CN105985288A - 一类吡啶苯基偶联化合物及其药物组合物和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一类吡啶苯基偶联化合物及其药物组合物和用途。本发明的一类吡啶苯基偶联化合物是一种PSD-95/nNOs解偶联剂，能选择性抑制PSD-95和nNOs之间的结合，从而发挥药效作用，具有重要的潜在治疗价值，在制备治疗脑卒中、神经病理性疼痛、阿尔茨海默病或血管性痴呆药物中有着广泛的用途。

Description

一类吡啶苯基偶联化合物及其药物组合物和用途

技术领域

本发明涉及药物化学领域，特别涉及一类吡啶苯基偶联化合物或其药学上可接受的盐及包含该化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物，涉及该类化合物或其药学上可接受的盐及包含该化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物作为PSD-95/nNOs解偶联剂的应用，特别是在制备治疗神经病理性疼痛、脑卒中、阿尔茨海默病或血管性痴呆药物中的用途。

背景技术

神经病理性疼痛是一种“损害或疾病累及躯体感觉系统后直接导致的疼痛”。神经病理性疼痛病因复杂，常规的止痛药如阿片类及非甾体抗炎药没有明显疗效，是一种难治且对人类有巨大危害的疾病。

突触前膜释放的神经递质谷氨酸会激活突触后受体NMDAR，NMDAR离子通道开放后，释放大量的钙离子。钙离子会激活nNOs，促进NO的生成并最终产生神经毒性。在这个过程中，nNOs的β-finger结构会和PSD-95的PDZ结构域相互作用才能激活nNOs，而nNOs的β-finger空间构象需要较强的次级键，Arg121和Asp62之间的盐桥构成了较为稳定的次级键。如果破坏盐桥，β-finger结构也会随即溶解。此外，nNOs中的氨基酸Leu107和Phe111的侧链疏水性基团之间可以形成稳定的疏水键，这对于nNOs与PSD-95蛋白之间的相互作用也十分关键。PSD-95/nNOs解偶联剂的应用能够在神经病理性疼痛、脑卒中、阿尔茨海默病或血管性痴呆等疾病中发挥作用。

目前尚无一种PSD-95/nNOs解偶联剂的药物成功上市，因此，研发此类药 物，具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种PSD-95/nNOs解偶联剂的化合物和药物组合物及其作为PSD-95/nNOs解偶联剂的应用。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：

一类如式I所示的化合物或其药学上可接受的盐，

其中：

R₁为卤素、CONH₂；

R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、芳基、杂芳基、杂脂环基、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基或C₂-C₈炔基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基或C₂-C₈炔基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基或C₂-C₈炔基中的任选位置可被一个或两个以上的卤素原子、氰基、硝基、芳基、杂芳基、芳氧基、杂脂环基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；

R₇～R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₈烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基；

X为选自-O-，-N-；

m、n独立选自0或1；

当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；

当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。

作为优选，上述化合物中，

R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₆链烯基或C₂-C₆炔基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₆链烯基或C₂-C₆炔基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₆链烯基或C₂-C₆炔基中的任选位置可被一个或两个以上的卤素原子、氰基、硝基、芳基、杂芳基、芳氧基、杂脂环基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；

R₇～R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基；

X为选自-O-，-N-；

m、n独立选自0或1；

当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；

当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。

更优选地，上述化合物中，

R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、C₁-C₆烷基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₆烷基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₆烷基中的任选位置可被一个或两 个以上的卤素原子、氰基、硝基、芳基、杂芳基、芳氧基、杂脂环基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；

R₇～R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₃烷基；

X为选自-O-，-N-；

m、n独立选自0或1；

当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；

当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。

更优选地，上述化合物中，

R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、C₁-C₃烷基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₃烷基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₃烷基中的任选位置可被一个或两个以上的卤素原子、氰基、硝基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；

R₇～R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₃烷基；

X为选自-O-，-N-；

m、n独立选自0或1；

当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；

当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。

除非另有说明，在权利要求书和说明书中使用的以下术语具有下面讨论的含义：

术语“烷基”本身或作为另一个取代基的一部分是指直链(即不分支)或支链或环状的烃基或其组合，它们可以是完全饱和、单或多不饱和的，并且可包括具有指定的碳原子数(即C₁-C₁₀是指1至10个碳)的二价和多价基团。非限制性 地包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、正己基等；

