CN106093413A - 一种抗英夫利西抗体elisa检测试剂盒和检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗英夫利西抗体ELISA检测试剂盒和检测方法。包括英夫利西抗体包被的ELISA板、HRP标记的抗λ链的IgG抗体、HRP标记的抗F(ab’)2段的IgG抗体、四甲基联苯胺(TMB)、H2SO4和辅助试剂组成；所述的英夫利西抗体包被的ELISA板是通过以下方法制备的：用TNF‑α包被ELISA板，然后加入英夫利西单克隆抗体，使英夫利西单克隆抗体与TNF‑α结合固定于ELISA板上作为固定抗原，由此得到英夫利西抗体包被的ELISA板。本发明操作简便，普通实验室均可开展，测量结果灵敏性高，特异性强，能够广泛应用临床。
Description
技术领域：
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种抗英夫利西抗体ELISA检测试剂盒和检测方法。
背景技术：
英夫利西单克隆抗体(infliximab,IFX)是由75％人源性IgG1κ轻链的恒定区和25％鼠源性的多变区组成的嵌合型单克隆抗体，能够特异性结合游离和膜连的肿瘤坏死因子α(TNF-α)，进而阻断TNF-α激活的NF-κB促炎通路，促发过度活化的淋巴细胞凋亡，最终抑制免疫紊乱引起的组织损伤，是目前广泛应用于治疗风湿性疾病和炎症性肠病的生物制剂药物(Koji Sono,Cytokine 59,2012；Matteo Bosani,Biologics:Targets&Therapy 2009；Gert Van Assche,Gut,2012)。其中尤其对于炎症性肠病的治疗，相比传统药物如5-氨基水杨酸、糖皮质激素、免疫抑制剂(硫唑嘌呤、6-巯基嘌呤)等，IFX能够迅速诱导并长期维持黏膜愈合，而后者对于延长炎症性肠病的无激素缓解期、减少并发症、减少住院率及手术率，最终延缓疾病的自然病程发展具有重要意义(2012ECCO)。IFX能够发挥促进肠道粘膜愈合的效应主要取决于药物进入患者体内后达到并维持足够的治疗窗浓度，目前研究表明IBD患者维持病情缓解需要IFX浓度维持在3–7μg/mL(Niels Vande CasteeleGastroenterology 2015)，当IBD患者IFX测定浓度低于3μg/mL，采用加大IFX剂量输注或缩短给药间隔的用药方案调整能够显著提升患者的粘膜愈合率，反之，若患者IFX测定浓度高于7μg/mL，适当减量能够在不影响患者的粘膜愈合率前提下节约患者花费。因此，准确评估英夫利西的体内浓度对于患者获得更佳疗效及临床医生治疗决策具有极其重要的意义。
英夫利西作为不属于人体自身的蛋白，其具有一定的免疫原性，即能刺激体内的免疫系统产生针对英夫利西的抗体(anti-infliximab antibody,ATI)和致敏T淋巴细胞的特异性免疫反应。ATI能够结合英夫利西加快其清除，导致体内IFX浓度不足和疗效不佳，同时增加输液反应的发生风险(M.Svenson,Rheumatology,2007)。因此测定血清IFX和ATI浓度对于临床医生及早发现可能发生IFX失应答的患者，明确IFX失应答的可能原因，以及指导临床治疗策略调整使患者持续维持病情缓解具有相当重要价值(Ben-Horin S,NatureReviews Gastroenterology&Hepatology,2014)。
目前测量血清ATI浓度的方法较多，传统方法为双抗原夹心法(double-antigen(DA)enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA))和放射免疫检测法(Ainsworth MA,AmJ Gastroenterol.2008；Wolbink GJ,Arthritis Rheum.2006),，双抗原夹心法将IFX同时作为捕获ATI的抗原以及检测ATI的抗体，存在相当的技术限制，如单价的IgG4型ATI只有1个抗原决定簇，只能结合于包被的IFX，而作为检测抗体的IFX则无法与之结合，而约36％的ATI就会因属于IgG4(M.Svenson,Rheumatology,2007)而发生漏诊；另一方面，体内类风湿因子能够针对IgG FC片段上抗原表位结合，因而也能结合于包被抗原IFX导致检测结果假阳性(Ben-Horin S,Gut,2010)。