CN106011215A - 一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法 - Google Patents

一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106011215A
CN106011215A CN201610592127.6A CN201610592127A CN106011215A CN 106011215 A CN106011215 A CN 106011215A CN 201610592127 A CN201610592127 A CN 201610592127A CN 106011215 A CN106011215 A CN 106011215A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fermentation
preparation
ldx1
flocculant
klebsiella
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610592127.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106011215B (zh
Inventor
栾兴社
姜国辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Yaodong Biological Engineering Co. Ltd.
Original Assignee
Rizhao Clean Water Biological Science And Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Rizhao Clean Water Biological Science And Technology Co Ltd filed Critical Rizhao Clean Water Biological Science And Technology Co Ltd
Priority to CN201610592127.6A priority Critical patent/CN106011215B/zh
Publication of CN106011215A publication Critical patent/CN106011215A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106011215B publication Critical patent/CN106011215B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P39/00—Processes involving microorganisms of different genera in the same process, simultaneously
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/08—Seawater, e.g. for desalination
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/20—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from animal husbandry

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Separation Of Suspended Particles By Flocculating Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法。该方法以克雷伯氏菌LDX1‑1和野油菜黄单孢菌CICC10258的混合菌种，采用无拮抗兼容性摇瓶与高镁发酵培养基发酵协同发酵，发酵完成后采用混合盐进行凝胶化强度处理。该制备方法发酵速度快，工艺易于操作，发酵浓度高，生产成本低。生产的絮凝剂用于处理高盐度高浮力海水具有结构稳定，絮块致密，沉降速度快的特点，对养殖海水净化具有显著效果。

