CN106047901A

CN106047901A - 源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1及用途

Info

Publication number: CN106047901A
Application number: CN201610403138.5A
Authority: CN
Inventors: 董波; 徐小金; 张丹丹; 唐明智
Original assignee: Zhejiang Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Zhejiang Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2016-06-08
Filing date: 2016-06-08
Publication date: 2016-10-26

Abstract

本发明提供了一个源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1及用途，同时提供了该基因的核苷酸序列或其互补链的核苷酸序列、该基因编码的cDNA序列以及该基因编码的蛋白质的氨基酸序列。该基因在营养生长、孢子形成模式、孢子产生量、侵染菌丝形成和致病过程中起重要作用，该基因Moarrdc1或其编码的蛋白质的表达可作为用于设计和筛选抗真菌药物的靶标。

Description

源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1及用途

技术领域

本发明属于植物病理学和微生物基因工程领域，提供了一个来源于稻瘟病菌的、在营养生长、孢子形成模式、孢子产生量、侵染菌丝形成和致病过程中起重要作用的新基因Moarrdc1编码区核苷酸序列及其编码蛋白质的氨基酸序列。

背景技术

稻瘟病又称为稻热病，是由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的一种世界性重要稻病。稻瘟病与纹枯病和白叶枯病被列为三大水稻病害。该病主要通过气流传播，对水稻生产的危害程度因品种、栽培技术以及气候条件不同有所差别。世界上每年由稻瘟病造成的水稻产量损失在10％-30％，局部田块甚至绝收。我国几乎每年都有稻瘟病的流行和爆发。如2005年，四川省20个市和127个县的230万亩稻田，重庆市100多万亩稻田发生稻瘟病，因其流行迅速、发病品种多，对水稻产量影响严重。在2011年7-10月间，中国龙川、肇庆、阳江等地遭受不同程度的稻瘟病菌侵害，江西宜春和浙江等“高产抗病”品种也大面积发病。除此以外，稻瘟病菌也能侵染其他禾本科植物，对小米、大麦和小麦等农作物造成的影响也不可估量。

稻瘟病菌的生活史分为有性阶段和无性阶段。有性阶段不参与病害循环，其在自然环境中也没有观察到。在实验室条件下，将两个不同交配型的菌株进行有性杂交，可产生子囊和子囊孢子。在自然界中，无性阶段始于营养菌丝分化产生分生孢子梗；而后，分生孢子梗以合轴式的产孢模式产生分生孢子；分生孢子随风雨降落到水稻叶片上，孢子尖端释放粘胶，使其与水稻叶片的疏水表面紧密粘贴；2小时之内，分生孢子萌发产生芽管，芽管尖端形成肿大并“钩化”，继而形成具有侵染能力的特殊细胞结构-附着胞；附着胞形成侵染栓，穿透寄主表皮，进入叶肉组织，形成次生侵染菌丝在寄主组织胞内进行胞间传播，导致寄主退绿和组织坏死，产生病班；最后在被侵染的叶片表面产生出新的分生孢子梗，其再次以合轴方式产生分生孢子，新产生的分生孢子进行下一轮侵染循环。进入冬天时，分生孢子和营养菌丝在稻谷和稻草上越冬，完成其生活史。次年春天，分生孢子重新开始新一轮的病害循环过程。由上述可见稻瘟病菌以合轴方式产生分生孢子是其成功进入病害循环的先决条件，研究表明稻瘟病菌以其他方式产生的分生孢子，其往往无法完成侵染循环。

鉴定和克隆植物病原真菌的致病性基因，尤其是与病害循环紧密相关的基因，可为设计和筛选抗真菌药物提供有用的靶标位点。目前已在包括稻瘟病菌在内的许多真菌中证明了一些药物靶点的存在，并获得了疗效不错的抗真菌农药制剂。例如，稻瘟病菌抗菌剂三环唑，其靶点是稻瘟病菌的三羟萘还原酶，其作用机制是抑制黑色素合成；另外一种青霉菌多肽杀菌剂sorphenA，其作用靶点是青霉CYP51基因产物脱甲基酶。因此，利用分子生物学技术鉴定和克隆在稻瘟病菌侵染过程中具有重要功能的致病性基因，可以为设计和筛选新的抗真菌药物提供有用的药物靶点。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种新的、对稻瘟病菌等真菌的菌丝生长、分生孢子产生模式和分生孢子产生量、侵染菌丝形成以及致病性有重要影响的基因Moarrdc1及该基因的用途。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1，该基因的核苷酸序列或其互补链的核苷酸序列为SEQ ID NO：1。

本发明同时提供了上述基因Moarrdc1编码的cDNA序列，该cDNA序列具有SEQ IDNO：2所示的核苷酸序列。

本发明同时提供了上述基因Moarrdc1编码的蛋白质，该蛋白质具有SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列。

本发明还同时提供了基因Moarrdc1的用途，该基因Moarrdc1的表达作为用于设计和筛选抗真菌药物的靶标。

本发明还同时提供了基因Moarrdc1编码的蛋白质的用途，该蛋白质的表达和修饰作为设计和筛选抗真菌药物的靶标。

本发明通过同源序列比对，在稻瘟病菌中克隆了与致病性相关的基因Moarrdc1，该基因在真核生物中高度保守，唯独在植物中不存在其同源序列。

本发明通过构建Moarrdc1基因同源置换载体，利用农杆菌介导的转化将载体转入到野生型稻瘟病菌，得到了基因缺失突变体ΔMoarrdc1；在基因缺失突变体ΔMoarrdc1中，重新引入ΔMoarrdc1基因，突变体的表型恢复。

本发明分析了基因缺失突变体ΔMoarrdc1的基本表型，稻瘟病菌Moarrdc1基因缺失后，气生菌丝变得稀少，菌落生长缓慢；分生孢子的产孢方式发生根本性改变，由合轴式(sympodial)变为向顶式(acropetal)；产孢能力大幅下降；侵染菌丝形成大幅下降；水稻和大麦的致病性显著减弱。

本发明所涉及的基因因为同源重组造成的基因缺失突变导致稻瘟病菌生长缓慢、产孢方式改变，产孢量下降，侵染菌丝形成降低，并在感病水稻品种上的致病力大幅下降；更重要的是，比较基因组学研究发现此类基因虽在多数真核生物中保守，其在植物中却不存在。因此，本发明最重要的用途是：应用上述成果，设计和筛选能够破坏该基因的表达、剪切及其编码蛋白表达的化合物，或设计和筛选能对该蛋白的氨基酸序列进行修饰的化合物，从而开发出新的抗真菌药物。同时，由于此类基因所在的基因家族在植物中不存在同源基因，因此以此基因为靶点开发的抗真菌药物对宿主植物本身的影响会比较小。此外，本发明的用途还包括利用该基因的DNA或cDNA序列作为探针在其它真菌中分离与该基因具有一定序列同源性的序列。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