此外，血清中的IFX可与作为检测抗体的IFX竞争性结合ATI，妨碍血清ATI的检测(Colombel JF,N Engl J Med.2010；Seow CH,Gut.2010)。另一种测量ATI浓度的方法是放射免疫检测法(Ainsworth MA,Am J Gastroenterol.2008；Wolbink GJ,Arthritis Rheum.2006),由于使用了放射性原料，该方法需经过辐射防护专业培训的人员及特殊设备方能开展，临床上难以广泛普及使用。
发明内容：
本发明的目的是提供一种可避免血清中IFX对ATI检测的干扰，准确性大大提高，同时操作方便，灵敏度高，特异性强的抗英夫利西抗体ELISA检测试剂盒和检测方法。
当前ATI的ELISA检测技术关键问题在于寻找能够高度特异结合ATI且容易制备的检测抗体，基于上述背景以及人体抗体结构特征：即抗体分子是由2条较长、相对分子量较大的相同的重链和2条较短、相对分子质量较小的相同的轻链经二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子，轻链有Kappa(κ)链和lambda(λ)链两种同种型，正常人类血清中κ：λ的比例为2:1(Lam CW,Clin Biochem 1991)，IFX的轻链全部是由κ链组成的，无λ链，而ATI的轻链主要是由λ链组成(M.Svenson,Rheumatology,2007)，因此本发明人开展了anti-λELISA法间接检测血清ATI的浓度，该法使用辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗λ链抗体作为检测抗体，可避免血清中IFX对ATI检测的干扰，准确性大大提高，同时新方法操作简便，普通实验室均可开展，测量结果灵敏性高，特异性强，能够广泛应用临床，从而实现了本发明的目的。
本发明的抗英夫利西抗体(ATI)的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
首先用TNF-α包被ELISA板，然后加入英夫利西单克隆抗体(IFX)，使英夫利西单克隆抗体(IFX)与TNF-α结合固定于ELISA板上作为固定抗原，将ELISA板上固定有英夫利西单克隆抗体的孔分成待测样本孔和标准曲线孔；
标准曲线孔中加入含BSA的PBS溶液，然后再加入倍比稀释的已知浓度的抗F(ab’)2段的IgG抗体(Ben-Horin S,Gut,2010)，而后加入底物TMB，在HRP的催化下变为蓝色，后在酸的作用下变为黄色，最后测定其吸光度值，通过已知浓度的抗F(ab’)2段的IgG抗体的吸光度值绘制出标准曲线；
在待测样本孔处加入待测血清，使血清中的ATI与IFX结合从而固定下来，然后再加入HRP标记的针对ATI的抗λ链的IgG抗体，该抗体仅与ATI结合，不与IFX结合，而后加入底物TMB，在HRP的催化下变为蓝色，后在酸的作用下变为黄色，最后测定其吸光度值，根据待测血清的吸光度值与上述标准曲线计算出血清中ATI的浓度。
所述的含BSA的PBS溶液是质量分数1％BSA的PBS溶液。
所述的测定吸光度值是在酶标仪读取450nm的吸光度值。
本发明的第二个目的是提供抗英夫利西抗体ELISA检测试剂盒，其特征在于，包括抗英夫利西抗体包被的ELISA板、HRP标记的抗λ链的IgG抗体、HRP标记的抗F(ab’)2段的IgG抗体、四甲基联苯胺(TMB)、H2SO4和辅助试剂组成；
所述的抗英夫利西抗体包被的ELISA板是通过以下方法制备的：用TNF-α包被ELISA板，然后加入英夫利西单克隆抗体(IFX)，使英夫利西单克隆抗体(IFX)与TNF-α结合固定于ELISA板上作为固定抗体，由此得到抗英夫利西抗体包被的ELISA板。