Description

一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法
技术领域
本发明涉及一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，属于生物技术与生物工程技术领域。
背景技术
随着中国海水养殖业的迅猛发展，沿海育苗场及养殖场废水排放量与日俱增，从而造成近海水域水质恶化，或富营养化、生态系统失衡，导致了养殖病害滋生、赤潮频发。近海水域污染严重地破坏了海洋生态环境和影响了广大沿海地区的可持续性经济发展。海水养殖废水包括来源于粪便和饲料的颗粒态固体废物，溶解态代谢废物，无机盐、抗微生物剂和药物的残留等。海水养殖废水不同于工业废水和生活污水的是，具有盐度效应和污染物的含量低、水量大的特点，这就增加了其废水的处理难度。因此，研究有效的养殖海水处理技术已成为当今社会经济发展的强烈需求。
现在的物理处理技术，如沉淀、过滤可去除养殖海水中的悬浮物和部分COD、BOD，但对可溶性有机物、无机物及总N、P等的去除效果不佳。化学处理方法，如漂白粉、孔雀石绿等水质改良剂虽然也能对养殖后的海水进行一定的处理，但这些方法会对水质环境产生二次污染。臭氧法是一种既能够消除水中的污染物、改善水质而又对环境友好的处理方法，但臭氧氧化技术的不足之处是处理成本较高，残留的臭氧还会对养殖对象产生一定的毒性作用。养殖海水的生物净化处理技术研究日益受到社会的关注。生物处理技术是利用微生物的吸收、代谢作用去除水体中有机物和氨氮，与物化技术相比具有投资低、不易产生二次污染等优点，是处理溶解态污染物较为经济有效的方式。但由于养殖海水污染物负荷低和存在的功能菌数目少，造成菌体与污染物不能有效的聚集，故发挥不出良好的反应效果。
中国发明专利“海水养殖废水反硝化净化方法”(申请人：大连水产学院，申请号：200810230123.9)和中国发明专利“海水微生物絮凝剂的制备方法”(申请人：国家海洋局，申请号：201010247147.2)公开了养殖海水的生物处理方法，但存在着效果单一、规模化应用困难和生产周期长、处理剂用量大的不足。
发明内容
本发明的目的是针对现有方法的缺陷和满足养殖海水规模化高效生物净化的市场需求，提供一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法。该方法以克雷伯氏菌LDX1-1和野油菜黄单孢菌CICC10258的混合菌种，采用无拮抗兼容性摇瓶与高镁发酵培养基发酵协同发酵，发酵完成后采用混合盐进行凝胶化强度处理。该制备方法发酵速度快，工艺易于操作，发酵浓度高，生产成本低。生产的絮凝剂用于处理高盐度高浮力海水具有结构稳定，絮块致密，沉降速度快的特点，对养殖海水净化具有显著效果。
本发明的技术方案是：一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，其特征是，
(1)生产菌种的扩大培养
斜面菌种培养：将克雷伯氏菌LDX1-1(CGMCC No.11330)、野油菜黄单孢菌CICC10258，分别接种斜面培养基，24-32℃各培养24-48h；
摇瓶菌种扩大培养：将上述克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258斜面菌苔分别接种摇瓶培养基，搅匀，24-30℃培养10-18h，分别得到克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258摇瓶扩大培养液体菌种备用；
(2)发酵培养(高浓度镁盐发酵)
将发酵培养基按体积比1.5％-4.0％的接种量接种克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258混合摇瓶扩大培养液体菌种(两菌种体积比为5-7：3-5)，采取高浓度镁盐、双菌种协同发酵，发酵时间为20-30h；
(3)发酵液处理(凝胶化)
将发酵液过滤去除菌体及其它杂质，加入混合盐(NaCl 85％+CaCl2 15％)至终浓度为1.0％-3.0％，升温至50-80℃，维持15-30min后将温度快速降至17-30℃，得到液体微生物絮凝剂。
将液体微生物絮凝剂加入1.5-2.5倍体积的乙醇(浓度≥90％)醇沉，得沉淀；将沉淀用离心机离心，乙醇洗涤后再经真空干燥至水分小于5％，用粉碎机粉碎后，得到固体微生物絮凝剂。发酵制备的微生物絮凝剂经测定分析，发酵产量≥2.4％(即≥24g絮凝剂/L发酵液)，絮凝率≥93％。
各培养基成分如下：
克雷伯氏菌(Klebsilla sp.)LDX1-1斜面培养基：蔗糖10-15g/L，NH4NO3 1.5-2.5g/L，K2HPO4 0.8-1.3g/L，MgSO4 0.2-0.9g/L，NaCl 0.3-0.8g/L，FeSO4 0.01-0.03g/L，琼脂粉1.5％。
野油菜黄单孢菌(Xanthomonas campestris)CICC10258斜面培养基：蛋白胨3-7g/L，牛肉膏2-5g/L，氯化钠3-7g/L，琼脂粉1.5％。