图1：稻瘟病菌中全部arrestin家族蛋白示意图。Arrestin家族蛋白是除植物以外的所有真核生物中广泛保守存在的一类重要信号调控因子。本发明针对其中命名为Moarrdc1的蛋白；

图2：Moarrdc1基因敲除过程示意图；

图3：Southern杂交验证Moarrdc1的敲除；

图4：基因缺失突变体ΔMoarrdc1产孢模式由合轴式变为向顶式。4A/4B/4C，野生型(Wild-type)、基因缺失突变体(ΔMoarrdc1)及互补突变体(arrdc-c)在CM平板上的生长速度(图4A)，产孢量(图4B)和分生孢子萌发率(图4C)统计结果。ΔMoarrdc1在CM培养基上生长速度明显慢于野生型和互补突变体，其产孢量亦大幅下降，并且所产生的孢子萌发率大幅下降；

图5：钙荧光白染色表明缺失突变体孢子形态发生明显改变；

图6：野生型孢子一般具有1到2个横隔，而缺失突变体孢子横隔数明显增多；

图7：丝状真菌产孢模式多达20余中，野生型稻瘟病菌以合轴式(sympodial)产生分生孢子，而基因缺失突变体不仅产孢量大幅下降，其产孢模式也发生根本性改变，突变体以向顶式(acropetal)产孢；

图8：野生型、基因缺失突变体及互补突变体中产孢关键基因的表达情况。稻瘟病菌中，只有两个转录因子(acr1和cca1)被报道参与产孢模式的调控。而Moarrdc1的缺失导致其中cca1转录因子的大幅下调，标尺＝20μm；

图9：ΔMoarrdc1突变体宿主植物接种实验。ΔMoarrdc1突变体水稻叶片喷雾接种致病结果代表性图片，表明ΔMoarrdc1突变体对水稻的致病力大幅下降；

图10：ΔMoarrdc1突变体宿主植物接种实验。ΔMoarrdc1突变体水稻叶片喷雾接种致病统计结果，结果表明ΔMoarrdc1突变体对水稻的致病力大幅下降；

图11：分生孢子被稀释成5×10⁴个/ml,接种于完整(intact)或擦伤(wounded)大麦叶片的表面，30小时后用甲醇脱色观察试验菌株的致病结果代表性图片，结果表明ΔMoarrdc1突变体的侵染钉和侵染菌丝形成过程严重受阻；

图12：分生孢子被稀释成5×10⁴个/ml,接种于完整(intact)或擦伤(wounded)大麦叶片的表面，30小时后用甲醇脱色观察试验菌株的致病统计结果，结果表明ΔMoarrdc1突变体的侵染钉和侵染菌丝形成过程严重受阻，标尺＝20μm；

图13：MoARRDC1的亚细胞转运。在休眠的分生孢子，EGFP-ARRDC1分散于微弱但明显可见的点状结构。孢子萌发后，绿色荧光信号明显增强，点状星号增多。增加培养时间发现绿色点状信号变得异常巨大，并且常常可见小点汇聚到大点周围，标尺＝10μm；

图14：MoARRDC1蛋白与自噬泡标志性蛋白Atg8共定位于孢子及菌丝中。图13和图14结果表明MoARRDC1蛋白在孢子萌发过程中从细胞溶质渐渐转移至自噬泡，MoARRDC1蛋白的转运与自噬过程相关，标尺＝10μm。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

实施例1：Moarrdc1基因的分离和克隆

使用来源于NCBI网站的CDD蛋白结构域数据库链接http://www.ncbi.nlm.nih.gov/cdd/获得序列信息arrestinN(pfam00339)和arrestinC(pfam02752)，在稻瘟病菌数据库http://www.broadinstitute.org/annotation/genome/magnaporthe_grisea/MultiHome.html通过blastP进行同源序列搜索，获得了七个arrestin家族蛋白，并命名为Moarrdc1-6以及MoPalF为了研究Moarrdc1基因的功能，从稻瘟病菌野生型菌株KJ201的基因组中，利用引物arrdc1-xba1和arrdc1-xba2克隆了Moarrdc1基因全序列，并且连接到pkd5GFP载体上，进行了测序；同时，在野生型菌株KJ201的cDNA中克隆了该基因的编码序列并且连接到pkd5GFP载体上，进行了测序分析。DNA序列见SEQ ID NO：1，cDNA序列见SEQ ID NO：2。氨基酸序列见SEQ ID NO：3。

实施例2：Moarrdc1基因缺失突变体和互补突变体的获得

2.1 Moarrdc1基因敲除载体的构建

以KJ201的基因组为模板，用引物3241-u1/2和3241-d1/2分别扩增上、下游片段。引物3241-u1/2和3241-d1/2的序列见表1。

表1 引物序列

扩增体系为：

扩增程序为：

PCR反应条件：

1.95℃预变性2min

2.98℃10s

3.58℃15s

4.72℃30s

2-4.35个循环

5.72℃5min

6.4℃保温。

用Hph-m1/2引物，以质粒pCB1003为模版，扩增1.4kb潮霉素的片段。Hph-m1/2引物的序列(见表1)

扩增程序为：

PCR反应条件：

1.94℃预变性2min

2.98℃ 10s

3.58℃ 15s

4.72℃ 30s

2-4.35个循环

5.72℃ 5min

6.4℃保温

上述三个片段利用融合PCR的方法连接到一起，融合产物作为模版，用3241-n1/2引物进行巢式PCR(引物的序列见表1)，扩增的片段引入EcoRI/BamhI位点(设计的引物上面含有EcoRI/BamhI位点)，连接到pCAMBIA1300相应位置，载体构建成功。所得的载体为包含Moarrdc1基因上游序列-潮霉素抗性基因-下游片段的p1300-Moarrdc1载体。具体如下：

