CN106136246A - 一种具有延缓衰老及生发功能的组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于保健食品领域，涉及一种具有延缓衰老及生发功能的组合物及其应用。本发明所述组合物包括黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹等，可以通过多种途径、多层次解决面色不华、气力不足、头发稀疏、没有光泽等问题，起到延缓衰老、养发育发的作用。在此基础上，增加海参多肽粉，能够进一步显著增强两者的抗氧化活性，延缓衰老，促进毛囊进入生长期，增加毛囊个数，从而达到促进毛发生长的效果。本发明所述组合物可以用于延缓衰老、生发的保健食品，应用范围广泛，具有良好的经济和社会效应。

Description

一种具有延缓衰老及生发功能的组合物及其应用

技术领域

本发明属于保健食品领域，特别涉及一种具有延缓衰老及生发功能的组合物及其应用。

背景技术

正常成人随年龄增加，自身机能减退，在整体、组织、细胞，乃至分子水平皆有所体现，有些人会出现面色不华、气力不足、头发稀疏、没有光泽等现象，这提示我们已经开始衰老。

古今中外，针对衰老问题，人们一直在寻找各种延年益寿的方法和抗衰老药物(抗氧化剂)，以期能在遗传学上所界定的寿限内延迟衰老或提高生命质量。针对衰老的一些外在表现，西医多采用补充相应的补充剂，或药物治疗。如面色不华，多服用补铁类产品；气力不足，多服用营养补充剂、蛋白质粉等；头发稀疏、没有光泽，主要是针对脂溢性脱发和斑秃，以激素类药物治疗为主。

中医基础理论对衰老机制的认识以脏腑为核心，包括肾虚衰老、肝郁衰老、脾胃虚弱衰老、气滞血瘀痰浊衰老等学说，并认为衰老多由肾精气血亏虚、阴阳衰惫、心阳虚衰、脾胃虚弱等所致。

市面上针对面色不华、气力不足、头发稀疏、没有光泽等问题，药品居多，或者是一些补铁、营养补充剂、蛋白质粉等保健食品。如治疗脱发常用的非那雄胺片、米诺地尔等，但多数与雄性激素有关，长期口服会引起多种不良反应和副作用，对身体造成伤害，且价格昂贵。而气血和胶囊，主要是疏肝理气、活血止痛，专治女性气血不和。至今未见有综合改善上述问题的，可长期服用的保健食品。

发明内容

本发明的目的在于针对上述现有技术的不足，在中医传统理论的基础上，结合现代中西医技术，提供一种组合物，具体的说是提供一种具有延缓衰老及生发功能的组合物及其应用。本发明组合物制成的保健食品，可解决面色不华、气力不足、头发稀疏、没有光泽等问题，起到延缓衰老的作用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种组合物，包括黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹。

在本发明的一些具体实施方案中，组合物以质量份计，包括如下组分：

中医有：“人之所有者，血与气耳”一说。《圣济总录》所言：“血气者，人之神。又心者，生之本，神之变，其华在面，其充在血脉，服药以驻颜色，当以益血气为先。”又有“发为血之余”一说。隋代《诸病源侯论》认为：“若血盛则荣于须发，故须发美，若血气衰弱，经脉虚竭，不能荣润，故须发脱落”。本发明所述组合物融入黄芪、当归、何首乌、墨旱莲、桑椹多味天然药材，气血双补，滋养肝肾，可改善面色不华、气力不足、头发稀疏、没有光泽等问题，进而起到延缓衰老的作用。

