CN105954413B - 同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的lc-ms/ms方法 - Google Patents

同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的lc-ms/ms方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC‑MS/MS方法。所述的8种人工合成着色剂为新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑。本发明首先加热除去乙醇、调酸后，采用自组装的固相萃取净化小柱(阳离子交换填料+阴离子交换填料)对不同性质的人工合成着色剂实现同步净化、富集，采用LC‑MS/MS一次色谱过程进行配制酒中8种人工合成着色剂的同时定量测定。该方法操作简单，净化效果好，灵敏度高，重现性好，可广泛应用于配制酒中上述8种人工合成着色剂的检测。

Description

同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法
技术领域
本发明涉及一种同步快速检测配制酒中多种人工合成着色剂的方法，具体涉及一种可同时对配制酒中8种人工合成着色剂进行提取、净化、定量测定的固相萃取/LC-MS/MS方法。
背景技术
人工合成着色剂是通过化学合成的方法生产的有机色素，主要以苯、甲苯、萘等芳烃类化工产品为原料，经过磺化、卤化、偶氮化等一系列有机反应化合而成。其成本低廉、色泽鲜艳、着色力强、性能稳定，在食品生产加工行业中被广泛应用。但人工合成着色剂大多为偶氮类化合物，过量食用可对人体有致畸致癌作用。近年来，为了加强对食用合成着色剂的管理，许多国家对食用合成色素的理化性质及安全性做了深入细致的研究，明确限定了食用合成色素的使用品种、使用范围及使用量。美国严禁在加工食品中使用偶氮玉红、罗丹明B、喹啉黄、萘酚黄、酸性紫6B和亮黑等，允许使用靛蓝、新红；欧盟严禁使用新红、罗丹明B、萘酚黄和酸性紫6B，允许使用靛蓝、偶氮玉红、喹啉黄、亮黑，但有限量要求；我国GB2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对靛蓝、新红、偶氮玉红、喹啉黄的使用也有严格的限量要求，罗丹明B、萘酚黄、亮黑和酸性6B紫则严禁使用。
目前，国内外用于食品中多种合成着色剂的检测方法主要有分光光度法、高效液相色谱法、高效液相串联质谱法等。分光光度法操作繁琐、定性定量准确度较差。液相色谱法是目前应用最广泛的检测方法，但是缺乏配套的确证技术，无法满足复杂的食品基质中目标物的定性确证要求。已报道的检测食品中合成着色剂的LC-MS/MS方法，只涉及单一系列着色剂且无普适的前处理净化手段。因此，建立一种同时提取、净化、同步快速定量检测配制酒中新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑8种人工合成着色剂的方法变得尤为重要。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法。该方法同步提取、一次过柱萃取净化、一次色谱过程定量分析配制酒中的8种人工合成着色剂，包括新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑。该方法操作简单、灵敏度高、重现性好、准确率高。
本发明所采用的技术方案为：一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法，其特征是，
所述的8种人工合成着色剂为新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑；
具体包括以下步骤：
(1)制备：取配制酒样品，加热除去乙醇，加入超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至3-6，得待净化溶液；
(2)净化：
a、同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱的组装：取40-60μm阳离子交换填料和40-60μm阴离子交换填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；
b、柱活化：将上述固相萃取小柱依次用pH值6-7的水、甲醇活化；
c、加样淋洗：转移上述待净化液至固相萃取小柱，依次用pH值3-6的水、甲醇淋洗SPE柱；