融合PCR扩增体系为：

扩增程序为：

用3241-n1/2引物进行扩增体系：

PCR反应步骤如下：

备注说明：

上文中上游片段具体如SEQ ID NO：4所示；

上文中下游片段具体如SEQ ID NO：5所示；

上文中潮霉素的片段具体如SEQ ID NO：6所示；

上文中三片段融合后的巢式PCR产物片段具体如SEQ ID NO：7所示。

2.2 ΔMoarrdc1突变体的获得

包含Moarrdc1基因上游序列-潮霉素抗性基因-下游片段的p1300-Moarrdc1载体转化到农杆菌中后，通过农杆菌介导方法转化稻瘟病菌野生型菌株KJ201。在基因置换过程中，大部分外源DNA插入到稻瘟病菌的基因组中，由于两端同源序列的存在，部分会发生同源置换，同源置换的过程见图1。试验中总挑取得到12个转化子，提取所得转化子的基因组DNA，利用3241-ck1/2和Hph-ck1/2引物进行多重PCR(引物的序列见表1)，所有转化子对应的PCR产物电泳均具有1.4kb左右的潮霉素条带，表明PCR体系运作正常并且转化子均为潮霉素阳性，其中部分转化子PCR产物电泳没有425bp的目的条带(3241-ck1/2对应的PCR产物)，初步断定这些没有目的条带的转化子为基因置换突变体(这部分被潮霉素抗性基因替换)。选取其中三个突变体arrdc1-c1/2/3大量提取基因组DNA，进行Southern杂交验证。用ScaI对arrdc1-c1/2/3的基因组进行酶切，野生型KJ201为对照，引物3241-sb1和3241-sb2的PCR扩增产物，合成杂交探针。

备注说明：突变体arrdc1-c1/2/3的PCR产物电泳中没有425bp的目的条带。

转化子多重PCR反应体系：

反应程序

本发明Southern杂交用Roche公司地高辛DNA标记与检测试剂盒(DIG-High PrimeDNA Labeling and Detection Kit I)进行。杂交探针的合成：反应体系与程序，与上游片段操作方法相同。获得的PCR产物，进行探针合成，步骤如下：

1)将全部50μl体系的PCR产物进行胶回收，回收产物沸水浴中温育10min，使DNA变性，并迅速在冰水中冷却。

2)混匀DIG-High Prime，加4μl DIG-High Prime到16μl变性的模板DNA中，混合并稍离心。在37℃温箱温浴24h。

杂交结果显示，野生型KJ201菌株在2kb处有杂交信号，而突变体在4kb处有杂交信号并且是单拷贝，该杂交结果证实了arrdc1-1/2/3为Moarrdc1基因缺失突变体(图1)。选取arrdc1-1进行单孢分离并保存,命名为ΔMoarrdc1进行后续试验。

备注说明：arrdc1-1/2/3三个缺失突变体均表现生长速度缓慢，气生菌丝疏松；野生型菌株生长速度真长，气生菌丝较多。

2.3互补载体的构建

为了验证突变体的表型是因为基因Moarrdc1的缺失引起的，构建了互补载体p1300G418-Moarrdc1。利用引物1300-g418u/d扩增G418片段，通过无缝克隆(TARAKAclontech公司无缝连接试剂盒)连接到pCAMBIA1300的HindIII和PstI位点上获得p1300G418载体。利用引物3241-c1/2扩增了含有基因CDS及其上游序列和下游序列的全长4.5kb片段，无缝克隆到1300G418载体XhoI和EcoRI的位点上，获得互补载体p1300G418-Moarrdc1。将p1300G418-Moarrdc1载体转化到农杆菌中后，通过ATMT方法利用农杆菌转化稻瘟病菌突变体ΔMoarrdc1。

由于ΔMoarrdc1缺失突变体和野生型的差异非常大，互补后，缺失突变体的表型得到恢复，表型与野生型KJ201相同。ΔMoarrdc1表型的变化是由Moarrdc1基因的缺失引起的。选取互补菌株arrdc-c进行后续试验(备注说明：C表示补充、恢复的意思)。

备注说明：互补后，突变体ΔMoarrdc1的缺失表型得到恢复，互补菌株arrdc-c(arrdc-c是由ΔMoarrdc1缺失突变体互补后而得)生长速度变快，气生菌丝浓密，与野生型KJ201的表型相同。

实施例3：突变体关键性表型分析

3.1突变体菌落生长速度

在CM培养基上，野生型KJ201和互补型arrdc-c的气生菌丝浓密，而ΔMoarrdc1菌落的气生菌丝稀疏，生长缓慢，约为野生型的70％(图4A)。Moarrdc1基因的缺失影响了稻瘟病菌的菌落形态和生长速度。

3.2突变体ΔMoarrdc1产孢量下降

将菌株接种在CM培养基上，16/8小时光照/黑暗，28℃生长10天后，测量菌落直径，计算菌落面积，然后使用无菌水洗脱气生菌丝，三层擦镜纸过滤，定容到5毫升，显微镜下统计。野生型KJ201的孢子产量为20.45±5.14×10³个/cm²，互补型菌株arrdc-c孢子产量为22.90±2.52×10³个/cm²，而基因缺失突变体ΔMoarrdc1的产孢量为0.90±0.13×10³个/cm²(图4B)。因此，ΔMoarrdc1的缺失降低了稻瘟病菌在CM平板上的单位面积产孢量。

3.3突变体ΔMoarrdc1分生孢子形态发生显著变化

对菌株分生孢子的进一步观察发现，野生型和互补型菌株在水里的2h萌发率分别为97.50±1.04％和96.80±1.54％，而缺失突变体的萌发率降低为73.50±3.45％(图4C)。并且突变体分生孢子形态发生严重改变，主要表现在横隔数量。野生型分生孢子中，约90％的孢子由两个横隔将其划分为三个相邻细胞，剩余10％的孢子拥有一个横隔或无横隔了。互补型菌株横隔情况与野生型类似。而突变体中只有约36％的孢子拥有两个横隔，约43％的孢子拥有一个横隔或者没有横隔，多达21％的孢子拥有大于等于两个横隔，因而孢子形态发生严重改变，形态图和统计数据见图5和图6。

3.4突变体ΔMoarrdc1分生孢子产孢模式发生根本性改变

对产孢过程的进一步观察发现，野生型和互补型菌株分生孢子梗浓密，并且均以合轴方式(sympodial)产生分生孢子。而缺失突变体分生孢子梗稀疏，并且分生孢子梗以向顶式(acropetal)产生分生孢子(图7)。定量PCR实验亦表明，缺失突变体与野生型相比，在产孢阶段，控制分生孢子梗的关键性基因COS1和控制分生孢子梗产孢模式的关键性基因CCA1，其表达量均有明显下调(图8)。