所述的辅助试剂包括pH9.6的碳酸氢盐缓冲液、质量分数1％BSA的PBS溶液、质量分数0.1％BSA的PBS溶液、体积分数0.05％PBST溶液和蒸馏水。
所述的pH9.6的碳酸氢盐缓冲液每升是这样配制的：将Na2CO3 1.59g和NaHCO32.93g加入1L的蒸馏水中，调pH达到9.6，得到碳酸氢盐缓冲液；
所述的用TNF-α包被ELISA板是用含500ng/ml TNF-α的碳酸氢盐缓冲液包被ELISA板。
所述的质量分数1％BSA的PBS溶液是在pH7.4的PBS溶液(磷酸盐缓冲液)中加入BSA使其质量分数为1％，由此得到质量分数1％BSA的PBS溶液；
所述的质量分数0.1％BSA的PBS溶液是在pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)中加入BSA，使其浓度为质量分数0.1％，由此得到质量分数1％BSA的PBS溶液。
所述的体积分数0.05％PBST溶液是指含体积分数0.05％Tween-20的PBS溶液，其是在pH7.4PBS溶液(磷酸盐缓冲液)中加入Tween-20，使其体积分数为0.05％，由此得到体积分数0.05％PBST溶液。
本发明在ATI测定时，选用HRP(辣根过氧化物酶)标记的抗λ链抗体作为检测抗体，该抗体仅与ATI结合，不与IFX结合，可使ATI的检测结果不受血清中IFX的影响，同时由于不存在ATI的标准品，所以我们选用已知浓度的可以与IFX结合的抗F(ab’)2段的IgG抗体进行绘制标准曲线，使结果可信，准确性大大提高。同时新方法操作简便，普通实验室均可开展，测量结果灵敏性高，特异性强，能够广泛应用临床。
附图说明：
图1是ATI标准曲线示意图。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：血清ATI浓度测定：
一、试剂准备：
(1)TNF-α：100μg TNF-α中加入1ml无菌去离子水，在室温下静置2小时，加入4ml质量分数0.1％BSA-PBS溶液，分装到250μl的EP管中，-20℃低温保存，避免反复冻融，工作浓度为含500ng/ml TNF-α的碳酸氢盐缓冲液，使用时，用下面的碳酸氢盐缓冲液(pH9.6)稀释。
(2)碳酸氢盐缓冲液：将Na2CO3 1.59g和NaHCO3 2.93g加入1L的蒸馏水，调pH达到9.6，4℃保存不能超过1个月，使用前需恢复至室温
(3)IFX标准品：用BCA法测量标准品的IFX浓度，并分装到250μl的EP管保存于-20℃，可冻融2次。
(4)HRP标记的抗λ链的IgG抗体：分装到250μl EP管，-20℃保存。使用时在495μl1％BSA-PBS溶液中加入5μl的HRP标记的抗λ链单抗，吸取40μl上述溶液，加入1ml1％BSA-PBS溶液中，作为工作溶液；
(5)HRP标记的抗F(ab’)2段的IgG抗体：分装到的250μl EP管，-80℃低温保存。为了中期存储，可与保护性过氧化物酶溶液按1:100稀释，4℃可保存超过6个月。工作浓度为600ng/ml，2μl加入1ml 1％BSA-PBS溶液即可；
(6)TMB：4℃保存，使用前需恢复至室温
(7)2M H2SO4：4℃保存，使用前需恢复至室温
所述的1％BSA-PBS是指质量分数1％BSA的PBS溶液，其是在pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)中加入BSA使其质量分数为1％，由此得到质量分数1％BSA的PBS溶液；
所述的质量分数0.1％BSA-PBS是指质量分数0.1％BSA的PBS溶液，是在pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)中加入BSA，使其质量分数为0.1％，由此得到质量分数0.1％BSA的PBS溶液。
二、ATI的测定
(1)用100μl含500ng/ml TNF-α的碳酸氢盐缓冲液包被ELISA板，4℃过夜培育
(2)用250μl 0.05％PBST洗板2次，洗去未附着于ELISA板上的TNF-α，用150μl 1％BSA-PBS封闭1-2小时，由此得到TNF-α包被ELISA板；