链烯基指的是由至少一个碳-碳双键组成的不饱和的直链或支链烃基，典型地为C₂-C₈烯基，非限制性地包括乙烯、丙烯、异丙烯、丁烯、异丁烯、叔丁烯、正戊烯、异戊烯、正己烯等；

炔基指的是由一个或两个以上碳-碳参键组成的不饱和的直链或支链烃基，典型地为C₂-C₈炔基，非限制性地包括乙炔基、丙炔、异丙炔、丁炔、异丁炔、叔丁炔、戊炔、己炔；

环烷基指全部为碳的单环或稠合的环(稠合环意味着系统中的每个环与系统中的其他环共享毗邻的一对碳原子)基团，其中一个或多个环不具有完全连接的π电子系统，典型地为C₃-C₈环烷基，非限制性地包括环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、金刚烷、环己烯、环己二烯、环庚烷、环辛烷、环庚二烯和环庚三烯等；

烷氧基表示-O-(未取代的烷基)和-O(未取代的环烷基)。代表性的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等；芳氧基表示-O-芳基和-O-杂芳基，包括但不限于苯氧基、吡啶氧基、呋喃氧基、噻吩氧基、嘧啶氧基、吡嗪氧基等及其衍生物；

“芳基”指的是有一个或两个以上闭环的环状芳烃部分，典型地为C₆-C₁₄芳基，非限制性地包括苯基、苄基、萘基、蒽基、菲基、联苯基等；芳基可以是取代的或未取代的；当被取代时优选为一个或多个，更优选为一个、两个或三个，取代基独立地选自(不局限于)卤素、硝基、氰基、三卤C₁-C₁₀烷基、酰基、C₅-C₉杂脂环基、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基、单或二C₁-C₁₀烷基氨基、羟基、巯基、C₁-C₁₀烷氧基、烷硫基等；

“杂芳基”表示5至12个环原子的单环或稠合环基团，含有一个、两个、三个或四个选自N、O或S的环杂原子，其余环原子是C，另外具有完全共轭的π电子系统；未取代的杂芳基非限制性地包括吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、吡啶、噁唑、异噁唑、噻唑基、吡唑、嘧啶、喹啉、异喹啉、嘌呤、咔唑、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁二唑等；杂芳基可以是取代的或未取代的，取代基优选为一个或多个，更优选为一个、两个或三个，独立地选自(不局限于)卤素、硝基、氰基、三卤C₁-C₁₀烷基、酰基、C₅-C₉杂脂环基、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基、氨基、单或二C₁-C₁₀烷基氨基、羟基、巯基、C₁-C₁₀烷氧基、C₁-C₁₀烷硫基等；

杂脂环基表示单环或稠合环基团，在环中具有5到9个环原子，其中一个、两个或三个环原子选自N、O或S(O)y的杂原子，其中y是0至2的整数，其余环原子是C，这些环可以具有零条、一条或多条双键，但这些环不具有完全共轭的π电子系统；未取代的杂脂环基非限制性地包括吡咯烷基、哌啶子基、哌嗪子基、吗啉代基、硫代吗啉代基等；杂脂环基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或两个以上，更优选为一个或两个或三个，进而更优选为一个或两个，非限制性地包括低级烷基、三卤C₁-C₁₀烷基、卤素、羟基、C₁-C₁₀烷氧基、巯基、C₁-C₁₀烷硫基、氰基、酰基、硫代酰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、硝基、N-磺酰氨基、S-磺酰氨基；优选地，杂脂环基可选地被一个或两个取代基取代，取代基非限制性地包括卤素、低级烷基、三卤C₁-C₁₀烷基、羟基、巯基、氰基、N-酰氨基、单或二C₁-C₁₀烷基胺基、羧基或N-磺酰氨基；

卤素和卤代是指氟、氯、溴或碘；

三卤甲基表示-CX₃基团，其中X是如上定义的卤素；

脂肪环表示3到9个碳原子组成的环状基团，环可以具有零条、一条或多条双键，但这些环不具有完全共轭的π电子系统；脂肪环可以是取代的或未取代的，取代基优选为一个或两个以上，更优选为一个或两个或三个，进而更优选为一个或两个，独立选自(不局限于)卤素、硝基、氰基、三卤C₁-C₁₀烷基、酰基、C₅-C₉杂脂环基、烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基、氨基、单或二C₁-C₁₀烷基氨基、羟基、巯基、C₁-C₁₀烷氧基、C₁-C₁₀烷硫基等。