实施例4：Moarrdc1是稻瘟病菌致病力所必需的

在实验室条件下，菌株在CM平板上生长10天后，水洗收集分生孢子，将其配置为5×10⁴个/ml的0.02％Tween 20悬浮液。对感病型水稻品种进行叶片喷雾接种实验，未接菌的叶片作对照。结果表明突变体ΔMoarrdc1分生孢子悬浮液只能水稻叶片上产生极少量无法扩展的病斑(图9和图10)。同时，我们还分析了ΔMoarrdc1突变体的植物组织致病性。ΔMoarrdc1突变体无论在完整或擦伤的大麦叶片上均只能导致少量病斑，结果表明突变体虽能成功侵入植物组织，但其后的次生侵染菌丝生长受阻。统计结果发现，在30h完整叶片侵染试验中，野生型和互补型菌株侵染菌丝形成率分别为89.47±2.01％和91.47±1.76％，而突变体ΔMoarrdc1侵染菌丝形成率为14.60±3.61％；在30h擦伤叶片侵染试验中，结果类似，野生型和互补型菌株侵染菌丝形成率分别为88.83±2.89％和89.13±1.67％，而突变体ΔMoarrdc1侵染菌丝形成率为21.60±8.07％(图11和图12)。

实施例5：Moarrdc1与自噬泡共定位

5.1 EGFP-ARRDC1载体构建

为了研究Moarrdc1在稻瘟病菌中的空间表达模式，以pKD5GFP载体为骨架构建了pEGFP-ARRDC1载体，由于Moarrdc1基因自身启动子作用下的基因融合载体，其转化稻瘟病菌菌株后获得的荧光非常微弱。我们使用了pKD5GFP载体自身带有的H3强启动子，使用arrdc1-xba1和arrdc1-xba2引物从稻瘟病菌cDNA文库中扩增基因CDS片段，然后使用融合PCR方法将CDS引入载体的XbaI位点，获得了pEGFP-ARRDC1载体。载体利用ATMT方法转化野生型和缺失突变体菌株获得了基因融合荧光蛋白的突变体菌株。

5.2 EGFP-ARRDC1融合蛋白的胞内转运观察

在休眠的分生孢子，EGFP-MoARRDC1分散于微弱但明显可见的点状结构。孢子萌发后，荧光信号明显增强，点状信号增多。增加培养时间发现绿色点状信号变得异常巨大，并且常常可见小点汇聚到大点周围(图13)。进一步研究发现EGFP-ARRDC1与细胞自噬泡标志性蛋白Atg8共定位(图14)。图13和图14结果表明MoARRDC1蛋白在孢子萌发过程中从细胞溶质渐渐转移至自噬泡，MoARRDC1蛋白的转运与自噬过程相关。

CM培养基(Talbot et al.,1993)

若配固体培养基，每1L培养基中加15g琼脂粉；121℃湿热灭菌20min。

*20×Nitrate salts(1000ml)：

1000×Vitamin solution(100ml)

1000×Trace elements(100ml)

以上三种试剂均过滤除菌，4℃黑暗储存。

实施例6：利用Moarrdc1基因的表达情况作为靶标，筛选抗真菌药物。

把稻瘟病菌在液体完全培养基中大量培养，收集菌丝后分成若干小份，每一份加入待筛选的化合物或候选药物继续在液体完全培养基培养数小时，提起菌丝RNA，采用QPCR的方法检测Moarrdc1基因的表达情况。如果Moarrdc1的表达被候选药物抑制，则菌丝细胞内没有Moarrdc1的表达或者Moarrdc1的表达减少。获得的化合物再利用实施例4的方法，在接种的孢子液中加入候选药物，测定野生型稻瘟病菌在这种化合物存在的条件下对水稻致病性有没有减弱，进一步确定该化合物的抗真菌效果。当测定结果为菌株对水稻致病性减弱时，说明候选药物具有明显抗菌效果，可以作为抗菌药物的来源；当测定结果为菌株对水稻致病性没有明显变化时，说明候选药物不具有明显抗菌效果，不可作为抗菌药物的来源。

实施例7：利用Moarrdc1蛋白的表达或修饰作为靶标，筛选抗真菌药物。

把受Moarrdc1基因调控的下游基因启动子与GFP荧光蛋白构建融合载体，将载体转入稻瘟病菌中，然后把荧光转化子在液体完全培养基中大量培养，收集菌丝后分成若干小份，每一份加入待筛选的化合物或候选药物继续在液体完全培养基培养数小时，取菌丝在荧光显微镜下观察菌丝GFP荧光的情况。如果Moarrdc1的表达被候选药物抑制，则其失去对下游基因的调控作用，GFP不表达从而菌丝失去绿色荧光。获得的化合物再利用实施例4的方法，在接种的孢子液中加入候选药物，测定野生型稻瘟病菌在这种化合物存在的条件下对水稻致病性有没有减弱，进一步确定该化合物的抗真菌效果。当测定结果为菌株对水稻致病性减弱时，说明候选药物具有明显抗菌效果，可以作为抗菌药物的来源；当测定结果为菌株对水稻致病性没有明显变化时，说明候选药物不具有明显抗菌效果，不可作为抗菌药物的来源。

