CN105998171A - 秦艽及其提取物在制备治疗和/或预防皮肤癣的药物的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了秦艽及其提取物在制备抗真菌的药品、消毒用品或日化用品中的用途。本发明还提供了一种新的秦艽提取物及其制备方法。本发明秦艽及提取物可以抑制真菌,治疗真菌引起的皮肤癣,为临床提供了一种新的选择。

Description

秦艽及其提取物在制备治疗和/或预防皮肤癣的药物的用途
技术领域
本发明涉及秦艽及其提取物在制备治疗和/或预防皮肤癣的药物的用途,属药物领域。
背景技术
秦艽为龙胆科(Gentianaceae)龙胆属(Gentiana L.)秦艽组(Sect.Cruciata Gaudin)植物的干燥根,是我国常用的大宗药材之一。秦艽组植物全世界约20种,《中国药典》(2010年版一部)收录的秦艽药材有秦艽(Gentiana macrophylla Pall.)、麻花秦艽(Gentiana straminea Maxim.)、粗茎秦艽(Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.)或小秦艽(Gentiana dahurica Fisch.)。另外,管花秦艽作为上述秦艽的近缘种,常作为地方习用品种。在我国,秦艽已有2000多年的药用历史。中药《神农本草经》记载:“其味苦、平、无毒。治寒热邪气,寒湿风痹,肢节痛,下水,利小便”;藏药《晶珠本草》记载:“其味苦、平,具有清热利胆、舒筋止痛的功效,用于治疗风湿性关节炎、肺结核、低热盗汗、黄疸型肝炎等症。
皮肤癣病是指由皮肤癣菌引起的表皮、毛发、甲板等组织的浅表性真菌感染,包括手足癣、体股癣、头癣、甲癣等。皮肤癣菌按菌落特征,颜色和大分生抱子的形态可分为:毛癣菌属(Trichophyton Malmsten)、小孢子菌属(Micmsponwi Gruby)、表皮癣菌属(Epidermophyton Sabouraud)。这些真菌广泛的存在于世界各地,主要存在于土壤里及人和动物上。皮肤癣菌所致的浅部真菌病是皮肤科常见病,有较高的发病率和复发率,至少有10-20%的世界人口可能感染这些病原体。由皮肤癣菌引起的手足癣可占皮肤科门诊病例的20%以上。红色毛癣菌则是临床最常见的亲人性皮肤癣菌,约80%的体股癣和72%的手足癣由该菌引起,多为慢性感染,病程迁延,复发率高。须癣毛癣菌的感染在体股癣、手足癣及甲癣的致病菌中仅次于红色毛癣菌,居第二位。目前市场上治疗皮肤癣病的产品主要有盐酸特比萘芬、酮康唑、硝酸咪康唑、硝酸益康唑等,多为化学合成的抗生素类药物。关于抗生素类药物刺激性较大、或毒副作用较大、或易产生耐药性等缺点一直备受关注。
因此,研制天然来源的治疗皮肤癣病的药物具有重要的现实意义及开发潜力。
未见秦艽及其提取物抗皮肤癣相关致病菌或者治疗皮肤癣的相关报道。
发明内容
本发明的技术方案是提供了秦艽及其提取物在制备抗真菌方面的新用途。
本发明首先提供了秦艽及其提取物在制备抗真菌的药品、消毒用品或日化用品中的用途。
药品是指用于预防、治疗、诊断人的疾病,有目的地调节人的生理机能并规定有适应症或者功能主治、用法和用量的物质
消毒用品包括消毒剂、消毒器械(含生物指示物、化学指示物和灭菌物品包装物)、卫生用品和一次性使用医疗用品。
日化用品是指人们日常生活中使用的科技化学制品,包括洗发水、沐浴露、化妆品、洗衣粉等。
优选地,所述的秦艽是龙胆科植物秦艽Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽Gentiana straminea Maxim.、粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.、小秦艽Gentiana dahurica Fisch.或管花秦艽Gentiana siphonantha Maxim.ex Kusnez.的干燥根。
优选地,所述的秦艽的提取物为乙醇提取物。
进一步优选地,所述的秦艽的乙醇提取物是由下述方法制备:取秦艽,用50%-80%乙醇提取,即可。
优选地,所述秦艽的乙醇提取物是由下述方法制备:
1)取秦艽,粉碎,得到秦艽粉;
2)将秦艽粉和50-80%乙醇溶液混匀,提取温度为45-60℃,料液比为1:10~1:30,提取时间为45~90min,提取3次,得到秦艽提取液;
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45-60℃,真空度-0.05~-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行干燥得到秦艽提取物。
其中,所述抗真菌的药品、消毒用品或日化用品是抗犬小孢子菌(Microsporum canis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)的药品、消毒用品或日化用品。