杂环表示在环中具有5到9个环原子，其中一个、两个或三个环原子选自N、O或S(O)y的杂原子，其中y是0至2的整数，其余环原子是C，这些环可以具有零条、一条或多条双键，但这些环不具有完全共轭的π电子系统；未取代的杂环非限制性地包括吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉等；杂环可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或两个以上，更优选为一个或两个或三个，进而更优选为一个或两个，非限制性地包括低级C₁-C₁₀烷基、三卤C₁-C₁₀烷基、卤素、羟基、C₁-C₁₀烷氧基、巯基、C₁-C₁₀烷硫基、氰基、酰基、硫代酰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、硝基、N-磺酰氨基、S-磺酰氨基；优选地，杂环可选地被一个或两个取代基取代，取代基非限制性地包括卤素、低级烷基、三卤C₁-C₁₀烷基、羟基、巯基、氰基、N-酰氨基、单或二C₁-C₁₀烷基胺基、羧基或N-磺酰氨基；

芳环表示有一个或两个以上闭环的环状芳烃部分，非限制性地包括苯、萘、蒽、菲等；芳环可以是取代的或未取代的；当被取代时优选为一个或多个，更优选为一个、两个或三个，取代基独立地选自(不局限于)卤素、硝基、氰基、三卤C₁-C₁₀烷基、酰基、C₅-C₉杂脂环基、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基、单或二C₁-C₁₀烷基氨基、羟基、巯基、C₁-C₁₀烷氧基、C₁-C₁₀ 烷硫基等；

杂芳环表示表示5至12个环原子的单环或稠合环基团，含有一个、两个、三个或四个选自N、O或S的环杂原子，其余环原子是C，另外具有完全共轭的π电子系统；未取代的杂芳环非限制性地包括吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、吡啶、噁唑、异噁唑、噻唑基、吡唑、嘧啶、喹啉、异喹啉、嘌呤、咔唑、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁二唑等；杂芳环可以是取代的或未取代的，取代基优选为一个或多个，更优选为一个、两个或三个，独立地选自(不局限于)卤素、硝基、氰基、三卤C₁-C₁₀烷基、酰基、C₅-C₉杂脂环基、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基、氨基、单或二C₁-C₁₀烷基氨基、羟基、巯基、C₁-C₁₀烷氧基、C₁-C₁₀烷硫基等。

本发明提供的化合物还包含该化合物在药学上可接受的等价物或两者以上的混合物。

作为优选，本发明提供的化合物在药学上可接受的等价物可以包含药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物、代谢物、前药或等排物中的一种或两者以上的混合物。

作为优选，本发明提供的化合物在药学上可接受的等价物中，药学上可接受的盐包含本发明所提供化合物的酸式盐或碱式盐。所述药学上可接受的盐具有该化合物的药学活性，且在生物学上和实际应用中均符合需要。

本发明提供的化合物在药学上可接受的等价物中，药学上可接受的酸式盐非限制性地包括醋酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲酸盐、丙酸盐、己二酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙基磺酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、甘 油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。

作为优选，本发明提供的化合物在药学上可接受的等价物中，前药指的是本发明化合物的衍生物，在表现其药理学效用之前需要经过生物转化，如代谢。前药由改善化学稳定性、改善患者接受和依从度、改善生物利用度、延长作用时间、改善了器官选择性、改善制剂如增强水溶解性，或减少副作用如毒性的物质配制而成。前药可由本发明化合物用常规方法制备而成，见Burger's Medicinal Chemistry and Drug Chemistry，第5版，Vo1.1,pp.172-178,949-982(1995)。

在本发明中，等排物指的是具有不同的分子式但显示出相似的或同样的物理特性的元素、官能团、取代基、分子或离子。例如，四唑是羧酸的等排物，因为它有与羧酸相似的性质，即使它们有不同的分子式。典型地，两个等排的分子有相似的或同样的大小和形状。理想地，等排的分子将是同构的和能够共同结晶。等排物分子其它物理性质通常都包括沸点、密度、粘性和热传导性。然而，因为外部轨道可以不同地杂化，故某些性质可能会不同：偶极力矩、极性、极化作用、大小和形状。等排物包括生物等排物。生物等排物之间，除了物理的相似性之外，共有某些生物学性质。典型地，生物等排物与之相同的识别部位相互作用或广泛地产生相似的生物学作用。

