淀粉)的粉末混合物。对于鼻内施用，化合物可以用作例如液体喷雾、粉末或滴的形式。

化合物还可以被配制成直肠组合物，例如包含例如常规栓剂基质(例如可可油或其他甘油酯)的栓剂或保留灌肠。

此外，化合物可以被配制成药性持久的制剂。这种长效的制剂可以通过植入(例如，皮下或肌内植入)或通过肌内注射来施用。因此，例如可以用适合的聚合材料或疏水材料(例如可接受油中的乳剂)或离子交换树脂或者微溶的衍生物(例如微溶盐)来配制化合物。

如有需要，组合物可以存在于可以包含一种或多种包含活性成分的单位剂型的包装或分配器装置中。包装可以例如包括金属或塑料箔，例如罩板包装。包装还可以包含单独的小瓶或其他容器。包装或分配器装置可以附有施用说明。

剂量

可以以治疗有效的剂量向患者施用晶体形式I，以预防、治疗或控制完全或部分地由本文所述的GPCR-配体相互作用介导的疾病和障碍。可以以足以引起患者的有效保护或治疗反应的量向患者施用包括晶体形式I的药物组合物。剂量将由采用的特别化合物的功效和受试者的情况以及体重或待治疗区域的表面积决定。剂量的大小还将由伴随特定化合物的施用的任何副作用的存在、性质和程度或特别受试者的带菌体决定。

可以根据主治临床医生考虑到诸如患者的年龄、情况和体型以及治疗症状的严重程度等因素而做出的判断来调节包括根据本文所述方法制备的形式I或另一非晶体形式和/或其药物可接受的盐化物的化合物的施用的量和频率。普通技术医师或兽医可以容易地确定并开具所需药物的有效量，以预防、抵制或抑制病情的发展。一般而言，预期有效量将为0.001mg/kg至10mg/kg体重，特别地为0.01mg/kg至1mg/kg体重。更具体地，预期有效量将为通过静脉施用连续灌输0.01微克/kg体重/min至100微克/kg体重/min，持续12小时至14天的时间。可以将所需的剂量在一天内以适当的间隔以两份、三份、四份或更多分亚剂量施用。亚剂量可以配制为单位剂型，例如每单位剂型包含0.01至500mg，并且特别地0.1mg至200mg的活性成分。

在一些实施方式中，药物制剂为单位剂型。以这种形式，制剂被细分为包含适当数量的活性成分的适合大小的单位剂量，例如实现期望目的的有效量。根据特别的应用，可以将单位剂量的制剂中活性化合物的数量从约0.01mg改变或调整至约1000mg、从约0.01mg至约750mg、从约0.01mg至约500mg，或从0.01mg至约250mg。取决于患者的需求和治疗病情的严重程度，可以改变采用的实际剂量。针对特别情况确定正确的剂量方案属于本领域的技术范围。为了方便起见，根据需要可在一天内将总剂量分为多部分并且施用。

医疗用途

包括根据本文所述方法制备的SEQ ID.NO.1的晶体形式I或非晶体形式的组合物可以用于治疗例如将有利地对血压下降做出反应的心血管或心肾障碍。

在一些实施方式中，提供了治疗心血管障碍的方法。在一些实施方式中，该方法包括向受试者或有需要的受试者施用治疗有效量的晶体形式I和/或其治疗可接受的盐。在一些实施方式中，该方法包括向受试者或有需要的受试者施用根据本文所述方法制备的治疗有效量的SEQ ID.NO.1的非晶体形式和/或其治疗可接受的盐。这些心血管障碍包括但不限于，慢性高血压、高血压危象、急性充血性心力衰竭、心绞痛、急性心肌梗塞、左心室衰竭、脑血管机能不全、颅内出血、心力衰竭、急性失代偿性心力衰竭(也可以称为急性心力衰竭)、原发性高血压、术后高血压、高血压性心脏病、高血压性肾病、肾血管性高血压、恶性高血压、肾移植术后患者稳定、扩张型心肌病、心肌炎、心脏移植术后患者稳定、支架后管理相关的障碍、神经源性高血压、先兆子痫、腹主动脉瘤以及涉及血液动力的任何心血管障碍。