其中,所述抗真菌的药品、消毒用品或日化用品是治疗和/或预防皮肤癣的药品、消毒用品或日化用品。
其中,所述治疗和/或预防皮肤癣的药品、消毒用品或日化用品是治疗和/或预防犬小孢子菌(Microsporum canis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)引起的皮肤癣的药品、消毒用品或日化用品。
本发明还提供了一种秦艽提取物,步骤如下:它按照如下方法制备:
1)取秦艽,粉碎,得到秦艽粉;
2)将秦艽粉和50-80%乙醇溶液混匀,提取温度为45-60℃,料液比为1:10~1:30,提取时间为45~90min,提取3次,得到秦艽提取液;
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45-60℃,真空度-0.05~-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行干燥得到秦艽提取物。
优选地,它按照如下方法制备:
1)取龙胆科植物管花秦艽Gentiana siphonantha Maxim.ex Kusnez.的干燥根,粉碎,得到秦艽粉;
2)将秦艽粉和50%乙醇溶液混合均匀,提取温度为45℃,料液比为1:30,提取时间为45min,提取3次,得到秦艽提取液;
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45℃,真空度-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏;
4)将秦艽提取浸膏进行干燥,得到秦艽提取物。
本发明还提供了一种制备前述秦艽提取物的方法,步骤如下:
1)取秦艽,粉碎,得到秦艽粉;
2)将秦艽粉和50-80%乙醇溶液混匀,提取温度为45-60℃,料液比为1:10~1:30,提取时间为45~90min,提取3次,得到秦艽提取液;
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45-60℃,真空度-0.05~-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行干燥,得到秦艽提取物。
本发明秦艽及提取物可以抑制犬小孢子菌(Microsporum canis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)等真菌,治疗由犬小孢子菌(Microsporum canis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)引起的皮肤癣,应用前景良好。
显然,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为本发明不同浓度秦艽提取物对须癣毛癣菌抑制作用的扫描电镜图;
图2为本发明不同浓度秦艽提取物对混合菌悬液造模后豚鼠治愈后的皮损表观图;
图3豚鼠表皮皮损得分评价图。
具体实施方式
实施例1本发明药品的制备
1、秦艽提取物的制备:
1)取秦艽(管花秦艽Gentiana siphonantha Maxim.ex Kusnez.的干燥根)粉碎,得到秦艽粉。
2)将秦艽粉和提取溶剂50%乙醇溶液混合均匀,提取温度为45℃,料液比为1:30,提取时间为45min,提取3次,得到秦艽提取液。
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45℃,真空度-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行冷冻干燥,温度-80℃,时间24h,得到秦艽提取物。
2、处方:按例1所述的乙醇提取所得秦艽提取物10g,甘油50g,脱水山梨醇硬脂酸酯(司盘-60)10g,凡士林250g。
3、制法:取提取物与甘油置水浴上加热至溶解,加入脱水山梨醇硬脂酸酯(司盘-60)搅匀,最后加入凡士林,搅匀,即得软膏剂。
4、性状:本品为黄褐色软膏。
5、用法与用量:取适量涂于患处或用纱布敷于患处,一日3-5次。
实施例2本发明药品的制备
1、秦艽提取物的制备:
同实施例1。
2、处方:按例1所述的乙醇提取所得秦艽提取物10g,乙醇490ml。
3、制法:取提取物,溶于适量乙醇中,如不透明可用干燥滤器或滤材过滤,再添加乙醇适量至处方配比量,搅匀,即得醑剂。
4、性状:本品为无色或淡棕色澄明液体,有特殊气味,并有清凉感。
5、用法与用量:外用,局部涂搽,一日3次。
实施例3本发明日化用品(化妆品)的制备
1、秦艽提取物的制备
1)取秦艽(秦艽Gentiana macrophylla Pall.的干燥根),粉碎,得到秦艽粉。
2)将秦艽和提取溶剂80%乙醇溶液混合均匀,提取温度为60℃,料液比为1:10,提取时间为90min,提取3次,得到秦艽提取液。