在本发明中，代谢物指的是由代谢或由代谢过程产生的物质。

本发明提供了一类吡啶苯基偶联化合物作为PSD-95/nNOs解偶联剂药物中的应用。

其中，所述痴呆优选为神经病理性疼痛、脑卒中。

在本发明的实施例中，发明人利用体外细胞水平，大鼠在体疼痛模型评价PSD-95/nNOs解偶联剂活性。实验结果表明，吡啶苯基偶联化合物能选择性抑制PSD-95和nNOs之间的结合，发挥药效作用。

综合上述实验结果，本发明中的化合物是一种PSD-95/nNOs解偶联剂。

根据本发明的制备和效果实施例及本领域的知识，可以推断出本发明通式中R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、C₁-C₃烷基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₃烷基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₃烷基中的任选位置可被一个或两个以上的卤素原子、氰基、硝基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；R₇～R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₃烷基。所得到的化合物在效果上相同或相近，且制备方法简单易行。

根据本发明的制备和效果实施例及本领域的知识，可以推断出本发明通式中X为选自-O-，-N-；m、n独立选自0或1；当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。所得到的化合物在效果上相同或相近，且制备方法简单易行。

本发明还提供了一种药物组合物，其包含一类吡啶苯基偶联化合物、药学上可接受的等价物或其混合物以及药学上可接受的载体。

附图说明

图1 原代神经元体外培养成熟过程中NMDAR-PSD95-nNOS的表达情况

图2 NMDA：Glycine共诱导对原代神经元的兴奋性损伤

图3 SNL成功造模前后大鼠缩足反应阈值(PWT)的变化

图4 经口灌胃S2后对SNL大鼠PWT的影响

具体实施方式

本发明公开了一类吡啶苯基偶联化合物及其药物组合物和用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。

本发明实施例中所制备的化合物如下：

化合物1：5-(2-(2,4-二氯-6-(二甲基氨基)苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S1所示；

化合物2：2,4-二氯-6-(((2-(6-氯吡啶-3-基)乙基)氨基)甲基)苯酚，如S2所示；

化合物3：5-(2-(2,4-二氯-6-((二甲基氨基)甲基)苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S3所示；

化合物4：5-(2-((2,4,6-三氯苄基)氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S4所示；

化合物5：5-(2-(2,4-二氯-6-硝基苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S5所示；

化合物6：5-(2-(2-氨基-4,6-二氯苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S6所示；

化合物7：5-(2-(2,4,6-三氯苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S7所示；

化合物8：5-(((2-(6-氯吡啶-3-基)乙基)氨基)甲基)-2-硝基苯酚，如S8所示；

化合物9：2-(6-氯吡啶-3-基)-N-(5-氟-2-硝基苄基)乙胺，如S9所示；

化合物10：N-(苯并[c][1,2,5]噁二唑-4-基甲基)-2-(6-氯吡啶-3-基)乙胺，如S10所示；

化合物11：2-(6-氯吡啶-3-基)-N-(2,3-二氯苄基)乙胺，如S11所示。

实施例1：化合物S1的合成

合成路线：

将2-氨基-4,6-二氯苯酚0.4g、溶于20ml乙腈中，冰浴搅拌，加入甲醛水溶液10ml和NaBH₃CN 0.7g，醋酸2ml，室温反应12小时。减压蒸出乙腈，加入乙酸乙酯分散，饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，有机层干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝25:1～20:1，得产品2-二甲氨基-4,6-二氯苯酚257mg，收率55.16％。

将化合物2-二甲氨基-4,6-二氯苯酚70mg、5-羟乙基-2-氰基吡啶50mg及PPh₃98mg溶于5ml无水四氢呋喃中，冰浴下滴加DEAD 0.65ml，0℃搅拌过夜，TLC检测反应，反应完毕，加入乙酸乙酯后饱和NaCl水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝10:1～2:1得产品(1)73mg，收率63.94％。

将氰基化合物(1)40mg、碳酸钾20mg溶于2ml DMSO中，冰浴下滴加30％的双氧水溶液0.2ml开始反应，TLC检测反应，反应完毕，加入乙酸乙酯后饱和NaCl水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝5:1～2:1得产品(2)19mg，收率45.07％，MS:[M+H]⁺＝354.1。

实施例2：化合物S2的合成

合成路线：

将2-氯-5-氰基甲基吡啶1g(1.0eq)溶于15ml无水四氢呋喃中，0℃搅拌滴加BH₃四氢呋喃溶液19.74ml(3.0eq)，加热回流2小时，冷却，蒸除溶剂干燥即得产品，直接进行下一步反应。