在一些实施方式中，心血管障碍是急性心血管障碍。在一些实施方式中，急性心血管障碍是急性高血压危象、妊娠毒血症、急性心肌梗塞、急性充血性心力衰竭、急性心力衰竭、急性缺血性心脏病、肺动脉高血压、术后高血压、偏头痛、视网膜病和术后心脏/瓣膜手术。

在一些实施方式中，提供了治疗与AT1R相关的病毒性传染病的方法。在一些实施方式中，该方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的晶体形式I和/或其治疗可接受的盐。在具体实施方式中，该组合物通过静脉内注射施用。

联合治疗

还提供了下述用于治疗任何心血管或心肾障碍的方法：通过施用根据本文所述方法制备的晶体形式I和/或非晶体形式和/或其药物可接受的盐，结合其他用于治疗心血管和/或心肾障碍的药物。这些其他药物包括：利尿剂，诸如呋喃苯胺酸；血管扩张剂，诸如硝酸甘油、硝普盐、脑钠肽(BNP)，或其类似物；强心剂，诸如多巴酚丁胺；血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂，诸如甲巯丙脯酸和依那普利；β受体阻滞剂，诸如卡维地洛和心得安；血管紧张素受体阻滞剂(ARB)，诸如缬沙坦和坎地沙坦；和/或醛固酮拮抗剂，诸如安体舒通。

在联合治疗中，晶体形式I或非晶体形式与一种或多种用于治疗心血管和/或心肾障碍的药物共同施用，以提高心血管和/或心肾障碍治疗的功效，并减少与这些疗法的高剂量相关的副作用。

上述的联合治疗具有协同和加成治疗效果。药物治疗方案的一种改进可以被描述为两种或多种药剂的相互作用，使得它们的联合作用降低联合治疗中使用的一种或两种药剂的不良事件(AE)的发生率。这种不良影响的发生率的降低可以是例如施用较低剂量的联合治疗中使用的一种或两种药剂的结果。例如，如果单独药物A的效果为25％，并且在标签剂量下具有45％的不良事件发生率；单独药物B的效果为25％，并且在标签剂量下具有30％的不良事件发生率，但是当两种药物以低于各自的标签剂量结合时，如果整体效果为35％(一种改进，但不是协同的或附加的)，并且不良发生率为20％，则存在药物治疗方案的改进。

在一些实施方式中，本文所述的化合物作为单个治疗施用。在一些实施方式中，本文所述的化合物作为联合治疗的一部分施用。例如，化合物可以与用于治疗/预防/抑制和/或减轻化合物对其有用的疾病或病情的其他药物或疗法联合使用。

这些的一种或多种其他药物可以以常用的途径和量施用，因此，可以与本文所述化合物同时或相继施用。当本文所述的化合物与一种或其他药物同时使用时，除了本文所述的化合物以外，还可以采用包含这些其他药物的药物单位剂型。相应地，药物组合物包括那些除了本文所述化合物以外还包含一种或多种其他活性成分的组合物。

对疾病或障碍施用治疗化合物是有效治疗方案的受试者或患者通常是人类，但也可以是任何动物，包括在临床试验或筛选实验或活性实验背景下的实验动物。因此，如本领域普通技术人员可以容易理解的，方法、化合物和组合物特别适于向任何动物，诸如哺乳动物，并且包括但绝不限于人类、家畜(诸如猫科或犬科受试者)、农畜(诸如但不限于牛科、马科、山羊科、绵羊科和猪科受试者)、野生动物(无论是野生的或是动物园中的)、研究动物(诸如老鼠、大鼠、兔子、山羊、绵羊、猪、狗、猫等)、禽鸟类(诸如鸡、火鸡、鸣禽等)施用，即用于兽医医疗用途。

下列实施例仅为说明性的，并且不应视为以任何方式限制实施方式的范围，因为在阅读本公开内容之后，这些实施方式涵盖的许多变型和同等物对于本领域技术人员将变得明显。

实施例

实施例1A

在0.5ml的水溶液(去离子水)中逐渐溶解100mg的SEQ.ID.NO.1。将混合物涡旋，直到样本完全溶解。允许混合物在环境条件下静置沉淀。在适合的形成时间后，仔细分离并干燥晶体形式I。然后使用X-射线粉末衍射测定法来表征形式I。图4示出了形式I的X-射线粉末衍射图。