本发明所述组合物以黄芪、当归为君，制何首乌为臣，墨旱莲为佐，桑椹子为使。黄芪具有补气固表之功效。“肺主皮毛”，黄芪通过补益肺气固摄毛孔促进巩固毛发的生长。当归养血合营，其甘温质润，长于补血，为补血之圣药，与黄芪配伍气血双补，以达生发固发之功效。黄芪、当归二药又组成当归补血汤，其为气血双补之剂，“有形之血不能速生，无形之气应当急固”，有形之血生于无形之气，故用黄芪来补气生血。制何首乌，补益精血，《本草纲目》载：“养血益肝，固精益肾，健筋骨，乌髭发，为滋补良药”，自古就是养发护发之良品。墨旱莲，甘酸性寒，归肝肾二经，具有补肝益肾、乌须黑发之功效，《唐本草》言：“汁涂发眉，生速而繁”。桑椹，滋阴补血，生津润燥，《滇南本草》载：“桑椹，益肾脏而固精，久服黑发明目”。诸药配伍，气血双补，肝肾同调，共奏养发乌发之功效。

现代药理研究成分分析表明，黄芪多糖可通过增强机体免疫功能、提高机体抗氧化能力和直接清除自由基等发挥其延缓衰老的作用。当归多糖可清除自由基，抑制细胞凋亡，增强免疫力从而达到抗衰老的目的。桑椹亦可清除自由基，增强免疫力。毛囊是控制毛发生长的皮肤附属器官，现代药理研究证明当归、何首乌等药材均能直接作用于毛囊，促进头发的生长，改善头发状态。

在一些实施方案中，本发明所述组合物以质量份计，包括如下组分：

在一些实施方案中，本发明所述组合物以质量份计，包括如下组分：

在另一些实施方案中，本发明所述组合物以质量份计，包括如下组分：

本发明中所述组合物中的黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹是本领域技术人员公知的，可以通过商业途径从医药商店购买得到或通过现有技术中公开的方法栽培、采收制备得到，其规格符合国家或行业标准即可。

在本发明的另一些实施方案中，组合物还包括海参多肽。

海参是属棘皮动物门海参纲的海洋棘皮动物，其营养与药用价值极高，与人参、燕窝、鱼翅齐名，是世界八大珍品之一，从中医角度来看，其味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗萎，其性温补。海参多肽指以鲜活海参为原料，经蛋白酶水解，分离纯化后得到的以小分子肽为主、多种功效成分共存的蛋白质水解产物，具有抗血管生成、抗肿瘤、抗凝血、降血压、抗炎、抗菌、抗氧化、抗血栓形成、抗癌等作用。头发早白稀疏，也是衰老表现，海参多肽粉具有显著抗氧化和延衰作用，与中医组方结合，内延衰，外养发。

本发明中所述组合物种的海参多肽粉是市售商品，通过采用生物酶解技术得到的可溶于水的活性成分，经低温干燥、超微粉碎等工艺制得。产品质量符合行业标准，且肽含量(以干基计)≥50％。

在本发明的一些实施方案中，组合物以质量份计，还包括海参多肽0.1-2份。

优选的，所述组合物以质量份计，还包括海参多肽0.2-1份。

更优选的，所述组合物以质量份计，还包括海参多肽0.25-0.5份。

本发明还提供了所述组合物的制备方法。

在一些实施方案中，所述组合物的制备方法为取黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹加水提取。

在另一些实施方案中，所述组合物的制备方法为取黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹加水提取，干燥后与海参多肽粉混匀。

优选的，所述提取方法为：将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹投入加水提取两次，合并两次的提取液。

其中，优选第一次加10-15倍量水，提取1-2h，过滤除渣；第二次再加5-10倍量水，提取1-2h，过滤除渣。

本发明的组合物以黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹五种中草药配合共用，可显著清除体外羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子等活性氧自由基，增强小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化歧化酶(SOD)的活力，降低小鼠血清丙二醛(MDA)的含量，具有清除脂质过氧化物、增强抗氧化酶活性的作用，从而增强机体的抗氧化能力；同时也可以增加C3H/He小鼠不同时间点毛发生长长度、缩短小鼠背部皮肤变黑时间、促进毛囊进入生长期、延缓毛囊进入退行期，从而达到延缓衰老、促进生发的功能。在此基础上，增加海参多肽粉，能够进一步显著增强两者的抗氧化活性，延缓衰老，起到促进毛发生长的作用。因此本发明还提供了所述组合物在制备延缓衰老功能的食品、保健食品中的应用。