将上述产品240mg、2-羟基-3,5-二氯苯甲醛273mg加入20ml甲醇中搅拌分 散，冰浴下向体系中缓慢加入NaBH₄150mg，升温回流3小时，TLC检测反应完毕，停止反应，冷却，现体系中加入1N的盐酸溶液调节pH1～2，回流1h，冷却过滤，蒸除溶剂，加入乙酸乙酯分散，有机层用碳酸氢钠洗涤、饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝5:1～2:1，得产品(16)131.4mg，收率27.56％，MS:[M+1]⁺＝331.1。

实施例3：化合物S3的合成

合成路线：

将2,4-二氯苯酚1.0g(1.0eq)溶于20ml乙醇中，加入二甲胺350mg，冰浴下加入健全水溶液(含甲醛233mg)，升温至室温搅拌反应4小时，反应液蒸干后加入乙酸乙酯溶解，饱和NaCl水溶液洗涤，有机层干燥，浓缩，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝10:1～2:1，得产品158mg，收率12.05％。

将上述苯酚化合物74mg、5-羟乙基-2-氰基吡啶50mg及PPh₃98mg溶于5ml无水四氢呋喃中，冰浴下滴加DEAD 0.65ml，0℃搅拌过夜，TLC检测反应，反应完毕，加入乙酸乙酯后饱和NaCl水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝10:1～2:1得产品(2)68mg，收率57.13％。

将氰基化合物(2)53mg、碳酸钾20mg溶于2ml DMSO中，冰浴下滴加 30％的双氧水溶液0.2ml开始反应，TLC检测反应，反应完毕，加入乙酸乙酯后饱和NaCl水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝3:1～1:1得产品(S3)20.5mg，收率36.78％，MS:[M+H]⁺＝368.1。

实施例4：化合物S4的合成

合成路线：

将2,4,6-三氯苯甲醇68mg、5-羟乙基-2-氰基吡啶50mg及PPh₃98mg溶于5ml无水四氢呋喃中，冰浴下滴加DEAD 0.65ml，0℃搅拌过夜，TLC检测反应，反应完毕，加入乙酸乙酯后饱和NaCl水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝10:1～2:1得产品(2)59mg，收率51.97％。

将氰基化合物(3)76mg、碳酸钾20mg溶于2ml DMSO中，冰浴下滴加30％的双氧水溶液0.2ml开始反应，TLC检测反应，反应完毕，加入乙酸乙酯后饱和NaCl水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝3:1～1:1得产品(S4)45mg，收率56.23％，MS:[M+H]⁺＝360.3。

实施例5：化合物S5的合成

合成路线：

将2-硝基-4,6-二氯苯酚207mg、2-氰基-5-羟乙基吡啶148mg及PPh₃524mg溶于10ml无水四氢呋喃中，冰浴下滴加DEAD 0.8ml，0℃搅拌过夜，TLC检测反应，反应完毕，加入乙酸乙酯后饱和NaCl水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝20:1～15:1得产品(22)168mg，收率49.85％。

将氰基化合物(22)75mg、碳酸钾20mg溶于2ml DMSO中，冰浴下滴加30％的双氧水溶液0.2ml开始反应，TLC检测反应，反应完毕，加入纯水10ml，有大量固体析出，过滤得产品35mg，收率44.3％，MS:[M+H]⁺＝356.1。

实施例6：化合物S6的合成

合成路线：

将硝基化合物(4)145mg、锌粉112mg及氯化铵92mg溶于20ml 75％乙醇水溶液中，回流2小时，减压蒸出乙醇，乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝8:1～4:1得产品(5)89mg，收率67.38％。

将氰基化合物(5)89mg、碳酸钾20mg溶于3ml DMSO中，冰浴下滴加30％的双氧水溶液0.2ml开始反应，TLC检测反应，反应完毕，，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝4:1～1:1得产品(S6)53mg，收率56.25％，MS:[M+H]⁺＝326.1。

实施例7：化合物S7的合成

合成路线：

将2,4,6-三氯苯酚196mg、2-氰基-5-羟乙基吡啶148mg及PPh₃393mg溶于10ml无水四氢呋喃中，冰浴下滴加DEAD 262mg，0℃搅拌过夜，TLC检测反应，反应完毕，加入乙酸乙酯后饱和NaCl水溶液洗涤，干燥，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝40:1～20:1得产品(6)86mg，收率26.38％。

将氰基化合物(6)86mg、碳酸钾20mg溶于2ml DMSO中，冰浴下滴加30％的双氧水溶液0.2ml开始反应，TLC检测反应，反应完毕，加入纯水10ml，有大量固体析出，过滤得产品(S7)58mg，收率63.91％，MS:[M+H]⁺＝345.0。