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度60℃,真空度-0.05Mpa,得到秦艽提 取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行冷冻干燥,温度-20℃,时间24h,得到秦艽提取物。
2、制备
取秦艽提取物,与化妆品领域允许的辅料混合,即得化妆品。
实施例4本发明消毒用品(消毒剂)的制备
1、粗茎秦艽提取物的制备
1)取粗茎秦艽(粗茎秦艽Gentiana erassicaulis Duthie ex Burk.的干燥根),粉碎,得到粗茎秦艽。
2)将粗茎秦艽和提取溶剂60%乙醇溶液混合均匀,提取温度为55℃,料液比为1:20,提取时间为60min,提取3次,得到粗茎秦艽提取液。
3)将粗茎秦艽提取液减压浓缩,温度50℃,真空度-0.07Mpa,得到粗茎秦艽提取浸膏。
4)将粗茎秦艽提取浸膏进行冷冻干燥,温度-50℃,时间24h,得到粗茎秦艽提取物。
2、制备
取粗茎秦艽提取物,与消毒剂领域允许的辅料混合,即得消毒剂。
以下用实验例的方式来说明本发明的有益效果:
实验例1秦艽抑制真菌的作用
1材料与仪器
1.1实验菌株
犬小孢子菌(Microsporum canis 00287),来自于由北京大学第一附属医院皮肤科真菌室;
须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte 60050),来自于北京大学第一附属医院皮肤科真菌室;
红色毛癣菌(Trichophyton rubrum ATCC10218),购于杭州市第三人民医院皮肤科。
1.2药物与试剂
秦艽(管花秦艽Gentiana siphonantha Maxim.ex Kusnez.的干燥根),2013年8月,采于青海省门源县青石嘴镇。
秦艽提取物的制备:
1)将秦艽粉碎,得到秦艽粉。
2)将秦艽粉和提取溶剂50%乙醇溶液混合均匀,提取温度为45℃,料 液比为1:30,提取时间为45min,提取3次,得到秦艽提取液。
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45℃,真空度-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行冷冻干燥,温度-80℃,时间24h,得到秦艽提取物。
1.3主要材料试剂与仪器
表1.实验中所需材料与试剂
表2.实验中所需仪器
2、实验方法
2.1最低抑菌浓度MIC值的测定
准确称取秦艽提取物,用无菌水将其溶解制成储备液。
取无菌试管,将储备液用RPMI-1640培养基(Gibco公司)连续倍比稀释至2倍终浓度(20μg/mL)。
根据美国临床和实验室标准协会CLSI推荐的《M38-A实验方案,将犬小孢子菌(Microsporum canis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)分别置于SDA培养基上,于28℃恒温 培养(MJX-250B-Z电热恒温培养箱,上海君曦科学仪器有限公司)14天后,用无菌盐水制备含有犬小孢子菌、须癣毛癣菌或红色毛癣菌的菌丝及孢子的菌悬液。分别取100μL终浓度的麻花艽提取物的稀释液,由高浓度到低浓度分别加入到无菌96孔细胞培养板的第1孔至第10孔中,并分别加入100μL菌悬液,使每一浓度的受试样稀释液和菌悬液分别被1:1稀释到终浓度。第11孔作为生长对照孔仅加菌悬液100μL和培养基100μL。第12孔作为空白对照孔仅加培养基200μL。将接种后的细胞培养板置于28℃恒温培养,培养14天后,根据MIC值的判定标准(0:肉眼清晰;1:略模糊,80%受抑制;2:浊度显著降低,50%受抑制;3:浊度轻度降低;4:浊度未降低)五个判定点中的1或2作为判定终点,在不搅动的情况下与对照孔对比。
2.2抑菌圈试验
用接种环挑取各试管斜面的犬小孢子菌、须癣毛癣菌或红色毛癣菌种于无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。用无菌吸管向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。向各培养皿内注入15ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均匀,待其冷却。用镊子将圆片滤纸在不同浓度的麻花艽提取物中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央,盖上盖子。置适宜温度下,培养2~3d,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。
2.3SEM电镜观察