最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

SEQUENCE LISTING

<110> 浙江省农业科学院

<120> 源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1及用途

<130> 201605

<160> 7

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 1510

<212> DNA

<213> Magnaporthe oryzae

<400> 1

atggctgcct cagtgagggt gtcaggcccg ccaaacagta gtttcttgat aggttatcca 60

gggatttcgg caacactggt gagtgtgact tccggttatg gatagtttag cgtggcgcaa 120

accgtcgcgc agtcatgcga ttgatggtgg gggtgggcat cgcgggagta ctgtgtcggt 180

cgtgaagagc cgacgctgtt ggcaaatgct ttcctcatgt gggcgctctc tgccatgcct 240

cttgaatcct tgccagtcca tcccgtgtcg cgcacactcc gctaaccaca tgtgtcatgg 300

tcgtcacttc aatagccacg catagaagga accgtcgaaa ttaggccctc gcagggctat 360

tcgatgcccg tcgccatatc gctggtcagg atatgtcttc aaagacgaga gtcgatacac 420

ccggctgccg ataacatggc caagaagcac ttgggtacac cccggcgtga aacgaccgat 480

attgttggca aggaacatct tctgtttcgg tgccctgacg gcaaggaatc cgagagtgtt 540

atcgccatgg accttccttt cgtcctcttt atcccttttg gtcgcggtgg cgaggagacc 600

aacaggagga ttcctccagc atcacttcag cttcctagtc gaactgccga aacatattac 660

gagctcatag ttaccgtcca gcaaggtgcc agccatcaaa acaagtacca tttccctctg 720

ccgctccaga ggtacgatac cctctcgacg tttggcatgt ataatcgccc cgaatccaag 780

gttgcgacgg cggataacat tgtgactttg gggatctcgt tgccgcgctg gagctacgga 840

ccactggacc cgatcaccgt ctacataaaa cttgccccaa acccagactg gctgaacaag 900

gccaagcggg ttacaatcaa caagatcacg ctaagcatag aggaagaaat cacatacaac 960

ccagagggtg acgagccgca aaaaaaggtt aataggatct ccaagcacac gcaaccggtc 1020

gggactaggc ttcccgaggc cggttacact acgaatctcg ggctcgtgtt tccatcgcga 1080

gatctcagag acgccgaagg ggttatgcgt cgaggagagc catccaagtt tccaaatcat 1140

gaggtgactt cgttcaccac gacctcgact ttgtacaagg tggagttctt tctcacaatc 1200

aaggtttgtt gccgcgatct catcatagga ataaacctgg agcaaccata ctgacataaa 1260

cgcaaaggca tccatgagct ccgcacgtga tatcactctc aggcagccta tcgtcatctg 1320

cccaatggac cagcaagcct gtaaggaaga aatcgaggcc attgagcaag cagcgaggga 1380

tgcgtcactt gtcgatccaa atcacccgta tactccagcc aaaaccattg tgctggctag 1440

ccatgagaac tctcttcggc acctgggtct ttgtattgtg ggtgggcaga agaagccttt 1500

gattgaatga 1510

<210> 2

<211> 1209

<212> DNA

<213> Magnaporthe oryzae

<400> 2

atggctgcct cagtgagggt gtcaggcccg ccaaacagta gtttcttgat aggttatcca 60

gggatttcgg caacactgcc acgcatagaa ggaaccgtcg aaattaggcc ctcgcagggc 120

tattcgatgc ccgtcgccat atcgctggtc aggatatgtc ttcaaagacg agagtcgata 180

cacccggctg ccgataacat ggccaagaag cacttgggta caccccggcg tgaaacgacc 240

gatattgttg gcaaggaaca tcttctgttt cggtgccctg acggcaagga atccgagagt 300

gttatcgcca tggaccttcc tttcgtcctc tttatccctt ttggtcgcgg tggcgaggag 360

accaacagga ggattcctcc agcatcactt cagcttccta gtcgaactgc cgaaacatat 420

tacgagctca tagttaccgt ccagcaaggt gccagccatc aaaacaagta ccatttccct 480

ctgccgctcc agaggtacga taccctctcg acgtttggca tgtataatcg ccccgaatcc 540

aaggttgcga cggcggataa cattgtgact ttggggatct cgttgccgcg ctggagctac 600

ggaccactgg acccgatcac cgtctacata aaacttgccc caaacccaga ctggctgaac 660

aaggccaagc gggttacaat caacaagatc acgctaagca tagaggaaga aatcacatac 720

aacccagagg gtgacgagcc gcaaaaaaag gttaatagga tctccaagca cacgcaaccg 780

gtcgggacta ggcttcccga ggccggttac actacgaatc tcgggctcgt gtttccatcg 840

cgagatctca gagacgccga aggggttatg cgtcgaggag agccatccaa gtttccaaat 900

catgaggtga cttcgttcac cacgacctcg actttgtaca aggtggagtt ctttctcaca 960

atcaaggcat ccatgagctc cgcacgtgat atcactctca ggcagcctat cgtcatctgc 1020

ccaatggacc agcaagcctg taaggaagaa atcgaggcca ttgagcaagc agcgagggat 1080

gcgtcacttg tcgatccaaa tcacccgtat actccagcca aaaccattgt gctggctagc 1140

catgagaact ctcttcggca cctgggtctt tgtattgtgg gtgggcagaa gaagcctttg 1200

attgaatga 1209

<210> 3

<211> 402

<212> PRT

<213> Magnaporthe oryzae

<400> 3

Met Ala Ala Ser Val Arg Val Ser Gly Pro Pro Asn Ser Ser Phe Leu

1 5 10 15

Ile Gly Tyr Pro Gly Ile Ser Ala Thr Leu Pro Arg Ile Glu Gly Thr

20 25 30

Val Glu Ile Arg Pro Ser Gln Gly Tyr Ser Met Pro Val Ala Ile Ser

35 40 45

Leu Val Arg Ile Cys Leu Gln Arg Arg Glu Ser Ile His Pro Ala Ala

50 55 60

Asp Asn Met Ala Lys Lys His Leu Gly Thr Pro Arg Arg Glu Thr Thr

65 70 75 80

Asp Ile Val Gly Lys Glu His Leu Leu Phe Arg Cys Pro Asp Gly Lys

85 90 95

Glu Ser Glu Ser Val Ile Ala Met Asp Leu Pro Phe Val Leu Phe Ile

100 105 110

Pro Phe Gly Arg Gly Gly Glu Glu Thr Asn Arg Arg Ile Pro Pro Ala

115 120 125

Ser Leu Gln Leu Pro Ser Arg Thr Ala Glu Thr Tyr Tyr Glu Leu Ile

130 135 140

Val Thr Val Gln Gln Gly Ala Ser His Gln Asn Lys Tyr His Phe Pro

145 150 155 160

Leu Pro Leu Gln Arg Tyr Asp Thr Leu Ser Thr Phe Gly Met Tyr Asn

165 170 175

Arg Pro Glu Ser Lys Val Ala Thr Ala Asp Asn Ile Val Thr Leu Gly

180 185 190

Ile Ser Leu Pro Arg Trp Ser Tyr Gly Pro Leu Asp Pro Ile Thr Val

195 200 205

Tyr Ile Lys Leu Ala Pro Asn Pro Asp Trp Leu Asn Lys Ala Lys Arg

210 215 220

Val Thr Ile Asn Lys Ile Thr Leu Ser Ile Glu Glu Glu Ile Thr Tyr

225 230 235 240

Asn Pro Glu Gly Asp Glu Pro Gln Lys Lys Val Asn Arg Ile Ser Lys

245 250 255

His Thr Gln Pro Val Gly Thr Arg Leu Pro Glu Ala Gly Tyr Thr Thr

260 265 270

Asn Leu Gly Leu Val Phe Pro Ser Arg Asp Leu Arg Asp Ala Glu Gly

275 280 285

Val Met Arg Arg Gly Glu Pro Ser Lys Phe Pro Asn His Glu Val Thr

290 295 300

Ser Phe Thr Thr Thr Ser Thr Leu Tyr Lys Val Glu Phe Phe Leu Thr

305 310 315 320

Ile Lys Ala Ser Met Ser Ser Ala Arg Asp Ile Thr Leu Arg Gln Pro

325 330 335

Ile Val Ile Cys Pro Met Asp Gln Gln Ala Cys Lys Glu Glu Ile Glu

340 345 350

Ala Ile Glu Gln Ala Ala Arg Asp Ala Ser Leu Val Asp Pro Asn His

355 360 365

Pro Tyr Thr Pro Ala Lys Thr Ile Val Leu Ala Ser His Glu Asn Ser

370 375 380

Leu Arg His Leu Gly Leu Cys Ile Val Gly Gly Gln Lys Lys Pro Leu

385 390 395 400

Ile Glu

<210> 4

<211> 1820

<212> DNA

<213> Magnaporthe oryzae

<400> 4

aacgatgccg atccgaatgg atgccacact gcattggacg cggtccaaat acagaaaacg 60

gtgcactgta catgaagcgg ttgctttctt agaggggtaa gttgcgtgac cagagcttct 120

accggtaaga ttaataccgt caaggaaagt gtgcatatat gaacagaagc cagaacagaa 180

acgccgaact atgtactgtg aaagaaagat aaatagaaga cgaaagaaag atgacgctac 240

agcaaaacaa ttcggcatca caggcaaggt cccagtttag actagaatgg acccaagtcc 300

agtacttgat gtacctactg cagcaagcgt gccttgaggt acattacgta cctacctagg 360

tagttcctag gtaggtaagg tatgtaggta cctatattcc taggtatgtt ccccaattga 420

gggagggacc taagctaata agaggtataa ttagactagg actttggtcc gccttgccgt 480

gtagtcctac gctccgtgcg acaagatgat gattcacgtc actaaaactt agatcagagc 540

aatatcaacc ggaccaacaa tcattctgtc aacaaagaca aggattgaac ctgctgaatt 600

tacactgtgt tttgtattcg gaatcaaggt acggagtaag actgtgtgtc tgggttctgg 660

cacagcttta atcggattgt tttggattgc tgtttggttg aatgtttcca cgagaaaata 720

tggattagcg atacaaagtc ttaccaaaga gaggtaaaat gggttttctt gtaactctaa 780

ttgtactcca tatggtctat tctagatgac gtgcctaagc aagctaccgg tagagactgc 840

cccagactgt tttttagcca ttagctaaat acggtaggta cctgcccggg tacctaggta 900

gcttagttaa ggtagcttag gtaaggtagg tacctagtta atgtaggtaa ggtacctacc 960

tacctttcta ctgtatactg aagttgaagg tgattctgtt gttgtgctct gctgtgggag 1020

tcgaaattct attattcatt ttagcaaaac atgaatcccc actggattgt ttgtttggtg 1080

tactctgttc cgcaagcaac acaccgactg ggcggcccgc tagtctatct agtgtcatct 1140

gctccaaggc gggcggctgt agcctagttc tccaccttgg tttgaatact aggtggcatt 1200

gttgcattgt tgggtaacct acgtgcgaaa agccgtttcc atccaattct gattttttcc 1260

tttgtctctg gcctgtctgt tgttttgttt tcggcacaca tgtagcctat cgagctaagg 1320

caattagcca cccaaacagt cacttcatag cacccgtggc gtgtacaggg tcctcgaacc 1380

cgggatcgat cgctgttgtc ggcagctttt caaagaaggt cggcgacgca tctaggtacc 1440

ttagttataa tctgccataa acagcctcgc ctgcccagag gttggtggct gcccgcccca 1500

catcgagagg ggacggatac gcacttgatt actccgtaca ggcttggttg cgcaccgcac 1560

ttgcctccac tccaccgatg gacgcctcgt gggtagcact tcattaagct ccctgttgct 1620

aggcgcagca aacaaccaac cgccgccgtc gccgtcgctc ccgattgcca tcttcctttg 1680

cctcacctca cttcacgaca gccaccaata ttctcgacgt tcttacctcg acgttcttac 1740

ctcgacagta tcctcacgaa gtcgctgttt accatcggtc gcttctcaag tagtggaggt 1800

caacaatgaa tgcctatttt 1820

<210> 5

<211> 1783

<212> DNA

<213> Magnaporthe oryzae

<400> 5

tcgtccgagg gcaaaggaat agagtagatg tgctgctcag tgtcttctca tgggtcgaat 60

gcaggctatg cctcgagctg tagacacagt caactaagga ggttggtgct gtgctcttgc 120

tggtctcaca attgtcctag gcagcacatt agcgatccga tttccactcg gctaccactg 180

ccagcatcgg ataaatagtt catcatccta taaagcagga cctggttgct gtggacagca 240

ttccgataca cctttccagc atacatagac ttataatcct gcagcaattg gactgggacg 300

tttcatcctc cactattcca actgggaaac ccatgtggta gaaacgcaga ttctatactc 360

agatagacgg ttcgcgtttt acataccaga gagatttatt tgatactacc aagtacttct 420

ttttcttcga acgacagatc gactggcaca ggtgttcacg tatcttactt tttactactt 480

cttttttttc tcggaatgat agcttggaca accactggtc tacatccgct ttgctgggca 540

ttggggctgt acatatccgt ctatggcgtg gtgttaaggc tggctttatg ggaagatcgt 600

tcgagcaggc aggcgtgtgg acatcaatat gagcatgata ataaatctta tttttcttcc 660

aatgctgttc agtaggaaat tcccggcttg tgttttgcca agcaagttgt acactaatag 720

ttgataagcg ggagtataca agacattttg acatactatc tgactccctg ccctacgtag 780

actgcatacg tgacttttcg aaagaaaggt aggtagatac ctaggtacct aggtaccttg 840