(3)ELISA板上每孔加入100μl 100μg/ml IFX，通过与TNF-α特异性结合固定于ELISA板上，作为捕获ATI的抗原，室温下孵育1小时，200rpm振动；
(4)用250μl 0.05％PBST洗板3次，洗去未结合的IFX，由此得到抗英夫利西抗体包被的ELISA板，将抗英夫利西抗体包被的ELISA板的孔分成待测样本孔和标准曲线孔；
(5)在待测样本孔处加入100μl用1％BSA-PBS稀释的血清(一般稀释倍数为100倍，可根据结果减少或增加稀释倍数)，使血清中的ATI与IFX特异性结合，以及阴性对照(全阴性血清，按1:100稀释)，空白对照(1％BSA-PBS)，同时在标准曲线孔处加入100μl 1％BSA-PBS，每个标本设置1-2个副孔，室温下孵育1小时，200rpm振动
(6)用250μl 0.05％PBST洗板4次，洗去血清中未与IFX结合的成分
(7)在标准曲线孔处加入100μl HRP标记的抗F(ab’)2段的IgG抗体，与结合于ELISA板上的IFX结合，浓度从600ng/ml开始，连续倍比稀释，得到7个浓度(600ng/ml，300ng/ml，150ng/ml，75ng/ml，37.5ng/ml，18.75ng/ml，9.375ng/ml)，最后一个孔仅加1％BSA-PBS，每个浓度设置1-2个副孔，用于制作标准曲线，在待测样本孔中，每孔加入100μlHRP标记的抗λ链的IgG抗体，与结合于IFX上的ATI结合，不与IFX结合，室温下孵育1小时，200rpm振动
(8)用250μl 0.05％PBST洗板4次，洗去未结合的抗F(ab’)2段IgG抗体及抗λ链IgG抗体；
(9)避光下，每孔加入100μl TMB，直到4分钟后(通常在3-6分钟变色，根据标准孔的颜色深浅决定是否终止反应)变成蓝色后加入50μl的2M H2SO4终止反应，变成黄色
(10)在30分钟内于酶标仪上读取450nm的吸光度值。绘制出标准曲线，计算出血清中ATI的浓度。ATI标准曲线如图1所示。
从图1可以看出，其检测范围为0-600ng/ml，待测样本的浓度计算方法为将待测样本的OD值带入标准曲线拟合的公式，再乘以稀释倍数即可。
选取28例既往未接受过英夫利西治疗的克罗恩病或正常受试者作为阴性对照，测量阴性对照组的血清ATI浓度，可得出血清ATI浓度的检测下限为1.05±0.79μg/ml。孔间变异系数为0.84％，板间变异系数为7.93％。
在63个IFX治疗的CD患者中，应用本发明的检测方法(抗λ链ELISA法)可检测出22个患者ATI阳性(34.9％)，而双抗原夹心法仅可测出18个CD患者ATI阳性(28.5％)，有4个患者遗漏，且这4个患者血清中均可检测出IFX。为进一步验证血清IFX的存在对ATI检测的干扰，选取检测高浓度ATI且IFX检测不出的血清作为研究对象，外源性的加入梯度浓度的IFX(2.5,5,7.5,10μg/ml)，室温下孵育1h后分别用本发明的检测方法(抗λ链ELISA法)和双抗原夹心法检测ATI，结果发现加入2.5μg/ml外源性的IFX后，抗λ链ELISA法检测ATI的水平较未加外源性IFX前下降76％，而随后加入5,7.5,10μg/ml不再继续影响ATI的测定。9份血清中有3份血清的ATI用抗λ链ELISA法是可以检测出来的，但用双抗原夹心法完全检测不出。而且，该研究发现16个IFX+ATI+(即血清中可同时检测出IFX和ATI)的患者随访一段时间后，6个月时有6个患者(37.5％)发生IFX失应答，12个月时有7个患者(43.8％)发生失应答，24个月时有10个患者(78.6％)发生失应答，说明抗λ链ELISA法在可检测出IFX的血清中检测ATI的敏感性优于传统的双抗原夹心法。
表1.抗λ链ELISA法和双抗原夹心法检测ATI
所述的0.05％PBST是指含体积分数0.05％Tween-20的PBS溶液，其是在pH 7.4的磷酸盐缓冲液中加入Tween-20，使其体积分数为0.05％，由此得到体积分数0.05％PBST溶液。