实施例1B

在0.25ml的乙醇中逐渐溶解50mg的SEQ.ID.NO.1。将混合物涡旋，直到样本完全溶解。允许混合物在环境条件下静置沉淀。在约12小时至48小时的适合形成时间后，在连续氮气流下在蒸发器上将沉淀物仔细分离并干燥12小时至48小时。然后使用X-射线粉末衍射测定法来表征沉淀物。图11示出了来自乙醇的沉淀物的X-射线粉末衍射图。

实施例1C

在2ml的水中逐渐溶解500mg的SEQ.ID.NO.1，并将混合物加热至在10℃至60℃范围内的适当温度。向该混合物中添加丙酮。将混合物冷却至环境温度并搅拌约2-5小时。仔细过滤并分离悬浮液，并在真空下用丙酮漂洗并干燥。然后使用X-射线粉末衍射测定法来表征沉淀物。图12示出了来自水和丙酮的沉淀物的X-射线粉末衍射图。

实施例1D

在2ml的水中逐渐溶解500mg的SEQ.ID.NO.1，并将混合物加热至在10℃至60℃范围内的适当温度。向该混合物中添加5ml的异丙醇。将混合物冷却至环境温度并搅拌约2-5小时。仔细过滤并分离悬浮液，并在真空下用异丙醇漂洗并干燥。然后使用X-射线粉末衍射测定法来表征沉淀物。图13示出了来自水和异丙醇的沉淀物的X-射线粉末衍射图。

实施例1E

在1ml的水中在10℃至60℃范围内的适当温度下逐渐溶解500mg的SEQ.ID.NO.1。将混合物冷却至环境温度，并搅拌约2-5小时。仔细分离并干燥悬浮液。然后使用X-射线粉末衍射测定法来表征形式I。图14示出了SEQ.ID.NO.1的形式I的X-射线粉末衍射图。在图16中示出了对应的DSC温谱图。

实施例1F

在1.5ml的水中在10℃至60℃范围内的适当温度下逐渐溶解500mg的SEQ.ID.NO.1。将混合物冷却至环境温度，并搅拌约2-5小时，并添加丙酮。仔细过滤并分离悬浮液，并干燥。然后使用X-射线粉末衍射测定法来表征形式I。图15示出了形式I的X-射线粉末衍射图。在图16中示出了对应的DSC温谱图。

实施例1G

在2.5ml的水中在10℃至60℃范围内的适当温度下逐渐溶解500mg的SEQ.ID.NO.1。将混合物冷却至环境温度。仔细分离悬浮液，并在真空下干燥。然后使用X-射线粉末衍射测定法来表征形式I。图17示出了形式I的X-射线粉末衍射图。在图16中示出了对应的DSC温谱图。

实施例1H

在3.5ml的水中在10℃至60℃范围内的适当温度下逐渐溶解500mg的SEQ.ID.NO.1。将混合物冷却至环境温度。在室温下搅拌悬浮液，并通过过滤仔细分离，并在真空下干燥。然后使用X-射线粉末衍射测定法来表征形式I。图18示出了形式I的X-射线粉末衍射图。在图16中示出了对应的DSC温谱图。

使用高压高压液相色谱法(HPLC)和Waters Sunfire C18柱(5μm，4.6x 250mm，零件编号186002560)利用215nm的UV检测确定晶体形式I的化学特性。柱温设定为约30-65℃。以1.0mL/min的流速对每个样本使用包括去离子水中0.1％三氟乙酸(作为流动相A)和甲醇/DI水混合物(2:1v/v)中0.1％三氟醋酸(作为流动相B)的梯度法，其中流动时间为39min。在1.2mg/mL左右的相同浓度下在DI水中制备非晶体SEQ.ID.NO.1和晶体形式I的样本，并以20μL的体积注射。通过色谱数据系统软件(马萨诸塞州沃尔瑟姆Perkin Elmer,Inc.公司)获得数据并进行分析。如上文所述的SEQ.ID.NO.1在溶剂中的溶解度是预料之外的且令人惊讶的，并且允许成功沉淀并分离SEQ.ID.NO.1，这对于商业生产的大规模制造是必要的。