d、洗脱：低真空吹干SPE柱，用3％-6％的氨化甲醇洗脱待分析成分并接收，收集液于50℃氮气吹干，加水溶解，涡流混合后过0.22μm滤膜，供LC-MS/MS分析；
(3)检测：步骤(2)得到的待测样品用液相色谱-串联四级杆质谱进行测定。
优选的，具体包括以下步骤：
(1)制备：取配制酒样品于烧杯中缓缓加热至70℃搅拌除去乙醇，密封标识，待用；称取样品10g于25mL容量瓶中，加入10mL超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至3-6，超纯水定容得待净化溶液；
(2)净化：
a、同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱(6mL)的组装：分别称取40-80mg40-60μm阳离子交换填料和40-80mg 40-60μm阴离子交换填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；
所述的阳离子交换填料为选自苯磺酸键合聚苯乙烯二乙烯苯共聚物(PCX)、苯磺酸键合硅胶(SCX)、丙磺酸键合硅胶(PRS)中的至少一种，优选PCX填料；
所述的阴离子交换填料为选自聚酰胺(PA)、NH2氨丙基键合硅胶、多胺化聚苯乙烯二乙烯苯共聚物(PWAX)填料中的至少一种，优选PWAX填料；
所述的阳离子交换填料和阴离子交换填料的比例为重量比1:0.5～1:2；优选重量比1：1；
优选的，采用60mgPCX+60mgPWAX固相萃取小柱对样品进行净化处理；
b、柱活化：将上述固相萃取小柱依次用4-8mL pH值6-7的水、4-8mL甲醇活化；
c、加样淋洗：转移上述待净化液8-15mL至固相萃取小柱，依次用4-8mL pH值3-6的水、4-8mL甲醇淋洗SPE柱；
d、洗脱：低真空吹干SPE柱，用4-8mL 3％-6％的氨化甲醇(优选6ml的5％氨化甲醇)洗脱待分析成分并接收，收集液于50℃氮气吹干，用水定容至1.0mL，涡流混合后过0.22μm滤膜，供LC-MS/MS分析。
(3)检测：步骤(2)得到的待测样品用液相色谱-串联四级杆质谱进行测定。
优选的，所述步骤(3)中液相色谱-串联四级杆质谱的仪器参数条件如下：
液相色谱条件为：
质谱条件为：
选择反应监测母离子、子离子和碰撞能量如表2所示。实际测试时保留时间可以在表2基础上±5％。
本发明的有益效果：
本发明对配制酒中8种人工合成着色剂的含量检测进行了研究，样品用柠檬酸水溶液调试pH值至3-6后，用自组装固相萃取小柱净化，采用LC-MS/MS定量测定。该方法可实现性质不同的人工合成着色剂一次过柱萃取净化、一次色谱过程定量分析，操作简单、灵敏度高、重现性好、准确率较高。可广泛应用于配制酒中新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑8种人工合成着色剂的检测。
本发明利用自组装的固相萃取净化小柱，且采用阴离子填料和阳离子填料按一定比例混装的方式制成固相萃取小柱，对样品提取液进行净化处理，可在有效除去干扰物的同时实现对不同性质人工合成着色剂的净化、富集，方法灵敏度、准确度和精确度均符合食品添加剂分析标准，具有一定的新颖性和适用性。同时上述方式，相比采用两根不同的固相萃取柱分开萃取的方式节省了时间和成本。且本发明自组装小柱，可以根据样品中色素含量适当调整填料的粒径和用量，方便适用。本发明首次使用PWAX柱进行固相萃取，它的吸附容量大，萃取效果好。
本发明的方法中，8种人工合成着色剂同时进行提取、净化等前处理(本发明的8种物质为非同系物，由于不同物质的性质不同，在提取的过程中，很难把所有目标物都提取完全，但是，本发明的方法，同时提取、净化，并且8种目标物提取比较完全，实施例中的回收率就可以说明这点)，并且一次上机检测，节约时间和成本。
附图说明
图1 为甲醇+5mmol乙酸铵水溶液8种人工合成着色剂MRM色谱图；
图2 8种人工合成着色剂混合标准溶液的MRM色谱图；其中图2a为正离子模式下酸性紫和罗丹明B的MRM色谱图；图2b为负离子模式下新红、靛蓝、偶氮玉红、喹啉黄、萘酚黄、亮黑的MRM色谱图；
图3 葡萄酒样品中8种人工合成着色剂的MRM色谱图；
图4 葡萄酒加标样品中8种人工合成着色剂的MRM色谱图；
图5 是实施例1加标样品的MRM色谱图；
图6 是实施例2加标样品的MRM色谱图；
具体实施方式
为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明的内容不仅仅局限于下面的实施例，实施例不应视作对本发明保护范围的限定。
1仪器与试剂
液相色谱串联质谱仪：Aglient1200高效液相色谱仪，API4000质谱仪(美国ABSCIEX)；感量为0.1mg的分析天平(瑞士梅特勒公司)；Milli-Q纯水器(美国Millipore公司)；N-EVAP24氮吹仪(美国)；量程为10-100μL、100-1000μL移液枪(Eppendof公司)。
新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑标准品(自制)；甲醇：色谱纯(Merk公司)；乙腈：色谱纯(Merk公司)；甲酸：色谱纯(Merk公司)；乙酸铵：分析纯；柠檬酸：分析纯；氨水：分析纯；无水乙醇：分析纯；PWAX填料：Agela Technologies公司；PCX填料：Agela Technologies公司；SCX填料：Agela Technologies公司；PRS填料：AgelaTechnologies公司；NH2氨丙基键合硅胶填料：Agela Technologies公司；C18SPE萃取柱：Agela Technologies公司；阳离子交换(PCX)SPE萃取柱：Agela Technologies公司；聚酰胺(PA)SPE萃取柱：Agela Technologies公司。
2标准溶液配制
分别称取新红、靛蓝、酸性红、喹啉黄、萘酚黄、酸性紫6B、罗丹明B、亮黑8种着色剂标准品各100.0mg，用水溶解后，并分别定容于100mL棕色容量瓶中，即得1000mg/L标准储备液。棕色瓶储存于-18℃备用。
取空白样品按上述提取和净化方法进行处理，得到空白基质提取净化液。用该基质溶液稀释标准储备制成系列标准工作溶液，进行LC-MS/MS分析。以标准工作液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制相关线性方程。
3样品提取与净化
3.1制备：
取500mL样品于烧杯中缓缓加热至70℃搅拌除去乙醇，密封标识，待用；称取样品10g于25mL容量瓶中，加入10mL超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至3-5，超纯水定容得待净化溶液；
3.2净化：
3.2.1同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱的组装：分别称取40-80mg40-60μm阳离子交换填料和40-80mg 40-60μm阴离子交换填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；
所述的阳离子交换填料为选自苯磺酸键合聚苯乙烯二乙烯苯共聚物(PCX)、苯磺酸键合硅胶(SCX)、丙磺酸键合硅胶(PRS)中的至少一种，所述的阴离子交换填料为选自丙基乙二胺(PSA)、聚酰胺(PA)、多胺化聚苯乙烯二乙烯苯共聚物(PWAX)填料中的至少一种；
所述的阳离子交换填料和阴离子交换填料的比例为重量比1:0.5～1:2。
3.2.2柱活化：将上述固相萃取小柱依次用4-8mL pH值6-7的水、4-8mL甲醇活化。
3.2.3加样淋洗：转移上述待净化液8-15mL至固相萃取小柱，依次用4-8mL pH值3-6的水、4-8mL甲醇淋洗SPE柱。
3.2.4洗脱：低真空吹干SPE柱，用4-8mL 3％-6％的氨化甲醇洗脱待分析成分并接收，收集液于50℃氮气吹干，用水定容至1.0mL，涡流混合后过0.22μm滤膜，供LC-MS/MS分析。4检测
待测样品用液相色谱-串联四级杆质谱进行测定，仪器参数条件见下表1，选择反应监测母离子、子离子和碰撞能量见表2。
表1 液相色谱-串联四级杆质谱的仪器参数条件
表2 8种人工合成着色剂的LC-MS/MS分析参数
5.结果与讨论
5.1色谱质谱条件的优化
5.1.1流动相的选择
比较了乙腈+0.1％甲酸水溶液，甲醇+5mmol/L乙酸铵水溶液，甲醇+0.1％甲酸水溶液不同流动相对色谱图的影响。研究发现以乙腈+0.1％甲酸水、甲醇+0.1％甲酸水为流动相，有的目标物峰形差，离子化响应值低。甲醇+5mmol/L乙酸铵水溶液为流动相，采用梯度洗脱，8种色素能够快速分离，且每种化合物色谱峰对称尖锐，分离效果较好，MRM色谱图如附图1所示。
5.1.2质谱测定条件的优化
首先分别采用浓度为500μg/L的标准溶液以蠕动泵连续进样的方式进行母离子全扫描，确定每种农药的母离子质量数，然后再以母离子进行2级碰撞扫描，选择两个丰度比较高的子离子作为定性和定量离子。同时优化质谱条件，确定质谱最佳条件，建立多离子反应监测模式。图2a为正离子模式下酸性紫和罗丹明B的MRM色谱图；图2b为负离子模式下新红、靛蓝、偶氮玉红、喹啉黄、萘酚黄、亮黑的MRM色谱图。
5.2样品基质效应的消除
电喷雾离子源(ESI)易受样品基质的影响。试验中发现样品基质对离子化有抑制作用，不同色素受样品基质抑制程度不同，不同样品基质对色素离子化抑制程度也存在差异。萘酚黄，喹啉黄受样品基质影响较大；新红、靛蓝、酸性紫6B、酸性红、亮黑、罗丹明B影响较小。为消除样品基质效应，应以空白样品提取液作为标注溶液的稀释液来消除样品基质效应。
5.3pH值对回收率的影响
罗丹明B、萘酚黄、喹啉黄、新红、靛蓝、酸性紫6B、酸性红、亮黑8种着色剂均为水溶性，因此采用水作为溶剂提取。本研究比较了提取后直接过柱和调节pH再过柱净化带来的影响，发现：水样直接上柱喹啉黄、酸性红附着能力弱，在甲醇净化时会溶出，回收率变差。改变pH为3，4，5时发现pH＝4时效果最好，因此本文选择了水作为提取溶剂，提取后调节提取液pH为4。
5.4净化SPE柱的选择
常用来做色素的SPE净化萃取柱有阳离子交换(如PCX)SPE柱、阴离子交换柱(如PWAX、PA)SPE柱及C18粉制成的SPE柱等，C18粉具有疏水作用对非极性的组分有吸附作用，常用来去除杂质，对水溶性的着色剂几乎没有吸附能力。根据着色剂酸碱性的不同，填料有选择性的吸附目标物，如PCX粉对目标物罗丹明B有很好的吸附，但对其他酸性着色剂吸附差；PA粉、PWAX粉对酸性着色剂有很好的选择性吸附性。由于8种着色剂中既有酸性也有碱性化合物，本课题主要研究采用一次过柱解决净化问题。优选地，采用PCX粉：PWAX为填料时吸附两种性质的化合物能力最佳，60mgPCX：60mgPWAX/6mL自行填制净化萃取柱对样品进行净化处理。
5.5洗脱液的选择
本研究测试了纯甲醇洗脱上样后的SPE柱，发现目标化合物几乎洗脱不下来。比较1％、2％、4％、5％、6％、10％氨化甲醇作为洗脱液的洗脱效果。发现同样取6mL洗脱液时，5％氨化甲醇能洗脱完全，因此采用5％氨化甲醇作为洗脱液。
5.6方法验证
5.6.1方法的线性和检出限
将空白样品按上述提取和净化过程进行处理，得到空白基质提取净化液。用该基质溶液将标准液稀释成罗丹明B标准系列：20μg/L，40μg/L，80μg/L，160μg/L，200μg/L；酸性紫标准系列50μg/L，100μg/L，200μg/L，400μg/L，500μg/L；其余六种标准系列均为100μg/L，200μg/L，400μg/L，800μg/L，1000μg/L的混合标准工作液，LC/MS/MS进行分析后，计算得到标准曲线及相关系数，见表3。由此可见8种色素在线性范围内具有良好的线性关系，相关系数在0.9889-0.9991之间。
方法的检出限(LOD)以空白样品基质稀释标准曲线上的最低浓度出峰时，取信噪比S/N＝3和样品处理过程的稀释倍数计算得出。定量限(LOQ)以空白样品基质稀释标准曲线上的最低浓度出峰时，取信噪比S/N＝10和样品处理过程的稀释倍数计算得出。具体数据见表3。
表3 8种色素的线性方程、线性范围、相关系数和方法检出限
5.6.2回收率和精密度
对阴性配制酒样品进行添加回收实验。由于酸性紫、罗丹明B响应值高，分别添加浓度酸性紫为20、50、100μg/kg；罗丹明B为5、10、50μg/kg；其余6种色素添加浓度分别为50、100、200μg/kg。称样后加入标准溶液，涡旋混匀放置0.5h后按上文进行样品处理。每个水平重复6次，测精密度。结果见表4。可见，8种色素在配制酒中添加平均回收率在78.6％-102％之间，相对标准偏差(RSD)均小于8.0％。
表4 样品中8种色素回收率和精密度实验结果
5.7方法的应用
葡萄酒样加入罗丹明B、萘酚黄，喹啉黄、新红、靛蓝、酸性紫6B、酸性红、亮黑标准溶液的样品，按“3样品提取与净化”的实验步骤操作完毕后上机，测得色谱图分别如图3和图4所示。从色谱图中可以看出，葡萄酒样品基质不干扰8种人工着色剂的测定，加标样品回收较好，但罗丹明B在空白中有本底，需要扣空白。
实验表明，采用本法可同步净化、同时检测配制酒中8种人工合成着色剂，简便快速，准确灵敏、重现性好，完全满足进出口食品的产品质量控制要求。
实施例1：
葡萄酒样品中8种人工合成着色剂的测定。
3样品提取与净化
3.1提取
取500mL样品于烧杯中缓缓加热至70℃搅拌除去乙醇，密封标识，待用。
称取样品10g于25mL容量瓶中，加入10mL超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至4，超纯水定容得待净化溶液；
3.2净化
3.2.1同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱的组装：分别称取60mg 40-60μm PCX阳离子交换填料和60mg 40-60μmPWAX混合型弱阴离子交换填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；
3.2.2柱活化：将上述固相萃取小柱依次用6mL pH值6-7的水、6mL甲醇活化；
3.2.3加样淋洗：转移上述待净化液10mL至固相萃取小柱，依次用6mL pH 4的水、6mL甲醇淋洗SPE柱。
3.2.4洗脱：低真空吹干SPE柱，用6mL 5％的氨化甲醇洗脱待分析成分并接收，收集液于50℃氮气吹干，用水定容至1.0mL，涡流混合后过0.22μm滤膜，供LC-MS/MS分析。
4检测
待测样品用液相色谱-串联四级杆质谱进行测定，仪器参数条件见表1，选择反应监测母离子、子离子和碰撞能量见表2；其加标样品的MRM色谱图如图5所示，该样品回收率和精密度实验结果见表4。
实施例2
黄酒样品中8种人工合成着色剂的测定。
3样品提取与净化
3.1提取
取约500mL样品于烧杯中缓缓加热至70℃搅拌除去乙醇，密封标识，待用。
称取样品10g于25mL容量瓶中，加入10mL超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至4，超纯水定容得待净化溶液；
3.2净化
3.2.1同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱的组装：分别称取分别称取60mg 40-60μmPCX阳离子交换填料和60mg 40-60μmPWAX混合型弱阴离子交换填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；
3.2.2柱活化：将上述固相萃取小柱依次用6mL pH值6-7的水、6mL甲醇活化；
3.2.3加样淋洗：转移上述待净化液10mL至固相萃取小柱，依次用6mL pH值4的水、6mL甲醇淋洗SPE柱。
3.2.4洗脱：低真空吹干SPE柱，用6mL 5％的氨化甲醇洗脱待分析成分并接收，收集液于50℃氮气吹干，用水定容至1.0mL，涡流混合后过0.22μm滤膜，供LC-MS/MS分析。
4检测
待测样品用液相色谱-串联四级杆质谱进行测定，仪器参数条件见表1，选择反应监测母离子、子离子和碰撞能量见表2；其加标样品的MRM色谱图如图6所示，该样品回收率和精密度实验结果见表4。

Claims (5)

1.一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法，其特征是，
所述的8种人工合成着色剂为新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑；
具体包括以下步骤：
(1)制备：取配制酒样品，加热除去乙醇，加入超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至3-6，得待净化溶液；
(2)净化：
a、同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱的组装：取40-60μm苯磺酸键合聚苯乙烯二乙烯苯共聚物PCX填料和40-60μm多胺化聚苯乙烯二乙烯苯共聚物PWAX填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；
所述的苯磺酸键合聚苯乙烯二乙烯苯共聚物PCX填料和多胺化聚苯乙烯二乙烯苯共聚物PWAX填料的比例为重量比1:0.5～1:2；
b、柱活化：将上述固相萃取小柱依次用pH值6-7的水、甲醇活化；
c、加样淋洗：转移步骤(1)的待净化溶液至固相萃取小柱，依次用pH值3-6的水、甲醇淋洗固相萃取小柱；
d、洗脱：吹干固相萃取小柱，用3％-6％的氨化甲醇洗脱待分析成分并接收，收集液氮气吹干，加水溶解，涡流混合后过0.22μm滤膜，供LC-MS/MS分析；
(3)检测：步骤(2)得到的待测样品用LC-MS/MS进行测定；
所述LC-MS/MS的仪器参数条件如下：
液相色谱条件为：
质谱条件为：
2.如权利要求1所述的一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法，其特征是，8种人工合成着色剂的LC-MS/MS分析参数如下表所示：
3.如权利要求1或2所述的一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法，其特征是，具体包括以下步骤：
(1)制备：取配制酒样品于烧杯中缓缓加热至70℃搅拌除去乙醇，密封标识，待用；称取样品10g于25mL容量瓶中，加入10mL超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至3-6，超纯水定容得待净化溶液；
(2)净化：
a、同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱的组装：分别称取40-80mg 40-60μm苯磺酸键合聚苯乙烯二乙烯苯共聚物PCX填料和40-80mg 40-60μm多胺化聚苯乙烯二乙烯苯共聚物PWAX填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；
b、柱活化：将上述固相萃取小柱依次用4-8mL pH值6-7的水、4-8mL甲醇活化；
c、加样淋洗：转移步骤(1)的待净化溶液8-15mL至固相萃取小柱，依次用4-8mL pH值3-6的水、4-8mL甲醇淋洗固相萃取小柱；
d、洗脱：低真空吹干固相萃取小柱，用4-8mL 3％-6％的氨化甲醇洗脱待分析成分并接收，收集液于50℃氮气吹干，用水定容至1.0mL，涡流混合后过0.22μm滤膜，供LC-MS/MS分析；
(3)检测：步骤(2)得到的待测样品用LC-MS/MS进行测定。
4.如权利要求3所述的一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法，其特征是，分别称取60mg 40-60μm苯磺酸键合聚苯乙烯二乙烯苯共聚物PCX填料和60mg40-60μm多胺化聚苯乙烯二乙烯苯共聚物PWAX填料。
5.如权利要求3所述的一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法，其特征是，所述洗脱步骤采用6ml的5％氨化甲醇。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN106483241A (zh) * 2016-10-28 2017-03-08 陕西科技大学 葡萄酒中色素的超高效液相色谱‑四级杆静电场轨道离子阱质谱筛查方法
CN108008026B (zh) * 2017-11-01 2021-03-09 广西壮族自治区食品药品检验所 一种山楂丸中13种着色剂同步检测的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4264439A (en) * 1979-10-09 1981-04-28 The Dow Chemical Company Separation of anion and cation exchange resins in a mixed resin bed
CN104569237A (zh) * 2013-10-10 2015-04-29 惠州中创化工有限责任公司 一种测定液化石油气中甲缩醛组分的方法
CN105403630A (zh) * 2015-10-27 2016-03-16 云南瑞升烟草技术（集团）有限公司 一种检测再造烟叶用辅料中九种合成着色剂浓度的方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104007301A (zh) * 2013-02-21 2014-08-27 旭达电脑（昆山）有限公司 万用表

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4264439A (en) * 1979-10-09 1981-04-28 The Dow Chemical Company Separation of anion and cation exchange resins in a mixed resin bed
CN104569237A (zh) * 2013-10-10 2015-04-29 惠州中创化工有限责任公司 一种测定液化石油气中甲缩醛组分的方法
CN105403630A (zh) * 2015-10-27 2016-03-16 云南瑞升烟草技术（集团）有限公司 一种检测再造烟叶用辅料中九种合成着色剂浓度的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Weak anion and cation exchange mixed-bed microcolumn for protein separation;Chunyan Hou等;《J. Sep. Sci.》;20101231;第33卷;第3299-3303页 *
液相色谱串联质谱法检测食品中4种人工合成着色剂;郑新华等;《食品安全质量检测学报》;20160430;第7卷(第4期);第1412-1418页 *

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