参照NCCLS推荐的M38-A方案,将100μl药液分别由高浓度到低浓度加人无菌的96孔细胞培养板中,用RPMI-1640培养基连续倍比稀释至2倍终浓度(20μg/mL);第5孔为生长对照孔仅加菌悬液和RPMI-1640培养基,不加药物;第6孔为空白对照孔(RPMI-1 640培养基)。28℃孵育3d后挑取各孔菌落迅速进行电镜样品制备。将各孔菌丝调出,分别置于无菌的1.5ml离心管中,4℃冰箱中以2.5%戊二醛固定过夜;PBS溶液洗3次,每次20min;
30%-50%-70%-85%-90%-100%系列乙醇各脱水15min,100%乙醇脱水3次;25%-50%-75%-100%叔丁醇梯度置换15min,100%叔丁醇置换3。冷冻干燥,真空镀膜,扫描电镜观察。
3、实验结果
3.1最低抑菌浓度MIC值的测定
结果显示,秦艽提取物对须癣毛癣菌、犬小孢子菌和红色毛癣菌的最低抑菌浓度MIC的范围值为32-64μg/mL,阳性对照组盐酸特比萘芬(TBF)的MIC范围值在0.5-1.0μg/ml,抑菌效果能达到阳性对照物盐酸特比萘芬的1/50左右,表现出较强的抑制皮肤癣菌的效果。
3.2抑菌圈试验
实验结果如表3所示:
表3.秦艽提取物对3种菌株体外抑菌活性(测量抑菌圈大小cm)
抑菌圈结果显示,秦艽提取物对于这三种菌株都具有抑菌性,其中在100mg/ml浓度,对红色毛癣菌显现出抑菌性。在200mg/ml~400mg/ml时,对3种菌株都有抑菌性,其中对须癣毛癣菌的抑制性最强,抑菌圈大小在9.5~12.22cm左右。
3.3SEM电镜观察
SEM电镜观察结果显示,20μg/ml秦艽提取物作用后,须癣毛癣菌的菌丝形态基本正常,菌丝表面有轻微糙感,不光滑。40μg/ml浓度作用后,须癣毛癣菌菌丝形态基本正常,多数菌丝出现表面塌陷;80μg/ml浓度作用后,菌丝形态明显变化,粗细不一,缩窄处菌丝干瘪;160μg/ml浓度作用后,菌丝普遍出现明显变形,粗细不一,以菌丝干瘪为主。
实验结果说明,本发明秦艽及其提取物可以有效抑制犬小孢子菌(Microsporum canis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)三种真菌的生长,抑制作用强。
实验例2秦艽治疗和预防皮肤癣的作用
1材料与仪器
1.1实验菌株
犬小孢子菌(Microsporum canis 00287),来自于由北京大学第一附属医院皮肤科真菌室;
须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte 60050),来自于北京大学第一附属医院皮肤科真菌室;
红色毛癣菌(Trichophyton rubrum ATCC10218),购于杭州市第三人民医院皮肤科。
1.2药物与试剂
秦艽(管花秦艽Gentiana siphonantha Maxim.ex Kusnez.的干燥根),2013年8月采于青海省门源县青石嘴镇。
秦艽提取的制备:
1)将秦艽地下部分干燥,粉碎,得到秦艽粉。
2)将秦艽粉和提取溶剂50%乙醇溶液混合均匀,提取温度为45℃,料液比为1:30,提取时间为45min,提取3次,得到秦艽提取液。
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45℃,真空度-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行冷冻干燥,温度-80℃,时间24h,得到秦艽提取物。
1.3主要试剂与仪器
试剂与材料:PC/1%TBF-盐酸特比萘芬(TBF,X0144,诺华制药);羧甲基纤维素钠(CMC,PEG-3350,Sigma);无水乙醇(山东禹王实业有限公司化工分公司);80目砂纸;一次性注射器。
仪器:超净工作台(SW-CJ-1D,苏州净化仪器生产有限公司);电热恒温培养箱(MJX-150B-Z,上海博讯实业有限公司);不锈钢压力蒸汽灭菌锅(BXM-30R,上海博讯实业有限公司);显微镜(DM500,Leica);移液枪(Dragonlab-TopPette 1,上海胜科仪器有限公司);推毛器(PW228,Povos/奔腾)。
2、实验方法
犬小孢子菌、须癣毛癣菌、红色毛癣菌活化后分别接种于SDA培养基,30℃培养7天,无菌生理盐水洗脱后充分震荡混匀,调整3种菌株混合菌悬液浓度为1.0×108CF U/mL。腹腔注射麻醉剂,豚鼠背部双侧分别剪毛后脱毛,各形成约2.5×2.5cm的无毛区,用无菌砂纸在无毛区打磨至点状渗血后,均匀涂抹菌悬液100μL。在接种菌液第3天,将造模成功的25只豚鼠分别编号,按随机数字表法分为5组(阴性对照组/5%乙醇溶剂组/10%秦艽提取物/30%秦艽提取物/阳性对照组1%TBF),每组5只。每天由专人定时涂药1次,每次100μL连续14天。