实施例8：化合物S8的合成

合成路线：

将3-羟基-4-硝基苯甲醛167mg、2-氯-5-氨乙基吡啶156mg加入20ml甲醇 中搅拌分散，冰浴下向体系中缓慢加入NaBH₄150mg，升温回流3小时，TLC检测反应完毕，停止反应，冷却，现体系中加入1N的盐酸溶液调节pH1～2，回流1h，冷却过滤，蒸除溶剂，加入乙酸乙酯分散，有机层用碳酸氢钠洗涤、饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝10:1～2:3，得产品(S8)198mg，收率64.5％，MS:[M+1]⁺＝308.1。

实施例9：化合物S9的合成

合成路线：

将2-硝基-5-氟苯甲醛170mg、2-氯-5-氨乙基吡啶160mg加入20ml甲醇中搅拌分散，冰浴下向体系中缓慢加入NaBH₄0.5g，升温回流3小时，TLC检测反应完毕，停止反应，冷却，现体系中加入1N的盐酸溶液调节pH1～2，回流1h，冷却过滤，蒸除溶剂，加入乙酸乙酯分散，有机层用碳酸氢钠洗涤、饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝5:1～2:3，得产品(S9)103mg，收率33.33％，MS:[M+1]⁺＝310.1。

实施例10：化合物S10的合成

合成路线：

将化合物(7)150mg、2-氯-5-氨乙基吡啶160mg加入20ml甲醇中搅拌分散，冰浴下向体系中缓慢加入NaBH₄0.5g，升温回流3小时，TLC检测反应完毕，停止反应，冷却，现体系中加入1N的盐酸溶液调节pH1～2，回流1h，冷 却过滤，蒸除溶剂，加入乙酸乙酯分散，有机层用碳酸氢钠洗涤、饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝6:1～2:3，得产品(S10)87mg，收率30.21％，MS:[M+1]⁺＝289.1。

实施例11：化合物S11的合成

合成路线：

将2,3-二氯苯甲醛174mg、2-氯-5-氨乙基吡啶160mg加入20ml甲醇中搅拌分散，冰浴下向体系中缓慢加入NaBH₄0.5g，升温回流3小时，TLC检测反应完毕，停止反应，冷却，现体系中加入1N的盐酸溶液调节pH1～2，回流1h，冷却过滤，蒸除溶剂，加入乙酸乙酯分散，有机层用碳酸氢钠洗涤、饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析，石油醚：乙酸乙酯＝5:1～2:3，得产品(S11)105mg，收率33.43％，MS:[M+1]⁺＝315.1。

实施例12：大鼠皮层神经元原代培养

第一天(DIV1)取胎龄E18天的孕鼠，用预冷的含1％双抗的无菌去离子水清洗，然后左手夹住颈部皮肤固定脑袋，右手用眼科剪在后颈部剪开小口，再沿着脑中线剪开暴露两个大脑半球；再用弯眼科镊分离2/3大脑皮层，置于含预冷的DMEM的培养皿中。在体视学解剖镜下，剥除脑膜和血管，置于含新鲜的预冷DMEM培养皿中，用眼科剪将皮层剪成小于1mm3的小块组织，将组织小块转移到15mL离心管中，1000rpm离心5min，去除上清，加入10倍体积的预热含ETDA的0.25％Typsin于37℃消化10min，然后加入2mL FEB终止消化；1000rpm离心5min；去除所有上清，加入预热的神经元完成培养基 (Neuronbasal+2％B27，含1％和1％P/S)重悬消化后的组织；然后200目过筛，得到神经细胞悬液。细胞计数后，稀释成5×105个细胞/mL密度的细胞悬液，100μL/孔接种到预包被PDL的96孔板中，于37℃5％CO₂条件下培养。第二天(DIV2)完全培养基半量换液，以后每隔2天半量换液。

实施例13：NMDA：Glycine共诱导神经元兴奋性损伤

原代神经元体外分化至第10-14天(DIV10-14)轴突和树突充分延伸，并表达了NR2B、PSD95、nNOS等突触传递相关蛋白(如图1所示，原代神经元体外培养成熟过程中NMDAR-PSD95-nNOS的表达情况)。

