CN106046078A - 一种从油橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从油橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法，属于植物提取技术领域。本发明将预处理油橄榄叶粉末通过粳米和糯米发酵液进行提取，并加入纤维素酶以及果胶酶，使得油橄榄叶粉末中有效成份进一步释放，之后经过离心分离，旋蒸浓缩并干燥，从而得到从油橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法。实例证明，本发明操作简单易行，原料简单易得，利用粳米和糯米发酵液代替有机溶解，使得得到的橄榄苦苷中无任何有机溶剂残留物，安全健康，最终使得从油橄榄叶中提取得到的橄榄苦苷纯度高达85％以上，得率达到90％以上，可广泛可用于食品、药品的生产，适合工业化生产。

Description

一种从油橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法

技术领域

本发明公开了一种从油橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法，属于植物提取技术领域。

背景技术

橄榄苦苷是一种裂环环烯醚萜苷类化合物，在至少25种木犀科植物中存在。橄榄苦苷又是一个具有较强生物活性的化合物，文献报道其具有显著的抗真菌、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗癌和降血糖等多种生物活性，另外，橄榄苦苷还具有抗心律失常和解痉作用，是一种作用效果较好的血管紧张素转化酶抑制剂；橄榄苦苷还能够激活胃蛋白酶并降低其他霉的活性；橄榄苦苷还能减少肝细胞中由离子诱导的脂质过氧化作用产生的丙醛酸。

橄榄苦苷具有以下的功效：1、可以阻止细胞和病毒的生长，并刺激免疫系统中重要细胞的活性，以抵抗感染；2、对膀胱和微菌感染也极为有效；3、它有抗氧化能力，能减轻低密度脂蛋白的氧化程度，预防冠心病，动脉样硬化的发生；4、保持健康的血压和胆固醇水平，有舒缓血管平滑肌，降低血压的能力。

橄榄苦苷使用具有广阔的前景，具体包括：1、制药，用于制造治疗病毒、细菌、寄生虫和吸血虫等所引起的疾病的新药，和治疗感冒的新药；2、护肤品，用于护肤品中可以促进肌肤原蛋白再生，自然抵御由氧化而导致肌肤的破坏。

提取方法主要有热提取、超声波辅助提取、微波辅助提取等。这些方法均存在一定的技术缺陷，例如耗能大、耗材多、提取温度高导致橄榄苦苷易分解等。

另外，采用现有的提取方法从油橄榄叶中提取橄榄苦苷，提取物中橄榄苦苷的含量一般在10～40％，提取效果不佳，提取物中的橄榄苦苷含量较低，且橄榄叶的利用度不高；且在提取的过程中，有机溶剂消耗大，有些溶解带有毒性，使得得到的产品中有机溶剂残留量大，不能够广泛应用。

发明内容

本发明主要解决的技术问题：针对目前传统方法在提取橄榄苦苷的过程中，有机溶剂消耗大，使得得到的产物中含有大量有机溶剂残留物，不能够广泛应用，另外提取物中橄榄苦苷的含量较低，提取效果不佳的现状，提供了一种将预处理油橄榄叶粉末通过粳米和糯米发酵液进行提取，并加入纤维素酶以及果胶酶，使得油橄榄叶粉末中有效成份充分释放，之后经过离心分离，旋蒸浓缩并干燥，从而得到从油橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法。该方法操作简单易行，原料简单易得，利用粳米和糯米发酵液代替有机溶解，使得得到的橄榄苦苷中无任何有机溶剂残留物，安全健康，最终使得从油橄榄叶中提取得到的橄榄苦苷纯度高达85％以上，得率达到90％以上，可广泛可用于食品、药品的生产，适合工业化生产。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

（1）称取300～500g新鲜油橄榄叶，用去离子水洗涤3～5次，去除表面残留污物后，用液氮冷却处理3～5min，迅速取出，立即将其平铺于石磨磨盘上，研磨5～10min，收集研磨所得物料，将其转入密闭容器中，在室温条件下，减压至60～70kPa真空度，保压10～20min，得预处理油橄榄叶粉末，备用；

（2）依次称取0.8～1.0kg粳米和3～5kg糯米，人工混匀后，用去离子水洗涤3～5次，再将其转入蒸笼中，在90～95℃条件下蒸煮60～80min，随后将其平铺于竹席上，自然冷却至45～55℃；

（3）将冷却后的粳米和糯米转入盛有4～6L去离子水的发酵罐中，再加入15～30g酿酒酵母粉，用消毒的木棍搅拌10～20min后，将发酵罐密封，并在发酵罐周围铺设1～3层草稻草，密封发酵8～10个月，收集上清液；

（4）在反应釜中，依次加入600～800mL上述上清液，60～80g步骤（1）备用预处理油橄榄叶粉末，2～3g纤维素酶和2～3g果胶酶，加热升温至37～45℃，启动搅拌器，以600～800r/min转速搅拌反应3～5h，再将其转入超声振荡仪，以200～400W功率超声处理40～60min；

（5）待超声处理结束，离心分离，收集上清液，将其置于旋转蒸发器中，于75～85℃下，旋蒸浓缩3～4h，得浓缩液，再将其转入真空干燥箱中，在60～80℃干燥16～24h，即得橄榄苦苷。

本发明的应用方法是：将本发明制得的橄榄苦苷放入护肤乳液中，其中每100～200mL乳液中加入5～10g，充分混合均匀，使用时，取3～5mL混合液涂抹脸部，建议每天早晚洁面后涂抹，坚持使用10～15天，可明显感觉皮肤细腻弹性，长期使用可以促进肌肤原蛋白再生，可自然抵御由氧化而导致肌肤的破坏。

本发明的有益效果是：

（1）本发明方法独特新颖，在操作过程中，利用液氮冷却橄榄叶，使得细胞中水瞬间凝结成冰，通过研磨施压使橄榄叶细胞壁破裂，细胞中有效成分得以释放；

（2）本发明中利用低温降低水解酶活性，保护油橄榄叶中有效成份不易水解，另外研磨后立即减压，使冰升华，去除水份，并加入纤维素酶和果胶酶，使其中有效成份更加得到释放，提高提取率；

（3）本发明最终得到的橄榄苦苷中无任何有机溶剂残留物，安全健康，纯度高达85％以上，得率达到90％以上，可广泛可用于食品、药品的生产。

具体实施方式

首先称取300～500g新鲜油橄榄叶，用去离子水洗涤3～5次，去除表面残留污物后，用液氮冷却处理3～5min，迅速取出，立即将其平铺于石磨磨盘上，研磨5～10min，收集研磨所得物料，将其转入密闭容器中，在室温条件下，减压至60～70kPa真空度，保压10～20min，得预处理油橄榄叶粉末，备用；随后依次称取0.8～1.0kg粳米和3～5kg糯米，人工混匀后，用去离子水洗涤3～5次，再将其转入蒸笼中，在90～95℃条件下蒸煮60～80min，随后将其平铺于竹席上，自然冷却至45～55℃；之后将冷却后的粳米和糯米转入盛有4～6L去离子水的发酵罐中，再加入15～30g酿酒酵母粉，用消毒的木棍搅拌10～20min后，将发酵罐密封，并在发酵罐周围铺设1～3层草稻草，密封发酵8～10个月，收集上清液；接下来在反应釜中，依次加入600～800mL上述上清液，60～80g上述备用预处理油橄榄叶粉末，2～3g纤维素酶和2～3g果胶酶，加热升温至37～45℃，启动搅拌器，以600～800r/min转速搅拌反应3～5h，再将其转入超声振荡仪，以200～400W功率超声处理40～60min；最后待超声处理结束，离心分离，收集上清液，将其置于旋转蒸发器中，于75～85℃下，旋蒸浓缩3～4h，得浓缩液，再将其转入真空干燥箱中，在60～80℃干燥16～24h，即得橄榄苦苷。

实例1

首先称取300g新鲜油橄榄叶，用去离子水洗涤3次，去除表面残留污物后，用液氮冷却处理3min，迅速取出，立即将其平铺于石磨磨盘上，研磨5min，收集研磨所得物料，将其转入密闭容器中，在室温条件下，减压至60kPa真空度，保压10min，得预处理油橄榄叶粉末，备用；随后依次称取0.8kg粳米和3kg糯米，人工混匀后，用去离子水洗涤3次，再将其转入蒸笼中，在90℃条件下蒸煮60min，随后将其平铺于竹席上，自然冷却至45℃；之后将冷却后的粳米和糯米转入盛有4L去离子水的发酵罐中，再加入15g酿酒酵母粉，用消毒的木棍搅拌10min后，将发酵罐密封，并在发酵罐周围铺设1层草稻草，密封发酵8个月，收集上清液；接下来在反应釜中，依次加入600mL上述上清液，60g上述备用预处理油橄榄叶粉末，2g纤维素酶和2g果胶酶，加热升温至37℃，启动搅拌器，以600r/min转速搅拌反应3h，再将其转入超声振荡仪，以200W功率超声处理40min；最后待超声处理结束，离心分离，收集上清液，将其置于旋转蒸发器中，于75℃下，旋蒸浓缩3h，得浓缩液，再将其转入真空干燥箱中，在60℃干燥16h，即得橄榄苦苷。

本实例操作简单易行，将本发明制得的橄榄苦苷放入护肤乳液中，其中每100mL乳液中加入5g，充分混合均匀，使用时，取3mL混合液涂抹脸部，建议每天早晚洁面后涂抹，坚持使用10天，可明显感觉皮肤细腻弹性，长期使用可以促进肌肤原蛋白再生，可自然抵御由氧化而导致肌肤的破坏。