每天由同一实验者定时观察红斑、丘疹、鳞屑情况,记录每只豚鼠皮损评分。标准为:4分:皮损红肿,皮肤增厚、皮屑致密,布满整个皮损部位;3分:皮损红肿,皮屑间有点状的正常皮肤,正常皮肤累计小于1/4;2分:皮损微红、不肿,皮屑间有线状正常皮肤,正常皮肤累计小于1/2;1分:皮损不红、不肿,有少许皮屑,1/2以上正常皮肤;0分:皮损不红、不肿,基本为正常皮肤。
3、实验结果
结果如图3所示:
阴性对照组(NC)与5%乙醇组之间无明显差异,即溶剂组对患病豚鼠无治愈作用的影响。
NC与阳性对照组(PC/1%TBF)、10%秦艽提取物和30%秦艽提取物之间都具有极显著差异。
PC与5%乙醇之间具有及显著差异,而10%秦艽提取物和30%秦艽提取物与PC之间不具有差异性。
5%乙醇与10%秦艽提取物和30%秦艽提取物之间具有极显著差异,而10%秦艽提取物与30%秦艽提取物之间只具有显著差异。
以上可知,秦艽提取物的治愈效果具有剂量依赖性。秦艽提取物具有治愈皮肤癣的功能的。
实验结果说明,本发明秦艽及其提取物可以有效预防和治疗犬小孢子菌(Microsporum canis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)等真菌引起的皮肤癣。
综上,本发明秦艽及提取物抗真菌、以及预防和/或治疗皮肤癣的作用,可以制备成为抗真菌的药品、消毒用品或日化用品,应用前景良好。

Claims (10)

1.秦艽及其提取物在制备抗真菌的药品、消毒用品或日化用品中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述的秦艽是龙胆科植物秦艽Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽Gentiana straminea Maxim.、粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.、小秦艽Gentiana dahurica Fisch.或管花秦艽Gentiana siphonantha Maxim.ex Kusnez.的干燥根。
3.根据权利要求1或2所述的用途,其特征在于:所述的秦艽的提取物为乙醇提取物。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于:所述的秦艽的乙醇提取物是由下述方法制备:取秦艽,用50%-80%乙醇提取,即可。
优选地,所述秦艽的乙醇提取物是由下述方法制备:
1)取秦艽,粉碎,得到秦艽粉;
2)将秦艽粉和50-80%乙醇溶液混匀,提取温度为45-60℃,料液比为1:10~1:30,提取时间为45~90min,提取3次,得到秦艽提取液;
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45-60℃,真空度-0.05~-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行干燥,得到秦艽提取物。
5.根据权利要求1~4任意一项所述的用途,其特征在于:所述抗真菌的药品、消毒用品或日化用品是抗犬小孢子菌(Microsporum canis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)的药品、消毒用品或日化用品。
6.根据权利要求1~4所述的的用途,其特征在于:所述抗真菌的药品、消毒用品或日化用品是治疗和/或预防皮肤癣的药品、消毒用品或日化用品。
7.根据权利要求6所述的的用途,其特征在于:所述治疗和/或预防皮肤癣的药品、消毒用品或日化用品是治疗和/或预防犬小孢子菌(Microsporumcanis)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)或红色毛癣菌(Trichophytonrubrum)引起的皮肤癣的药品、消毒用品或日化用品。
8.一种秦艽提取物,其特征在于:它按照如下方法制备:
1)取秦艽,粉碎,得到秦艽粉;
2)将秦艽粉和50-80%乙醇溶液混匀,提取温度为45-60℃,料液比为1:10~1:30,提取时间为45~90min,提取3次,得到秦艽提取液;
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45-60℃,真空度-0.05~-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行干燥,得到秦艽提取物。
9.根据权利要求8所述的提取物,其特征在于:它按照如下方法制备:
1)取龙胆科植物管花秦艽Gentiana siphonantha Maxim.ex Kusnez.的干燥根,粉碎,得到秦艽粉;
2)将秦艽粉和50%乙醇溶液混合均匀,提取温度为45℃,料液比为1:30,提取时间为45min,提取3次,得到秦艽提取液;
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45℃,真空度-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏;