摇瓶培养基：(蔗糖60％+葡萄糖40％)10-20g/L，混和氮源(NH4NO3 55％+((NH4)2SO445％)2.1-4.0g/L，K2HPO4 0.8-1.5g/L，MgSO4 0.4-1.0g/L，NaCl 0.3-0.9g/L，FeSO4 0.01-0.03g/L。
发酵罐培养基：蔗糖25-40g/L，玉米淀粉12-25g/L，混和氮源(NH4NO3 55％+((NH4)2SO445％)2.0-3.9g/L，K2HPO4 0.8-1.5g/L，MgSO4 7-18g/L，NaCl 0.3-1.0g/L，FeSO4 0.01-0.04g/L，MnSO4 0.01-0.05g/L。其中硫酸镁按总量20％、35％、45％的比例分别在配制发酵培养基时、发酵培养6h和发酵培养9h时三个时间段加入培养基中。
所述步骤(2)发酵罐控制的条件为：无菌空气通风比为0.25-0.7VVM，搅拌转速为120-350r/min，发酵温度为24-32℃，罐压为0.01-0.03MPa。
该微生物絮凝剂的使用方法为：以适当的浓度按需要量在同时混合的条件下直接加入养殖海水、藻类细胞培养液、污染海水等中。
针对养殖海水：微生物絮凝剂使用量(干重)为每吨水3-6g，SS絮凝率≥91％。
针对藻类细胞培养液：微生物絮凝剂使用量(干重)为每吨水4-7g，藻细胞回收率≥93％。
本发明的技术效果是：
(1)本发明采用无拮抗兼容性摇瓶培养基与发酵培养基，适合克雷伯氏菌LDX1-1和野油菜黄单孢菌CICC10258混合菌种生长。本发明采用高镁发酵促进酰基化，基团修饰，结构改造，乙酰化程度明显提高。本发明采用混合盐凝胶化强度处理，提高了产品的絮凝沉降速度。
(2)相比克雷伯氏菌LDX1-1单菌发酵，本发明采用克雷伯氏菌LDX1-1和野油菜黄单孢菌CICC10258混合菌种发酵，产量提高20％，絮凝率提高8％，产品乙酰化取代度提高110％，稳定性和凝胶化程度提高，产品絮凝沉降速度加快了13％。
(3)本发明混合发酵制备微生物絮凝剂的方法具有工艺合理；生产成本低，可进行大规模生产；发酵周期短(≤30h)，发酵产率高(产率≥2.4％)和产品絮凝率高(≥93％)，对海水净化有显著效果的优点。应用于循环养殖海水处理SS絮凝率≥91％；应用于海水养殖藻液藻细胞回收，回收率≥93％，具有广阔的开发前景和很好的应用价值。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的微生物絮凝剂的制备方法和使用效果进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。本发明所使用的克雷伯氏菌(Klebsilla sp.)LDX1-1菌株由青岛耀东生物工程有限公司提供(专利申请号：201510656846.5，发明名称：一株克雷伯氏菌及用它制备微生物絮凝剂的方法)。本发明所使用的野油菜黄单孢菌(Xanthomonas compestris)CICC10258购自中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)。
微生物絮凝剂絮凝率的测定为：用海水配制质量浓度为0.4％的高岭土悬液和10％的CaCl2溶液，备用。在六联搅拌仪的反应杯中加入体积比98％高岭土悬液、2％CaCl2溶液，混匀，制成絮凝体系备用。测定时每100mL絮凝体系加入适量絮凝剂，以120r/min的搅拌转速快速混合40s，然后再以60r/min的搅拌转速缓慢混合120s。静止5min。吸取上清液，测定波长550nm下的OD值B。加蒸馏水替代发酵液重复以上操作测得OD值A。絮凝率＝{(A-B)/A}×100％。对样品进行处理时，在絮凝体系中用样品代替高岭土悬液，其他操作步骤与微生物絮凝剂絮凝率的测定相同。
实施例1微生物絮凝剂制备生产菌种的扩大培养
(1)生产菌种的扩大培养
①培养基
克雷伯氏菌(Klebsilla sp.)LDX1-1斜面培养基：蔗糖12g/L，NH4NO3 1.5g/L，K2HPO4 1.0g/L，MgSO4 0.4g/L，NaCl 0.3g/L，FeSO4 0.01g/L，琼脂粉1.5％。
野油菜黄单孢菌(Xanthomonas campestris)CICC10258斜面培养基：蛋白胨5g/L，牛肉膏3g/L，氯化钠5g/L，琼脂粉1.5％。
摇瓶培养基：(蔗糖60％+葡萄糖40％)15g/L，混和氮源(NH4NO3 55％+((NH4)2SO4 45％)3g/L，K2HPO4 1.2g/L，MgSO4 0.6g/L，NaCl 0.3g/L，FeSO4 0.01g/L。
②接种及培养
斜面菌种培养：将克雷伯氏菌LDX1-1(CGMCC No.11330)、野油菜黄单孢菌CICC10258，分别接种斜面培养基，24-32℃培养24-48h，至斜面菌种生长旺盛；
摇瓶菌种扩大培养：将上述克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258斜面菌苔分别接种摇瓶培养基，搅匀，24-30℃培养10-18h，当菌体形态均一，生长数量达到要求时(2-5×108个活菌/mL)分别得到克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258摇瓶扩大培养液体菌种备用。