去除96孔板中的完全培养基，用预热的无菌Mg²⁺Free的Locke’s buffer轻柔清洗细胞1次，再换成含有NMDA：Glycine(50μM:10μM)的Mg²⁺Free的Locke’s buffer或孔板对照(Control)诱导30min，然后吸除孔中所有培养基，用含有1mM Mg²⁺的Locke’s buffer轻柔清洗细胞1次终止NMDA:Glycine的诱导，换成预热的完全培养基继续培养4h；然后用CellTiter-检测细胞活力；用以下公式计算，每孔神经元相对活力：细胞存活率Viability(％)＝100*RLU_{NMDA ： Glycine 模型}/RLU_Control(如图2所示，NMDA：Glycine共诱导对原代神经元的兴奋性损伤)。NMDA：Glycine共诱导后，原代神经元细胞活力显著下降(p<0.001)。

实施例14：化合物保护NMDA：Glycine共诱导的神经元损伤

化合物溶解液DMSO，储存液终浓度为10mM，用预热的Locke’s buffer配置化合物终浓度分别为1μM和10μM(DMSO含量为0.1％)或DMSO对照。原代神经元体外分化至第10-14天(DIV10-14)，去除96孔板中的完全培养基，用预热的无菌Mg²⁺Free的Locke’s buffer轻柔清洗细胞1次，加入含有100μL不同浓度的化合物(0，1μM或10μM)的Locke’s buffer 37℃5％CO₂继续培养， 孵育30min后加入11.1μL 10×NMDA：Glycine(500μM：100μM)诱导Locke’s buffer或空白Locke’s buffer，37℃5％CO₂继续培养30min；然后吸除孔中所有培养基，用含有1mM Mg²⁺的Locke’s buffer轻柔清洗细胞1次终止NMDA诱导，换成预热的完全培养基继续培养4h；然后用CellTiter-检测细胞活力。

化合物抑制NMDA：Glycine共诱导的神经元损伤的能力，用以下公式计算：抑制率(％)＝100*(RLU_化合物-RLU_{NMDA ： Glycine 模型})/(RLU_Control-RLU_{NMDA ： Glycine 模型})不同化合物抑制NMDA：Glycine共诱导神经兴奋性损伤的活性见表A。

表A不同浓度的化合物对NMDA：Glycine共诱导的兴奋性损伤的抑制活性：

化合物编号	Inhibition(％)@1μM	Inhibition(％)@10μM
			S1	18.1	27.6
S2	11.7	21.0
			S3	15.9	14.9
S4	0.5	6.4
			S5	7.2	8.7
S7	11.1	7.1
			S6	13.5	34.4
S8	5.9	7.3
			S9	10.7	21.8
S10	22.1	16.1
			S11	5.8	29.7

实施例15：大鼠基础阈值及SNL神经病理性疼痛模型的制作方法

SD大鼠(200±10g)手术前连续3天，利用动态足底板触觉仪(Ugo Basile， 37450)测定每只大鼠的机械痛抬足阈值的基础值；然后采用脊神经结扎法(segmental spinal nerve ligation，SNL)制备神经病理性疼痛模型。腹腔注射2％水合氯醛(0.2mL/l0g)麻醉SD大鼠，翻正反射消失后，固定大鼠于俯卧位。采用Kim和Chung的方法制作模型：在大鼠背部从L4-S2水平钝性分离长约3-5cm的正中皮肤切口，分离椎骨旁肌肉至第六腰椎突，暴露并切除右侧L5/L6关节突，部分咬开L6横突，从而能够暴露右侧的L4-L6脊神经，轻轻分离出L5神经，并用5-0丝线紧紧结扎L5。然后逐层缝合切口，碘伏消毒皮肤，继续饲养。术后动物出现步态异常，手术侧后肢除了轻度外翻、足趾紧收外，无其它畸形改变。两周后，再重新测试测定每只大鼠的机械痛抬足阈值，来筛选SNL疼痛模型成功与否，PWT小于15g即视为疼痛模型造模成功。图3所示，SNL造模前后大鼠PWT值显著降低(p<0.001)，由造模前的(25.10±1.389)下降至(13.07±0.5335)(如图3所示，SNL成功造模前后大鼠缩足反应阈值(PWT)的变化)。