来自过饱和水溶液的形式I的XRD表征表明其为晶体材料。形式I的DSC温谱图也显示出与非晶体SEQ.ID.NO.1不同的吸热转换，其中最后一个吸热峰出现在255℃-259℃左右。HPLC色谱图证实了从过饱和水溶液中制备的晶体形式在化学上与SEQ.ID.NO.1非晶体形式是相同的。

这些结果表明来自水的形式I为SEQ.ID.NO.1的晶体形式。结果还表明来自乙醇、丙酮/水和异丙醇/水的沉淀物显示出与非晶体SEQ.ID.NO.1相同的XRD图(图11-13)，并且它们可以包括非晶体形式、大部分非晶体形式、非晶体和晶体形式的混合物、一种或多种晶体形式，或者非晶体和一种或多种晶体形式的混合物。

实施例2

XRPD分析

使用台式X-射线衍射计D8Advance(威斯康星州麦迪逊Bruker AXS Inc.公司)来确定实施例1的X-射线粉末衍射图。将从实施例1中获得的少量样本装载到Si-低背景样本架上，并暴露于CuKα辐射(40kV x 40mA)。用以25rpm的速度旋转的旋转机在锁定耦合模式下扫描样本。角度范围为2°至40°2θ，步长为0.0069，步数为5470步，时间/步为0.39秒。用市场上可买到的软件(威斯康星州麦迪逊Bruker AXS Inc.公司Eva，2.0版)进行数据收集和分析。

图4示出了晶体形式I的X-射线粉末衍射图。在表1中提供了峰位置。

表1

角度(2θ)	d值(埃)
		6.182	14.28439
8.242	10.71841
		8.633	10.2345
10.103	8.74851
		10.71	8.24109
11.451	7.72162
		12.364	7.15297
13.248	6.67774
		14.081	6.28461
15.452	5.72976
		16.103	5.49955
16.58	5.34234
		17.323	5.11512
17.825	4.97193
		18.516	4.78809
19.197	4.6198
		20.14	4.37666
20.902	4.24645
		21.517	4.12648
23.149	3.83918
		24.423	3.64173
26.247	3.39266
		1.812	3.20517
30.801	2.9006
		32.472	2.75505
33.577	2.66691
		38.428	2.34063

实施例3

差示扫描量热分析

使用差示扫描量热法来分析晶体形式I。使用具有冷冻冷却附件的差示扫描量热仪(特拉华州纽卡斯尔TA Instruments公司DSC Q2000)进行分析。对由实施例1获得的大约2至5mg的样本进行称重，并在干燥氮气吹扫(50mL/min的流速)下以10℃/min从25℃加热至300℃。使用Universal Analysis(特拉华州纽卡斯尔TA Instruments公司)1.1.3动态气相吸附(DVS)对数据进行分析。

使用DVS Intrinsic Vapor Sorption Analyzer(宾夕法尼亚州阿伦敦SurfaceMeasurement Systems Ltd公司)来获得非晶体SEQ.ID.NO.1的水分吸附-解吸曲线，并在图3中示出。将来自实施例1中的少量样本放置在DVS样本架上。在25℃下在0％至95％的RH范围中记录了两个循环的吸附/解吸曲线(第一个吸附循环在45％RH时开始)，其中每步中最大的平衡时间为120min(0％、5％、15％、25％、35％、45％、55％、65％、75％、85％、95％)。

实施例4

显微镜分析

使用了带有Plan Fluor 10x物镜的偏光显微镜(纽约州梅尔维尔MorrellInstrument Company公司Nikon Eclipse E600POL)。通过抹刀将微量的样本放置在载玻片上。然后将样本放置在显微镜的圆形旋转台上。首先在平面偏振光下观察样本，然后在正交偏振光下观察双折射现象。用5.0版Plus(马里兰州罗克维尔MediaCyberneics,Inc.公司)捕捉图像并分析颗粒大小。使用偏光显微术进一步检查来自水中的形式I。结果证实了样本是晶体材料，因为在将样本台从0°转至90°后在正交偏正光下在样本中观察到了双折射，如图9所示。还确定了颗粒大小，如图10和表2所示。