本发明还提供了上述组合物在制备生发功能的食品、保健食品中的应用。

本发明所述组合物可按本领域常规制剂方法制备成保健食品的各种常规制剂，例如，可以向本发明有效量的组合物中加入食品学上可接受的添加剂，例如崩解剂、润滑剂、黏合剂、分散剂等，以常规制剂方法，制备成各种常用制剂。本发明优选制成片剂、粉剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。

对于本领域技术人员来说，在知晓活性成分的情况下，可根据常规的制剂方法，轻易的制成各种制剂产品，同时在制备中所采用的辅料也为本领域所公知。

由以上技术方案可知，本发明所述组合物包括黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹，通过多种途径、多层次解决面色不华、气力不足、头发稀疏、没有光泽等问题，起到延缓衰老、生发的作用。在此基础上，增加海参多肽粉，能够进一步显著增强两者的抗氧化活性，延缓衰老，促进毛囊进入生长期，增加毛囊个数，从而达到促进毛发生长的效果。本发明所述组合物可以用于延缓衰老、生发的保健食品，应用范围广泛，具有良好的经济和社会效应。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1示试验例1不同样品浓度羟自由基清除率(％)；

图2示试验例1不同样品浓度DPPH自由基清除率(％)；

图3示试验例1不同样品浓度超氧阴离子清除率(％)。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

为了更好的理解本发明，下面结合实施例，进一步阐述本发明。如无特殊说明，本发明提供的组合物中的各组分及其应用中所用其他原料及试剂均可由市场购得。

实施例1：

该组合物由如下组分制成：

黄芪30g，当归20g，制何首乌20g，墨旱莲30g，桑椹20g。

将上述原料按下列步骤制备成片剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；加入适当的辅料进行混合，过筛，加粘合剂制软材，制颗粒，干燥，整粒，添加适量的润滑剂或崩解剂压片，包衣，包装，制成片剂。

实施例2：

该组合物由如下组分制成：

黄芪25g，当归15g，制何首乌10g，墨旱莲10g，桑椹10g，海参多肽粉1g。

将上述原料按下列步骤制备成片剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；加入海参多肽粉、适当的辅料进行混合，过筛，加粘合剂制软材，制颗粒，干燥，整粒，添加适量的润滑剂或崩解剂压片，包衣，包装，制成片剂。

实施例3：

该组合物由如下组分制成：

黄芪6g，当归3g，制何首乌5g，墨旱莲5g，桑椹5g，海参多肽粉0.2g。

将上述原料按下列步骤制备成片剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；加入海参多肽粉、适当的辅料进行混合，过筛，加粘合剂制软材，制颗粒，干燥，整粒，添加适量的润滑剂或崩解剂压片，包衣，包装，制成片剂。

实施例4：

该组合物由如下组分制成：

黄芪15g，当归10g，制何首乌10g，墨旱莲15g，桑椹15g。

将上述原料按下列步骤制备成粉剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉分剂量，包装，制成粉剂。

实施例5：

该组合物由如下组分制成：

黄芪15g，当归10g，制何首乌10g，墨旱莲15g，桑椹15g，海参多肽粉0.5g。

将上述原料按下列步骤制备成粉剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；与海参多肽粉充分混合，分剂量，包装，制成粉剂。

实施例6：

该组合物由如下组分制成：

黄芪2g，当归1g，制何首乌1g，墨旱莲2g，桑椹1g。

将上述原料按下列步骤制备成粉剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉分剂量，包装，制成粉剂。

实施例7：

该组合物由如下组分制成：

黄芪3g，当归2g，制何首乌3g，墨旱莲3g，桑椹2g。

将上述原料按下列步骤制备成丸剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉，加入适当粘合剂，制成一定粘度的软材，制成素丸，包衣，制成丸剂。

