CN105796615A - 一种缓解肠道损伤的辣木有效组分及其制备方法与用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种辣木有效组分在制备缓解肠道损伤的药物中的用途;所述辣木有效组分的制备方法包括以下步骤:将辣木用乙醇提取,然后将提取液用乙酸乙酯进行萃取,分层,得乙酸乙酯萃取液;将所述乙酸乙酯萃取液浓缩,然后上样于硅胶层析柱,先用石油醚‑丙酮系统进行洗脱,然后再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱液;将所述甲醇洗脱液浓缩后,上样于大孔吸附树脂,用乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得辣木有效组分。本发明的优点是:能够显著的缓解顺铂引起的肠道损伤,揭示其在缓解癌症化疗副作用及肠道保护领域的应用前景,为辣木开拓了一个新的应用领域。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,特别涉及一种缓解肠道损伤的辣木有效组分及其制备方法与用途。
背景技术
化疗是化学药物治疗的简称,是利用化学药物阻止癌细胞的增殖、浸润、转移,直至最终杀灭癌细胞的一种治疗方式。它是一种全身性治疗手段,和手术、放疗一起,并称为癌症的3大治疗手段。由于化疗药物的选择性不强,在杀灭癌细胞的同时也会不可避免地损伤人体正常的细胞,从而出现药物的不良反应。因此,在接受化疗药物的时候,一方面希望能够达到最佳的抗肿瘤作用,另一方面也要注意预防和识别化疗药物的不良反应。
顺铂是中心以二价铂同两个氯原子和两个氨分子结合的重金属络合物,类似于双功能烷化剂,可抑制DNA的复制过程。目前认为,顺铂的主要作用部位在DNA的嘌呤和嘧啶碱基。由于顺铂属细胞周期非特异性药物,具有细胞毒性,可抑制癌细胞的DNA复制过程,并损伤其细胞膜上结构,所以它有较强的广谱抗癌作用。临床用于卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、恶性淋巴瘤、头颈部鳞癌、甲状腺癌及成骨肉瘤等多种实体肿瘤均能显示疗效。该药口服无效,静脉注射后开始在肝、肾、大小肠及皮肤中分布最多,18-24小时后肾内积蓄最多,而脑组织中最少。在血浆中消失迅速,呈双相型。开始血浆半衰期为25-49分钟,分布后血浆半衰期为55-73小时。静脉注射后1小时血浆含量为10%左右,90%与血浆蛋白等大分子结合。排泄较慢,1日内尿中排出19%-34%,4日内尿中仅排出25%-44%,但在全剂量注入后的5日内,仅有27%-43%的顺铂排出体外;胆道或肠道排出甚少,腹腔给药时腹腔器官的药物浓度相当于静脉给药的2.5-8倍。顺铂用药后的胃肠道副反应最常见,且明显,如食欲减退、恶心、呕吐、腹泻等,一般静脉注射1-2小时后发生,持续4-6小时或更长,停药后3-5日消失,但也有少数病人持续1周以上。
可见,顺铂是临床常用的化疗药物之一,具有抗癌谱广、疗效确切等特点,但其副作用大。临床上多考虑通过药物联用进行治疗,联合应用后呈现出协同作用,可发挥更为明显的抗肿瘤作用,因此可相应减少顺铂用量,从而降低副作用,减少患者痛苦,改善病人预后。实践中,也有患者通过食疗保健品对胃肠道的保护作用来缓解顺铂化疗引起的器官损伤。
辣木(MoringaoleiferaLam.)为辣木科辣木属植物,属小乔木植物,常绿或半落叶,原产于印度,又称为奇树、鼓槌树,为多年生热带落叶乔木,广泛种植在亚洲和非洲热带和亚热带地区,全世界约有13个辣木品种,主要分布在亚洲的印度、中国、日本,非洲的埃及、肯尼亚、埃塞俄比亚、安哥拉、纳米比亚、苏丹,美洲的墨西哥、美国等30多个热带、亚热带国家和地区。目前我国已经引种栽培印度传统辣木、印度改良辣木(早生且具高豆荚产量)和非洲辣木(原只产于肯尼亚图尔卡纳湖附近及埃塞俄比亚西南部)三个品种,主要分布在云南、贵州、广东、广西、海南、台湾等省区。目前较常食用的主要有印度传统辣木、印度改良种辣木和非洲辣木。辣木全身均可开发利用且用途广泛,可供观赏、食用、药用、植物油及啤酒的净化,也是理想的油料植物、蜜源植物、畜牧饲料和薪材。
辣木叶、茎的营养非常丰富,富含维生素C是柑桔的6倍,胡萝卜素是胡萝卜的4倍,钙和蛋白质的含量分别是牛奶的4倍和2倍,钾、铁、镁等含量都高于其他蔬菜、水果等。根据推算只要三汤匙的辣木叶粉末,就含有幼儿每日所需的270%的维生素A,42%的蛋白质,125%的钙,70%的铁及22%的维生素C。辣木以其高蛋白质、低脂肪、高纤维、高维生素的含量的特性与特殊的降血糖、抗菌消炎、强心的保健效果而成为人们健康食品界的新宠,被誉为新时代的健康食物。早在数百年前就有食用辣木的记载,其营养价值丰富,在台湾省被称为“21世纪人体保镖”,2012年被中国绿色食品发展中心认定为“国家首推绿色食品”,同年被评为“国宴特供菜”。国内外研究结果表明,辣木营养价值含量丰富,无论是籽实还是花、叶、茎,营养价值都很高。