表2

物镜编号	面积	尺寸(长度)μm	尺寸(宽度)μm
				1	297	24.4	17.6
2	2383	95.4	47.2
				4	638	35.2	25.2
5	992	50.3	34.2
				6	2635	96.7	39.4
7	3467	93.5	61.9
				9	475	44.8	14.6
10	2123	87.7	40.8

来自过饱和水溶液的形式I的XRD表征表明其为晶体材料。形式I的DSC温谱图也显示出与非晶体SEQ.ID.NO.1不同的吸热转换，其中最后一个吸热峰出现在255℃-259℃左右。HPLC色谱图证实了由过饱和水溶液制备的晶体形式在化学上与SEQ.ID.NO.1非晶体形式是相同的。这些结果表明来自水中的形式I为SEQ.ID.NO.1的晶体形式。通过对比，来自乙醇的沉淀物显示出与非晶体SEQ.ID.NO.1相同的XRD图，表明沉淀物中可以存在至少部分非晶体材料。

实施例5

形式I具有令人惊讶和预料不到的性质

方法

外观：目视检查了晶体粉末的外观和流动性质，并使用Nikon D3100 Digital SLR(14.2MP，带有18-55mm f/3.5-5.6AF-S DX VR Nikkor变焦镜头)数码相机拍摄了摄影图像。

体积密度：通过按以mL为单位称得的量的体积将粉末的重量划分为克，粗略地确定了非晶体和晶体形式的体积密度。在校准的天平上精确地对粉末进行称重；通过将称得的量转移到刻度量筒中来测量体积。

热重分析(TGA)：使用了具有气冷的热重量分析仪(特拉华州纽卡斯尔TAInstruments公司TGA Q5000IR)。在铂金TGA秤盘上称出约2mg的样本，并在干燥氮气吹扫(25ml/min的流速)下以10℃/min加热。使用Universal Analysis对数据进行分析(特拉华州纽卡斯尔TA Instruments公司)。

动态气相吸附(DVS)：使用DVS Intrinsic Vapor Sorption Analyzer(宾夕法尼亚州阿伦敦Surface Measurement Systems Ltd公司)获得了形式I的水分吸附/解吸曲线。将少量的样本放置在DVS样本架上。在25℃下在0％至95％的RH范围中记录了2个循环的吸附/解吸曲线(第一个吸附循环在45％RH时开始)，其中每步中最大的平衡时间为120min(0％、5％、15％、25％、35％、45％、55％、65％、75％、85％、95％)。

稳定性研究：评价了非晶体和晶体(形式I)SEQ.ID.NO.1的温度和湿度影响，这是为了提供对晶体SEQ.ID.NO.1的固态稳定性的评估。在各种温度和相对湿度条件下，将约1.6mg的SEQ.ID.NO.1放在敞开的闪烁瓶中。在表3中提供了研究设计。

表3稳定性研究设计

储存温度	相对湿度	时间点
			25℃	60％	2、4、8和12周
40℃	11％、32％、75％、90％	2、4、8和12周
			50℃	75％	2、4、8和12周

粉末X-射线衍射测定法(PXRD)：将少量的样本装载到Si-低背景样本架上，并在X-射线衍射仪(威斯康星州麦迪逊Bruker AXS Inc.公司D8Advance)中暴露于CuKα辐射(40kVx 40mA)。用以25rpm的速度旋转的旋转机在锁定耦合模式下扫描样本。角度范围为2°至40°2θ，其中步长为0.0069，步数为5470步，并且时间/步为0.39秒。用市场上可买到的软件(威斯康星州麦迪逊Bruker AXS Inc.公司Eva，2.0版)进行数据收集和分析。

降解产物的确定：使用1.0版PRD-TM-ANL-01105方法中所述的程序通过UPLC利用205nm的UV检测来量化包括SEQ.ID.NO.1的组合物中的降解产物的量。

结果

外观：晶体形式SEQ.ID.NO.1(形式I)的颜色仍然与非晶体形式相同。另外，发现晶体形式相比于非晶体形式具有更好的流动性质。

体积密度：非晶体和晶体SEQ.ID.NO.1的体积密度分别被确定为0.07g/ml和0.4g/ml。因此，晶体SEQ.ID.NO.1的体积密度显著提高，并大约比非晶体材料高6倍。晶体形式的体积密度的这种显著提高是无法预测的。

TGA：图19中示出的晶体SEQ.ID.NO.1的TGA重量损失曲线呈现出两个重量损失步骤。7.1％w/w的第一个重量损失事件出现在25℃至100℃之间；7.4％w/w的第二个重量损失事件出现在100℃至225℃之间。这两个重量损失事件与DSC温谱图中观察到的广泛吸热匹配，并与材料中水的损失和存在的残留乙酸相关联。在图19中示出了数据。

动态气相吸附(DVS)：DVS数据(图20)表明晶体SEQ.ID.NO.1不如非晶体SEQ.ID.NO.1那样吸湿。晶体形式仅大致在60％RH时吸收7.6％(按重量计)，并且在95％RH时吸收11％(按重量计)。然而，非晶体形式在60％RH时吸收大于10％(按重量计)，在95％RH时吸收大于30％(按重量计)。在完成DVS分析后，通过X-射线粉末衍射测定法来表征样本。图21示出了晶体形式在暴露于两个吸附/解吸循环后保持不变。

稳定性研究：在图22和图23中分别示出了在不同条件下在3个月的储存后非晶体和晶体SEQ.ID.NO.1的PXRD图。两种材料的固态形式在所有时间点和各种温度/湿度条件下保持稳定。在表4中提供了非晶体和晶体SEQ.ID.NO.1的总降解的结果。在高温度和湿度条件下，非晶体SEQ.ID.NO.1的总降解随着时间显著提高。在40℃/75％RH、40℃/90％RH和50℃/75％RH的提高条件下，检测到了高水平的水解降解产物，这是非晶体SEQ.ID.NO.1的总降解产物的主要贡献者。相比于非晶体形式，晶体SEQ.ID.NO.1的降解产物没有显著增加。在25℃/60％RH、40℃/11％RH和40℃/32％RH时，晶体SEQ.ID.NO.1的总降解仅增加约0.4％。在40℃/75％RH、40℃/90％RH和50℃/75％RH的提高条件下，水解降解产物还是总降解产物的主要贡献者，然而，在晶体SEQ.ID.NO.1中观察到的水平显著低于在非晶体SEQ.ID.NO.1中确定的水平。相应地，晶体SEQ.ID.NO.1预料不到地在化学上比非晶体SEQ.ID.NO.1显著更稳定。

表4：不同稳定条件下非晶体和晶体SEQ.ID.NO.1的总降解结果

如实施例中所示，并且如本申请中所讨论的，相比于非晶体形式，晶体形式I具有令人惊讶且预料不到的物理性质。例如，数据证明了相比于非晶体形式，晶体形式I具有增强的体积密度性质，这使得产品在制造中能更好地处理、更容易储存(不会占据太多空间)，并且更好地流动。相比于非晶体形式，晶体形式还具有更好的化学稳定性，并且其更不吸湿。因此，由于这两个改进的稳定性因素，预料不到且令人惊讶地，形式I是更稳定的，并且预料不到地，其可以在受控的冷冻温度(4℃)或室温下(20-25℃)下储存，相较于在-20℃下储存的非晶体形式，这是明显且预料不到的优势。在某种程度上，在较高温度下储存形式I的能力是预料不到的，因为肽的晶体形式在较高温度下(>-20℃)具有这种稳定性的提高是不寻常的，尤其是考虑到SEQ.ID.NO.1的非晶体形式的吸湿性质。预期SEQ.ID.NO.1的晶体形式I还具有与其他活性或无活性成分的协同作用，造成包括本文所述化合物的一种或多种晶体形式的药物组合物的增强的性能特征或性质。

同等物

虽然通过引用示例性实施方式已对实施方式进行了描绘和描述，但是这种引用并不暗示限制范围，并且不会推断出这种限制。具有本公开内容的权益的相关领域的普通技术人员容易想到实施方式在形式和功能上能够有相当多的修改、改变和同等物。

所描绘和描述的实施方式仅为示例性的，并且未穷举范围。

本文引用的所有参考文献的全部内容通过引用合并到本文中。

Claims (42)

1.一种SEQ.ID.NO.1的晶体形式。

2.一种SEQ.ID.NO.1的晶体形式I。

3.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约18.5±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

4.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约10.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

5.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约8.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

6.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

7.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

8.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约18.5以及约10.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

9.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约10.1以及约8.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

10.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约8.2以及约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

11.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约20.2以及约10.1±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

12.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约20.2以及约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

13.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约20.2、约10.1以及约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

14.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约8.2、约18.5以及约20.2±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

15.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括一个或多个在约18.5、约10.1、约8.2、约20.2以及约24.4±0.5度2θ的峰的X-射线粉末衍射图。

16.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括如图4中所示的一个或多个峰的X-射线粉末衍射图。

17.根据权利要求2所述的晶体形式I，其特征在于，包括在约10.7、约8.7、约4.7、约4.1以及约3.6±0.5度埃的一个或多个d-间隔值的X-射线粉末衍射图。

18.一种包括根据权利要求1所述的晶体形式的药物组合物。

19.一种包括根据权利要求2所述的晶体形式I的药物组合物。

20.根据权利要求19所述的药物组合物，其中，形式I为SEQ.ID.NO.1的肽或肽模拟物。

21.根据权利要求20所述的药物组合物，其中，所述肽或肽模拟物为环状的。

22.根据权利要求20所述的药物组合物，其中，所述肽或肽模拟物为二聚的。

23.根据权利要求20所述的药物组合物，其中，所述肽或肽模拟物为三聚的。

24.根据权利要求19所述的药物组合物，还包括用于治疗心血管或心肾障碍的额外药物。

25.一种用于制备SEQ.ID.NO.1的晶体形式的方法，包括使SEQ.ID.NO.1晶体化以形成SEQ.ID.NO.1的形式I，以及可选地分离SEQ.ID.NO.1的所述形式I。

26.根据权利要求25所述的方法，其中，所述晶体化包括在水溶液中溶解SEQ.ID.NO.1，并且由此使SEQ.ID.NO.1晶体化以形成形式I。

27.根据权利要求26所述的方法，其中，所述水溶液为去离子水。

28.根据权利要求25所述的方法，其中，所述水溶液包括去离子水。

29.一种用于制备SEQ.ID.NO.1的方法，包括使SEQ.ID.NO.1沉淀，以及可选地分离SEQ.ID.NO.1。

30.根据权利要求29所述的方法，其中，所述方法包括在水溶液中溶解SEQ.ID.NO.1，并由此使SEQ.ID.NO.1沉淀。

31.根据权利要求30所述的方法，其中，所述方法还包括将所述水溶液加热，并且将所述水溶液冷却至环境温度。

32.根据权利要求30或31所述的方法，其中，所述方法包括进一步使所述水溶液冷却至约0至约5℃的温度。

33.根据权利要求25-32中任一项所述的方法，还包括将SEQ.ID.NO.1的所述晶体形式冻干。

34.根据权利要求33所述的方法，还包括使经冻干的晶体形式再结晶。

35.一种包括通过使SEQ.ID.NO.1沉淀而制备的SEQ.ID.NO.1的药物组合物。

36.根据权利要求35所述的药物组合物，其中，SEQ.ID.NO.1从水溶液中沉淀。

37.一种治疗心血管或心肾障碍的方法，包括给予需要其的患者SEQ.ID.NO.1的晶体形式。

38.根据权利要求37所述的方法，其中，所述心血管或所述心肾障碍为心力衰竭。

39.根据权利要求37所述的方法，其中，所述患者已被诊断患有心力衰竭。

40.一种治疗心血管或心肾障碍的方法，包括给予需要其的患者SEQ.ID.NO.1的晶体形式I。

41.根据权利要求40所述的方法，其中，所述心血管或所述心肾障碍为心力衰竭。

42.根据权利要求40所述的方法，其中，所述患者已被诊断患有心力衰竭。