实施例8：

该组合物由如下组分制成：

黄芪20g，当归10g，制何首乌5g，墨旱莲15g，桑椹5g，海参多肽粉2g。

将上述原料按下列步骤制备成丸剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；与海参多肽粉充分混合，加入适当粘合剂，制成一定粘度的软材，制成素丸，包衣，制成丸剂。

实施例9：

该组合物由如下组分制成：

黄芪30g，当归20g，制何首乌20g，墨旱莲30g，桑椹20g，海参多肽粉0.1g。

将上述原料按下列步骤制备成丸剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；与海参多肽粉充分混合加入适当粘合剂，制成一定粘度的软材，制成素丸，包衣，制成丸剂。

实施例10：

该组合物由如下组分制成：

黄芪15g，当归10g，制何首乌10g，墨旱莲15g，桑椹5g，海参多肽粉0.5g。

将上述原料按下列步骤制备成胶囊剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；与海参多肽粉进行混合，制成混合粉，填充，封口，制成胶囊剂。

实施例11：

该组合物由如下组分制成：

黄芪10g，当归5g，制何首乌5g，墨旱莲5g，桑椹5g。

将上述原料按下列步骤制备成胶囊剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉，填充，封口，制成胶囊剂。

实施例12：

该组合物由如下组分制成：

黄芪25g，当归20g，制何首乌20g，墨旱莲25g，桑椹18g。

将上述原料按下列步骤制备成颗粒剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；加适量的粘合剂与辅料制颗粒，干燥，整粒，包装，制成颗粒剂。

实施例13：

该组合物由如下组分制成：

黄芪20g，当归15g，制何首乌10g，墨旱莲15g，桑椹15g，海参多肽粉1g。

将上述原料按下列步骤制备成颗粒剂：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取浓缩后，加入适量的纯化水及药用糊精，喷雾干燥，得喷干粉；加海参多肽粉、适量的粘合剂与辅料制颗粒，干燥，整粒，包装，制成颗粒剂。

实施例14：

该组合物由如下组分制成：

黄芪30g，当归20g，制何首乌20g，墨旱莲30g，桑椹18g，海参多肽粉0.25g。

将上述原料按下列步骤制备成口服液：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取，浓缩后，定容，加入海参多肽粉溶解，离心，灌装，灭菌，制成口服液。

实施例15：

该组合物由如下组分制成：

黄芪10g，当归5g，制何首乌10g，墨旱莲15g，桑椹20g，海参多肽粉1g。

将上述原料按下列步骤制备成口服液：

将黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹经水煮提取，浓缩后，定容，加入海参多肽粉溶解，离心，灌装，灭菌，制成口服液。

试验例1：体外抗氧化试验

1、实验样品

实验组1：由本发明组合物实施例4提供；将样品加水溶解配制成4个受试浓度，分别为：0.25mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL。

实验组2：海参多肽粉(购自山东永康食品有限公司，批号HS201504003)直接加蒸馏水溶解配制成4个受试浓度，分别为：0.25mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL。

实验组3：由本发明组合物实施例5提供；将样品加水溶解配制成4个受试浓度，分别为：0.25mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL。

空白对照组：蒸馏水。

2、实验方法与检测指标

2.1、清除羟自由基能力测定

配制0.75mmol/L邻菲啰啉无水乙醇溶液，取0.5mL于试管中，依次加入0.15mol/L的磷酸盐缓冲溶液(PBS，pH7.4)1mL和蒸馏水0.5mL并使之充分混匀，再加入0.75mmol/L硫酸亚铁溶液0.5mL，混匀，加入0.5mL0.01％双氧水，37℃水浴60min后，在536nm处测定吸光值，即为An。未损伤管加入0.5mL蒸馏水，代替损伤管中0.5mL0.01％双氧水，其他操作方法相同，测得Ab。未损伤管加入0.5mL样品溶液，代替损伤管中0.5mL蒸馏水，其他操作方法相同，测得As。计算样品的的清除率，公式如下：