在印度及非洲,辣木常被用作治疗糖尿病、高血压、皮肤病、免疫力低下、贫血、骨骼疾病、抑郁症、关节炎和消化器官肿瘤等疾病的传统药材,现代药理学研究发现,辣木具有解痉,抗菌,抗病毒,降压,消炎和抗肿瘤的活性,辣木中各种活性成分的存在至关重要。这些活性成分主要指其中的脂肪酸类、黄酮和其他酚性成分、糖及糖苷类、生物碱、萜类以及甾体类物质。
但迄今为止,尚未见辣木有效组分用于缓解顺铂诱导的肠道损伤的缓解作用的研究报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种缓解肠道损伤的辣木有效组分。
为了解决上述技术问题,本发明的技术方案为一种辣木有效组分在制备缓解肠道损伤的药物中的用途;所述辣木有效组分的制备方法包括以下步骤:将辣木用乙醇提取,然后将提取液用乙酸乙酯进行萃取,分层,得乙酸乙酯萃取液;将所述乙酸乙酯萃取液浓缩,然后上样于硅胶层析柱,先用石油醚-丙酮系统进行洗脱,然后再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱液;将所述甲醇洗脱液浓缩后,上样于大孔吸附树脂,用乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得辣木有效组分。
优选的,所述提取采用浸泡或者加热回流提取的方式来进行;所述提取的次数为1~5次,每次提取的时间为1~5小时。
优选的,所述乙醇提取时,乙醇的质量百分比浓度为70%~95%。
优选的,所述石油醚-丙酮系统中石油醚与丙酮的体积比为40~60:1。
优选的,所述大孔吸附树脂的型号为D101。
优选的,所述乙醇洗脱时,乙醇的质量百分比浓度为70%~95%。
采用乙醇提取、乙酸乙酯萃取,再采用硅胶层析柱和大孔吸附树脂进行分离,得到的辣木有效组分,能有效缓解肠道损伤。
附图说明
图1为本发明有效组分对正常小鼠肠道绒毛的影响;
图2为顺铂注射对正常小鼠肠道绒毛的影响;
图3为本发明辣木有效组分对正常小鼠肠道绒毛的影响。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是,对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明,但并不构成对本发明的限定。此外,下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例1
一种制备辣木有效组分的方法,包括以下步骤:将辣木用质量百分比浓度为75%的乙醇浸泡2小时,然后再用质量百分比浓度为75%的乙醇加热回流提取2次,每次提取的时间为3小时,合并乙醇浸泡液和乙醇提取液,然后将提取液用乙酸乙酯进行萃取,分层,得乙酸乙酯萃取液;将所述乙酸乙酯萃取液浓缩,然后上样于硅胶层析柱,先用50:1(体积比)的石油醚-丙酮系统进行洗脱,然后再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱液;将所述甲醇洗脱液浓缩后,上样于D101大孔吸附树脂,用质量百分比浓度为95%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得辣木有效组分。
实施例2
一种制备辣木有效组分的方法,包括以下步骤:将辣木用质量百分比浓度为95%的乙醇浸泡5小时,然后再用质量百分比浓度为795%的乙醇加热回流提取5次,每次提取的时间为1~5小时,合并乙醇浸泡液和乙醇提取液,然后将提取液用乙酸乙酯进行萃取,分层,得乙酸乙酯萃取液;将所述乙酸乙酯萃取液浓缩,然后上样于硅胶层析柱,先用60:1(体积比)的石油醚-丙酮系统进行洗脱,然后再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱液;将所述甲醇洗脱液浓缩后,上样于D101大孔吸附树脂,用质量百分比浓度为95%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得辣木有效组分。
实施例3
一种制备辣木有效组分的方法,包括以下步骤:将辣木用质量百分比浓度为70%的乙醇浸泡1小时,然后再用质量百分比浓度为70%的乙醇加热回流提取1次,提取的时间为1小时,合并乙醇浸泡液和乙醇提取液,然后将提取液用乙酸乙酯进行萃取,分层,得乙酸乙酯萃取液;将所述乙酸乙酯萃取液浓缩,然后上样于硅胶层析柱,先用40:1(体积比)的石油醚-丙酮系统进行洗脱,然后再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱液;将所述甲醇洗脱液浓缩后,上样于D101大孔吸附树脂,用质量百分比浓度为70%%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得辣木有效组分。
实施例4
一种制备辣木有效组分的方法,包括以下步骤:将辣木用质量百分比浓度为90%的乙醇浸泡3次,每次浸泡3小时,得乙醇提取液,然后将提取液用乙酸乙酯进行萃取,分层,得乙酸乙酯萃取液;将所述乙酸乙酯萃取液浓缩,然后上样于硅胶层析柱,先用50:1(体积比)的石油醚-丙酮系统进行洗脱,然后再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱液;将所述甲醇洗脱液浓缩后,上样于D101大孔吸附树脂,用质量百分比浓度为85%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得辣木有效组分。
实施例5
一种制备辣木有效组分的方法,包括以下步骤:将辣木粗碎,用质量百分比浓度为75%的乙醇加热回流提取3次,每次提取的时间为3小时,得乙醇提取液,然后将提取液用乙酸乙酯进行萃取,分层,得乙酸乙酯萃取液;将所述乙酸乙酯萃取液浓缩,然后上样于硅胶层析柱,先用55:1(体积比)的石油醚-丙酮系统进行洗脱,然后再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱液;将所述甲醇洗脱液浓缩后,上样于D101大孔吸附树脂,用质量百分比浓度为80%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得辣木有效组分。
为验证本发明的技术效果,特作以下试验:
实验动物为balb/c小鼠,雄性,分为空白对照(生理盐水),正常注射顺铂和顺铂注射联合实施例所得辣木有效组分灌胃三组,每组15只小鼠。
动物适应一周后,除空白组以外的两个实验组开始连续5天注射顺铂,注射剂量为4mg/kgb.w。由此建立药物诱导的肠道损伤模型。
之后,对于采用本发明辣木有效组分的实验组小鼠进行连续14天的灌胃,14天后结束动物实验。
将小鼠处死后解剖,取小鼠空肠段肠道,用20ml注射器将预冷的pH7.0磷酸盐缓冲溶液(PBS)从肠道的一段注入肠腔,清洗肠道内容物,清洗干净后用福尔马林固定24h。完成固定后,剪取不同位置的小肠空肠段,做脱水、包埋、切片、H&E染色,观察小鼠小肠形态结构变化。
如图1-3所示,H&E实验结果显示(10×10显微观察),相比较正常小鼠的肠道绒毛,顺铂注射组小鼠的肠道损伤严重,其绒毛萎缩现象明显,差异显著;灌胃本发明辣木有效组分的实验组与顺铂注射组相比,其绒毛的完整程度具有明显的改善。在对肠道绒毛长度的测量统计分析以后,发现干预后的小鼠,其绒毛长度显著性的高于顺铂注射组小鼠,说明本发明辣木有效组分对顺铂诱导的小鼠肠道损伤有明显的缓解作用。
因此,本发明通过动物体内试验证明了所得辣木有效组分通过口服给药能够显著的缓解顺铂诱导的肠道损伤,从而预示着本发明辣木有效组分在缓解化疗副作用方面有很好的应用前景。
以上结合附图对本发明的实施方式作了详细说明,但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言,在不脱离本发明原理和精神的情况下,对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型,仍落入本发明的保护范围内。
Claims (6)
1.一种辣木有效组分在制备缓解肠道损伤的药物中的用途;所述辣木有效组分的制备方法包括以下步骤:将辣木用乙醇提取,然后将提取液用乙酸乙酯进行萃取,分层,得乙酸乙酯萃取液;将所述乙酸乙酯萃取液浓缩,然后上样于硅胶层析柱,先用石油醚-丙酮系统进行洗脱,然后再用甲醇洗脱,收集甲醇洗脱液;将所述甲醇洗脱液浓缩后,上样于大孔吸附树脂,用乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得辣木有效组分。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述提取采用浸泡或者加热回流提取的方式来进行;所述提取的次数为1~5次,每次提取的时间为1~5小时。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述乙醇提取时,乙醇的质量百分比浓度为70%~95%。
4.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述石油醚-丙酮系统中石油醚与丙酮的体积比为40~60:1。
5.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述大孔吸附树脂的型号为D101。
6.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述乙醇洗脱时,乙醇的质量百分比浓度为70%~95%。
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