4)将秦艽提取浸膏进行干燥,得到秦艽提取物。
10.一种制备权利要求8或9所述秦艽提取物的方法,其特征在于:步骤如下:
1)取秦艽,粉碎,得到秦艽粉;
2)将秦艽粉和50-80%乙醇溶液混匀,提取温度为45-60℃,料液比为1:10~1:30,提取时间为45~90min,提取3次,得到秦艽提取液;
3)将秦艽提取液减压浓缩,温度45-60℃,真空度-0.05~-0.09Mpa,得到秦艽提取浸膏。
4)将秦艽提取浸膏进行干燥,得到秦艽提取物。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109172633A (zh) * 2018-10-19 2019-01-11 中国科学院西北高原生物研究所 一种秦艽提取物及其制备方法与应用
WO2022095489A1 (zh) * 2020-11-09 2022-05-12 云南英格生物技术有限公司 秦艽提取物及其制备方法和用途
WO2024023440A1 (fr) * 2022-07-26 2024-02-01 Basf Beauty Care Solutions France Sas Nouvelle utilisation cosmetique ou dermatologique d'un extrait de gentiana crassicaulis
FR3138615A1 (fr) * 2022-08-02 2024-02-09 Basf Beauty Care Solutions France Sas Nouvelle utilisation cosmétique ou dermatologique d’un extrait de Gentiana crassicaulis

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104666655A (zh) * 2015-03-20 2015-06-03 倪春仙 一种治疗真菌感染性口炎的中药组合物及其制备方法和用途
CN105055554A (zh) * 2015-07-20 2015-11-18 叶盛德 一种用于缓解并治疗疥癣的膏药

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104666655A (zh) * 2015-03-20 2015-06-03 倪春仙 一种治疗真菌感染性口炎的中药组合物及其制备方法和用途
CN105055554A (zh) * 2015-07-20 2015-11-18 叶盛德 一种用于缓解并治疗疥癣的膏药

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
余淑娴;等: "超声提取秦艽中龙胆苦苷的工艺优选", 《山东中医杂志》 *
刘庆丰;等: "除湿注射液中龙胆苦苷和苦参碱的HPLC测定", 《中国医药工业杂志》 *
史亦丽: "真菌及致病性真菌浅议", 《临床药物治疗杂志》 *
吴兴海;等: "中药秦艽及其可持续利用途径研究", 《世界科学技术》 *
曹晓燕;等: "HPLC测定管花秦艽不同部位龙胆苦苷的含量", 《中成药》 *
白晓朝: "正交试验法优选宁夏产秦艽醇提工艺", 《中华中医药杂志(原中国医药学报)》 *
郝晓霞;等: "正交实验法优选秦艽中龙胆苦苷提取工艺", 《时珍国医国药》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109172633A (zh) * 2018-10-19 2019-01-11 中国科学院西北高原生物研究所 一种秦艽提取物及其制备方法与应用
WO2022095489A1 (zh) * 2020-11-09 2022-05-12 云南英格生物技术有限公司 秦艽提取物及其制备方法和用途
WO2024023440A1 (fr) * 2022-07-26 2024-02-01 Basf Beauty Care Solutions France Sas Nouvelle utilisation cosmetique ou dermatologique d'un extrait de gentiana crassicaulis
FR3138615A1 (fr) * 2022-08-02 2024-02-09 Basf Beauty Care Solutions France Sas Nouvelle utilisation cosmétique ou dermatologique d’un extrait de Gentiana crassicaulis

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