清除率：I(％)＝(As-An)/(Ab-An)*100％

2.2、清除DPPH自由基能力测定

实验组1、2、3三个组别，分别加入DPPH溶液，空白对照组以加入等体积蒸馏水，室温下置于黑暗处反应30min后，于520nm波长下测定吸光度，计算DPPH自由基清除率。其中，DPPH自由基清除率计算公式如下：

DPPH清除率(％)＝[1-(Asample-A0sample)/(Acontrol-A0control)]×100％

式中，Asample、A0sample表示样品溶液和对照组的吸光值，Acontrol、A0control表示样品溶液和对照组的空白对照吸光度。

2.3、清除超氧阴离子活性能力测定

配制3mmol/L邻苯三酚(没食子酸)溶液和0.1mol/L Tris-HCl(其中含有2mmol/LEDTA)缓冲液。取0.1mol/L，pH8.2Tris-HCl缓冲液2.8mL(其中含有2mmol/L EDTA)，用移液枪加入0.1mL样品溶液，充分混合，25℃水浴10min，加入0.1mL 3mmol/L的邻苯三酚溶液(25℃)，充分混匀后快速转入石英比色皿中，320nm下每隔半分钟测定一次OD值，维持反应3min。0.1mol/L pH8.2的Tris-HCl缓冲液作为空白，对照组中加入与样品等体积的蒸馏水，模拟吸光度随时间变化的回归方程，斜率即为邻苯三酚的自氧化速率V，计算样品对的清除率，公式为：

清除率：I(％)＝(V对-V样)/V对*100％

式中：V对＝对照组邻苯三酚自氧化速率(ΔOD/Δmin)

V样＝样品组邻苯三酚自氧化速率(ΔOD/Δmin)

3、实验结果

3.1、清除羟自由基能力测定

结果如图1所示，实验组1、2、3均能够有效清除体外羟自由基，而且随着浓度的增加，清除能力增强。且实验组3比实验组1、2清除羟自由基的效果更好。

3.2、清除DPPH自由基能力测定

结果如图2所示，实验组1、2、3均能够有效清除DPPH自由基，而且随着浓度的增加，清除能力增强。且实验组3比实验组1、2清除DPPH自由基的效果更好。

3.3、清除超氧阴离子活性能力测定

结果如图3所示，实验组1、2、3均能够有效清除体外超氧阴离子，而且随着浓度的增加，清除能力增强。且实验组3比实验组1、2清除超氧阴离子的效果更好。

综上所述：本发明提供的组合物、海参多肽均可清除体外羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子，具有抗氧化功能；两者组合使用，抗氧化能力更强。

试验例2：动物试验

1、实验动物与剂量

1.1、组别

空白对照组：蒸馏水。

模型组：蒸馏水。

实验组1：本发明组合物实施例4。

实验组2：海参多肽粉直接加蒸馏水溶解配制(购自山东永康食品有限公司，批号HS201504003)。

实验组3：本发明组合物实施例5。

1.2、剂量

SPF级小鼠，根据临床拟用日用量，按照《保健食品检验与评价技术规范》等技术要求，通过体表面积折算得。对小鼠喂食均设低、高剂量约分别相当于成人临床拟日用量的5、20倍。

2、实验方法

2.1、原理

D-半乳糖供给过量，超常产生活性氧，打破了受控于遗传模式的活性氧产生与消除的平衡状态，引起过氧化效应。

2.2、实验方法与检测指标

选25～30g健康成年小鼠，除空白对照组外，其余动物用D-半乳糖40mg～1.2g/kgBW颈背部皮下注射或腹腔注射造模，注射量为0.1mL/10g，每日1次，连续造模6周。将动物随机分为空白对照组、模型组、实验组1低、高，实验组2低、高，实验组3低、高剂量组，每组10只。分别灌胃给予相应样品，六个剂量组经口给予不同浓度受试样品，空白对照组和模型对照组给予同体积蒸馏水，连续喂食42d。在给受试样品的同时，模型对照组和各剂量组继续给予相同剂量D-半乳糖颈背部皮下或腹腔注射。

实验结束后颈椎脱臼处死小鼠，采集血清，测定谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)生成量3个抗氧化指标，测定方法按试剂盒说明操作。

3、实验结果

表1 对小鼠血清中GSH-Px活性的影响

组别	GSH-Px活力(U/mL)
		空白对照组	1723.12±79.25***
模型组	1178.31±52.40
		实验组1低剂量	1688.76±45.45***
实验组1高剂量	1695.19±66.51***
		实验组2低剂量	1795.20±73.65***
实验组2高剂量	1855.01±69.25***
		实验组3低剂量	1868.75±52.39***
实验组3高剂量	1954.00±45.67***

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

由表1可知，各实验组与模型组相比，小鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著增高，且呈剂量依赖性；且实验组3增强GSH-Px活性的能力要高于同剂量实验组1和2。

表2对小鼠血清中SOD活性的影响

组别	SOD活力(U/mL)
		空白对照组	501.93±44.30***
模型组	161.19±9.63
		实验组1低剂量	350.00±36.15***
实验组1高剂量	489.04±56.07***
		实验组2低剂量	510.89±35.01***
实验组2高剂量	564.21±42.47***
		实验组3低剂量	539.29±30.14***
实验组3高剂量	715.66±42.91***

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

由表2可知，各实验组与模型组相比，小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增高，且呈剂量依赖性；且实验组3增强SOD活性的能力要高于同剂量实验组1和2。

表3 对小鼠血清中MDA含量的影响

组别	MDA含量(nmol/mL)
		空白对照组	21.35±3.88***
模型组	33.45±4.94
		实验组1低剂量	25.90±4.35***
实验组1高剂量	24.74±6.16***
		实验组2低剂量	23.19±4.80***
实验组2高剂量	21.41±5.08***
		实验组3低剂量	21.64±3.03***
实验组3高剂量	19.16±3.78***

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

由表3可知，各实验组与模型组相比，小鼠血清丙二醛(MDA)含量显著降低，且呈剂量依赖性；且实验组3清除血清MDA的能力要高于同剂量实验组1和2。

综上所述，本发明提供的组合物均可增强小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化歧化酶(SOD)的活力，降低小鼠血清中丙二醛(MDA)的含量，因此，具有清除脂质过氧化物、增强抗氧化酶活性的能力；且两者结合使用，能起到协同增效的作用。

试验例3：生发功能试验

1、实验动物与剂量

1.1、组别

空白对照组：蒸馏水。

实验组1：本发明组合物实施例4。

实验组2：海参多肽粉直接加蒸馏水溶解配制(购自山东永康食品有限公司，批号HS201504003)。

实验组3：本发明组合物实施例5。

1.2、剂量

对小鼠喂食均设低、高剂量约分别相当于成人临床拟日用量的5、20倍。

2、实验方法与检测指标

将脱毛膏涂于SPF级C3H/He小鼠背部，涂抹面积约3cm*4cm，冷却凝固后揭去，以去除背毛。确认休止期(当小鼠背部皮肤呈粉红色时)开始灌胃喂食。受试组每只小鼠从休止期起每天给予灌胃喂食，对照组则给予等量蒸馏水。连续喂食至小鼠背部去毛区的毛全部长出(喂食时间根据长毛情况而定，约4W)。测量并记录喂食不同时间段(14、21、28d)的毛发长度(mm)。每天观察小鼠皮肤及毛色变化，记录每只动物背部去毛区皮肤颜色从喂食到开始变黑的时间(对照组记录动物皮肤从变为粉红色到开始变黑的时间)，去毛区开始变黑到长满毛的时间，并定期拍照。

背部毛发生长状况评分标准：

1分---黑发占背部面积为0-20％；

2分---黑发占背部面积为20-40％；

3分---黑发占背部面积为40-60％；

4分---黑发占背部面积为60-80％；

5分---黑发占背部面积为80-100％。

喂食2～4W(根据生发情况定)，实验结束时取各组小鼠背部皮肤作组织病理切片，并与对照组作比较。光镜下观察小鼠皮肤毛囊组织学变化，参照国外文献Muller-Rover的毛囊形态学分期依据对毛囊进行分期。每只小鼠随机选择60个毛囊计算平均毛发周期评分：生长期VI为100分；退行早期为200分；退行中期为300分；退行晚期为400分。光镜下计算毛囊个数/100*视野、计算毛细血管个数以及管径大小、棘层细胞层数等指标。

3、实验结果

3.1对C3H/He小鼠背部毛发生长长度的影响

C3H/He小鼠脱毛后，每天观察背部毛发生长状况，发现小鼠在14-21d内毛发生长较为迅速。根据数据类型采用重复多因素方差分析，结果见表4。

表4 不同时间段的毛发长度(mm)

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

由表4可知：与空白对照组相比，实验组1、实验组2高剂量以及实验组3的样品均可显著增加C3H/He小鼠不同时间点毛发生长长度，其中以实验3组在第28d时效果最为显著。

3.2对C3H/He小鼠背部皮肤变黑时间的影响及对毛发评分的的影响

自脱毛后记录小鼠背部皮肤由粉红色(休止期)变黑(生长期)的时间，并自小鼠背部皮肤变黑后每天观察小鼠背部毛发生长状况。取14、21、28d三个时间点对背部毛发生长状况进行评分，结果见表5。

表5 对变黑时间及毛发评分的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

由表5可知：三个实验组的样品均可显著缩短小鼠背部皮肤变黑时间，其中以实验3高剂量组最为明显。

3.3对C3H/He小鼠毛囊形态学评分及毛囊个数的影响

实验结束时取各组小鼠背部皮肤置10％福尔马林溶液固定，做组织病理切片。光镜下观察小鼠皮肤毛囊组织学变化，参照国外文献Muller-Rover的毛囊形态学分期依据对毛囊进行分期。每只小鼠随机选择60个毛囊计算平均毛发周期评分，同时在光镜下计算毛囊个数/100*视野，结果见表6。

表6 对毛囊形态学评分及毛囊个数的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

由表6可知，与空白对照组相比，三个实验组的样品溶液均能显著增加小鼠毛囊个数，其中以实验组3高剂量最为显著。从表中可以看出，3组受试物均可以促进毛囊进入生长期，延缓毛囊进入退行期，从而发挥生发作用。

综上所述，本发明提供的组合物均可加快毛发生长速度、缩短除毛小鼠背部变黑时间，增加皮肤毛囊个数，从而促进毛发生长。且两者结合使用，能起到协同增效的作用。

取实施例1至实施例3、实施例6至实施例15制备的组合物进行上述实验，实验结果与实施例4和实施例5制备的组合物效果相同或相近，无显著差异(P＞0.05)。表明本发明实施例1至实施例15制备的组合物均具有抗氧化和生发的功效。

Claims (10)

1.一种组合物，包括黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹。

2.根据权利要求1所述组合物，以质量份计，包括如下组分：

3.根据权利要求1或2所述组合物，以质量份计，还包括海参多肽0.1-2份。

4.根据权利要求1-3任一项所述组合物，以质量份计，还包括海参多肽0.2-1份。

5.一种权利要求1或2所述组合物的制备方法，取黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹加水提取。

6.一种权利要求3或4所述组合物的制备方法，取黄芪、当归、制何首乌、墨旱莲、桑椹加水提取，干燥后与海参多肽粉混匀。

7.权利要求1-4任意一项所述组合物在制备具有延缓衰老功能的保健食品中的应用。

8.权利要求1-4任意一项所述组合物在制备具有生发功能保健食品中的应用。

9.一种保健食品，其特征在于，包括有效量的权利要求1-4任意一项所述组合物和食品学上可接受的添加剂。

10.根据权利要求9所述保健食品，其特征在于，其为片剂、粉剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。