实施例16：化合物S2对SNL大鼠机械疼痛的镇痛作用

大鼠SNL造模成功后，化合物给药当天给药前测定每只SNL模型大鼠的PWT，经口灌胃给予S230mg/kg(处方0.5％CMC-Na混悬液，灌胃给药体积10mL/kg)后分别于0.5h和1h再检测每只大鼠的PWT值。如图4所示，给药前大鼠的PWT从造模前的基础值(25.10±1.389)显著降低至12.48±0.8662(p<0.001)，S2灌胃给药后0.5h，PWT显著升高至(19.03±0.9308)(p<0.001)，给药后1h，PWT均值略有升高15.28±1.536，但与给药前相比无显著(p＝0.1313)。这说明，S2经口给药后能够在短时间内(<0.5h)快速升高PWT值，从而起到较好的镇痛效果(如图4所示，经口灌胃S2后对SNL大鼠PWT的影响)。

结论：综合上述实验结果，本发明中的化合物是一种PSD-95/nNOs解偶联剂，能选择性抑制PSD-95和nNOs之间的结合对于神经病理性疼痛具有重要的 潜在治疗价值。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一类如式I所示的吡啶苯基偶联化合物或其药学上可接受的盐

式Ⅰ

其中：

R₁为卤素、CONH₂；

R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、芳基、杂芳基、杂脂环基、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基或C₂-C₈炔基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基或C₂-C₈炔基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₁₀烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基或C₂-C₈炔基中的任选位置可被一个或两个以上的卤素原子、氰基、硝基、芳基、杂芳基、芳氧基、杂脂环基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；

R₇~R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₈烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基；

X为选自-O-，-N-；

m、n独立选自0或1；

当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；

当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。

2.如权利要求1所述的化合物，其中：

R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₆链烯基或C₂-C₆炔基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₆链烯基或C₂-C₆炔基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₆链烯基或C₂-C₆炔基中的任选位置可被一个或两个以上的卤素原子、氰基、硝基、芳基、杂芳基、芳氧基、杂脂环基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；

R₇~R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基；

X为选自-O-，-N-；

m、n独立选自0或1；

当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；

当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。

3.如权利要求1所述的化合物，其中：

R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、C₁-C₆烷基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₆烷基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₆烷基中的任选位置可被一个或两个以上的卤素原子、氰基、硝基、芳基、杂芳基、芳氧基、杂脂环基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；

R₇~R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₃烷基；

X为选自-O-，-N-；

m、n独立选自0或1；

当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；

当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。

4.如权利要求1所述的化合物，其中：

R₂～R₆为氢、卤素、羟基、巯基、硝基、-NR₇R₈、氰基、三卤烷基、羧基、酰基、烷氧基、C₁-C₃烷基，其中任选两个位置的取代基可以合起来构成脂肪环、杂环、芳环或杂芳环，所述C₁-C₃烷基中的任选-CH₂-可被一个或两个以上的-O-、-S-、-SO₂-、-C(O)-或/和-NR₉-置换，所述C₁-C₃烷基中的任选位置可被一个或两个以上的卤素原子、氰基、硝基、羟基、-NR₁₀R₁₁取代；

R₇~R₁₁独立选自氢、羟基、C₁-C₃烷基；

X为选自-O-，-N-；

m、n独立选自0或1；

当R₁为卤素时，X为-N-且m、n同时为1；

当R₁为CONH₂时，m、n不同时为0。

5.化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物选自：

化合物1：5-(2-(2,4-二氯-6-(二甲基氨基)苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S1所示；

化合物2：2,4-二氯-6-(((2-(6-氯吡啶-3-基)乙基)氨基)甲基)苯酚，如S2所示；

化合物3：5-(2-(2,4-二氯-6-((二甲基氨基)甲基)苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S3所示；

化合物4：5-(2-((2,4,6-三氯苄基)氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S4所示；

化合物5：5-(2-(2,4-二氯-6-硝基苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S5所示；

化合物6：5-(2-(2-氨基-4,6-二氯苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S6所示；

化合物7：5-(2-(2,4,6-三氯苯氧基)乙基)-2-吡啶甲酰胺，如S7所示；

化合物8：5-(((2-(6-氯吡啶-3-基)乙基)氨基)甲基)-2-硝基苯酚，如S8所示；

化合物9：2-(6-氯吡啶-3-基)-N-(5-氟-2-硝基苄基)乙胺，如S9所示；

化合物10：N-(苯并[c][1,2,5]噁二唑-4-基甲基)-2-(6-氯吡啶-3-基)乙胺，如S10所示；

化合物11：2-(6-氯吡啶-3-基)-N-(2,3-二氯苄基)乙胺，如S11所示。

6.如权利要求1～5中任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗脑卒中、神经病理性疼痛、阿尔茨海默病或血管性痴呆药物中的应用。

7.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1～5中任意一项所述化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。