实施例2微生物絮凝剂发酵
(1)发酵培养(高浓度镁盐发酵)
发酵罐培养基：蔗糖26g/L，玉米淀粉15g/L，混和氮源(NH4NO3 55％+((NH4)2SO4 45％)2.7g/L，K2HPO4 1.1g/L，MgSO4 10g/L，NaCl 0.3，FeSO4 0.015g/L，MnSO4 0.03g/L。
将发酵培养基按体积比2.2％的接种量接种克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258混合摇瓶扩大培养液体菌种(混合摇瓶扩大培养液体菌种中克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258扩大培养液体菌种体积比为6：4)。发酵采取高浓度镁盐发酵，把发酵所需量的硫酸镁按总量20％、35％、45％的比例分别在配制发酵培养基时、发酵培养6h时和发酵培养9h时加入培养的发酵罐中。发酵罐控制的条件为：无菌空气通风比为0.28VVM，搅拌转速为150r/min，发酵温度27℃，罐压为0.015MPa，发酵时间为28h。
(2)发酵液处理(凝胶化)
将发酵液过滤去除菌体及其它杂质，加入混合盐(NaCl 85％+CaCl2 15％)至终浓度为2.1％，升温至65℃，维持23min；然后将温度快速降至20℃，制得海水用液体微生物絮凝剂。
实施例3：生产固体微生物絮凝剂
实施例1的液体微生物絮凝剂在70r/min充分搅拌下加入2.0倍体积的95％(V/V)乙醇，得沉淀，将沉淀用离心机离心8min，将所得固形物用90％(V/V)乙醇充分洗涤，将含醇固形物用真空干燥器在真空度-0.07Mpa，42℃下干燥至水分小于5％，用粉碎机粉碎成80目粉状。产量为2.6％，絮凝率≥93％。
以采用克雷伯氏菌LDX1-1进行单菌发酵制备絮凝剂(采用专利申请201510656846.5实施例2中的方法)进行对比，结果如表1所示。
表1本发明与克雷伯氏菌LDX1-1单菌发酵的产品效果对比
从表1可以看出：本发明的发酵产量比克雷伯氏菌LDX1-1单独发酵提高20％；在海水中盐度效应下絮凝率≥93％，比之LDX1-1单独发酵产品提高8％；产品乙酰化取代度为38％，比之LDX1-1单独发酵提高110％，常温下产品的稳定性由7天提高到21天；由于凝胶化程度提高，产品絮凝沉降速度(絮块沉到100mL量筒底部的时间)比LDX1-1单一发酵加快了13％。
实施例4微生物絮凝剂的应用
(1)对中国科学院海洋研究所试验基地循环养殖海水按构建的净化系统进行处理，制备的微生物絮凝剂使用量(干重)为每吨水3-6g，SS絮凝率≥91％，COD去除率≥81％，微生物去除率≥72％。
(2)对青岛即墨海水养殖藻液按构建的回收系统进行的藻细胞絮凝回收，添加的微生物絮凝剂干重为每吨水4-7g，藻细胞回收率≥93％，回收的藻细胞浓缩25倍。
实施例5微生物絮凝剂发酵
(1)发酵培养
发酵罐培养基：同实施例2。
将发酵培养基按体积比2.5％的接种量接种克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258混合摇瓶扩大培养液体菌种(混合摇瓶扩大培养液体菌种中克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258扩大培养液体菌种体积比为6.5：3.5)。发酵采取高浓度镁盐发酵，把发酵所需量的硫酸镁按总量20％、35％、45％的比例分别在配制发酵培养基时、发酵培养6h时和发酵培养9h时加入培养的发酵罐中。发酵罐控制的条件为：无菌空气通风比为0.30VVM，搅拌转速为120r/min，发酵温度28℃，罐压为0.015MPa，发酵时间为27h。
(2)发酵液处理(凝胶化)
将发酵液过滤去除菌体及其它杂质，加入混合盐(NaCl 85％+CaCl2 15％)至终浓度为2.3％，升温至62℃，维持25min；然后将温度快速降至18℃，制得海水用液体微生物絮凝剂。按照实施例3的步骤可以进一步制备成固体微生物絮凝剂。
实施例6微生物絮凝剂发酵
(1)发酵培养
发酵罐培养基：同实施例2。
将发酵培养基按体积比2.0％的接种量接种克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258混合摇瓶扩大培养液体菌种(混合摇瓶扩大培养液体菌种中克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258扩大培养液体菌种体积比为5.5：4.5)。发酵采取高浓度镁盐发酵，把发酵所需量的硫酸镁按总量20％、35％、45％的比例分别在配制发酵培养基时、发酵培养6h时和发酵培养9h时加入培养的发酵罐中。发酵罐控制的条件为：无菌空气通风比为0.25VVM，搅拌转速为200r/min，发酵温度27℃，罐压为0.015MPa，发酵时间为30h。
(2)发酵液处理(凝胶化)
将发酵液过滤去除菌体及其它杂质，加入混合盐(NaCl 85％+CaCl2 15％)至终浓度为2.0％，升温至67℃，维持21min；然后将温度快速降至20℃，制得海水用液体微生物絮凝剂。按照实施例3的步骤可以进一步制备成固体微生物絮凝剂。

