CN106018032A - 一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液 - Google Patents

一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液 Download PDF

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孙玲敏
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Abstract

本发明公开了一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，包括以下重量份的组分：磷酸二氢钾3～4份，磷酸氢二钠14～16份，水补齐剩余量至2000份，其制备方法为S1：保持配制室恒温，称取相应重量份的磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，分别加水溶解，并转移至同一容量瓶中，用水定容，即得混合溶液；S2：用磷酸调节pH值在7～8.5；S3：高压灭菌，放冷至室温后转移至试剂瓶中，即得一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，缓冲液密封保存在0～4℃的冰箱中，备用。本发明提出的缓冲液能有效提高外周染色体制片的成功率，提高工作效率，降低染色体玻片的重滴率，降低实验人员的工作量，减少试剂损耗，降低制片成本。

Description

一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液
技术领域
本发明涉及缓冲液技术领域，尤其涉及一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液。
背景技术
在生物学和植物学实验中经常需要进行染色体的制片，在外周血染色体制片过程中常会遇到细胞和染色体有蓝色背景的情况，影响制片的效果和制片的成功率，使得染色体制片过程中染色体玻片的重滴率普遍较高，导致染色体制片的成功率较低，既造成实验试剂的损耗，又使得实验人员的工作量增加，同时还耽误实验进度，降低工作效率。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液。
一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，包括以下重量份的组分：磷酸二氢钾3～4份，磷酸氢二钠14～16份，水补齐剩余量至2000份。
一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，包括以下重量份的组分：磷酸二氢钾3.5份，磷酸氢二钠14.6份，水补齐剩余量至2000份。
优选的，所述磷酸二氢钾与磷酸氢二钠的物质的量的比为1∶3.5～4.5。
优选的，所述水为现配的去离子水或双蒸水中的一种，且pH值在6.5～7。
本发明还提出一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：将配制室温度调至20～30℃，并保持恒温，称取相应重量份的磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，分别加入适量的水，搅拌使固体溶解，分别将磷酸二氢钾溶液和磷酸氢二钠溶液转移至同一容量瓶中，并用水定容至刻度线，即得混合溶液；
S2：将上述混合溶液置于烧杯中，用磷酸调节pH值在7～8.5；
S3：将上述调节好pH值的混合溶液转移至高压灭菌室进行高压灭菌，放冷至室温后转移至试剂瓶中，即得一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，且该缓冲液密封保存在0～4℃的冰箱中，备用。
本发明提出的缓冲液能有效提高外周染色体制片的成功率，提高工作效率，降低染色体玻片的重滴率，使制片实验的一次性通过率高，降低实验人员的工作量，减少试剂损耗，避免重新制片造成的人力物力损耗，降低制片成本，而且还提出了一种简单的制备缓冲液的方法，制备过程简单，配制的缓冲液较稳定，一次配制可连续使用几天。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
实施例一
本发明提出的一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，包括以下重量份的组分：磷酸二氢钾3.5份，磷酸氢二钠14.6份，双蒸水补齐剩余量至2000份。
其制作方法，包括以下步骤：
S1：将配制室温度调至25℃，并保持恒温，称取相应重量份的磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，分别加入适量的双蒸水，搅拌使固体溶解，分别将磷酸二氢钾溶液和磷酸氢二钠溶液转移至同一容量瓶中，并用双蒸水定容至刻度线，即得混合溶液；
S2：将上述混合溶液置于烧杯中，用磷酸调节pH值在7.5；
S3：将上述调节好pH值的混合溶液转移至高压灭菌室进行高压灭菌，放冷至室温后转移至试剂瓶中，即得一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，且该缓冲液密封保存在2℃的冰箱中，备用。
实施例二
本发明提出的一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，包括以下重量份的组分：磷酸二氢钾4份，磷酸氢二钠16份，水补齐剩余量至2000份。
其制作方法，包括以下步骤：
S1：将配制室温度调至30℃，并保持恒温，称取相应重量份的磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，分别加入适量的水，搅拌使固体溶解，分别将磷酸二氢钾溶液和磷酸氢二钠溶液转移至同一容量瓶中，并用水定容至刻度线，即得混合溶液；
S2：将上述混合溶液置于烧杯中，用磷酸调节pH值在8；
S3：将上述调节好pH值的混合溶液转移至高压灭菌室进行高压灭菌，放冷至室温后转移至试剂瓶中，即得一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，且该缓冲液密封保存在0℃的冰箱中，备用。
实施例三
本发明提出的一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，包括以下重量份的组分：磷酸二氢钾3份，磷酸氢二钠14份，水补齐剩余量至2000份。
其制作方法，包括以下步骤：
S1：将配制室温度调至20℃，并保持恒温，称取相应重量份的磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，分别加入适量的水，搅拌使固体溶解，分别将磷酸二氢钾溶液和磷酸氢二钠溶液转移至同一容量瓶中，并用水定容至刻度线，即得混合溶液；
S2：将上述混合溶液置于烧杯中，用磷酸调节pH值在8.5；
S3：将上述调节好pH值的混合溶液转移至高压灭菌室进行高压灭菌，放冷至室温后转移至试剂瓶中，即得一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，且该缓冲液密封保存在0℃的冰箱中，备用。
10名实验人员分别对于同一品种进行外周染色体制片，在制片过程中分别使用实施例一～实施例三制备的缓冲液进行试验，且缓冲液为现配，记录重滴个数，实验结果如下：
患者情况 制片个数 重滴个数 重滴率
实施例一 300 3 1.0％
实施例二 300 5 1.7％
实施例三 300 6 2.0％
由上述相同实验人员对于同一品种进行外周染色体制片，在制片过程中分别使用实施例一～实施例三制备的缓冲液进行试验，且缓冲液贮存在冰箱中3天，记录重滴个数，实验结果如下：
患者情况 制片个数 重滴个数 重滴率
实施例一 300 4 1.3％
实施例二 300 5 1.7％
实施例三 300 7 2.3％
本发明提出的缓冲液能有效提高外周染色体制片的成功率，提高工作效率，降低染色体玻片的重滴率，使制片实验的一次性通过率高，降低实验人员的工作量，减少试剂损耗，避免重新制片造成的人力物力损耗，降低制片成本，而且还提出了一种简单的制备缓冲液的方法，制备过程简单，配制的缓冲液较稳定，一次配制可连续使用几天。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，其特征在于，包括以下重量份的组分：磷酸二氢钾3～4份，磷酸氢二钠14～16份，水补齐剩余量至2000份。
2.一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，其特征在于，包括以下重量份的组分：磷酸二氢钾3.5份，磷酸氢二钠14.6份，水补齐剩余量至2000份。
3.根据权利要求1所述的一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，其特征在于，所述磷酸二氢钾与磷酸氢二钠的物质的量的比为1∶3.5～4.5。
4.根据权利要求1所述的一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，其特征在于，所述水为现配的去离子水或双蒸水中的一种，且pH值在6.5～7。
5.一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：将配制室温度调至20～30℃，并保持恒温，称取相应重量份的磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，分别加入适量的水，搅拌使固体溶解，分别将磷酸二氢钾溶液和磷酸氢二钠溶液转移至同一容量瓶中，并用水定容至刻度线，即得混合溶液；
S2：将上述混合溶液置于烧杯中，用磷酸调节pH值在7～8.5；
S3：将上述调节好pH值的混合溶液转移至高压灭菌室进行高压灭菌，放冷至室温后转移至试剂瓶中，即得一种提高制备染色体玻片成功率的缓冲液，且该缓冲液密封保存在0～4℃的冰箱中，备用。
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