gtcaaacatt tggcgtgatt ggccatgaaa ttctacacgt catccacgtc caatgtatac 900

ttttcgacac cgaccgaagt atacttcatt ctatgcgcag ctgccaactg acctaccccc 960

ttcctcgtat ttcccccctg gcttgccatc agagcgtgcc atggtcaaat agcgatgaat 1020

agaccgtacg ataaacaacc aagcaagcca aggtaatttc tagtgacgat gataaacctg 1080

gcgacgagtg actctcgcgt aaccatggca cacgtgcaaa accggattca tacaaaacat 1140

ggaagaagaa gaaattttga tattaaagtt gaagcatttc tcaaggtcta atttgtatag 1200

tccagcttgt ccaatggctg ctttctgaat agcatgagta ccgggcgggg gttaacttga 1260

aagcaagctc tcatcagaga aagaatatga cttaactaca ttgctattat tgtgtttcaa 1320

tcttcacaag aacacgggga ttgcatctat gcatcatgaa tatcttgcca ccacatcaaa 1380

ttgattactt gggtagcatt tgatgcttac atggaacacg gataaacttg ctttacttgt 1440

attccttaag ttagaggtcc gttcctcccc actttcccct tcgtcagctg tctagtccta 1500

gcttggcatc gattacgtcc cttgaactac ctacctacct acctacctac ctaggtagtt 1560

gtatgcaacc tatcttttcg gaaccaccgg agctataatc aacagcaccc agagccaaat 1620

ctgactttca cctttgatga gaaaaaaccc catttcagag gcaggctcca aagagtgcga 1680

catggcaaca tcaacagtac gaatccgccg gagcgacttg catattcaaa aattccaagt 1740

ggaccaacgg acggttaagt cattaccatt gcgattatgt gcc 1783

<210> 6

<211> 1355

<212> DNA

<213> Magnaporthe oryzae

<400> 6

tagtggaggt caacaatgaa tgcctatttt ggtttagtcg tccaggcggt gagcacaaaa 60

tttgtgtcgt ttgacaagat ggttcattta ggcaactggt cagatcagcc ccacttgtag 120

cagtagcggc ggcgctcgaa gtgtgactct tattagcaga caggaacgag gacattatta 180

tcatctgctg cttggtgcac gataacttgg tgcgtttgtc aagcaaggta agtggacgac 240

ccggtcatac cttcttaagt tcgcccttcc tccctttatt tcagattcaa tctgacttac 300

ctattctacc caagcatcca aatgaaaaag cctgaactca ccgcgacgtc tgtcgagaag 360

tttctgatcg aaaagttcga cagcgtctcc gacctgatgc agctctcgga gggcgaagaa 420

tctcgtgctt tcagcttcga tgtaggaggg cgtggatatg tcctgcgggt aaatagctgc 480

gccgatggtt tctacaaaga tcgttatgtt tatcggcact ttgcatcggc cgcgctcccg 540

attccggaag tgcttgacat tggggagttc agcgagagcc tgacctattg catctcccgc 600

cgtgcacagg gtgtcacgtt gcaagacctg cctgaaaccg aactgcccgc tgttctccag 660

ccggtcgcgg aggccatgga tgcgatcgct gcggccgatc ttagccagac gagcgggttc 720

ggcccattcg gaccgcaagg aatcggtcaa tacactacat ggcgtgattt catatgcgcg 780

attgctgatc cccatgtgta tcactggcaa actgtgatgg acgacaccgt cagtgcgtcc 840

gtcgcgcagg ctctcgatga gctgatgctt tgggccgagg actgccccga agtccggcac 900

ctcgtgcatg cggatttcgg ctccaacaat gtcctgacgg acaatggccg cataacagcg 960

gtcattgact ggagcgaggc gatgttcggg gattcccaat acgaggtcgc caacatcctc 1020

ttctggaggc cgtggttggc ttgtatggag cagcagacgc gctacttcga gcggaggcat 1080

ccggagcttg caggatcgcc gcgcctccgg gcgtatatgc tccgcattgg tcttgaccaa 1140

ctctatcaga gcttggttga cggcaatttc gatgatgcag cttgggcgca gggtcgatgc 1200

gacgcaatcg tccgatccgg agccgggact gtcgggcgta cacaaatcgc ccgcagaagc 1260

gcggccgtct ggaccgatgg ctgtgtagaa gtactcgccg atagtggaaa ccgacgcccc 1320

agcactcgtc cgagggcaaa ggaatagagt agatg 1355

<210> 7

<211> 4508

<212> DNA

<213> Magnaporthe oryzae

<400> 7

atgaacagaa gccagaacag aaacgccgaa ctatgtactg tgaaagaaag ataaatagaa 60

gacgaaagaa agatgacgct acagcaaaac aattcggcat cacaggcaag gtcccagttt 120

agactagaat ggacccaagt ccagtacttg atgtacctac tgcagcaagc gtgccttgag 180

gtacattacg tacctaccta ggtagttcct aggtaggtaa ggtatgtagg tacctatatt 240

cctaggtatg ttccccaatt gagggaggga cctaagctaa taagaggtat aattagacta 300

ggactttggt ccgccttgcc gtgtagtcct acgctccgtg cgacaagatg atgattcacg 360

tcactaaaac ttagatcaga gcaatatcaa ccggaccaac aatcattctg tcaacaaaga 420

caaggattga acctgctgaa tttacactgt gttttgtatt cggaatcaag gtacggagta 480

agactgtgtg tctgggttct ggcacagctt taatcggatt gttttggatt gctgtttggt 540

tgaatgtttc cacgagaaaa tatggattag cgatacaaag tcttaccaaa gagaggtaaa 600

atgggttttc ttgtaactct aattgtactc catatggtct attctagatg acgtgcctaa 660

gcaagctacc ggtagagact gccccagact gttttttagc cattagctaa atacggtagg 720

tacctgcccg ggtacctagg tagcttagtt aaggtagctt aggtaaggta ggtacctagt 780

taatgtaggt aaggtaccta cctacctttc tactgtatac tgaagttgaa ggtgattctg 840

ttgttgtgct ctgctgtggg agtcgaaatt ctattattca ttttagcaaa acatgaatcc 900

ccactggatt gtttgtttgg tgtactctgt tccgcaagca acacaccgac tgggcggccc 960

gctagtctat ctagtgtcat ctgctccaag gcgggcggct gtagcctagt tctccacctt 1020

ggtttgaata ctaggtggca ttgttgcatt gttgggtaac ctacgtgcga aaagccgttt 1080

ccatccaatt ctgatttttt cctttgtctc tggcctgtct gttgttttgt tttcggcaca 1140

catgtagcct atcgagctaa ggcaattagc cacccaaaca gtcacttcat agcacccgtg 1200

gcgtgtacag ggtcctcgaa cccgggatcg atcgctgttg tcggcagctt ttcaaagaag 1260

gtcggcgacg catctaggta ccttagttat aatctgccat aaacagcctc gcctgcccag 1320

aggttggtgg ctgcccgccc cacatcgaga ggggacggat acgcacttga ttactccgta 1380

caggcttggt tgcgcaccgc acttgcctcc actccaccga tggacgcctc gtgggtagca 1440

cttcattaag ctccctgttg ctaggcgcag caaacaacca accgccgccg tcgccgtcgc 1500

tcccgattgc catcttcctt tgcctcacct cacttcacga cagccaccaa tattctcgac 1560

gttcttacct cgacgttctt acctcgacag tatcctcacg aagtcgctgt ttaccatcgg 1620

tcgcttctca agtagtggag gtcaacaatg aatgcctatt ttggtttagt cgtccaggcg 1680

gtgagcacaa aatttgtgtc gtttgacaag atggttcatt taggcaactg gtcagatcag 1740

ccccacttgt agcagtagcg gcggcgctcg aagtgtgact cttattagca gacaggaacg 1800

aggacattat tatcatctgc tgcttggtgc acgataactt ggtgcgtttg tcaagcaagg 1860

taagtggacg acccggtcat accttcttaa gttcgccctt cctcccttta tttcagattc 1920

aatctgactt acctattcta cccaagcatc caaatgaaaa agcctgaact caccgcgacg 1980

tctgtcgaga agtttctgat cgaaaagttc gacagcgtct ccgacctgat gcagctctcg 2040

gagggcgaag aatctcgtgc tttcagcttc gatgtaggag ggcgtggata tgtcctgcgg 2100

gtaaatagct gcgccgatgg tttctacaaa gatcgttatg tttatcggca ctttgcatcg 2160

gccgcgctcc cgattccgga agtgcttgac attggggagt tcagcgagag cctgacctat 2220

tgcatctccc gccgtgcaca gggtgtcacg ttgcaagacc tgcctgaaac cgaactgccc 2280

gctgttctcc agccggtcgc ggaggccatg gatgcgatcg ctgcggccga tcttagccag 2340

acgagcgggt tcggcccatt cggaccgcaa ggaatcggtc aatacactac atggcgtgat 2400

ttcatatgcg cgattgctga tccccatgtg tatcactggc aaactgtgat ggacgacacc 2460

gtcagtgcgt ccgtcgcgca ggctctcgat gagctgatgc tttgggccga ggactgcccc 2520

gaagtccggc acctcgtgca tgcggatttc ggctccaaca atgtcctgac ggacaatggc 2580

cgcataacag cggtcattga ctggagcgag gcgatgttcg gggattccca atacgaggtc 2640

gccaacatcc tcttctggag gccgtggttg gcttgtatgg agcagcagac gcgctacttc 2700

gagcggaggc atccggagct tgcaggatcg ccgcgcctcc gggcgtatat gctccgcatt 2760

ggtcttgacc aactctatca gagcttggtt gacggcaatt tcgatgatgc agcttgggcg 2820

cagggtcgat gcgacgcaat cgtccgatcc ggagccggga ctgtcgggcg tacacaaatc 2880

gcccgcagaa gcgcggccgt ctggaccgat ggctgtgtag aagtactcgc cgatagtgga 2940

aaccgacgcc ccagcactcg tccgagggca aaggaataga gtagatgtgc tgctcagtgt 3000

cttctcatgg gtcgaatgca ggctatgcct cgagctgtag acacagtcaa ctaaggaggt 3060

tggtgctgtg ctcttgctgg tctcacaatt gtcctaggca gcacattagc gatccgattt 3120

ccactcggct accactgcca gcatcggata aatagttcat catcctataa agcaggacct 3180

ggttgctgtg gacagcattc cgatacacct ttccagcata catagactta taatcctgca 3240

gcaattggac tgggacgttt catcctccac tattccaact gggaaaccca tgtggtagaa 3300

acgcagattc tatactcaga tagacggttc gcgttttaca taccagagag atttatttga 3360

tactaccaag tacttctttt tcttcgaacg acagatcgac tggcacaggt gttcacgtat 3420

cttacttttt actacttctt ttttttctcg gaatgatagc ttggacaacc actggtctac 3480

atccgctttg ctgggcattg gggctgtaca tatccgtcta tggcgtggtg ttaaggctgg 3540

ctttatggga agatcgttcg agcaggcagg cgtgtggaca tcaatatgag catgataata 3600

aatcttattt ttcttccaat gctgttcagt aggaaattcc cggcttgtgt tttgccaagc 3660

aagttgtaca ctaatagttg ataagcggga gtatacaaga cattttgaca tactatctga 3720

ctccctgccc tacgtagact gcatacgtga cttttcgaaa gaaaggtagg tagataccta 3780

ggtacctagg taccttggtc aaacatttgg cgtgattggc catgaaattc tacacgtcat 3840

ccacgtccaa tgtatacttt tcgacaccga ccgaagtata cttcattcta tgcgcagctg 3900

ccaactgacc tacccccttc ctcgtatttc ccccctggct tgccatcaga gcgtgccatg 3960

gtcaaatagc gatgaataga ccgtacgata aacaaccaag caagccaagg taatttctag 4020

tgacgatgat aaacctggcg acgagtgact ctcgcgtaac catggcacac gtgcaaaacc 4080

ggattcatac aaaacatgga agaagaagaa attttgatat taaagttgaa gcatttctca 4140

aggtctaatt tgtatagtcc agcttgtcca atggctgctt tctgaatagc atgagtaccg 4200

ggcgggggtt aacttgaaag caagctctca tcagagaaag aatatgactt aactacattg 4260

ctattattgt gtttcaatct tcacaagaac acggggattg catctatgca tcatgaatat 4320

cttgccacca catcaaattg attacttggg tagcatttga tgcttacatg gaacacggat 4380

aaacttgctt tacttgtatt ccttaagtta gaggtccgtt cctccccact ttccccttcg 4440

tcagctgtct agtcctagct tggcatcgat tacgtccctt gaactaccta cctacctacc 4500

tacctacc 4508

Claims

1.源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1，其特征是：所述的真菌致病性基因Moarrdc1的核苷酸序列或其互补链的核苷酸序列为SEQ ID NO：1。

2.如权利要求1所述的源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1，其特征是：所述真菌致病性基因Moarrdc1编码的cDNA序列具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。

3.如权利要求1所述的源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1，其特征是：所述真菌致病性基因Moarrdc1编码的蛋白质具有SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列。

4.如权利要求1所述的源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1的用途，其特征是：所述的基因。

5.如权利要求1所述的源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1的用途，其特征是：基因Moarrdc1的表达作为用于设计和筛选抗真菌药物的靶标。

6.如权利要求3所述的源于稻瘟病菌的真菌致病性基因Moarrdc1的用途，其特征是：所述基因Moarrdc1编码的蛋白质的表达和修饰作为设计和筛选抗真菌药物的靶标。