Claims (8)

1.一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，其特征是，
(1)生产菌种的扩大培养
斜面菌种培养：将克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258，分别接种斜面培养基，24-32℃各培养24-48h；
摇瓶菌种扩大培养：将上述克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258斜面菌苔分别接种摇瓶培养基，搅匀，24-30℃培养10-18h，分别得到克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258摇瓶扩大培养液体菌种备用；
(2)发酵培养
将发酵培养基按体积比1.5％-4.0％的接种量接种克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258混合摇瓶扩大培养液体菌种进行发酵，发酵时间为20-30h；所述克雷伯氏菌LDX1-1、野油菜黄单孢菌CICC10258混合摇瓶扩大培养液体菌种中，二种菌种的体积比为5-7：3-5；
(3)发酵液处理
将发酵液过滤去除菌体及其它杂质，加入混合盐至终浓度为1.0％-3.0％，升温至50-80℃，维持15-30min后将温度快速降至17-30℃，得到液体微生物絮凝剂；所述混合盐为：按质量比计，NaCl 85％+CaCl2 15％；
所述摇瓶培养基为：混合碳源10-20g/L，混和氮源2.1-4.0g/L，K2HPO4 0.8-1.5g/L，MgSO40.4-1.0g/L，NaCl 0.3-0.9g/L，FeSO4 0.01-0.03g/L；所述混合碳源为：按质量比，蔗糖60％+葡萄糖40％；所述混和氮源为：按质量比，NH4NO3 55％+(NH4)2SO4 45％；
所述发酵培养基为：蔗糖25-40g/L，玉米淀粉12-25g/L，混和氮源2.0-3.9g/L，K2HPO40.8-1.5g/L，MgSO4 7-18g/L，NaCl 0.3-1.0g/L，FeSO4 0.01-0.04g/L，MnSO4 0.01-0.05g/L；所述混和氮源为：按质量比，NH4NO3 55％+(NH4)2SO4 45％。
2.如权利要求1所述的一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，其特征是，上述液体微生物絮凝剂加入1.5-2.5倍体积的乙醇醇沉，得沉淀；将沉淀用离心机离心，乙醇洗涤后再经真空干燥至水分小于5％，用粉碎机粉碎后，得到固体微生物絮凝剂。
3.如权利要求1或2所述的一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，其特征是，所述发酵培养基中的硫酸镁按总质量20％、35％、45％的比例分别在配制发酵培养基时、发酵培养6h和发酵培养9h时三个时间段加入培养基中。
4.如权利要求1或2所述的一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，其特征是，所述步骤(2)发酵控制的条件为：无菌空气通风比为0.25-0.7VVM，搅拌转速为120-350r/min，发酵温度为24-32℃，罐压为0.01-0.03MPa。
5.如权利要求1或2所述的一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，其特征是，所述克雷伯氏菌LDX1-1斜面培养基为：蔗糖10-15g/L，NH4NO3 1.5-2.5g/L，K2HPO4 0.8-1.3g/L，MgSO4 0.2-0.9g/L，NaCl 0.3-0.8g/L，FeSO4 0.01-0.03g/L，琼脂粉1.5％。
6.如权利要求1或2所述的一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，其特征是，所述野油菜黄单孢菌CICC10258斜面培养基为：蛋白胨3-7g/L，牛肉膏2-5g/L，氯化钠3-7g/L，琼脂粉1.5％。
7.权利要求1-6中任意一项所制备的微生物絮凝剂。
8.权利要求7所述的微生物絮凝剂在净化养殖海水、藻类细胞培养液或污染海水中的应用。
CN201610592127.6A 2016-07-26 2016-07-26 一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法 Active CN106011215B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610592127.6A CN106011215B (zh) 2016-07-26 2016-07-26 一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610592127.6A CN106011215B (zh) 2016-07-26 2016-07-26 一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106011215A true CN106011215A (zh) 2016-10-12
CN106011215B CN106011215B (zh) 2019-09-13