实例2

首先称取400g新鲜油橄榄叶，用去离子水洗涤4次，去除表面残留污物后，用液氮冷却处理4min，迅速取出，立即将其平铺于石磨磨盘上，研磨8min，收集研磨所得物料，将其转入密闭容器中，在室温条件下，减压至65kPa真空度，保压15min，得预处理油橄榄叶粉末，备用；随后依次称取0.9kg粳米和4kg糯米，人工混匀后，用去离子水洗涤4次，再将其转入蒸笼中，在93℃条件下蒸煮70min，随后将其平铺于竹席上，自然冷却至50℃；之后将冷却后的粳米和糯米转入盛有5L去离子水的发酵罐中，再加入25g酿酒酵母粉，用消毒的木棍搅拌15min后，将发酵罐密封，并在发酵罐周围铺设2层草稻草，密封发酵9个月，收集上清液；接下来在反应釜中，依次加入700mL上述上清液，70g上述备用预处理油橄榄叶粉末，2.5g纤维素酶和2.5g果胶酶，加热升温至42℃，启动搅拌器，以700r/min转速搅拌反应4h，再将其转入超声振荡仪，以300W功率超声处理50min；最后待超声处理结束，离心分离，收集上清液，将其置于旋转蒸发器中，于80℃下，旋蒸浓缩3.5h，得浓缩液，再将其转入真空干燥箱中，在70℃干燥22h，即得橄榄苦苷。

本实例操作简单易行，将本发明制得的橄榄苦苷放入护肤乳液中，其中每150mL乳液中加入8g，充分混合均匀，使用时，取4mL混合液涂抹脸部，建议每天早晚洁面后涂抹，坚持使用13天，可明显感觉皮肤细腻弹性，长期使用可以促进肌肤原蛋白再生，可自然抵御由氧化而导致肌肤的破坏。

实例3

首先称取500g新鲜油橄榄叶，用去离子水洗涤5次，去除表面残留污物后，用液氮冷却处理5min，迅速取出，立即将其平铺于石磨磨盘上，研磨10min，收集研磨所得物料，将其转入密闭容器中，在室温条件下，减压至70kPa真空度，保压20min，得预处理油橄榄叶粉末，备用；随后依次称取1.0kg粳米和5kg糯米，人工混匀后，用去离子水洗涤5次，再将其转入蒸笼中，在95℃条件下蒸煮80min，随后将其平铺于竹席上，自然冷却至55℃；之后将冷却后的粳米和糯米转入盛有6L去离子水的发酵罐中，再加入30g酿酒酵母粉，用消毒的木棍搅拌20min后，将发酵罐密封，并在发酵罐周围铺设3层草稻草，密封发酵10个月，收集上清液；接下来在反应釜中，依次加入800mL上述上清液，80g上述备用预处理油橄榄叶粉末，3g纤维素酶和3g果胶酶，加热升温至45℃，启动搅拌器，以800r/min转速搅拌反应5h，再将其转入超声振荡仪，以400W功率超声处理60min；最后待超声处理结束，离心分离，收集上清液，将其置于旋转蒸发器中，于85℃下，旋蒸浓缩4h，得浓缩液，再将其转入真空干燥箱中，在80℃干燥24h，即得橄榄苦苷。

本实例操作简单易行，将本发明制得的橄榄苦苷放入护肤乳液中，其中每200mL乳液中加入10g，充分混合均匀，使用时，取5mL混合液涂抹脸部，建议每天早晚洁面后涂抹，坚持使用15天，可明显感觉皮肤细腻弹性，长期使用可以促进肌肤原蛋白再生，可自然抵御由氧化而导致肌肤的破坏。

Claims (1)

1.一种从油橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法，其特征在于具体操作步骤为：

（1）称取300～500g新鲜油橄榄叶，用去离子水洗涤3～5次，去除表面残留污物后，用液氮冷却处理3～5min，迅速取出，立即将其平铺于石磨磨盘上，研磨5～10min，收集研磨所得物料，将其转入密闭容器中，在室温条件下，减压至60～70kPa真空度，保压10～20min，得预处理油橄榄叶粉末，备用；

（2）依次称取0.8～1.0kg粳米和3～5kg糯米，人工混匀后，用去离子水洗涤3～5次，再将其转入蒸笼中，在90～95℃条件下蒸煮60～80min，随后将其平铺于竹席上，自然冷却至45～55℃；

（3）将冷却后的粳米和糯米转入盛有4～6L去离子水的发酵罐中，再加入15～30g酿酒酵母粉，用消毒的木棍搅拌10～20min后，将发酵罐密封，并在发酵罐周围铺设1～3层草稻草，密封发酵8～10个月，收集上清液；

（4）在反应釜中，依次加入600～800mL上述上清液，60～80g步骤（1）备用预处理油橄榄叶粉末，2～3g纤维素酶和2～3g果胶酶，加热升温至37～45℃，启动搅拌器，以600～800r/min转速搅拌反应3～5h，再将其转入超声振荡仪，以200～400W功率超声处理40～60min；

（5）待超声处理结束，离心分离，收集上清液，将其置于旋转蒸发器中，于75～85℃下，旋蒸浓缩3～4h，得浓缩液，再将其转入真空干燥箱中，在60～80℃干燥16～24h，即得橄榄苦苷。