Claims (6)
1.一种抗英夫利西抗体的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
首先用TNF-α包被ELISA板，然后加入英夫利西单克隆抗体，使英夫利西单克隆抗体与TNF-α结合固定于ELISA板上作为固定抗原，将ELISA板上固定有英夫利西单克隆抗体的孔分成待测样本孔和标准曲线孔；
标准曲线孔中加入含BSA的PBS溶液，然后再加入倍比稀释的已知浓度的抗F(ab’)2段的IgG抗体，而后加入底物TMB，在HRP的催化下变为蓝色，后在酸的作用下变为黄色，最后测定其吸光度值，通过已知浓度的抗F(ab’)2段的IgG抗体的吸光度值绘制出标准曲线；
在待测样本孔处加入待测血清，使血清中的抗英夫利西抗体(ATI)与IFX结合从而固定下来，然后再加入针对ATI的HRP标记的抗λ链的IgG抗体，而后加入底物TMB，在HRP的催化下变为蓝色，后在酸的作用下变为黄色，最后测定其吸光度值，根据待测血清的吸光度值与上述标准曲线计算出血清中ATI的浓度。
2.根据权利要求1所述的抗英夫利西抗体的检测方法，其特征在于，所述的含BSA的PBS溶液是质量分数1％BSA的PBS溶液。
3.根据权利要求1所述的抗英夫利西抗体的检测方法，其特征在于，所述的测定吸光度值是在酶标仪读取450nm的吸光度值。
4.一种抗英夫利西抗体ELISA检测试剂盒，其特征在于，包括抗英夫利西抗体包被的ELISA板、HRP标记的抗λ链的IgG抗体、HRP标记的抗F(ab’)2段的IgG抗体、四甲基联苯胺(TMB)、H2SO4和辅助试剂组成；
所述的抗英夫利西抗体包被的ELISA板是通过以下方法制备的：用TNF-α包被ELISA板，然后加入英夫利西单克隆抗体，使英夫利西单克隆抗体与TNF-α结合固定于ELISA板上作为固定抗原，由此得到英夫利西抗体包被的ELISA板。
5.根据权利要求4所述的抗英夫利西抗体ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述的辅助试剂包括pH9.6的碳酸氢盐缓冲液、质量分数1％BSA的PBS溶液、质量分数0.1％BSA的PBS溶液、体积分数0.05％PBST溶液和蒸馏水。
6.根据权利要求4所述的抗英夫利西抗体ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述的用TNF-α包被ELISA板是用含500ng/ml TNF-α的碳酸氢盐缓冲液包被ELISA板。
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|---|---|---|---|---|
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| CN103109190A (zh) * | 2010-08-19 | 2013-05-15 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 用于测量结合治疗性单克隆抗体的抗体的测定法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BELLA UNGAR，ET AL: "Significance of low level infliximab in the absence of anti-infliximab antibodies", 《WORLD J GASTROENTEROL》 * |
| BEN-HORIN S.ET AL: "The immunogenic part of infliximab is the F(ab’)2, but measuring antibodies to the intact infliximab molecule is more clinically useful", 《GUT》 * |
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