Family

ID=57113840

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610592127.6A Active CN106011215B (zh) 2016-07-26 2016-07-26 一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106011215B (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106676009A (zh) * 2016-12-29 2017-05-17 新奥科技发展有限公司 微藻养殖方法
CN109796092A (zh) * 2019-02-03 2019-05-24 福安市冠富农业科技有限公司 一种海水净化方法
CN110229763A (zh) * 2019-04-30 2019-09-13 宁波大学 一株絮凝剂生产菌及其在对虾生物絮团养殖和染料脱色中应用
CN112359070A (zh) * 2020-12-02 2021-02-12 山东三岳化工有限公司 一种生物絮凝剂及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101225405A (zh) * 2008-01-21 2008-07-23 西安建筑科技大学 一种微生物絮凝剂的生产方法及使用方法
CN101993137A (zh) * 2010-08-06 2011-03-30 国家海洋局天津海水淡化与综合利用研究所 海水微生物絮凝剂的制备方法
CN105176877A (zh) * 2015-10-12 2015-12-23 青岛美能达生物科技有限公司 一株克雷伯氏菌及用它制备微生物絮凝剂的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101225405A (zh) * 2008-01-21 2008-07-23 西安建筑科技大学 一种微生物絮凝剂的生产方法及使用方法
CN101993137A (zh) * 2010-08-06 2011-03-30 国家海洋局天津海水淡化与综合利用研究所 海水微生物絮凝剂的制备方法
CN105176877A (zh) * 2015-10-12 2015-12-23 青岛美能达生物科技有限公司 一株克雷伯氏菌及用它制备微生物絮凝剂的方法

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106676009A (zh) * 2016-12-29 2017-05-17 新奥科技发展有限公司 微藻养殖方法
CN106676009B (zh) * 2016-12-29 2020-04-24 新奥科技发展有限公司 微藻养殖方法
CN109796092A (zh) * 2019-02-03 2019-05-24 福安市冠富农业科技有限公司 一种海水净化方法
CN110229763A (zh) * 2019-04-30 2019-09-13 宁波大学 一株絮凝剂生产菌及其在对虾生物絮团养殖和染料脱色中应用
CN110229763B (zh) * 2019-04-30 2022-01-18 宁波大学 一株絮凝剂生产菌及其在对虾生物絮团养殖和染料脱色中应用
CN112359070A (zh) * 2020-12-02 2021-02-12 山东三岳化工有限公司 一种生物絮凝剂及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN106011215B (zh) 2019-09-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10150943B2 (en) Klebsiella sp. strain and method for preparing microbial flocculant from same
CN101333499B (zh) 复合型活菌生物净水剂及其制备方法
CN106754576B (zh) 一株快速降解污水中氮素的菌株及其应用
WO2015184935A1 (zh) 一株高效底改芽孢杆菌及其制成的复合底改菌剂和应用
CN106430820B (zh) 一种高氨氮养猪沼液的生物处理装置及其工艺
CN106011215A (zh) 一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法
CN104593303B (zh) 一种液态复合微生物菌剂及其生产方法
CN109110912A (zh) 一种纳污坑塘黑臭水体治理方法
CN101921710B (zh) 过度养殖区水体微生物修复剂
CN103937695A (zh) 一种处理畜禽养殖污水的复合生物菌剂及其制造方法
CN101624234A (zh) 养殖水体用微生物净水剂及其制备工艺
CN101691258B (zh) 一种新型生物水质净化球及其制备工艺
CN109081447A (zh) 一种小球藻-不动杆菌-假单胞菌联合去除养殖废水氮、磷的方法
CN101735973A (zh) 一株高效脱氮除磷菌c18
CN109609397A (zh) 一种水产养殖用复合微生物菌剂及应用
CN101701197A (zh) 新型微生物菌群组合剂及其混合培养基
CN102070283B (zh) 一种高效处理畜禽养殖废水的技术
CN107384833A (zh) 一种复合微生物组合菌剂，其制备方法及应用、一种黑臭河道的治理方法
CN103695352A (zh) 一种针对大枣加工厂废水采用微生物发酵工艺制造水质处理剂的方法
CN114591878B (zh) 一种制备海水养殖尾水处理菌剂的工艺及尾水处理方法
CN108408921B (zh) 一种提升养殖水体透明度的微生态制剂及其制备方法
CN109179683A (zh) 一种用于污水处理的硅藻土基微生物絮凝剂及制备方法
CN109055259A (zh) 假单胞菌xd-3及其应用以及微生物絮凝剂
CN1340462A (zh) 利用枯草芽孢杆菌的水产养殖环境生物修复方法
CN108102943A (zh) 一种高效脱氮微生物及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20190814

Address after: 266109, No. 111, sunny road, Chengyang District, Shandong, Qingdao

Applicant after: Qingdao Yaodong Biological Engineering Co. Ltd.

Address before: 276800 Zhongsheng Road, Taolu Town, Rizhao International Ocean City, Shandong Province

Applicant before: Rizhao clean water biological science and Technology Co Ltd

TA01 Transfer of patent application right
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant