CN105831767A - 用于增强免疫力和抗疲劳的组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及食品技术领域，具体公开了一种用于增强免疫力和抗疲劳的组合物及其制备方法和应用，其中组合物包括20～40重量份的α‑亚麻酸原料油，55～75重量份的茶油和5～20重量份的辅酶Q10。制备方法包括：将α‑亚麻酸原料油、茶油、辅酶Q10搅拌、混匀得到混合物。本发明采用α‑亚麻酸原料油、茶油和辅酶Q10进行复配，三者相辅相成，显著缓解体力疲劳，增强免疫力，并兼具抗氧化作用，可应用于制备用于增强免疫力、抗疲劳的保健品。

Description

用于增强免疫力和抗疲劳的组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及食品技术领域，尤其涉及一种增强免疫力和抗疲劳的组合物及其制备方法和应用。

背景技术

疲劳一般以疲劳感、怠倦感为主要症状，是伴随其他睡眠障碍、干劲低下等多种症状的疾病。疲劳感、倦怠感是提示身体异常的中药警报之一，即使在健康时也可在进行剧烈运动、长时间劳动或在过度的精神压力下等自我感觉到的一种生理学上的疲劳。通常通过身体休息可以回复到原本正常的状态，不会长久地持续。但由于现代人大多数在长时间的劳动、过度的精神压力状况下难以得到充分的休息，所以常常容易发生疲劳。疲劳的表现为身体困倦，精神倦怠，注意力减退，工作效率下降，是一个经过适当时间休息和调整可以恢复的生理现象，是一个极其复杂的身体变化综合反应过程，经常处于疲劳状态就会发展为病理性损害。

免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物例如病毒、细菌等，处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。人体内执行这一功能的是免疫系统。因此，免疫力低下，病毒性疾病易侵入，易感冒等，得了疾病难以根治，患病后疾病的治疗的疗程长。人体免疫力增强，能预防病毒性的疾病发生，也能控制和减少细菌性疾病的产生和发展，还能提高人体素质，又能加速大多数疾病的治愈，增强自身的免疫力是一种强身健体的最佳方法。

α-亚麻酸是一种omega-3系多不饱和脂肪酸，是构成人体脑细胞和组织细胞的重要成分。而人体不能合成α-亚麻酸，只能依靠食物来源获得。它进入人体后，在酶的催化作用下，转化成为二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，可以抑制机体的免疫功能和炎症反应，对多种免疫细胞的功能具有调节作用。

辅酶Q₁₀是一种广泛存在于生物体细胞中的化学组分，无毒副作用。它是人体细胞能量制造的基础，具有代谢性强心作用，效果确切。辅酶Q₁₀主要用于急慢性病毒性肝炎、急性肝坏死的治疗，对心血管疾病和高血压有非常好的疗效，它还可以用于癌症的综合治疗，同时在抗衰老、抗疲劳、减肥和美容等方面独具功效。

但两者单独使用对增强免疫力、抗疲劳的效果均不理想。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种增强免疫力和抗疲劳的组合物，还提供该组合物的制备方法，具有工艺简单、成本低、营养损失小等优势，可应用于制备用于增强免疫力、抗疲劳的保健品。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，优选的，包括20～40重量份的α-亚麻酸原料油，55～75重量份的茶油，5～20重量份的辅酶Q10。

上述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，优选的，所述α-亚麻酸原料油为紫苏油或亚麻籽油。

上述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，优选的，所述组合物包括27重量份的紫苏油，63重量份的茶油、10重量份的辅酶Q10。

上述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，优选的，所述组合物包括25重量份的亚麻籽油、55重量份的茶油、20重量份的辅酶Q10。

上述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，优选的，所述α-亚麻酸原料油中α-亚麻酸的含量为50wt％～65wt％。

上述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，优选的，所述茶油中含有60wt％～85wt％的油酸、0.08mg/g～0.082mg/g的茶多酚、0.08mg/g～0.15mg/g的维生素E。

上述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，优选的，所述组合物还包括10～30重量份的明胶。

作为一个总的技术构思，本发明还提供了一种上述用于增强免疫力和抗疲劳的组合物的制备方法，优选的，包括以下步骤：将α-亚麻酸原料油、茶油、辅酶Q10搅拌、混匀得到混合物。

上述的制备方法，优选的，所述制备方法还包括：将所述混合物制备成软胶囊或粉剂。

作为一个总的技术构思，本发明还提供了一种上述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物在制备用于增强免疫力、抗疲劳的保健品中的应用。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

(1)本发明提供了一种用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，采用α-亚麻酸原料油，茶油和辅酶Q10复配，α-亚麻酸是一种omega-3系多不饱和脂肪酸，是构成人体脑细胞和组织细胞的重要成分。而人体不能合成α-亚麻酸，只能依靠食物来源获得。它进入人体后，在酶的催化作用下，转化成为二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，可以抑制机体的免疫功能和炎症反应，对多种免疫细胞的功能具有调节作用。茶油中的茶多酚具有抗炎等作用，还含有天然抗氧化剂维生素E。辅酶Q10是一种脂溶性醌类化合物，参与线粒体氧化磷酸化与ATP的产生过程，调控细胞氧化还原反应环境，辅助还原电子的穿膜过程，参与细胞质膜与内膜间质子梯度的形成，是细胞呼吸和代谢的激活剂，也是重要的抗氧化剂和非特异性免疫增强剂，在生物体能量的产生、功能衰退病的防御、免疫系统的调节、心脏和肌肉组织受损后的恢复等方面起非常重要的作用。本发明将三者成分复配，α-亚麻酸原料油与茶油的加入不仅可以调节n-6/n-3系脂肪酸的浓度与比例(n-6∶n-3为2～3∶1)，可调节机体的免疫功能和炎症反应，同时对多种免疫细胞的功能具有调节作用；饱和脂肪酸可以提供能量。三者相辅相成，达到增强免疫力、抗疲劳效果。

(2)本发明提供了一种用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，包括320～40重量份的α-亚麻酸原料油，55～75重量份的茶油，α-亚麻酸原料油中所含α-亚麻酸为n-3多不饱和脂肪酸，茶油中含量较高的亚油酸为n-6单不饱和脂肪酸，α-亚麻酸在体内可转化为n-3多不饱和脂肪酸的EPA和DHA；亚油酸在体内可转化为n-6单不饱和脂肪酸的ARA。此三种多不饱和脂肪酸是调节机体免疫与炎症相关因子的中药前体物质。花生四稀酸、EPA和DHA等多不饱和脂肪酸能影响多种细胞的不同功能。

(3)本发明提供了一种用于增强免疫力和抗疲劳的组合物的制备方法，其中茶油采用低温冷榨方法，并经冬化处理后制备得到的，其单不饱和脂肪酸含量高达80％，每100g茶油中含有8.2mg茶多酚，12mg的维生素E。低温冷榨可以避免传统压榨技术由于高温可导致营养物质的流失。

(4)本发明本发明提供了一种用于增强免疫力和抗疲劳的组合物的制备方法，其中α-亚麻酸原料油亚临界流体萃取方法制备，其α-亚麻酸含量高达62.6％。较之传统工艺，所得α-亚麻酸含量较高。

具体实施方式

以下结合具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的保护范围。

实施例

以下实施例中所采用的材料和仪器均为市售。

实施例1

一种本发明的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，包括27g的紫苏油，63g的茶油，10g的辅酶Q10、30g的明胶；其中紫苏油中α-亚麻酸含量为60.1wt％；茶油中含有80wt％的油酸，8.2mg/100g的茶多酚，12mg/100g的维生素E。

一种本实施例的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备紫苏油：以紫苏籽作为原料，处理后原料颗粒度为60目，在萃取温度为45℃，萃取压力为0.5MPa，解析压力为0.2MPa，解析温度70℃，萃取时间为90min，进行亚临界流体萃取，其α-亚麻酸含量高达60.1％。

(2)制备茶油：选取粒大、饱满、种壳黑褐色、无病斑、有光泽的新鲜优质油茶球果，破壳后取出油茶籽晒干，在0～7℃的低温环境，利用植物种子后熟作用，促进其后熟完成，脱壳。75℃进行冷榨后，65℃过滤，预冷至8℃进入冬化结晶罐中，并低速搅拌，冬化8h后，在12℃(多次过滤，去除细小杂质及蜡质，得成品茶油。其成品茶油中单不饱和脂肪酸(油酸)含量高达80％，每100g茶油中含有8.2mg茶多酚，12mg维生素E。

(3)将步骤(1)中制备得到的紫苏油、步骤(2)中制备得到的茶油、辅酶Q10、明胶按照配方量混合、搅拌均匀得到混合物。

(4)将步骤(3)中的混合物制成软胶囊。

实施例2

一种本发明的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，包括25g的亚麻籽油，55g的茶油，20g的辅酶Q10；其中亚麻籽油中α-亚麻酸含量为62.8％，茶油中含有8.0mg/100g的茶多酚、10.1mg/100g的微生物E。

一种本实施例的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备亚麻籽油：以亚麻籽油作为原料，处理后原料颗粒度为60目，在萃取温度为45℃，萃取压力为0.5MPa，解析压力为0.2MPa，解析温度70℃，萃取时间为90min，进行亚临界流体萃取，其α-亚麻酸含量高达62.8％。

(2)制备茶油：选取粒大、饱满、种壳黑褐色、无病斑、有光泽的新鲜优质油茶球果，破壳后取出油茶籽晒干，在0～7℃的低温环境，利用植物种子后熟作用，促进其后熟完成，脱壳。将脱壳后的油茶籽在75℃进行冷榨后，65℃过滤，预冷至8℃进入冬化结晶罐中，并低速搅拌，冬化8h后，在12℃多次过滤，去除细小杂质及蜡质，得成品茶油。其成品茶油中单不饱和脂肪酸(油酸)含量高达80％，每100g茶油中含有8.0mg茶多酚，10.1mg维生素E。

(3)将步骤(1)中制备得到的亚麻籽油、步骤(2)中制备得到的茶油、辅酶Q10按照配方量混合、搅拌均匀得到混合物。

(4)将步骤(3)中的混合物制成粉剂。

动物实验：

为了验证本发明的产品是否具有增强免疫力、抗疲劳的功能性，本发明样品选择实施例1样品进行动物测定，测试过程如下。

受试对象：选择60只健康成年雄性昆明种小白鼠，体重18～22g。

喂养方法：将昆明种小白鼠按体重随机分为10组，每组10只，按照以下配方喂养小鼠，一日喂养1次，自由进食，连续喂养30天。

水对照组：蒸馏水1g/(kg·d)。

对照组：喂养茶油1g/(kg·d)。

实验组：设高、中、低三个剂量，分别为低剂量组：采用实施例1的组合物0.26g/(kg·d)、中剂量组：采用实施例1的组合物0.54g/(kg·d)、高剂量组：采用实施例1的组合物1.1g/(kg·d)的组合物进行灌胃。

抗疲劳：

1.游泳试验：

末次给予小鼠受试物30min后，小鼠尾根部负小鼠体重5％的铅皮，放入水温为25℃、水深35cm的游泳箱中。每一批小鼠下水之前均将水温调至25℃，并将室温恒定在25℃。每只水箱一次放入6只小鼠。用秒表记录自游泳开始至力竭死亡的时间，该时间为小鼠的游泳时间，测定结果列于表1中。

2.血清尿素氮测定：

末次给予小鼠受试物30min，将小鼠放于温度30℃的水中游泳90min，休息60min，摘眼球采血，分离血清用全自动生化分析仪测定，测定结果列于表2中。

3.肝糖原测定：

末次给予小鼠受试物30min后，立即处死。取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称取肝脏100mg，采用蒽酮法检测肝糖原含量(以mg/g肝表示)，测定结果列于表3中。

表1：组合物对小鼠游泳时间的影响结果表

表2：组合物对小鼠血清尿素氮的影响结果表

表3：组合物对小鼠肝糖原的影响结果表

增强免疫力：

1.脏器体重比值测定：

小鼠称重后颈椎脱臼处死，取其胸腺、脾脏，去尽筋膜，用滤纸吸干脏器表面血污并称重，计算胸腺体重比值，测定结果列于表4和表5中。

表4：组合物对小鼠胸腺体重比值的影响结果表

从表4中可以看出不同的剂量与对照组相比，小鼠的胸腺体重比值无显著性差异，因此组合物对动物的胸腺体重比值没有明显影响。

表5：组合物对小鼠脾脏体重比值的影响结果表

从表5可以看出不同的剂量与对照组相比，小鼠的脾脏体重比值无显著性差异，因此组合物对动物的脾脏体重比值没有明显影响。

2.ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验：

动物连续给样30天后，颈椎脱臼处死，取脾脏，制成脾细胞悬液，调整细胞浓度为3×10⁶个/ml，将细胞悬液分为两孔加入24孔培养板中国，每孔1mL，一孔加75μLConA液(相当于7.5μg/mL)，另一孔作为对照，置5％CO₂，37℃培养68h。培养结束前4h，每孔轻轻吸取上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的PRMI1640培养液，同时加入MTT(5mg/mL)50μL/孔，继续培养4h，培养结束后，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解后，然后将液体移入96孔板中，每孔加3个平行样，用酶标仪在570nm波长进行测量吸光度值(A值)，计算试验孔A值与对照孔A值之差，以表示淋巴细胞的增值能力，检测结果列于表6中。

表6：组合物对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验的影响结果表

由表6可见，水对照组、溶剂对照组和3个剂量组对小鼠的淋巴细胞增殖能力之间无显著性差异，认为组合物对提高小鼠淋巴细胞增殖能力没有明显影响。

3.抗体生成细胞测定：

动物连续给样30天后，将脱纤维绵阳红细胞免疫5天后，动物颈椎脱臼处死，取出脾脏，制成脾细胞悬液，调整细胞浓度为5×10⁶个/mL。将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水100mL)加热溶解后，放入45℃水浴保温，与等量、2倍浓度的、pH为7.2～7.4的Hanks液混合，分装小试管，每管0.5mL，再向管内加入50μL、l10％的SRBC，20μL脾细胞悬液，迅速混匀，倾倒于已刷琼脂薄层的6cm平皿上，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数，测定结果列于表7中。

表7：组合物对小鼠抗体生成细胞数的影响结果表

由表7可见，水对照组与中剂量组及高剂量组对空斑数的影响具有明显的差异，认为组合物具有增加小鼠抗体生成细胞数的能力。

4.小鼠碳廓清试验：

动物连续给样30天后，尾静脉注射1∶5稀释的印度墨汁，待墨汁注入，立即计时。注入墨汁后2、10分钟，分别从内眦静脉丛取血20μL，并将其加到2mL碳酸钠溶液中，用分光光度计在600nm波长处测试吸光度值，以碳酸钠溶液做空白对照。根据动物体重，肝重和脾重计算吞噬指数，结果以方差分析进行统计，统计结果列于表8中。若受试物组血清溶血素抗体积数高于对照组，且差异有显著性，可判定受试物有提高小鼠单核-巨噬细胞的碳廓清能力的作用。

表8：组合物对小鼠血清溶血素水平的影响结果表

由表8可见，水对照组、溶剂对照组和3个剂量组对小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清能力之间无显著性差异，认为组合物对小鼠碳廓清能力没有明显影响。

5.小鼠NK细胞活性测定：

动物连续给样30天后，颈椎脱臼处死，取脾脏，制成脾细胞悬液(效应细胞)，取传代后24h YAC-1细胞加1640完全培养液，调整细胞浓度为4×10⁵个/mL(靶细胞)，取靶细胞和效应细胞各100μL效靶比(50∶1)，加入U形96孔培养板，靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100μL，上述各项均设有三个复孔，于37℃、5％二氧化碳培养箱中培养4小时，每孔吸取上清液100μL置于平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μL，反应3min，每孔加入1mol/L的HCL30μL终止，用酶标仪在490mm处测定A值，测定结果列于表9中。

表9：组合物对小鼠NK细胞活性的影响

由表9可见，水对照组、溶剂对照组和3个剂量组对小鼠NK细胞活性之间无显著性差异，认为组合物对小鼠NK细胞活性没有明显影响。

综上说述，综上，经口给予小鼠不同剂量组的组合物30天，对小鼠体重增长无不良影响，对小鼠脾脏和胸腺体重比值无影响，小鼠的体液免疫功能、细胞免疫功能测定结果均为阳性，单核-巨噬细胞吞噬能力、NK细胞活性测定结果均为阴性，表明组合物具有增强免疫力功能的作用。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制。虽然本发明已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本发明。任何熟悉本领域的技术人员，在不脱离本发明的精神实质和技术方案的情况下，都可利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同替换、等效变化及修饰，均仍属于本发明技术方案保护的范围内。

Claims (10)

1.一种用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，其特征在于，包括20～40重量份的α-亚麻酸原料油，55～75重量份的茶油和5～20重量份的辅酶Q10。

2.根据权利要求1所述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，其特征在于，所述α-亚麻酸原料油为紫苏油或亚麻籽油。

3.根据权利要求2所述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，其特征在于，所述组合物包括27重量份的紫苏油，63重量份的茶油和10重量份的辅酶Q10。

4.根据权利要求2所述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，其特征在于，所述组合物包括25重量份的亚麻籽油、55重量份的茶油和20重量份的辅酶Q10。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，其特征在于，所述α-亚麻酸原料油中α-亚麻酸的含量为50wt％～65wt％。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，其特征在于，所述茶油中含有60wt％～85wt％的油酸、0.08mg/g～0.082mg/g的茶多酚、0.08mg/g～0.15mg/g的维生素E。

7.根据权利要求1至4中任一项所述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物，其特征在于，所述组合物还包括10～30重量份的明胶。

8.一种权利要求1至7中任一项所述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将α-亚麻酸原料油、茶油、辅酶Q10搅拌、混匀得到混合物。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：将所述混合物制备成软胶囊或粉剂。

10.一种权利要求1至7中任一项所述的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物或权利要求8至9中任一项所述制备方法制备得到的用于增强免疫力和抗疲劳的组合物在制备用于增强免疫力、抗疲劳的保健品中的应用。